培养基管理制度

培养基管理制度

1．目的：确保产品的无菌及微生物限度检查结果真实可靠。

2．范围：检验用的培养基。

3．术语和定义：无。

4．职责：检验员负责实施，质量部负责监督。

5．内容：

5.1 人员资质

微生物检验员应具有一定的微生物学专业知识，并经过专业培训，持证上岗。

5.2 种类和要求

本实验室所使用的培养基均为脱水、干燥的商品培养基。

5.3购买

培养基保管员根据培养基的存量及时提出申购。应当从可靠的供应商处采购，生产厂家应尽量稳定，必要时应当对供应商进行评估。

5.4接收

培养基购进后，由保管员负责接收，并及时填写接收记录。若培养基标签未标注效期，则应当在培养基的容器上标注接收日期。购买的培养基应有处方和使用说明，不得有结块或颜色改变的现象。

5.5贮藏

5.5.1 培养基性状均为粉末，有特殊气味，容易受潮。保管员核对品名、数量后，按标签的要求置于阴凉干燥处避光密封贮藏。

5.5.2 贮存期限：新购进未开封的脱水培养基按厂家说明书上的期限贮存。开封后的脱水培养基的贮存条件和效期均按说明书上的规定执行。

5.6制备

5.6.1 按规定对初次使用或新购进批次的培养基按《培养基的适用性检查操作规程》进行适用性检查，并填写相关实验记录。

5.6.2 在配制培养基时先检查脱水培养基的外观性状，凡结块、霉变或变色者均不能使用。

5.6.3 制备所用的玻璃器皿须按规定的方式进行洗涤、干燥。干燥后的器皿按规定的方式进行灭菌。已灭菌的器皿按规定的要求存放，并在规定的期限内使用。

5.6.4配制

5.6.4.1 培养基按其说明书和规定的程序进行准确称量，用量筒量取一定量纯化水加入培养基，用玻璃棒搅拌均匀。需加热时应不停搅拌，防止粘糊。注意不要过度加热，以避免培养基颜色变深。培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。

5.6.4.2 填写配制记录，其内容有名称、批号、配制量、所用脱水培养基批号、称量数、溶剂量、灭菌时间、灭菌程序参数、配制日期、配制者、截止使用日期以及质

量检查结果。

5.6.5 分装与灭菌：

5.6.5.1 配制好的培养基用耐高温、高压瓶分装，将瓶盖拧上但不能拧紧，预留出气的空隙，然后置高温高压（121℃，0.103MPa）灭菌20分钟，取出后及时拧紧瓶盖密封，冷却至室温，在容器上做好标识，注明名称、批号、截止使用日期等，置2~8℃环境中保存。

5.6.5.2填写灭菌记录，其内容有灭菌器的状态、灭菌物、灭菌起始时间、灭菌程序参数、操作者与复核者。

5.6.5.3 分装后的培养基必须在配制当天（2小时内）进行灭菌处理。

5.6.6 贮藏：

5.6.6.1 培养基应在冰箱避光贮藏，冰箱温度以2~8℃为宜。培养基不得在0℃或0℃以下存放，冷冻可能破坏凝胶特性。

5.6.6.2 贮藏于2~8℃的培养基，如保存密闭容器中应在2个月内使用，如保存于非密封容器内应在3个周内使用。

5.7使用

5.7.1 培养基使用前应检查外观。容器和盖子破裂的，培养基出现失水、沉淀、结晶、过期、长菌等现象的，不能再使用，须及时处理。

5.7.2 灭菌后的固体培养基只允许再融化1次，以避免因过度受热造成培养基质量下降或微生物污染。培养基可置60℃恒温水浴箱中进行加温融化（水浴高度不能超过瓶身的2/3，一般30分钟左右即可），待其完全融化后，取出，用一次性无尘布擦干瓶身，按微生物实验室管理制度的要求传入洁净实验室的超净工作台（或生物安全柜）下进行平板制备。

5.7.3 倾注培养基时，应擦干培养基容器、培养皿或试管外表面的水分，避免容器外壁的水滴进入培养基中造成污染。平板倾注时，应尽量避免形成气泡，凝固后应不产生裂缝或涟漪。如果用试管分装，液体培养基的装量约为试管的1/4高度，固体斜面培养基的装量约为试管的1/5高度，需要摆斜面的试管要趁热倾斜摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。

5.8 销毁

使用过的培养基（包括过期、失效、被污染的培养基）应经高温高压（121℃，0.103MPa）30分钟灭菌处理后才能丢弃。