同型半胱氨酸检测方法的研究进展
同型半胱氨酸检测方法的研究进展
同型半胱氨酸检测方法的研究进展肖倩;杨颖;甘家宝;张瑞云;刘春叶【摘要】同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)在细胞和组织的生长中起重要作用,人体Hcy水平与病理过程和人类疾病密切相关,实现准确、快速、高选择性地检测血尿中Hcy含量,对生命科学研究以及临床诊断具有重要的作用.对Hcy的检测方法进行了综述,分别对放射酶法、免疫法、HPLC法、质谱法、毛细管电泳法、微流控纸芯片法等的优缺点进行对比总结,为Hcy的研究和临床诊断提供了参考.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2019(047)010【总页数】4页(P14-16,39)【关键词】同型半胱氨酸;检测方法;微流控纸芯片【作者】肖倩;杨颖;甘家宝;张瑞云;刘春叶【作者单位】西安医学院药学院,陕西西安710021;西安医学院药学院,陕西西安710021;西安医学院药学院,陕西西安710021;西安医学院药学院,陕西西安710021;西安医学院药学院,陕西西安710021【正文语种】中文【中图分类】R1同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是含有硫分子的氨基酸，主要来源于进食过程中的蛋氨酸，即甲硫氨酸去甲基化形成Hcy。
Hcy本身不参与蛋白质合成，也不进行编码，血液中的Hcy含量是人体健康的重要指标，Hcy浓度增高，将使人体的DNA不能很好地修复从而面临更高的疾病风险。
此外，它还会引起重金属和自由基等人体代谢废物在体内积聚，导致各种炎症、细胞损伤。
因此，检测Hcy在人体内的含量对上述疾病的预防、诊断和治疗非常重要，本文对目前Hcy检测方法进行。
1 放射酶分析法放射酶实验(Radio enzymic Assays) [1]，是最早测人类血清Hcy的方法。
1981年，Kredich[2]提出相关理论。
1984年，Ueland P M等[3]测定了大鼠、兔子组织提取液中的Hcy。
1985年，Helga Refsum等[4]测定了人血清中的Hcy含量。
同型半胱氨酸的研究新进展
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Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１１，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
随时间延长而增高，采 集 血 样 后 立 即 离 心 去 除 血 细 胞 ；血 样 的 保 存 状 态 ：去 除 血 细 胞 后 的 待 检 血 样 在 室 温可保存４ｄ，在０ ℃～２ ℃下保存 ２ 周，于 －２０ ℃ 下数年保持ｔＨｃｙ性质 稳 定 性。（２）检 测 方 法：用 不 同的检验方法得 出 的 检 验 结 果 有 一 定 的 差 异。（３） 规范操作：标准化 建 立、质 量 控 制、操 作 规 范 以 保 证 提 高 准 确 度 ，降 低 分 析 差 异 。 ２．４ 药 物 影 响 如 烟 酸 、胰 岛 素 、茶 碱 、质 子 泵 抑 制 剂、二 甲 双 胍、苯 妥 英 钠、左 旋 多 巴、异 烟 肼、甲 氨 蝶 呤 、利 尿 剂 、抗 痉 挛 药 、阿 扎 立 平 、口 服 避 孕 药 等 有 升 高 Ｈｃｙ的作用，青霉胺可降低血 Ｈｃｙ水平。
贵 州 医 药 ２０１１ 年 １１ 月 第 ３５ 卷 第 １１ 期
同型半胱氨酸HCY
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的代谢研究, 1955年获得了诺贝尔化学奖。
同型半胱氨酸尿症的特点
马凡样的表现: --中枢神经系 统的表现，如 智力缺陷
骨骼肌的表 现: 骨质疏 松症
血管表现: 血管闭 塞，血栓栓塞
眼睛的表现: 异位 晶状体
该图为HCy尿症的特 点, 其中我们可以 很明显的看到, 血 管闭塞, 血栓栓塞
的血管表现。
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• 第五，增殖性疾病的影响: 细胞增殖加快可以使同型半胱氨酸浓度升 高，例如慢性炎症性疾病，以及恶性疾病如急性淋巴细胞白血病时都
会出现同型半胱氨酸浓度升高。快速的细胞分裂增加了对于叶酸的需 求可能是造成这种表现的原因之一。
• 第六，肾功能的影响: 目前对于肾衰竭患者血浆同型半胱氨酸浓度增 加的机制还不是很清楚。不管原因如何，终末期肾脏病的患者总同型
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同型半胱氨酸（HCY）的研究历史
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同型半胱氨酸（Homocysteine, Hcy）
同型半胱氨酸（Homocysteine, 简称Hcy）, 1931年由Vicent du Vigneaud首次从膀胱结石
中分离到, 它是一种含硫的氨基酸。du Vigneaud主要进行有机硫化合物, 包括含硫氨基酸
• 研究表明: Hcy的升高是与中风有重要关联的危险因子。美国最新的 数据显示中年后期男性中风发病率，处于55-64这个年龄段的男性相 对于45-54年龄段的男性而言，前者患中风的几率是后者的三倍。
• 高HCY是造成老年痴呆症与帕金森的重要因素，英国研究发现， Hcy 水平大于11.2μmol/L的病人，三年后随访，发现他们大脑颞叶（包 括海马）快速萎缩。
2.同型半胱氨酸的代谢主要有再 甲基化途径和转硫途径两个。
1）再甲基化途径：是指约有50% 同型半胱氨酸在蛋氨酸合成酶的作用 下，以维生素Ｂ12为辅酶因子，以N5-甲基四氢叶酸为甲基供体，发生再 甲基化，重新合成蛋氨酸。
同型半胱氨酸的检测及临床意义范文
同型半胱氨酸的检测及临床意义一、同型半胱氨酸同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中的重要中间产物，部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与白蛋白结合而存在。
大量对Hcy的研究表明Hcy是心脑血管疾病的独立危险因素，危险度随着浓度的升高而增加。
Boushey等的研究结果显示，血浆总Hcy水平每升高5umol/L，相当于胆固醇升高500umol/L。
伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原发性高血压定义为H型高血压。
二、影响血液Hcy水平的因素1、遗传因素：C667T点突变可引起Hcy升高。
CBS基因多态性。
蛋氨酸合成酶基因多态性。
2、性别与年龄：国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而升高，而且男性>女性。
女性在绝经前的水平较低，绝经后显著升高，认为其机制可能与雌激素水平的变化有关。
3、营养因素：①VitB6、VitB12、叶酸等Hcy代谢辅酶摄入不足时，则Hcy升高。
②饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成酶活性下降，从而造成Hcy血症。
③饮食中蛋氨酸过高：有报道认为高动物蛋白饮食可能是Hcy血症的危险因素之一。
三、同型半胱氨酸致病机理1、内皮毒性作用。
2、刺激血管平滑肌细胞增生。
3、致血栓作用：Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活C蛋白和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板内前列腺素合成增加，从而促进血小板粘附和聚集。
4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱：Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结构，促进斑块钙化。
5、干扰谷胱甘肽的合成：谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管产生保护作用。
Hcy干扰谷胱甘肽的合成，从而对机体造成危害。
6、影响体内的转甲基化反应：Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲基化过程，甲基化能力的降低影响细胞的发育及分化，这可能是Hcy致病的关键因素。
同型半胱氨酸检测方法学及评价的某些进展
同型半胱氨酸检测方法学及评价的某些进展摘要：同型半胱氨酸( HCy)又称高半胱氨酸(HHcy)，是一种含硫氨基酸，它不属于组成蛋白质的20种氨基酸，本身不参与蛋白质的合成，也没有特异的3个DNA碱基对其进行编码，在体内不能合成，它是由蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中产生的重要的中间产物，只能来源于蛋氨酸的分解代谢。
血浆Hcy是一个总称，指血浆中所有形式的Hcy，包括还原型Hcy，双硫Hcy，混合双硫半胱氨酸Hcy和混合双硫蛋白质Hcy，正常情况下游离Hcy很少，主要以蛋白质形式存在。
很多因素如遗传、营养、肾功能不全、药物、激素等因素均可能影响体内同型半胱氨酸的代谢，造成高Hcy血症。
近年来大量研究证明高Hcy血症是心脑血管疾病的一个新的独立危险因素。
还与糖尿病、肾衰、老年痴呆等高度相关，危险度随Hcy浓度的升高而增加[1]。
现就Hcy的检测方法及评价做一简述。
1放射免疫分析法：该方法灵敏度高，特异性强，但操作繁琐且有放射污染，同时同位素易衰变及对人体有危害限制了使用，为推广使用。
2气湘色谱质谱法(GC-MS) 1987年首先报道了GC-MS法联用测定Hcy，该法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。
但因需要的设备昂贵，难以适合常规临床化学实验时使用门，但操作十分复杂，耗时长，仪器设备要求高，很难普及。
3高效液相色谱法(HPLC) 是目前公认的参考方法，基本分析原理：先使用还原剂使血样中所有形式的Hcy转变成还原形式，然后与荧光试剂进行衍生生成Hcy-荧光物质复合物[2]，将衍生后的样品进行色谱分析。
因色谱固定相对不同物质的吸附力不同，因此流动相将其洗脱下来的次序也不同，根据这一原理将样品中的不同物质分开，以荧光检测器检测洗脱下Hcy-荧光物质复合物的荧光强度，将其与标准品／内标的比值进行比较和计算，就可以测定血中Hcy的水平。
此方法灵敏度高，准确度和精密度好，但由于其操作繁琐复杂，耗时耗费，不适用于临床应用，主要用于实验研究。
血清同型半胱氨酸的研究进展
检测医学血清同型半胱氨酸的研究进展米文育,林延鹏(中国人民解放军第252医院儿科,河北保定071000)中图分类号:R541.4;R743 文献标识码:A 文章编号:1006-2084(2007)15-1185-03摘要:同型半胱氨酸(Hc y)是含巯基氨基酸,从细胞内的甲硫氨酸代谢中起源,为甲硫氨酸代谢的中间产物。
血中总Hc y 水平受许多因素的影响,如参与Hc y 代谢酶的基因遗传变异、某些药物、肾衰竭、性别与年龄、雌激素缺乏、Hc y 代谢所需辅助因子缺乏如叶酸、维生素B2、维生素B 6、维生素B 12等。
近期的研究表明:高同型半胱氨酸血症是冠状动脉疾病、脑血管疾病、外周血管疾病独立的危险因子,也是有效的预测因子,并具有较高的临床应用价值。
关键词:同型半胱氨酸;脑血管疾病;冠状动脉疾病;外周血管疾病Research Progress on Serum Homocysteine MI W en -yu ,LIN Yan -peng .(De partment o f Pediatrics ,No .252Hos pital o f PLA ,Bao ding 071000,China )Abstract :Homocystei ne (Hcy)i s a sulphate -contai ning amino aci d,which originated from meth-i oni ne metaboli sm and i ts intermediate product.The total Hc y level in s erum is affected by many factors,which i ncludes gene autogenous variation ofHcy metabolic enz yme,some drugs ,renal fail ure,sex and age,abs ence of es trogen,lack of co -factor needed in Hcy metabolis m such as folic acid,vi tamin B2,vi ta min B6,vi tamin B12and s o on.Recent studi es showed that high Hcy level is the independent risk factor and effec tive predictor of coronary artery dis eas e,cerebrovascular dis eas e and peripheral angiopathy,whic h als o has high value i n clinical application.Key words :Homocys teine;Cerebrovascular diseases;Cardiovascular di seas es;Peripheral vascular dis eas es随着检测技术的发展,以及对同型半胱氨酸(homocys -teine,Hcy)研究的进一步深入,目前认为Hcy 在诸多学科领域中具有较高的应用价值,尤其是在心脑血管疾病方面,被认为是缺血性心脑血管疾病的独立致病危险因素,也是预测心脑血管疾病转归的有效因子,同时在妊娠高血压综合征、耳聋、神经发育异常等方面亦有其临床意义。
同型半胱氨酸的检测技术与临床应用新进展
仪 ｌ ， 反 应 原 理 在 膦 氯 化 氢 （ Ｃ Ｐ 作 用 下 氧 化 型 Ｈｃ 化 １其 ］ Ｔ Ｅ） ｙ转
【 键 词 】 半 胱 氨 酸 ； 代 谢 ； 临 床 实 验 室 技 术 关
中 图分 类 号 ： ４ ６ １ ２ Ｒ ４ ． ｌ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：６ ３４ ３ （ ０ ８ １－０ ３０ １ ７ — ｌ ０ ２ ０ ） １１ ２ — ３
同型 半 胱 氨 酸 （ ｙ 又 称 高 半 胱 氨 酸 是 一 种 含 硫 氨 基 酸 ， Ｈｃ）
谢 酶 基 因多 态 性 ： 近 发 现 胱 硫 醚 ８合 成 酶 （ Ｂ ） 因 多 态 性 最 Ｃ Ｓ基 可 导 致 Ｈｃ ｙ中 度 升 高 。其 他 弓起 Ｈｅ ｌ ｙ升 高 的 代 谢 酶 基 因多 态 性 包 括 亚 甲基 四 氢 叶 酸 还 原 酶 、 氨 酸 合 成 酶 、 菜 碱 同 型 半 蛋 甜 胱 氨 酸 甲基 转 移 酶 等 。
同 型 半 胱 氨 酸 的 检 测 方 法
血 中总 Ｈｃ （ Ｈｃ） 括 蛋 白结 合 型 、 ｙ半 胱 氨 酸 混 合 ｙｔ ｙ 包 Ｈｃ－
型 二 硫 化 物 、 胱 氨 酸 及 还 原 型 Ｈｃ （ｅ ｙ ４ ， 中 与 蛋 白 高 ｙ ｒＨｃ ） 种 其
结 合 的 Ｈｃ 总 量 的 ７ ～ ８ 。 血 浆 中 约 ９ Ｈｃ ｙ占 Ｏ Ｏ ９ ｙ被 氧
同型半胱氨酸的相关研究进展
同型半胱氨酸的相关研究进展发表时间：2016-02-22T14:33:51.877Z 来源：《健康世界》2015年20期供稿作者：宋淑云[导读] 牙克石市建设社区卫生服务中心 Hcy是一种非特异性指标，受多种因素影响，因此监测血浆中Hcy水平对许多疾病的预防也具有重要意义。
宋淑云牙克石市建设社区卫生服务中心内蒙古呼伦贝尔 022150摘要：同型半胱氨酸（Hcy）升高可作为判断心脑血管疾病危险性的独立指标，与传统指标相比具有更高的应用价值。
并且近期研究表明Hcy也参与到糖尿病、肾病等疾病的发病与进展。
本文将就血浆Hcy影响因素、检测手段及临床应用进行简要综述。
关键词：同型半胱氨酸；心脑血管疾病；糖尿病；肾病同型半胱氨酸（Homocysteine，简称Hcy），是一种含巯基的氨基酸，1931年由Vicent du Vigneaud首次由膀胱结石中分离得到，重要的是1969年McCully首次提出了高同型半胱氨酸血症（HHcy）可导致动脉粥样硬化性血管疾病的假说。
近年来，HHcy与心脑血管疾病、糖尿病及肾病、肿瘤等疾病的相关性受到了越来越多学者的关注，并且国内外许多学者对于HHcy做为动脉粥样硬化发生的独立危险因素已达成共识[1]。
Hcy是一种非特异性指标，受多种因素影响，因此监测血浆中Hcy水平对许多疾病的预防也具有重要意义。
本文对其影响因素、检测方法及临床应用综述如下。
一、影响Hcy水平的因素1、年龄与性别：国外一些研究纳入大量一般人群，发现Hcy的浓度分布为非正态分布，多表现为右侧拖尾的正偏态分布。
无论男性还是女性，Hcy的血浆浓度均随着年龄的增长而增加。
在青春期以后，男性Hcy浓度比女性平均高出1-2?mol/L，这种差异是由于性激素的不同作用导致的，雄激素使Hcy浓度增高而雌激素可使Hcy浓度降低[2]。
因此绝经期以后，女性的Hcy浓度显著增高，与男性的差距逐渐缩小。
2、体内B族维生素水平：Hcy是蛋氨酸及胱氨酸的中间代谢产物，其代谢依赖于几种关键酶及辅助因子，即叶酸、维生素B12、维生素B6及维生素B2。
新HCY
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• 现代医学发展趋势
• 从疾病医学向健康医学发展防发展 • 从重治疗向重预防发展 • 从群体治疗向个体治疗发展
• 从以疾病为中心向以病人为中心发展
—— WHO《迎接21世纪的挑战》 发现健康短板，实现个体化保健
新理念
许多学者认为血液Hcy升高已成为动脉粥样硬化 发生的一个独立危险因子。也成为基础医学和临 床医学研究的新热点
HCY和唐氏综合征
• 母亲叶酸代谢障碍是继年龄因素 后的导致DS的第二大危险因素 • 甲基缺乏与DNA甲基异常有关， 并会造成DNA链断裂、染色体重 组和分离异常 • 叶酸遗传代谢障碍引起的DNA低 甲基化导致染色体不分离，是导 致DS发生的危险因素
重点
HCY和复发性流产
• 复发性流产与血液高凝状态密切相关，其 机理可能是胎盘动脉栓塞引起胚胎血供不足 、绒毛缺血性坏死。而叶酸代谢障碍导 致的高同型半胱氨酸血症是血液高凝状态 及相关疾病的独立危险因素 叶酸代谢障碍导致胚胎发育所必须的DNA 和蛋白质甲基化不足，也是造成胚胎发育 停止、流产的重要原因。
伴有血浆HCY升高的原发性高血压定义为H型 高血压（高血压患者中有四分之三为H型高血压， 其脑卒中死亡风险增加12倍
主 要 内 容
1 同型半胱氨酸的研究历史 同型半胱氨酸生物化学原理 影响同型半胱氨酸水平的主要因素 同型半胱氨酸的临床应用 同型半胱氨酸检测方法参考范围 同型半胱氨酸检测适用人群
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年龄和性别对同型半胱氨酸浓度的影响
在一般人群中，同型半胱氨酸浓度为非正态分布，多表现为正偏态分布，即向右侧脱尾（高值侧）。 分布曲线向右脱尾多是因为有相当大一部分人群的生活方式不健康 。无论男性还是女性，随着年龄的 增长，tHcy的血浆浓度增加，在青春期以后，总同型半胱氨酸的平均浓度存在显著的性别差异。男性 总同型半胱氨酸浓度比女性平均高出1-2µmol/L。这种性别差异是由于男性肌肉容量较大，此外还有性 激素的不同作用。一般而言，雌激素的作用可使同型半胱氨酸浓度降低，而雄激素则使同型半胱氨酸 浓度增高。绝经期以后，女性与男性的同型半胱氨酸浓度差异开始缩小
同型半胱氨酸的检测方法及临床应用的研究进展
Ｃ ｙ ｓ ） Ⅲ 。维生 素在 Ｈ ｃ ｙ的代谢 过程 中起 到很 重要 的 调节 作 用 。 除此之外运动 、 饮 食 习惯 、 性 别 和 年 龄 都对 Ｈ ｃ ｙ的水平 有 显著 的影 响［ ２ １ 。当生物体 内的一 些 关键 酶基 因被 改 变时 ． Ｈｃ ｙ的代谢 途径 会 受 到影
实验与检验医学 ２ ０ １ ６年 １ ０月 第 ３ ４卷第 ５期 Ｅ ｘ ｏ ｅ ｒ ｉ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ ａ ｎ ｄ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｖ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， ０ ｃ ｔ ． ２ ０ １ ６ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． ５
Hale Waihona Puke ・ ６ ０ １ ・ 响， 导 致 Ｈｃ ｖ增 多 ， 血液 中 Ｈ ｃ ｖ处 于高 水 平 状 态 ， 称 作 高 同型 半 胱 氨 酸 血 症 （ ｈ ｙ ｐ ｅ ｒ ｈ ｏ ｍ ｏ ｃ ｙ ｓ ｔ ｅ ｉ ｎ ｅ ｍ ｉ ａ ． ＨＨ ｃ ｙ ） ． 我 国一 般将 空 腹 总 Ｈｃ ｙ血浆 浓 度＞ ｌ Ｏ ￣ ｍｏ ｌ ／ Ｌ定 义 为 Ｈ Ｈ ｃ ｙ Ｅ ３ １ 高浓 度 的 Ｈｃ ｙ通 过 ＭＡ Ｐ Ｋ ／ Ｅ Ｒ Ｋ
荧 光 法 自从 １ ９ ９ ３年 Ｆ ｉ ｓ ｋ ｅ ｒ ｓ ｔ ｒ ａ ｎ ｄ等 首 次 采 用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法 检 测 Ｈ ｃ ｖ后 ， 经过不断改进和完善 ． 该
方 法具 备 了 良好 的 敏感 性 、 精确 度 和特 异 性 ． 加快 了样 本 的检 测 速 度 ， 并且能够检测血浆 、 尿液 、 内 腔 积液 等样本 中的 Ｈ ｃ ｖ浓度『 １ ３ 】 。 该方 法 的关 键步骤 是 荧光 的标记 ．目前 常 用 的荧 光标 记 物 主要 有荧 光 探针 和染料 １ ． ４ ． １ Ｐ — ａ ｃ ｉ ｄ — ａ ｌ ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｅ （ Ｐ — Ｃ ＨＯ ） 荧光探 针 ｆ Ｐ — Ｃ Ｈ Ｏ １
常规生化检验中循环酶法检测血清同型半胱氨酸的临床研究
常规生化检验中循环酶法检测血清同型半胱氨酸的临床研究目的研究临床生化检验中应用循环酶法检测血清同型半胱氨酸的临床意义，为疾病诊断提供可参考依据。
方法抽取我院住院部2014年7月～2015年12月收治冠心病、高血压及脑梗死患者各60例为研究组，抽取相同时间段来院体检健康人50例为对照组。
应用循环酶法检测血清同型半胱氨酸指标，并对结果进行比较分析。
结果研究组患者血清同型半胱氨酸水平显著高于正常人（P ＜0.05）。
比较冠心病患者和高血压患者、脑梗死患者同型半胱氨酸数值，冠心病患者同型半胱氨酸水平显著高于高血压患者和脑梗死患者（P＜0.05）。
结论同型半胱氨酸水平在高血压患者、脑梗死患者和冠心病患者体内含量有显著差异，可用于疾病的鉴别诊断和病情分析。
标签：生化检验；循环酶法；同型半胱氨酸血清中高同型半胱氨酸与动脉血栓性疾病发病率呈相关关系，是其发病的独立危险因素之一[1]。
临床中使用多种方法对血清同型半胱氨酸水平进行检测，本文研究循环酶法检测血清中同型半胱氨酸含量，分析冠心病、高血压和脑梗死患者体内同型半胱氨酸水平是否存在差异，现将结果总结如下。
1 资料与方法1.1一般资料本文采取回顾性分析法。
抽取笔者所在医院住院处2014年7月～2015年12月收住入院治疗的冠心病、高血压和脑梗死患者各60例，组成本次实验的研究组对象。
抽取相同时间段来院体检健康人50例为对照组对象。
冠心病患者包括男性32例，女性28例，平均年龄（50.3±2.8）岁，高血压患者包括男性34例，女性26例，平均年龄（52.1±2.4）岁，脑梗死患者包括男性33例，女性27例，平均年龄（53.3±2.8）岁。
对照组包括男性25例，女性25例，平均年龄（52.2±3.1）岁。
研究组成员间以及研究组和对照组成员间没有一般资料的差异（P>0.05）。
1.2方法所有参与研究人员清晨、空腹，采集静脉血3～4ml，高速离心分离血清待检。
血同型半胱氨酸的临床应用与进展
血同型半胱氨酸的临床应用与进展同型半胱氨酸(Hcy),是由Butz及Vigneaud[1]于1932年最早发现，是蛋氨酸代谢转变成胱氨酸过程中的中间产物。
它不仅在心、脑血管疾病如急性心肌梗死(AMI)、急性冠脉综合症（ASC）、动脉粥样硬化（AS）、冠心病（CHD）、慢性心力衰竭(CHF)、急性脑梗死(ACI)、脑卒中、颅脑损伤等疾病时会明显升高，在糖尿病(DM)、慢性肾脏病（CKD）、慢性肾功衰（CRF）、类风湿(RA)、子痫、新生儿窒息等疾病以及中医辨证领域也都有所应用。
1.Hcy与动脉粥样硬化的关系大量研究证明，Hcy是动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）独立的危险因素[2]，在其发生、发展过程中起着重要作用。
促进AS形成的因素包括：内皮细胞损伤、氧化应激等。
（1）内皮细胞受损以及功能障碍会引起AS的形成，HHC可损伤内皮细胞功能[3]。
实验证明Hcy不仅可以通过进入到血管内皮细胞的蛋白质中使其功能受到影响,还可以诱导内皮细胞粘附分子表达和增加内皮细胞渗透性造成内皮细胞损伤[4]。
Hcy还可以通过活化炎症细胞来刺激巨噬细胞的表达及分泌血管内皮生长因子并激活核转录因子，促进人体中性粒细胞产生氧自由基,使血管内皮细胞受损。
（2）关于Hcy与氧化应激的关系有两种:Hcy通过高活性巯基的自动氧化损害细胞和使细胞的抗氧化机制受到抑制。
实验证明：HHC通过诱导过氧化氢及过氧化物的生成来损伤血管内皮细胞。
一氧化氮(NO)有舒张血管的作用, 对调节心、脑血管的功能有着重要的作用。
Hcy通过对内皮细胞NO代谢过程的影响，降低NO的生物活性及生物利用率，使血管舒张功能降低。
2.Hcy与慢性心力衰竭的关系研究证明, Hcy含量在慢性心力衰竭(Chronic heart failur，CHF)患者血液中升高，并推测Hcy可能是独立于缺血性机制之外引起心衰的一种危险因素。
石伟利等对60名CHF患者按照纽约心脏协会（New York Heart Association，NYHA）心功能分级进行分组研究发现，Hcy 浓度在CHF组比正常对照组升高；NYHA心功能分级各组间也存在明显差别，并与左室射血分数（Left Ventricular Ejection Fraction ，LVEF）成正比，随着心功能分级级数的增加，Hcy含量升高，随着LVEF的降低Hcy含量升高，因此，Hcy可被用来反映心功能分级水平，且能反映其损伤的严重程度。
高同型半胱氨酸血症的临床研究进展
高同型半胱氨酸血症的临床研究进展同型半胱氨酸（Hcy）是一种含硫氨基酸，是蛋氨酸代谢过程中的中间产物。
当血液中同型半胱氨酸水平升高（通常定义为空腹血浆Hcy 水平≥15 μmol/L）时，就会导致高同型半胱氨酸血症（HHcy）。
近年来，HHcy 因其与多种疾病的密切关联而受到广泛关注，成为临床研究的热点之一。
HHcy 的发病机制较为复杂。
首先，遗传因素在其中起着重要作用。
某些基因突变可能导致参与 Hcy 代谢的关键酶活性降低，如亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）、胱硫醚β合成酶（CBS）等，从而影响Hcy 的正常代谢。
其次，营养因素也不容忽视。
维生素 B6、维生素B12 和叶酸等营养素的缺乏会干扰 Hcy 向蛋氨酸或半胱氨酸的转化，进而引起 Hcy 水平升高。
此外，年龄增长、不良生活方式（如吸烟、酗酒、长期高蛋氨酸饮食）、某些药物的使用以及一些疾病状态（如肾功能不全、甲状腺功能减退、恶性肿瘤等）也可能导致 HHcy 的发生。
HHcy 与心血管疾病的关系密切。
大量研究表明，HHcy 是心血管疾病的独立危险因素。
高水平的 Hcy 能够损伤血管内皮细胞，促进血管平滑肌细胞增殖，增加氧化应激和炎症反应，导致动脉粥样硬化的形成和进展。
此外，HHcy 还会影响血液的凝固和纤溶系统，增加血栓形成的风险，从而引发心肌梗死、脑卒中等心血管事件。
临床研究发现，降低 Hcy 水平可以显著降低心血管疾病的发生风险和死亡率。
HHcy 与神经系统疾病也有着千丝万缕的联系。
在脑血管疾病方面，HHcy 会增加脑小血管病的发病风险，促进脑白质病变的进展，加重认知功能障碍。
对于阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病，HHcy可能通过氧化应激、神经炎症和神经毒性等机制，加速神经元的损伤和死亡，从而导致病情的恶化。
此外，HHcy 还与癫痫、偏头痛等神经系统疾病的发生和发展有关。
在糖尿病及其并发症方面，HHcy 同样扮演着重要角色。
糖尿病患者往往存在着不同程度的代谢紊乱，这可能导致 Hcy 代谢异常，进而出现 HHcy。
同型半胱氨酸与心脑血管疾病的研究进展
同型半胱氨酸与心脑血管疾病的研究进展同型半胱氨酸（homo cystenine,Hcy）是蛋氨酸(Mct)和半胱氨酸(Cys)代谢过程中的中间产物，是一种含硫氨基酸。
Hcy与心、脑血管疾病有密切关系，可引起各脏器如心、脑、肺、脾、肾等组织梗塞。
近十几年来, 许多临床研究和流行病学调查证实血浆同型半胱氨酸水平与心、脑血管事件的风险成正相关, 与高血压相同,无明确分界值[1]。
本文就Hcy在心、脑血管疾病中的研究进展作一综述。
1 Hcy的理化性质同型半胱氨酸（homocysteine, hCY）于1932年由Devgneaud发现，是一种人体内的含硫氨基酸，即22甲基242巯基丁酸。
由饮食中摄取的蛋氨酸在三磷酸腺苷作用下先形成S2腺苷蛋氨酸,再经甲基转移酶作用形成S2腺苷Hcy,然后脱去腺苷变成Hcy。
Hcy在血中主要以二价形式结合于以白蛋白为主的血浆蛋白存在[2]，为蛋氨酸代谢过程的重要中间产物，其本身并不参与蛋白质的合成。
血浆中存在氧化型和还原型Hcy两种形式，氧化型含二硫基，包括同型胱氨酸和胱氨酸；还原型含硫基，包括同型半胱氨酸和半胱氨酸。
Hcy的代谢途径主要有三条：一条是Hcy在依赖维生素B12的蛋氨酸合成酶（5-甲基四氢叶酸、Hcy甲基转移酶、EC2.1.1.13）的作用下，生成蛋氨酸和四氢叶酸；另一条是Hcy在依赖维生素B6的胱硫醚-β-合成酶（EC4.2.1.22）的催化下，与丝氨酸缩合生成胱硫醚，后者进一步生成半胱氨酸和α-酮丁酸；第三条是Hcy在甜菜碱- Hcy甲基转移酶（EC2.1.1.5）的作用下，重新甲基化生成蛋氨酸，该酶仅见于肝脏组织内[3]。
2 Hcy的检测方法Hcy的检测方法较多,主要有：放射酶分析法、离子色谱法、气相色谱质谱分析法、毛细电泳法、荧光偏振法、高效液相色谱法、化学发光法、酶联免疫分析法等。
目前应用最广泛的是高效液相色谱法, 其灵敏度高, 能分离、分析血液中存在的多种氨基酸。
同型半胱氨酸与血管性疾病的研究进展
ｉ三主堕！差垒盛垫！旦！ｌ第继耋阻舅・综述与讲座・同型半胱氨酸与血管性疾病的研究进展辽宁省人民医院检验科（１１００１５）赵鸿梅曲波同型半胱氨酸（Ｈｅｙ）是蛋氨酸循环的正常代谢产物，是能量代谢和许多需甲基化反应的重要中间产物，其本身并不参与蛋白质的合成。
１９６９年Ｍｃｕｌｌｙ提出Ｈｅｙ可能与动脉粥样硬化有关，随着检测技术的不断提高和发展，越来越多的研究证实，高同型半胱氨酸血症（ＨＨｃｙ）不仅与冠状动脉粥样硬化性心脏病有关，也是脑血管病的一个独立危险因素，同时还发现与肿瘤等其他疾病相关。
现就ＨＨｅｙ与血管疾病的研究综述如下。
１Ｈｅｙ的代谢Ｈｅｙ是人体的必需氨基酸之一，在正常人体内，Ｈｅｙ的生成和代谢保持着平衡。
正常人血浆Ｈｅｙ呈正偏态分布，其正常范围因方法学不同而尚待统一。
在血浆中，７０％一８０％的Ｈｅｙ以二硫键形式与血浆蛋白结合，２０％一３０％自身结合成二聚体Ｈｅｙ，约１％的Ｈｅｙ以自由硫醇形式存在于循环中。
正常情况下Ｈｅｙ的代谢途径有３条ｕＪ。
１．１再甲基化途径以ＶｉｔＢ，：为辅助因子在蛋氨酸合成酶作用下，由亚甲基四氢叶酸为甲基供体，再甲基化形成蛋氨酸，这一过程在任何组织中均可发生；Ｈｅｙ再甲基化的另一途径局限于肝细胞内，以甜菜碱为甲基供体，在甜菜碱Ｈｅｙ转换酶催化作用下完成蛋氨酸合成。
１．２转硫化途径以ＶｉｔＢ。
：为辅助因子，由胱硫醚Ｂ合成酶（ＣＢＳ）催化和丝胺酸缩合形成胱硫醚。
该反应在生理条件下不可逆，利于Ｈｅｙ的转运，生成的胱硫醚在＾ｙ一硫醚酶作用下裂解为仪一酮丁酸和半胱氨酸，后者可再转变为谷胱甘肽或进一步代谢为硫酸盐经尿排出。
１．３直接释放到细胞外基质Ｈｅｙ释放到细胞外基质是处理细胞内Ｈｅｙ的途径之一，与细胞内蛋氨酸途径密切相关。
细胞外Ｈｅｙ的增加反映了其生成和代谢的紊乱。
有研究表明［２】，蛋氨酸的浓度可以影响Ｈｅｙ的释放，在低浓度时，细胞释放受到蛋氨酸合成酶的影响；而高浓度时，细胞释放则受到胱硫醚合成酶的影响。
关于同型半胱氨酸
血同型半胱氨酸检测临床意义同型半胱氨酸理论虽然早在20世纪30年代就有人提到同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy），但Hcy理论的真正奠基人是美国哈佛大学的病理学家McCully。
McCully在翻阅麻州总医院历史资料时偶然发现一个奇特的病例，一名8岁的男孩死于动脉粥样硬化造成的颈动脉狭窄。
基于历史中有关该男孩尿中含有大量Hcy的记载引起了McCully的注意。
经过大量实验研究，McCully于1969年首次向外界公布了他的研究成果：造成心脑血管疾病的真正原因不是脂质代谢紊乱而是血中Hcy过高，即氨基酸代谢紊乱。
遗憾的是，McCully的理论整整被忽略了26年，McCully本人也因为哈佛大学禁止他以哈佛的名义发表“异端邪说”而辞去了其在哈佛大学和麻州总医院的职务。
90年代，在哈佛公共卫生学院对8万人跟踪研究14年得出的结论证明了McCully的理论之后，1995年以McCully论述Hcy的理论专著《心脏革命》的出版和第一届Hcy国际学术会议的召开为标记，Hcy理论正式被医学界接受。
最近10年有关同型半胱氨酸的研究论文,在MEDLINE数据库中就有7000篇之多；研究证实,高浓度的Hcy是冠状动脉疾病、脑血管疾病、外周血管疾病独立的危险因子。
血Hcy增高与多种疾病相关,如动脉硬化相关疾病(冠心病、中风、糖尿病等),静脉栓塞,肾脏疾病,骨质疏松,老年性痴呆,肿瘤,妊娠并发症,习惯性流产及新生儿缺陷等。
因此监测和降低同型半胱氨酸的浓度，具有十分重要的临床意义。
同型半胱氨酸(Hcy)是一种含硫分子的氨基酸。
在体内经蛋氨酸脱甲基化生成,主要通过再甲基化和转硫途径代谢。
需蛋氨酸合成酶、胱硫醚β合成酶(CBS)及维生素B12、叶酸、维生素B6参与。
酶功能障碍或维生素的缺乏等均可导致同型半胱氨酸升高。
同型半胱氨酸致病机理:①损伤血管壁导致血管阻塞;②损伤血管内皮细胞;③促进血小板激活;④增强凝血功能;⑤促进平滑肌增值;⑥细胞毒化作用;⑦刺激LDL氧化等。
同型半胱氨酸的研究进展
世界最新医学信息文摘 2018年第18卷第69期 71同型半胱氨酸的研究进展张雪敏1，冯玉宝2△（1.内蒙古医科大学研究生学院，内蒙古 鄂尔多斯 017000；2.内蒙古鄂尔多斯市中心医院，内蒙古 鄂尔多斯 017000）摘要：同型半胱氨酸是近些年的研究热点，高同型半胱氨酸与多种疾病的密切相关，其是心脑血管疾病独立的危险因素，并且降低同型半胱氨酸水平在H型高血压治疗中至关重要，同时同型半胱氨酸在脑卒中及其他疾病亦具有重要的临床价值。
本文就同型半胱氨酸及部分相关疾病进行叙述。
关键词：同型半胱氨酸；冠心病；H型高血压；脑卒中中图分类号：R589 文献标识码：A DOI: 10.19613/ki.1671-3141.2018.69.045本文引用格式：张雪敏,冯玉宝.同型半胱氨酸的研究进展[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(69):71-72.0 引言同型半胱氨酸（Homocysteine, Hcy）是在肌肉与肝脏中形成的含有细胞毒性的含硫氨基酸。
Hcy在血浆中存在两种形式，一种是结合性，一种是游离性，一般血清中检测的Hcy 称为总Hcy[1]。
Hcy的主要代谢途径有两种，分别是甲基化形成蛋氨酸和丝氨酸缩合形成胺硫醚，其中重要的辅助因子有叶酸、维生素B12和维生素B6。
近年研究报道，外界摄入蛋氨酸含量与血清Hcy含量存在正相关性，因此当维生素B12、维生素B6摄入不足及摄入过量含蛋氨酸的食物均可使血清Hcy水平升高。
近年研究表明，高同型半胱氨酸（Hyper-Homocysteinemia, HHcy）是心血管疾病的独立危险因素，与H型高血压、冠心病、脑卒中等疾病关联密切[2]。
本文就Hcy 与相关疾病进行综述。
1 同型半胱氨酸与冠心病冠心病（Coronary Atherosclerotic Heart Disease, CAHD）是指动脉粥样硬化造成动脉管壁硬化、管腔狭窄，导致心肌细胞供血不足的疾病，是一种常见的心血管病。
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第47卷第10期2019年5月广 州 化 工Guangzhou Chemical IndustryVol.47No.10May.2019同型半胱氨酸检测方法的研究进展*肖 倩,杨 颖,甘家宝,张瑞云,刘春叶(西安医学院药学院,陕西 西安 710021)摘 要:同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)在细胞和组织的生长中起重要作用,人体Hcy水平与病理过程和人类疾病密切相关,实现准确㊁快速㊁高选择性地检测血尿中Hcy含量,对生命科学研究以及临床诊断具有重要的作用㊂对Hcy的检测方法进行了综述,分别对放射酶法㊁免疫法㊁HPLC法㊁质谱法㊁毛细管电泳法㊁微流控纸芯片法等的优缺点进行对比总结,为Hcy的研究和临床诊断提供了参考㊂关键词:同型半胱氨酸;检测方法;微流控纸芯片 中图分类号:R1 文献标志码:A文章编号:1001-9677(2019)10-0014-04*基金项目:国家自然科学基金(No:81202492);陕西省大创项目(No:201825029);校级大创项目(No:2018DC-29)㊂第一作者:肖倩(1996-),女,药学专业本科生㊂通讯作者:刘春叶(1977-),教授,主要从事药物分析及质量评价㊂Research Progress on Detection Methods of Homocysteine*XIAO Qian,YANG Ying,GAN Jia-bao,ZHANG Rui-yun,LIU Chun-ye(School of Pharmacry,Xi’an Medical University,Shaanxi Xi’an710021,China)Abstract:Homocysteine is an essential amino acid that contains mercapto group,and it plays an important role in the growth of cells and tissues.Meanwhile,human Hcy level is closely related to the pathological process and human diseases.Therefore,accurate,rapid and highly selective detection of Hcy content in hematuria is of great significance for life science research and clinical diagnosis.The research progress on Hcy detection methods was discussed.The advantages and disadvantages of radio enzymic assays,immunoassay,HPLC method,mass spectrometer,capillary electrophoresis,paper-based microfluidic analytical devices were reviewed.The trends and future challenges of the method were summarized,which would provide references for the detection of Hcy in clinical research.Key words:homocysteine;detection methods;paper-based microfluidic analytical devices同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是含有硫分子的氨基酸,主要来源于进食过程中的蛋氨酸,即甲硫氨酸去甲基化形成Hcy㊂Hcy本身不参与蛋白质合成,也不进行编码,血液中的Hcy含量是人体健康的重要指标,Hcy浓度增高,将使人体的DNA不能很好地修复从而面临更高的疾病风险㊂此外,它还会引起重金属和自由基等人体代谢废物在体内积聚,导致各种炎症㊁细胞损伤㊂因此,检测Hcy在人体内的含量对上述疾病的预防㊁诊断和治疗非常重要,本文对目前Hcy检测方法进行㊂1 放射酶分析法放射酶实验(Radio enzymic Assays)[1],是最早测人类血清Hcy的方法㊂1981年,Kredich[2]提出相关理论㊂1984年,Ueland PM等[3]测定了大鼠㊁兔子组织提取液中的Hcy㊂1985年,HelgaRefsum等[4]测定了人血清中的Hcy含量㊂方法如下:清液加碱液,调节pH至7,加有机还原剂二硫代苏糖醇(DTT),37℃放置10min;利用活性炭不能吸附Hcy的特点,除去组织液中的其他腺苷;最后,Hcy在水解酶的催化下和同位素标识的腺苷发生反应,生成有放射性的s-腺苷半胱氨酸(SAH),用HPLC进行定量㊂实验证实,血清中70%的Hcy可与血浆中的载体蛋白组合㊂放射酶分析法敏感性和特异性比较好,但测量范围小,样品处理过程繁琐,需要经过酶培养㊁蛋白质沉淀㊁中和反应等步骤㊂但是,该方法可改进为采用薄层色谱或纸层析代替HPLC进行检测[5],不需要昂贵的仪器,实验简单易行㊂2 免疫检测法免疫检测法(immunoassay,IA)应用免疫学理论,以抗原或抗体测定样品的含量㊂IA包含荧光偏振和酶免疫两种㊂2.1 荧光偏振免疫分析法[6]1995年,Mohammed T.Shipchandler[7]中使用的荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay,FPIA)原理检测血浆/血清中的Hcy㊂FPIA测定原理:Hcy水解酶和同位素标记的大量腺苷催化Hcy产生放射性SAH,加入SAH抗体(Ab)和抗原(Ag),当待测试的SAH的浓度较高时,则该体系中抗体可以全部反应,剩余未结合的SAH;若待测SAH浓度较低第47卷第10期肖倩,等:同型半胱氨酸检测方法的研究进展15时,则产生Ag-Ab复合物;自动免疫测定分析仪测量荧光偏振振幅,然后通过标准曲线方法测定Hcy含量,本实验简单易行㊂2012年,鄢盛恺[8]经过实验表明,FPIA与四种色谱方法具有良好的相关性㊂2.2 酶免疫测定法酶免疫吸附剂(enzyme imrrmnoassay,EIA)[9]于1995年被首次报道,该方法为基于荧光偏振免疫分析的定量免疫分析法[10],具有灵敏度高㊁方便快捷的特点,适用于临床实验室检测Hcy㊂EIA和FPIA检测原理相同,但是在EIA法中,用酶取代了放射分析法中的放射性核素,增加了对底物反应的灵敏度[11]㊂EIA法操作更简单快捷,准确度高,易于实现自动化[4],且测定速度更快(82个/2.5h),可用于某些物质的定性和定量分析㊂缺点是EIA法只能测量血清/血浆Hcy,不能测量尿液中的Hcy,且不能同时测定其他硫醇物类物质㊂3 高效液相色谱法高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)具有高速㊁高效㊁高灵敏度和自动操作的特点[12],因此,HPLC是目前确定Hcy最常用的方法之一㊂HPLC可根据不同的检测方法分为荧光检测法和电化学检测法,根据其衍生方法的不同,可分为柱前衍生化㊁柱上衍生化和柱后衍生化㊂3.1 荧光检测高效液相荧光检测法(high performance liquid with fluorescence detection,HPLC-FD),多采用柱前衍生技术来测定Hcy的含量㊂1993年,FiskerStrand等[13]首次使用HPLC法对血浆和尿液中的Hcy和含硫醇化合物进行测定㊂此后,国内相关学者对其进行改进[14]㊂3.2 电化学检测高效液相电化学检测(high performance liquid with electrochemical detection,HPLC-ED)法具有样品处理简单㊁样品不需要衍生化㊁特异性高㊁自动注入㊁检测时间短㊁可以同时测量大量样品和其他硫醇类物质㊂但是HPLC-ED法也存在一些问题,如:流通池污染㊁电极腐蚀等会对测量结果产生影响,因此,需要仔细保养检测器以使检测结果稳定准确㊂因此,有人尝试使用多孔碳电极库仑检测器代替金汞电极电流检测器来克服这个缺陷㊂直到1998年,Evrouski[15]采用脉冲积分电流计解决了上述问题㊂2000年,Accinni等[16]使用HPLC结合电化学库仑阵列来诊断新生儿筛查卡上干血斑中的Hcy,该方法线性关系好㊁精密度高㊁回收率高㊁简便快速㊁灵敏㊁价格低廉,在新生儿检测代谢异常方面有重要作用,且可被用作新生儿的Hcy常规诊断方法㊂4 质谱法1993年,Ueland等[17]首先采用(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)GC-MS检测Hcy,以DTT作还原剂,N-甲基-N-(叔丁基二甲基)三氟乙酰胺为衍生化试剂,用GC-MS法在24h内完成了160份样品的分离和定量分析,可用于尿样中Hcy的测定㊂该法的缺点是半自动化和设备试剂的高成本,且衍生化过程复杂㊁耗时㊂同HPLC相比,GC-MS更可靠㊁选择性更高㊁更灵敏(GC-MS检测限0.1pmol/L;HPLC 检测极限2~4pmol/L)㊁精度更高,尤其适合低浓度Hcy的测定[18]㊂1999年,Magera等[19]发展了液相层析电喷涂串联质谱法(LC-MS/MS),即利用同位素稀释和电喷涂电离串联质谱仪结合测定Hcy,该方法具有多样性㊁高特异性和高灵敏度㊁成本低㊁检测速度快㊁易于自动化的特性,可用于检测尿液中Hcy,适用于大量临床样品(150~200/d)的Hcy检测㊂且此法与HPLC㊁FPIA均有很好的相关性㊂5 毛细管电泳法使用毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)法测定Hcy 已有文献报道[10]㊂主要过程为:Hcy与7-氟苯并-2-氧杂-1, 3-恶二唑-4-磺酰胺(ABD-F)在50℃下衍生反应,使用二极管阵列紫外检测器,电泳分离时间不超过8min,该方法可用于血液和尿液Hcy的高灵敏度检测[20]㊂与HPLC相比,CE法不使用固定相,避免了测量元件形态和固定相的形态变换,可更简单㊁更快速㊁更准确㊁更灵敏㊁更有效地进行Hcy㊁蛋氨酸㊁半胱氨酸㊁谷胱甘肽的同时测定,非常适用于临床研究和日常使用[21]㊂Kang等[22]也证明CE是简单且快速的自动的方法,特别是对于微量(1μL)㊁低浓度的Hcy样品和其他含硫醇的化合物的测定更具优势㊂但CE一般耗时较长,在实时监测方面并不实用㊂6 纸芯片法近年来,人们对小型的传感器件大量需求,以及对低价格的诊断手段的追求,使便携式微流控纸芯片的(microfluidic paper-based analytical devices,μPADs)关注度逐渐增加,成为当前的热门㊂μPADs是由Whitesides研究小组[23]在2007年提出,与传统的微流体分析系统相比,它具有自己独特的优势:纸质介质易于使用和运输,因为它们资源丰富,成本低,可再生,易于处理,可回收,易于化学改性,具有良好的稳定性和良好的生物相容性㊂因而,在食品和药物测试中㊁在环境检测㊁临床诊断上都有着较为理想的前景(表1)㊂表1 微流控纸芯片在各领域的应用研究Table1 Application ofμPADs in various fields应用领域检测样品参考文献临床诊断葡萄糖丙肝病毒[24][25]检测可替宁乳酸脱氢酶氨基转氨酶埃博拉病毒牛血清蛋白[26][27][28][29][30]环境污染物的监测非金属环境污染物的监测硝酸盐和亚硝酸盐铜离子[31-32][33][34-35]食品安全有毒物质的检测杀虫剂敌敌畏大肠杆菌单增李斯特菌沙门氏菌[36][37][38][38][38]汞离子㊁银离子氨基糖苷类抗生素[39][39][39] Kong等[40]构建了基于纸张双功能区μPADs,通过优选的多个氧化锌纳米树脂(ZnO nanoflowers,ZnO-NFS)和分子印迹聚合物(molecularly imprinting polymer,MIP)对L-谷氨酸和L-16 广 州 化 工2019年5月半胱氨酸进行检测,检出限分别为9.6μmol/L和24μpm/L,灵敏度较高㊂利用光氧化产物对紫外光下的生物分子进行高灵敏检测,可避免同一区域内多次修饰对重现性的影响,为L-谷氨酸和L-半胱氨酸提供了更有效的分析策略㊂7 结 语Hcy的检测有助于心血管疾病和糖尿病的早期预防㊁诊断与治疗㊂目前,Hcy的检测方法常用的为放射酶实验㊁免疫检测法㊁HPLC法㊁CE法等,前两者需要对样品进行标记,步骤繁琐,环境污染大;后两者则需要昂贵的仪器,不适合经济发达和偏远地区使用㊂与此相比,μPADs成本低廉㊁携带方便㊁易回收㊁无环境污染,很好地弥补了上述缺点,满足分析平台微型化㊁自动化㊁集成化的要求,为Hcy的检测提供了一个全新的平台㊂虽然该μPADs方法在Hcy的检测方面鲜有报道,相信在不久之后,μPADs会成为Hcy检测的新平台,为心脑血管等疾病的预防诊断提供新方法,对人们的健康提供保障㊂参考文献[1] 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