蔬菜农药残留检测作业指导书
蔬菜农药残留速测操作规程
蔬菜农药残留速测操作规程一、实验器材和试剂准备1.酶抑制率检测试剂盒：包括试剂盒、标准品、储存液等。
2.离心管、小磨牙棒、移液枪等实验器材。
3.待检样品：新鲜蔬菜样品。
二、样品处理1.取新鲜蔬菜样品，去除外皮、叶片等不需要的部分，只保留主要部分，务必保持新鲜度。
2.将样品切碎，使用小磨牙棒研磨成细碎的样品提取物。
3.将提取物加入适量的提取液中，使用移液枪混合均匀。
4.离心提取液，收集上清液备用。
三、样品检测1.打开试剂盒，取出标准品和样品孔板。
将标准品和样品分别加入对应的孔中。
2.利用孔板盖密封，轻轻摇晃使标准品和样品充分混合。
3.将孔板放入试剂盒中，开始计时。
4.在规定时间内（通常为30分钟），观察偶氮酚比色液的变化情况，记录下标准品和样品孔的颜色。
四、数据处理1.分别计算标准品孔和样品孔的OD值。
2.根据标准品孔和样品孔的OD值，计算出酶抑制率(%)，公式为：(1-样品孔OD值/标准品孔OD值)×100%。
3.将酶抑制率与标准曲线进行对照，确定蔬菜样品中农药残留的浓度。
五、结果分析1.根据样品中农药残留浓度的分析结果，判断样品的安全性。
2.若样品中的农药残留浓度超过安全标准，则该样品被认定为不合格。
3.若样品中的农药残留浓度在安全标准范围内，则该样品被认定为合格。
六、注意事项1.操作过程中，避免任何可能的污染，如手套、实验器材等。
2.严格按照操作规程进行操作，避免误操作导致结果不准确。
3.注意实验室安全，避免化学品接触皮肤、吸入或误食。
4.样品的收集和处理应当迅速进行，避免样品变质导致结果不准确。
以上是蔬菜农药残留速测(酶抑制率法)的操作规程，通过这种方法可以快速检测蔬菜中农药残留的情况，确保蔬菜的安全性。
在进行实验操作时需要注意安全和准确性，以保证检测结果的可靠性。
农药残留物分析作业指导书
目录林泉-03-NC01蔬菜和水果中有机磷类农药残留的测定 (1)林泉-03-NC02蔬菜和水果中有机氯类农药残留的测定 (3)林泉-03-NC03蔬菜和水果中有机氯类、拟除虫菊酯类多残留的测定 (6)林泉-03-NC04蔬菜和水果中吡虫啉的测定 (9)林泉-03-NC05蔬菜和水果中异菌脲的测定 (11)林泉-03-NC06蔬菜和水果中除虫脲的测定 (13)林泉-03-NC07蔬菜和水果中多菌灵的测定 (15)林泉-03-NC01蔬菜和水果中有机磷类农药残留的测定一、项目:敌百虫、敌敌畏、久效磷、乐果、对硫磷二、方法：气相色谱法NY/T761-2008三、本方法的检出限依次为：0.06mg/kg、0.01mg/kg、0.03mg/kg、0.02mg/kg、0.02mg/kg。
四、方法原理：试样中有机磷农药经乙腈提取，提取溶液经过滤浓缩后，用丙酮定容，双自动进样器同时注入气相色谱仪的两个进样口，农药组分经不同极性的两根毛细管柱分离，火焰光度检测器（FPD）检测。
用双柱的保留时间定性，外标法定量。
五、试剂与材料1、乙腈、丙酮2、氯化钠：140℃烘烤4h。
3、滤膜，0.2um，有机溶剂膜。
4、铝箔六、仪器设备1、气相色谱仪（FPD）2、食品加工器、漩涡混合器、匀浆机、氮吹仪七、标准溶液：购买标准溶液，贮存在-18℃的冰箱。
八、色谱参考条件1、色谱柱：100％聚甲基硅氧烷（DB-1或HP-1）柱，30m×0.53mm×1.50um,或相当者。
2、温度：进样器：220℃检测器：250℃柱温:150℃(保持2min),以8℃/min速率，至250℃（保持12min)。
3、气体及流量载气：氮气，纯度≥99.999％，流速为10mL/min。
燃气：氢气，纯度≥99.999％，流速为75mL/min。
助燃气：空气，流速为100mL/min。
九、分析步骤1、试样制备按GB/T8855抽取蔬菜、水果样品，取可食部分，经缩分后，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样。
蔬菜、水果农药残留快速检测操作指南
附1：扬州市蔬菜、水果农药残留快速检测操作指南（试行2011）本指南仅适用于蔬菜、水果有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测。
一、抽样及预处理1、抽样同一批次同一品种随机抽取适量样品作为检样，其中叶菜类取不同植株叶片（至少8片～10片叶子）为样本，瓜果类、根类、茎类从表皮至果肉1厘米～1.5厘米处取样。
一份检验，一份备查。
2、预处理（1）、检样应做好标记，并及时记录；（2）、取待检样，擦净表面泥土，切或剪成1厘米左右碎片。
二、检测方法——丁酰胆碱酯酶抑制率法或乙酰胆碱酯酶抑制率法1、试剂、器具及仪器- 1 -（1）缓冲液、显色剂、底物、丁酰胆碱酯酶等试剂按说明书的要求进行配置和贮存。
（2）样品杯、试管、滴管、洗瓶、移液枪或移液管、不锈钢剪刀、比色皿、擦镜纸。
（3）农药残留快速检测仪。
（4）天平或台秤（精确度0.1g）。
（5）冰箱。
（6）恒温装置按仪器使用说明书要求配备。
2、仪器性能（1）稳定性：仪器预热10分钟后，数字显示值漂移在3分钟内不超过0.04(V)。
（2）透射比准确度:±1.0%。
（3）工作环境温度:5～40℃。
（4）测定精度：≤5%。
（5）检测通道：8通道。
（6）测量范围：0.00%～100.00%（抑制率）。
（7）检出下限：0.1～3.0mg/kg。
（8）检测时间：30分钟以内（含前处理）。
- 2 -3、操作步骤（1）开机后设置或检查仪器工作（显色反应时间3分钟），并校准预热仪器。
（2）称取处理好的2g（非叶菜类称取4g）样品放入样品杯中，加入20mL缓冲液，振荡1 ~2分钟进行提取，静置3 ~5分钟后取出上清液待用。
（3）空白对照：在小试管内加入50uL酶液、3mL缓冲液、50uL显色剂，于37~38℃下放置30分钟后再加入50uL底物，立即倒入比色皿中上机测试。
（4）样品测试：在小试管内加入50uL酶液、3mL样品提取液、50uL显色剂，于37~38℃下放置30分钟后加入50uL底物，立即倒入比色皿中上机测试。
农残检测步骤范文
农残检测步骤范文
一、样品准备：
1.根据检测需要，选择适当的农产品样品，包括蔬菜、水果、畜禽肉、饲料等。
2.采集样品时应注意避开农药施用期和施用后恢复期，并采集充分混
合的样品。
4.根据检测要求，将样品进行标样，便于后续的处理和比对。
二、提取：
1.将样品进行均质处理，将样品分配成若干平行样品。
2.根据农残的属性，选择合适的提取溶剂，如甲醇、乙酸乙酯等，然
后将样品和溶剂进行混合，使农残充分溶解。
3.对于固体样品，可以采用溶解、萃取、提取等方法，如超声波法、
浸提法等。
4.进行离心，使样品与溶液分离。
5.将提取液转移到适合进行下一步处理的容器中。
三、纯化：
1.针对提取液中的杂质，可以通过沉淀、萃取、净化等方法进行纯化。
2.常用的纯化方法包括固相萃取、液相色谱、凝胶柱层析等。
3.使用纯化后的样品溶液进行检测，以提高结果的准确性。
四、检测：
1.根据农残的不同特性和检测要求，选择适当的检测方法，如气相色
谱-质谱联用技术、高效液相色谱法、酶联免疫吸附检测等。
2.根据方法的要求，进行仪器的预热和校准。
3.将纯化后的样品进行注射或添加进仪器中进行检测。
4.通过仪器进行分析和测量，获取样品中农残的含量。
五、结果分析：
1.根据检测结果，计算出样品中农残的含量。
2.比对检测结果与相应的国家、地区农残限量标准，判断样品是否符
合安全标准。
3.对于超过安全标准的样品，可以采取相应的措施，如停售、退货、
召回等。
4.对于符合安全标准的样品，可以生成相应的检测报告，并公示结果。
农残检测作业指导
安徽李府酒店管理农残检测作业指导书1.目的原辅材料农残检测是用来保护产品的，对农残检测的洗涤是为了达到安全卫生的要求，以免对产品造成污染危害。
2.职责2.1营运部和店长负责贯彻该作业指导书2.2营运部质检员负责农残检测的实施2.3门店负责人负责农残检测工具的保管2.4营运总监负责该作业指导书的监督检查。
3.适用范围本公司采购的原辅材料4.内容4.1农药残留快速测定（果蔬类）目前所使用的农药按其化学结构大致可分为：有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类等。
在我国农药中，70﹪为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70﹪为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
根据以上情况，制定出有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测方法，使其不受时间、地点、场合等条件限制，甚至普通消费者也能够操作使用，有利于及时发现问题、采取措施，控制高残留农药蔬菜的摄入，降低中毒发生率，保障消费者食菜安全。
农残快速测定可采用快速卡法和酶抑制率法—分光光度法两种，为定性兼半定量。
主要用于蔬菜中有机磷和氨基酸酯类农药残留的快速定性，还适用于食物中毒物质的快速筛选。
目前常见的有农药速测卡、农残速测试剂、高灵敏度农药速测卡等用于蔬菜、瓜果中有机磷和氨基酸酯类农药残留的快速检测。
4.2、农药残留速测卡（1）原理胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸与靛酚（蓝色），有机磷或氨基酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
（2）操作时注意事项植物次生物质，如：葱、蒜、箩卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。
处理这类样品时，不要剪得太碎，同样可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。
当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3min时可以变蓝，即可往下操作。
农产品中农药残留检测能力验证作业指导书
农产品中农药残留检测能力验证作业指导书各检测机构：为规范能力验证的工作程序，保证能力验证结果的科学性、合理性和可比性，特作如下几点说明：1、考核样品本次农药残留检测能力验证计划共有4份苹果样品，每份样品均为25.0 g，采用旋盖样品瓶包装。
其中一份为空白样品，另外三份为加标样品。
本次能力验证工作仍采用添加回收方式，试验过程中不得分取样品进行测试。
本次能力验证考核样品由顺丰速运于7月15日统一寄出，各实验室在收到样品时，应对样品状态和样品编号进行确认，在24小时内填写接收确认表并扫描上传至填报系统，逾期不报视为样品状态正常。
如发现包装破损或有泄漏等情况，应立即与能力验证技术支持单位联系。
样品已通过整体稳定性测定，冷冻样品融化不影响检测结果，无需与技术支持单位联系。
2、检测方法本次能力验证活动推荐但不限于下列方法：NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定；GB 23200.8-2016食品安全国家标准水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法；GB 23200.113-2018 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法，如实验室采用非标方法，请在结果报告单中标注说明。
3、标准溶液说明本次能力验证不提供标准溶液，自行进行购置。
4、检测结果报送说明（1）结果格式：检测结果等相关信息填写结果报告单中，测试结果以mg/kg 为单位上报，样品质量以25.0 g计算，结果保留三位有效数字；每份样品3个平行，取平均值，并给出相应的相对标准偏差。
（2）报送要求：各参加机构请在收到样品后96小时内完成检测和结果上报工作。
如未按规定时间完成报送，不计入结果统计。
a.在线提交：按要求填写结果，加盖单位公章，在规定时间内扫描后在线提交。
b.纸质版：随后将检测结果原件及原始记录、图谱等一并寄送技术支持单位，以便进行结果分析；5、结果判定说明所选考核参数回收率在70%~130%范围内的判定为合格，超出上述范围或存在定性错误的判定为不合格。
水果蔬菜中农药残留检测技术
2.有机磷农残检测气相色谱条件： 色谱柱:色谱柱温度:40℃(保持 2 min),100℃/min升至265℃（保持6.5min） 检测器温度: 260℃;进样口温度 250℃;载 气: 99.999%高纯氮气;吹扫流量0.5ml/min; 进样量1ul；定量方法：峰面积外标法定量。
谢谢您的聆听！望批评指正！
三、仪器分析与数据处理
气相色谱仪,配火焰光度检测器(FPD);shRtx-1701毛细管色谱柱30m×0.32mm（内径） ×0.25um（膜厚）；进样垫;进样针；不分 流衬管 正己烷(色谱纯)、丙酮（色谱纯） ;0.2um 滤膜；带针注射器；待测有机磷农药 (敌敌 畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果)标准品
2.1.3浓缩
目的：缩小样品液的体积、提高待测组分的浓度 方法： 常压浓缩 待测物易损失、需转移定容，增大样液体积
气流吹蒸浓缩法
空气或N2吹拂样液表面，辅以水浴加热 减压浓缩
KD浓缩器、旋转蒸发器，水浴加热并抽气减
压，浓缩速度快，被测组分损失少。
旋转蒸发器
使用时，水浴温度不宜超 过60℃。
称取样品25.0g，记录实际称量数字，倒入50.0mL
样品前处理过程
有机磷：蒸发近干的小烧杯，加入2.0mL 丙酮，盖上铝箔，备用。将上述备用液完全转 移至15mL刻度离心管中，再用3mL丙酮分三 次冲洗烧杯，并转移至离心管，最后定容至 5.0mL，在漩涡混合器上混匀，移入自动进样
小瓶中，如果定容后的样品溶液过于混浊，应
用0.2μm的滤膜过滤后再装入小瓶，待测。
3. 实验室里的工作人员一定要有良好操作习惯 ： 穿工作服，戴手套 实验时应随时记录实验数据，仪器使用记录 和环境条件等 称样时要准确记录
4.样品前处理注意事项： 1.样品要碎的均匀，不能有大块； 2.剧烈震荡要充分，保证完全分层； 3. 从移液开始，包括移液管，烧杯以及后面的鸡心瓶 不能沾到水，要完全干燥； 4.定容要准确 ； 5. 做过农药标准品的一系列玻璃仪器要绝对和农残仪 器分开，防止交叉污染，影响结果； 6.一般先做样品再做标样，以防柱子污染； 7.一定要处理好废液，分类处理。
农药残留快速检测说明书
农药残留快速检测说明书执行标准:GB/T 5009.199-2003一、试剂保存配制前均为冷冻保存，有效期18个月（0-5℃冷藏保存为12个月）。
二、试剂配制缓冲液：取一包用510ml蒸馏水摇匀溶解后常温备用。
底物：取一瓶加入10ml蒸馏水摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
酶液：取一瓶加入10ml缓冲液摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
显色剂：取一瓶加入10ml缓冲液摇匀溶解，用时取100μl，配制后0-5℃冷藏保存。
三、检测样本制备1、取有代表性的蔬菜除去泥土，用天平称取2g，叶菜取叶片部分，瓜果取皮4g。
2、将菜样剪成1cm见方大小置于小烧杯内，加入10ml缓冲液，震荡1-2分钟。
3、将烧杯中的浸泡液用移液管吸取上清部分2.5ml移入另一试管内，即为样本提取液。
四、测试取一支试管加入2.5ml缓冲作为空白对照,然后与各样本提取液的试管分别依次加入酶液 100ul 显色剂 100ul 摇匀，放置10分钟底物100ul摇匀后马上倒入比色皿中然后立即放入仪器，按“开始空白分析”键后等待检测结果。
(做过对照后，接下来的检测则按“开始样品分析”，但重新开机或更换试剂后需要再做一次空白对照)注：检测时间为3分钟的空白对照值△A O应≥0.3；当温度低于20℃时应该采取加温措施，以提高数据的准确性；若△A O＜0.3，又无条件加温时，空白及样品的酶量可加倍。
五、结果判定抑制率＜50%时判定为合格；抑制率≥50%时农药残毒超标，必要时可进行定量检测。
六、注意事项1、试剂使用时，用一瓶配制一瓶，用前应摇匀；2、试剂应避免交叉污染，吸出后的试剂不可再打回瓶内；七、包装规格：500份，（酶、底物，显色剂）各1瓶，提取试剂2包。
农药残留快速检测说明书执行标准:GB/T 5009.199-2003一、试剂保存配制前均为冷冻保存，有效期18个月（0-5℃冷藏保存为12个月）。
二、试剂配制缓冲液：取一包用510ml蒸馏水摇匀溶解后常温备用。
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蔬菜农药残留检测作业指导书
简介
农药残留是指在农业生产中施用农药直接或间接存于谷物、蔬菜、果品、畜产品、水产品以及土壤和水体中的现象。
有机磷和氨基甲酸酯类农药中存在着部分高毒和剧毒品种，如果被施用于生长期较短、连续采收的蔬菜，则很难避免因残留量超标而导致人畜中毒。
由于农药残留对人和生物危害很大，各国对农药的施用都进行严格的管理，并对食品中农药残留容许量做了规定。
检测原理
有机磷或氨基甲酸酯类农药对于乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用，通过测定该酶的活性被抑制的程度即可知样品中含有农药的残留情况。
检测对象
蔬菜
试剂配制
1.缓冲液：将缓冲液试剂袋中的试剂倒出，溶于500ml蒸馏水中，溶解、混匀即可。
2.底物：往标注为底物的瓶中加入13ml蒸馏水。
2-4℃环境下冷藏保存。
3.显色剂：无需配制放入冰箱冷藏（2-4℃），切勿冷冻结冰。
4.酶试剂：酶试剂已配成溶液可直接使用。
平常要在2-4℃环境下冷藏保存，切勿冷冻至结冰。
操作步骤
1.样品处理
1.1植株：称取2g样品（叶菜剪成宽度为1cm的菜羊，块根菜取1cm左右的表皮样品）放入三角瓶中，加入10ml缓冲液后，震荡提取2分钟。
1.2若浸提液清澈无色或颜色较浅，取上清液待测；
若浸提液浑浊，离心，上清液待测；
若浸提液色素干扰严重，可用活性炭脱色，具体方法如下：将浸提液转移至另一个三角瓶中，加入0.1-0.5g活性炭（根据颜色深浅调整），水浴70分钟加热5分钟，取出趁热过滤，滤液待测。
【备注】：葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄液汁中含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。
处理这类样品时，可采取整株（体）浸提，避免次生物物质干扰。
2.检测样品的制备
2.1空白对照液
2.1.1取酶100ul，缓冲液2.5ml，加入专用反应瓶中，再加入显色剂100ul，静置15分钟（35度恒温更加）。
2.1.2加入底物100ul；
2.1.3摇匀后立即测试。
2.2检测样品液
2.2.1取酶100ul，待测样品液2.5ml，加入专用反应瓶中，再加入显色剂100ul，静置15分钟（35度恒温更加）。
2.2.2加入底物100ul；
2.2.3摇匀后立即测试。
3.检测样品测试
3.1空白对照测量
3.1.1取2.5ml对照样品于比色皿中；
3.1.2将比色皿放入指定的通道中；
3.1.3按“对照”键，屏幕下方显示测量时间；
3.1.4检测结束后，仪器自动显示对照样品的测试结果△Ao。
【备注】：a 当显色时间为1min时，空白对照在0.15-0.3之间时，可继续做实验；
b 当空白对照值在＜0.15时，需重做空白对照，若重复多次的空白对照值＜0.15
时，必须更换酶试剂。
c 当空白对照值在＞0.3时，需将酶溶液适当稀释，重新做空白对照。
. d 当显色时间为3min时，对照值应≥0.3。
＜0.3时更换酶试剂。
3.2样品测量
3.2.1取2.5m待测样品于比色皿中；
3.2.2将比色皿放入指定的通道中；
3.2.3按“对照”键，屏幕下方显示测量时间；
3.2.4检测结束后，仪器自动显示指定通道检测样品的测试结果△Ai。
判断标准
1.样品的抑制率在40-50%之间可疑农残超标样品；
2.抑制率＞50%为农残超标样品，表明被测样品的农药残留毒性可能超过安全界定的标准，建议用气相色谱法等仪器分析法作进一步确认。
注意事项
1.加入底物后，应迅速混匀，立即测试
2.所有的检测液对皮肤均具有不同程度的伤害，使用时请做好防护。
不慎沾到皮肤应立即擦干并用大量水冲洗。
3.检测试剂请务必在2-4℃保存。