沙门氏菌在各培养基上的典型特征

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沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征

沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征

沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征沙门菌是一类常见的致病性细菌,属于革兰氏阴性杆菌。

沙门菌属于弯曲杆菌科(Enterobacteriaceae),分为两个主要种类,即沙门氏菌(Salmonella enterica)和副沙门氏菌(Salmonella bongori)。

沙门菌引起的感染通常通过食物污染而传播,可能导致胃肠道疾病,如沙门氏菌肠炎和沙门氏菌败血症。

首先,沙门菌在麦康凯培养基上形成湿润、灰白色的菌落。

菌落通常呈较大的圆形或不规则形状,直径约为2-3毫米。

一些沙门菌菌株的菌落可能呈现出多样的色彩,如浅粉红色、红色或暗红色。

这种多样性可能与菌株的基因型和环境因素有关。

其次,沙门菌在麦康凯培养基上显示出明显的差异性。

麦康凯培养基中含有伴碱性红(neutral red)和胆红素(bile salts)。

伴碱性红是一种pH指示剂,能够区分细菌的酸性和碱性发酵产物。

沙门菌一般会产生酸性发酵产物,导致菌落周围的培养基变红。

与伴碱性红不同,胆红素是一种选择性抑制剂,能够抑制大多数革兰氏阳性细菌的生长,从而选择性地促进沙门菌的生长。

此外,沙门菌在麦康凯培养基中表现出一些特殊的生理性状。

沙门菌通常具有乳糖分解酶,因此能够分解麦康凯培养基中的乳糖,并产生酸性的发酵产物。

这一特性使得沙门菌的菌落周围环绕着一个明亮的红色区域,称为"乳糖阳性反应"。

与此同时,乳糖阳性反应能够帮助鉴别沙门菌和其他革兰氏阴性杆菌。

麦康凯培养基还可通过其他特定性反应来进一步鉴别沙门菌,如气泡产生、硫化氢产生、尿素分解和胆汁溶解等。

这些反应有助于区分不同的沙门菌菌株和其他细菌的区别。

总结起来,沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征主要包括:湿润、灰白色的菌落;形状多样,直径约为2-3毫米;菌落周围呈现红色区域;乳糖阳性反应,产生酸性发酵产物等。

这些特征有助于快速鉴别和检测沙门菌,并可用于临床和食品安全检测中。

沙门氏菌显色培养基

沙门氏菌显色培养基

沙门氏菌显色培养基沙门氏菌显色培养基(ChromogenicSalmonellaAgar)用途:用于沙门氏菌的快速分离和鉴定。

(GB4789.40-2010)原理:蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;抑菌剂抑制革兰氏阳性菌,增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落,大肠菌群产生蓝绿色的菌落。

配方(每升):蛋白胨19.6g酵母膏粉3g氯化钠5g抑菌剂 1.5g琼脂12g混合色素 6.4g最终pH7.0±0.2使用方法:1、称取本品47.5g,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,混合均匀加热至100℃,并按常规不断搅拌直至完全溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),不需高压灭菌,冷至50℃,倾注灭菌平皿。

2、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液与增菌液。

3、建议使用二步增菌法:(1)前增菌:将处理过的样品25g置于225mL缓冲蛋白胨水中,混合均匀后37℃培养6~8h;(2)选择性增菌:取前增菌液1mL加入到9mL四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)中,混合均匀后37℃培养18~24h;4、用接种环取增菌液一环,划线接种于沙门氏菌显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。

5、观察结果。

挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

6、可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。

质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后于36±1℃培养18—24h生长情况如下表。

菌名菌号生长状况培养特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115 良好菌落品红色大肠埃希氏菌ATCC25922 良好菌落蓝绿色奇异变形杆菌CMCC(B)49005 良好菌落无色粪肠球菌ATCC29212 受抑制-----贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。

沙门氏菌检验

沙门氏菌检验

实验六食品中沙门氏菌的检验一、概述:1.沙门氏菌的形态特征:革兰氏阴性,两端钝圆的短杆菌,无芽孢,一般无荚膜,周身鞭毛,运动力强,具菌毛。

2.沙门氏菌需氧或兼性,10-42℃都可生长,最适生长温度为37℃,最适pH 为6.8-7.8。

3.沙门氏菌食物中毒的食品主要为动物性食品,特别是畜肉类及其制品,污染肉类食物的几率很高。

冷冻对沙门氏菌无杀灭作用,即使在-25℃低温仍可存活10个月左右。

意义:沙门氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。

在世界各国各类细菌性的食物中毒中,沙门氏菌常居前列。

因此,沙门氏菌的检测是各国检验机构对多种进出口食品的必检项目之一。

二、操作步骤:1.前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。

2.选择性增菌——在含选择性抑制剂的促生长培养基中间,样品进一步增菌的一个步骤。

此培养基允许沙门氏菌持续增殖,同时阻止大多数其他细菌的增殖。

3.选择性平板分离——这一步采用固体选择性培养基,抑制非沙门氏菌的生长,提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。

4.生化鉴定——排除大多数非沙门氏菌,提供了沙门氏菌培养物菌属的生理生化鉴定结果。

5.血清学技术——对沙门氏菌属培养物进行血清学分型鉴定,确定菌型。

主要沙门氏菌有2000多个血清型,可先用多价血清鉴定,再用单因子血清鉴定,先有常见菌型的血清鉴定,再用不常见菌型的血清鉴定。

三、实验过程:1.前增菌将样品鸡蛋壳用灭菌棉签查拭蛋壳后,将棉签上部剪掉,下部放入前增菌培养基BPW中,5个棉签放入150mL前增液中,将制备好的预增菌液于37℃培养8-18h。

(样品液变浑浊即可)2.选择性增菌轻轻摇动培养过的样品混合物,移取4mL前增菌液转种于40mL TTB选择性增菌液内,于42 ℃±1 ℃培养18h-24h。

如果菌株生长过慢(TTB 培养基需现配现用,每组制备40ml增菌液,需加入816uL的碘液后再加入前增液)。

沙门氏菌检测操作规程

沙门氏菌检测操作规程

沙门氏菌检测操作规程1 原理沙门氏菌的检测需要四个连续的阶段见下图:1.1 用非选择性液体培养基预增菌将试料接种到缓冲蛋白胨水(BPW),在36℃±1℃下培养16~20h。

(样品中可能存在少量的沙门氏菌却含大量的肠杆菌科的其他菌,所以选择性增菌是必须的;为了检测受伤的沙门氏菌,常须进行预增菌。

)1.2 在选择性液体培养基上增菌将1.1中的培养物接种到四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液和亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液中。

于TTB增菌液内42℃±1℃培养18h~24h;SC 增菌液内36℃±1℃培养18h~24h。

1.3 初步筛选将1.2的培养物接种到以下两个选择性培养基:亚硫酸铋(BS)琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂,于36℃±1℃分别培养40h~48h(BS 琼脂平板)或18h~24h(XLD 琼脂平板),根据菌落特性,辨别可疑沙门氏菌菌落。

1.4再次筛选挑出1.3中的可疑沙门氏菌菌落,在沙门氏菌显色培养基中培养再次筛选,再用合适的生化和血清学试剂进行鉴定。

2 试剂与仪器2.1所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针2.2 仪器:分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基2.3.1缓冲蛋白胨水培养基(BPW)称取BPW培养基20.1g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,以90mL/瓶分装到各锥形瓶,并于121℃灭菌15 min,冷至常温。

2.3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液取TTB增菌液基础93.6g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于锥形瓶中,每瓶100mL。

将锥形瓶放入灭菌锅中,121℃灭菌20min;冷至30℃,每100mL基础培养基中加入TTB配套试剂碘液和煌绿各一支(开启前用75%酒精棉消毒西林瓶表面),混合均匀。

2.3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液取SC培养基23g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装锥形瓶,冷至常温备用。

沙门氏菌——精选推荐

沙门氏菌——精选推荐

沙门氏菌1.形态染色特性²G-无芽孢杆菌。

除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛。

2.培养特性²需氧或兼性厌氧菌。

生长温度10~42℃,最适温度为37℃。

适宜pH为6.8~7.8。

胆盐可促进其生长。

普通琼脂:圆形、光滑、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小菌落。

3.生化特性发酵葡萄糖;不发酵乳糖、蔗糖;产生硫化氢;还原硝酸盐;不水解尿素;不液化明;V-P反应阴性;不产吲哚(靛基质试验阴性);能利用枸橼酸盐(个别菌株不利用)。

动力 + 4、抵抗力•沙门氏菌属不耐热,55℃ 1h、60℃ 15~30min即被杀死。

5.毒素特性•沙门氏菌不产生外毒素,但菌体裂解时,可产生毒性很强的内毒素,此种毒素为致病的主要因素,可引起人体发冷、发热及白细胞减少等病症。

大肠杆菌1 形态与染色特性:²革兰氏阴性;菌体两端钝圆,中等大小,杆状;周生鞭毛,能运动。

不产生荚膜,无芽孢;2 培养特性:²需氧及兼性厌氧菌对营养要求不高,在普通琼脂上生长良好,在15~45℃范围内均可生长,最适生长温度37℃,最适pH为7.2~7.4。

部分菌落可出现β溶血。

²远藤琼脂:带金属光泽的红色菌落;²伊红美兰(EMB)琼脂:紫黑色菌落,有的有金属光泽;²麦康凯琼脂:菌落呈红色。

3 生化特性:不能在KCN培养基上生长,靛基质试验阳性,V-P试验阴性,不利用枸橼酸盐4 血清学特性:大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O) 、鞭毛抗原(H) 、荚膜抗原(K)和菌毛抗原(F)四部分组成。

常见血清型为O157:H7。

5 抵抗力:对一般消毒剂都比较敏感。

对氯尤为敏感。

6 毒素特性: LT和ST志贺氏菌属分类:包括四群 ABCD群仅A群不发酵甘露醇。

D群迟缓发酵乳糖。

志贺氏菌食物中毒实际上就是食源性的菌痢暴发。

中毒的临床症状可分为肠炎型和痢疾型。

不同培养基检测沙门氏菌的效果对比

不同培养基检测沙门氏菌的效果对比

分析检测不同培养基检测沙门氏菌的效果对比李秀秀1,汪 琦2*(1.德州市德城区疾病预防控制中心,山东德州 253000;2.乐陵市疾病预防控制中心,山东德州 253600)摘 要:本研究为筛选适用于沙门氏菌检测的培养基,比较了4种不同选择性培养基对沙门氏菌的检测效果。

研究发现,4种培养基中,鼠伤寒沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌的生长率均较高,相较于甲型副伤寒沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂培养基、沙门氏菌显色培养基、HE琼脂培养基和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐培养基中较易分辨;4种干扰菌中,除木糖赖氨酸脱氧胆酸盐培养基中的奇异变形杆菌难与鼠伤寒沙门氏菌相区分外,其他条件下均可与沙门氏菌区分;4种培养基均对以粪肠球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用。

关键词:选择性培养基;沙门氏菌;检测技术;效果对比Comparative Analysis of Different Culture Media forSalmonella DetectionLI Xiuxiu1, WANG Qi2*(1.Dezhou Decheng District Center for Disease Control and Prevention, Dezhou 253000, China; oling Center forDisease Control and Prevention, Dezhou 253600, China)Abstract: This study compared the detection effects of four different selective culture media on Salmonella in order to screen suitable culture media for Salmonella detection. Research has found that among the four culture media, Salmonella typhimurium and Salmonella paratyphi A have higher growth rates. Compared to Salmonella paratyphi A, Salmonella typhimurium is more easily distinguished in bismuth sulfite agar, Salmonella chromogenic medium, HE agar medium, and xylose lysine deoxycholate medium; among the four interfering bacteria, except for Proteus mirabilis in xylose lysine deoxycholate medium, which is difficult to distinguish from Salmonella typhimurium, it can be distinguished from Salmonella under other conditions; all four culture media showed significant inhibitory effects on Gram positive bacteria represented by Enterococcus faecalis.Keywords: selective culture media; Salmonella; detection technology; comparative analysis沙门氏菌(Salmonella)是一类常见的食源性病原菌,为革兰氏阴性杆菌,被认为是食品和水源中最主要的致病菌之一[1]。

沙门氏菌的检验方法与注意事项

沙门氏菌的检验方法与注意事项

沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中,沙门氏菌比较常见,是一种致病性细菌,国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌,所以在检验沙门氏菌时,对试剂与培养基有很高的要求,下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍!一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示,我们国家因细菌性食物中毒的人中,有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。

人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物,就会造成细菌性感染,以此在毒素的影响下产生食物中毒,造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。

而且沙门氏菌的传播途径较多,肉、蛋和其他食物,从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况,所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。

二、沙门氏菌的检验(一)前增菌(无选择性)BPW(缓冲蛋白胨水)属于一种比较常见的增菌培养基,不包括任何抑制物质,有助于修复受损的沙门氏菌。

促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。

(二)选择性增菌TTB(四硫磺酸钠煌绿增菌液)内含有硫代硫酸钠,结合四硫磺酸钠,能够对肠道共生菌进行有效抑制,而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌,可以在这一培养基当中生长繁殖;煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖,而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。

SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液)能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌,其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸,促使亚硒酸与硫的复合物生产,对细菌硫的代谢产生干扰,进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。

(三)分离培养基(选择性)①BS(亚硫酸铋琼脂)内含亚硫酸铋指示剂,可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制,但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响;其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖,还原亚硫酸铋,使其形成硫酸铋,使黑色菌落附近有黑棕色的环,对光可看到金属光泽。

BS的压力和温度不可过高,避免选择性下降,需在使用前配制,放置阴暗处储存,48小时后丧失选择性,储存不合理会造成色浅,表示效果开始减弱,联合TTB、SC使用能够提高检出率。

微生物标准菌株图谱

微生物标准菌株图谱
O157菌在O157荧光培养基上典型特征
在梅里埃O157显色培养基上典型特征
非O157大肠杆菌在科玛嘉O157显色培养基上典型特征
大肠杆菌在路桥O157显色培养基上典型特征
BC菌在营养琼脂上典型特征
BC菌在MYP上典型特征
BC菌在OXOID显色培养基上典型特征
BC菌在卵黄琼脂上典型特征
霉菌在孟加拉红琼脂上典型特征
大肠菌群在科玛嘉ECC显色培养基上典型特征
大肠菌群在OXOID选择性大肠菌群/杆菌显色培养基上特征
大肠杆菌在大肠杆菌/大肠菌群显色培养基上典型特征
大肠杆菌在EC肉汤上典型特征
大肠杆菌在科玛嘉ECC显色培养基上典型特征
大肠杆菌在3M测试片上典型特征
大肠杆菌O157:H7在EMB上典型特征
大肠杆菌O157:H7在山梨醇麦康凯琼脂上典型特征
亚利桑那沙门氏菌在HE琼脂上典型特征
柠檬杆菌在HE琼脂上典型特征
其他乳糖阳性硫化氢阴性的肠道菌在HE琼脂上典型特征
沙门氏菌在WS琼脂上典型特征
沙门氏菌在XLD琼脂上典型特征
沙门氏菌(硫化氢阳性)在DHL上典型特征
沙门氏菌(硫化氢阴性)在DHL上典型特征
亚利桑那沙门氏菌在DHL上典型特征
其他乳糖阳性硫化氢阴性的肠道菌在DHL上典型特征
霉菌在3M霉菌酵母测试片上典型特征
酵母菌在孟加拉红琼脂上典型特征
酵母菌在马铃薯葡萄糖琼脂上典型特征
酵母菌在3M霉菌酵母测试片上典型特征
沙门氏菌在三糖铁琼脂斜面上典型特征
沙门氏菌在尿素酶琼脂斜面上典型特征
沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂(BS琼脂)上典型特征
沙门氏菌(硫化氢阳性)在HE琼脂上典型特征
沙门氏菌(硫化氢阴性)在HE琼脂上典型特征

分离培养沙门氏菌

分离培养沙门氏菌

培养基名称:酚红煌绿琼脂Brilliant Green/ Phenol Red Agar规格说明:250g干燥培养基培养基用途:用于分离培养沙门氏菌(伤寒沙门氏菌除外) 。

培养基使用原理:蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;酚红指示剂在pH6.8时呈黄色,pH8.1呈粉红色,发酵糖产酸的菌落呈黄色,不发酵糖的菌落为红色;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。

微生物图册:培养基配方(每升):牛肉膏粉5g蛋白胨 10g酵母膏粉3g磷酸氢二钠1g磷酸二氢钠0.6g琼脂 15g乳糖10g蔗糖 10g酚红 0.09g煌绿 0.005g最终pH7.0±0.2酚红煌绿琼脂使用方法:1、称取酚红煌绿琼脂54.7g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌20min,待冷至50℃左右,倾注灭菌平皿,待凝固后备用。

2、用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。

3、将平板翻转放入培养箱中,36±1℃培养20—40h。

如有需要培养至48h。

4、观察结果。

生长在本培养基上的沙门氏菌典型菌落,使培养基颜色由粉红变红,菌落为红色透明。

酚红煌绿琼脂质量控制:下列菌株接种在本培养基上,经36±1℃培养20—40h,结果如下:菌名菌号生长状况菌落特征鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好红色奇异变形杆菌CMCC(B)49005 部分或完全抑制红色大肠埃希氏菌ATCC25922 部分或完全抑制绿色贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

沙门氏菌

沙门氏菌

沙门氏菌菌种保存
一.目的:保存沙门氏菌菌种
二.原理: 沙门氏菌为革兰氏阴性菌,直杆状(较大肠杆菌细)可以在普通肉汤培养基,SS培养基上(形成红色菌落时间大约在24h后菌落中心回变成黑色), 兼性厌氧培养.
甘油可以保护沙门氏菌在低温环境中存活,可以防止菌体在超低温环境中水分形成冰粒,起到保护作用.
三.实验器材及材料:SS培养基(分离细菌),普通肉汤培养基(扩增细菌),超低温冰箱,恒温震荡培养箱,操净台,试管1000ul移液枪,离心杯,甘油.
四.实验步骤
1、培养基:配制营养肉汤培养基
配方:牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,磷酸氢二钾1g,蒸馏水1000ml.(高压灭菌备用)
2、分离沙门氏菌
3、染色观察,做细菌生化鉴定,确认为沙门氏菌
4、扩增培养:在液体培养基中接入沙门氏菌菌落(总量约为试管的
1/3),37℃恒温震荡培养箱中培养18-24h
5、保存方法:在离心杯中加入300ul菌液+700ul甘油(80%甘油
+20%生理盐水)-70℃培养
6、验菌:取出离心杯验菌,看是否有细菌生长。

第四节沙门氏菌

第四节沙门氏菌

TSI(排除A/A H2S-结果 ),靛基质,尿素,KCN,赖氨酸
H2S+ 靛+ 尿- KCN- 赖+ 甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 H2S- 靛- 尿- KCN- 赖+/- ONPG - 沙门氏菌 非沙门氏菌
非如左述的各种反应结果



BPW:缓冲蛋白胨水 MM:氯化镁孔雀绿增菌液 TTB:四硫磺酸钠煌绿增菌液 SC:亚硒酸盐增菌液
生物学性状-形态特征

大小0.6~1.0×2~3um,无芽胞, 一般有鞭毛(鸡沙门菌除外),无 荚膜,多数有菌毛,

革兰氏阴性杆菌,需氧或兼性厌 氧。
生物学性状-培养特性

最适生长温度为35~37℃,最适 pH值为6.8~7.8。 营养琼脂平板上:菌落大小一般 为2~3mm,光滑、湿润、无色、 半透明、边缘整齐。 血平板上:中等大小的灰白色菌 落。
5.血清学技术提供了培养物菌种的鉴定 。
中华人民共和国国家标准
GB/T 4789.4-2003
微生物学检验 沙门氏菌检验
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
前增菌法 25g+BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h,干蛋品18h~24h
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
直接增菌法 25g+灭菌生理盐水25mL 检样匀液25mL +MM (或TTB)100mL

目前至少有67种0抗原和2000以上血清型, 所致疾病称沙门菌病。
致病性-沙门菌病(salmonellosis)
肠热症 -----伤寒病和副伤寒病总称,由伤寒杆菌和 甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。两次菌血症。
急性肠炎(食物中毒)——最常见的沙门杆菌感染, 多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。

沙门氏菌分离和鉴定培养基

沙门氏菌分离和鉴定培养基

沙门氏菌分离和鉴定培养基目前使用经典的培养方法来鉴定沙门氏菌(一种强致病性食源性致病菌)的方法沙门氏菌污染是全球食源性疾病的第二大成因。

控制沙门氏菌的暴发是食品监管机构、餐馆和整个食品工业的一项重要任务。

沙门氏菌家族包括 2,300 多种血清型的细菌,但其中有两种类型,即肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏杆菌,约占所有人类感染的一半。

大多数沙门氏菌的暴发可以追溯到乳制品、家禽和肉制品,但沙门氏菌几乎可以在任何食物上生长。

鸡、鸡蛋及其衍生产品的风险特别高。

图 1.沙门氏菌食品工业中的微生物控制在预防沙门氏菌暴发中起着关键作用。

用于鉴定沙门氏菌的试验和培养基利用了沙门氏菌在生理学或生物化学上与其他属肠杆菌科不同的独特性质。

例如,来自沙门氏菌属的细菌多为兼性厌氧菌、氧化酶阴性、过氧化氢酶阳性和革兰氏阴性杆菌。

大多数菌株都能运动并发酵葡萄糖,同时产酸和产气。

目前用于区分和鉴定沙门氏菌的培养基仍然基于 pH 指示剂指示的碳水化合物发酵的检测(关于碳水化合物发酵能力,另见表 1 )、蛋白水解活性、硫化氢产量和选择性的检测。

大多数现代培养基也结合了一些此类检测系统,使培养基更可靠。

最常见的选择性培养基和差异培养基的列表见表 2。

阿东糖醇- - 55876阿拉伯糖+/- +/- 80372纤维二糖- - 56481右旋糖+ +/- 63367半乳糖醇+/- +/- 73044果糖+/- +/- 53901半乳糖+ +/- 89608肌醇+/- +/- 89614乳糖- - 28816麦芽糖+ +/- 77653甘露醇+ +/- 94438甘露糖+/- +/- 94445蜜二糖+ + 93196棉子糖- - 94226鼠李糖+/- +/- 93999水杨苷- - 92971山梨醇+ +/- 93998蔗糖- - 94309海藻糖+ +/- 92961木糖+ +/- 07411表1.沙门氏菌的典型碳水化合物发酵能力Sigma-Aldrich A0715Andrade 蛋白胨水Sigma-Aldrich 28943Andrade 蛋白胨水,Vegitone Sigma-Aldrich 95388亚硫酸铋琼脂Sigma-Aldrich 15835BPL琼脂Sigma-Aldrich 70134改良亮绿琼脂Sigma-Aldrich 16026亮绿酚红乳糖蔗糖琼脂Sigma-Aldrich 36408溴甲酚紫肉汤Sigma-Aldrich 22520中国蓝乳糖琼脂Sigma-Aldrich 55420氯化琼脂Sigma-Aldrich 70135DCLS琼脂Sigma-Aldrich 90035DCLS 琼脂 2 号Sigma-Aldrich D2935脱羧酶肉汤基质,Moeller Sigma-Aldrich D7809脱氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂Sigma-Aldrich E5399内琼脂Sigma-Aldrich 70137内琼脂Sigma-Aldrich 16447葡萄糖溴甲酚紫琼脂Sigma-Aldrich 51490海克通肠道菌琼脂Sigma-Aldrich 60787克利格勒琼脂Sigma-Aldrich 61792莱夫森琼脂Sigma-Aldrich 66304赖氨酸脱羧酶肉汤Sigma-Aldrich 62915赖氨酸铁琼脂Sigma-Aldrich 70143麦康凯琼脂 1 号Sigma-Aldrich 19352麦康凯琼脂 1 号,VegitoneSigma-Aldrich M8302, 94216麦康凯琼脂,结晶紫,氯化钠和 0.15% 胆盐Sigma-Aldrich 70144麦康基肉汤Sigma-Aldrich 75717, 16377紫色麦康凯肉汤Sigma-Aldrich 63014麦康凯马克杯琼脂Sigma-Aldrich 51405麦康凯琼脂(无盐)Sigma-Aldrich 69965莫塞尔肉汤Sigma-Aldrich 43052Muller-Kauffmann四硫酸盐肉汤,碱 (ISO)Sigma-Aldrich 75315OF试验营养琼脂Sigma-Aldrich 81648Pril® 甘露醇琼脂Sigma-Aldrich 04584增菌肉汤,符合DIN EN ISO 6579:2002Sigma-Aldrich 17173改良增菌肉汤Sigma-Aldrich R0773增菌培养基Sigma-Aldrich 92322改良增菌肉汤培养基(碱性),半固态Sigma-Aldrich 84368Önöz 沙门氏菌琼脂Sigma-Aldrich 84370沙门氏菌浓缩肉汤Sigma-Aldrich 70153亚硒酸盐肉汤(碱性)Sigma-Aldrich 84922亚硒酸盐胱氨酸肉汤Sigma-Aldrich 85438SIM 培养基Sigma-Aldrich 85463辛蒙斯柠檬酸盐琼脂Sigma-Aldrich 85640SS-琼脂Sigma-Aldrich 86352TBG 肉汤Sigma-Aldrich 88151连四硫酸盐肉汤Sigma-Aldrich 88148Muller-Kauffmann四硫酸盐富集肉汤Sigma-Aldrich 44940三糖铁琼脂Sigma-Aldrich 51463尿素肉汤Sigma-Aldrich 42376紫红色胆汁琼脂,VegitoneSigma-Aldrich 70189, 79873紫红色胆汁葡萄糖琼脂Sigma-Aldrich 17213不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂Sigma-Aldrich 53605不含乳糖的紫红色胆汁葡萄糖琼脂,VegitoneSigma-Aldrich 41270紫红色胆汁乳糖葡萄糖琼脂Sigma-Aldrich 95273VRB 杯琼脂Sigma-Aldrich 95586XLD琼脂Sigma-Aldrich 76721XLT4 琼脂(碱)表2.沙门氏菌选择性和差异性培养基(列表不完整。

沙门氏菌培养特点

沙门氏菌培养特点

沙门氏菌的培养特点主要有以下几个方面:
形态特征:革兰氏染色阴性,无荚膜,无芽孢,多数有鞭毛,有动力,短小杆菌。

培养特性:沙门氏菌是兼性厌氧菌,最适温为37℃,在普通培养基上生长良好。

在麦康凯平板上,沙门氏菌通常形成无色、透明的菌落。

SS平板上则显无平板上显无色、透明菌落,但大部分菌落中央显黑色(产色、透明菌落,但大部分菌落中央显黑色(产H2S)。

生存能力:沙门氏菌对营养要求不高,在普通培养基上生长良好。

以上信息仅供参考,建议咨询专业人士获取更准确的信息。

沙门氏菌几种检测方法简介与比较

沙门氏菌几种检测方法简介与比较

VITEK
商品化生化鉴定系统

API 20E API 20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产 物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法,广泛应 用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
API 20E
第1位数
O N P G 1
反应 结果
第2位数
O D C 1 CI T
第3位数
T D A 2 4 IN D
沙门菌生物学性状
不分解乳糖(亚利桑那菌除外)。分解
葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产 气)。多数产生H2S,不产生靛基质, 不液化明胶,不分解尿素,不产生乙酰 甲基甲醇,多数能利用枸橼酸盐,能还
原硝酸盐为亚硝酸盐,在氰化钾培养基
上不生长。
沙门菌常用生化试验
三糖铁(TSI)
尿素酶试验
阴性(黄)阳性(红)

VIDAS(生物梅里埃公司) BAX (杜邦公司)

沙门菌仪器检测法

VIDAS 应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪 , 用荧光分析技术通过固相吸附器,用已知抗体来捕 捉目标生物体,然后以带荧光的酶联抗体再次结合, 经充分冲洗,通过激发光源检测,即能自动读出发 光的阳性标本,其优点是检测灵敏度高,速度快, 可以在48小时的时间内快速鉴定沙门氏菌、大肠杆 菌O157:H7、单核李斯特菌,空肠弯曲杆菌和葡 萄球菌肠毒素等。
急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、
肠炎杆菌等引起。
败血症:常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。
沙门菌生物学性状
大小0.6~1.0×2~3um,无芽胞, 一般有鞭毛(鸡沙门菌除外),无荚 膜,多数有菌毛,革兰氏阴性杆菌, 需氧或兼性厌氧,最适生长温度为 35~37℃,最适pH值为6.8~7.8。

沙门氏菌特征2

沙门氏菌特征2

沙门氏菌在SS琼脂上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在37 ℃ 培养 18-24 小时后,无色透明菌落有黑色中心;志贺氏菌呈无色透明菌落。

沙门氏菌在胆硫乳琼脂(DHL琼脂)上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在37 ℃ 培养 22-24 小时后,无色半透明有黑色中心或几乎全为黑色。

有些菌株无色半透明。

沙门氏菌在海博沙门氏菌显色培养基上典型特征文章出处:- 图片点击次数:典型沙门氏菌显亮红色,大肠杆菌显蓝色绿色,枸橼酸杆菌显紫色,其它细菌显黄色或无色。

沙门氏菌在HE琼脂上典型特征文章出处:- 图片点击次数:在37 ℃ 培养 18-24 小时后,沙门氏菌、亚利桑那菌和变形杆菌为蓝绿色至蓝色、有或无黑色中心的菌落;大肠杆菌和大肠菌群为粉红色菌落,有沉淀环;,无色半透明有黑色中心或几乎全为黑色。

志贺氏菌和普罗菲登斯菌为绿色、湿润而隆起菌落。

沙门氏菌在SS琼脂上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在37 ℃ 培养 18-24 小时后,无色透明菌落有黑色中心;志贺氏菌呈无色透明菌落。

沙门氏菌在XLD琼脂上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在35 ℃ 培养 24-48 小时后,无色半透明有黑色中心或几乎全为黑色。

志贺氏菌为无色透明菌落。

大肠杆菌为黄色菌落,其外围有黄色环。

沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂(BS琼脂)上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在37 ℃ 培养 24-48 小时后,棕褐色或灰色至黑色,有时有金属光泽,周围培养基呈棕色或黑色,有些菌株呈灰绿色 , 周围培养基不变或微变暗。

沙门氏菌在胆硫乳琼脂(DHL琼脂)上典型特征文章出处:- 图片点击次数:沙门氏菌在 37 ℃ 培养 22-24 小时后,无色半透明有黑色中心或几乎全为黑色。

有些菌株无色半透明。

2024版沙门氏菌检验实验解析PPT

2024版沙门氏菌检验实验解析PPT

增加“无菌量筒:容量50mL、无菌均质杯、无菌均质袋、无菌广口瓶:容量500mL、无菌试管15mm×150mm、18mm×180mm、无菌接种环:10μL(直径约3mm)、1μL以及接种针”
对检验用器具规格明确,方便实验室选用
增加“生物安全柜”
对于实验室开展活菌操作、样本检测实验室生物安全等级需“BSL-2”,因此,增加此设备是生物安全必须。
明确接种菌液浓度为“0.5麦氏浊度”,接种量“2滴~3滴”,避免接种量过大导致假阳性;还有增加"接种混匀后滴加一层无菌液体石蜡进行密封"由于氰化钾不稳定容易分解失效,因此,加石蜡密封避免造成假阳性反应。
“符合表3中A1者,为沙门氏菌典型的生化反应”后面补充“进行血清学鉴定后报告结果”
明确的指出符合沙门氏菌典型的生化反应需要进行血清学鉴定后报告结果
调整可疑菌落初筛流程
流程图更清晰易懂
TTB选择性增菌改为:低背景菌36 ℃±1 ℃,高背景菌42 ℃±1 ℃原因:验证试验发现,对于生鲜样品,TTB 42℃比 TTB 36℃的选择性好,所以继续沿用;对于深加工样品,TTB 36℃比 TTB 42℃生长好,所以低背景菌采用36℃±1℃培养。如有需要,可将预增菌的培养物在2 ℃~8 ℃冰箱保存不超过72h,再进行选择性增菌。
2016版“必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴定”修改为2024版中“必要时,按表5进行沙门氏菌种和亚种的生化鉴定”
“生化群”用“种和亚种”替代,更易懂;
在表5沙门氏菌种和亚种的生化鉴定中增加“肠炎沙门氏菌、邦戈尔沙门菌种名”以及肠炎沙门氏菌种内对应的6个亚种和生化群分型”;生化反应项增加“明胶酶、L(+)-酒石酸盐、半乳糖醛等8项”
主要变化
章节
新标准变更内容

沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征

沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征

沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征
沙门菌是一种常见的肠道病原菌,能够引起人类和动物的感染。

麦康
凯培养基是一种专门用于细菌培养的营养丰富的培养基。

在麦康凯培
养基上培养沙门菌,会观察到一些独特的菌落特征。

菌落外观类特征
沙门菌在麦康凯培养基上的菌落是呈现圆形的,一般直径约为1-3毫米之间。

菌落的颜色是灰白色,均匀半透明,表面光滑且洁白。

有时,
菌落中心会出现微小的凹陷,但边缘的轮廓清晰可见。

菌落微观结构类特征
通过显微镜观察沙门菌在麦康凯培养基上的菌落,其微观结构为白色,呈圆形,直径约为1-3微米。

菌落的形态规则,不分支、不分枝,生长速度缓慢而稳定。

菌落生长类特征
沙门菌在麦康凯培养基上的菌落生长类特征较为特殊。

在菌落外观上,表现出很好的茵陈反应。

在培养基上,沙门菌可以进行无氧或好氧生长,并且生长速度较快,一般在18-24小时左右就可以观察到其生长情
况。

此外,在培养基中添加氧气时,会产生鲜艳的菌落,颜色变得更加深沉。

总结
从以上观察可以得出,沙门菌在麦康凯培养基上的菌落主要表现为圆形呈灰白色,表面光滑,一般直径为1-3毫米。

微观结构为白色、直径约1-3微米的圆形。

在生长方面,沙门菌可以进行无氧或好氧生长,生长速度快,一般在18-24小时可以观察到其生长情况。

这些观察表明沙门菌在麦康凯培养基上的菌落特征比较独特,对于临床和学术研究都具有重要的指导意义。

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沙门氏菌在海博沙门氏菌显色培养基 上典型特征
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