毛细管电泳技术在检测分析中的应用
毛细管电泳技术在基因分析中的应用研究
毛细管电泳技术在基因分析中的应用研究前言近年来,科学技术的发展迅猛,其中毛细管电泳技术在基因分析方面的应用日益广泛。
毛细管电泳技术以其高灵敏度、高分辨率、高效能和适用于多样化样品等特点,在DNA测序、基因检测等方面表现出色,成为基因分析研究的重要手段之一。
一、毛细管电泳技术概述毛细管电泳技术是将分离物从毛细管的一端注入,经过电场的作用沿毛细管内壁移动,最终在另一端分离出来的技术。
毛细管电泳技术包括手性毛细管电泳、凝胶毛细管电泳、开放式毛细管电泳、可逆微波加热毛细管电泳等多种方法。
在基因分析方面,凝胶毛细管电泳是比较常见的一种方法,主要通过毛细管内填入凝胶或聚丙烯酰胺等凝胶物质作为固定相来进行分析。
二、毛细管电泳技术在DNA测序中的应用DNA测序是分子生物学中重要的技术,毛细管电泳技术对其有重要的促进作用。
毛细管电泳技术分离范围宽、分辨率高,还可以进行自动化操作。
使用垂直毛细管电泳仪进行DNA测序,可以使多少达到每日3万个样品。
其主要优点是可以通过电泳移动时间确定DNA序列,并且可以自动化进行操作,提高了工作效率和准确度。
三、毛细管电泳技术在基因检测中的应用毛细管电泳技术在基因检测方面的应用非常广泛,其检测方法简便、鉴定准确、速度快等特点受到广泛关注。
在基因检测方面,毛细管电泳技术的应用范围很广,在遗传病、肿瘤基因、传染病等方面都可使用。
常见的应用包括RFLP法、SSCP法、PCR-SSCP法、PCR-RFLP法等等,还可以结合DNA芯片技术实现高通量检测。
四、毛细管电泳技术在其他领域中的应用毛细管电泳技术不仅在基因分析领域中有广泛应用,也被应用在药物代谢学、生物化学、环境科学等领域。
例如毛细管电泳技术可以用于药物分析中的手性分离、环境监测中的污染物检测、食品安全领域中的食品检测等。
结语毛细管电泳技术在基因分析中的应用是当今生命科学领域研究的重要手段之一。
毛细管电泳技术具有高灵敏度、高分辨率、高效能及适用于多样化样品等特点,使之成为当前研究中的一项重要工具。
药物分析中的毛细管电泳法测定药物含量
药物分析中的毛细管电泳法测定药物含量毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE)是一种常用于药物分析的高效分离技术。
它基于药物在电场中的电荷迁移速率不同,通过毛细管内的电场驱动,实现对药物的定量分析。
本文将详细介绍药物分析中的毛细管电泳法测定药物含量的原理、方法和应用,以及该技术在药物分析中的优势。
一、原理毛细管电泳法测定药物含量,是利用毛细管的微小通道对药物进行分离和测量的一种分析技术。
它利用药物分子在电场作用下受到电荷的影响,从而在毛细管内发生电泳迁移,实现对药物的分离和定量测定。
其原理主要包括三个方面:1. 药物分子的电荷特性:药物分子可以分为带正电荷、带负电荷和无电荷的三类。
根据药物的电荷特性,调整毛细管内的电荷环境,使药物分子在电场中按照不同的电荷迁移速率进行分离。
2. 毛细管的表面电荷:毛细管内壁会带有一定的电荷,称为表面电荷。
表面电荷与药物分子的电荷有相互作用,影响药物在毛细管内的迁移速率。
3. 毛细管内的电场:在毛细管内施加电场,通过电泳迁移,使药物分子按照不同速率进行分离。
二、方法毛细管电泳测定药物含量的方法主要包括前处理、样品准备、色谱条件设置、电泳分离和定量测定等步骤。
下面将简要介绍这些步骤的具体操作:1. 前处理:对于复杂的样品,如血液、尿液等,需要进行前处理。
常用的前处理方法包括样品提取、样品净化等。
2. 样品准备:将提取的药物样品溶解于适宜的溶剂中,得到适宜的药物浓度。
3. 色谱条件设置:选择合适的色谱柱、毛细管和分离液,调整电泳分析的条件,如缓冲液的浓度、pH值等。
4. 电泳分离:将样品注入毛细管中,施加电场,使药物分子在毛细管内发生电泳迁移,实现对药物的分离。
5. 定量测定:通过荧光检测、紫外吸收等方法,测定药物的峰面积或峰高,从而确定药物的含量。
三、应用毛细管电泳法作为一种高效的药物分析技术,广泛应用于药物研发、生产和质量控制等领域。
药物分析中的毛细管电泳技术
药物分析中的毛细管电泳技术毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis,简称CE)是一种基于电动力的分离技术,被广泛应用于药物分析领域。
本文将介绍毛细管电泳技术在药物分析中的原理、应用和发展前景。
一、原理毛细管电泳技术的基本原理是利用电场作用下的离子迁移和分离。
这种技术借助于毛细管的高表面积和对电荷敏感性,通过调节电压和电流,使样品中的离子在毛细管中迁移,并在离子迁移速度不同的情况下实现分离。
二、应用1. 药物纯度检测毛细管电泳技术在药物纯度检测中具有很大优势。
通过测量样品中成分的峰高和面积,可以确定药物的含量和纯度。
毛细管电泳技术还可以检测含有多个成分的混合物,提高药物的纯度和质量。
2. 药物代谢研究毛细管电泳技术在药物代谢研究中也有广泛应用。
毛细管电泳技术可以快速分离和定量药物代谢产物,并提供与其他分析方法相比更高的分辨率和灵敏度。
这对于研究药物的代谢途径、代谢产物的生成和药物代谢动力学具有重要意义。
3. 药物配伍研究在多种药物联合使用时,毛细管电泳技术可以用于药物之间的相互作用研究。
通过测量药物在毛细管中迁移的速度和峰形,可以揭示药物之间的相互作用机制,为药物配伍的合理应用提供科学依据。
三、发展前景毛细管电泳技术在药物分析领域的应用前景广阔。
随着仪器设备的改进和方法的发展,毛细管电泳技术的分离效率和灵敏度得到提高,对药物分析的应用范围也越来越广泛。
未来,毛细管电泳技术有望在药物分析中发挥更重要的作用,如提高新药的研发效率、分析药物的药动学特性等。
总结:毛细管电泳技术作为一种快速、高效的药物分析方法,已经在药物纯度检测、药物代谢研究和药物配伍研究等方面取得了显著的应用效果。
在未来,随着技术的进一步发展和改进,毛细管电泳技术将在药物分析领域发挥更重要的作用,为药物研发和质量控制提供强有力的支持。
说明毛细管电泳特点及应用
说明毛细管电泳特点及应用
毛细管电泳是一种高效液相色谱技术,其基本原理是利用电场将带电粒子在毛细管中的移动速率和荷电量的差异进行分离和富集。
毛细管电泳具有高分离效率、快速分离、小量样品、自动化程度高等特点,已经成为了化学、生物、环境学等领域的一个重要分析工具。
其主要应用领域和特点如下:
1.分离生化分子
毛细管电泳可以用于分离和富集DNA、RNA、蛋白质、糖类和小分子有机物等生物分子。
这些生物分子在酸碱性、水解、氧化还原等条件下有不同的化学性质和电荷性质,可以被毛细管电泳技术精确分离和定量。
例如在DNA分离和定量方面,毛细管电泳已经成为PCR扩增产物检测、基因测序、DNA指纹鉴定等分子生物学技术中的重要手段。
2.分析环境污染物
毛细管电泳可以用于环境监测和食品安全检测等领域,可以对水、空气、土壤和食品中的有机和无机污染物进行快速准确定量分析。
例如利用毛细管电泳技术可以分析环境中的氨、硝酸盐、荧光增白剂、PESTICIDE 等有害物质含量,以及酒类中的苯甲酸、乙酸等有害物质。
3.分析药品和代谢产物
毛细管电泳可以快速、灵敏地分离和鉴定药品和代谢产物,具有药动学和毒理学研究的重要意义。
毛细管电泳技术节省反应时间,减少实验操作时间,可对液-液、液-固、固-液等反应进行分离和分析,得到精确的数据和结果。
如利用毛细管电泳技术,可以分析身体内的有机酸、氨基酸、代谢产物等物质。
总之,毛细管电泳技术在化学分析和生物分析中均有广泛应用,且已成为学术研究和工业生产的一种重要分离分析手段。
毛细管电泳技术在化学分析中的应用
毛细管电泳技术在化学分析中的应用随着科学技术的不断进步,越来越多的新技术应用于化学分析领域。
其中,毛细管电泳技术是一种非常有潜力的技术,其应用广泛,可以应用于食品、医药、环境等多个领域,极大地提高了化学分析的效率和准确性。
下面,本文将从毛细管电泳技术的原理、优点、应用以及发展前景等方面,分析其在化学分析中的应用。
一、毛细管电泳技术的原理毛细管电泳技术是基于毛细管内样品分子的电荷和尺寸的差异进行分离的一种方法,其分离原理是利用电场力、液相流动力和溶剂静电引力等相互作用力,将带电分子分离开来的过程。
其中,毛细管电泳分离过程是在毛细管内部一个微小的空间内进行的,这个微小的空间称为分离柱。
分离柱中填充有分离介质,通常使用胶体硅、聚丙烯酰胺凝胶、聚合物微球等。
当外加高压电场作用于分离柱时,其他因素不影响下,分别具有不同电荷的分子将因其电荷大小而在分离柱内发生移动,这样就完成了样品分析。
二、毛细管电泳技术的优点毛细管电泳技术在化学分析中的应用范围非常广泛,具有以下优点:1.分离效率高:毛细管电泳技术分离效果很好,可以分离出电泳物质的同分异构体和混杂物,从而使分析的结果更加准确可靠。
2.快速分析:毛细管电泳技术可以在短时间内完成分析,不仅提高了分析效率,而且缩短了分析时间。
3.高选择性:毛细管电泳技术在分离和检测过程中,只会对一些特定的物质进行分离,因此,在检测过程中可以不用去关注所有的物质,从而可以降低实验成本和实验时间。
4.成本低:毛细管电泳技术不需要使用昂贵的设备,其使用成本比较低,适合化学实验室使用。
三、毛细管电泳技术在化学分析中的应用非常广泛,主要包括以下几个方面:1.食品领域:毛细管电泳技术可以用于饮料、果汁、啤酒等中硫酸盐和氰化物的检测和分析。
2.环境领域:毛细管电泳技术可以用于环境污染物的检测和分析,如有机污染物、金属离子等。
3.医药领域:毛细管电泳技术可以用于药物的研究和分析,包括药物分子的结构、成分、质量等。
品检中的毛细管电泳分析技术
品检中的毛细管电泳分析技术毛细管电泳分析技术是一种用于化学、生物和环境领域的重要分析方法。
它基于样品在电场中的迁移速度差异来分离和检测不同化学物质的方法。
在品质检验中,毛细管电泳分析技术被广泛应用于产品质量的监控和分析中。
本文将对毛细管电泳分析技术在品质检验中的应用进行详细介绍。
毛细管电泳分析技术在品质检验中的应用主要体现在对产品中各种成分的分离和定量分析上。
通过毛细管电泳分析技术,可以快速准确地检测出产品中的各种有机和无机化合物,如酸、碱、重金属、农药和药物等。
这对于确保产品的质量和安全性非常重要。
毛细管电泳分析技术在品质检验中还可以用于表征产品的特性和性能。
例如,在食品行业,通过毛细管电泳分析技术可以检测食品中的营养成分、添加剂和污染物,从而评估食品的营养价值和安全性。
毛细管电泳分析技术还可以用于药物的质量控制,确保药品的纯度和稳定性。
毛细管电泳分析技术在品质检验中的应用还包括对产品中杂质的检测和分析。
在制药和化妆品行业中,为了确保产品的质量,需要对产品中的杂质进行分析和识别。
毛细管电泳分析技术以其高分离效果和灵敏度,在检测产品中微量杂质方面具有突出优势。
通过毛细管电泳分析技术,可以对杂质进行定性和定量分析,并找出潜在的问题。
毛细管电泳分析技术还可以用于产品质量问题的溯源和调查。
当产品质量问题发生时,需要追溯问题的起源和原因。
通过毛细管电泳分析技术,可以对产品进行全面的分析和比对,找出问题的根源。
这有助于制定相应的改进措施,提高产品的质量和安全性。
总之,毛细管电泳分析技术在品质检验中具有广泛的应用前景。
它可以对产品的成分、特性、杂质以及质量问题进行全面而准确的分析,保障产品的质量和安全性。
随着科技的进步和技术的不断完善,毛细管电泳分析技术将进一步发展,并在品质检验中扮演更重要的角色。
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用摘要毛细管电泳技术又称为高效毛细管电泳。
作为一种新的分离分析技术,以其高效,快速,低实验消耗等优点,受到了广泛重视,而其在药物分析中的应用得到迅速的发展。
在原料分析中的中药材鉴别和质量控制,中药有效成分的分离与测定和中成药制剂。
而在西药复方制剂中,广泛用于解热镇痛药、抗组胺药、消炎药和止咳药,降压药和抗生素、合成抗菌剂及生物技术产品等药物和制剂的分离,鉴定和分析及其对手性分子的拆分,基于手性主—客体络合的毛细管电泳手性拆分,基于手性胶束增溶的毛细管电泳手性拆分和基于蛋白质亲和的毛细管电泳手性拆分,还有临床用药中,都显示了其高效,快速的特点。
毛细管电泳技术正广泛用于药物分析的各个相关的部分中,正越来越受到人们的重视。
AbstractCapillary electrophoresis technology called high performance capillary electrophoresis. As a new kind of separation and analysis technology, with its rapid, efficient, low consumption advantages of experiment was Received widely attention, and its application in pharmaceutical analysis is rapid development. The analysis of Chinese herbal medicine in raw material identification and quality control, the TCM separation and determination and proprietary Chinese medicine preparations. But in western medicine compound preparations, widely used in antipyretic analgesics, the antihistamine drugs, expectorant and cough, antihypertensives and antibiotics, synthetic antibacterial agent and biotechnology product such drugs and preparation of separation, appraisal and analysis and the opponent of chiral molecule split, based on chiral Lord - object complexation of capillary electrophoresis chiral resolution, based on chiral dissociation of increase soluble adopted capillary electrophoresis chiral separation and based on protein affinitive capillary electrophoresis chiral resolution, and clinical medicine, shows its high efficiency, fast characteristic. Capillary electrophoresis technology is widely used in pharmaceutical analysis of each relevant sections, are becoming more and more attention by people.关键词:毛细管电泳技术药物分析应用Keywords: Capillary electrophoresis drug analysis application前言毛细管电泳(CE) 又称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),它以弹性石英毛细血管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分的淌度和分配行为上的差别进行分离和分析。
毛细管电泳法的原理和应用
毛细管电泳法的原理和应用1. 原理毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE)是一种基于电场作用下离子在毛细管中迁移的分离技术。
其原理基于离子在电场中带电迁移速度与其电荷量、电场强度以及溶液介质的性质相关的事实。
毛细管电泳法通过在毛细管中施加电场,利用分子的电荷差异和大小来实现分离物质的目的。
1.1 分离机制毛细管电泳法的分离机制主要包括以下几个步骤:1.进样:待测样品经过电泳柱,在毛细管中形成等电流聚焦带。
2.分离:应用电场,待测物质开始在毛细管内移动,根据分子的电荷和尺寸差异,分离成不同的带电物质。
3.检测:通过检测器对不同迁移距离的带电物质进行监测和记录。
1.2 主要影响因素影响毛细管电泳分离效果的主要因素包括:•电场强度:电场强度越高,迁移速度越快,但也容易产生电泳柱壁的热效应。
•pH 值:溶液的pH 值会影响离子的电荷状态,从而影响其迁移速度。
•温度:温度的变化会影响毛细管电泳的分离效果,通常需要控制温度来确保数据的可靠性。
2. 应用领域毛细管电泳法在许多领域中得到了广泛的应用,下面列举了其中的几个主要应用领域:2.1 生物医药领域•药物分析:毛细管电泳法可以用于药物代谢产物分析、毒性物质筛选和药物质量分析等。
•蛋白质分析:毛细管电泳法对于蛋白质的分析具有高分辨率和高灵敏度的特点,被广泛应用于蛋白质药物的质量控制和结构研究等方面。
2.2 环境监测领域•水质监测:毛细管电泳法可以用于水质中有机和无机物质的分析,可用于环境污染监测和水质安全评价等。
•大气污染物监测:毛细管电泳法可以用于大气中挥发性有机物质(VOCs)和颗粒物的分析,对于大气污染物的来源和分布有重要作用。
2.3 食品安全领域•农药残留分析:毛细管电泳法可以用于食品中农药残留的检测,对于保证食品安全和农产品质量具有重要意义。
•食品添加剂分析:毛细管电泳法可用于食品添加剂的定性和定量分析,用于食品质量控制和标签声明的验证等。
毛细管电泳法
毛细管电泳法简介毛细管电泳法是一种常用于分离和检测化学物质的分析技术。
它基于样品在电场作用下在毛细管中的迁移速度的差异,利用电泳现象进行分离。
该方法具有分离效果好、分析速度快、样品消耗少等优点,被广泛应用于生物、环境、食品等领域的分析研究。
原理毛细管电泳法的基本原理是利用电场作用下带电粒子在毛细管中的迁移速度差异分离物质。
当样品通过直径较小的毛细管时,由于电场的作用,带电物质会在毛细管中产生电泳迁移。
迁移速度快的物质会较早到达检测器位置,而迁移速度慢的物质则会滞留在毛细管中,从而实现了物质的分离。
毛细管电泳法主要利用了物质在电场、毛细管中的迁移速度与其电荷、粒径、溶剂性质等因素之间的关系。
其中,电荷是最重要的因素之一。
毛细管电泳法可分为两种类型:正交电泳和非正交电泳。
正交电泳主要用于带电物质的分离,而非正交电泳则用于非带电物质的分离。
操作步骤1. 准备工作在进行毛细管电泳实验之前,需要准备好以下实验器材和试剂:•毛细管电泳仪•毛细管•电解质缓冲液•样品溶液2. 设置电泳条件根据实验需要,设置好合适的电场强度、电解液pH值和缓冲液浓度等参数。
这些参数的选择对于实验结果的准确性和分离效果的好坏至关重要。
3. 毛细管填充将毛细管浸入缓冲液中,通过电力作用使缓冲液进入毛细管,直至毛细管完全填充。
4. 样品进样通过微量注射器将样品溶液缓慢注入毛细管,注意避免气泡的产生。
5. 开始电泳将毛细管两端插入正、负电极中,开启电源,开始电泳过程。
6. 结果分析根据实验需要,可以选择不同的检测方法进行结果分析,如紫外检测、荧光检测等。
应用领域毛细管电泳法广泛应用于生物、环境、食品等领域的分析研究。
具体的应用包括:1.蛋白质分析:毛细管电泳法可用于蛋白质的分离和定量分析,对于药物研发、生物学研究等具有重要意义。
2.DNA分析:毛细管电泳法可以用于DNA序列分析、基因突变检测、DNA测序等领域,对于遗传学研究、法医学等具有重要意义。
毛细管电泳分离技术在食品检测中的应用
毛细管电泳分离技术在食品检测中的应用随着现代化生活方式的改变,人们的饮食习惯也在发生着变化,越来越多的人选择食用外来品种或加工食品。
然而,这也带来了一系列的安全隐患。
为了保障公众的食品安全,食品检验已经成为一个非常重要的事项。
而毛细管电泳分离技术,凭借其高效、快速、灵敏的优势,在食品检测中得到了广泛应用,成为食品检测领域的一颗明珠。
毛细管电泳分离技术是一种基于电动力学吸引作用实现离子分离的方法。
它借助浸渍有电解液的毛细管,通过电场的作用,将离子从样品中逐一分离,然后检测各离子的运动速度以确定其化学性质。
相对于传统的高效液相色谱(HPLC)及气相色谱(GC)检测技术,毛细管电泳分离技术更加快速、高效,并且可以实现极小量的样品分析。
毛细管电泳分离技术在食品检测中最主要的应用是分析食品中的添加剂、农药残留、重金属及微生物等有害成分。
其中,添加剂的检测是毛细管电泳分离技术的重点应用领域之一。
目前,食品添加剂已经成为食品制造过程中不可或缺的一部分。
但是,在黑心厂家的欺诈下,一些非法添加剂如甲醛、苏丹红等危害健康的物质被加入到食品中。
针对这种情况,毛细管电泳分离技术可以对添加剂进行精确的检测,并确认添加剂是否符合标准。
另一方面,毛细管电泳分离技术还可以用于对化妆品中的化学成分进行分析。
目前市面上的化妆品品种众多,但并不是每一种都符合安全标准。
很大一部分原因是一些化妆品成分对人体健康有危害。
这种情况下,毛细管电泳分离技术可以对化妆品成分进行快速准确的鉴别,从而保障人们的健康权益。
在农业领域,毛细管电泳分离技术也是一种应用广泛的分析方法。
例如,它可以用于检测农药及肥料中的各种有害物质,从而确保农产品的质量和安全。
同时,毛细管电泳分离技术还可以用于检测各种微生物,从而保证农产品的卫生质量。
总之,毛细管电泳分离技术是一种非常有前途的分离技术,它在食品检测领域的应用已经得到了广泛的肯定和认可。
通过对添加剂、农药、重金属、微生物等有害成分的精确检测,毛细管电泳分离技术对于提升食品安全质量至关重要。
药物分析中的毛细管电泳法发展
药物分析中的毛细管电泳法发展近年来,毛细管电泳法在药物分析领域中得到了广泛应用和发展。
毛细管电泳法是一种基于药物分子在电场中迁移速率的差异来进行分离和检测的技术。
它具有操作简便、分离效果好、分析速度快等优点,并且可以适用于各种药物分析的需求。
本文将从毛细管电泳法的原理、应用及发展前景等方面进行探讨。
一、毛细管电泳法的原理毛细管电泳法是基于毛细管对带电分子的选择性迁移来实现分离和检测的。
在毛细管电泳法中,主要利用了电双层效应和溶剂流体力学效应。
当样品溶液被注入到带电的毛细管中,带电粒子在电场的作用下迁移,由于不同药物分子的电荷量和分子结构不同,它们在电场中的迁移速率也不同,从而实现了分离。
同时,通过控制电场强度和溶液流速等参数,还可以实现对分离效果和灵敏度的调节。
二、毛细管电泳法在药物分析中的应用1. 药物成分分析:毛细管电泳法可以用于药物成分的分离和定量分析。
通过调节毛细管电泳法的分离条件,可以实现对药物中各个成分的分离并进行定量检测。
这对于药物的质量控制和药物研发具有重要意义。
2. 药物代谢物分析:毛细管电泳法也可以用于药物代谢物的分离和分析。
药物在人体内经过代谢后,会产生各种代谢产物。
通过毛细管电泳法的分离作用,可以将代谢产物从药物中分离出来,并进行鉴定和定量分析,有助于了解药物的代谢规律和代谢途径。
3. 药物残留量检测:毛细管电泳法可以用于药物残留量的检测。
在农药使用和食品加工过程中,会存在一定的农药残留量。
毛细管电泳法可以将农药残留物与食品基质分离开来,并进行定量检测,有助于保障食品安全。
三、毛细管电泳法发展前景展望毛细管电泳法具有多种优点,如分离效果好、操作简便、分析速度快等,因此在药物分析领域中具有广泛的应用前景。
随着科学技术的不断进步和技术的不断更新,毛细管电泳法将更加成熟和完善,其应用范围也将进一步拓展。
例如,近年来,一些新型的毛细管电泳仪器和柱材料的开发推动了毛细管电泳法在药物分析中的应用,使其在分离效果和分析速度上有了更大的突破。
药物分析中的毛细管电泳法测定药物结构
药物分析中的毛细管电泳法测定药物结构毛细管电泳法是一种常用的药物分析技术,可用于测定药物结构。
本文将介绍毛细管电泳法的原理、操作步骤、应用领域和优势等相关内容。
一、毛细管电泳法的原理毛细管电泳法是一种基于电动力和电荷选择性的分离技术,通过在毛细管中施加电场,使带电的药物分子在电场作用下沿着毛细管迁移,从而实现药物分离和结构测定。
毛细管材料、电解液组成、电场强度和药物分子的特性等因素都会影响分离效果和测定结果。
二、毛细管电泳法的操作步骤1. 毛细管准备:选择合适的毛细管,常用的有硅胶毛细管、聚合物毛细管和玻璃毛细管等,根据不同的药物性质选择合适的毛细管材料。
2. 电解液准备:根据药物的电荷性质和分离要求选择合适的电解液组成,常用的有缓冲液、有机溶液和离子对等。
3. 样品处理:将待测试的药物样品进行处理,通常包括样品前处理和样品标记等步骤,以增强分离效果和信号检测。
4. 注射样品:将经处理的药物样品通过注射器等装置注入到毛细管中,保持注射速度稳定。
5. 施加电场:连接电泳设备,根据药物分子特性和需要进行电场强度的设定。
6. 结果分析:根据电泳的运行时间、药物分离的位置和检测信号等信息,进行结果分析和药物结构测定。
三、毛细管电泳法的应用领域毛细管电泳法在药物分析领域有广泛的应用。
主要应用于药物结构分析、药物成分分离和纯度测定等方面。
它具有检测迅速、高分辨率、需样品量少和方法简便等优点,适合于复杂样品和微量样品的分析。
四、毛细管电泳法的优势1. 高分离效果:毛细管电泳法能够有效地分离药物分子,尤其适用于复杂样品的分析。
2. 快速分析:相比传统的色谱技术,毛细管电泳法具有分离速度快的优势,能够提高分析效率。
3. 小样品量:毛细管电泳法对样品量的要求较低,适合于微量样品的分析。
4. 简便易行:操作步骤相对简单,不需要复杂的样品准备和设备操作。
综上所述,毛细管电泳法是一种重要的药物分析技术,其原理、操作步骤、应用领域和优势使其成为药物结构测定的有力工具。
毛细管电泳的基本原理及应用剖析
毛细管电泳的基本原理及应用剖析毛细管电泳(CE)是一种基于电场作用的色谱分离技术,广泛应用于生物学、医药、环境、食品等领域。
它通过在毛细管中施加电场,利用样品中的带电粒子在电场作用下发生迁移分离,最终在检测器上形成峰。
毛细管电泳具有分离效率高、样品消耗量少、实验时间短等优点,因此被广泛研究和应用。
电动力作用是指在电场作用下,带电粒子会迁移,其迁移速率与电荷大小、电场强度和粒子大小有关。
这个原理形成了毛细管电泳的分离能力。
在毛细管电泳中,带有不同电荷的离子在电场作用下会迁移到不同的位置,实现了分离。
电渗流作用是指在电场作用下,电解质溶液中的离子在毛细管内部形成一个电化学双层,从而形成了定向的流动,这种流动称为电渗流。
电渗流的作用是维持溶液流动的速度和方向,使得样品能够快速地通过毛细管。
1.生物学:毛细管电泳在DNA分析、蛋白质分析和细胞生物学中有重要应用。
例如,DNA测序、突变分析和基因检测等都可以通过毛细管电泳实现。
此外,毛细管电泳还可以用于血清蛋白质分析,从而帮助研究疾病的诊断和治疗。
2.医药:毛细管电泳在药物分析中有广泛的应用。
例如,在药物代谢研究中,毛细管电泳可以用于分析药物及其代谢产物。
此外,毛细管电泳还可以用于药物纯度和含量的测定,以及药物的质量控制和研发。
3.环境:毛细管电泳在环境监测中有重要的应用。
例如,通过毛细管电泳可以分析水、土壤和大气样品中的有机物、金属和其他污染物。
此外,毛细管电泳还可以用于监测和分析环境中的微量物质,如重金属、农药残留、有机污染物等。
4.食品:毛细管电泳在食品检测和质量控制中有广泛应用。
例如,可以利用毛细管电泳对食品中的营养成分、添加剂和农药进行分析和检测。
此外,也可以通过毛细管电泳对食品中的毒素和致病菌进行检测,确保食品的安全性。
综上所述,毛细管电泳是一种重要的色谱分离技术,其基本原理是利用电场作用使带电粒子在毛细管中迁移分离,并且具有分离效率高、样品消耗量少等优点。
毛细管电泳技术的原理及应用
毛细管电泳技术的原理及应用毛细管电泳技术(capillary electrophoresis, CE)是一种基于分子运动速度和电荷的分离技术,它可以对极为细微和复杂的样品进行非常快速、高效、高分辨率的分离,因此在生命科学、医学、环境监测以及法医鉴定等领域得到了广泛应用。
CE技术的基本原理是,将带电的分析物经过一定长度的毛细管中运动,然后按照分子电荷大小、分子尺寸、形状、亲水性等物理化学性质,在电场作用下发生运动,进而得到不同的分离柱上电泳峰。
因此,CE技术具有以下几个特点:1.高分辨率:CE技术是基于分子各自的电荷和分子体积来实现分离的,与传统的凝胶电泳、色谱等技术相比,具有更高的分离能力和更高的分辨率。
可以分离出一些极为相似化学性质的化合物,如绝对立体异构体、各种同分异构体、杂环化合物、天然产物等。
2.快速分离:CE技术分离速度快,通常只需要数分钟至数小时内就可以完成。
3.微量样品:CE技术只需要微量的样品,通常在纳升至皮克摩尔级别内,可以大幅节省样品量,减少开支。
4.广泛应用:CE技术可以广泛用于生命科学、医学、药学、环境系、农业等多种领域,如蛋白质分离、核酸分离、药物分析、糖类分析、环境监测等。
应用领域1:分离和鉴定生化大分子生命科学领域对生化大分子(如蛋白质和核酸)的检测、分离和鉴定,起着极其重要的作用。
传统方法往往采用相对陈旧的凝胶电泳、高效液相色谱等方法,分离速度慢、分辨率低、相对而言较为复杂。
而毛细管电泳克服了这一问题,可以在很多底物条件下,将生化大分子在极短的时间内分离出来。
应用领域2:药物分析随着社会不断进步,人们对药物质量越来越重视。
毛细管电泳技术的使用就可以大大提高药品的品质。
它可以轻易地实现活性成分的分离和标准控制的设置,确保了药品的控制和定量性准确。
应用领域3:环境监测环境监测是社会上一个越来越受到重视、越来越重要的领域。
CE技术在环境监测上,可以对空气污染、水污染分子和有害物质的检测、鉴定等方面发挥重要作用。
毛细管电泳技术在蛋白质分析中的应用
毛细管电泳技术在蛋白质分析中的应用一、引言蛋白质是生物体内功能最为重要的分子之一,对于了解细胞的生物化学过程以及疾病的发生机制具有重要意义。
因此,研究蛋白质的组成、结构和功能成为科学家们的关注焦点。
毛细管电泳技术作为一种高效、灵敏、分离能力强的方法,成为蛋白质分析中的重要手段。
二、毛细管电泳技术的原理毛细管电泳技术是基于蛋白质在电场中的迁移速度差异实现的。
其基本原理是利用电场作用下,蛋白质离子在毛细管中迁移的速度差异,以达到分离的目的。
毛细管电泳技术可以根据蛋白质的等电点、分子质量和电荷性质等特征,进行选择性的分离和定量分析。
三、毛细管电泳技术在蛋白质分析中的应用1. 等电点聚焦等电点聚焦是毛细管电泳技术中常用的一种分离方法。
通过调节pH梯度和电场强度,使得蛋白质在电场中迁移速度减慢并最终停留在等电点位置。
利用等电点聚焦技术,可以实现复杂混合样品中蛋白质的高效分离和富集。
2. 表面修饰毛细管电泳表面修饰毛细管电泳是一种改善毛细管电泳分析效果的手段。
通过在毛细管内壁涂覆一层具有特定性质的物质,可以在一定程度上调节毛细管的分离能力和选择性。
表面修饰毛细管电泳技术能够提高蛋白质的分离效果,并且具有较好的重复性和稳定性。
3. 应用实例毛细管电泳技术在蛋白质分析中已经发挥了重要作用。
例如,利用毛细管电泳技术可以对血浆蛋白质进行快速和高效的分离与定量,有助于了解疾病发生机制和诊断。
另外,毛细管电泳还可以用于蛋白质修饰的研究,如糖基化、磷酸化等。
这些应用实例充分展示了毛细管电泳技术在蛋白质分析中的重要性和广泛适用性。
四、结论毛细管电泳技术作为一种高效、灵敏、分离能力强的分析方法,在蛋白质分析中发挥着重要作用。
其原理简单、操作方便,可以应用于复杂混合样品的分离和定量分析。
随着技术的不断发展与成熟,毛细管电泳技术将进一步拓展其在蛋白质分析领域的应用前景,为蛋白质研究提供更多有力支持。
毛细管电泳技术在食品检测中的应用
K y wo d : a i a y e e r p o e i ;s p r to a t r e r s c p l r l to h r ss e a a i n p t e n;f o e e t n; p l a i n;e h i u l o d d t c i a p i to t c n q e o c
和缓 冲溶液 组 成 外 , 通 过 其 他 因 素 如 聚 合 物 网络 、 不
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已在 生命科 学 、 物工程 、 生 医学药 物 、 环境 保护和 食
品检 验等 领域 中显示 出极其 重要 的应用前景 口 。近 些 ]
年 来 , E仪 器 的硬件 、 件 、 法 都 有长 足 的进 展 , C 软 方 芯
片毛细 管技术 的 出现反应 了分析 仪器最 终发展方 向是 微 型化 和集 成化 , 品 的前处 理 、 样 富集 、 分离 测 定 等都
可在 芯片上 自动化 完成 。
p 梯度或另 一分配 相 对分 离条 件 的影响 。通 常 把它 H 看成 其它各 种分离 模式 的母 体 。如 Ab eft hM. d l t 用 aa C E测定丙 型病毒 性 肝炎 的特 殊 分子 标记 , 建 立相 Z 并 应 的测定方法[ e i c o gc e 3 ha h n h n使 用 C E测定 铜 的 — Z 防腐蚀 抑制剂 并建 立了相应 的测定 方法 。 ] 1 1 2 毛 细管胶束 电动 色谱 ..
食 品成 分 的复杂 性 、 多Hale Waihona Puke 性 对食 品分 析技 术 和方
法提 出 了很 高 的要 求 。由于 C E具 有 多种分 析模 式和
检测 方法 , 以满 足食 品复杂 成分 的分析 要求 ,C 可 E在 食 品分析方 面 的应 用 日趋 广泛嘲 。
毛细管电泳技术在食品安全检测中的应用研究
毛细管电泳技术在食品安全检测中的应用研究近年来,随着食品安全问题的日益严重,越来越多的科研人员开始关注毛细管电泳技术在食品安全检测中的应用。
毛细管电泳技术是一种高效、快速、灵敏、经济的分离和检测方法,具有高分辨率、高灵敏度、高选择性、操作简单等特点,被广泛应用于食品、医药、环保等领域。
毛细管电泳技术在食品领域的应用主要涉及到食品成分分析、农药残留检测、毒素快速检测等。
下面将分别从这三个方面来论述毛细管电泳技术在食品安全检测中的应用研究。
一、食品成分分析食品成分分析是食品科学的重要研究方向之一。
食品中不同成分的含量分布直接关系到食品的质量,因此对各种成分的快速、准确、经济的检测方法的研究十分重要。
毛细管电泳技术能够分离几乎所有具有电荷的化合物,包括有机酸、氨基酸、碳水化合物等,具有高分辨率和快速分离等优势,可以对食品中复杂的成分进行分析。
例如,在研究奶制品中脂肪酸的组成和分布时,传统的色谱质谱方法需要经过脂肪酸甲酯化反应和萃取等多个步骤,操作繁琐、耗时长,而毛细管电泳技术则能够直接对脂肪酸进行定量和分离,操作简单快捷,对于研究奶制品中脂肪酸组成的分布、加工技术、储存条件等具有显著的优势。
另外,毛细管电泳技术还可用于食品中色素的定性和定量分析,能够对不同来源、不同成分的食品色素进行快速而准确的鉴定和分离,这对于食品质量的控制、产品研发和市场竞争具有重要的意义。
二、农药残留检测农药在食品生产中得到广泛应用,经常存在于食品中,常常会影响到人们的健康。
因此,农药残留检测是保障食品安全的重要手段之一。
传统的农药检测方法通常采用色谱质谱技术,虽然准确性高,但耗时较长、操作复杂,不利于快速检测。
毛细管电泳技术能够对草甘膦、乙草胺、多菌灵等农药残留进行快速、准确的检测,且无需复杂的前处理。
有研究表明,毛细管电泳技术能够快速检测苯嘧磺隆、氯丹、马拉硫磷、敌敌畏等农药残留,同时能够对不同来源、不同种类的食品进行快速筛查,对农产品安全质量监管提供了重要的技术支撑和保障。
毛细管电泳在药物分析中的应用
毛细管电泳在药物分析中的应用随着药物研发和制造的进一步发展,药物分析成为保证药物质量和安全性的重要环节之一。
毛细管电泳作为一种高效、快速、高灵敏度的分析技术,逐渐应用于药物分析领域。
本文将介绍毛细管电泳在药物分析中的应用,并探讨其在药物分析中的优势和挑战。
一、毛细管电泳的原理和基本步骤毛细管电泳是利用电流作用下的毛细管中离子迁移行为实现分离的一种分析方法。
它基于毛细管中的电动流动理论,通过施加电场将药物样品带到具有特定填充物的毛细管中进行分离。
毛细管电泳的基本步骤包括:样品进样、电泳分离、检测和数据处理等。
二、毛细管电泳在药物分析中的优势1. 高分离效率:毛细管电泳具有很高的分离效率,能够有效地将复杂的药物样品分离,提高分析的准确性。
2. 速度快:毛细管电泳是一种快速分析技术,通常只需几分钟到几十分钟就可完成分析,大大缩短了分析时间。
3. 灵敏度高:毛细管电泳具有很高的灵敏度,能够检测到微量的药物成分,对于药物分析中需要极低浓度检测的情况非常有优势。
4. 样品消耗少:毛细管电泳的样品消耗非常小,对于宝贵的药物样品的分析非常适用。
5. 环境友好:毛细管电泳是一种无或少有有机溶剂的分析技术,相对于传统的高效液相色谱等技术,对环境的影响更小。
三、毛细管电泳在药物分析中的应用1. 药物成分分析:毛细管电泳可用于药物成分的分析和检测,如对药物中各种成分进行定性和定量分析。
2. 药物质量评价:毛细管电泳可用于药物质量评价,对于分析药物的纯度、杂质等方面具有重要作用。
3. 药物代谢研究:毛细管电泳能够对药物代谢产物进行分析,深入研究药物在体内的转化过程和代谢途径,为药代动力学和药效学提供有力支持。
4. 生物样品分析:毛细管电泳可用于生物样品(如血液、尿液等)中药物的定性和定量分析,为生物体内药物浓度和代谢过程的研究提供便利。
5. 法药品质控制:毛细管电泳在药品质控中的应用越来越广泛,能够对药物中的活性成分进行分析和监测,保证药物的质量和安全性。
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2011-12-31 毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用分析化学毛细管电泳技术及其在检测分析中的应用摘要:毛细管电泳技术(CE)作为现今一种主要的分析技术,凭借其高效、灵敏、快速、设备简单、广泛适用性等特点,广泛应用于各个领域。
本文简要概述了CE技术的原理及特点,并简述了它在环境分析、食品分析、药物分析、生物大分子分析等各个领域的应用。
关键词:毛细管电泳;分析;应用1.毛细管电泳技术简介1.1 产生与发展毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)是一种在电泳技术的基础上发展的一种现代分离技术。
电泳技术作为一种分离技术已有近百年历史,1937 年A.Tiselius首先提出:传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热。
1967年,Hjerten最先提出了毛细管电泳的雏形,即在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳。
但他并没有完全克服传统电泳的弊端。
直至1981年Jorgenson和Lukacs提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 这时现代毛细管电泳技术真正产生。
1984 年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支:胶束电动毛细管色谱(MEKC)。
1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。
同年,Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。
近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
毛细管电泳技术兼有高压电泳及高效液相色谱等优点,其突出特点是:(1)所需样品量少、仪器简单、操作简便。
(2)分析速度快,分离效率高,分辨率高,灵敏度高。
(3)操作模式多,开发分析方法容易。
(4)实验成本低,消耗少。
(5)应用范围极广。
自1988年出现了第一批毛细管电泳商品仪器,短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求,得到了迅速的发展。
1.2 毛细管电泳技术的简单原理毛细管电泳的基本装置是一根充满电泳缓冲液的毛细管(如图1),和与毛细管两端相连的两个小瓶。
微量样品从毛细管的一端通过“压力”或“电迁移”进入毛细管。
电泳时,与高压电源连接的两个电极分别浸人毛细管两端小瓶的缓冲液中。
样品朝与自身所带电荷极性相反的电极方向泳动。
各组分因其分子大小、所带电荷数、等电点等性质的不同而迁移速率不同,依次移动至毛细管输出端附近的光检测器,检测、记录吸光度,并在屏幕上以迁移时间为横坐标,吸光度为纵坐标将各组分以吸收峰的形式动态直观地记录下来。
图 1图 21.3毛细管电泳技术的分离模式(1)毛细管区带电泳(Capillary ZoneElectrophoresis, CZE)用以分析带电溶质。
为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层。
CZE 是最基本也是最常见的一种操作模式,应用范围最广,可用于多种蛋白质、肽、氨基酸的分析。
(2)胶束电动毛细管色谱(MicellarElectrokinetic Capillary Chromatography, MECC)在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸纳,形成胶束,被分离物质在水和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移,达到分离。
MECC 是唯一一种既能用于中性物质的分离又能分离带电组分的CE模式。
(3)毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis, CGE)在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶。
CGE 分凝胶和无胶筛分两类,主要用于DNA、RNA 片段分离和顺序、PCR产物分析及蛋白质等大分子化合物的检测。
(4)亲和毛细管电泳,在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基,以亲和力的不同达到分离。
可用于研究抗原-抗体或配体-受体等特异性相互作用。
(5)毛细管电色谱,(Capillary Electrochromatography, CEC)是将高效液相色谱(HPLC)的固定相填充到毛细管中,或在毛细管内壁涂布固定相,以电渗流为流动相驱动力的色谱过程。
此模式兼具电泳和液相色谱的模式。
(6)毛细管等电聚焦电泳(Capillary Isoelectric Focusing, CIEF)是通过内壁涂层使电渗流减到最小,在两个电极槽分别装酸和碱,加高电压后,在毛细管内壁建立pH 梯度,溶质在毛细管中迁移至各自的等电点,形成明显区带。
聚焦后,用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH 值使溶质通过检测器。
CIEF 已经成功用于测定蛋白质等电点,分离异构体等方面。
(7)毛细管等速电泳,(Capillary isotachophoresis, CITP)采用先导电解质和后继电解质,使溶质按其电泳淌度不同得以分离。
(8)CE/MS 联用,CE 的高效分离与MS 的高鉴定能力结合,成为微量生物样品,尤其是多肽、蛋白质分离分析的强有力工具。
可提供分子量及结构信息,适于目标化合物分析或窄质量范围内扫描分析,如多环芳香碳氢化合物(PAH)、寡聚核苷酸分析等。
2. 毛细管电泳技术的应用毛细管电泳(CE)由于具有着上述独特优点,现已被广泛应用于环境分析、食品分析、药物分析、生化分析等领域。
分析的对象可以是离子、小分子、生物大分子乃至高分子、粒子和活体单个细胞。
含量测定范围可从常量到微量乃至几个分子的测定。
应用极其广泛。
2.1 环境分析毛细管电泳在环境分析中主要应用于水样中阳离子和阴离子的分析、多环芳烃的分析、农药残留量的分析、多氯联苯的分析、金属离子和无机阴离子的分析、DNA 加合物的测定、酚类化合物分析等几个方面。
以金属离子分析为例。
传统的金属离子仪器分析方法包括原子吸收法、离子色谱法、液相色谱法、电化学法和质谱法。
上述方法中有的需要消耗大量的溶剂和时间,有的预处理方法复杂,有时甚至会造成待测成分在预处理过程中严重受损。
毛细管电泳(CE)因其溶剂消耗量小、分离效率高逐渐受到重视。
石美,高庆宇等人开发了一种将毛细管电泳用于含水溶性金属离子样品分离检测的间接紫外法。
在8.5min内实现K+,Ba2+,Ca2+,Na+,Mg2+,Mn2+,Zn2+,Cd2+,Li+和Cu2+10种金属离子的基线分离,各金属离子的检测限、线性范围和标准工作曲线相关系数分别为0.01~0.21mg/L,0.06~60mg/L和0.5~0.9998之间,标准样品回收率为9.64%~102.6%,5次测定的相对标准偏差在0.8%~4.5%之间。
并证明该法可以用于这些金属离子在复杂基质中的常规检测。
2.2食品分析毛细管电泳在食品分析中主要应用于蛋白质、氨基酸、生物胺、维生素、碳水化合物、无机离子、有机酸等的含量测定以及食品添加剂、残留农药、生物毒素的分析。
王茜和王广增对毛细管电泳技术在食品添加剂分析中的应用进行了综述,例如:毛细管区带电泳(CZE)可分离和测定浓缩果汁、软饮料、果酱、蚝油和人造黄油中的山梨酸和苯甲酸,检测限约0.06mg/L,相对标准偏差(RSD)为0.9%-4%。
为了减少基质干扰,在分离之前用固相萃取柱(SPE)对样品进行预处理,检测限低于0.5 m/L。
唐吉军等人用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术从随机寡核苷酸文库中筛选获得特异识别蓖麻毒素靶分子的适配子,将毛细管电泳技术作为分离手段引入到SELEX 筛选中,利用毛细管电泳高效的分离能力使得筛选周期大大缩短。
2.3药物分析从1987年首次将毛细管电泳技术用于药物分析以来,已有约200篇论文报道CE用于几百种药物及各种剂型中主药成分分析、相关杂质检测、纯度检查、无机离子含量测定及定性鉴别等药物常规分析。
进来对于中药成分分析以及手性对映体分离分析越来越成为关注的焦点。
对中药及其制剂的成分分析目前较常用的方法为毛细管区带电泳和毛细管胶束电动色谱法。
中药成分一般采用水煮或用醇等有机溶剂提取,其萃取液中常见的药效成分为生物碱、黄酮、香豆素、有机酸及甙类。
现已有关于芍药、人参、黄芩、黄连、黄柏、麻黄、大黄、甘草等中药材以及葛根汤、小柴胡汤、加味逍遥散等几十种中药复方及其制剂中某些药效成分分析的报道。
手性对映体分离有巨大的应用价值,已引起世界各国普遍关注,成为现代高科技的一个重要领域。
我国已将其列为自然科学基金资助的重大项目∀。
由于CE的分离效率高,分离模式多和分析时间短的优点。
所以CE分离手性对映体的应用发展得很快。
例如第八届国际高效毛细管电泳学术年会共有362篇论文,其中手性对映体分离就有31篇,占8.6%。
可用CE间接分析方法进行手性对映体分离,即将手性对映体和某些试剂反应后利用两对映体产物间微小差别用CE分离。
但此法存在许多问题。
用CE直接分离手性对映体是发展方向。
在机理上已提出手性对映体分离的数学模型。
可用5种模式即CZE、MECC、毛细管凝胶电泳、毛细管电色谱和毛细管等速电泳等进行分离。
常用的手性选择剂有环糊精、冠醚、手性选择性金属络合物、胆酸盐、手性混合胶束、蛋白和糖等。
国际高效毛细管电泳学术年会会议论文除介绍一些手性对映体分离实例外,主要集中在机理研究。
如手性分离中表面反应的机理、结合常数的测定、背景电解质和外加有机溶剂的影响以及MECC中表面活性剂结构、溶质结构对分离的影响等。
如Vigh 等基于多种平衡推导出的计算公式,可研究PH值,手性选择剂浓度,电渗流等对分离及选择性的影响。
2.4 生物大分子分析CE主要在生物大分子方面主要应用于核酸分析、蛋白质分析、糖类分析几个方面。
其中最为热门的要数对于DNA的分析。
CE技术运用于DNA分析最首要的优点是可以实现微量DNA的检测。
核酸是基本遗传物质。
用MECC 在40min以内分离出14种核酸成分。
采用动态pH 梯度将CZE扩展到具有不同pK值混合物,分离出11种嘌呤和嘧啶混合物。
从水解的RNA中用CZE在5min以内分离出4个核糖核苷酸异构体。
当使用LIF 检测器时,它可以从几十纳克的固相硅胶树脂中检测到所吸附的几个纳克或几个皮克的DNA。
因此,从若干白细胞、癌细胞或几微升血液中提取的DNA 可直接为CE所定量,用于PCR扩增。
当CE与PCR 微型装置相连时,可检测到2个拷贝的起始模板经20次循环后的扩增产物,这也是所有报道中CE的微量检测极限。
而且,当使用聚丙烯酰胺填充的毛细管、绿色氦/氖激光光源时,利用内插试剂溴化乙锭(EB),可以检测到几个皮克的双链DNA—EB复合物,而在琼脂糖凝胶上用EB染色不能分辨。
因此,cE极大地提高了DNA的检测灵敏度,使检测所需样品量剧减,为对DNA微芯片进行在板电泳提供了可能。
由上,CE又发展出对于DNA片段的分离以及基因突变的检测,此外,在毒品、血清蛋白和血色素变异的分析中,CE已成为了常规的诊断手段。