氨基酸蛋白质提取工艺特性PPT讲稿
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实验三氨基酸蛋白质的性质鉴定ppt优选PPT文档
解释： 解释：茚三酮反应：aa和Pr都显蓝色
5%氯化汞（剧毒）3—5黄滴，蛋有什白么现象反？说应明什：么问黄题？色沉淀，这一反应为苯丙氨
5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
酸、酪氨酸、色氨酸等苯环aa特有。 氢氧化钠（5%）、硫酸铜（1%）、谷氨酸（1%）
甘氨酸（1%）、鸡蛋白、茚三酮（0. 缩二脲反应呈紫色
解释：不同Pr硫酸另铵沉取淀饱1和%度谷不同氨酸2ml按上法加入同样试剂作对照实
2.
验，比较反应结果。 5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
2%茚三酮溶液3—4滴，然后将两支试管放在沸水浴中加热8—10分钟，观察两支试管有什么现象发生？ 取2ml鸡蛋白溶液于试管中，慢慢加入等量硫酸铵饱和溶液，混合均匀，即成不饱和硫酸铵溶液，静置数分钟，则析出球蛋白，滤出沉 淀，向滤液中加入结晶硫酸铵，使其饱和（硫酸铵不再溶解为止），此时析出清蛋白。 2、茚三酮试剂制备：0.
解释：茚三酮反应：aa和Pr都显蓝色
2、缩二脲反应
蒸馏水中，两天内用完于，否一则失支效。试管中加入鸡蛋白溶液2ml，再滴加5% 氢氧化钠溶液至呈碱性，再加3—5滴1%硫酸铜溶 2%茚三酮溶液3—4滴，然后将两支试管放在沸水浴中加热8—10分钟，观察两支试管有什么现象发生？
1g茚三酮溶50ml
液，观察有何颜色？ 两支试管中，各加入蛋白质溶液1ml，然后一支试管中慢慢加入1%硫酸铜溶液几滴，另一支试管中加入0.
了解氨基酸及蛋白质的主要化学性质及检验方法 取2ml鸡蛋白溶液于试管中，慢慢加入等量硫酸铵饱和溶液，混合均匀，即成不饱和硫酸铵溶液，静置数分钟，则析出球蛋白，滤出沉 淀，向滤液中加入结晶硫酸铵，使其饱和（硫酸铵不再溶解为止），此时析出清蛋白。 5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
5%氯化汞（剧毒）3—5黄滴，蛋有什白么现象反？说应明什：么问黄题？色沉淀，这一反应为苯丙氨
5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
酸、酪氨酸、色氨酸等苯环aa特有。 氢氧化钠（5%）、硫酸铜（1%）、谷氨酸（1%）
甘氨酸（1%）、鸡蛋白、茚三酮（0. 缩二脲反应呈紫色
解释：不同Pr硫酸另铵沉取淀饱1和%度谷不同氨酸2ml按上法加入同样试剂作对照实
2.
验，比较反应结果。 5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
2%茚三酮溶液3—4滴，然后将两支试管放在沸水浴中加热8—10分钟，观察两支试管有什么现象发生？ 取2ml鸡蛋白溶液于试管中，慢慢加入等量硫酸铵饱和溶液，混合均匀，即成不饱和硫酸铵溶液，静置数分钟，则析出球蛋白，滤出沉 淀，向滤液中加入结晶硫酸铵，使其饱和（硫酸铵不再溶解为止），此时析出清蛋白。 2、茚三酮试剂制备：0.
解释：茚三酮反应：aa和Pr都显蓝色
2、缩二脲反应
蒸馏水中，两天内用完于，否一则失支效。试管中加入鸡蛋白溶液2ml，再滴加5% 氢氧化钠溶液至呈碱性，再加3—5滴1%硫酸铜溶 2%茚三酮溶液3—4滴，然后将两支试管放在沸水浴中加热8—10分钟，观察两支试管有什么现象发生？
1g茚三酮溶50ml
液，观察有何颜色？ 两支试管中，各加入蛋白质溶液1ml，然后一支试管中慢慢加入1%硫酸铜溶液几滴，另一支试管中加入0.
了解氨基酸及蛋白质的主要化学性质及检验方法 取2ml鸡蛋白溶液于试管中，慢慢加入等量硫酸铵饱和溶液，混合均匀，即成不饱和硫酸铵溶液，静置数分钟，则析出球蛋白，滤出沉 淀，向滤液中加入结晶硫酸铵，使其饱和（硫酸铵不再溶解为止），此时析出清蛋白。 5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？
氨基酸工艺学PPT课件(共10单元)07 氨基酸分离提取和精制
4、凝聚
➢ 氨基酸发酵液中含有大量的胶体物质，该类物质可使发酵液黏 度增加，使发酵液过滤速率显著降低。
➢ 凝聚是指在电解质的作用下，通过降低胶体系统的扩散双电层 排斥电位，使胶体系统的分散状态发生破坏，从而使胶体粒子 聚集的过程。
➢ 氨基酸发酵液中的微生物细胞和碎片、菌体和蛋白质等胶体粒 子均存在扩散双电层的结构，该扩散双电层结构和所带的相同 电荷可使胶体粒子保持分散状态。
3、错流过滤
❖ 螺旋卷式膜组件 ➢ 螺旋卷式膜组件是一类将膜、多孔膜支撑材料和悬浮液通道网
等组合旋转，一并装入具有一定承压能力的外壳管内而制成的 膜组件。 ➢ 螺旋卷式膜组件的结构：
三、离子交换工艺
❖ 离子交换的基本概念 ❖ 离子交换的基本原理 ❖ 离子交换树脂对氨基酸的吸附规律 ❖ 离子交换的操作过程
3、沉淀
➢ 除含有微生物细胞和碎片、蛋白质和某些胶体物质外，氨基酸 发酵液中还含有一定量的无机离子，如高价的金属离子Ca2+、 Mg2+和Fe3+ 。
➢ 无机离子不仅会影响氨基酸产品的质量，还会显著降低离子交 换树脂吸附氨基酸的吸附量和吸附效率。
➢ 常采用沉淀剂：草酸或草酸钠（ Ca2+ 、 Mg2+ ）、磷酸盐 （ Mg2+ ）、黄血盐（ Fe3+ ）、三聚磷酸钠（ Ca2+、Mg2+和 Fe3+ ）。
2、离子交换的基本原理
➢ 氨基酸是两性电解质，在酸性发酵液中，氨基酸是含有-NH3+基 团的阳离子，能被阳离子交换树脂交换吸附；在碱性发酵液中， 氨基酸是含有-COO-基团的阴离子，能被阴离子交换树脂交换 吸附；在pH值为氨基酸等电点（pI）的发酵液中，氨基酸不电 离，此时氨基酸的兼性离子静电荷为零，不能被阳离子和阴离 子交换树脂交换吸附。
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质提取工艺课件
提取工艺
5
3.蛋白质的变性
引起蛋白质变性的原因：（物理和化学）
物理因素：加热、加压、脱水、搅拌、振荡、
紫外线照射、超声波等；
化学因素：强酸、强碱、尿素、重金属盐等
在临床医学上，变性因素常常被应用于消毒 及灭菌。
注意防止蛋白质变性就能有效保存蛋白质制
剂
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质
提取工艺
6
3.蛋白质的变性
提取工艺
13
蛋白质的变性、沉淀、凝固相互之 间有密切关系
蛋白质变性后不一定沉淀，变性的 蛋白质只在等电点附件才沉淀；
沉淀的蛋白质也不一定凝固
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质
提取工艺
14
二、蛋白质、氨基酸的分类
1.蛋白质的分类
按组成上分：
单纯蛋白质和结合蛋白质
➢ 单纯蛋白质：水解后只生成氨基酸的蛋白质。
物的细胞壁和细胞器中 ➢储藏蛋白：贮藏物质，供生长利用。
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质
提取工艺
16
按功能分类：
活性蛋白质和非活性蛋白质
➢活性蛋白质：酶、激素蛋白质、膜蛋白质等 ➢非质
提取工艺
17
三、蛋白质、氨基酸的生理功能
➢蛋白质是与各种形式的生命活动联系在一
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质
提取工艺
26
抢救误服重金属盐中毒的病人。
天然药物提取工艺氨基酸和蛋白质
提取工艺
10
c.生物碱试剂以及某些酸类沉淀蛋白质：
➢蛋白质可与生物碱试剂（苦味酸、鞣酸） 以及某些酸（三氯乙酸、硝酸等）结合成 不溶性的盐沉淀；
➢ 沉淀的条件为pH小于等电点，此时蛋白 质带正电荷易与酸根负离子结合成盐；
蛋白质提取、分离、纯化及鉴定(共14张PPT)
而增加
原理
蛋白质分子吸附某种盐类离子后，带电层使蛋白质分
子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子间相互作用增强， 因而溶解度增加
盐析的影响因素
➢蛋白质的种类：
分子量越大，沉淀所需盐的量越少（卵球蛋白>卵清蛋白）
蛋白质分子不对称性越大，越容易沉淀
➢温度：
高离子强度溶液中，升高温度有利于蛋白质的失水沉淀 低离子强度溶液或纯水中，蛋白质的溶解度在一定温度范
常为凝胶柱床体积的1%-10% ➢洗脱速度要恒定
➢实验完毕后，将凝胶全部回收处理，以备下次实验使用，
严禁将凝胶丢弃或倒入水池中
实验三脱盐后离子测定及蛋白浓度测定
1.硫酸根离子浓度测定
（决定是否停止洗脱）
醋酸钡与溶液中的硫酸根离子可以形成白色的沉淀，同时不能同蛋 白质形成沉淀。
➢从每管洗脱液中取1滴加在黑瓷板上，加入1滴醋酸钡溶液，观察沉淀 ➢实验中设阴性对照(双蒸水)和阳性对照(硫酸铵溶液)
➢SephadexG-25：吸水量2.5ml/g，干粒子直径100-300µm，筛 孔40-60。大部分蛋白质分子从外水体积流出，盐等小分子
从内水体积流出。
实验一卵清球蛋白的盐析分离
0.7ml卵清+0.7ml饱和硫酸铵溶液（每组2个EP管）
混合均匀（避免产生气泡）
静置3-5分钟，蛋白质析出
3000rห้องสมุดไป่ตู้m，离心3分钟 用移液枪去除上清（含卵清白蛋白）
蛋白质提取、分离、纯化及鉴定
➢材料（取材一定要新鲜，在低温下操作）
➢前处理及裂解细胞（匀浆器、研钵、超声波、反复冻融、
酶解等） ➢蛋白质粗分级分离（水、盐溶液、稀酸、稀碱、有机溶剂、
盐析、有机溶剂分级分离、等电点分离）
原理
蛋白质分子吸附某种盐类离子后，带电层使蛋白质分
子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子间相互作用增强， 因而溶解度增加
盐析的影响因素
➢蛋白质的种类：
分子量越大，沉淀所需盐的量越少（卵球蛋白>卵清蛋白）
蛋白质分子不对称性越大，越容易沉淀
➢温度：
高离子强度溶液中，升高温度有利于蛋白质的失水沉淀 低离子强度溶液或纯水中，蛋白质的溶解度在一定温度范
常为凝胶柱床体积的1%-10% ➢洗脱速度要恒定
➢实验完毕后，将凝胶全部回收处理，以备下次实验使用，
严禁将凝胶丢弃或倒入水池中
实验三脱盐后离子测定及蛋白浓度测定
1.硫酸根离子浓度测定
（决定是否停止洗脱）
醋酸钡与溶液中的硫酸根离子可以形成白色的沉淀，同时不能同蛋 白质形成沉淀。
➢从每管洗脱液中取1滴加在黑瓷板上，加入1滴醋酸钡溶液，观察沉淀 ➢实验中设阴性对照(双蒸水)和阳性对照(硫酸铵溶液)
➢SephadexG-25：吸水量2.5ml/g，干粒子直径100-300µm，筛 孔40-60。大部分蛋白质分子从外水体积流出，盐等小分子
从内水体积流出。
实验一卵清球蛋白的盐析分离
0.7ml卵清+0.7ml饱和硫酸铵溶液（每组2个EP管）
混合均匀（避免产生气泡）
静置3-5分钟，蛋白质析出
3000rห้องสมุดไป่ตู้m，离心3分钟 用移液枪去除上清（含卵清白蛋白）
蛋白质提取、分离、纯化及鉴定
➢材料（取材一定要新鲜，在低温下操作）
➢前处理及裂解细胞（匀浆器、研钵、超声波、反复冻融、
酶解等） ➢蛋白质粗分级分离（水、盐溶液、稀酸、稀碱、有机溶剂、
盐析、有机溶剂分级分离、等电点分离）
蛋白质降解和氨基酸代谢优秀课件.ppt
第七章 蛋白质降解和氨基酸的分解代谢
学习目标
◆掌握一些主要的概念：转氨作用，氧化脱氨，联合脱氨 基作用,鸟氨酸循环(尿素循环)，生酮和生糖氨基酸
◆熟悉鸟氨酸循环发生的部位，循环中的各步酶促反应， 尿素氮的来源
◆了解氨基酸碳骨架的氧化途径，特别是与代谢中心途径 （酵解和柠檬酸循环）的关系，以及一些氨基酸代谢 中酶的缺损引起的遗传病.
内容提要
◆生物体内蛋白质的降解体系主要包括溶酶体的非选择性降解和泛 肽/26S蛋白酶体的选择性降解.
◆谷氨酸脱氢酶催化氨整合到谷氨酸中，谷氨酰胺是氨的一个重要 载体和主要运输形式。葡萄糖-丙氨酸循环.
◆转氨酶催化α-氨基酸和α-酮酸的可逆相互转换。 ◆联合脱氨基作用是生物体脱氨的主要方式,主要分为以谷氨酸脱
L-谷氨酸脱氢酶
CH NH2 COOH
NAD(P)+ NAD(P)H+H+
COOH
CH2 CH2 C=O
+ NH3
COOH
R-CH-COO|
氨基酸氧化酶（FAD、FMN） R-C|| -COO-+NH3
NH+3
α-氨基酸
H2O+O2
H2O2
O
α-酮酸
蛋白质降解和氨基酸代谢优秀课件
• 氨基酸氧化酶：
（pepsinogen） （pepsin）
小肠 分泌 肠促胰液肽 中和胃酸
（secretin）
小肽
胰蛋白酶，糜蛋白酶，弹性蛋白酶
（trypsin） （chymotrypsin） （elastase）
羧肽酶， 氨肽酶 ， 二（三）肽酶
（carboxypeptidase）（aminopeptidase） （di，tripeptidase）
学习目标
◆掌握一些主要的概念：转氨作用，氧化脱氨，联合脱氨 基作用,鸟氨酸循环(尿素循环)，生酮和生糖氨基酸
◆熟悉鸟氨酸循环发生的部位，循环中的各步酶促反应， 尿素氮的来源
◆了解氨基酸碳骨架的氧化途径，特别是与代谢中心途径 （酵解和柠檬酸循环）的关系，以及一些氨基酸代谢 中酶的缺损引起的遗传病.
内容提要
◆生物体内蛋白质的降解体系主要包括溶酶体的非选择性降解和泛 肽/26S蛋白酶体的选择性降解.
◆谷氨酸脱氢酶催化氨整合到谷氨酸中，谷氨酰胺是氨的一个重要 载体和主要运输形式。葡萄糖-丙氨酸循环.
◆转氨酶催化α-氨基酸和α-酮酸的可逆相互转换。 ◆联合脱氨基作用是生物体脱氨的主要方式,主要分为以谷氨酸脱
L-谷氨酸脱氢酶
CH NH2 COOH
NAD(P)+ NAD(P)H+H+
COOH
CH2 CH2 C=O
+ NH3
COOH
R-CH-COO|
氨基酸氧化酶（FAD、FMN） R-C|| -COO-+NH3
NH+3
α-氨基酸
H2O+O2
H2O2
O
α-酮酸
蛋白质降解和氨基酸代谢优秀课件
• 氨基酸氧化酶：
（pepsinogen） （pepsin）
小肠 分泌 肠促胰液肽 中和胃酸
（secretin）
小肽
胰蛋白酶，糜蛋白酶，弹性蛋白酶
（trypsin） （chymotrypsin） （elastase）
羧肽酶， 氨肽酶 ， 二（三）肽酶
（carboxypeptidase）（aminopeptidase） （di，tripeptidase）
蛋白质的提取和分离ppt课件
答案 C
学习探究区
第14课时
带电性质 大小
本 课 栏 目 开 关
慢 快 小分子
匀浆
电泳 染色
自我检测区
第14课时
1． 在乳酸脱氢酶同工酶分离过程中， 使用缓冲液的作用
本 课 栏 目 开 关
是 A．维持溶液浓度不变 B．维持溶液酸碱度不变 C．催化蛋白质分离过程顺利完成 D．无实际意义
( B )
解析 分离蛋白质时加入缓冲液，其原因是缓冲液在 一定范围内能抵制外界酸和碱对反应溶液溶液 pH 的 影响，保持 pH 基本不变。
学习探究区
第14课时
带电性质 的 差 异 以 及 分 子 本 身 的 ______ 大小 、 种 分 子 __________ 形状 不同。使带电分子产生不同的迁移速度，从而实 ______
现样品中各种分子的分离。
本 课 栏 目 开 关
(2)常用方法种类 ①琼脂糖凝胶电泳：在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂
学习探究区
第14课时
活学活用 2．下列说法不正确的是
本 课 栏 目 开 关
(
)
A．在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性 B．将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，是为了保 证酶的活性 C．载样缓冲液中的溴酚蓝是一种酸碱缓冲物质，维 持 pH 稳定 D．电泳的结果是出现了 5 个条带，说明乳酸脱氢酶 有 5 种同工酶
学习探究区 3．结果分析
第14课时
本 课 栏 目 开 关
由图中电泳结果可以看出：
乳酸脱氢酶有5种同工酶 。 5 个条带说明 _______________________ (1)每个器官形成了 __ 心脏 中含量最高，在 ________ 骨骼肌 中含量最低，说明 (2)LDH2 在 _____ 不同的器官同一种同工酶的含量不同 。 _____________________________________ LDH5 ，含量最低的是 ________ LDH1 ， (3)骨骼肌中含量最高的是 _______ 同一器官不同的同工酶含量不同 。 说明 _________________________________
学习探究区
第14课时
带电性质 大小
本 课 栏 目 开 关
慢 快 小分子
匀浆
电泳 染色
自我检测区
第14课时
1． 在乳酸脱氢酶同工酶分离过程中， 使用缓冲液的作用
本 课 栏 目 开 关
是 A．维持溶液浓度不变 B．维持溶液酸碱度不变 C．催化蛋白质分离过程顺利完成 D．无实际意义
( B )
解析 分离蛋白质时加入缓冲液，其原因是缓冲液在 一定范围内能抵制外界酸和碱对反应溶液溶液 pH 的 影响，保持 pH 基本不变。
学习探究区
第14课时
带电性质 的 差 异 以 及 分 子 本 身 的 ______ 大小 、 种 分 子 __________ 形状 不同。使带电分子产生不同的迁移速度，从而实 ______
现样品中各种分子的分离。
本 课 栏 目 开 关
(2)常用方法种类 ①琼脂糖凝胶电泳：在电泳缓冲液和凝胶中加入琼脂
学习探究区
第14课时
活学活用 2．下列说法不正确的是
本 课 栏 目 开 关
(
)
A．在酶的提取和分离过程中必须保持其生物活性 B．将心脏研磨成匀浆时要在冰浴下进行，是为了保 证酶的活性 C．载样缓冲液中的溴酚蓝是一种酸碱缓冲物质，维 持 pH 稳定 D．电泳的结果是出现了 5 个条带，说明乳酸脱氢酶 有 5 种同工酶
学习探究区 3．结果分析
第14课时
本 课 栏 目 开 关
由图中电泳结果可以看出：
乳酸脱氢酶有5种同工酶 。 5 个条带说明 _______________________ (1)每个器官形成了 __ 心脏 中含量最高，在 ________ 骨骼肌 中含量最低，说明 (2)LDH2 在 _____ 不同的器官同一种同工酶的含量不同 。 _____________________________________ LDH5 ，含量最低的是 ________ LDH1 ， (3)骨骼肌中含量最高的是 _______ 同一器官不同的同工酶含量不同 。 说明 _________________________________
氨基酸生产工艺 ppt课件
• α-酮戊二酸脱氢酶在谷氨酸生物合成中非常重要 • 谷氨酸高产菌应丧失或仅有微弱的α-酮戊二酸脱氢酶活
力
α-酮戊二酸脱氢酶
α-酮戊二酸
琥珀酰CoA
琥珀酸
若α-酮戊二酸脱氢酶活力很弱，就使糖代谢流进入TCA循环后受阻在 α-酮戊二酸处
α-酮戊二酸
NH4+、谷氨酸脱氢酶
谷氨酸
2.DCA循环
乙酰CoA 草酰乙酸
苹果酸酶
丙酮酸
苹果酸
±CO2
苹果酸脱氢酶
草酰乙酸
NAD+ NADH+H+
1，6-二磷酸果糖
PEP
丙酮酸激酶 CO2 +PEP羧化酶 CO2
PEP羧化酶对PEP的表现亲和力约是丙酮酸激酶的1/10
PEP浓度低
所以在谷氨酸发酵 中，糖的分解代谢 途径与CO2固定的 适当比例是提高谷 氨酸对糖收率的关 键问题。
有机酸浓度低 DCA循环运转 乙醛酸、草酰乙酸 异柠檬酸脱氢酶抑制
DCA循环运转 TCA循环有机酸过剩 异柠檬酸裂解酶抑制 乙醛酸浓度降低 异柠檬酸脱氢酶抑制解除 TCA循环运转
• 在糖质原料的谷氨酸发酵中，在谷氨酸生成期，
如果葡萄糖先转化为醋酸，再由DCA循环提
供C4二羧酸合成谷氨酸，谷氨酸对糖的转化 率就大为减少。
天冬甜肽（Aspartom）： L-Asp和L-phe合成 美国Searle公司30年前低热量营养性甜味剂 口感近似蔗糖，甜度为蔗糖的25~30倍，热量仅为 蔗糖的1/160，全球总销量已1.5万吨
阿丽泰(Alitame)：由天冬氨酸与丙氨酸合成 甜味更纯正，耐热性更好，最适用于面包、饼干、 蛋糕等焙烤食品
• 色氨酸 • 5-羟基－色氨酸 • 赖氨酸
力
α-酮戊二酸脱氢酶
α-酮戊二酸
琥珀酰CoA
琥珀酸
若α-酮戊二酸脱氢酶活力很弱，就使糖代谢流进入TCA循环后受阻在 α-酮戊二酸处
α-酮戊二酸
NH4+、谷氨酸脱氢酶
谷氨酸
2.DCA循环
乙酰CoA 草酰乙酸
苹果酸酶
丙酮酸
苹果酸
±CO2
苹果酸脱氢酶
草酰乙酸
NAD+ NADH+H+
1，6-二磷酸果糖
PEP
丙酮酸激酶 CO2 +PEP羧化酶 CO2
PEP羧化酶对PEP的表现亲和力约是丙酮酸激酶的1/10
PEP浓度低
所以在谷氨酸发酵 中，糖的分解代谢 途径与CO2固定的 适当比例是提高谷 氨酸对糖收率的关 键问题。
有机酸浓度低 DCA循环运转 乙醛酸、草酰乙酸 异柠檬酸脱氢酶抑制
DCA循环运转 TCA循环有机酸过剩 异柠檬酸裂解酶抑制 乙醛酸浓度降低 异柠檬酸脱氢酶抑制解除 TCA循环运转
• 在糖质原料的谷氨酸发酵中，在谷氨酸生成期，
如果葡萄糖先转化为醋酸，再由DCA循环提
供C4二羧酸合成谷氨酸，谷氨酸对糖的转化 率就大为减少。
天冬甜肽（Aspartom）： L-Asp和L-phe合成 美国Searle公司30年前低热量营养性甜味剂 口感近似蔗糖，甜度为蔗糖的25~30倍，热量仅为 蔗糖的1/160，全球总销量已1.5万吨
阿丽泰(Alitame)：由天冬氨酸与丙氨酸合成 甜味更纯正，耐热性更好，最适用于面包、饼干、 蛋糕等焙烤食品
• 色氨酸 • 5-羟基－色氨酸 • 赖氨酸
氨基酸合成蛋白质ppt课件
6
1
5
5
6
2
4
4
6
3
3
3
假如n个氨基酸脱水缩合,形成m 条肽链，上表该怎么填呢？
规律总结：
假如n个氨基酸脱水缩合,形成m条 肽链，那么产生的水分子数=肽键 数=（n-m）
随堂练习：
某蛋白质分子共有4条肽链，300个肽键， 则形成这个蛋白质分子所需氨基酸分子 数以及它们在缩合过程中生成的水分子
的数分别（ ）C。
规律总结：
假如n个氨基酸脱水缩合，形成一条 肽链，形成的多肽叫n肽，则失去的 水分子数=肽键数=（n-1)
假如n个氨基酸脱水缩合,形成m条肽 链，那么产生的水分子和肽键数会 是多少？
规律总结：
6
1
5
5
6
2
形成一条肽链：
5分子水和5个肽键
形成两条肽链：
肽链1:
肽链2:
4分子水和4个肽键
规律总结：
肽键
R1
R2
二肽
H2O
H2O
H C COOH R2
三肽的合成
HOH
NH2 C C N 肽键
R1
HOH
CCN 肽键
R2
H
三
C COOH 肽
R2
二肽
H2O H2O
由氨基酸形成蛋白质的示意图
氨基酸
脱水缩合
二肽
脱水缩合
三肽
脱水缩合
一条多肽 链折叠形 成蛋白质
几条多肽 链折叠形 成蛋白质
折叠盘曲成 多肽 空间结构
一个氨基酸分子的氨基 （-NH2）相连接，同时脱去 一个水，这种结合方式叫做脱水缩合。
肽键：连接两个氨基酸分子的化学键（-NHCO-）。
高中生物选修五氨基酸蛋白质PPT课件
第26页/共40页
4、蛋白质、淀粉、脂肪是三种重要的营养 物质，其中__脂_肪___不是高分子化合物，这 三种物质水解的最终产物分别是 蛋白质→_氨__基_酸____； 淀粉→_葡__萄__糖____； 脂肪→_高__级_脂__肪_酸__和__甘_油__ ； 在蛋白质水解的最终产物分子中，含有 ___________ 官能团。
第21页/共40页
概念对比
盐析
变化条件 浓的无机盐溶液
变性
受热、紫外线、酸、碱、 重金属盐和某些有机物
物理变化
变化性质 (溶解度降低)
变化过程
可逆
用途
分离提纯
化学变化 (蛋白质性质改变)
不可逆
杀菌消毒
第22页/共40页
●实验：
（1）鸡蛋白溶液
性质5: 颜色反应
浓硝酸 变成黄色
双缩脲试剂
（2）鸡蛋白溶液
H2O 水解 H2O
H2O
HO NCH2C
HO NCH2C
多肽
水解
HO NCH2C
HO NCH2C
蛋白质
第9页/共40页
甘氨酸和丙氨酸脱水缩合成二肽,能形成几种二肽
甘氨酸
甘氨酸
丙氨酸
丙氨酸
甘氨酸
丙氨酸
丙氨酸
第10页/共40页
甘氨酸
1、n个氨基酸分子之间通过缩聚(一个氨基酸分子中氨基上的氢原子与相邻氨基酸
第19页/共40页
●实验：
鸡蛋白溶液
鸡蛋白溶液
性质4:变性
加 乙热酸铅
蛋白质凝结 蛋白质凝结
加水 不再溶解 加水 不再溶解
●结论：在热、强酸、强碱、重金属盐、甲醛、酒精、苯酚溶液、紫外线等作用
过程 下，蛋白质失去原有的可溶性而凝结，同时丧失了生理活性。这种 是不可逆的。
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• 氨基酸在适当的条件下，能进行有机胺或有机酸的
几乎全部反应。与一般的酸和碱可生成稳定的盐， 大部分均能溶于水，但与重金属如铜、银、汞等制 成的络合物不溶于水，也可利用这种性质来分离氨 基酸。
二、氨基酸的浸出
• ①水浸出法：将中草药以粉碎机粉碎，装入逆
流浸出罐组的每一个浸出罐中。用水做浸出溶 剂，最好在有搅拌的条件下，加热进行逆流浸
• (1)盐浓度：提取蛋白质的盐的浓度，一般
在0.02～0.2M的范围内。常用稀溶液和缓 冲液有0.02～0.05M磷酸缓冲液，0.09～ 0.15M氯化钠溶液。
• (2)pH值：蛋白质和酶所用的提取液pH值
一般选择在被提取的蛋白质等电点两侧的稳 定区内。
• (3)温度：蛋白质和酶一般都不耐热，所以
• ②成盐分离法:利用某些酸性氨基酸与某些金属化
合物，如氢氧化钡、氢氧化钙生成难溶性盐，或 某碱性氨基酸与一般酸生 成盐，从而与其他未成 盐的氨基酸分离。如南瓜子中的南瓜子氨基酸是 通过与过氯酸生成结晶性盐而分出的。
• ③晶析法:利用不同氨基酸等电点不同，进行晶析
结晶分离。1.5～2.0时，浓缩先晶析出 亮氨酸，它的母液加盐酸后再浓缩晶析出异亮氨 酸，最后母液中回收缬氨酸。
提取时通常要求低温操作。
2.有机溶剂提取
• 一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多
的蛋白质和酶，难溶于水、稀盐、稀酸和稀碱，常 用有机溶剂提取。如丙酮、异丙醇、乙醇、正丁醇 等，均可溶于水或部分溶于水，这些溶剂都同时有 亲脂性和亲水性。其中正丁醇有较强的亲脂性，也 有一定亲水性，在0℃时于水中有10.5％的溶解度。 它在水和脂分子间起着类似去污剂的作用，取代蛋 白质与脂质重新与蛋白质结合，使原来蛋白质在水 中溶解度大大增加。丁醇在水溶液及各种生物材料 中解离脂蛋白的能力极强，是其他有机溶剂所不及 的。我国生化工作者曾用此法成功地提取了琉拍酸 脱氢酶，对于碱性磷酸醋酶的提取效果也十分显著。
不溶于水、盐、稀酸、稀碱
(包括磷蛋白、粘 蛋白、糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、 血红蛋白、金属蛋白、黄素蛋白 等)
此类蛋白质溶解度性质随蛋白质与非蛋白结合部分 的不同而异， 除脂蛋白外，一般可溶于稀酸，稀碱 及盐溶液中，脂蛋白如脂质部分露于外，则脂溶性 占优势，如脂质部分被包围于分子之中，则水溶性 占优势。
蛋白质类别
溶解性质
简单蛋白质 1.白蛋白 2.球蛋白 a.真球蛋白 b.拟球蛋白 3.醇溶蛋白 4.谷蛋白 5.精蛋白 6.组蛋白
硬蛋白质
1、溶于水及稀盐、稀酸、稀碱溶液，可被50%饱 和度硫酸铵析出。2、a.一般在等电点不溶于水， 但加入少量的盐、碱则可溶解。
b.溶于水，可为50%的饱和度硫酸铵析出。 3、溶于70—80%乙醇中，但不溶于水及无水乙醇 。 4、在等电点不溶于水，也不溶于稀盐酸，易溶于 稀酸，稀 碱溶液。 5、溶于水和稀酸，易在稀氨水中沉淀。 6、溶于水和稀酸，易在稀氨水中沉淀。
• ①离子交换法:这是分离氨基酸的常用方法。可直
接将水或稀乙醇提取物通过装有离子交换树脂的 交换柱，带正荷的氨基酸与树脂上的-SO３基吸 附。由于氨基酸带的正电荷随溶液pH发生变化， 同一氨基酸在不同pH的缓冲溶液中，以及不同氨 基酸在同一pH的环境中，所带的正电荷各不相同， 与磺酸基吸附的强弱也相应不同。可以借助这种 差别，使氨基酸互相分离。
• ②稀乙醇浸出法：将生药粉末装入逆流渗滤浸
出罐组的每一个浸出罐中。以70%乙醇进行 渗滤浸出，先浸出的溶液浓度较大，后浸出的 溶液浓度较低。最好采用逆流渗漉浸出法，把 出液系数控制在5，可以得到较好的浸出效果。
三、氨基酸的分离
• 水浸出液或稀乙醇减压浓缩后的水溶液往往含有
几种或十几种氨基酸，因此所得的是总氨基酸， 必须进行分离纯化。一般采用以下的纯化方法：
二、蛋白质及酶的一般提取方法
• 1.水溶液提取 凡能溶于水、稀盐、稀酸或稀碱的
蛋白质或酶，一般都可用稀盐溶液或缓冲溶液进行 提取。稀盐溶液有利于稳定蛋白质结构和增加蛋白 质溶解度。加入的提取液的量要适当，加入量太少 提取不完全，加的量太多，则不利于浓缩，一般用 量为原材料3～6倍体积左右，可一次提取或分次提 取。提取时常缓慢搅拌，以提高提取效率。以盐溶 液或缓冲液提取蛋白质和酶时，常综合考虑下列因 素：
• 有些蛋白质和酶既溶于稀酸、稀碱，又
能溶于一定比例的有机溶剂。在这样的 情况下，采用稀的有机溶剂提取常常是 为防止水解酶的破坏，并兼有除杂和提 高纯化效果的作用。
• 四、氨基酸、肽的鉴别反应
• ①茚三酮(Ninhydrin)反应：所有的a-氨基酸及含
有a-氨基酸的肽类和蛋白质都能和该试剂反应呈 现兰色或兰紫色。必要时加热，反应可在滤纸上 进行。
• (2)吲哚醌(Isatin）试剂反应：不同的氨基酸与
吲哚醌试剂反应，能显示不同的颜色。由于试剂 的配制方法不同，对同一种氨基酸所显示的颜色 也往往有差异。吲哚醌不仅可用于氨基酸的显色， 而且从其颜色的区别，可以帮助辨认氨基酸。显 色不稳是其特点，氨对显色无干扰。
氨基酸蛋白质提取工艺特性课 件
一、氨基酸的特性
• 因氨基酸分子较小，且有羧基、氨基，同时具有碱性
和酸性极性基团较多，所以它的极性较大，能溶于水， 不溶于有机溶剂。因同时具有羧基和氨基，有酸碱两 性的性质，能与酸和碱形成不同的盐。当溶液的pH 发生变化时，溶液中的离子状态也发生了变化。在电 场中酸性溶液的氨基酸则向阴极电泳，而在碱性溶液 中则向阳极电泳，当溶液的pH值达一定时，氨基酸 不向任何电极移动，此时溶液的pH值就是该氨基酸 的等电点。不同的氨基酸有不同的等电点，在等电点 时氨基酸的溶解度最低，根据这种性质可以用电泳法 分离氨基酸。
第二节 蛋白质提取工艺特性
• • 蛋白质按其功能可分为活性蛋白和非活性蛋白二
类；
• 按结构又可分为简单蛋白和结合蛋白二类： • 再一种分类是根据蛋白质的溶解度差别而分为水
溶性蛋白、醇溶性蛋白等，还有一类硬蛋白，不 溶于水、稀酸、稀碱和有机溶剂，遇强酸、强碱 水解。
表6-1 不同结构的蛋白质及其溶解性质