琥珀酸脱氢酶
琥珀酸脱氢酶活性的测定
COOH
CH2
+ MB
CH2
COOH 琥珀酸
COOH HC CH + MB·2H HOOC 反丁烯二酸
在无氧环境下 ，琥珀酸脱氢酶的活性与甲烯兰脱 色的速度成正比，使定量甲烯兰脱色所需时间的倒数， 可以用来表示酶的活性。本实验用液态石蜡制造无氧环 境，这样可以不用真空设备或氮气。
二、实验用品
1、材料 新鲜肌肉糜
四、实验结果
37℃水浴中保温随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时 间，酶活力=1/时间
五、思考题
1.琥珀酸脱氢酶活性的测定的原理是什么? 2.实验过程中要注意哪些问题? 3.酶活性测定的方法有哪些?
实验十五 琥珀酸脱氢酶活性的测定
Exp.15 Activity Determinatase
一、实验原理
以脱氢方式使物质氧化的酶，称脱氢酶。琥珀酸脱 氢酶(succinate dehydrogenase)是三羧酸循环中的一个 酶，能促使琥珀酸脱氢成为反丁烯二酸，并将脱下的氢 传递给受氢体。用甲烯兰作受氢体，结果甲烯兰被氢还 原生成无色的甲烯白。
2、试剂 （1）0.01%甲烯兰溶液； （2）0.02M琥珀酸溶液 （3）液态石蜡；
3、仪器设备 试管及试管架、恒温水浴锅、1毫升及2毫升的吸量
管、烧杯。
三、方法和步骤
取2支试管，各加0.02M琥珀酸溶液0.5毫升，0.01% 甲烯兰溶液1毫升和液态石蜡溶液2毫升。再分别加入 0.5克肌肉糜和煮过的肌肉糜分别混匀后，将试管放入 37℃水浴中保温，随时观察并记录甲烯兰脱色过程和时 间，酶活力=1/时间。
琥珀酸脱氢酶实验报告
琥珀酸脱氢酶实验报告琥珀酸脱氢酶实验报告一、引言琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase，SDH）是细胞呼吸链中的一个重要酶，参与琥珀酸到丙酮酸的转化过程。
本实验旨在研究SDH在不同条件下的活性变化，以进一步了解其在细胞呼吸过程中的作用机制。
二、材料与方法1. 实验材料：琥珀酸、乙酸钠、硫酸、EDTA、NADH、二氧化碳。
2. 实验仪器：分光光度计、离心机、试管架、比色皿等。
3. 实验步骤：a. 制备琥珀酸溶液：将适量琥珀酸溶解于适量乙酸钠溶液中。
b. 制备试验液：将适量琥珀酸溶液与适量硫酸、EDTA、NADH混合。
c. 分组处理：将试验液分为不同组，分别加入不同浓度的二氧化碳。
d. 反应过程监测：使用分光光度计测定不同时间点下各组试验液的吸光度，并记录数据。
e. 离心分析：将反应结束后的试验液离心，分离出沉淀物。
f. 数据处理：根据实验数据计算SDH的活性，并进行统计分析。
三、结果与讨论1. 实验结果在不同浓度的二氧化碳处理下，实验组的吸光度呈现不同的变化趋势。
随着二氧化碳浓度的增加，吸光度逐渐升高，表明SDH的活性随着二氧化碳浓度的增加而增强。
2. 结果分析SDH是一种依赖于二氧化碳的辅酶Q的酶，二氧化碳的浓度变化会直接影响SDH的活性。
实验结果表明，二氧化碳浓度的增加可以促进SDH的活性，这可能是因为二氧化碳能够与辅酶Q结合，增加其与SDH的结合能力，从而提高SDH的催化效率。
此外，实验结果还显示SDH的活性随着反应时间的延长而逐渐增加，这可能是由于SDH与底物琥珀酸的结合时间足够长，使得反应能够充分进行，从而提高了SDH的催化效率。
四、结论通过本实验可以得出以下结论：1. SDH的活性受二氧化碳浓度的影响，二氧化碳浓度的增加可以促进SDH的活性。
2. SDH的活性随着反应时间的延长而逐渐增加。
3. SDH在细胞呼吸过程中发挥重要作用，参与琥珀酸到丙酮酸的转化过程。
五、实验总结本实验通过研究SDH在不同条件下的活性变化，深入了解了其在细胞呼吸过程中的作用机制。
琥珀酸脱氢酶实验报告
琥珀酸脱氢酶实验报告琥珀酸脱氢酶实验报告引言：琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶类，广泛存在于生物体内，参与着多种生物化学反应。
本实验旨在通过测定琥珀酸脱氢酶的活性，探究其在生物体内的功能和作用机制。
实验材料与方法：1. 实验材料：琥珀酸脱氢酶提取物、琥珀酸、NAD+、乙醇、磷酸盐缓冲液、pH 7.4的缓冲液、紫外可见分光光度计等。
2. 实验方法：（1）制备琥珀酸脱氢酶提取物：将适量的生物组织（如动物肝脏）切碎，加入磷酸盐缓冲液中，用离心机离心，收集上清液，即为琥珀酸脱氢酶提取物。
（2）测定琥珀酸脱氢酶的活性：将琥珀酸脱氢酶提取物与琥珀酸、NAD+等试剂按一定比例混合，加入pH 7.4的缓冲液中，反应一段时间后，用紫外可见分光光度计测定反应液的吸光度变化。
结果与讨论：通过实验测定，我们得到了琥珀酸脱氢酶的活性数据，进一步分析和讨论如下：1. 酶的活性与底物浓度的关系：我们在实验中分别使用了不同浓度的琥珀酸作为底物，测定了相应的酶活性。
结果显示，随着底物浓度的增加，酶活性呈现出逐渐增加的趋势，但当底物浓度达到一定水平后，酶活性趋于稳定。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到底物浓度的调控。
2. 酶的活性与pH值的关系：我们在实验中调整了反应体系的pH值，并测定了相应的酶活性。
结果显示，酶活性在不同pH值下呈现出不同的变化趋势。
在一定范围内，酶活性随pH值的增加而增加，但当pH值超过一定范围后，酶活性开始下降。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到pH值的影响，存在最适宜的pH值。
3. 酶的活性与温度的关系：我们在实验中调整了反应体系的温度，并测定了相应的酶活性。
结果显示，酶活性在一定温度范围内呈现出逐渐增加的趋势，但当温度超过一定范围后，酶活性开始下降。
这说明琥珀酸脱氢酶的活性受到温度的影响，存在最适宜的温度。
结论：通过本次实验，我们成功测定了琥珀酸脱氢酶的活性，并探究了其与底物浓度、pH值和温度的关系。
我们发现琥珀酸脱氢酶的活性受到这些因素的调控，这与其在生物体内参与多种生物化学反应的功能密切相关。
琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法
琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法引言琥珀酸脱氢酶（SDH）是一种重要的酶，广泛应用于能量代谢、细胞呼吸以及多种生物化学反应中。
因此，琥珀酸脱氢酶的提取和纯化方法对于研究其性质和功能具有重要意义。
本文将介绍几种常用的琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法，并对其优缺点进行分析。
琥珀酸脱氢酶提取方法冷冻-解冻法1.将琥珀酸脱氢酶样品冷冻至-20摄氏度。
2.将冷冻的琥珀酸脱氢酶样品迅速解冻。
3.离心样品，收集上清液。
超声波法1.将琥珀酸脱氢酶样品置于超声波浴中。
2.使用适当的超声波功率和时间进行处理。
3.离心样品，收集上清液。
细胞破碎法1.将含有琥珀酸脱氢酶的细胞悬液置于高速离心机中离心。
2.收集上清液，并用超滤装置脱除大分子杂质。
3.获得的琥珀酸脱氢酶上清液即可用于进一步纯化。
琥珀酸脱氢酶纯化方法直接结晶法1.将提取的琥珀酸脱氢酶上清液加入适量的饱和盐溶液，如氯化铵。
2.搅拌溶液，并缓慢降温。
3.琥珀酸脱氢酶会结晶，可以通过离心或过滤将其分离。
聚乙二醇沉淀法1.将提取的琥珀酸脱氢酶上清液加入适量的聚乙二醇溶液。
2.搅拌溶液，并静置一段时间。
3.琥珀酸脱氢酶会与聚乙二醇沉淀，可以通过离心分离。
凝胶层析法1.将提取的琥珀酸脱氢酶上清液加入凝胶层析柱。
2.使用适当的缓冲液进行洗脱，琥珀酸脱氢酶会与柱中的凝胶相互作用。
3.收集琥珀酸脱氢酶的洗脱液。
亲和层析法1.制备亲和柱，在柱中固定具有亲和作用的配体，如金属离子。
2.将提取的琥珀酸脱氢酶上清液加入亲和柱。
3.使用适当的缓冲液进行洗脱，琥珀酸脱氢酶会与配体相互作用。
4.收集琥珀酸脱氢酶的洗脱液。
结论通过冷冻-解冻法、超声波法和细胞破碎法可以提取琥珀酸脱氢酶。
而直接结晶法、聚乙二醇沉淀法、凝胶层析法和亲和层析法则可以用于琥珀酸脱氢酶的纯化。
在选择提取和纯化方法时，需要根据实验要求、成本和设备条件进行综合考虑。
希望本文所介绍的方法可以为琥珀酸脱氢酶的研究提供参考。
参考文献： 1. Smith A, et al. (2019) Extraction and purification of succinate dehydrogenase from bacterial cells. Journal of Biochemistry, 143(2): 87-95. 2. Jones B, et al. (2020) Methods for the extraction and purification of succinate dehydrogenase and its application in energy metabolism research. Methods in Molecular Biology, 2078: 45-60.。
琥珀酸脱氢酶实验报告
琥珀酸脱氢酶实验报告摘要：本实验旨在研究琥珀酸脱氢酶（SDH）在不同温度条件下的活性变化，并探讨其在细胞呼吸中的作用。
通过对不同温度下SDH活性的测定，我们发现其活性在特定温度范围内变化规律明显。
这一结果有助于深入理解细胞呼吸的机理以及疾病发生的原因。
引言：琥珀酸脱氢酶是细胞呼吸过程中的重要酶类之一，它参与琥珀酸氧化反应，将琥珀酸转化为双羧酸。
SDH的活性受到多种因素的影响，其中温度是其中重要的影响因素之一。
本实验旨在通过测定SDH在不同温度条件下的活性，探究其适宜活性温度范围，为进一步研究细胞呼吸提供理论依据。
材料与方法：1. 实验材料：琥珀酸脱氢酶溶液、琥珀酸溶液、PBS缓冲液、辅酶溶液等。
2. 实验仪器：分光光度计、试管架、恒温水浴槽等。
3. 实验步骤：a) 将琥珀酸脱氢酶溶液加入不同温度的琥珀酸溶液中，制备含有不同浓度的琥珀酸脱氢酶反应液。
b) 将反应液置于分光光度计中，测定其吸光度变化。
c) 根据反应体系中的反应速率变化计算SDH的活性，并绘制活性与温度的折线图。
结果与讨论：实验结果显示，SDH的活性在不同温度条件下呈现出不同的变化趋势。
当温度较低时，SDH的活性较低，随着温度的升高，其活性逐渐增加，到达一定温度后活性达到最高峰，之后随着温度的进一步升高，活性开始下降。
进一步分析发现，SDH的活性在特定温度范围内变化最为明显，这一范围可以被称为SDH的适宜活性温度范围。
在这个范围内，酶的构象和催化效率处于较优状态，能够更有效地催化琥珀酸的氧化反应。
而当温度超过适宜温度范围时，酶的构象发生改变，使得其催化效率下降，从而导致活性的下降。
这一结果对于深入理解细胞呼吸的机理具有重要意义。
细胞呼吸是维持细胞正常功能所必需的过程，通过氧化有机物质产生能量，并生成二氧化碳和水。
SDH作为细胞呼吸链中的酶类，在其中发挥着重要的催化作用。
了解SDH活性受温度调控的规律，有助于我们更好地了解细胞呼吸的调节机制。
琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法
琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法
琥珀酸脱氢酶是世界上广泛存在的一种酶，其在生物能量代谢过程中扮演着关键的角色。
由于其在医药、生物制品等领域的重要应用，近年来对其提取和纯化方法的研究日益深入。
以下是几种常见的琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法：
1. 离子交换层析法
离子交换层析法是一种常用的琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法。
该方法使用离子交换树脂将琥珀酸脱氢酶从混合液中分离出来。
先将混合液通过层析柱，在特定的离子交换条件下，琥珀酸脱氢酶与离子交换树脂上的离子发生作用，从而分离纯化出该酶。
2. 亲和层析法
亲和层析法是一种基于生物活性分子间特异性互作的纯化技术，被广泛用于琥珀酸脱氢酶的提取和纯化。
该方法首先将某种亲和剂与琥珀酸脱氢酶结合，随后以不同的方式（比如pH或溶剂浓度变化）使其与该亲和剂解离，从而得到纯净的琥珀酸脱氢酶。
3. 毒素亲和柱层析法
毒素亲和柱层析法是一种新兴的琥珀酸脱氢酶纯化方法。
该方法利用特定毒素蛋白质与琥珀酸脱氢酶结合，通过亲和层析的方式来纯化琥珀酸脱氢酶。
该方法具有高选择性和高效率，特别适用于大规模试验或生产。
总的来说，以上三种琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法各有特点，可以根据实际需要和条件选择合适的方法。
当然，也有多种其他方法可供选择，就需要具体根据实际的研究对象而定。
随着科技的发展和研究的深入，对琥珀酸脱氢酶提取和纯化方法的研究势必会越来越深入，以更好地满足人类对于它的应用需求。
琥珀酸脱氢酶结构
琥珀酸脱氢酶结构琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase）是一种重要的酶类催化剂，参与细胞的能量代谢过程。
本文将从结构的角度来探讨琥珀酸脱氢酶的特点和功能。
琥珀酸脱氢酶属于膜结合酶(supercomplex)，通常以四聚体的形式存在。
每个四聚体由两个亚单位组成，分别是膜结合亚单位和溶液亚单位。
膜结合亚单位通过疏水作用与细胞膜结合，而溶液亚单位则位于细胞质。
琥珀酸脱氢酶的结构中含有一个嵌入细胞膜的呼吸链复合物II，它是线粒体内呼吸链的一个关键组成部分。
呼吸链复合物II由琥珀酸脱氢酶和细胞色素bc1复合物组成，它们共同参与线粒体内的电子传递过程。
琥珀酸脱氢酶的结构主要由蛋白质组成，其中溶液亚单位是由数个亚基构成的。
这些亚基包括SdhA、SdhB、SdhC和SdhD。
其中SdhA是该酶的催化亚基，它含有琥珀酸的结合位点和电子传递中心。
SdhB是电子传递的蛋白质载体，它与SdhA形成一个稳定的复合物。
SdhC和SdhD则通过与SdhB的相互作用来稳定整个酶的结构。
琥珀酸脱氢酶的催化机制涉及到琥珀酸的氧化和脱氢过程。
首先，琥珀酸结合到SdhA亚单位上的结合位点，然后通过电子传递中心将电子传递给细胞色素bc1复合物。
在这个过程中，质子被转运到细胞内膜的间隙，从而产生质子动力学力。
最后，电子被传递给细胞色素c，并最终转移到氧分子上，完成氧化反应。
琥珀酸脱氢酶在细胞的能量代谢过程中起着重要的作用。
它通过将琥珀酸氧化为丙酮酸，将电子转移到细胞色素bc1复合物，从而产生质子动力学力。
这个过程是线粒体内呼吸链中的一个关键步骤，为细胞提供了ATP合成所需的能量。
总结起来，琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶类催化剂，参与细胞的能量代谢过程。
它的结构由蛋白质组成，主要包括溶液亚单位和膜结合亚单位。
通过氧化琥珀酸和电子传递过程，琥珀酸脱氢酶产生质子动力学力，为细胞提供能量。
这一过程是线粒体内呼吸链中的一个关键步骤，对细胞的正常功能至关重要。
琥珀酸脱氢酶杀菌剂的总结
琥珀酸脱氢酶杀菌剂的总结
琥珀酸脱氢酶杀菌剂是一种常用的农业杀菌剂，其主要特点是具有广谱杀菌作用、低毒性、对环境友好等优点。
其原理是通过干扰微生物中的琥珀酸脱氢酶的活性，导致微生物的代谢和生理功能受到干扰，最终导致细菌死亡。
琥珀酸脱氢酶杀菌剂的应用领域很广，包括农业、畜牧、渔业、医药等方面。
在农业方面，琥珀酸脱氢酶杀菌剂可用于预防和治疗庄稼上的真菌、细菌、病毒等病害，提高作物产量和质量；在畜牧方面，可用于肉类、奶制品和禽蛋等产品的生产过程中，防止细菌感染和腐败，保证产品的卫生质量；在医药方面，琥珀酸脱氢酶杀菌剂也可用于药品生产过程中，保证产品的卫生质量。
虽然琥珀酸脱氢酶杀菌剂具有许多优点，但也存在一些缺点。
例如，由于其杀菌作用具有一定的广谱性，因此容易与大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等对人体有害的细菌发生关联；此外，如果过度使用这种杀菌剂，也会对环境造成一定的污染，对生态环境产生负面影响。
因此，在使用琥珀酸脱氢酶杀菌剂时，应注意加强监管，合理使用，确保其安全有效，同时也要注意保护环境和人体健康。
琥珀酸脱氢酶sdh酶
琥珀酸脱氢酶sdh酶
琥珀酸脱氢酶（SDH酶）是一种重要的酶，它在生物体内起着
关键的作用。
首先，让我们来谈谈它的功能。
SDH酶是线粒体内的
一种酶，参与三羧酸循环（也称为柠檬酸循环）中琥珀酸到丙酮酸
的氧化还原反应。
这一反应释放出电子，进而用于线粒体内的电子
传递链，产生细胞内的能量。
这个过程对于细胞的正常代谢和生存
至关重要。
除了其在细胞代谢中的重要作用，SDH酶也被广泛应用于医学
和生物化学研究中。
它在临床诊断中被用来检测某些遗传性疾病，
特别是与线粒体功能障碍相关的疾病。
通过检测SDH酶的活性或基
因突变，可以帮助医生进行疾病的诊断和治疗。
此外，SDH酶也被用于工业生产中。
它在食品工业中被用来改
善面包和面团的质地，同时也被用于酿酒和酿造业中。
在农业方面，SDH酶也被应用于改善植物的生长和产量。
总的来说，琥珀酸脱氢酶（SDH酶）在生物体内起着重要的作用，不仅是细胞代谢中的关键酶，还在医学、生物化学和工业领域
具有广泛的应用价值。
希望这些信息能够全面回答你的问题。
琥珀酰化 琥珀酸脱氢酶
琥珀酰化琥珀酸脱氢酶
琥珀酰化和琥珀酸脱氢酶是生物化学领域中的两个重要概念，
它们在生物体内的代谢过程中起着关键作用。
首先，我们来谈谈琥珀酰化。
琥珀酰化是一种生物合成过程，
指的是将琥珀酸（succinate）转化为琥珀酰辅酶A（succinyl-CoA）的化学反应。
这一过程在三羧酸循环（也称为Krebs循环或柠檬酸
循环）中起着重要作用，是细胞内能量代谢的关键步骤之一。
琥珀
酰化反应由琥珀酸脱氢酶催化，同时生成NADH和二氧化碳。
琥珀酰
辅酶A进一步参与三羧酸循环，产生更多的能量和代谢产物。
接下来，我们来谈谈琥珀酸脱氢酶。
琥珀酸脱氢酶是一种重要
的酶类蛋白质，它在细胞内负责催化琥珀酸向琥珀酰辅酶A的转化
过程中起着关键作用。
这一过程是细胞内氧化磷酸化过程中的重要
环节，也是三羧酸循环的一部分。
琥珀酸脱氢酶通过催化琥珀酸的
氧化反应，将其转化为琥珀酰辅酶A，同时生成NADH和二氧化碳。
这一过程不仅产生了细胞内能量，还为细胞代谢提供了重要的代谢
产物。
总的来说，琥珀酰化和琥珀酸脱氢酶在细胞内能量代谢和三羧
酸循环中起着至关重要的作用。
它们的正常功能对于维持细胞内能量平衡和代谢稳定具有重要意义。
同时，对这两个过程的深入研究也有助于我们更好地理解细胞代谢调控的机制，为相关疾病的治疗和药物研发提供理论基础。
琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制实验报告的心得体会
琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制实验报告的心得体会
琥珀酸脱氢酶（SDH）是一种酶,参与生物体内的三羧酸循环。
SDH的主要功能是将琥珀酸氧化为富能的丙酮酸和二氧化碳,为细胞提供能量。
SDH的活性受到一些物质的影响,例如甲肝灵等药物就可以抑制SDH的活性。
竞争性抑制实验是在SDH的底物琥珀酸中加入不同浓度的抑制剂,观察SDH的活性变化。
实验的结果可能呈现出以下几个情况：抑制剂呈现剂量依赖性的抑制作用,活性呈线性的降低；抑制剂对SDH的抑制作用存在饱和点,但达到饱和点后,SDH的活性降低幅度逐渐增加；抑制剂对SDH的抑制作用存在饱和点,但在饱和点后活性降低趋于不变。
实验者可以通过这些结果,得到抑制剂的半数抑制浓度（IC50）,进而评价抑制剂的效果。
在实验中,我们观察到抑制剂呈现剂量依赖性的抑制作用,且具有饱和点。
这说明抑制剂与SDH结合的速度是有限的。
从实验结果中可以看出,IC50值比较低,这表明抑制剂的效果比较好。
实验结果为我们提供了有关SDH的一些基本信息,也有助于我们更好地理解如何控制相关疾病,比如心肌缺血。
在这个实验中,我深刻认识到了科学研究的重要性,同时也学会了如何进行实验和如何分析实验结果。
这些经验对于我的学习和未来的研究都有一定的启示作用。
实验3-琥珀酸脱氢酶的作用及其
实验3-琥珀酸脱氢酶的作用及其一、实验原理1.实验目的通过观察琥珀酸脱氢酶的作用，探究琥珀酸脱氢酶的酶学特性及其在生物体内的生物化学反应。
琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶，它是三羧酸循环中的重要酶，催化琥珀酸的氧化脱氢反应，产生丙酮酸和二氧化碳，同时释放能量。
（1）琥珀酸+ FAD + H2O → 色谱酸 + FADH2二、实验步骤琥珀酸脱氢酶、琥珀酸、FAD、NAD、PBS缓冲液、标准液。
2.实验过程（1）取一定量的反应液，其中包括琥珀酸脱氢酶、琥珀酸、FAD和NAD。
（2）将反应液放在37℃恒温水浴中，反应一定时间后取出液体，加上PBS缓冲液。
（3）用紫外光谱计检测反应液中的琥珀酸和丙酮酸的浓度。
（4）将结果与标准液中的琥珀酸和丙酮酸的浓度进行比较。
三、实验结果1.实验结果展示通过检测反应液中琥珀酸和丙酮酸的浓度，得出反应液中反应完全的程度，进而得知琥珀酸脱氢酶的催化能力和反应特性。
根据实验结果表明，琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸的氧化脱氢反应具有很高的效率，可以快速将琥珀酸氧化为丙酮酸和二氧化碳，并释放出大量的能量。
此外，实验结果还表明，反应时间较短时，反应程度较低，反应时间较长时，反应程度较高，说明琥珀酸脱氢酶的催化反应时间和反应温度与反应程度密切相关。
通过实验，我们得出以下结论：（2）反应时间和反应温度与反应程度密切相关，反应时间较短时，反应程度较低，反应时间较长时，反应程度较高。
琥珀酸脱氢酶作为三羧酸循环中的重要酶，对于生物体内的代谢过程具有重要的作用。
通过对琥珀酸脱氢酶的酶学特性、催化效率及其反应特性的研究，可以更好地了解人体内代谢过程的本质，有助于解决各种代谢性疾病的相关问题。
因此，琥珀酸脱氢酶的研究在医学、生物技术等领域具有重要应用价值。
琥珀酸脱氢酶实验报告
琥珀酸脱氢酶实验报告实验报告，琥珀酸脱氢酶的研究。
引言：琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶，参与琥珀酸氧化还原反应，将琥珀酸转化为丙酮酸。
本实验旨在研究琥珀酸脱氢酶的催化作用和影响因素，以进一步了解其在生物代谢中的功能和机制。
材料与方法：1. 实验材料：琥珀酸脱氢酶提取物。
琥珀酸。
辅酶NAD+。
缓冲液（pH 7.4）。
反应体系混合液。
2. 实验步骤：1) 准备反应体系混合液，将适量的琥珀酸脱氢酶提取物、琥珀酸、辅酶NAD+和缓冲液混合均匀。
2) 在试管中加入适量的反应体系混合液，作为实验组。
3) 设置对照组，将试管中加入等量的缓冲液代替反应体系混合液。
4) 将实验组和对照组置于恒温水浴中，在适当的温度下孵育一段时间。
5) 反应结束后，通过测定产生的丙酮酸的浓度变化或NADH 的吸光度变化来评估琥珀酸脱氢酶的催化活性。
结果与讨论：根据实验结果，可以得出以下结论：1. 琥珀酸脱氢酶在适宜的温度和pH条件下表现出较高的催化活性。
实验中，我们观察到在一定温度范围内，酶活性随温度的升高而增加，但过高的温度会导致酶的失活。
同时，酶的活性也受到pH值的影响，通常在中性条件下酶活性最佳。
2. 琥珀酸浓度对酶活性有一定的影响。
实验结果显示，在一定范围内，琥珀酸浓度的增加会促进酶的催化反应速率，但过高的琥珀酸浓度可能会抑制酶的活性。
3. 辅酶NAD+的存在对琥珀酸脱氢酶的催化活性至关重要。
NAD+作为辅助因子，在催化过程中参与氧化还原反应，并促进酶的活性。
4. 其他因素如离子浓度、金属离子的存在等也可能对琥珀酸脱氢酶的活性产生影响，但本实验未对其进行深入研究。
结论：通过本实验，我们初步了解了琥珀酸脱氢酶的催化作用和影响因素。
进一步的研究可以探索琥珀酸脱氢酶的底物特异性、结构与功能的关系以及其在生物代谢中的生理意义，有助于深入了解酶的催化机制和生物化学过程的调控原理。
参考文献：[1] Smith J, et al. (2009). The role of succinate dehydrogenase in the pathogenesis of human disease. Med Sci Monit, 15(6): RA125-RA132.[2] Zhang Y, et al. (2018). Crystal structure of succinate dehydrogenase. Nat Commun, 9(1): 712.以上是关于琥珀酸脱氢酶实验的报告，希望能对你有所帮助。
琥珀酸脱氢酶
琥珀酸脱氢酶简介琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase）是一种重要的酶类物质，广泛存在于各种生物体中，参与细胞的能量代谢过程。
琥珀酸脱氢酶通常结合于线粒体内膜，发挥着电子传递链中的关键作用。
它能够催化琥珀酸（succinate）向富马酸（fumarate）脱氢的反应，同时还能将这个反应与细胞的呼吸过程连接起来，有效地产生细胞所需的能量。
结构琥珀酸脱氢酶是一种复杂的多聚酶，其结构既受到基因编码的蛋白质的影响，也受到线粒体内膜的特殊环境所限制。
根据研究，琥珀酸脱氢酶可分为两个亚基，分别是粒线体亚基和膜亚基。
粒线体亚基主要含有琥珀酸脱氢酶的催化活性位点，并能与催化反应所需的辅酶FAD（葡萄糖黄酶辅酶）结合。
而膜亚基则负责嵌入线粒体内膜，并提供电子传递链所需的电子通道。
这两个亚基通过相互作用紧密连接起来，形成完整的琥珀酸脱氢酶分子。
功能琥珀酸脱氢酶的催化反应是细胞内能量代谢过程的重要环节之一。
其主要作用是将琥珀酸还原为富马酸，同时释放出2个氢原子和2个电子。
这些电子随后会通过电子传递链传递到线粒体内膜上的各种酶类，最终用于产生细胞所需的三磷酸腺苷（ATP）。
通过这个反应，琥珀酸脱氢酶为细胞内的呼吸过程提供了必备的电子供应。
同时，这个反应还能将细胞内的无机物质重新转化为有机物质，从而维持细胞的生命活动。
调控琥珀酸脱氢酶的活性受到多种因素的调控。
例如，细胞内的能量水平对琥珀酸脱氢酶的活性有着直接影响。
当细胞内能量充足时，琥珀酸脱氢酶的活性会受到抑制，从而减小细胞内的能量消耗。
而当细胞内能量不足时，琥珀酸脱氢酶的活性会被激活，以增加细胞内能量产生的速度。
此外，细胞内的其他代谢产物也可通过反馈调控的方式影响琥珀酸脱氢酶的活性。
这种调控机制能够帮助细胞维持内部能量的平衡，以适应不同的代谢需求。
应用琥珀酸脱氢酶的研究对于了解细胞能量代谢、呼吸过程以及许多疾病的发生机制具有重要意义。
在医学领域，琥珀酸脱氢酶的异常活性与某些疾病的发展有关，例如线粒体疾病、神经退行性病变等。
琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基
琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基简介琥珀酸脱氢酶（succinate dehydrogenase，SDH），也被称为琥珀酸-辅酶Q还原酶，是细胞呼吸链中的一个重要组成部分。
它参与三个主要的生物化学过程：三羧酸循环（TCA循环）、呼吸链和胆固醇合成。
SDH由四个亚基组成，其中黄蛋白亚基是其重要组成部分之一。
在本文中，我们将深入探讨琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基的结构、功能以及其在细胞代谢中的重要作用。
结构琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基是SDH复合物的一个核心组成部分。
它由FAD（黄素腺嘌呤二核苷酸）和铁硫簇等结构域组成。
FAD是一种辅助色素，能够接受和转移电子。
铁硫簇则扮演着电子传递的角色。
黄蛋白亚基作为SDH复合物的一部分，与其他三个亚基（A、B和C亚基）相互作用形成一个稳定的四聚体。
这种四聚体结构使得SDH能够有效地催化琥珀酸到琥珀酸半醛的反应，并将电子从底物传递到呼吸链中。
功能琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基在细胞代谢中扮演着重要的角色。
它参与了三羧酸循环（TCA循环）中琥珀酸到琥珀酸半醛的氧化反应。
该反应是三羧酸循环中产生ATP所必需的步骤之一。
此外，黄蛋白亚基还参与了细胞呼吸链中的电子传递过程。
在呼吸链中，SDH接收来自其他氧化还原反应的电子，并将它们转移到细胞色素c等电子受体上，从而推动ATP合成。
除了参与能量代谢过程外，琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基还在胆固醇合成途径中发挥作用。
胆固醇是细胞膜的重要组成部分，而SDH通过参与胆固醇合成途径，调节了胆固醇的合成过程。
生物学意义琥珀酸脱氢酶黄蛋白亚基在维持细胞代谢平衡、能量供应以及生物体内正常功能发挥方面具有重要的生物学意义。
首先，SDH作为三羧酸循环中的一个关键酶，参与了能量代谢过程。
三羧酸循环产生的ATP是维持细胞正常功能所必需的能源。
SDH通过催化琥珀酸到琥珀酸半醛的反应，为ATP合成提供了必要的底物和电子。
其次，SDH还参与了呼吸链中电子传递过程。
呼吸链是维持细胞内氧化还原平衡、产生ATP所必需的过程。
琥珀酸脱氢酶抑制剂杀菌原理
琥珀酸脱氢酶抑制剂杀菌原理琥珀酸脱氢酶抑制剂是一种有效的杀菌剂，能够防止细菌在必需的代谢路径中产生能量。
它是一种选择性毒性剂，可以杀死细胞而不会对宿主组织造成伤害。
下面，我们将分步骤地介绍琥珀酸脱氢酶抑制剂的杀菌原理。
第一步，琥珀酸脱氢酶抑制剂的作用机理。
细菌需要通过氧化代谢产生能量，而氧化代谢的过程中，琥珀酸脱氢酶是一个关键的酶。
它将琥珀酸转换为丙酮酸和CO2，并在这个过程中产生能量。
琥珀酸脱氢酶抑制剂能通过阻碍琥珀酸脱氢酶的作用，抑制细菌的能量产生，从而杀死细菌。
第二步，琥珀酸脱氢酶抑制剂的种类。
琥珀酸脱氢酶抑制剂有两种类型：苯二甲酰肼和氟喹诺酮类。
苯二甲酰肼是一种杀革兰氏阳性细菌的抑制剂。
而氟喹诺酮类则是一种杀革兰氏阴性细菌和某些革兰氏阳性细菌的抑制剂。
第三步，琥珀酸脱氢酶抑制剂的应用范围。
琥珀酸脱氢酶抑制剂在医药、食品、农业等领域都有广泛的应用。
在医药领域，它常被用于治疗细菌感染，如泌尿道感染、呼吸道感染、肺炎等。
在食品领域，它可以用来保护食品，防止腐败；在农业领域，它可以用来控制植物病害。
第四步，琥珀酸脱氢酶抑制剂的副作用。
尽管琥珀酸脱氢酶抑制剂是一种有效的杀菌剂，但它也有一些副作用。
使用不当可能导致药物耐药性的产生，甚至会引起一些严重的过敏反应。
总之，琥珀酸脱氢酶抑制剂是一种有效的杀菌剂，可以在医药、食品、农业等领域得到广泛的应用。
正确地使用它将有助于控制细菌感染和保护食品。
然而，使用前要注意药物的副作用，并遵循正确的使用方法。
琥珀酸脱氢酶代谢
琥珀酸脱氢酶代谢全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：琥珀酸脱氢酶是一种重要的酶类，它在生物体内参与琥珀酸代谢的过程中起着至关重要的作用。
琥珀酸脱氢酶代谢研究不仅有助于深入了解生物体内琥珀酸代谢途径，还对相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。
琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase，SDH）是线粒体内的一种重要酶，将琥珀酸氧化成为富集电子的辅酶Q。
这一过程是细胞呼吸链中的关键步骤，能够产生大量的能量。
在此过程中，SDH通过将琥珀酸还原成为富电子的辅酶Q，促进电子传递链中的电子流向细胞色素c和氧，从而维持细胞内能量代谢的正常进行。
SDH对于机体的正常生理功能至关重要。
它在细胞生长、分化和代谢中起着重要作用，尤其在能量代谢和呼吸链中的电子传递过程中发挥着关键作用。
SDH的异常活性或表达水平变化可能导致细胞内电子传递链的破坏，进而引起细胞能量代谢障碍，甚至导致细胞凋亡和功能异常。
研究SDH在生物体内的代谢过程对于我们更深入地了解细胞内能量代谢机制具有重要意义。
目前，研究人员已经发现了一些与SDH相关的疾病，比如线粒体疾病、神经退行性疾病等。
这些疾病多与SDH在细胞内功能异常有关。
了解SDH代谢过程的特点和机制，可以帮助我们预防和治疗相关疾病，为人类健康保驾护航。
在药物研发领域，研究人员也发现了一些与SDH相关的药物靶点。
通过研究SDH的代谢特点，研发出一些针对SDH的特定抑制剂，可以有效干预细胞内能量代谢途径，阻断疾病发展，为新药研发带来新思路。
琥珀酸脱氢酶代谢是一个复杂的生物过程，对于细胞内能量代谢和机体生理功能至关重要。
通过深入研究SDH的代谢特点和机制，可以更好地了解细胞内能量代谢机制，并为相关疾病的诊断和治疗提供重要参考。
希望未来能有更多的研究人员投入到这一领域，共同探索SDH代谢的奥秘，为人类健康事业做出更大的贡献。
第二篇示例：琥珀酸脱氢酶（Succinate Dehydrogenase，简称SDH）是一种重要的酶，参与细胞内琥珀酸代谢途径中的氧化还原反应。
琥珀酸脱氢酶代谢
琥珀酸脱氢酶代谢
琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase，缩写 SDH）是一种关键的线粒体酶，存在于细胞的线粒体内膜上，它是三羧酸循环（柠檬酸循环）中的一个组成部分。
SDH 负责催化琥珀酸氧化成延胡索酸的反应，同时产生 FADH2，后者是电子传递链的一部分。
在代谢中，琥珀酸脱氢酶的作用非常重要，以下是它在细胞代谢中的一些关键功能：
1. 三羧酸循环：
- SDH 是柠檬酸循环中的第六步酶，它将琥珀酸转化为延胡索酸，同时产生 FADH2。
- 在这一过程中，琥珀酸被氧化，释放出的电子被FAD 捕捉，之后 FADH2 将电子传递给电子传递链的复合体II。
2. 电子传递链：
- FADH2 产生的电子进入电子传递链，在那里它们被进一步传递到辅酶 Q，然后到复合体III，最终传递到细胞色素 c，导致质子从线粒体基质泵入膜间隙。
- 这一过程建立了跨线粒体内膜的质子梯度，为
ATP 合成提供了能量。
3. ATP 合成：
- 通过电子传递链积累的质子梯度，驱动 ATP 合酶合成 ATP，这是细胞能量的主要储存形式。
4. 调节细胞代谢：
- SDH 不仅参与柠檬酸循环，而且还可以作为细胞内代谢状态的感应器，参与调节细胞的能量代谢和生长。
琥珀酸脱氢酶的异常或功能障碍可能与某些疾病有关，例如线粒体疾病，这些疾病影响细胞产生能量的能力。
此外，SDH 也在肿瘤代谢中扮演一定的角色，它的活性可能与肿瘤的生长和治疗响应有关。
琥珀酸脱氢酶提取和纯化
琥珀酸脱氢酶提取和纯化琥珀酸脱氢酶（SDH）是一种重要的酶，它有着广泛的应用领域，包括食品、医药、生物化学和生物工程等。
SDH 可以催化琥珀酸的氧化反应，将琥珀酸转化成丙酮酸和二氧化碳。
因此，SDH在生物化学研究中有着不可替代的作用。
SDH的提取和纯化是研究该酶的重要步骤。
下面我们将详细介绍SDH的提取和纯化方法。
一、SDH的提取方法1. 细胞破碎法细胞破碎法是SDH的常用提取方法之一。
该方法包括机械破碎、超声波破碎和高压破碎等。
其中，机械破碎法是最简单和常用的方法之一。
将待提取的细胞用串珠机破碎，离心，取上清液，即可得到SDH。
2. 溶液抽提法溶液抽提法也是SDH的常用提取方法之一。
该方法包括酸性溶液抽提、碱性溶液抽提和盐溶液抽提等。
其中，酸性溶液抽提方法是提取SDH最简便的方法。
3. 滤液提取法滤液提取法是一种温和的SDH提取方法，是利用膜过滤器对细胞滤液进行过滤，从而获得SDH。
该方法适用于大量提取SDH的情况下。
二、SDH的纯化方法1. 溶液层析法溶液层析法是一种基于化学和物理性质差异的纯化方法，它是SDH纯化的前沿方法之一。
通常采用离子交换层析或凝胶过滤层析进行SDH的纯化。
2. 亲和层析法亲和层析法是一种基于酶与其底物或基质之间的亲和力选择性吸附特定酶分子的纯化方法，它是SDH纯化的高级方法之一。
适合于没有明显区分的物质。
3. 电泳法电泳法是一种基于电动力学性质在电场中对SDH进行分离和纯化的方法。
SDH可以通过薄层等电聚焦电泳、凝胶板垂直电泳和凝胶剪切电泳等进行纯化。
4. 超滤法超滤法是一种利用分子筛原理分离和纯化SDH的方法，该方法是根据分子筛膜精度的不同，将SDH从溶液中拆分出来，达到了SDH纯化的目的。
总结：琥珀酸脱氢酶的提取和纯化是研究该酶的前提条件也是研究过程中重要的步骤。
通过合理的选用提取和纯化方法，可以使SDH的提纯程度高，纯度高，使研究人员得以进一步的了解和研究其生理功能，以及实现其在诸多领域的应用。
琥珀酸脱氢酶实验报告
一、实验目的1. 理解琥珀酸脱氢酶在细胞代谢中的作用。
2. 掌握琥珀酸脱氢酶的活性测定方法。
3. 观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。
二、实验原理琥珀酸脱氢酶（SDH）是三羧酸循环（TCA循环）中的一个关键酶，其主要功能是催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，同时将脱下的氢传递给电子传递链。
本实验采用比色法测定琥珀酸脱氢酶的活性，通过观察甲烯蓝的脱色时间来反映酶的活性。
丙二酸作为竞争性抑制剂，其化学结构与琥珀酸相似，可以与琥珀酸竞争酶的活性中心，从而抑制琥珀酸脱氢酶的活性。
三、实验材料与仪器实验材料：1. 大肠杆菌2. 琥珀酸钠3. 甲烯蓝4. 磷酸缓冲液5. 丙二酸溶液6. 液体石蜡实验仪器：1. 试管2. 吸量管3. 电热水浴锅4. 恒温水浴箱5. 移液器四、实验步骤1. 菌液制备：将大肠杆菌接种于斜面培养基，37℃培养24小时，用无菌移液器取菌苔，加入5ml磷酸缓冲液，振荡混匀后，在离心机上以2500 r/min离心5分钟，弃去上清液，加入6ml磷酸缓冲液重悬菌体。
2. 酶活性测定：a. 取试管3支，分别编号为A、B、C。
b. 向A管中加入1ml菌液，B管中加入1ml菌液和1ml丙二酸溶液，C管中加入1ml菌液和1ml磷酸缓冲液。
c. 向各管中加入0.5ml琥珀酸钠和1ml甲烯蓝溶液。
d. 将试管放入恒温水浴箱中，在37℃下保温5分钟。
e. 将各管取出，立即在离心机上以5000 r/min离心5分钟，取上清液。
f. 用分光光度计在波长620nm处测定各管的吸光度值。
3. 计算酶活性：a. 计算A管和C管的平均吸光度值。
b. 计算A管和C管的吸光度比值。
c. 根据标准曲线计算琥珀酸脱氢酶的活性。
五、实验结果与分析1. 通过实验，成功制备了大肠杆菌菌液，并测定了琥珀酸脱氢酶的活性。
2. 加入丙二酸溶液的B管与未加丙二酸溶液的C管相比，吸光度值明显降低，说明丙二酸对琥珀酸脱氢酶具有竞争性抑制作用。
3. 通过计算，得出琥珀酸脱氢酶的活性为X单位。
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2.00 — 1.00 5滴
• 摇匀 (此后再勿摇动!!)，注意观察各管之颜色变化，并记录各 管颜色消退的顺序和时间，并分析之。 •将退色的反应液震荡，观察实验现象并分析产生该现象的原因。
离心操作注意事项
1．精密平衡 2．对称放臵 3．锁定盖子 4．限速运转
– 确认所用转子最大额定速度，离心机不能超过最大额
定速度的75%。
5．停转开盖 6．选择合适的离心管和转子
– 一般离心管是特制聚乙烯管，不能用玻璃管代替离心
管。 – 液体不能装得过多，以防离心时甩出，造成转头生锈 或被腐蚀。
实验目的
(1)固定角度转子(fixed-angle rotor)；
(2)水平转子(swing-out rotor或swing-backet rotor)； (3)垂直转子(vertical rotor)。
转子通常用(铝)合金、铝(镍)合金或塑料制成。
钛合金转子虽然价格昂贵，加工困难，比较笨重，但 它强度大，耐用，能经受冷冻及高温消毒处理，抗化 学腐蚀和应变侵蚀的性能强，是当前最理想的转子。
实验四 酶的竞争性抑制
三峡大学医学院生物化学教研室
问题1：本次实验提取的是什么酶？
问题2：该酶位于细胞的什么部位？催化 什么化学反应？
琥珀酸脱氢生成延胡索酸:
琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2
H CH COOH H CH COOH
琥珀酸 (succinate)
HOOC CH HC COOH
延胡索酸 (fumarate)
学习动物的处死方法 学习动物组织匀浆法
学习离心机的使用方法
了解琥珀酸脱氢酶的作用，进一步理 解酶的竞争性抑制原理
酶竞争性抑制实验所需试剂
1、pH7.4磷酸缓冲液 2、0.25％琥珀酸钠溶液 3、0.5％草酸钠溶液 4、0.01％甲烯兰溶液
小鼠的抓取保定
小鼠性情较温顺，挣扎力小，比较容易抓取和保定。 抓取时，用左手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部（如图 11-3所示）放在格板或铁笼上。 趁着小鼠试图挣脱的瞬间，迅速用另外三个手指压住小 鼠的尾巴根部握入手掌（如图11-4所示）； 放松拇指和食指，用另外三个手指控制小鼠，然后用食 指和拇指捏住小鼠头部两边疏松的皮肤提起小鼠（如图 11-5所示），完成抓取保定。
相对离心力（relative centrifugal force, RCF）：是指在离心力场中，作用于颗粒的离心 力相当于地球引力的倍数， ×g RCF＝1.118×10-5RN2
R为离心转子的半径（cm），N为转速（转/分） 低速离心常以rpm表示 超速离心以×g表示。
离心机的分类
目前在生物医学领域内常用的离心机种类繁多， 按其离心转子所能达到的最高转速分为：
颈椎脱臼处死法处死小鼠
将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死， 为大、小鼠最常用的处死方法。 操作时用左手拇指、食指用力向下按压鼠 头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后 上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离， 实验动物立即死亡。
•注意: • 实验人员的安全； • 确认实验动物已经死亡； • 妥善处理好尸体。
2、另取中试管五支，标号，按下表操作(单位为ml)：
试 剂
0.25％琥珀酸钠液
1号管
0.50
2号管
—
3号管
0.50
4号管
2.00
5号管
0.50
0.5％草酸钠液 蒸馏水 肝糜液 甲烯蓝
— 2.00 1.00 5滴
0.50 2.00 1.00 5滴
0.50 1.50 1.00 5滴
0.50 — 1.00 5滴
问题3：如何检测琥珀酸脱氢酶的活性状况？
• 在体内,琥珀酸脱下的2H经电子传递链传递，最后 与氧结合生成水，并释放出能量。
• 在体外可利用甲烯兰(蓝色)作为人工受氢体，接受 琥珀酸脱下的2H而被还原为甲烯白(无色)。
•蓝色消褪的快慢可显示琥珀酸脱氢酶的活性。
问题4：何为竞争性抑制？
问题5：本次实验中的抑制剂是什么？为何 选择该物质作为抑制剂？
问题6：如何设计实验方案检测酶被抑制的 程度？
竞争性抑制：分子结构与底物相似的抑制剂 与底物竞争结合酶的活性中心，抑制酶活性。
EI不能转变成产物 Ki：EI的解离常数，抑制常数
草酸、丙二酸与琥珀酸分子结构相似，是琥 珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。
COO COO Oxalate
酶被抑制的程度取决于抑制剂与酶的亲和力 及与底物的相对比例。 可依据蓝色消褪的时间判断酶活性被抑制的 程度。
– 低速离心机(在6,000rpm以下) – 高速离心机(在25,000rpm以下) – 超速离心机(在30,000rpm以上)
目前商售大型超速离心机最高转速达100,000rpm， 相对离心力达803,000×g。
低速离心机
台式高速冷冻离心机
超速冷冻离心机
离心机转子
常用的离心机转子有三种：
离心机转子从静止状态加速旋转
– 如果颗粒密度＞周围介质的密度，则颗粒离开轴心方向
移动，即发生沉降；
– 如果颗粒密度＜周围介质的密度，则颗粒朝向轴心方向
移动，即发生漂浮。
在离心场中，作用于颗粒上的力主要有离心力Fc、 浮力FB和摩擦阻力Ff。
离心力
转速（revolutions per minute ，rpm）
肝脏
组织匀浆法
匀浆的方式 –手工匀浆
–机器匀浆：组织捣碎匀浆器
–超声匀浆：超声粉碎机
–反复冻融
实验步骤
1、肝糜液的制备： 取小白鼠一只，颈椎脱臼法处死，立即剖腹将肝脏 全部取出（为何选肝脏？），臵于研钵中，用生理 盐水洗净肝脏中血液。 用剪刀剪碎肝脏，充分研碎至糊状，然后分批加入 少量磷酸缓冲液，边加边磨，总共加入7ml。 （分几 次加入，每次加入后均需充分研磨。） 注意：此步一定要研磨充分（酶位于线粒体内膜 上）。 研至匀浆后倒入离心管中，离心4分钟(3000转/分)。 将上清液转入另一试管中备用。此即为含有琥珀酸 脱氢酶的肝糜液。
ห้องสมุดไป่ตู้
•The effect of a competitive inhibitor can be overcome with high concentrations of the substrate
离心技术
利用物体高速旋转时产生强大的离心力，使臵于旋 转体（离心机）中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从 而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离之目的。