微生物检测系列之沙门氏菌检验技巧及详解

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沙门氏菌的检验方法

沙门氏菌的检验方法

沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌,可引起许多动物和人类的肠道感染。

为了检验沙门氏菌的存在,可以采用以下一些常见的方法:1.培养方法:沙门氏菌是一种需氧的微生物,在富含营养成分的寒凝琼脂或低酸性洗涤剂和生物素的培养基上培养。

常用的培养基如VRB (XLD)琼脂、SS琼脂、MS琼脂等。

培养基可以选择均匀地涂布在平板上,也可以用于液体培养。

2.表型特征:沙门氏菌的菌落通常呈现红色或无色,个别品系可能为粉红色。

如在VRB琼脂上,沙门氏菌会变为红色或橙色。

沙门氏菌也可以产生硫化氢,导致MS琼脂呈现黑色。

3.生化特性:沙门氏菌通常可以进行一些常规的生化测试,如产生气泡的气液反应,碳源利用测试和酸碱指示剂变色等。

这些测试可以帮助进一步确认沙门氏菌的存在。

4.血清学方法:采用沉淀试验或血清凝集试验检测血清中的抗生素,以确定是否感染了沙门氏菌。

这些试验通常利用鸡血清,鸡蛋白和羊血清制备的具有特异性的血清反应。

5. 分子生物学方法:沙门氏菌的检验还可以利用PCR技术进行,通过检测沙门氏菌特异性基因如invA基因的存在来确定沙门氏菌的存在。

6.抗生素敏感性试验:通过对沙门氏菌菌株进行抗生素敏感性测试,可以了解菌株对不同抗生素的抗性情况,为临床使用合适的抗生素提供参考。

除了以上提到的方法,还有其他一些检验方法如酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光PCR等也常被用于沙门氏菌的检验。

这些方法不仅可以准确快速地检测沙门氏菌的存在,还可以区分不同菌株和进行进一步的流行病学分析。

总之,通过上述的方法,可以对沙门氏菌进行有效的检验,从而帮助人们及时判断感染情况并及时采取措施进行治疗和预防。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析一、简介沙门氏菌是一种能引起人类和动物肠道感染的细菌,也可以引起食品中毒。

它主要通过食品、饮用水和接触感染物传播。

对于食品中的沙门氏菌进行检验和分析,对保障食品安全至关重要。

二、检验方法1.纳氏肠杆菌培养基法用纳氏肠杆菌培养基法检验食品中的沙门氏菌,是一种常用的方法。

它利用富含养分的培养基,使得沙门氏菌能够在培养基中迅速生长,并形成典型的菌落。

检验人员可以根据菌落的形态、颜色和大小等特征来识别沙门氏菌的存在。

2.血液平板培养法血液平板培养法是另一种常用的检验方法。

将待测样品涂抹在富含养分的血液平板上,再将平板置于恒温培养箱中培养一段时间,观察是否有典型的沙门氏菌菌落的产生。

3. PCR法PCR法是一种较为快速、敏感的检验方法。

通过PCR技术可以快速对样品中的沙门氏菌进行检测,结果准确可靠。

这种方法对实验条件和检验人员的要求较高,但可以提高检测的速度和准确性。

三、分析结果通过上述方法进行检验后,需要进行有关分析。

针对检验结果,进行有关的分析可以有效地判断食品中是否存在沙门氏菌污染,并确定污染的程度。

1. 菌落计数通过检验方法得到的菌落数可以反映食品中的沙门氏菌污染程度。

一般来说,菌落数越多,说明沙门氏菌污染越严重。

2. 菌株鉴定对分离出的菌株进行鉴定,可以确定其是否为沙门氏菌。

根据鉴定结果,可以进一步分析菌株的来源和特性。

3. 毒素检测有些沙门氏菌会产生毒素,对食品中的毒素进行检测,可以确定食品中是否存在具有毒素产生能力的沙门氏菌。

四、实验注意事项在进行沙门氏菌检验及分析时,有一些实验注意事项需要遵守。

1. 实验室操作检验和分析工作要在严格的实验室条件下进行,保证实验室内的环境洁净,避免交叉污染。

2. 操作规范操作人员要求严格遵守相关操作规程,使用消毒剂对实验仪器、培养基和工作台进行处理。

3. 实验安全在进行检验和分析实验时,要注意个人防护,避免因接触致病菌而导致感染。

五、应用领域沙门氏菌检验及分析在食品安全领域具有广泛的应用。

微生物-沙门氏菌

微生物-沙门氏菌

沙门氏菌Ⅲ (即亚利桑那菌) 黑色有金属光泽
乳糖迟缓阳性或阴性的菌株与沙门氏菌Ⅰ、 Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖阳性的菌株为 粉红色,中心带黑色。 乳糖阳性的菌株为黄色,中心黑色或几乎 全黑色;乳糖迟缓阳性或阴性的菌株为蓝 绿色或蓝色,中心黑色或几乎全黑色。 乳糖迟缓阳性或阴性的菌株,与沙门氏菌 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖阳性的菌 株为粉红色,中心黑色,但中心无黑色形 成时与大肠艾希氏菌不能区分.
培养基全黄色
制好的培 养基
斜面、 底部黄 色,并 产生H2S
对照管
斜面红色,底部黄 色,产生H2S
底面黄色,并产生CO2
食品安全检验技术(微生物部分) 沙门氏菌检验
(1)斜面碱性(红色-)底部酸性(黄色+)产气或不 产气(产气时会造成琼脂裂开):表示仅葡萄糖发酵。 因微生物优先分解葡萄糖产酸,使培养基变黄,但因 葡萄糖含量低,于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱 性反应,同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱, 培养基底部则因氧张力较小,且微生物生长较慢,故 仍维持酸性反应。 (2)斜面酸性(黄色+)底部酸性(黄色+)产气或不 产气:表示除了葡萄糖发酵外,乳糖与(或)蔗糖也 发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高,经继续发酵,可维持 培养基斜面与底部保持酸性反应。
10mL+MM (或TTB)100mL
42 ℃ 18h~24h
10mL+SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h~24h
直接增菌法 25g+灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL +MM (或TTB)100mL
42 ℃ 18h~24h
检样匀液25mL
+SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h~24h
(二)分离培养

微生物分类学之沙门氏菌检验(ppt 26页)

微生物分类学之沙门氏菌检验(ppt 26页)
毒素,这是致病的主要原因。
5
6、血清学特性:
沙门氏菌具有复杂的抗原结构。虽然沙门氏菌具有 O、H、K和其它表面物质(如菌毛)四种抗原,但只有O 抗原是每个菌株均有的成分。
1)O抗原(菌体抗原) *存在于菌体表面,为脂多糖,多糖部分决定其特异性, *O抗原耐热(100℃、2.5h或121℃、2h加热均不破坏其
抗原性),其特异性不易丧失或变异。 *一个菌体具有一种或多种不同的O抗原。
6
2)H抗原(鞭毛抗原) *H抗原存在于鞭毛中,不耐热,化学成分蛋白质,其
抗原性可以被酒精所破坏。
*H抗原可分为两相 第1相:为特异相,用小写英文字母表示,a~z,Z以后
则从z1、z2……,已编到z83。 第2相:为非特异相以阿拉伯数字表示,共7种。 具有第1相和第2相H抗原的细菌称为双相菌,大多数沙
DHL(或HE、WS、SS)
36 ℃ ± 1 ℃ 18h~24h
TSI(排除A/A H2S-结果 ),靛基质,尿素,KCN,赖氨酸
H2S+ 靛- 尿-KCN- 赖+(或一项不符) 沙门氏菌血清学试验
H2S+ 靛+ 尿- KCN- 赖+
甘露醇+ 山梨醇+ 沙门氏菌血清学试验
H2S- 靛- 尿- KCN- 赖+/-
(3)败血症
多为猪霍乱杆菌引起,甲、乙、丙型副伤寒杆菌和 肠炎杆菌亦可引起败血症。
(4)慢性肠炎
沙门氏杆菌可引起慢性、持久性肠炎。
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沙门氏菌广泛分布于自然界,是引起食物中毒的 重要病原菌。在世界各国各类细菌性的食物中毒中, 沙门氏菌常居前列。因此,沙门氏菌的检测是各国检 验机构对多种进出口食品的必检项目之一。
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(对二甲基氨基苯甲醛) 在世界各国各类细菌性的食物中毒中,沙门氏菌常居前列。 沙门氏杆菌可引起慢性、持久性肠炎。 沙门氏菌广泛分布于自然界,是引起食物中毒的重要病原菌。 3、氨基酸脱羧酶的测定 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789. 前增菌:食品样品在含有营养的非选择性培养基中增菌,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。 生物化学筛选:排除大多数非沙门氏菌,也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。 试验方法:取培养24h培养液,先加入少量乙醚,摇动试管以提取和浓缩吲哚,待其浮于培养液表面后,再沿试管壁徐缓加入吲哚试剂 数滴,在接触面呈红色,即为阳性。 一般不发酵乳糖和蔗糖,不发酵侧金盏花醇; 普通营养琼脂上生长良好,菌落中等大小,无色半透明、圆形、光滑、湿润。 三糖铁琼脂斜面常产生H2S。 只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中 含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。 第1相:为特异相,用小写英文字母表示,a~z,Z以后则从z1、z2……,已编到z83。 2、培养特性:需氧或兼性厌氧;

沙门氏菌的检验方法

沙门氏菌的检验方法

沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌,其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。

下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。

1. 培养分离沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。

常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。

将待检样品接种于选择性培养基上,并采用适当的温度和培养时间进行培养。

沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落,可以通过形态特征进行初步判断。

2. 生化检测生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。

常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。

气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。

亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。

尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。

3. 血清学检测血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。

常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。

在这些方法中,沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合,形成可见的凝集物或荧光产物,从而判断是否感染沙门氏菌。

4. 分子生物学方法分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。

常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应(PCR)、核酸杂交和基因测序等。

PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏菌基因的特定片段,从而进行检测。

核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合,形成杂交信号来进行检测。

基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列,确定其身份。

总结:沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。

这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在,可以提供准确鉴定和检测结果。

在实际应用中,结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。

沙门氏菌的检测方法及其原理

沙门氏菌的检测方法及其原理

沙门氏菌的检测方法及其原理
沙门氏菌的检测方法主要有传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。

以下将分别介绍每种方法的原理。

1. 传统培养法:这是一种常用的检测沙门氏菌的方法。

原理是将样本(如食物、病人体液等)接种在含有适宜营养物质的培养基上,利用沙门氏菌的生长特性进行培养。

经过一定时间的孵育,形成典型的沙门氏菌菌落后,可以通过形态特征和生理生化试验进行鉴定。

2. 分子生物学方法:分子生物学方法主要是利用沙门氏菌特异性的基因或DNA序列来检测其存在。

最常用的方法是聚合酶链反应(PCR),其中利用特异性引物扩增含有沙门氏菌特定序列的DNA片段。

扩增后的产品可以通过凝胶电泳进行检测与鉴定。

此外,还有核酸杂交、测序和引物探针技术等方法也可以用于沙门氏菌的检测。

3. 免疫学方法:免疫学方法利用沙门氏菌的抗原与抗体之间特异性反应进行检测。

其中最常用的方法是酶联免疫吸附测定法(ELISA)。

ELISA基于固相试剂酶标板,将沙门氏菌的抗原固定在试剂酶标板上,然后加入特异性抗沙门氏菌的抗体。

经过洗涤步骤,再加入辅助抗体结合酶标记物。

最后加入底物,沙门氏菌存在时可通过颜色变化来判断阳性反应。

这些方法在实验室或食品安全监测中广泛应用,能够高效、准确地检测沙门氏菌的存在。

沙门氏菌鉴定流程

沙门氏菌鉴定流程

沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等,能够判断疾病的严重程度。

1、血常规检查:感染沙门氏菌时,多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况,大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象,该项结果可以辅助诊断沙门菌病。

2、便常规检查:感染沙门氏菌以后,部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况,通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。

3、ELISA法检查:检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况,有助于沙门菌感染的诊断。

除此之外,沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等,如果自身的病情比较严重,建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗,以免延误病情。

微生物沙门菌检测方法

微生物沙门菌检测方法

微生物沙门菌检测方法
沙门菌是一种常见的细菌,可以引起食物中毒和肠道感染。

常见的微生物沙门菌检测方法包括:
1. 培养方法:将样品(如食物、粪便等)在富含沙门菌生长所需营养物质的培养基上培养,然后观察是否有沙门菌的生长。

这种方法需要一定的时间,通常需要24-48小时。

2. PCR方法:利用聚合酶链式反应(PCR)技术,通过扩增沙门菌的DNA片段来检测沙门菌的存在。

PCR方法可以快速准确地检测沙门菌,通常只需要数小时。

3. 免疫学方法:利用特异性抗体与沙门菌的抗原进行特异性反应,通过观察抗原-抗体的反应形成可见的颜色、荧光或光学信号来检测沙门菌。

常见的免疫学方法包括:
- ELISA(酶联免疫吸附试验):通过固相酶标法来检测沙门菌的抗原或抗体;- 免疫层析试纸法:利用沙门菌抗原或抗体与检测纸片上预先固定的抗体或抗原进行特异性反应,形成可见的颜色提示结果;
- 免疫荧光法:利用沙门菌抗原或抗体与特定荧光染料标记的抗体或抗原进行特异性反应,通过观察荧光信号来检测沙门菌。

以上是常见的微生物沙门菌检测方法,选择适合的方法需要考虑到检测的目的、时间要求和实验条件等因素。

沙门氏菌的检验方法与注意事项

沙门氏菌的检验方法与注意事项

沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中,沙门氏菌比较常见,是一种致病性细菌,国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌,所以在检验沙门氏菌时,对试剂与培养基有很高的要求,下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍!一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示,我们国家因细菌性食物中毒的人中,有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。

人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物,就会造成细菌性感染,以此在毒素的影响下产生食物中毒,造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。

而且沙门氏菌的传播途径较多,肉、蛋和其他食物,从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况,所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。

二、沙门氏菌的检验(一)前增菌(无选择性)BPW(缓冲蛋白胨水)属于一种比较常见的增菌培养基,不包括任何抑制物质,有助于修复受损的沙门氏菌。

促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。

(二)选择性增菌TTB(四硫磺酸钠煌绿增菌液)内含有硫代硫酸钠,结合四硫磺酸钠,能够对肠道共生菌进行有效抑制,而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌,可以在这一培养基当中生长繁殖;煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖,而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。

SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液)能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌,其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸,促使亚硒酸与硫的复合物生产,对细菌硫的代谢产生干扰,进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。

(三)分离培养基(选择性)①BS(亚硫酸铋琼脂)内含亚硫酸铋指示剂,可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制,但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响;其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖,还原亚硫酸铋,使其形成硫酸铋,使黑色菌落附近有黑棕色的环,对光可看到金属光泽。

BS的压力和温度不可过高,避免选择性下降,需在使用前配制,放置阴暗处储存,48小时后丧失选择性,储存不合理会造成色浅,表示效果开始减弱,联合TTB、SC使用能够提高检出率。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种常见的致病菌,能引起人体消化系统的疾病,如沙门氏菌食物中毒和肠炎等。

对食品和环境样品中的沙门氏菌进行检验和分析是非常重要的。

沙门氏菌的检验方法主要包括培养法和分子生物学法。

培养法是传统的沙门氏菌检验方法,该方法使用一系列专门的培养基,如XLD(Xylose Lysine Deoxycholate Agar)和SS(Salmonella Shigella Agar)等,以培养和鉴定沙门氏菌菌株。

将样品加入适当的培养基,然后在适当的温度下进行培养。

经过一段时间后,观察培养基上的菌落形态特征,如形状、色素和粘度等,进一步进行鉴定。

还可以使用生化试剂和抗生素敏感性试验来确定菌株的身份。

分子生物学法是一种快速准确的沙门氏菌检验方法,其基于沙门氏菌特有的基因序列,如invA和fliC等。

通过PCR(聚合酶链反应)技术,可以扩增出这些目标序列,并通过相应的检测方法,如凝胶电泳或实时荧光PCR等,进行检测。

这种方法不仅能够快速鉴定沙门氏菌,还可以检测沙门氏菌的数量和种类等重要信息。

沙门氏菌的分析主要涉及其在食品和环境样品中的存在和数量。

对于食品样品,可以通过抽样和分析的方法来确定沙门氏菌的存在情况和数量。

一般来说,可以选择一些高风险的食品,如家禽肉类、蛋制品和生鲜蔬菜等,进行检测。

对于环境样品,主要包括水源、污水、土壤等,可以通过采样和培养法来确定沙门氏菌的存在。

沙门氏菌的分析结果可以提供重要的参考信息,用于评估食品和环境的安全性。

通过分析沙门氏菌的数量和种类等信息,可以判断食品和环境中是否存在潜在的健康风险,并采取相应的措施进行预防和控制。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的细菌,通常存在于一些动物体内,例如家禽和家畜的肠道内。

它们也有可能通过食物和水传播到人体内,导致沙门氏菌感染。

本文将介绍沙门氏菌检验及分析的相关内容。

1. 沙门氏菌的检验方法(1)血清凝集反应法以沙门氏菌的特异性抗原与沙门氏菌患者血清反应,观察血清凝集是否发生,来判断患者是否感染了沙门氏菌。

这种方法快速简便,但准确度较低。

(2)细菌培养法将患者样本培养在含有沙门氏菌生长所需营养物的培养基上,观察是否出现菌落,来判断是否感染了沙门氏菌。

这种方法耗时较长,但准确度较高。

沙门氏菌的感染对人体健康有很大影响,因此对沙门氏菌的分析也非常重要。

(1)简单的感染症状一般情况下,沙门氏菌感染的症状包括腹泻、呕吐、发热等。

这些症状通常在感染后1-3天内出现,并可持续数日至数周不等。

(2)食品检测沙门氏菌通常通过食物途径传播,因此食品检测是非常重要的。

食品中是否存在沙门氏菌可通过简单的生化方法来鉴定。

(3)抗生素敏感性测试对于沙门氏菌感染的治疗,抗生素是常用的治疗手段之一。

在使用抗生素前,应进行抗生素敏感性测试,以确保所选择的抗生素对沙门氏菌有效。

3. 沙门氏菌感染的预防(1)注意卫生沙门氏菌多数存在于家禽和家畜的肠道内,因此在处理家禽和家畜时应注意卫生,避免沙门氏菌感染。

食品加工时应注意卫生,使用新鲜食材,逐层消毒,避免沙门氏菌感染。

(3)加强个人卫生个人卫生习惯也是预防沙门氏菌感染的重要措施。

包括勤洗手,不用食指挖鼻孔和耳朵等行为,不用手接触眼睛、口鼻、食物等等。

4. 总结以上就是沙门氏菌检验及分析的相关内容。

沙门氏菌属于一类较为常见的细菌,引起的感染对人体健康有很大的危害。

因此,对沙门氏菌进行检验及分析,以及采取预防措施是非常必要的。

微生物检验之沙门氏菌的检验

微生物检验之沙门氏菌的检验

微生物检验之沙门氏菌的检验人沙门氏菌病有四类综合症:沙门氏菌病;伤寒;非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。

沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致,通常表现为轻度,持久性腹泻。

伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。

未接受过治疗的病人致死率可超过10%,而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%,幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。

这些无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)。

非伤寒型沙门氏菌败血症可由各型沙门氏菌感染所致,能影响所有器官,有时还引起死亡。

幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。

一、致病性沙门氏菌胃肠炎,潜伏期一般6-72小时,主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。

病程一般1-2天或更长。

感染剂量为15-20个菌,死亡率达1-4%。

最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。

污染源主要是人和家畜的粪便,沙门氏菌常存在于动物中,特别是禽类和猪。

在许多环境中也有存在。

从水,土壤,昆虫中,从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。

它们可以存在于多类食品中,包括生肉,禽,奶制品和蛋,鱼,虾和田鸡腿,酵母,椰子,酱油和沙拉调料,蛋糕粉,奶油夹心甜点,顶端配料,干明胶,花生露,橙汁,可可和巧克力。

沙门氏菌属也是嗜温性细菌,在中等温度,中性pH,低盐和高水活度条件下生长最佳。

生长最低水活度为0.94。

兼性厌氧,对中等加热敏感。

同样,该菌属能适应酸性环境。

通过卫生以防止二次污染;蒸煮;巴氏消毒等控制。

正常家庭烹调,个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染,以及控制时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌病的发生。

二、检验因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体,因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。

沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。

从食品中分离和鉴定沙门氏菌,当前通用的方法学分5个步骤:1.前增菌-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的食源性病原微生物,引起的沙门氏菌感染会导致沙门氏菌病,主要症状包括腹泻、发热、恶心呕吐等。

为了确保食品安全,对食品中沙门氏菌的检验及分析显得尤为重要。

沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。

传统培养法是将食品样品转移到含有适当营养物质的培养基上进行培养,通过观察形状、颜色及生长情况来鉴别沙门氏菌的存在。

分子生物学方法则是借助PCR技术,通过特定引物扩增沙门氏菌的DNA片段,进而进行检测与鉴定。

沙门氏菌的分析主要包括对菌株的鉴定与分型。

鉴定主要通过形态学、生理特性及生化试验等方法,确定该菌株是否为沙门氏菌。

分型则是通过分子生物学方法,如多重引物随机扩增多态性DNA分析(MLVA)、多重引物PCR分型(MLST)等,对沙门氏菌进行分型,进一步了解其遗传多样性及流行病学相关信息。

沙门氏菌的检验标准主要参考国家标准或行业标准,如《食品安全国家标准沙门氏菌检验》(GB 4789.4-2016)、《食品微生物学沙门氏菌检验方法 GB/T 4789.5-2013》等。

这些标准明确了样品的采集方法、培养条件及检测指标等,确保了检验结果的准确性。

在食品安全监测中,沙门氏菌的检验通常应用于肉制品、蛋制品、禽肉及水产品等食品中。

在取样时,应注意避免污染或交叉感染,同时需确保样品代表性。

样品取回后,应尽快送达实验室进行检测,避免菌落生长过于旺盛,影响检验结果。

沙门氏菌的检验结果的解读需要参考相关标准。

通常来说,如果样品中沙门氏菌的检出数目超过规定标准,则判定为阳性,表示该样品存在沙门氏菌污染,不符合食品安全要求。

反之,如果检测结果未能检出沙门氏菌,则判定为阴性,表示该样品符合食品安全要求。

沙门氏菌的检验与分析是确保食品安全的重要环节。

通过合适的检验方法和分析技术,能够准确判断食品样品是否存在沙门氏菌污染,并提供科学依据来保障大众健康。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种常见的细菌,它是一种肠道中存在的病原菌,也是一种会引起食物中毒的细菌。

因此,对食品中是否含有沙门氏菌的检测显得尤为重要。

本文将讨论沙门氏菌的检验及分析。

一、沙门氏菌的检测方法1、培养方法:沙门氏菌可以在常规的培养基上培养,最常用的是含有胆汁、钠氯和肉汤的液体培养基。

为了增强提取沙门氏菌的准确性和产出,一些特定的选择性平板可以使用,例如MacConkey平板、SS平板或XLD平板。

2、分子生物学方法:PCR检测法是最常见的分子生物学方法之一,它能够检测出非常小的沙门氏菌种群,而不用传统的培养方法。

PCR检测法在物质的检测、生命科学和分子检测等方面发挥着巨大的作用,因此在沙门氏菌检测中也是一个十分重要的检测方法。

二、沙门氏菌的分析方法1、食物检测法:针对某些食品如肉制品、低酸奶、蛋制品等,一般采用已经证实的正式方法来进行检测。

一些具有特异性和高敏感性的方法包括文化方法、免疫学方法和分子生物学方法等。

2、环境检测法:针对食品制作过程中的环境样品进行检测。

这些样品中可能包括牛奶或鸡蛋残留的菌种和接触制造食品的各种人员的手、口腔及袍子等菌群。

检测方法类似于食物检测法,包括文化方法、免疫学方法和分子生物学方法。

需要注意的是,一些细菌可能不能够在环境样品中明显存在,这会使得结果有所偏差。

三、沙门氏菌的风险控制方法1、仔细洗涤食品:消费者在购买食品时应仔细阅读标签,确保食品是新鲜的。

同时,食品应洗涤干净以去除可能存在的菌群。

2、食品加热:食品加热是消灭沙门氏菌最常用的方法。

保健专家建议将肉品煮至中间部位温度达到160°F(71°C),这可确保煮熟并杀死存在的细菌。

3、储存要注意:沙门氏菌喜欢在潮湿、潮湿的环境中繁殖。

所以,消费者最好将食品储存在干燥的地方,并注意食品的过期日期。

结论:消费者和食品业者在选择食品时,应该提高对食品中是否存在沙门氏菌的警惕性,并采取措施来防止感染。

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析

沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种能够引起食物中毒的细菌,它会在食品生产和加工过程中引起污染,导致食品中毒事件的发生。

对食品中的沙门氏菌进行检验及分析是非常重要的,可以保障食品安全,保护消费者的健康。

一、沙门氏菌的检验方法1. 检验样品的选择要进行沙门氏菌的检验,首先需要选择检验样品。

常见的样品包括生鲜肉类、禽类、蛋类、奶制品、水产品、蔬菜和水果等。

2. 检验方法沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。

传统培养法:通过在适宜的培养基上培养样品中的沙门氏菌,并进行培养时间、培养温度和培养后的观察来进行检验。

分子生物学方法:包括PCR、实时荧光PCR、蛋白质芯片技术等。

3. 检验过程(1)样品的制备:将样品进行预处理,如样品减容、均质化、稀释等。

(2)沙门氏菌的分离:将样品在培养基上进行分离培养,并进行相应的筛选和鉴定。

(3)菌落的计数:通过计数方法,对沙门氏菌的数量进行测定。

(4)沙门氏菌的鉴定:对分离出的沙门氏菌进行鉴定,确认其种属和毒力类型。

4. 结果分析通过检验分析得到的结果,对样品是否超标、是否存在沙门氏菌污染等进行判断和分析。

二、沙门氏菌的分析意义2. 生产质量对食品中的沙门氏菌进行检验和分析,可以对生产工艺进行控制,确保生产过程的卫生安全,保障产品的质量。

3. 公共卫生及时对食品中的沙门氏菌进行检验和分析,可以帮助卫生监管部门掌握食品安全情况,及时采取措施,有效保护公共卫生。

4. 营养健康保障食品安全,避免食品中毒事件的发生,对促进人们的营养健康具有重要意义。

三、沙门氏菌的预防控制为了有效预防和控制沙门氏菌污染,可以采取以下措施:1. 生产环节控制合理设计食品生产线,加强生产卫生管理,确保生产过程中的卫生安全。

2. 原料筛选选择优质原料,确保原料的卫生安全性。

3. 加工控制加强食品加工的卫生监管,保障食品加工过程中的卫生安全。

4. 检验监控加强对食品中沙门氏菌的检验监控,确保食品质量和食品安全。

沙门氏菌检测操作步骤

沙门氏菌检测操作步骤

沙门氏菌检测操作步骤沙门氏菌是一种常见的细菌,其存在于许多环境中,包括食物、水源和动物体内。

由于沙门氏菌可能引起严重的食物中毒症状,因此对其进行检测和控制非常重要。

在本文中,我将介绍沙门氏菌检测的操作步骤,以帮助您了解如何进行有效的沙门氏菌检测。

1. 选择适当的检测方法在进行沙门氏菌检测之前,首先需要选择适当的检测方法。

常见的检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。

传统培养法需要将样品在富含营养物的培养基上培养并观察有无沙门氏菌生长。

分子生物学方法利用PCR技术检测沙门氏菌的DNA,而免疫学方法则使用抗体来检测沙门氏菌的存在。

根据您的需求和实验条件,选择合适的检测方法非常重要。

2. 样品采集在进行沙门氏菌检测之前,需要采集样品。

这些样品可以是食物、水源、表面物体或动物组织。

确保在采集样品之前,正确消毒采样工具以避免任何污染。

确保将样品收集到干净、密封的容器中,以避免污染和交叉感染。

3. 样品准备收集样品后,需要进行适当的样品准备以便于后续的沙门氏菌检测。

对于食物样品,可以使用均匀悬浮液方法将样品与适当的缓冲液混合均匀。

对于水样或表面物体样品,可以使用封闭的容器直接收集样品。

对于动物组织样品,需要先将样品进行处理,如挤压、切割或研磨,以获得足够的样品量进行检测。

4. 样品分析根据选择的检测方法,进行相应的样品分析。

如果使用传统培养法,可以将样品转移到含有适当培养基的培养皿中,并进行孵育。

培养过程中,需要注意培养皿的环境条件,如温度、pH值和氧气含量。

如果使用分子生物学方法,可以提取样品中的DNA,并使用PCR技术进行检测。

如果使用免疫学方法,可以使用特定的抗体与样品中的沙门氏菌结合,然后观察是否发生免疫反应。

5. 结果解读根据样品分析的结果,进行结果解读。

对于传统培养法,可以观察培养皿中是否有沙门氏菌的典型形态或颜色变化。

对于分子生物学方法,可以通过PCR扩增的产物的大小和带状图样来判断是否存在沙门氏菌的DNA。

2024版沙门氏菌检验实验解析PPT

2024版沙门氏菌检验实验解析PPT

增加“无菌量筒:容量50mL、无菌均质杯、无菌均质袋、无菌广口瓶:容量500mL、无菌试管15mm×150mm、18mm×180mm、无菌接种环:10μL(直径约3mm)、1μL以及接种针”
对检验用器具规格明确,方便实验室选用
增加“生物安全柜”
对于实验室开展活菌操作、样本检测实验室生物安全等级需“BSL-2”,因此,增加此设备是生物安全必须。
明确接种菌液浓度为“0.5麦氏浊度”,接种量“2滴~3滴”,避免接种量过大导致假阳性;还有增加"接种混匀后滴加一层无菌液体石蜡进行密封"由于氰化钾不稳定容易分解失效,因此,加石蜡密封避免造成假阳性反应。
“符合表3中A1者,为沙门氏菌典型的生化反应”后面补充“进行血清学鉴定后报告结果”
明确的指出符合沙门氏菌典型的生化反应需要进行血清学鉴定后报告结果
调整可疑菌落初筛流程
流程图更清晰易懂
TTB选择性增菌改为:低背景菌36 ℃±1 ℃,高背景菌42 ℃±1 ℃原因:验证试验发现,对于生鲜样品,TTB 42℃比 TTB 36℃的选择性好,所以继续沿用;对于深加工样品,TTB 36℃比 TTB 42℃生长好,所以低背景菌采用36℃±1℃培养。如有需要,可将预增菌的培养物在2 ℃~8 ℃冰箱保存不超过72h,再进行选择性增菌。
2016版“必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴定”修改为2024版中“必要时,按表5进行沙门氏菌种和亚种的生化鉴定”
“生化群”用“种和亚种”替代,更易懂;
在表5沙门氏菌种和亚种的生化鉴定中增加“肠炎沙门氏菌、邦戈尔沙门菌种名”以及肠炎沙门氏菌种内对应的6个亚种和生化群分型”;生化反应项增加“明胶酶、L(+)-酒石酸盐、半乳糖醛等8项”
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上图是两种不同的样品在 BPW 中增菌的结果 2. 选择性增菌 (1)用到的试剂是亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)和四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB),选 择两种培养基同时操作的原因是是防止漏检:TTB 可以抑制除了多数的除了沙门以外的肠 道菌生长,但是同时也能抑制较少一些种类的沙门菌生长;而 SC 则是相比较 TBB 选择性要 低很多,可以防止 TTB 抑制的那些菌当中的沙门氏菌,但是 SC 里面划线出来的平板因为细 菌种类较多,比较难分离,在选择可疑菌时难度又较大。所以同时使用两种培养液,就具备 了两者的优点,SC 范围广,TTB 选择性强。 (2)TTB 和 SC 提前配制,分装灭菌、冷却备用;也可以购买商品化的培养管 (3)晃动混匀增菌液,从中吸取分别吸取 1 mL 分别加入到 TTB 和 SC 培养管中,混匀。 TTB 培养管置于 42±1 ℃培养箱培养 18-24 h,SC 培养管主语 36±1 ℃培养 18-24 h。 (4)SC 培养后,若菌生长,培养液会变红,但是变红不意味着沙门氏菌的存在,还需 要往下进行。
微生物检测系列之沙门氏菌检测过程详解及注意事项
严烨
沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一,其病原沙门氏菌属肠道细 菌科,包括那些引起食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。它们除可感染人外,还 可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。人畜感染后可呈无症状带菌 状态,也可表现为有临床症状的致死疾,它可能加重病态或死亡率,或者降低动物的繁殖生 产力。
所以将沙门氏菌检验规定为食品致病性菌种检验中的重要项目,它的检测过程一般包括 样品前增菌、选择性增菌、选择性平板分离划线、初步生化鉴定(确定可疑菌)、生化鉴定、 血清学鉴定及血清学分型(选做)共计 7 个步骤。整个步骤完全完成至少需要 7 天时间。下 面以样品检测示例对整个检测过程进行分析梳理。
国家方法标准:GB 4789.4-2016 1. 前增菌 (1)需要的试剂为缓冲蛋白胨水(BPW),蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求; 氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是缓冲剂。 (2)按样品来源分为普通样品、能力验证样品及盲样考核样品等。 (3)按样品形态分为固态样品、半固态样品及液态样品。 (4)能力验证样品及盲样考核等样品按照随样附带的作业指导书进行操作;普通样品 直接量取 25 g(mL)加入 225 mL BPW 中,混匀置于 36 ℃±1 ℃的恒温培养箱中培养 18 h。 注:样品不需要匀浆均质,直接秤取加入 BPW 中即可,对于固体大颗粒物质,需要捣 碎后称量;BPW 要按照配制说明提前分装灭菌备用。
3. 选择性分离划线 (1)这一步是整个沙门氏菌检测环节最重要的步骤,因为平板划线分离的效果决定了 可疑菌落的判定和选择。 (2)平板划线选择四分法,分离效果好,更容易出现单菌落。
(3)一般习惯选用的分离培养基为亚硫酸铋琼脂(BS)、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD) 及沙门氏菌显色培养基。本人尤其对 XLD 有独特的爱好,因为感觉 XLD 上的菌落形态较 多,分的更为清楚。常见沙门氏菌在 BS 上的可疑菌落具有黑色金属光泽、棕褐色或灰色, 菌落周围培养基呈现黑色或棕色;在 XLD 上的可疑菌落呈粉红色,大部分沙门氏菌带有黑 色中心,少部分(如甲型副伤寒沙门氏菌)无黑色中心,有些菌株会呈现全黑色菌落(如鼠 伤寒沙门氏菌),极少数的为黄色菌落;沙门显色培养基(SCA)根据说明书进行判断,常 见的科玛嘉的选择性培养基可疑菌呈紫红色,其他菌呈蓝绿色(其他的如青岛海博的可疑菌 呈亮红色,广东环凯的可疑菌落呈红色,等等)。也可选择 HE 琼脂,它含有的硫代硫酸钠 和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使得可疑菌落中心可能呈黑色。无论选择哪种选择性 培养基,BS 是必须要选择的,再同其他一种或两种培养基结合起来判定可疑菌存在性。
(4)BS 琼脂:含有煌绿、亚硫酸铋能抑制大肠埃希氏菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的 生长,但对伤寒、副伤寒等沙门氏菌的生长无影响。伤寒杆菌及其他沙门氏菌能利用葡萄糖 将亚硫酸铋还原成硫酸铋,形成黑色菌落周围绕有黑色和棕色的环,对光观察可见有金属光 泽。该培养基制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性,应在临用时配制,超过 48 h 不 宜使用。XLD 琼脂:培养基中含有去氧胆酸钠作指示剂,在该浓度下的去氧胆酸钠也同时 作为大肠埃希氏菌的抑制剂,而不影响沙门氏菌属和志贺氏菌属的生长。HE 琼脂:在保证 细菌所需营养的基础上,加入了一些抑制剂,如:胆盐、柠檬酸盐、去氧胆酸钠等,可抑制 某些肠道致病菌和革兰氏阳性菌的生长,但对革兰氏染色阴性的肠道致病菌则无抑制作用。 沙门氏菌显色培养基(SCA):主要用于快速筛选、分离沙门氏菌,原理是利用沙门氏菌特 异性酶与显色基团的特有反应,使色原游离出来,沙门氏菌在培养基上呈紫色或紫红色。而 大肠埃考
样 BS
XLD





1
阴 性 样 品 2
阳 性 样 品 1
阳 性 样 品 2
沙门显色(科玛嘉)
样 BS 品 甲 型 副 伤 寒 沙 门 氏 菌 鼠 伤 寒 沙 门 氏 菌
XLD
沙门显色(科玛嘉)
阴性样品在 HE 上的分离效果及 XLD 琼脂上各种菌落形态:
从以上的这些实例来看,要通过一种培养基来判定菌落的可疑程度是有难度的,需要几 种分离培养基结合起来才能有效的判别可疑菌落,在 BS 上无可疑菌落的样品,在 XLD 上 会出现可疑菌落,在 XLD 上无可疑菌落的,会在显色培养基上有可疑菌落。顺便提一下, 沙门氏菌显色培养基的分辨效果还是很好的。再进一步说,要通过分离这一步就要判定出阳 性和阴性样时不可能的,只能结合后续的生化特性进行判断(如奇异变形杆菌在 XLD 上的 形态是灰黑色的,具有很强的干扰性)。
从选择性平板上作用就可以看出,选择性的目的是分辨出培养液中倒地有几种菌,无论 是灰色的、黑色的、粉色的、带黑色中心的还是不带黑色中心的,都是下一步初步生化鉴定 的对象菌,这样做的目的就是为了不遗漏任何可能。再强调一遍,有几种菌,就要做几种菌 的初步生化鉴定。
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