培养基适用性检查验证方案.

编号: FA/06-31-B

培养基适用性

验证方案

计数培养基

甘肃佛仁制药科技有限公司

培养基适用性验证方案

标题培

养

基

适

用

性

编

号

FA/

06-

31-B

验证方案

页码

共5页、第1页

执行

20 0 年月日

颁发部门

GM

P综

合办

分

发

部

行

政管

理办

分

发

数

公室门公室

起草人

起

草日

期

审

核

人

审

核日

期

批

准

人

批

准

日

期

目录

1. 概述 (2)

2. 验证目的 (2)

3. 验证的范围 (2)

4. 验证人员及职责…………………………………………………………………

2

5. 验证程序和方法 (2)

6. 验证可接受的标准 (3)

7. 验证步骤 (3)

8. 结果分析及评价： (4)

9. 验证报告 (5)

10. 建议 (5)

11. 最准批准………………………………………………………………

(5)

12. 所使用的记

录………………………………………………………………

(6)

1. 验证目的：

细菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基适合细菌、霉菌及酵母菌数测定。

2. 参照标准：2010版中国药典二部附录XI J微生物限度检查法。

3. 验证项目：营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基的适用性检查。

4.验证小组人员及职责：

4.1验证小组人员:

小组人员职务姓名所在部门职务

组长连学仁质量部经理

组员黄志康质量部QC主任组员郭萍珍质量部检验员4.2验证人员职责及要求

4.2.1按验证方案及相关文件实施验证。

4.2.2认真观察并做好验证原始记录。

4.2.3对实施验证的结果负责。

4.3验证中各部门的职责

4.3.1验证领导组职责

4.3.1.1制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。

4.3.1.2确定验证项目及验证项目负责人。

4.3.1.3负责验证方案的批准工作。

4.3.1.4负责验证资料及结果的审核工作。

4.3.1.5负责验证报告的批准工作。

4.3.2验证工作小组职责

4.3.2.1负责验证方案的起草工作。

4.3.2.2参与验证方案的讨论、确认工作。

4.3.2.3负责验证方案的实施。

4.3.2.4负责验证结果的分析、统计、报告工作。

4.3.2.5参与验证结果的评价工作。

4.3.3质量部职责

4.3.3.1负责公司验证日常管理工作。

4.3.3.2负责验证方案的审核工作。

4.3.3.3负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。

4.3.3.4负责检验仪器及检验方法的验证。

4.3.3.5负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。

4.3.3.6负责对验证人员的培训、考核工作。

4.3.3.7负责验证资料和报告的审核工作。

4.3.3.8负责验证文件回收、归档管理工作。

5. 合格标准：被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平

均数的70%，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。

6. 试验材料：

6.1. 被验证产品：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基

6.2. 仪器设备：

6.2.1. SYQ-DSX-280B型手提式压力蒸汽灭菌器

6.2.2. SW-CJ-2A双人净化工作台

6.2.3. XSW-CJ-1A单人净化操作台

6.2.4. HZMJ型霉菌培养箱 (23～28℃

6.2.5. JC303-4电热恒温培养箱 (30～35℃

6.2.6.不锈钢远红外烘箱

6.2.7 101-2A电热鼓风干燥箱

6.2.8微波炉

6.3. 验证用培养基

名称生产厂家批号

营养琼脂培

养基

营养肉汤培

养基

玫瑰红钠琼

脂培养基

改良马丁培

养基

改良马丁琼

脂培养基

营养琼脂对

照培养基

玫瑰红钠琼

脂对照培养基

酵母浸出粉

胨葡萄糖琼脂培

养基

6.4. 验证用菌株：(第代

验证菌株培养基培养温度培养时间

（小时）大肠埃希菌营养肉汤30—35℃18—24 金黄色葡萄球菌营养肉汤30—35℃18—24 枯草芽孢杆菌营养肉汤30—35℃18—24 白色念珠菌改良马丁培

23—28℃24—48

养基

23—28℃5—7（天）黑曲霉菌改良马丁琼

脂培养基

7. 菌液制备

7.1. 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，于30～35℃培养18～24小时。取经30～35℃培养18~24小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌营养肉汤新鲜培养物1ml加入到

9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-6~10-7约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。

7.2.接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，于23～28℃培养

24~48小时。取经23～28℃培养24~48小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml 加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。

7.3.接种黑曲霉菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，于23～28℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%

（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50～100cfu∕ml 的菌悬液备用。