生态毒理学：第三章 生态毒理学常用实验方法GB格式
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②体外实验 ：利用游离器官，培养的细胞 或细胞器，生物模拟系统进行毒理学研究
③人体观察（临床观察）中毒、事故、意外 等 ④流行病学研究：研究疾病的分布，探讨病 因，采取措施。
不同阶段的毒理学试验项目
第一阶段----急性毒性试验和局部毒性试 验
第二阶段----重复剂量毒性试验、遗传毒 性试验与发育毒性试验
3. 实验观察指标选择：
实验指标（观测指标）是指在实验观察中用于反 映研究对象中某些可被检测仪器或研究者感知的 特征或现象标志。 实验指标选择的基本条件： （1）特异性 （2）客观性 （3）灵敏度 （4）精确度 （5）可行性 （6）认可性
实验指标选择依据通常有： （1）根据实验的目的、任务和内容选择指标。 （2）根据化学物的种类和用途来选择国家标准、 部委和各级政府发布的法规、规定和行业规范 中相应的程序中的实验方法要求来选择指标。
3.成年的健康实验动物和人可能的暴露途径是 基本的选择
(1)成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物作 为一般人群的代表性实验模型。
幼年和老年动物、妊娠的雌性动物、疾病状态作 为特殊情况另作研究。
(2)毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模 拟人接触该受试物的方式。
科研设计遵循的三原则
1.对照原则
➢对照的意义在于通过对照鉴别处理因素与非处理因 素的差异及处理因素的效应大小,消除和减少随机化 原则所不能控制的抽样误差及实验者操作熟练程度等 所造成的差异。 ➢在动物实验中，要求相比较的各组间动物的种类、 性别、年龄、体重等尽可能地一致。对照组与实验组 同等重要，两组的动物数应相等。 ➢毒理学实验中常用的对照形式有以下几种：
2.剂量-反应(效应)研究
Biological Response
FEL: Frank Effect Level
有直接显著影响值
最低可见有害作用水平
LOAEL: Lowest Observable Adverse Effect Level
最低可见作用水平
NOAEL:No Observable Adverse Effect Level
毒理学动物实验设计
外推
2.实验动物必须暴露于高剂量 是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。
一般要设3个或3个以上剂量组，以观察剂 量-反应（效应）关系，确定受试化学物引起毒 效应及其毒性参数。
(1)毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安 全性，而是为了表征化学品可能产生的毒作用。 (2)毒理学试验中实验模型所需的动物总是远少 于处于危险中的人群。为了在少量动物得到有 统计学意义的可靠的结果，需要应用相对较高 的剂量，以使效应发生的频率足以被检测。
未观察到损害作用水平
LOEL: Lowest Observable Effect Level
NOEL: No Observable Effect Level
Log[Dose] 无可见作用剂量水平
3.确定毒作用的靶器官
4.确定损害的可逆性 5.其它 ➢毒作用的敏感检测指标和生物学标志 ➢毒作用机制研究 ➢受试物的毒物动力学和代谢研究 ➢中毒的解救措施
个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 变量间的相关性
三、毒理学动物实验设计内容
1.实验动物选择：原则： A.对化合物毒性反应与人接近的动物 B.易于饲养管理 C.操作方便 D.易于获得，品系纯化，价格低廉
2. 实验动物分组与剂量选择、实验期限：
Biological Response
高剂量组 中剂量组：LOAEL 低剂量组：NOAEL
Log[Dose]
(4)自身对照：对照与实验在同一受试者身上进行，如同一个体左 右部位的对比，给药前后的对比，先给甲药后给乙药的对比等 方式。若采用给药前后的对比，总是将用药前作为对照，这实 质上也是一种空白对照。 严格地说，还需要单独设立一个对照 组， 比较实验组与对照组处理前后的效应差值 。
2.重复原则
(1)足够的实验样本数： (2)实验结果的可重复性。
3
第三章
毒理学试验
一、毒理学毒性评价试验的原则
毒理学实验通常是毒性评价或安全性评价试验， 通常由权威机构规定评价程序。
在描述毒理学的试验中，有三个基本的原则: 1.外来化学物在实验动物产生的作用，可以 外推于人。 基本假设为： ①人是最敏感的动物物种； ②人和实验动物的生物学过程包括化学物的 代谢，与体重（或体表面积）相关。
3.随机原则
为了减少个体差异这种非处理因素的干拢，应 于实验前将实验动物依统计学原则进行随机分组， 以此达到尽可能降低非处理因素的混杂效应，从 而提高每组动物间均衡性的目的。 随机分组方法： ①随机数字表法； ②计算机软件（如SPSS、SAS、Excel等）方法 。
毒理学的研究方法
①体内试验 也称为整体动物实验，整体研 究动物外推到人
4. 统计学处理方法：
表2 IPCS专家组推荐的统计学分析方法
数据类别和统计学要求 1．“有或无”数据： 动物间的比较
个别组的比较
动物内部比较 2．分级数据： 动物间的比较 动物内部的比较
3．连续数据： 动物间的比较 动物内部比较 变量间的相关性
非均匀性 与剂量相关的趋势 个别组的比较 非均匀性 变量问的相关性
第三阶段----亚慢性毒性试验、生殖毒性 试验和毒动学试验
第四阶段-目的
1.受试物毒作用的表现和性质 在急性和慢性毒性试验中，观察受试物对 机体的有害作用，对有害作用的观察应该是对 每个实验动物进行全面的、逐项的观察和记录。 发现有害作用是进行剂量-反应(效应)研究的前 提。
(1)空白对照：又称正常对照对照组不加任何处理因素，即处理因 素完全空白。
(2)标准对照：指在所谓标准条件下进行观察的对照。如抗结核病 的新药试验，应以链霉素和异烟肼为标准对照药物，且不可用 降低标准对照的办法来提高试验效应 。
(3)阳性对照：毒理学研究中的三致试验( 致突变试验、致癌试验 和致畸试验)，除常规设立空白对照 (阴性对照)外尚需同时设 立阳性对照，即使用必定出现阳性结果阳性受试物(如环磷酰 胺)，以判断该试验方法是否成功。若阳性对照没有出现阳性 结果，则说明该试验是失败的。
③人体观察（临床观察）中毒、事故、意外 等 ④流行病学研究：研究疾病的分布，探讨病 因，采取措施。
不同阶段的毒理学试验项目
第一阶段----急性毒性试验和局部毒性试 验
第二阶段----重复剂量毒性试验、遗传毒 性试验与发育毒性试验
3. 实验观察指标选择：
实验指标（观测指标）是指在实验观察中用于反 映研究对象中某些可被检测仪器或研究者感知的 特征或现象标志。 实验指标选择的基本条件： （1）特异性 （2）客观性 （3）灵敏度 （4）精确度 （5）可行性 （6）认可性
实验指标选择依据通常有： （1）根据实验的目的、任务和内容选择指标。 （2）根据化学物的种类和用途来选择国家标准、 部委和各级政府发布的法规、规定和行业规范 中相应的程序中的实验方法要求来选择指标。
3.成年的健康实验动物和人可能的暴露途径是 基本的选择
(1)成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物作 为一般人群的代表性实验模型。
幼年和老年动物、妊娠的雌性动物、疾病状态作 为特殊情况另作研究。
(2)毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模 拟人接触该受试物的方式。
科研设计遵循的三原则
1.对照原则
➢对照的意义在于通过对照鉴别处理因素与非处理因 素的差异及处理因素的效应大小,消除和减少随机化 原则所不能控制的抽样误差及实验者操作熟练程度等 所造成的差异。 ➢在动物实验中，要求相比较的各组间动物的种类、 性别、年龄、体重等尽可能地一致。对照组与实验组 同等重要，两组的动物数应相等。 ➢毒理学实验中常用的对照形式有以下几种：
2.剂量-反应(效应)研究
Biological Response
FEL: Frank Effect Level
有直接显著影响值
最低可见有害作用水平
LOAEL: Lowest Observable Adverse Effect Level
最低可见作用水平
NOAEL:No Observable Adverse Effect Level
毒理学动物实验设计
外推
2.实验动物必须暴露于高剂量 是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。
一般要设3个或3个以上剂量组，以观察剂 量-反应（效应）关系，确定受试化学物引起毒 效应及其毒性参数。
(1)毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安 全性，而是为了表征化学品可能产生的毒作用。 (2)毒理学试验中实验模型所需的动物总是远少 于处于危险中的人群。为了在少量动物得到有 统计学意义的可靠的结果，需要应用相对较高 的剂量，以使效应发生的频率足以被检测。
未观察到损害作用水平
LOEL: Lowest Observable Effect Level
NOEL: No Observable Effect Level
Log[Dose] 无可见作用剂量水平
3.确定毒作用的靶器官
4.确定损害的可逆性 5.其它 ➢毒作用的敏感检测指标和生物学标志 ➢毒作用机制研究 ➢受试物的毒物动力学和代谢研究 ➢中毒的解救措施
个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 变量间的相关性
三、毒理学动物实验设计内容
1.实验动物选择：原则： A.对化合物毒性反应与人接近的动物 B.易于饲养管理 C.操作方便 D.易于获得，品系纯化，价格低廉
2. 实验动物分组与剂量选择、实验期限：
Biological Response
高剂量组 中剂量组：LOAEL 低剂量组：NOAEL
Log[Dose]
(4)自身对照：对照与实验在同一受试者身上进行，如同一个体左 右部位的对比，给药前后的对比，先给甲药后给乙药的对比等 方式。若采用给药前后的对比，总是将用药前作为对照，这实 质上也是一种空白对照。 严格地说，还需要单独设立一个对照 组， 比较实验组与对照组处理前后的效应差值 。
2.重复原则
(1)足够的实验样本数： (2)实验结果的可重复性。
3
第三章
毒理学试验
一、毒理学毒性评价试验的原则
毒理学实验通常是毒性评价或安全性评价试验， 通常由权威机构规定评价程序。
在描述毒理学的试验中，有三个基本的原则: 1.外来化学物在实验动物产生的作用，可以 外推于人。 基本假设为： ①人是最敏感的动物物种； ②人和实验动物的生物学过程包括化学物的 代谢，与体重（或体表面积）相关。
3.随机原则
为了减少个体差异这种非处理因素的干拢，应 于实验前将实验动物依统计学原则进行随机分组， 以此达到尽可能降低非处理因素的混杂效应，从 而提高每组动物间均衡性的目的。 随机分组方法： ①随机数字表法； ②计算机软件（如SPSS、SAS、Excel等）方法 。
毒理学的研究方法
①体内试验 也称为整体动物实验，整体研 究动物外推到人
4. 统计学处理方法：
表2 IPCS专家组推荐的统计学分析方法
数据类别和统计学要求 1．“有或无”数据： 动物间的比较
个别组的比较
动物内部比较 2．分级数据： 动物间的比较 动物内部的比较
3．连续数据： 动物间的比较 动物内部比较 变量间的相关性
非均匀性 与剂量相关的趋势 个别组的比较 非均匀性 变量问的相关性
第三阶段----亚慢性毒性试验、生殖毒性 试验和毒动学试验
第四阶段-目的
1.受试物毒作用的表现和性质 在急性和慢性毒性试验中，观察受试物对 机体的有害作用，对有害作用的观察应该是对 每个实验动物进行全面的、逐项的观察和记录。 发现有害作用是进行剂量-反应(效应)研究的前 提。
(1)空白对照：又称正常对照对照组不加任何处理因素，即处理因 素完全空白。
(2)标准对照：指在所谓标准条件下进行观察的对照。如抗结核病 的新药试验，应以链霉素和异烟肼为标准对照药物，且不可用 降低标准对照的办法来提高试验效应 。
(3)阳性对照：毒理学研究中的三致试验( 致突变试验、致癌试验 和致畸试验)，除常规设立空白对照 (阴性对照)外尚需同时设 立阳性对照，即使用必定出现阳性结果阳性受试物(如环磷酰 胺)，以判断该试验方法是否成功。若阳性对照没有出现阳性 结果，则说明该试验是失败的。