不同产地黄芪HPLC_DAD指纹图谱及主要黄酮成分含量测定

明黄芪具有增强肌 体 的 免 疫 功 能，利 尿、抗 疲 劳、抗
病毒、镇痛等作用，临 床 主 要 用 于 气 虚 乏 力、食 少 便
溏、中 气 下 wenku.baidu.com、久 泻 脱 肛、血 虚 萎 黄、内 热 消 渴 等
病 。 ［２］ 黄芪是常用 补 气 类 中 药 材，在 宁 夏 六 盘 山 地
区广泛种植，是 西 北 区 域 大 宗 药 材 之 一。 近 年 来，
黄 芪 （Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ）为 豆 科 植 物 蒙 古 黄 芪 Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．ｖａｒ．ｍｏｎ－ ｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ和膜荚黄芪 Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍ－ ｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．的 干 燥 根 ［１］，主 产 于 内 蒙 古 、 山 西 、甘 肃 、黑 龙 江 、宁 夏 等 地 ，现 代 药 理 实 验 研 究 表
［收 稿 日 期 ］２０１４－０９－２３
不同产地黄芪 ＨＰＬＣ／ＤＡＤ 指纹图谱及主要黄酮成分含量测定
李婷婷１，舒志恒２，于良２，郝文静２，付雪艳１，２ （１．宁夏医科大学·回 医 药 现 代 化 省 部 共 建 教 育 部 重 点 实 验 室 ，宁 夏 银
川 ７５０００４；２．宁夏医科大学·宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏 银川 ７５０００４）
ＨＰＬＣ／ＤＡＤ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｉｎ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉｇｉｎｓ
ＬＩ Ｔｉｎｇ－ｔｉｎｇ１，ＳＨＵ Ｚｈｉ－ｈｅｎｇ２，ＹＵ Ｌｉａｎｇ２，ＨＡＯ Ｗｅｎ－ｊｉｎｇ２，ＦＵ Ｘｕｅ－ｙａｎ２（１．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｈｕｉ Ｅｔｈｎｉｃ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｍａｉｎ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉ－ ｇｉｎｓ，ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｄａｔａ ｓｕｐｐｏｒｔｓ ｆｏｒ ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ，ａｎｄ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｆｏｒ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｏｆ １２ ｂａｔｃｈｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉｇｉｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂ－ ｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＨＰＬＣ／ＤＡＤ ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｃａｍｐａｎｕｌｉｎ ａｎｄ ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ／ＤＡＤ ｍｅｔｈｏｄ． Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ （４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，５μｍ），ｗｉｔｈ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ａｃｅ－
［基金项目］宁夏回族自治区卫生计生委重点科研项目：黄芪药材黄酮成分的抗炎、耐缺氧的谱效关系研究（编号：２０１４－ＮＷ－００９）；国家 自 然 科 学基金（编号：８１４６０５９９） ［作者简介］李婷婷，女，硕士，研 究 方 向：中 （回）药 药 效 物 质 基 础，Ｅ－ｍａｉｌ：ｎｘｌｔｔ７０８８＠１６３．ｃｏｍ ［通 讯 作 者］付 雪 艳 ，女 ，副 教 授 ，博 士 ，研 究 方 向 ：中 （回 ）药 提 取 分 离 与 结 构 鉴 定 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｆｕｘｕｅｙａｎ１２１５＠１６３．ｃｏｍ
［５］ 钟祥，李应东．小檗碱药理作用研究进展［Ｊ］．亚太传 统 医 药， ２０１２，８（３）：１８５－１８６．
［６］ 王曙光，方俊天，包青山，等．黄连解毒散等兽用 中 成 药 中 盐 酸 小檗碱的紫外含量测 定 ［Ｊ］．内 蒙 古 石 油 化 工，２００１，２７（０２）： １５４－１５５．
［７］ 马成 花．薄 层 扫 描 法 测 定 利 舒 康 胶 囊 中 盐 酸 小 檗 碱 的 含 量 ［Ｊ］．中 国 医 院 药 学 杂 志 ，２００６，２６（０８）：１０４２－１０４３．
药材标准化种植、谱 效 关 系 研 究 及 药 材 质 量 标 准 全
面提升提供数据支撑。
１ 材 料 １．１ 药 材 黄 芪 Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ，均 采 自 以 下 不 同产地，经宁夏医科 大 学 药 学 院 生 药 学 教 研 室 张 新
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｍｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｎｉｎｇｘｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｏｄｅｒｎ Ｈｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｎｉｎｇｘｉａ Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ）
［摘要］ 目的：建立黄芪 ＨＰＬＣ 指纹图谱并测定黄酮类成分的 含 量，为 黄 芪 药 材 标 准 化 种 植、谱 效 关 系 研 究 及 药 材 质 量 标 准 全面提升提供数据支撑。方法：采用 ＨＰＬＣ／ＤＡＤ 法建立１２批次黄芪 药 材 指 纹 图 谱，并 对 毛 蕊 异 黄 铜 苷、芒 柄 花 黄 素 进 行 含 量测定，色谱柱：Ｗｅｌｃｈｒｏｍ－Ｃ１８色谱柱（４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，５μｍ）；梯 度 洗 脱 流 动 相 为 甲 醇 －乙 睛－０．０２ ｍｏｌ·Ｌ－１磷 酸 二 氢 钠 溶 液，流速１．２ ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长２５４ ｎｍ。结果：应用指纹图谱相似度评价软件 找 出 １５ 个 共 有 峰，指 认 ２ 个 色 谱 峰，９ 个 样 品 相似度都在０．９００以上，毛蕊异黄酮苷和芒柄花黄素进行定量检测，检测 范 围 内 线 性 关 系 良 好 。 结 论：本 研 究 建 立 黄 芪 药 材 指 纹 谱 方 法 稳 定 ，数 据 可 靠 ，可 用 于 控 制 黄 芪 药 材 质 量 。 ［关 键 词 ］ 黄 芪 ；指 纹 图 谱 ；含 量 测 定 ；不 同 产 地 ［中 图 分 类 号 ］Ｒ９２７．２ ［文 献 标 识 码 ］Ａ ［文 章 编 号 ］１００１－５２１３（２０１５）１３－１１８２－０６ ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１５．１３．０５
· １１８２ ·
中国医院药学杂志２０１５年７月第３５卷第１３期 Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，Ｊｕｌ ２０１５，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１３
敏度和准确度都能符合测定要求。
参考文献：
［１］ 刘 利 敏 ．中 药 材 黄 柏 及 其 开 发 利 用 ［Ｊ］．陕 西 师 范 大 学 学 报 （自 然 科 学 版 ），２００４，３２（Ｓ２）：１７４－１７９．
［２］ 侯小涛，戴航，周江煜．黄柏 的 药 理 研 究 进 展［Ｊ］．时 珍 国 医 国 药 ，２００７，１８（０２）：４９８－５００
［３］ 胡 俊 青 ，胡 晓 ．黄 柏 化 学 成 分 和 药 理 作 用 的 现 代 研 究 ［Ｊ］．当 代 医 学 ，２００９，１５（０７）：１３９－１４１．
［４］ 谢义明．小檗碱的药理研 究 及 临 床 应 用［Ｊ］．中 国 医 院 药 学 杂 志 ，１９９１，１１（１２）：１２－１３，５０．
檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀 和 盐 酸 药 根 碱 的 含 量 ［Ｊ］．中 药 材 ，２０１１，３４ （０３）：４６９－４７１． ［１０］ 王峰，黄 薇，李 倩．胶 束 增 敏 荧 光 光 度 法 测 定 小 檗 碱 的 含 量 ［Ｊ］．理 化 检 验 （化 学 分 册 ），２００９，４５（０３）：３０８－３０９＋３１２． ［１１］ 马秋菊，任佳佳，褚志杰，等．高效液相色谱法同 时 测 定 马 黄 酊 中士的宁、马钱子碱和小檗碱的含量［Ｊ］．中 国 医 院 药 学 杂 志， ２０１４，３４（１９）：１６８４－１６８７． ［１２］ 张倩，蔡丽芬，钟 国 跃，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ 法 同 时 测 定 关 黄 柏 中 小 檗碱、药根碱、巴马汀及黄柏酮含量的方法 学 研 究［Ｊ］．中 国 中 药 杂 志 ，２０１０，３５（１６）：２０６１－２０６４． ［１３］ 陈玉兰，陶凌晖，侯华，等．核磁共振氢谱内标法 测 定 盐 酸 小 檗 碱 的 含 量 ［Ｊ］．第 三 军 医 大 学 学 报 ，２００９，３１（２２）：２２１７－２２１９． ［１４］Ｌｉ Ｎ，Ｎｇ Ｔ Ｂ，Ｗｏｎｇ Ｊ Ｈ，ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ ｐｈｅｎｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ ａｎｄ ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ ｍｕｓｈｒｏｏｍｓ ｂｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ，２０１３，１３９（１／４）：１１６１－１１６７． ［１５］ 董学芝，赵海兰，魏林恒，等．氧 氟 沙 星 选 择 性 电 极 的 制 备 及 其 性 能 研 究 ［Ｊ］．分 析 测 试 技 术 与 仪 器 ，２００１，７（２）：７８～８０ ［１６］ 中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：２８６－２８７．
［８］ 史伯安，王望峰，曾艳，等．反相流动注射化学发 光 法 测 定 盐 酸 小檗碱［Ｊ］．湖北 民 族 学 院 学 报 （自 然 科 学 版 ），２００５，２３（０３）： ２３９－２４２．
［９］ 温 金 莲 ，刘 丹 ，宋 粉 云 ．毛 细 管 电 泳 法 测 定 一 清 胶 囊 中 盐 酸 小
有文献报道黄芪黄酮类成分作为黄芪药材的主要成
分之一，具有抗心 肌 缺 血、抗 肿 瘤、抗 损 伤、抗 炎、抗
突变等多种重要药理作用［３－６］，但目前黄芪药 材 指 纹
图谱的研究方法多 针 对 于 对 皂 苷 类 成 分 的 研 究，因
此 本 文 针 对 黄 酮 类 成 分 的 测 定 ，建 立 １２ 批 次 黄 芪 药 材指纹图谱并测定 黄 酮 类 主 要 成 分 的 含 量，为 黄 芪
中国医院药学杂志２０１５年７月第３５卷第１３期 Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，Ｊｕｌ ２０１５，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１３
· １１８３ ·
ｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ａｎｄ ０．０２ ｍｏｌ·Ｌ－１ ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ ｏｒｔｈｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ （ｐＨ ３．２）ａｔ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １．２ ｍｌ·ｍｉｎ－１ ａｔ ２５４ ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｆｉｆ－ ｔｅｅｎ ｃｏｍｍｏｎ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ａｆｆｉｒｍｅｄ ｂｙ “Ｃｈｉｎｅｓｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ＂ ａｎｄ ４ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｏｆ ９ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ０．９．Ｃａｍｐａｎｕｌｉｎ ａｎｄ ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ ｓｈｏｗｅｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ（ｒ＞０．９９９ ６）ｗｉｔｈｉｎ ｔｅｓｔ ｒａｎｇｅ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉｇｉｎｓ