肠道寄生虫粪便的病原学检查方法
寄生虫总结
病原学诊断技术粪便检查粪便检查是诊断寄生虫病的基本方法。
为了取得准确的结果,送检标本需保持新鲜,保存时间一般不宜超过24小时。
如检查肠内原虫滋养体,最好立即检查,或暂时保存在35-37℃条件下待查。
盛粪便的容器要干净,粪便中不可混入尿液和其它污染物,以免影响检查结果。
(一)直接涂片法(二)用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,连续作3次涂片,可以提高检出1、蠕虫卵检查滴1滴生理盐水于洁净的载玻片上,用牙签挑取绿豆大小的粪便块,在生理盐水中涂抹均匀。
(三)2、原虫检查(四)滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。
(五)包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以1滴碘液代替生理盐水,粪便涂抹方法同上。
(六)隐孢子虫卵囊染色检查:目前最佳的方法为金胺-酚改良抗酸染色法。
其次为金胺-酚染色法和改良抗酸染色法。
(二)厚涂片透明法(改良加藤法)此方法需掌握粪膜的合适厚度和透明时间,如粪膜厚且透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长则虫卵变形,不易辨认。
(三)浓聚法1、沉淀法原虫包囊和蠕虫卵的比重大,可沉积于水底,有助于提高检出率。
自然沉淀法本法主要用于蠕虫卵检查,蠕虫卵比重大于水,可沉淀于水底,使虫卵浓集。
离心沉淀法:将滤去粗渣的粪液离心1-2分钟,倒去上层液,注入清水,再离心沉淀,如此反复沉淀3-4次。
本法省时、省力,适用于临床检验。
2、浮聚法利用比重较大的液体,使原虫包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。
(1)饱和盐水浮聚法:此法用以检查钩虫卵效果好,也可用于检查其他线虫卵和微小膜壳绦虫卵。
(2)硫酸锌离心浮聚法:此法适用于检查原虫包囊、球虫卵囊、线虫卵和微小膜壳绦虫卵。
(四)毛蚴孵化法依据血吸虫卵内的毛蚴在适宜温度的清水中,短时间内可孵化出的特征而设计的方法。
(五)肛门拭子法适用于检查肛周产卵的蛲虫或常可在肛门附近发现的带绦虫卵。
1、棉签拭子法2、透明胶纸法用长约6cm,宽约2cm的透明胶纸的胶面,粘贴肛门周围的皮肤,然后将有胶的一面平贴在玻片上,镜检。
总结归纳常用粪便检查虫卵
总结归纳常用粪便检查虫卵粪便检查虫卵是一种常见的医学检查方法,用于诊断人体内是否存在寄生虫感染。
虫卵检查可通过观察和鉴定粪便样本中的虫卵,帮助医生判断寄生虫的种类和感染程度。
本文将总结和归纳一些常用的粪便检查虫卵方法。
一、直接涂片法直接涂片法是最常用的粪便检查方法之一。
具体操作步骤如下:1. 将新鲜的粪便样本取一小块,放在玻璃片上。
2. 用玻璃棒或者玻璃杆将粪便涂开,形成薄片。
3. 将涂有粪便的玻璃片放在显微镜载物片上,用盖玻片盖住。
4. 用显微镜在低倍镜下观察,寻找虫卵的存在。
二、浮选法浮选法是一种常用的虫卵检查方法,适用于一些虫卵较小、密度较轻的情况。
具体操作步骤如下:1. 取适量粪便样本放入容器中。
2. 加入一定量的饱和盐水或者浓热盐水。
3. 用搅拌器充分搅拌均匀,使粪便样本中的虫卵浮到液面上。
4. 将液面吸取一定量到显微镜载玻片上,盖上盖玻片。
5. 用显微镜在低倍镜下观察,寻找虫卵的存在。
三、离心沉淀法离心沉淀法是一种虫卵检查方法,适用于一些虫卵较大、密度较重的情况。
具体操作步骤如下:1. 取适量粪便样本放入离心管中。
2. 加入一定量的浓盐水,并充分搅拌均匀。
3. 离心管放入离心机中,以一定的转速进行离心。
4. 离心后,将上层液体倒掉,只留下底部沉淀的物质。
5. 从沉淀中取一定量到显微镜载玻片上,盖上盖玻片。
6. 用显微镜在低倍镜下观察,寻找虫卵的存在。
四、浸渍法浸渍法是一种虫卵检查方法,适用于一些虫卵比较困难观察的情况。
具体操作步骤如下:1. 取适量粪便样本放入容器中。
2. 加入一定量的浓盐水或者浓硝酸。
3. 充分搅拌均匀,使粪便样本中的虫卵溶解。
4. 用吸管吸取一定量的溶液到显微镜载玻片上,盖上盖玻片。
5. 用显微镜在低倍镜下观察,寻找虫卵的存在。
通过以上总结的常用粪便检查虫卵方法,医生可以准确判断患者是否存在寄生虫感染,并采取相应的治疗手段。
粪便检查虫卵是一项重要的临床检查,能够帮助诊断和治疗相关疾病,提高患者的生活质量。
粪便检查直接涂片法简便易行
1、基本原则( Basic principle )
(3)寄生于体内却在肛周产卵或虫卵在 经过肛门时粘附在肛门周围——采 用肛门拭子法查虫卵。
Enterobius. vermicularis egg
Taenia egg
1、基本原则( Basic principle )
采血 涂片 溶血 染色 镜检
病原学诊断 血液检查
注意事项:
1.玻片的洁净程度对涂制血膜的质量有直接关系, 因此要求严格按规程清洗玻片。 2. 采血时间:疟疾现症病人可随时取血,一般以
寒热发作时或发作后数小时取血为好;夜现周 期型淋巴丝虫感染调查则应在21~2时之间采 血。
病原学诊断 组织活检
Toxoplasma gondii trophozoite Trichinella spiralis cyst
2、注意事项 (Note)
(1)注意蠕虫卵之间和原虫包囊之间的鉴别, 以及蠕虫卵与各种相似物之间的鉴别;
(2)注意各种检查方法的适应对象。
(3)有些寄生虫要注意采集标本的时间及 送检的时间。
一、寄生虫病诊断(Diagnosis of Parasitosis)
(1)询问病史 ( Taking History)
感染史、排虫史及临床症状
(2)体格检查 ( Physical Examination)
皮下包块、皮疹
(3)实验室检查 (Laboratory test)
实验室检查 (Laboratory test)
1.直接涂片法 2.浓集法
•浮聚法
饱和盐水浮聚法 硫酸锌浮聚法
饱和盐水浮聚法
病原学诊断 粪便检查
1.直接涂片法 2.改良加藤氏法 3.浓集法 4.线虫幼虫培养法
常见肠道寄生虫的虫卵鉴定及主要病原学检测--2018.6.5
不宜超过 2 小时;若温度低,空气湿度大,涂
片放置时间可适当延长。总之,涂片放置时间
取决于粪样透明度,只要透明了,就应及时镜
检,否则透明过度,薄壳虫卵易变形看不清楚, 会造成漏检或误判。 • 5 、用椭圆孔塑料定量板,每孔所容粪便重量 平均41.7mg,每片所得虫卵数乘以 24,再乘粪 便系数,即得每克粪便的虫卵数。
蛔虫卵:45~75×35~50μm)
有盖蠕虫卵大小比较
无盖蠕虫卵大小比较
虫卵颜色:无色透明、淡黄色、黄褐色或 棕黄色、褐色、暗褐色、金黄色 虫卵卵壳:厚度、均匀度、纹理、凹陷
• 虫卵附属物:有、无 大小
如:透明栓、小棘、卵盖
虫卵内容物:单卵细胞、多细胞、 一卵
细胞及多个卵黄细胞、 是否细胞分裂
三、虫 卵 图 像
受精蛔虫卵
(直 接 涂 片 中)
(Kato-Katz 厚 涂 片 中)
未受精蛔虫卵和受精蛔虫卵
(直 接 涂 片 中)
( Kato-Katz 厚 涂 片 中)
脱去蛋白膜受精蛔虫卵
与有蛋白膜受精蛔虫卵
脱去蛋白膜受精蛔虫卵 与 未 受精 蛔 虫 卵
正在发育的受精蛔虫卵
感染性蛔虫卵
未受精蛔虫卵
受精蛔虫卵
钩虫卵
(直 接 涂 片中)
变 形 钩 虫 卵
(Kato-Katz 厚 涂 片 中)
鞭虫卵
(直 接 涂 片 中)
(Kato-Katz 厚 涂 片 中)
鞭虫卵
蛲虫卵
(直 接 涂片 中)
( Kato-Katz 厚 涂 片 中) (透 明 胶 带 纸 下)
蛲虫卵
蛲虫卵
肝吸虫卵(华支睾吸虫卵)
阿米巴肠病应该做哪些检查,有什么常见的检查方法?
阿米巴肠病应该做哪些检查,有什么常见的检查方法?阿米巴肠病常见的检查方法直接涂片检查、粪细菌培养、粪便寄生虫、阿米巴原虫抗体、阿米巴原虫抗原阿米巴肠病一般都有哪些检查方法一、病原学检查:1.粪便检查:⑴活滋养体检查法:常用生理盐水直接涂片法检查活动的滋养体。
急性痢疾患者的脓血便或阿米巴炎病人的稀便,要求容器干净,粪样新鲜、送检越快、越好,寒冷季节还要注意运送和检查时的保温。
检查时取一洁净的载玻片,滴加生理盐水1滴,再以竹签沾取少量粪亲,涂在生理盐水中,加盖玻片,然后置于显微镜下检查。
典型的阿米巴痢疾粪便为酱红色粘液样,有特殊的腥臭味。
镜检可见粘液中含较多粘集成团的红细胞和较少的白细胞,有时可见夏科一雷登氏结晶(Charcotmdash;Leyden crystals)和活动的滋养体。
这些特点可与细菌性痢疾的粪便相区别。
⑵包囊检查法:临床上常用碘液涂片法,该法简便易行。
取一洁净的载玻片,滴加碘液1滴,再以竹签沾取少量粪样,在碘液中涂成薄片加盖玻片,然后置于显微镜下检查,鉴别细胞核的特征和数目。
2.阿米巴培养:已有多种改良的人工培养基,常用的如洛克氏液、鸡蛋、血清培养基,营养琼脂血清盐水培养基,琼脂蛋白胨双相培养基等。
但技术操作复杂,需一定设备,且阿米巴人工培养在多数亚急性或慢性病例阳性率不高,似不宜作阿米巴诊断的常规检查。
3.组织检查:通过乙状结肠镜或纤维结肠镜直接观察粘膜溃疡,并作组织活检或刮拭物涂片,检出率最高。
据报道乙状结肠、直肠有病变的病例约占有症状患者的2/3,因此,凡情况允许的可疑患者都应争取作结肠镜检,刮拭物涂片或取活组织检查。
滋养体的取材必须在溃疡的边缘,钳取后以局部稍见出血为宜。
脓腔穿刺液检查除注意性特征外,应取材于脓腔壁部,较易发策滋养体。
二、免疫诊断:近年来国内外陆续报告了多种血清学诊断方法,其中以间接血凝(IHA)、间接荧光抗体(IFAT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)研究较多,但敏感性对各型病例不同。
钩虫加检测方法国标
钩虫加检测方法国标钩虫是一类寄生于人体肠道的寄生虫,主要感染人体小肠。
其常见的感染途径有摄食感染、皮肤穿刺感染和恶性贫血时蚴体经口摄入三种途径。
钩虫感染者常会出现贫血、腹泻、腹痛、食欲不振等症状。
为了早期发现和治疗钩虫感染,保障公共卫生安全,中国对钩虫感染进行了相关的检测方法国标。
一、病原学检测部分:1.粪便检查法:粪便检查法是目前最常用的一种检测钩虫的方法。
具体操作步骤如下:(1)混合沉淀法:取患者新鲜粪便约3-5g,在容器中加入10%饱和食盐水混合搅拌,放置15分钟左右,使虫卵或幼虫下沉到容器底部。
(2)滤纸法:将混合沉淀的粪便挤压到滤纸上,用玻片压实,使粪便与滤纸接触,滤纸上的虫卵或幼虫被粪液浸泡后就能被看到。
对于粪便检查法,国标规定了基本设备、试剂、操作方法、虫卵鉴定和结果报告等方面的详细要求。
2.端部肠镜检查法:端部肠镜检查法是通过将肠镜插入患者的肛门,直接观察小肠黏膜上的钩虫成虫进行检测。
该方法可以更直观地观察、鉴定钩虫成虫,但需要专业技术人员进行操作,设备要求较高。
二、免疫学检测部分:1.血清学检测法:血清学检测可通过检测寄主血清中的特异性抗体来判断是否感染钩虫。
国标要求采用酶联免疫吸附试验(ELISA)或免疫荧光分析法(IFA)进行血清学检测。
该方法对早期感染具有很高的敏感性和特异性。
2.基因检测法:基因检测法是近年来出现的一种新型检测方法,通过检测患者粪便中的钩虫基因来判断钩虫感染情况。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和高度自动化的特点,但设备要求较高,使用普及度较低。
无论是病原学检测还是免疫学检测,国标都对设备要求、操作方法、质量控制、结果判定和报告等方面进行了详细规定,保障了钩虫检测的准确性和标准化。
该国标的实施可以提高钩虫感染的诊断水平,为早期发现和治疗钩虫感染提供科学依据,并对公共卫生工作具有重要意义。
同时,随着技术的不断进步,相信将来会有更加高效、便捷、准确的检测方法出现,进一步提高钩虫感染的检测水平。
寄生虫实验诊断方法
寄生虫感染的诊断1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI 2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥; 3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。
待粪膜稍干,即可镜检。
玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。
寄生虫病原学诊断方法
1. 鲜血压滴标本检查 2. 涂片染色标本检查 3. 虫体浓集法
➢涂片法虽然可以查到血液中的原虫,但血液中的 虫体较少时,则不易查出虫体。为此常先进行集虫, 再制片检查。其操作过程是采病畜抗凝血6-7毫升, 以每分钟500转的速度离心5分钟,使其中大部分红 细胞沉降。
而后将含有少量红细胞,白细胞和虫体的上层血浆移 入另一离心管中,补加一些生理盐水,以每分钟2500 转的速度离心10分钟。取沉淀物制成抹片,按上述染 色法染色检查。此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病。
局部剪毛,消毒,以10毫升注射器和较粗的针头刺 入淋巴结,抽取淋巴组织;拔出针头,将针头内容 物推挤到载玻片上,涂成抹片,固定,染色,镜检, 可以找到柯赫氏蓝体。
➢家畜患弓形虫病时,除死后可在一些组织中找到 包囊和速殖子外,生前诊断可取腹水,检查其中滋 养体的存在。收集腹水,猪只可采取侧卧保定,穿 刺部在白线下侧脐的后方(公畜)或前方(母畜) 1-2厘米处。
➢常用的方法为 漏斗幼虫分离法 亦称贝尔曼法 (Baermann's technique)
7. 测微技术 ➢各种虫卵和幼虫,大小通常较为恒定。虫卵或幼虫的 大小可作为确定某一虫卵或幼虫的依据。虫卵和幼虫 的测量需用测微器。
长1mm的直 线等分为100 小格,每小格 等于10 μm
10倍物镜,标定后 每小格是多少?
4. 组织内虫体检查法 ➢有些原虫可以在动物身体的不同组织内寄生。一 般在死后剖检时,取一小块组织,以其切面在载玻 片上做成抹片、触片,或将小块组织固定后制成组 织切片,染色检查。抹片或触片可用瑞氏染色法或 姬氏染液染色。
➢泰勒虫感染的病畜常呈现局部体 表淋巴结肿大。取淋巴结穿刺物, 进行显微镜检查以寻找病原体,对 本病的早期诊断很有帮助。其方法 是,首先将病畜保定,用右手将肿 大的淋巴结稍向上方推移,并用左 手固定淋巴结。
蛔虫病的临床表现、检查、治疗和预防
蛔虫病的临床表现、检查、治疗和预防一、概述:建议就诊于传染病科。
蛔虫病是由似蚓蛔线虫(简称人蛔虫或蛔虫)引起的寄生虫病。
是人体最常见的肠道寄生虫病之一。
二、临床表现:(一)腹痛:蛔虫寄生于肠道或胆道,造成机械性梗阻,常引起剧烈的阵发性腹部绞痛,以脐周为甚。
(二)发热:幼虫在肺部发育,引起蛔虫性肺炎或蛔虫性哮喘,常有咳嗽,发热,严重者有高热,寒战,咯血等症状。
(三)食欲不振、消瘦:成虫寄生于肠道,影响人体对于营养的吸收,患儿常常有营养不良,消瘦,贫血等症状。
(四)荨麻疹、皮肤瘙痒;(五)重者可有频繁呕吐、胸痛、呼吸困难、紫绀。
三、检查:1、病原学检查:粪便涂片法或盐水浮聚法可较容易查到虫卵。
近年来常用改良加藤法。
该法虫卵检出率较高。
2、B超和逆行胰胆管造影:有助于异位蛔虫症的诊断。
3、血常规:幼虫移行时引起的异味蛔虫症及并发感染时血液白细胞与嗜酸性粒细胞增多。
4、X线检查:幼虫致病期部分病人肺部X线检查可见浸润性病变,病灶常有游走现象。
四、治疗:(一)驱虫治疗:目前常用的驱虫药为阿苯达唑、甲苯达唑和伊维菌素。
驱虫时间宜选在感染高峰之后的秋冬季节,学龄儿童可采用集体服药。
由于存在再感染的可能性,感染程度高的地区最好每隔3~6个月驱虫一次。
对有并发症的患者,应及时送医院治疗。
(二)饮食治疗:驱虫后一般不需要忌口,可吃一些富有营养的食物,如鸡蛋、豆腐、鱼、新鲜蔬菜和水果等,有贫血现象,驱虫后还应适当多吃一些动物肝脏和瘦肉等补充营养。
(三)手术治疗:有时蛔虫性肠梗阻可发展成绞窄性肠梗阻、肠扭转或套叠,必须及时手术治疗。
蛔虫也可穿过肠壁,引起肠穿孔及腹膜炎,若不及时手术即可死亡。
五、预防:1、加强宣传教育,普及卫生知识,注意饮食卫生和个人卫生,做到饭前、便后洗手,不生食未洗净的蔬菜及瓜果,不饮生水,防止食入蛔虫卵,减少感染机会。
2、使用无害化人粪做肥料,防止粪便污染环境是切断蛔虫传播途径的重要措施。
粪 便 检 验
为了减少粪便隐血试验的假阳性和假阴性,
一般采用中度灵敏度的方法;但可联合使用 灵敏度高和灵敏度低的2种方法。邻联甲苯胺 法为1983年中华医学会全国临床检验方法学 学术会推荐的方法。试带法虽然使用方便, 但试带不稳定、特异性较低。 (2)干扰因素:FOBT化学法的干扰因 素与评价见表6-5。
2.红细胞
粪便中红细胞呈草绿色、略有 折光性的圆盘状,有时可因粪便pH影响,而 呈皱缩状。 健康人粪便无红细胞。粪便 中红细胞变化见表6-6-4。
3.上皮细胞
粪便中的上皮细胞为肠黏膜 上皮细胞。除直肠段被覆复层鳞状上皮细胞 外,整个小肠、大肠黏膜上皮细胞均为柱状 上皮细胞;细胞呈卵圆形或短柱状,两端钝 圆,细胞较厚,结构模糊,夹杂于白细胞之 间。 健康人粪便中很少见到柱状上皮细胞 (少量脱落柱状上皮细胞已破坏)。柱状上 皮细胞增多见于结肠炎症、伪膜性肠炎。
图6-2 寄生虫虫卵-2 A鞭虫卵 B肺吸虫卵 C肝吸虫 卵 D钩虫卵
图6-3 寄生虫虫卵-3 A姜片虫卵 B血吸虫卵
受精蛔虫卵: 短椭圆形,棕黄色,卵壳 厚,壳外常有一层波浪形 的蛋白质膜,内含有一大 而圆的卵细胞。
未受精蛔虫卵: 较狭长,长椭圆形,棕黄色,卵壳 与蛋白膜较较薄,卵内含许多大小 不等,具有折光性的物质。
(二)食物残渣和结晶
1.食物残渣类 (1)脂肪:苏丹Ⅲ染色后,粪便中脂 肪可分为中性脂肪、游离脂肪酸和结合脂肪 酸3种(表6-7)。
(2)淀粉颗粒:外形为圆形、椭圆形或多角形颗 粒,大小不等,在盐水涂片中一般可见同心形的折 光条纹,无色,具有一定折光性,滴加碘液后呈黑 蓝色,若部分水解为糊精者则呈棕红色。 (3)肌纤维:为淡黄色条状、片状、有纤细 的横纹,如加入伊红可染成红色。 (4)植物细胞及植物纤维:呈螺旋小管或蜂 窝状,可见形态繁多的植物细胞。呈圆形、长圆形、 多角形,双层细胞壁,细胞内有叶绿素小体,需注 意与寄生虫虫卵鉴别。
粪便检查
北京大学基础医学院06级基础班刘惠蛟90605106
粪便检查
【实验目的】
检查消化道寄生虫有很多方法,通过实验,掌握对不同的寄生虫病采用相应的病原学检查方法,并在需要的时候才用两种或者多种方法联合使用。
【材料与方法】
材料:待检粪便,载玻片,盖玻片,显微镜,生理盐水,木棒。
方法:生理盐水直接涂片法。
1 取洁净载玻片一张,在中央滴1滴生理盐水。
2 用木棒挑取小许粪便,在生理盐水上涂成粪膜,粪膜厚度为透过粪膜刚好能看到底
下报纸的字迹。
加盖玻片,注意避免空气小泡。
3 镜检,先低倍镜观察,确认可能存在的虫卵,为了进一步确认,需要时可以再高倍镜
下观察。
【结果】
显微镜中观察到的虫卵形态如下:卵壳较厚,整体颜色为棕褐色,卵壳包裹物与卵壳之间有半月形间隙。
推断为蛔虫虫卵。
【讨论】
镜下观察,发现虫卵数目较少,这可能与涂片的厚度不够,另外几乎所有的虫卵均未发现波浪状的蛋白质膜,可能的原因有:一是虫卵在与粪便混合中波浪状的蛋白质脱落,二是显微镜光源太强以至于看不清楚其结构。
由于镜下观察到的虫卵数目较少,所以该方法有可能漏检其他群在的寄生虫卵,并且由于数目少,未能观察到典型的受精蛔虫卵。
可以用浓集法检查,此种方法课浓集粪便中的虫卵,提高检出率。
各操作方法的优缺点如下:。
肠道寄生虫粪便的病原学检查方法
肠道寄生虫粪便的病原学检查方法潘严;姜子睿;周超;李彩云【摘要】In the experimental animal pathogen detection,the parasite detection is one of the important branches,and it is also an indispensable aspect of the quality of experimental animals.Parasitic invasion of the host can produce a variety of harmful effects in the host body including the seizure of nutrients,mechanical damage,secondary infection,toxic effects,seriously affect the experimental animal health and reduce the quality of experimental animals. Many parasites in eggs and oocysts,or host larvae with the faeces excreted through feces,which can determine whether the parasite examination,parasite infection and infection type and degree.Etiological examination is an important diagnostic technique of parasite egg and adult feces collection,do stool examination is the diagnosis of digestive tract have no experimental animal parasitic infections more commonly used methods.There are many kinds of pathogenic methods in laboratory animal feces examination.This article lists and describes some of the more commonly used methods of qualitative and quantitative examination of fecal parasites,aimed at improving the technical level of fecal parasite pathogens.%在实验动物病原检测中,寄生虫检测是其中重要的分支,也是体现实验动物质量不可或缺的一个方面。
肠道寄生虫粪便的病原学检查方法
肠道寄生虫粪便的病原学检查方法作者:潘严姜子睿周超李彩云来源:《中国医药科学》2016年第20期[摘要] 在实验动物病原检测中,寄生虫检测是其中重要的分支,也是体现实验动物质量不可或缺的一个方面。
寄生虫侵入宿主可在宿主体内产生多种有害作用包括夺取营养,机械性损伤,继发感染,毒性作用等,严重影响实验动物健康并降低实验动物的质量。
许多寄生虫生活史中虫卵、卵囊、或幼虫随宿主的粪便排出体外,这些都可以通过粪便寄生虫检查,确定是否感染寄生虫以及感染的种类和程度。
病原学检查是诊断寄生虫成虫及虫卵的重要的实验技术,采集粪便做粪便检查又是诊断实验动物消化道有无寄生虫感染比较常用的手段。
实验动物粪检的病原学方法有多种。
本文列举并介绍了一些目前比较常用的粪便寄生虫定性和定量的检查方法,旨在提高粪便寄生虫病原学检查的技术水平。
[关键词] 肠道寄生虫;粪便;病原学检查方法;实验动物质量[中图分类号] R446 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616(2016)20-213-05Pathogenic examination methods of Intestinal parasite stoolPAN Yan JIANG Zirui ZHOU Chao LI CaiyunShanghai Yinuosi Biological Technology Co.Ltd.,National Shanghai New Drug Safety Evaluation Research Center,Shanghai 201203,China[Abstract] In the experimental animal pathogen detection,the parasite detection is one of the important branches,and it is also an indispensable aspect of the quality of experimental animals.Parasitic invasion of the host can produce a variety of harmful effects in the host body including the seizure of nutrients,mechanical damage,secondary infection,toxic effects,seriously affect the experimental animal health and reduce the quality of experimental animals.Many parasites in eggs and oocysts,or host larvae with the faeces excreted through feces,which can determine whether the parasite examination,parasite infection and infection type anddegree.Etiological examination is an important diagnostic technique of parasite egg and adult feces collection,do stool examination is the diagnosis of digestive tract have no experimental animal parasitic infections more commonly used methods.There are many kinds of pathogenic methods in laboratory animal feces examination.This article lists and describes some of the more commonly used methods of qualitative and quantitative examination of fecal parasites,aimed at improving the technical level of fecal parasite pathogens.[Key words] Intestinal parasites;Stools;Pathogenic examination method;Laboratory animal quality根据现行的2001版中国国家标准实验动物寄生虫学检测方法,不同种属动物体内体外寄生虫有其适用的检测方法,这些方法是经过很多检测人员反复实践得出的结论。
(2019培训用)常见肠道寄生虫的虫卵鉴定及主要病原学检测
血吸虫卵
姜片虫卵
(直 接 涂 片 中)
Kato-Katz 厚 涂 片 中)
肝片吸虫卵
曼氏迭宫绦虫卵
长膜壳绦虫卵
短膜壳绦虫卵
长、短 膜 壳 绦 虫 卵
带绦虫卵
带绦虫卵
长膜壳绦虫卵
镜下易混淆的几种虫卵
未 受 精 蛔 虫 卵
曼 氏 迭 宫 绦 虫 卵
肺 吸 虫 卵
血
吸
蛲
虫
虫
卵
卵
易误认为虫卵的物质
• 7、结果登记:要将镜检结果即时记录在原始登 记表上,在记录每克粪便虫卵数时要将观察到 的数乘以24,再乘以粪便系数(成形便1、半成 形便1.5、软便2、粥样便3、水泻便4)。
注意事项: • 1、亲水性透明玻璃纸在使用前需全部浸入透
明液中,浸泡24小时以上。 • 2、把刮片上的细粪渣填入定量板时,必须填
二、寄生虫卵 形态特征
• 常用术语
• 虫卵形态特点 虫卵的形状 圆形:长膜壳绦虫卵、带绦虫卵 椭圆形:蛔虫卵、钩虫卵、姜片虫卵、片形 吸虫卵 纺锤形:鞭虫卵、曼氏迭宫绦虫卵(或椭圆) 梨形:肝吸虫卵 不对称形:肺吸虫卵、蛲虫卵
虫卵的形状
虫卵的大小 蠕虫卵大小相差很大,大小悬殊19μm~240μm。 受精蛔虫卵:45~75×35~50μm 同种蠕虫卵大小也有差异 大型虫卵>100um:姜片虫、片形吸虫、血吸 虫(曼氏、埃及)、部分棘口吸虫 中型虫卵50-100um:线虫卵、日本血吸虫、 并殖吸虫、长膜壳绦虫、曼氏迭宫绦虫 小型虫卵<50um :华支睾吸虫、后睾吸虫、 异形吸虫、带绦虫、短膜壳绦虫
虫卵的附属物 卵盖:有:吸虫(除血吸虫)、假叶目 绦虫(曼绦、阔绦);
无:线虫、血吸虫、圆叶目绦虫 (带、长、短) 透明栓:鞭、毛圆 波浪形蛋白质膜:蛔(未脱膜) 小棘:肝、血、阔节
肠道寄生虫粪便病原学检查
肠道寄生虫粪便病原学检查肠道寄生虫有不同的发育阶段,当其发育到一定阶段后就可以在粪便中被检测出来,例如:蠕虫的虫卵、幼虫、成虫和节片,原虫的滋养体、包囊、卵囊或孢子囊还有一些节肢动物的成虫或幼虫,这是临床上最常见的寄生虫检查方式,下面我们来了解一下肠道寄生虫粪便病原学的检查手段。
一、粪便标本采集的注意事项首先,取样时应以含脓、血、黏液的部分为重点,尽量做到多部位取材,样本取材量应为5—10g,但若做自然沉淀或血吸虫毛蚴孵化检查法,取样量则需达到30g以上。
另外,蠕虫成虫及绦虫节片的检查则要留存患者24小时内的粪便样本。
其次,保存粪便样本的容器必须清洁、干燥,取样后要进行密封保存,以免受到水、尿液、粉尘、药物或泥土的干扰,容器以硬纸盒为最佳,并在容器外贴好标签,用以识别。
最后,粪便样本要在采集后的24小时之内送检,送检后的半小时内完成检查,或可在35—37摄氏度的条件下进行保存,以确保检测到新鲜的粪便样本,尤其是在检查运动的滋养体时,例如:阿米巴、鞭毛虫、纤毛虫。
二、肠道寄生虫的粪便病原学检查方式第一,直接涂片法。
此法操作简便,检出率高,常用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体以及卵囊。
可分为生理盐水直接涂片法和直接涂片染色法。
生理盐水直接涂片法,是指滴适量生理盐水在载玻片的中央,然后使用竹签取米粒大小粪便样本与其充分混合,而后继续用竹签将混合物涂成膜,制成涂片后再置于显微镜下观察,重复此操作三次,分别进行观察,以提升检出率。
直接涂片染色法一般使用碘液进行染色,只需将生理盐水直接涂片法中的生理盐水换成碘液即可,同样需重复涂片观察三次。
第二,浮聚法。
当原虫的包囊或虫卵处于比自身比重更大的溶液中时就会出现上浮并集中于液体表面现象。
可分为饱和盐水浮聚法、硫酸锌离心浮聚法、蔗糖离心浮聚法以及氯化锌溶液浮聚法。
饱和盐水浮聚法,此法多应用于检查钩虫卵,这是因为饱和盐水的比重为1.17-1.19,而钩虫卵的比重为1.085-1.09。
寄生虫实验诊断方法
1临床诊断:A病史、症状、体征 B物理诊断:X线、B超、CT、MRI2实验室检查:A病原学方法:粪便检查;血液检查;排泄物分泌物检查;其他器官组织检查B免疫学方法 C分子生物学方法(一)粪便检查:直接涂片法;厚涂片法;浓集法;毛蚴孵化法;肛门拭子检查法;钩蚴培养法;虫卵计数法;定量透明法;带绦虫孕节检查法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的方法。
要取得准确的结果1)粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时; 2)盛粪便的容器要干净,并防止污染与干燥;3)粪便不可混杂尿液等,以免影响检查结果; 4)取材部位:尽可能取病变部位。
直接涂片法:用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,适用范围广,但检出率相对较低。
一般要求连续作3次涂片,可提高检出率。
⑴蠕虫卵检查:方法:一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中异物的鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
⑵原虫检查:1)活滋养体检查:方法同查蠕虫卵。
注意事项。
2)包囊的碘液染色检查:方法同上,以一滴碘液代替生理盐水。
若同时需检查活滋养体,可在用生理盐水涂匀的粪滴附近滴一滴碘液,再盖上盖片。
涂片染色的一半查包囊;末染色的一半查活滋养体。
3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前较佳的方法为金胺酚改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存的含卵囊粪便都可用此法染色。
染色过程是先用金胺-酚染色,再用改良抗酸染色法复染。
厚涂片透明法(改良加藤法)取约5mg粪便,置于载玻片上,覆以浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片,轻压,使粪便铺开(20×25mm)。
待粪膜稍干,即可镜检。
玻璃纸准备:将玻璃纸浸于甘油-孔雀绿溶液中,至少浸泡24小时,至玻璃纸呈现绿色。
使用此法需掌握粪膜的合适厚度和透明的时间。
如粪膜厚,透明时间短,虫卵难以发现;如透明时间过长,则虫卵变形,也不易辨认。
沉淀法:原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。
寄生虫检查的直接涂片法
寄生虫检查的直接涂片法寄生虫检查的直接涂片法介绍:寄生虫检查的直接涂片法是一项用于检查寄生虫的辅助检查方法。
粪便检查是诊断寄生虫病常用的病原学检测方法。
用以检查蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
方法简便,连续作3次涂片,可以提高检出率。
此相检查可以用于判断相应的病征。
寄生虫检查的直接涂片法正常值:送检的图片中未发现蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
寄生虫检查的直接涂片法临床意义:异常结果:发现蠕虫卵、原虫的包囊和滋养体。
需要检查的人群:消化道异常者。
寄生虫检查的直接涂片法注意事项:不合宜人群:一般无不适合人群。
检查前禁忌:检查前不要吃抗寄生虫的药物,以免影响结果。
检查时要求:。
要取得准确的结果,粪便必须新鲜,送检时间一般不宜超过24小时。
如检查肠内原虫滋养体,最好立即检查,或暂时保存在35°C~37°C条件下待查。
盛粪便的容器须洁净、干燥,并防止污染;粪便不可混入尿液及其它体液等,以免影响检查结果。
寄生虫检查的直接涂片法检查过程:1.蠕虫卵检查滴一滴生理盐水于洁净的载玻片上,用棉签棍或牙签挑取绿豆大小的粪便块,在生理盐水中涂抹均匀;涂片的厚度以透过玻片隐约可辨认书上的字迹为宜。
一般在低倍镜下检查,如用高倍镜观察,需加盖片。
应注意虫卵与粪便中的异物鉴别。
虫卵都具有一定形状和大小;卵壳表面光滑整齐,具固有的色泽;卵内含卵细胞或幼虫。
2.原虫检查 (1) 活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。
气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。
必要时可用保温台保持温度。
(2)包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理盐水,粪便涂抹方法同上。
若同时需检查活滋养体,可在玻片另一侧滴一滴生理盐水。
同上法涂抹粪便标本,再盖上盖片。
片中滴碘液的一侧查包囊;另一侧查活滋养体。
(3)隐孢子虫卵囊染色检查:目前最佳的方法为金安-酚改良抗酸染色法。
其次为金胺酚染色法和改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存(4℃1个月内)的含卵囊粪便都可用这三种方法染色。
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定性和定量 的检查方法 , 旨在提高粪便寄生虫病原学检查的技术水平。
[ 关键词 】 肠道寄生虫; 粪便 ; 病原 学检查方法; 实验动物质量
[ 中图分 类 号 】 R 4 4 6 [ 文 献标 识码 】 B 【 文章 编 号 】 2 0 9 5 — 0 6 1 6( 2 0 1 6) 2 0 — 2 1 3 — 0 5
i t i s a l s o a n i n d i s p e n s a b l e a s p e c t o f t h e q u a l i t y o f e x p e r i me n t a l a n i ma l s . Pa r a s i t i c i n v a s i o n o f t h e h o s t c a n p r o d u c e
i n f e c t i o n , t o x i c e f f e c t s , s e r i o u s l y a f f e c t t h e e x p e r i me n t a l a n i ma l h e a l t h a n d r e d u c e t h e q u a l i t y o f e x p e r i me n t a l a n i ma l s . Ma n y p a r a s i t e s i n e g g s a n d o o c y s t s , o r h o s t l a r v a e wi t h t h e f a e c e s e x c r e t e d t h r o u g h f e c e s , wh i c h c a n d e t e r mi n e wh e t h e r
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十 目 医 药 辱 牛 予2 0 1 6 年 1 0 月 第 6 卷 第 2 0 期
・ 工作探讨 ・
肠道寄 生虫粪便 的病原学检 查 方云 上海益诺思生物技术有限公司 国家上海新药安全评价研究中心, 上海 2 0 1 2 0 3
【 摘要 】 在实验动物病原检测中 , 寄生虫检测是其中重要的分支 , 也是体现实验动物质量不可或缺的一个方 面。寄生虫侵 入宿主可在宿主体 内产生多种有 害作用包括夺 取营养, 机械性损伤 , 继发感染, 毒性作用等 , 严重影响实验动物健康并降低实验动物 的质量。许多寄生虫生活史中虫卵 、 卵囊 、 或幼虫随宿主的粪便排 出体外 , 这些 都可以通过粪便 寄生虫检查 , 确定 是否感染寄生虫以及感染的种类 和程度 。病原学检查是诊 断寄生虫成虫及虫卵的重要 的实验技术 , 采集粪便做粪便检查 又是诊断实验动物消化道有无寄生虫感染 比 较常用 的手段 。实验动物粪检 的病原学方法有多种。本文列举并介绍了一些 目前 比较常用 的粪便寄生虫
Pa t ho g e ni c e xa mi na t i o n me t h o d s o f I n t e s t i na l pa r a s i t e s t o o l
P A N Y a h J l ANG Z i r m Z HoU C ha o l J I Ca i yu n S h a n g h a i Yi n uo s i Bi o l o g i c a l Te c h n o l o g y Co . L t d. , Na t i o n a l S ha ng ha i Ne w Dr u g Sa f e t y Ev a l u a t i o n Re s e a r c h