DNase I 脱氧核糖核酸酶
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20 mM Tris-Cl,pH 7.5 和 1 mM MgCl2。该溶液可以在-20ºC 储存至少一年。 2. 在37 ºC孵育10~15分钟。 3. 3. 加入1 μl终止溶液以结合钙离子和镁离子,使DNase I失活,终止反应。
ü 必须在加热之前加入终止溶液(20 mM EGTA)以防止金属(Mg/Ca)离子催化水解 RNA。在 70°C 加热 10 分钟使 DNA 酶 I 和 RNA 变性。
DNase 活性。
质检结果: 泳道 1:Marker 泳道 2:阴性对照(无 DNase I) 泳道 3:DNA + 1 单位 DNA 酶 I. 泳道 4:DNA + 2 单位 DNA 酶 I. 泳道 5:DNA + 3 单位 DNA 酶 I.
Sangon 泳道1 泳道 2 泳道 3 泳道 4 泳道 5
DNase I 脱氧核糖核酸酶
产品编号 : A610099 包装规格:250 MG / 1 G / 5 G
产品说明: 脱氧核糖核酸酶 I(A610099)是来源于牛胰腺的核酸内切酶,在二价阳离子存在的情况下会降解双链 DNA,生成 3'-OH
寡核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I 可以剪切双链 DNA 位点形成切口,而在 Mn2+存在条件下,DNase I 可以剪切 DNA 的 双链。
抑制剂:EGTA;EDTA;盐浓度> 100 mM 会降低 DNase 活性。
io 分子量:31,000 道尔顿。 B 必备:Ca2+和 Mg2+或 Mn2+
来源:牛胰腺。
n 储存温度:-20°C 储存。避免频繁的温度变化。请参阅产品信息标签上的有效期。 o 终止溶液:20 mM EGTA(pH 8.0)。
在切口平移中,DNase I 剪切出作为 DNA 合成起始位点的单链切口,并通过剪切双链 DNA 克隆随机的 DNA 片段。 DNase I 是一种色谱级纯的制剂。它以冻干粉末的形式提供,其活性约为 500 Kunitz U/mg。为了获得最大的稳定性, DNase 须以至少 1 mg/ml 的浓度溶解在含有 20 mM Tris-HCl 和 1 mM MgCl2,且 pH 7.5 的 50%甘油中。该溶液可以在-20ºC 温度下储存至少一年。
本产品消化时间不得超过 15 分钟或消化温度高于 37 ºC,否则残留的污染性 RNA 酶将开始降解 RNA。
使用说明: 1. 此 DNase 溶液不含 RNase 抑制剂。 2. 在不同的缓冲条件下,完全消化给定量的 DNA 所需的 DNA 酶量可能需要凭经验确定。例如,盐浓度> 100 mM 会降低
n 等于一个 Kunitz 单位。可在产品信息标签上查看单位浓度。 a 步骤 S 1. 向无RNA酶的PCR管中加入:
1 μg RNA 样品; 49 μl 的 1×反应缓冲液:40 mM Tris-Cl(pH 8.0),2.5 mM(最高达 10 mM)MgSO4,1 mM(最高达 10 mM)CaCl2; 1 μl DNase I,1 单位/ml * ü 请参阅分析说明书以了解该批次的活性。为了溶解至少 1 unit/ml 浓度的 DNA 酶 I,推荐使用储存缓冲液:50e 的单位定义是在 37°C 温度下,50 μl 含有 40 mM Tris-HCl(pH 8.0),2.5 mM(最高 10 mM)MgSO4,1 mM(至
多 10 mM)CaCl2 的缓冲液中,10 分钟内完全降解 1 μg λDNA 所需的量。在这些测定条件下,一个单位的 DNA 酶活性大约
h 推荐的 1×反应缓冲液: c 40 mM Tris-HCl(pH 8.0),2.5 mM(最多 10 mM)MgSO4,1 mM(最多 10 mM)CaCl2.。
注意:如果原料中含有 EGTA,EDTA,其他螯合剂和/或高浓度的盐,推荐使用含有更高浓度的镁离子和钙离子缓冲液。
te 热灭活:65°C 终止溶液中 10 分钟。
ü 必须在加热之前加入终止溶液(20 mM EGTA)以防止金属(Mg/Ca)离子催化水解 RNA。在 70°C 加热 10 分钟使 DNA 酶 I 和 RNA 变性。
DNase 活性。
质检结果: 泳道 1:Marker 泳道 2:阴性对照(无 DNase I) 泳道 3:DNA + 1 单位 DNA 酶 I. 泳道 4:DNA + 2 单位 DNA 酶 I. 泳道 5:DNA + 3 单位 DNA 酶 I.
Sangon 泳道1 泳道 2 泳道 3 泳道 4 泳道 5
DNase I 脱氧核糖核酸酶
产品编号 : A610099 包装规格:250 MG / 1 G / 5 G
产品说明: 脱氧核糖核酸酶 I(A610099)是来源于牛胰腺的核酸内切酶,在二价阳离子存在的情况下会降解双链 DNA,生成 3'-OH
寡核苷酸。Mg2+存在条件下,DNase I 可以剪切双链 DNA 位点形成切口,而在 Mn2+存在条件下,DNase I 可以剪切 DNA 的 双链。
抑制剂:EGTA;EDTA;盐浓度> 100 mM 会降低 DNase 活性。
io 分子量:31,000 道尔顿。 B 必备:Ca2+和 Mg2+或 Mn2+
来源:牛胰腺。
n 储存温度:-20°C 储存。避免频繁的温度变化。请参阅产品信息标签上的有效期。 o 终止溶液:20 mM EGTA(pH 8.0)。
在切口平移中,DNase I 剪切出作为 DNA 合成起始位点的单链切口,并通过剪切双链 DNA 克隆随机的 DNA 片段。 DNase I 是一种色谱级纯的制剂。它以冻干粉末的形式提供,其活性约为 500 Kunitz U/mg。为了获得最大的稳定性, DNase 须以至少 1 mg/ml 的浓度溶解在含有 20 mM Tris-HCl 和 1 mM MgCl2,且 pH 7.5 的 50%甘油中。该溶液可以在-20ºC 温度下储存至少一年。
本产品消化时间不得超过 15 分钟或消化温度高于 37 ºC,否则残留的污染性 RNA 酶将开始降解 RNA。
使用说明: 1. 此 DNase 溶液不含 RNase 抑制剂。 2. 在不同的缓冲条件下,完全消化给定量的 DNA 所需的 DNA 酶量可能需要凭经验确定。例如,盐浓度> 100 mM 会降低
n 等于一个 Kunitz 单位。可在产品信息标签上查看单位浓度。 a 步骤 S 1. 向无RNA酶的PCR管中加入:
1 μg RNA 样品; 49 μl 的 1×反应缓冲液:40 mM Tris-Cl(pH 8.0),2.5 mM(最高达 10 mM)MgSO4,1 mM(最高达 10 mM)CaCl2; 1 μl DNase I,1 单位/ml * ü 请参阅分析说明书以了解该批次的活性。为了溶解至少 1 unit/ml 浓度的 DNA 酶 I,推荐使用储存缓冲液:50e 的单位定义是在 37°C 温度下,50 μl 含有 40 mM Tris-HCl(pH 8.0),2.5 mM(最高 10 mM)MgSO4,1 mM(至
多 10 mM)CaCl2 的缓冲液中,10 分钟内完全降解 1 μg λDNA 所需的量。在这些测定条件下,一个单位的 DNA 酶活性大约
h 推荐的 1×反应缓冲液: c 40 mM Tris-HCl(pH 8.0),2.5 mM(最多 10 mM)MgSO4,1 mM(最多 10 mM)CaCl2.。
注意:如果原料中含有 EGTA,EDTA,其他螯合剂和/或高浓度的盐,推荐使用含有更高浓度的镁离子和钙离子缓冲液。
te 热灭活:65°C 终止溶液中 10 分钟。