不同产地黄芪HPLC_DAD指纹图谱及主要黄酮成分含量测定
不同产地黄芪总黄酮HPLC指纹图谱研究
不同产地黄芪总黄酮HPLC指纹图谱研究
陈伯丛;王汝上;罗德祥
【期刊名称】《北方药学》
【年(卷),期】2016(013)007
【摘要】目的:建立黄芪总黄酮的HPLC指纹图谱分析方法,评价不同来源药材的质量.方法:采用二极管阵列检测器,色谱柱为AglientExtend
C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2％甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm.结果:建立14个共有特征峰的HPLC指纹图谱,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求.结论:该方法稳定可靠、重复性好,可结合含量测定用于全面控制黄芪的质量.
【总页数】3页(P8-10)
【作者】陈伯丛;王汝上;罗德祥
【作者单位】广东省佛山市中医院佛山528000;广州康臣药物研究有限公司广州510530;广东省佛山市中医院佛山528000
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.山西省不同产地中药材黄芪HPLC指纹图谱研究 [J], 石玉娟;解军;李桂兰
2.不同产地黄芪HPLC指纹图谱的聚类分析及相似度评价 [J], 赵慧辉;赵平;吴刚;李桂兰;刘养清
3.基于HPLC法测定不同产地黄芪总黄酮和异黄酮的含量 [J], Liu Yaling;Geng Yaping;Huang Xiaosu;Zhao Linru;Zhang Pengfei
4.不同栽培方式产地蒙古黄芪中黄芪甲苷和总黄酮含量差异分析 [J], 田文仓; 魏胜利; 冯紫薇; 石福娟; 石玥; 张靖晗; 丁一明; 栾震; 宋学武; 赵婷
5.基于HPLC指纹图谱及聚类分析评价不同产地黄芪的质量 [J], 王兆华;张大军;黄凤辉
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建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱方法论文
建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的方法【摘要】目的就建立黄芪药材中黄酮类成分hplc指纹图谱的方法进行探讨。
方法采用hplc法建立黄芪中黄酮类成分指纹图谱。
结果对照品在0.0834-1.5012μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。
回收率、平均回收率、rsd都较高。
除了样品2（山西大同）和样品10（陕西旬邑）外，其它各批的相似度均大于o.94。
结论本文所选用的方法回收率好、操作简便，同时专属性较强，可以对黄芪药材中黄酮类成分的质量更好地控制。
【关键词】黄芪药材；黄酮类成分；hplc指纹图谱黄芪为补气中药，有补气升阳、益卫固表，托毒排脓和益气利水作用。
产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。
春秋采挖，除去须根、根头，晒干。
切片，生用或蜜炙用。
黄芪性微温、味甘，含多种微量元素（铜、锌、硒等）、多种叶酸、氨基酸、多糖、蔗糖、皂甙，可以利尿消肿、补肺固表、补脾益气，可以有效地调节血糖含量、增强心肌收缩力、抗应激、抗衰老、抗菌、降压、利尿，主治肢体麻木、贫血萎黄、气血不足、脏器下垂、中气下陷、咳喘短气、肺气虚弱、气虚自汗、脾胃气虚等[1][2]，用hplc指纹图谱法测定黄芪药材中黄酮类成分，方法简便可行，准确可靠[3]1 仪器与试药1.1 仪器 agilengt1260高效液相色谱仪（lc2000）、auw-220d 电子分析天平（日本岛津）、a4dl型自动纯水蒸馏器（广州恒广科学仪器有限公司）、dsq10260超声仪（上海亚荣生化仪器厂）、自动进样器、uv2401-pc紫外分光光度计（日本岛津）、re-52aa旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。
1.2 试药黄芪药材均采集于全国各地，按照产地不同分为十批次；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯[4]2 方法与结果2.1 供试品溶液及阴性对照溶液的制备取6.0g黄芪将其研细，然后进行精密称定，称定之后将其置于瓶中，加入40ml含量为70%的乙醇。
HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量
HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【摘要】目的采用HPLC法同时测定不同主产地黄芪饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量.方法色谱柱固定相为Inertsil ODS-SPC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(含0.2％甲酸),梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,紫外检测波长260 nm,柱温为40℃.结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在0.00569 ～0.0569、0.00448 ～0.0448、0.00257～0.0257、0.00265～0.0265mg/mL时与色谱峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为98.72％、99.32％、100.03％、99.78％,RSD为1.06％、2.32％、2.86％、1.08％.结论该方法准确灵敏,可作为评价不同产地黄芪饮片的质量控制方法.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2016(037)003【总页数】3页(P63-65)【关键词】黄芪饮片;毛蕊异黄酮葡萄糖苷;芒柄花苷;毛蕊异黄酮;芒柄花素;HPLC 【作者】蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【作者单位】四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R284.2【Abstract】Objective: To determine the contents of calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin in Astragalus Pieces of different main origins by HPLC. Methods: Column stationary phase was Inertsil ODS-SPC18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm) and mobile phase was acetonitrile-water (containing 0.2% formic acid), by gradient elute, with 1.0 mL·min-1 of flow rate and 260 nm of ultraviolet detector wavelength, at 40℃ of column temperature. Results: The calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin showed a good linear relationship with chromatographic peak areas at the range of 0.00569-0.0569, 0.00448-0.0448, 0.00257-0.0257 and 0.00265-0.0265mg/mL. The average recovery was 98.72%, 99.32%, 100.03% and 99.78%, and RSD was 1.06%, 2.32%, 2.86% and 1.08%. Conclusion: The method is accurate and sensitive and can be valued as a quality control method for Astragalus Pieces of different origins.【Key words】Astragalus Pieces, calycosin-glucoside, ononin, calycosin, formononetin, HPLC黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao.或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。
含量测定结合HPLC指纹图谱优选黄芪不同栽培方式
含量测定结合HPLC指纹图谱优选黄芪不同栽培方式田曼;王雅丽;颜永刚;张岗;王昌利【摘要】目的优选黄芪药材的最佳栽培方式.方法采用高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术,以4个成分(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)的含量及黄芪黄酮的高效液相色谱特征图谱的共有峰总面积之和为综合评判指标,通过考察不同栽培方式(不起垄覆膜、10 cm垄高覆膜、20 cm垄高覆膜、30 cm垄高覆膜、露头移栽)对黄芪药材质量的影响.结果当栽培方式为不起垄覆膜(即当地传统的平地开沟覆膜移栽)时,黄芪药材质量最优.结论该试验考察了不同栽培方式对于黄芪药材质量的影响,为以后黄芪药材进一步的种植研究提供依据.【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2018(037)007【总页数】4页(P373-376)【关键词】黄芪;起垄覆膜;含量测定;指纹图谱【作者】田曼;王雅丽;颜永刚;张岗;王昌利【作者单位】陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9黄芪为豆科(Leguminosae sp)黄耆属(Astragalus Linn)植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.var.mongholicus (Bge.) Hsiao]或膜荚黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.)]的干燥根[1]，又名棉芪。
主要分布于内蒙古、甘肃、山西、陕西等地。
现代研究表明黄芪具有抗肿瘤[2]、保护心肌缺血[3]、保护心血管内皮细胞[4]、免疫调节[5]、抗衰老[6]、抗氧化[7]等作用。
随着现代研究的不断深入，人们对于黄芪的需求量也在逐年增加，但是由于大规模采挖导致野生黄芪的资源也在逐年锐减，如今，野生黄芪已被列为国家三级保护植物[8]。
HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量
Sample
Astragaloside Ⅳ3 7 , 3′- dihydroxy 4′-
met hoxyisoflavone 7 - hydroxy - 4′-
met hoxyisoflavone
n
1
2
3
4
5
3
1. 054 ±0. 024 1. 862 ±0. 030 0. 889 ±0. 013 1. 083 ±0. 133 1. 155 ±0. 025
Sample
Astragaloside Ⅳ 7 , 3′- dihydroxy 4′-
met hoxyisoflavone 7 - hydroxy - 4′-
met hoxyisoflavone
n
6
7
8
9
10
3
1. 019 ±0. 043 1. 675 ±0. 130 1. 496 ±0. 230 0. 472 ±0. 003 0. 934 ±0. 013
3
2. 141 ±0. 032 9. 667 ±0. 009 13. 055 ±0. 051 3. 650 ±0. 020 0. 763 ±0. 006
3 0. 414 7 ±0. 001 0. 899 ±0. 007 9. 904 ±0. 041 2. 379 ±0. 020 0. 670 ±0. 005
3
1. 755 ±0. 345 1. 193 ±0. 324 1. 290 ±0. 066 0. 457 ±0. 012 0. 290 ±0. 131
7 , 3′- dihydroxy -
4′-
3
1. 316 ±0. 036 1. 389 ±0. 147 0. 840 ±0. 097 7. 541 ±0. 004 2. 078 ±0. 027
HPLC法同时测定黄芪药材中10种黄酮类成分的含量
HPLC法同时测定黄芪药材中10种黄酮类成分的含量张妍;董琳;雍婧姣;毛福英;尹蕾;付雪艳【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2017(028)021【摘要】目的:建立同时测定黄芪药材中10种黄酮类成分含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Agilent SB-C18,流动相为乙腈-0.3%甲酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为35℃,进样量为10μL.结果:毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、异槲皮苷、染料木苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、槲皮素、染料木素、山柰酚、异鼠李素和芒炳花素检测进样量线性范围分别为0.03029~1.5145μg(r=0.9994)、0.01500~0.7500μg(r=0.9995)、0.00739~0.3695μg(r=0.9991)、0.12011~6.0055μg(r=0.9998)、0.03836~1.918μg(r=0.9999)、0.02989~1.4945μg(r=0.9995)、0.00704~0.352μg(r=0.9994)、0.01683~0.8415μg(r=0.9995)、0.00454~0.227μg(r=0.9999)、0.01336~0.668μg(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为99.55%~100.45%(RSD=0.36%,n=6)、99.34%~101.00%(RSD=0.59%,n=6)、98.05%~100.36%(RSD=1.27%,n=6)、99.73%~100.13%(RSD=0.18%,n=6)、99.70%~100.30%(RSD=0.22%,n=6)、99.67%~103.27%(RSD=1.37%,n=6)、98.13%~104.41%(RSD=2.37%,n=6)、96.35%~100.06%(RSD=1.46%,n=6)、99.47%~101.13%(RSD=0.60%,n=6)、99.70%~100.06%(RSD=0.15%,n=6).结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于黄芪药材中10种黄酮类成分含量的同时测定.%OBJECTIVE:To establish a method for simultaneousdetermination of 10 flavonoids in Astragalus membranaceus. METHODS:HPLC method was adopted. The determination was performed on Agilent SB-C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.3% formic acid (gradient elution) at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 254 nm, and the column temperature was 35 ℃. The sample size was 10 μL. RESULTS:The linear ranges of calycosin-7-O-glucoside,iso-quercitrin,genistin,ononin,calycosin,quercetin,genistein,kaempferol,isorha mnetin and formononetion were 0.03029-1.5145μg (r=0.9994),0.01500-0.7500 μg(r=0.9995),0.00739-0.3695 μg(r=0.9991),0.12011-6.0055μg(r=0.9998),0.03836-1.918 μg (r=0.9999),0.02989-1.4945μg(r=0.9995),0.00704-0.352 μg(r=0.9994),0.01683-0.8415μg(r=0.9995),0.00454-0.227μg(r=0.9999),0.01336-0.668μg(r=0.9999),respectively. RSDs of precision,stability and reproducibility tests were all lower than 2.0% . The recoveries were 99.55% -100.45%(RSD=0.36% ,n=6) ,99.34% -101.00%(RSD=0.59% ,n=6) , 98.05%-100.36%(RSD=1.27%,n=6),99.73%-100.13%(RSD=0.18%,n=6),99.70%-100.30%(RSD=0.22%,n=6), 99.67%-103.27%(RSD=1.37%,n=6),98.13%-104.41%(RSD=2.37%,n=6),96.35%-100.06%(RSD=1.46%,n=6), 99.47%-101.13%(RSD=0.60%,n=6),99.70%-100.06%(RSD=0.15%,n=6),respectively. CONCLUSIONS:This method is convenient,sensitive,stable and reproducible,can be used for simultaneous determination of 10 flavonoidsin A. membranaceus.【总页数】4页(P2970-2973)【作者】张妍;董琳;雍婧姣;毛福英;尹蕾;付雪艳【作者单位】宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回医药现代化省部共建教育部重点实验室,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001;宁夏医科大学宁夏回药现代化工程技术研究中心,银川 750001【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.HPLC法同时测定黄芪饮片中4个异黄酮类成分的含量 [J], 王知斌;马振平;刘秀;王秋红;杨炳友;匡海学2.HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量 [J], 胡芳弟;封士兰;赵健雄;张勇;陈立仁3.HPLC法同时测定菟丝子药材中酚酸和黄酮类成分含量 [J], 陈蕾;赵陆华;谭喜莹4.HPLC法测定黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量 [J], 阮佳佳;林灵超5.HPLC法测定5年及6年生黄芪中黄酮类成分的含量 [J], 王利平;秦雪梅;张丽增;李欣;刘焕蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱的光谱相关色谱分析
黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱的光谱相关色谱分析
谢建伟;黄兰芳;贺云彪;胡伟;王玉林
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】2010(027)002
【摘要】用色谱与光谱联用技术,将光谱信息与色谱信息相结合,对黄芪中黄酮类化合物进行光谱相关色谱方法分析,判断中药黄芪不同色谱指纹图谱中的相关性组分,进而表征和建立4个产地黄芪中黄酮类化合物特征色谱指纹图谱.该法能用于不同产地中药黄芪的真伪和优劣的鉴别,为以后黄芪活性化合物的定性、定量关系研究及质量控制提供基础.
【总页数】5页(P553-557)
【作者】谢建伟;黄兰芳;贺云彪;胡伟;王玉林
【作者单位】衙州学院化学与制药工程系,浙江省衙州市九华北大道78号,324000;衙州学院化学与制药工程系,浙江省衙州市九华北大道78号,324000;湖南省常德市药品检验所,湖南省常德市,415000;衙州学院化学与制药工程系,浙江省衙州市九华北大道78号,324000;衙州学院化学与制药工程系,浙江省衙州市九华北大道78号,324000
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
【相关文献】
1.HPLC-DAD研究黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱 [J], 谢显珍;黄兰芳
2.箬竹叶中黄酮类化合物的高效液相色谱分析 [J], 邹耀洪
3.黄芪中黄酮类化合物药理作用研究进展 [J], 张东霞
4.近红外光谱法同时测定黄芪精口服液中黄芪多糖和黄芪甲苷的含量 [J], 刘冰;刘振尧;朱乾华;杨季冬
5.翻白草中黄酮类化合物的液相色谱分析 [J], 孟令云;杨玲;王佳祥;才秀颖;吴百杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
市售不同产地黄芪HPLC—DAD—ELSD指纹图谱及同时测定3种成分含量的方法研究
市售不同产地黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ指纹图谱及同时测定３种成分含量的方法研究廖小芳１ꎬ毕晓黎２ꎬ３ꎬ胥爱丽２ꎬ３ꎬ李养学２ꎬ３(１.广州中医药大学第五临床医学院ꎬ广东广州５１０４０５ꎻ２.广东省中医药工程技术研究院ꎬ广东广州５１００９５ꎻ３.广东省中医药研究开发重点实验室ꎬ广东广州５１００９５)摘要:目的采用高效液相色谱法㊁二极管阵列检测器和蒸发光散射检测器联用技术(ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ)建立４５批不同产地黄芪药材的指纹图谱ꎬ并在指纹图谱条件下ꎬ同时测定３种黄酮类及皂苷类成分的质量分数ꎮ方法采用Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｋｉｎｅｔｅｘ＠ＸＢＣ１８色谱柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)ꎬ流动相为乙腈￣０.０２％甲酸水(梯度洗脱)ꎬ流速为１.０ｍＬ/ｍｉｎꎬ柱温为３０ħꎬ进样量为１０μＬꎬ检测波长为２３０ｎｍꎮ蒸发光散射检测器条件:漂移管温度为６０ħꎬ载气流速为２.５Ｌ/ｍｉｎꎮ结果建立了４５批不同产地黄芪药材的ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ串联指纹图谱ꎬ并确立了ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ指纹图谱的２２个共有峰ꎬ指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和毛蕊异黄酮ꎻＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ指纹图谱确立了２２个共有峰ꎬ指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮和黄芪皂苷Ⅰꎮ毛蕊异黄酮葡萄糖苷在１２６.３５０~７５０.８１２μｇ/ｍＬ㊁毛蕊异黄酮在１６２.５００~９７５.０００μｇ/ｍＬ㊁黄芪皂苷Ⅰ在８４.２３０~５０５.３５０μｇ/ｍＬ线性关系良好ꎬｒ>０.９９９０ꎬ平均加样回收率分别为１００.５％㊁１０３.２％㊁９８.２％ꎮ结论建立的方法简单㊁准确㊁可靠ꎬ为评价和控制不同产地的黄芪药材质量提供了一定的科学依据ꎮ关键词:黄芪ꎻ指纹图谱ꎻ高效液相色谱法ꎻ毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎻ毛蕊异黄酮ꎻ黄芪皂苷Ⅰ中图分类号:Ｒ２８４.２㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９６￣３６５３(２０１８)０５￣０５５８￣０６ＤＯＩ:１０.１６８０９/ｊ.ｃｎｋｉ.２０９６－３６５３.２０１８０６０５０２收稿日期:２０１８￣０６￣０５基金项目:广东省名优中成药二次开发项目 名优中成药玉屏风颗粒的二次开发 (粤中医办函[２０１７]１９号)ꎻ广东省科技计划项目 创新中药研发平台建设 (２０１７Ａ０７０７０１０１７)作者简介:廖小芳(１９９３ )ꎬ２０１６级在读硕士研究生ꎬＥｍａｉｌ:ｌａｌａｌａ０２３４＠１２６.ｃｏｍ通信作者:毕晓黎(１９７９ )ꎬ博士ꎬ主任中药师ꎬ硕士生导师ꎬ从事中药质量评价研究ꎬＥｍａｉｌ:５４９７３２９５２＠ｑｑ.ｃｏｍꎮ网络出版时间:２０１８￣１０￣１６１０:４６:３１㊀网络出版地址:ｈｔｔｐ://ｋｎｓ.ｃｎｋｉ.ｎｅｔ/ｋｃｍｓ/ｄｅｔａｉｌ/４４.１７３３.Ｒ.２０１８１０１６.１０４６.００２.ｈｔｍｌＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔａｎｄｔｈｒｅｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ̓ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｆｏｒＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｂｙＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤＬＩＡＯＸｉａｏｆａｎｇ１ ＢＩＸｉａｏｌｉ２ ３∗ ＸＵＡｉｌｉ２ ３ ＬＩＹａｎｇｘｕｅ２ ３１.ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０４０５ Ｃｈｉｎａ ２.ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ㊀ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｂｅｏｆＴＣＭ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００９５ Ｃｈｉｎａ ３.ＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００９５ Ｃｈｉｎａ∗ＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒＥｍａｉｌ ５４９７３２９５２＠ｑｑ.ｃｏｍＡｂｓｔｒａｃｔ ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｍｅｔｈｏｄｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓ ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｔｈｒｅｅｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎＭｉｃｒｏｃｔｉｓＦｏｌｉｕｍ ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｃａｌｙｃｏｓｉｎ ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ ａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓ.ＭｅｔｈｏｄｓＩｔｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈａＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘｋｉｎｅｔｅｘ＠ＸＢ￣Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ ４.６ｍｍˑ２５０ｍｍ ５μｍ ａｎｄａｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｇｒａｄｕａｌｌｙｄｉｌｕｔｅｄｗｉｔｈａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ￣０.０２％ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄａｔａｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１.０ｍＬ/ｍｉｎ ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓｓｅｔａｔ２３０ｎｍ ａｎｄｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０ħ.Ｄｒｉｆｔｔｕｂｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ６０ħ ａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ２.５Ｌ/ｍｉｎ.ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｎｄ２２ｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｆｒｏｍＤＡＤｓｉｇｎａｌａｎｄ２２ｃｏｍｍｏｎｐｅａｋｓｆｒｏｍＥＬＳＤｓｉｇｎａｌｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｃａｌｙｃｏｓｉｎ ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅｗｅｒｅｂａｓｅｌｉｎｅｓｅｐｅｒａｔｅｄｗｉｔｈｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙ广东药科大学学报㊀ＪｏｕｒｎａｌｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ㊀Ｏｃｔ.２０１８ꎬ３４(５)㊀ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｐｅａｋａｒｅａｓｏｖｅｒｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓ ｗｉｔｈｉｎ１２６.３５０－７５０.８１２ １６２.５００－９７５.０００ ８４.２３０－５０５.３５０μｇ/ｍＬ ｒ>０.９９９０ ｗｈｏｓｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ１００.５％ １０３.２％ ９８.２％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅｓａｃｅｒｔａｉｎｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｂａｓｉｓｆｏｒｅｖａｌｕａｔｉｎｇａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｒｅａｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ＨＰＬＣ ｃａｌｙｃｏｓｉｎｇｌｙｃｏｓｉｄｅ ｃａｌｙｃｏｓｉｎ ａｓｔｒａｇａｌｏｓｉｄｅ㊀㊀黄芪为豆科植物蒙古黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ(Ｆｉｓｃｈ.)Ｂｇｅ.ｖａｒ.ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ(Ｂｇｅ.)ｈｓｉａｏ或膜荚黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ(Ｆｉｓｃｈ.)Ｂｇｅ.的干燥根ꎬ具有益气健脾㊁补气固表的功效[１]ꎮ近年来ꎬ有关黄芪药材指纹图谱的研究报道较多[２￣１０]ꎬ但未见文献对色谱峰进行指认或仅指认出１~２个成分ꎬ也有文献报道将黄芪分为黄酮类和皂苷类成分ꎬ分别用不同溶剂提取并建立相应的指纹图谱ꎮ采用(ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ)串联技术研究不同产地黄芪药材指纹图谱并同时对其黄酮类和皂苷类成分进行测定的研究尚未见有报道ꎮ本文采用ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ串联技术[１１￣１２]对不同产地黄芪药材指纹图谱进行研究ꎬ同时测定了黄酮类与皂苷类成分的质量分数ꎬ为全面评价黄芪药材的质量提供数据支持ꎮ１㊀仪器与材料１.１㊀仪器Ａｇｉｌｅｎｔ１２００高效液相色谱仪(包括二极管阵列检测器(ＤＡＤꎬ美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司)ꎻＡｌｌｔｅｃｈ３３００蒸发光散射检测器(美国)ꎻＸＳ２０５ＤＵ梅特勒电子分析天平(瑞士)ꎻＫＱ７００￣ＤＥ型数控超声波清洗机(江苏昆山市超声仪器有限公司)ꎻＭｉｌｌｉ￣ＱＡｄｅｖａｎｔａｇｅＡ１０自动型纯水机(美国)ꎻＪＰ￣１５０Ａ高速多功能粉碎机(浙江永康市五瑞工贸有限公司)ꎮ１.２㊀材料毛蕊异黄酮葡萄糖苷(批号:１１１９２０￣２０１２０３)对照品购自中国食品药品检定研究院ꎻ毛蕊异黄酮对照品(批号:Ｍ￣０２１１５０８１７)㊁黄芪皂苷Ⅰ对照品(批号:Ｈ￣０３８￣１７０４２６)购自成都瑞芬思生物科技有限公司ꎻＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＫｉｎｅｔｅｘ ＸＢ￣Ｃ１８(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)色谱柱(美国)ꎻ甲酸㊁乙腈(色谱纯ꎬ德国Ｍｅｒｃｋ)ꎻ液相用水为超纯水ꎻ甲醇(分析纯ꎬ广州化学试剂厂)ꎮ黄芪药材为全国各地购买的黄芪饮片ꎬ经广东省中医药工程技术研究院毕晓黎主任中药师鉴定ꎬ为豆科植物蒙古黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ(Ｆｉｓｃｈ.)Ｂｇｅ.ｖａｒ.ｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ(Ｂｇｅ.)ｈｓｉａｏ或膜荚黄芪Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ(Ｆｉｓｃｈ.)Ｂｇｅ.的干燥根ꎬ共４５批ꎬ样品来源见表１ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ串联指纹图谱研究２.１.１㊀色谱条件㊀色谱柱:ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＫｉｎｅｔｅｘ＠ＸＢＣ１８色谱柱ꎻ流动相:乙腈(Ａ)￣０.０２％甲酸水溶液(Ｂ)ꎬ梯度洗脱(０~６ｍｉｎꎬ５％~１２％Ａꎻ６~１０ｍｉｎꎬ１２％~２４％Ａꎻ１０~２２ｍｉｎꎬ２４％~３７％Ａꎻ２２~２６ｍｉｎꎬ３７％~４５％Ａꎻ２６~２８ｍｉｎꎬ４５％~７０％Ａꎻ２８~３７ｍｉｎꎬ７０％~８０％Ａꎻ３７~４７ｍｉｎꎬ７０％~８０％Ａ)ꎻ体积流量:１ｍＬ/ｍｉｎꎻ表１㊀各批次黄芪药材来源信息表Ｔａｂｌｅ１㊀ＴｈｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ编号产地编号产地编号产地编号产地ＨＱ１甘肃定西ＨＱ１３甘肃渭源ＨＱ２５山西大同ＨＱ３７甘肃武山ＨＱ２内蒙古包头ＨＱ１４甘肃渭源ＨＱ２６甘肃定西ＨＱ３８甘肃陇西ＨＱ３内蒙古包头ＨＱ１５甘肃渭源ＨＱ２７甘肃陇西ＨＱ３９内蒙古呼伦贝尔ＨＱ４内蒙古呼伦贝尔ＨＱ１６甘肃武山ＨＱ２８甘肃武山ＨＱ４０内蒙古包头ＨＱ５内蒙古固阳ＨＱ１７甘肃岷县ＨＱ２９内蒙古包头ＨＱ４１内蒙古固阳ＨＱ６内蒙古呼和浩特ＨＱ１８甘肃金昌ＨＱ３０山西浑源ＨＱ４２内蒙古固阳ＨＱ７甘肃岷县ＨＱ１９甘肃陇西ＨＱ３１山西浑源ＨＱ４３内蒙古呼伦贝尔ＨＱ８甘肃岷县ＨＱ２０内蒙古固阳ＨＱ３２山西浑源ＨＱ４４甘肃渭源ＨＱ９甘肃岷县ＨＱ２１甘肃武山ＨＱ３３山西大同ＨＱ４５甘肃陇南ＨＱ１０甘肃金昌ＨＱ２２内蒙古包头ＨＱ３４山西浑源ＨＱ１１甘肃定西ＨＱ２３甘肃陇西ＨＱ３５内蒙古固阳ＨＱ１２甘肃陇西ＨＱ２４内蒙古包头ＨＱ３６甘肃陇南９５５第５期㊀廖小芳ꎬ等.市售不同产地黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ指纹图谱及同时测定３种成分含量的方法研究柱温:３０ħꎻ检测波长:２３０ｎｍꎻ进样量:１０μＬꎻ气体流速:２.５ｍｉｎ/Ｌꎻ蒸发光散射检测器漂移管温度:６０ħꎮ２.１.２㊀供试品溶液的制备㊀取黄芪粉末(过４号筛)约２ｇꎬ精密称定ꎬ置５０ｍＬ具塞锥形瓶中ꎬ精密加入７０％(体积分数ꎬ下同)甲醇２５ｍＬꎬ称定质量ꎬ超声(功率７００Ｗꎬ频率５０ｋＨｚ)处理１ｈꎬ放冷ꎬ用７５％甲醇补足减失的质量ꎬ回收溶剂至干ꎬ用７０％甲醇溶液定容至５ｍＬꎬ过０.４５μｍ微孔滤膜ꎬ取续滤液ꎬ即得ꎮ２.１.３㊀对照品储备溶液的制备㊀分别取毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ对照品适量ꎬ精密称定ꎬ加甲醇制成毛蕊异黄酮葡萄糖苷２０２.１６４μｇ/ｍＬ㊁毛蕊异黄酮２６０.０００μｇ/ｍＬ㊁黄芪皂苷Ⅰ１３４.７４０μｇ/ｍＬ的对照品储备溶液ꎮ２.１.４㊀精密度试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ并按 ２.１.１ 项下色谱条件连续进样６次ꎬ记录色谱图ꎬ以１０号色谱峰(毛蕊异黄酮)为参照峰ꎬ计算各主要色谱峰相对峰面积和相对保留时间的ＲＳＤ均小于３.０％ꎬ表明方法精密度良好ꎮ２.１.５㊀重复性试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法平行制备６份供试品溶液ꎬ并按 ２.１.１ 项下色谱条件依次进样测定ꎬ记录色谱图ꎬ以１０号色谱峰(毛蕊异黄酮)为参照峰ꎬ计算各主要色谱峰相对峰面积和相对保留时间的ＲＳＤ均小于３.５％ꎬ表明方法重复性良好ꎮ２.１.６㊀稳定性试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ在 ２.１.１ 色谱条件下分别于０㊁２㊁４㊁８㊁１２㊁１８㊁２４ｈ进样测定ꎬ记录色谱图ꎬ以１０号色谱峰(毛蕊异黄酮)为参照峰ꎬ计算各主要色谱峰相对峰面积和相对保留时间的ＲＳＤ均小于２.５％ꎬ表明供试品溶液在２４ｈ内稳定ꎮ２.１.７㊀ＨＰＬＣ指纹图谱的建立㊀将收集的４５批黄芪药材样品ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ并按 ２.１.１ 项下色谱条件依次进样测定色谱图ꎮ采用国家药典委员会发布的 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２００４Ａ版) 对上述所得的色谱图进行指纹图谱分析ꎬ以黄芪对照药材为参照ꎬ提取吸收信号较强㊁峰形明显㊁稳定性较好的共有峰生成标准图谱ꎬ结果见图１￣图４ꎮ结果显示ꎬＨＰＬＣ￣ＤＡＤ法标定了２２个共有特征色谱峰ꎬ其中４号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎬ１０号峰为毛蕊异黄酮ꎻＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ法标定了２２个共有特征色谱峰ꎬ其中４号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎬ１０号峰为毛蕊异黄酮ꎬ１７号峰为黄芪皂苷Ⅰꎻ不同产地黄芪的化学成分并无太大差异ꎮ图１㊀５批黄芪药材ＨＰＬＣ叠加色谱图￣ＤＡＤ信号Ｆｉｇｕｒｅ１㊀ＨＰＬＣｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｏｆ４５㊀ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ￣ＤＡＤｓｉｇｎａｌ图２㊀４５批黄芪药材ＨＰＬＣ叠加色谱图￣ＥＬＳＤ信号Ｆｉｇｕｒｅ２㊀ＨＰＬＣｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇｏｆ４５㊀ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ￣ＥＬＳＤｓｉｇｎａｌmAU797.08379.63-37.820.0013.6227.2540.87t/m i n４.毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎻ１０.毛蕊异黄酮ꎮ图３㊀４５批黄芪药材对照特征图谱￣ＤＡＤ信号Ｆｉｇｕｒｅ３㊀ＣｏｍｍｏｎｐａｔｔｅｒｎｏｆＨＰＬＣｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆ４５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ￣ＤＡＤｓｉｇｎａｌmAU55.8636.2816.71-2.870.0013.6427.2840.92t/m i n４.毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎻ１０.毛蕊异黄酮ꎻ１７.黄芪皂苷Ⅰꎮ图４㊀４５批黄芪药材对照特征图谱￣ＥＬＳＤ信号Ｆｉｇｕｒｅ４㊀ＣｏｍｍｏｎｐａｔｔｅｒｎｏｆＨＰＬＣｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆ４５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ￣ＥＬＳＤｓｉｇｎａｌ０６５广东药科大学学报㊀第３５卷㊀２.１.８㊀相似度评价㊀以黄芪对照药材的色谱图为对照图谱ꎬ采用国家药典委员会发布的 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２００４Ａ版) 软件ꎬ计算４５批黄芪药材样品色谱图与对照图谱的相似度ꎬ结果见表２ꎮ可见ꎬ４５批药材中ꎬ４１批药材相似度大于０.９ꎬ仅有４批相似度较低(０.７~０.８之间)ꎬ表明市售黄芪药材质量较稳定ꎮ表２㊀相似度评价结果Ｔａｂｌｅ２㊀ＳｉｍｉｌａｒｉｔｉｔｉｅｓｏｆＨＰＬＣｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ编号相似度编号相似度编号相似度ＨＱ１０.９７０ＨＱ１６０.９９２ＨＱ３１０.９２６ＨＱ２０.９６６ＨＱ１７０.９８５ＨＱ３２０.９８３ＨＱ３０.９３４ＨＱ１８０.９８５ＨＱ３３０.９１８ＨＱ４０.９８８ＨＱ１９０.９７８ＨＱ３４０.９７９ＨＱ５０.９３０ＨＱ２００.９３９ＨＱ３５０.９８０ＨＱ６０.９３７ＨＱ２１０.７６７ＨＱ３６０.９３７ＨＱ７０.９８６ＨＱ２２０.９８５ＨＱ３７０.９６１ＨＱ８０.９５９ＨＱ２３０.９２５ＨＱ３８０.９９３ＨＱ９０.９６６ＨＱ２４０.９３５ＨＱ３９０.８０９ＨＱ１００.９６８ＨＱ２５０.９１６ＨＱ４００.８００ＨＱ１１０.９８７ＨＱ２６０.７５９ＨＱ４１０.９３５ＨＱ１２０.９０８ＨＱ２７０.９８２ＨＱ４２０.９２２ＨＱ１３０.９４９ＨＱ２８０.９５９ＨＱ４３０.９１２ＨＱ１４０.９７３ＨＱ２９０.９４９ＨＱ４４０.９４５ＨＱ１５０.９６３ＨＱ３００.９８８ＨＱ４５０.９７６２.１.９㊀聚类分析㊀将４５批黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ指纹图谱的２２个共有特征峰进行归一化处理ꎬ以毛蕊异黄酮色谱峰(１０号峰)为参照峰ꎬ计算１~２２号指纹峰的相对峰面积ꎬ将量化数据矩阵导入ＳＰＳＳ２２.０ꎬ采用ｗａｒｄ联结ꎬ以Ｅｕｃｌｉｄｅａｎ为样品相似度的距离公式ꎬ进行聚类分析ꎬ结果见图５ꎮ可见ꎬ４５批黄芪样品可分成５大类:Ａ(山西)㊁Ｄ(内蒙古)㊁Ｅ(甘肃)各一类ꎻＢ为内蒙古与甘肃混合类ꎻ相似度较低的样品归为Ｃ类ꎮ２.２㊀ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ法同时测定黄芪中的３种成分２.２.１㊀色谱条件及样品制备㊀分别按 ２.１.１ ２.１.２ ２.１.３ 项下方法处理ꎮ２.２.２㊀线性关系的考察㊀分别精密吸取不同体积各对照品储备溶液适量ꎬ置２ｍＬ量瓶内ꎬ用甲醇稀释至刻度ꎬ摇匀ꎬ制得质量浓度分别含毛蕊异黄酮葡萄糖苷为１２.６３５㊁２５.２７１㊁３７.９０６㊁５０.５４１㊁６３.１７６㊁７５.８１２μｇ/ｍＬꎻ毛蕊异黄酮为１６.２５０㊁３２.５００㊁４８ ７５０㊁６５.０００㊁８１.２５０㊁９７.５００μｇ/ｍＬꎻ黄芪皂苷Ⅰ为８.４２３㊁１６.８４５㊁２５.２６８㊁３３.６９０㊁４２.１１３㊁５０.５３５μｇ/ｍＬ的系列混合对照品溶液ꎬ分别精密吸取１０μＬꎬ注入液相色谱仪ꎬ按 ２.１.１ 项下色谱条件进行测定ꎬ以进样质量浓度为横坐标(Ｘ)㊁峰面积为纵坐标(Ｙ)ꎬ绘制标准曲线ꎬ求得回归方程分别为:毛蕊异黄酮葡萄糖苷ꎬＹ＝１.２８６９Ｘ＋２９７.２８ꎬｒ＝０.９９９７ꎻ毛蕊异黄酮ꎬＹ＝１.３１２７Ｘ＋４５３.２ꎬｒ＝０.９９９８ꎻ黄芪皂苷ⅠꎬＹ＝０.９８９９Ｘ＋１２８.５ꎬｒ＝０.９９９６ꎻ结果表明毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ分别在１２６.３５０~７５０.８１２㊁１６２.５００~９７５.０００㊁８４.２３０~５０５.３５０μｇ/ｍＬ范围内呈良好的线性关系ꎮ使用Ｗａｒｄ连结的树状图重新调整的距离聚集结合图５㊀４５批黄芪药材聚类分析结果Ｆｉｇｕｒｅ５㊀Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓｏｆ４５ｂａｔｃｈｅｓｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘ２.２.３㊀精密度试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ按 ２.１.１ 项下色谱条件连续进样６次ꎬ结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ色谱峰峰面积的ＲＳＤ分别为１.５６％㊁１.３７％㊁１.２８％ꎬ表明方法精密度良好ꎮ２.２.４㊀重复性试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法平行制备６份供试品溶液ꎬ按 ２.１.１ 项下色谱条件依次测定ꎬ结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ色谱峰峰面积的ＲＳＤ分别为２.２３％㊁２.５６％㊁１.８７％ꎬ表明方法重复性良好ꎮ２.２.５㊀稳定性试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ在 ２.１.１ 色谱条件下分别于０㊁２㊁４㊁８㊁１０㊁１６㊁２４ｈ进样测定ꎬ结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ色谱１６５第５期㊀廖小芳ꎬ等.市售不同产地黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ指纹图谱及同时测定３种成分含量的方法研究峰峰面积的ＲＳＤ分别为１.２１％㊁１.３６％㊁１.８７％ꎬ表明供试品溶液中的各成分在２４ｈ内稳定性良好ꎮ２.２.６㊀加样回收率试验㊀取同一批供试品(ＨＱ３２)约１ｇꎬ精密称定６份ꎬ分别置５０ｍＬ量瓶中ꎬ加入毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ对照品各适量ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备样品ꎬ注入液相色谱仪ꎬ按 ２.１.１ 项下色谱条件依次测定ꎬ计算加样回收率ꎬ结果表明毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ的平均加样回收率分别为１００.５％㊁１０３.２％㊁９８.２％ꎬＲＳＤ分别为２.５８％㊁２.３２％㊁２.４５％ꎬ见表３ꎮ２.２.７㊀样品的测定㊀取４５批黄芪药材样品粉末(过４号筛)ꎬ按 ２.１.２ 项下方法制备供试品溶液ꎬ并按 ２.１.１ 项下色谱条件进行测定ꎬ计算各样品ＤＡＤ信号中毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮和ＥＬＳＤ信号中黄芪皂苷Ⅰ的质量分数ꎬ结果见表４ꎮ可见ꎬ山西产地的毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ质量分数较其他产地的高ꎬ而甘肃和内蒙古２个产地的黄芪药材３种成分质量分数无明显区别ꎮ表３㊀加样回收率试验结果Ｔａｂｌｅ３㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｔｅｓｔ成分样品量/ｇ样品中的量/ｍｇ加入量/ｍｇ测得量/ｍｇ回收率/％平均回收率/％ＲＳＤ/％毛蕊异黄酮葡萄糖苷１.００４３０.７２３１０.７２１２１.４６３２１０１.３１１００.５２.５８１.００５４０.７２３９１.４８０２１０２.４３１.００２１０.７２１５１.４９１６１０３.３９１.００６７０.７２４８１.４２２７９８.３９１.００４５０.７２３２１.４６２５１０１.２５１.００７２０.７２５２１.３９５９９６.５１毛蕊异黄酮１.００４３０.６１４１０.６１０１１.２１５８９９.３１１０３.２２.３２１.００５４０.６１４８１.２９１０１０５.４０１.００２１０.６１２８１.２８０２１０４.６９１.００６７０.６１５６１.２４１３１０１.２７１.００４５０.６１４３１.２７１５１０３.８５１.００７２０.６１５９１.２８３６１０４.７０黄芪皂苷Ⅰ１.００４３０.２３９００.２４３８０.４７４７９８.３１９８.２２.４５１.００５４０.２３９３０.４９６６１０２.８０１.００２１０.２３８５０.４６４３９６.２６１.００６７０.２３９６０.４７３９９８.０３１.００４５０.２３９１０.４７２７９７.８９１.００７２０.２３９７０.４６５１９６.２０表４㊀４５批黄芪药材样品中３种成分的测定结果Ｔａｂｌｅ４㊀Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆ４５ｂａｔｃｈｏｆＡｓｔｒａｇａｌｉＲａｄｉｘｗ/(ｍｇ ｇ－１)编号毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮黄芪皂苷Ⅰ编号毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮黄芪皂苷ⅠＨＱ１１.０２４１.０１８０.３３１ＨＱ２４０.８２５０.８４１０.２７２ＨＱ２１.１０４０.９６１０.３６１ＨＱ２５１.４２９１.２８８０.４２２ＨＱ３０.９６８０.８３１０.３２５ＨＱ２６０.７６２０.７６９０.２５９ＨＱ４１.２７０１.０４７０.２６５ＨＱ２７１.０７１１.１４４０.３９５ＨＱ５０.９８００.９２３０.３３９ＨＱ２８０.７６３０.６８９０.２６１ＨＱ６０.９２１１.０５６０.３０８ＨＱ２９０.５１３０.５３５０.１９５ＨＱ７１.０７９１.１６４０.２４６ＨＱ３０１.４６４１.４１９０.４３１ＨＱ８１.１０５１.０１７０.２５３ＨＱ３１１.３２７１.３５８０.４４４ＨＱ９１.０４７１.０５５０.３５１ＨＱ３２１.４３９１.２２３０.４７６ＨＱ１０１.０４０１.０８２０.２３０ＨＱ３３１.３８１１.３７５０.４０２ＨＱ１１０.８４６０.７４６０.１９９ＨＱ３４１.５０３１.２１００.５０２ＨＱ１２０.７９８０.７４８０.２７８ＨＱ３５０.８０６０.７２２０.２９７ＨＱ１３０.７８００.８４００.２９４ＨＱ３６０.６８４０.６６１０.２５７２６５广东药科大学学报㊀第３５卷㊀表４(续)编号毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮黄芪皂苷Ⅰ编号毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮黄芪皂苷ⅠＨＱ１４０.９５６０.９１７０.３４３ＨＱ３７０.７４１０.７６１０.２３３ＨＱ１５０.７５４０.７７１０.２５１ＨＱ３８０.５７３０.５６７０.２０９ＨＱ１６０.６６８０.６０４０.２３４ＨＱ３９０.６２４０.７０３０.２０６ＨＱ１７０.５１７０.４５９０.１７８ＨＱ４０１.１１６１.０２４０.２６８ＨＱ１８０.５０６０.５０８０.１６９ＨＱ４１０.５０８０.５７６０.１６９ＨＱ１９０.８４９０.７７１０.２８３ＨＱ４２０.３３４０.３８９０.１２１ＨＱ２００.３４６０.７８５０.０７５ＨＱ４３０.５７６０.３１８０.０９１ＨＱ２１０.５９１０.５０１０.１９４ＨＱ４４０.３９４０.３８７０.１４３ＨＱ２２０.８９０１.０３４０.３１６ＨＱ４５０.４１５０.４０２０.１３０ＨＱ２３１.１０４０.９９６０.１９２３ 讨论将供试品溶液进行１９０~４００ｎｍ紫外￣可见光全波长扫描发现ꎬ在２３０ｎｍ处下各色谱峰的数目㊁丰度㊁分离程度较好ꎬ故选择２３０ｎｍ为检测波长ꎮ为寻求最佳的色谱条件ꎬ先后考察了不同提取方式(浸泡㊁超声处理㊁加热回流)ꎻ不同提取溶剂(５０％甲醇㊁７０％甲醇㊁甲醇㊁乙醇)㊁不同提取时间(超声处理３０㊁４５㊁６０ｍｉｎ)㊁不同柱温(２５㊁３０㊁３５ħ)㊁不同流速(０.８㊁１.０㊁１.２ｍＬ/ｍｉｎ)㊁不同流动相体系(乙腈￣０.０２％甲酸水溶液㊁乙腈￣０.０２％冰醋酸水溶液㊁甲醇￣０.０２％甲酸水溶液)和不同品牌色谱柱(Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｋｉｎｅｔｅｘ＠ＸＢＣ１８㊁ＷａｔｅｒｓＸｂｒｉｄｇｅＣ１８柱㊁ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳＣ１８柱)ꎬ结果表明ꎬ色谱条件选择Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｋｉｎｅｔｅｘ＠ＸＢＣ１８色谱柱ꎬ柱温３０ħꎬ流速１.０ｍＬ/ｍｉｎꎬ流动相为乙腈￣０.０２％甲酸水溶液ꎬ７０％甲醇超声处理６０ｍｉｎ时ꎬ各色谱峰的峰形㊁分离程度较好ꎮ在指纹图谱研究过程中ꎬ黄芪ＤＡＤ信号和ＥＬＳＤ信号均标定了２２个共有色谱峰ꎬ通过与对照品比对ꎬ指认出其中３个主要成分ꎬ分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰꎮ为全面考察黄芪药材的质量ꎬ本研究建立了３种指标成分定量测定方法并对收集的４５批黄芪药材样品进行分析ꎬ由相似度和聚类分析结果可见ꎬ４５批黄芪样品可分成５大类:Ａ(山西)㊁Ｄ(内蒙古)㊁Ｅ(甘肃)各一类ꎻＢ为内蒙古与甘肃混合类ꎻ相似度较低的样品归为Ｃ类ꎬ相似度较低的原因可能为各个批次含量差异较大ꎬ但并不影响其共有峰的识别ꎬ故在建立其对照指纹图谱时ꎬ并未把相似度较低的４个批次剔除ꎮ出现Ｂ类的原因可能为内蒙古㊁甘肃两产地较接近㊁导致部分种子资源混淆ꎮ由３种指标成分定量测定结果可见ꎬ山西产地的毛蕊异黄酮葡萄糖苷㊁毛蕊异黄酮㊁黄芪皂苷Ⅰ的质量分数较其他产地的高ꎬ而甘肃和内蒙古２个产地３种成分的质量分数并无明显区别ꎮ本文建立的黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ串联指纹图谱和定量测定分析方法简单㊁方便㊁专属性强㊁重复性好ꎬ可快速㊁准确地鉴别和综合评价黄芪药材的质量ꎮ参考文献:[１]于玲ꎬ王知斌ꎬ王秋红ꎬ等.黄芪中黄酮类化合物药理作用研究进展[Ｊ].中医药信息ꎬ２０１８ꎬ３５(２):１０４￣１０８. [２]叶迎ꎬ王瑞海ꎬ包强ꎬ等.甘肃一㊁二年生红芪与黄芪黄酮类成分指纹图谱分析[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１８ꎬ２４(３):８３￣８９.[３]许京ꎬ叶迎ꎬ王瑞海ꎬ等.甘肃一年生㊁二年生红芪和黄芪ＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ指纹图谱比较[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１８ꎬ２４(６):７１￣７６.[４]张妍ꎬ董琳ꎬ雍婧姣ꎬ等.黄芪药材主要成分的含量测定方法及高效液相指纹图谱研究[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１６ꎬ２７(１１):２６１０￣２６１３.[５]陈伯丛ꎬ王汝上ꎬ罗德祥.不同产地黄芪总黄酮ＨＰＬＣ指纹图谱研究[Ｊ].北方药学ꎬ２０１６ꎬ１３(７):８￣１０.[６]吴王敏ꎬ李翔ꎬ王逢春.黄芪及相关药材ＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ色谱指纹图谱研究[Ｊ].华北国防医药ꎬ２０１０ꎬ２２(２):３２. [７]李婷婷ꎬ舒志恒ꎬ于良ꎬ等.不同产地黄芪ＨＰＬＣ/ＤＡＤ指纹图谱及主要黄酮成分含量测定[Ｊ].中国医院药学杂志ꎬ２０１５ꎬ３５(１３):１１８２￣１１８７.[８]殷文静ꎬ魏惠珍ꎬ刘晟楠ꎬ等.黄芪药材质量一致性及指纹图谱研究[Ｊ].中南药学ꎬ２０１５ꎬ１３(１２):１２３３￣１２３６. [９]杨慧洁ꎬ付娟ꎬ张海弢ꎬ等.黄芪药材质量评价研究现状[Ｊ].药物分析杂志ꎬ２０１４ꎬ３４(４):５７０￣５７６.[１０]严治学ꎬ何永志ꎬ王颖.黄芪ＨＰＬＣ￣ＥＬＳＤ指纹图谱的建立及分析[Ｊ].天津中医药大学学报ꎬ２０１７ꎬ３６(２):１４２￣１４５. [１１]杨晓莹ꎬ潘成成ꎬ窦桃艳ꎬ等.肾康颗粒ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ指纹图谱的建立及质量评价[Ｊ].现代中药研究与实践ꎬ２０１７ꎬ３１(４):６７￣７１.[１２]刘佳ꎬ周珏ꎬ王龙.ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ法测定参芪五味子片中黄芪甲苷和斯皮诺素的含量[Ｊ].海峡药学ꎬ２０１５ꎬ２７(１１):４０￣４２.(责任编辑:陈翔)３６５第５期㊀廖小芳ꎬ等.市售不同产地黄芪ＨＰＬＣ￣ＤＡＤ￣ＥＬＳＤ指纹图谱及同时测定３种成分含量的方法研究。
黄芪的高效液相色谱指纹图谱及主成分含量测定
的相似度 进 行 了 计 算 " 数 据 处 理 用 ^ G F ? B E, G F F ? J 相似度软件计算 ! 采用的原理是夹角余 弦法 " 1 G F 9 I 以共有峰的峰面积计算相似 度 ! % &个样品的相似度 均大于 " $a " 符 合 中 药 注 射 剂 指 纹 图 谱 技 术 指 南 要求 & ’ ! 结果见表 &" $ D "$% D $ 分别取黄芪对 % 3 ( 3 4 ! 相似度 的 精 密 度 与 重 现 性 # 照药材样品溶液 ! 连续进样 / 次 ! 测定指纹图谱相似 度的日内精密度 ! 各共有峰的峰面积与对照品相比 相似 度 & 分别为" a’ ( D " /! " # D # !! " " D % *! 4 2 Tj 分别在 $! 测定指纹图谱相似度 % D # &a $ %! & 天进样 ! 的日间精密度 ! 各共 有 峰 的 峰 面 积 与 对 照 品 相 比 相 似度 & a ’分 别 为 " " D " "! " ! D " /! " " D % *! 4 2 Tj $ 分别取岷县梅川镇杏林村黄芪 份 ! 按供试 % D $ (a / 品溶液制备方法制 备 样 品 溶 液 ! 测定指纹图谱相似 度的重复性 ! 共有 峰 的 峰 面 积 与 对 照 品 相 比 相 似 度 & a ’分 别 为 " ’ D $ # ’! " ’ D $ / %! " ’ D / % "!4 2 Tj " $ D % * /a ! ! 主成分含量测定 ! 3 %! 黄 芪 中 黄 芪 甲 苷 的 含 量 测 定 ! 色 谱 条 件 为 c B = @ G E H :3 T 2 ) %色谱柱& ( @! ’ D * @@k& ( $ @@’ ) & 天津琛航科学仪器有限公司 ’ ! c B = @ G E H :3 T 2 保护 柱& ! 乙腈 水& 洗 脱! ( @! ’ D * @@k% $ @@’ ) * !f / /’ ) 进样量 % ! 流速为% ( 检测波长为& $) : D $@ : @ H J! $ / 柱温 # J @! & (b " 黄 芪 甲 苷 的 回 归 方 程 和 相 关 系 数 ’ ’ 为# ! 线性范 Xj’ D ( &k% $ . ) & D % %k% $ B j$ D " " " /! 围为 # " 样品处理 方 法 同 % 结 % D % & ($* D $ ! ( D ’ D %! L ) 果见表 ’" 色谱图见图 &% 图 /"
HPLC-DAD研究黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱
HPLC-DAD研究黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱
谢显珍;黄兰芳
【期刊名称】《光谱实验室》
【年(卷),期】2009(026)003
【摘要】利用联用色谱建立了黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱,用相关化学计量学方法和黄芪黄酮类化合物标准谱对照,定性鉴定出八个黄酮类化合物,进而建立了4个产地黄芪中黄酮类化合物特征色谱指纹图谱,表明不同产地同种药材间的相关性.该方法能用于不同产地中药黄芪的真伪和优劣的鉴别,为以后黄芪活性化合物的定性定量关系研究及质量控制提供基础.
【总页数】5页(P559-563)
【作者】谢显珍;黄兰芳
【作者单位】常德职业技术学院医药系,湖南省常德市,415000;衙州学院化学化工系,浙江省衙州市,324000
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7+2
【相关文献】
1.黄芪中黄酮类化合物色谱指纹图谱的光谱相关色谱分析 [J], 谢建伟;黄兰芳;贺云彪;胡伟;王玉林
2.黄芪中黄酮类化合物药理作用研究进展 [J], 于玲;王知斌;王秋红;匡海学
3.中药黄芪中黄酮类化合物抗氧化活性的DFT研究 [J], LIU Jing-li;YU Hai-dong;LIANG Yan-ni
4.黄芪中黄酮类化合物药理作用研究进展 [J], 张东霞
5.黄芪中黄酮类化合物的超临界流体色谱分离方法研究 [J], 赵淑军;董姣姣;刘洁;贾志鑫;闫晓宁;郁映婷;陈奕君;李月婷;肖红斌
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黄芪药材的高效液相色谱指纹图谱及主要成分的含量测定方法研究进展_梁瑾
西 北 药 学 杂 志 ２０１２ 年 ９ 月 第 ２７ 卷 第 ５ 期
黄芪药材的高效液相色谱指纹图谱及主要成分的含量测定方法研究进展
梁 瑾，封士兰＊ ，刘小花，党子龙，梁建娣，杨春霞（兰州大学药学院，兰州 ７３００００）
摘要：目的 对黄芪药材的 ＨＰＬＣ 指纹图谱和主要成分的含量测定方法做一 概 述。 方 法 查 阅 ２００２ 年 以 来 国 内 外 报 道 的 有 关 黄芪药材的文献，研读有关高效液相色谱指纹图谱和含量测定 的 文 献，对 其 研 究 进 展 进 行 综 述。结 果 对 黄 芪 药 材 的 指 纹 图 谱 和 含 量 测 定 的 研 究 方 法 做 了 总 结 ，并 提 出 了 建 议 。 结 论 国 内 外 有 关 黄 芪 药 材 的 研 究 较 多 ，为 深 入 研 究 黄 芪 奠 定 了 基 础 。 关 键 词 ：黄 芪 ；指 纹 图 谱 ；含 量 测 定
作 者 简 介 ：梁 瑾 ，女 ，硕 士 研 究 生 ＊通 信 作 者 ：封 士 兰 ，教 授 ，博 士 生 导 师
的要求，较单一的控制 一 种 或 几 种 成 分 的 方 法 更 具 有 科 学 性 和全面性。２０００年，国 家 食 品 药 品 监 督 管 理 局 颁 布 了 《中 药 注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》后，指 纹 图 谱 的 研 究 成为中药研 究 的 热 点。 有 关 黄 芪 药 材 的 ＨＰＬＣ 指 纹 图 谱 的 研究如下： １．１ ＨＰＬＣ－ＵＶ 指纹 图 谱 胡 芳 弟 等［３］采 集 甘 肃 不 同 产 区 １２个蒙古黄芪样 品，用 甲 醇 超 声 提 取，提 取 液 浓 缩 后 用 水 饱 和正丁醇萃取，以 乙 腈 和 水 梯 度 洗 脱，２５４ｎｍ 为 检 测 波 长 研 究其指纹图谱，并用毛 蕊 异 黄 酮 和 芒 柄 花 素 对 指 纹 图 谱 峰 进 行了定位，测定了它们 和 黄 芪 甲 苷 的 含 量，共 找 出 ２６ 个 共 有 峰 ，１２ 批 样 品 相 似 度 均 在 ９０％ 以 上 。
不同产地黄芪药材和饮片的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱分析
•基础研究•不同产地黄芪药材和饮片的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱分析A钟荣荣7,李默影2,肖苏萍,王继永7,高永坚5,张斯杰7,周朗王海蝶59中国中药有限公司，北京192609；01中国医药工业研究总院中药创新中心，上海291293；31中国中药控股有限公司，广东佛山52834341江西中医药大学，江西南昌330094［摘要］目的：建立黄芪药材和饮片的高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器联用法(HPLC-DAD-ELSD)指纹图谱分析方法。
方法：采用Agilent Zorhe SB C^(189mm x4.2mm, 3.8pm)色谱柱；流动相为乙腈4.8%甲酸，梯度洗脱，流速99mL.min-1,柱温35咒，检测波长254nm,载气气压241kPa,漂移管温度99咒，增益54,并使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2094A版)软件计算49批不同产地黄芪药材和饮片的相似度。
结果：建立了黄芪药材和饮片的HPLCDADDLSD指纹图谱方法，确立了HPLC-DAD指纹图谱的10个共有峰，HPLCDLSD指纹图谱的11个共有峰，指认了其中的毛蕊异黄酮葡萄糖昔、芒柄花昔等7个峰。
除少数几批外，黄芪药材和饮片相似度均大于9.20结论：该方法前处理方法简单，重复性好，可用于评价和控制不同产地的黄芪药材和饮片质量。
［关键词］不同产地；黄芪；指纹图谱；高效液相色谱仪-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器；相似性分析［中图分类号］R230［文献标识码］A［文章编号］16734899(292994463246doi：19.939/j.Unu16734899.20101002090HPLC-DAD-ELSD Fingerprint Analysis of Astrogali Radix Medicinal Materials andDecoction Pieces from Different PlacesZHONG Rong-rong1,LS Mo-ying2,XIAOSu-qing1*,WANG Ji-qong1,GAO Yong-jian3,ZHANG Si-jie1,ZHOU Lang5,WANG HaiWie79China Nationai TTa9itionai CCinese Menicioe Co.,LU.,Bening22649,China；01Trayitionai Chinese Menicioe Innoation Center,China1\01001Institute p PhamaceoUcal InOustra ,Shanghai20293,China；31China TTa9itionai Chinese Menicioe Hoimnge Eimiten,Fosian523343,China；41Jiangai University p Tranitional Chinese Menicine ,NancOang334094,China［Abstroci］Objective:To estabOsh a high performance lipuid chromaOypph-hmde array deOctoovaporative light scattering detector(HPLC-DAD-ELSD)fingerprint analysis method for Astraaalus membranaceus and decoction Oplets.Methods：Agilent Z o P w SB C2(99mm x4.6mm, 3.8pm)column was used；the modilo phase was aceOnitdm-0.5% formic acid,yraPient elution；the flow rate was9 9mL•min-1,the column Omperature was35壬,the deOction wavelength was254nm,the carrier yas presspre was241kPa,the drift oUe Omperature was99壬,and the yain was54.The similarity of49batches of Astraaali RaPiu and the pieces of diUerent oriyins is calchlated using the"chromaOypphic fingerprint similarity evaluation system of traPiUonai Chinese medicine"2094A.Results:The HPLC-DAD-ELSD Ondem fingerprint method forA［基金项目］国家中药标准化项目(ZYBZH-YOY45)；北京市科技计划课题(Z171140091717623)-［通信作者］肖苏萍，正高级工程师，研究方向：中药产品开发和质量控制；Tel：(919)89255834,E-mail：xlaol a UdyP9 @1631com-632•Astragali Radiu and decoction pieces was estaUPsheX.Twelve common peads of HPLC-2AD fingerprints were estaUPsheX,and 11commotpnnesoeHPLC2ELSD entgnepentteswnennstenb.nshnd，ntd6pnnessuch nse.neotondsntd eoemototntent wnen identified.Except for a few batches,the similarity of Astragali Radiu and decoction pieces was greater than 0.9. Conclusion: This method has simple pretreatment method and good reproPpcibiPty.It can be used for evaluation and control of the quality of Astragali Radiu and decoction pieces from different pgces.[Keywonis]different origins；Astragali Radix；fingerprint；HPLC-DAD-2LSD-similarim analysis黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astraball4memOranaceus （Fisch.）Bghi vas mongholicas（Bga）Hsiao或膜荚黄芪A.memOran,aceas（Fisch.）Bga的干燥根，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、排脓托毒、敛疮生肌之功效7］。
HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量
HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量胡芳弟;封士兰;赵健雄;张勇;陈立仁【期刊名称】《分析测试技术与仪器》【年(卷),期】2003(009)003【摘要】比较黄芪对照药材和甘肃省近20个乡镇大面积种植的黄芪中黄芪甲苷和2个黄酮类化合物的含量,确定甘肃黄芪质量评价指标.采用Kromasil ODS-1色谱柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长254nm测定黄酮类成分的含量;乙腈-水为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为200nm测定黄芪甲苷的含量.黄酮类成分毛蕊异黄酮的线性范围为2.350×10-3～4.700×10-2μg,平均回收率为98.34%,RSD为2.00%;芒柄花素线性范围为:2.325×10-3～4.650×10-2μg,平均回收率为96.53%,RSD为1.63%;黄芪甲苷线性范围为1.215～6.075μg,平均回收率为101.47%,RSD为2.21%.该方法简便,可靠,准确,具有一定的实用性,可用于黄芪药材质量控制.【总页数】5页(P173-177)【作者】胡芳弟;封士兰;赵健雄;张勇;陈立仁【作者单位】兰州医学院药学院,甘肃,兰州,730000;兰州医学院药学院,甘肃,兰州,730000;兰州医学院药学院,甘肃,兰州,730000;兰州医学院药学院,甘肃,兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃,兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】O657.32【相关文献】1.HPLC法测定5年及6年生黄芪中黄酮类成分的含量 [J], 王利平;秦雪梅;张丽增;李欣;刘焕蓉2.HPLC-MS法测定黄芪中黄酮类成分的含量 [J], 陈春茗;龚姗;陈蕾;马丹凤3.HPLC-ELSD法测定不同产地、剂型黄芪饮片中黄芪甲苷含量 [J], 马宁;郝娟;王景雪4.HPLC-ELSD法测定黄芪、蜜黄芪中黄芪甲苷的含量 [J], 夏英;林新文;王刚5.HPLC法测定不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量 [J], 邹传宗;吴秋钰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同产地黄芪的电化学指纹图谱研究
不同产地黄芪的电化学指纹图谱研究作者：胡俊平李国凯任云来源：《江苏农业科学》2019年第12期摘要：在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3振荡体系中加入黄芪为反应底物，通过电化学工作站测定黄芪的电化学指纹图谱，设计正交试验考察建立黄芪电化学指纹图谱的条件并考察黄芪加入量、药材粒度对黄芪电化学指纹图谱的影响。
结果表明，黄芪加入量0.5 g，粒度为80目时可以取得理想的电化学指纹图谱。
在此测定条件下，研究不同产地黄芪的电化学指纹图谱，通过分析图谱中的特征物理参数，达到鉴定黄芪真伪和对不同产地黄芪进行质量评价的目的。
关键词：电化学指纹图谱;黄芪;不同产地;质量评价;正交试验;真伪鉴定;质量评价;产地鉴别中图分类号： S567.23+9.01 ;文献标志码： A ;文章编号：1002-1302（2019）12-0224-04黄芪（Radix Astragali）为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，具有健脾补中、利水消肿、升阳举陷、利尿之功效，主要分布在山西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙等地。
黄芪的化学成分为黄芪皂苷、黄酮、多糖、单糖、生物碱、叶酸、多种氨基酸以及人体所需要的微量元素[6]。
本研究分析了黄芪在BrO3--Mn2+-H+-CH3COCH3体系中做振荡反应的电化学指纹图谱，其特征物理量为（1）诱导时间（t诱导）：从加入试剂到振荡发生的时间;（2）振荡寿命（t振荡）：振荡开始到振荡结束的时间;（3）最高电位（Emax）：振荡曲线的电位最高值;（4）平衡电位（E平衡）：振荡结束时所对应的电位。
同时，本研究探讨了振荡体系各物质浓度、温度、药材粒度、加入量等对电化学指纹图谱的影响，分析了不同产地黄芪电化学指纹图谱的特征，结果表明不同产地黄芪的电化学指纹图谱有明显区别，该方法可用于黄芪药材的产地鉴别[7]。
1 仪器与材料1.1 仪器WK-600A高速药物粉碎机（山东省青州市精誠机械有限公司）;DF-101S聚热式恒温加热磁力搅拌器（河南省巩义市予华仪器有限公司）;电化学工作站（瑞士万通204）;烧杯;容量瓶;玻璃棒;滴管。
黄芪中黄酮类成分HPLC指纹图谱及聚类分析
黄芪中黄酮类成分HPLC指纹图谱及聚类分析
张秋红;王志刚
【期刊名称】《临床医学工程》
【年(卷),期】2012(019)006
【摘要】目的建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱,为其质量控制及基原鉴别提供方法学依据.方法采用HPLC法建立黄芪中黄酮类成分指纹图谱,标示其共有峰与特征峰,进行相似度评价及聚类分析.结果通过对10批不同产地黄芪药材的测定,标定9个共有峰,其相似度在0.826～0.990之间,经聚类分析,共可分为类4类,其中样品3、6、4聚为一类,5、9、1、7、8聚为一类,2和10分别单独聚为一类.结论该方法精确性高,精密度好,对黄芪的质量控制提供了一定方法学的依据.
【总页数】3页(P975-977)
【作者】张秋红;王志刚
【作者单位】广东省中医院药学部,广东广州510120;广东药学院,广东广州510006
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.主成分分析和聚类分析法研究刺玫果黄酮类成分HPLC指纹图谱 [J], 杨莹莹;王晓燕;冯夏珍;张文琴;叶松华
2.建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的方法 [J], 汤灿辉;何群
3.建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的方法 [J], 汤灿辉;何群;
4.HPLC法测定黄芪中黄酮类成分和黄芪甲苷的含量 [J], 胡芳弟;封士兰;赵健雄;张勇;陈立仁
5.HPLC-UV-ELSD法同时测定黄芪中黄芪皂苷和黄酮类成分 [J], 史鑫波;唐志书;刘妍如;宋忠兴;陈衍斌;苏瑞;许刚;王升
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不同产地黄芪药材的UPLCQTOFMS指纹图谱研究
不同产地黄芪药材的UPLCQTOFMS指纹图谱研究一、本文概述黄芪，作为一种具有悠久药用历史的中药材，被广泛应用于中医临床实践中。
其产地分布广泛，不同产地的黄芪在生长环境、气候条件、土壤特性等方面存在差异，这可能导致其药效成分和药效强度的不同。
因此，对不同产地黄芪药材的质量评价至关重要。
本文旨在利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术（UPLC-QTOFMS）对不同产地黄芪药材进行指纹图谱研究，以期为黄芪药材的质量控制和评价提供科学依据。
本文将介绍黄芪的药用价值及产地分布情况，阐述开展不同产地黄芪药材研究的必要性和重要性。
将详细介绍UPLC-QTOFMS技术的原理及其在中药材指纹图谱研究中的应用。
在此基础上，本文将详细描述实验材料、方法、数据处理和分析过程，包括样品的采集与制备、UPLC-QTOFMS分析条件的优化、指纹图谱的构建等。
通过对不同产地黄芪药材的UPLC-QTOFMS指纹图谱进行对比分析，本文将揭示各产地黄芪药材在化学成分组成和含量上的差异，评价其质量优劣，为黄芪药材的产地溯源和质量控制提供技术支持。
本文还将探讨不同产地黄芪药材药效成分与其生长环境、气候、土壤等因素的关联性，为优化黄芪种植技术和提高药材质量提供理论依据。
本文旨在通过UPLC-QTOFMS指纹图谱研究，全面评价不同产地黄芪药材的质量差异，为黄芪药材的质量控制、产地溯源和种植技术优化提供科学依据和技术支持。
二、材料与方法为了深入研究不同产地黄芪药材的UPLC-QTOFMS指纹图谱，我们收集了来自全国各地的黄芪药材样品。
这些样品分别来自不同的生长环境、气候条件和土壤质地，以确保研究结果的广泛性和代表性。
所有药材样品均经过专业鉴定，确保其品质和纯度。
实验所需的主要仪器包括超高效液相色谱仪（UPLC）、四极杆/飞行时间质谱仪（QTOFMS）等。
试剂方面，我们采用了高纯度的甲醇、乙腈等有机溶剂，以及用于样品处理的其他化学品。
不同产地黄芪药材中黄酮类成分含量分析
Ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ ＷＵ Ｇｕｏｘｕｅ
ｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ ｃａｎ ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ．
： ， ， Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ห้องสมุดไป่ตู้ＰＬＣ
黄芪属于豆科植物，是中医大量使用的滋补类药材， 国内市场的需求量非常高，由于野生黄芪数量较少，目前 大多以人工栽培为主［１］。相关研究表明，黄芪药材中含黄 酮类成分，这也使得黄芪药材具有抗病毒、抗菌、降血脂等 作用。为了探讨不同产地对黄芪药材中黄酮类成分含量 的影响，本研究使用了高效液相色谱对黄芪药材中含量较 高的几种黄酮类成分含量进行分析，现报道如下。 １ 资料与方法 １ １ 一般资料：本次研究选取的黄芪药材样品来自我国多 个省份，样品总共为２２ 批次，包括野生样品与栽培样品，经 鉴定所有药材均为真品。 １ ２ 检测仪器：本次检测所使用的仪器主要包括：２６９０ 型
（ ， ， ， ） Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００００ Ｃｈｉｎａ
： ： Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ． ： ， ， Ｍｅｔｈｏｄｓ ２２ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ， ａｓ ｍａｉｎ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ ｍａｔｅｒｉａｌｓ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ． Ｉｎ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｔｈｅ ， ， ， ｍａｉｎｌｙ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ４ ｋｉｎｄｓ ｉ． ｅ． ｃａｌｙｃｏｓｉｎ ７ＯβＤｇｌｕｃｏｓｉｄｅ ｏｎｏｎｉｎ ｃａｌｙｃｏｓｉｎ ａｎｄ ， ， ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ． Ａｎｄ ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｔｅｓｔ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｅｓｔ ｅｔｃ． ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ． ： Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｌｌ ＲＳＤ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｐｅａｋ ａｒｅａｓ ｉｎ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔ ｗｅｒｅ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ， １％ ｗｈｉｃｈ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ａｎｄ ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔ ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ． Ｉｎ ｔｈｅ ｄｅ ， ｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ， ， ， ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ Ｓｈａｎｘｉ ａｎｄ Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｓｔ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ｔｈａｔ ｆｒｏｍ Ｇａｎｓｕ Ｊｉｌｉｎ Ａｎ ： ｈｕｉ ａｎｄ Ｓｈａａｎｘｉ． Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ｗａｓ ｌｏｗｅｓｔ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＨＰＬＣ ， ， ｈａｓ ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｏｆ ｅａｓｙ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｇｕｔ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｇｕｔ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ｃａｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ， ａｓｔｒａｇａｌｉ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ ｒａｄｉｘ ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈａｂｉｔａｔｓ ｗｈｉｃｈ ｓｈｏｗ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｄｉｆ
基于黄酮类成分含量差异的子洲黄芪产地判别模式研究
基于黄酮类成分含量差异的子洲黄芪产地判别模式研究基于黄酮类成分含量差异的子洲黄芪产地判别模式研究摘要：本研究旨在探究子洲黄芪不同产地间黄酮类成分含量差异，并基于该差异建立产地判别模式。
采集了来自不同产地的子洲黄芪样品，通过高效液相色谱法（HPLC）测定其黄酮类成分含量，进而运用主成分分析（PCA）和线性判别分析（LDA）进行多元统计分析，建立子洲黄芪不同产地的判别模式。
关键词：子洲黄芪，黄酮类成分，产地判别，HPLC，PCA，LDA1. 引言子洲黄芪，为豆科植物、黄芪属的一种草本植物，因其产地多位于中国河南省子洲县而得名。
子洲黄芪具有多种药用价值，被广泛应用于中医药和保健品领域。
然而，由于生长环境和生长条件的差异，同一植物在不同产地可能会出现品质差异。
因此，建立一种快速、准确的子洲黄芪产地判别模式对产品质量控制具有重要意义。
2. 材料与方法2.1 样品采集从中国河南省子洲县不同产地采集了子洲黄芪样品共计100份，每个产地样品采集10份。
2.2 样品制备将采集的黄芪样品晾晒至干燥，并研磨成粉末。
2.3 HPLC分析采用高效液相色谱法（HPLC）测定子洲黄芪样品中黄酮类成分的含量。
色谱条件如下：色谱柱为C18柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（38:62，体积比），流速为1.0 mL/min，检测波长为260 nm。
2.4 数据处理与分析使用Excel软件对产地样品的HPLC测定结果进行处理，并计算黄酮类成分的相对含量。
进一步，运用主成分分析（PCA）和线性判别分析（LDA）对数据进行多元统计分析，建立产地判别模型。
3. 结果与讨论3.1 黄酮类成分含量差异通过HPLC测定，我们发现不同产地的子洲黄芪样品中黄酮类成分含量差异明显。
在所测定的15个黄酮类成分中，出现了数量和含量上的变化。
3.2 主成分分析结果将测定的黄酮类成分含量数据导入主成分分析软件进行处理，并提取前两个主成分解释的总方差达到80.55%。
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药材标准化种植、谱 效 关 系 研 究 及 药 材 质 量 标 准 全
面提升提供数据支撑。
１ 材 料 １．１ 药 材 黄 芪 Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ，均 采 自 以 下 不 同产地，经宁夏医科 大 学 药 学 院 生 药 学 教 研 室 张 新
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中国医院药学杂志２０１５年７月第３５卷第１３期 Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，Ｊｕｌ ２０１５，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１３
敏度和准确度都能符合测定要求。
参考文献：
［１］ 刘 利 敏 ．中 药 材 黄 柏 及 其 开 发 利 用 ［Ｊ］．陕 西 师 范 大 学 学 报 （自 然 科 学 版 ），２００４，３２（Ｓ２）：１７４－１７９．
中国医院药学杂志２０１５年７月第３５卷第１３期 Ｃｈｉｎ Ｈｏｓｐ Ｐｈａｒｍ Ｊ，Ｊｕｌ ２０１５，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１３
· １１８３ ·
ｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ａｎｄ ０．０２ ｍｏｌ·Ｌ－１ ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ ｏｒｔｈｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ （ｐＨ ３．２）ａｔ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １．２ ｍｌ·ｍｉｎ－１ ａｔ ２５４ ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｆｉｆ－ ｔｅｅｎ ｃｏｍｍｏｎ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ａｆｆｉｒｍｅｄ ｂｙ “Ｃｈｉｎｅｓｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ＂ ａｎｄ ４ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｏｆ ９ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ０．９．Ｃａｍｐａｎｕｌｉｎ ａｎｄ ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ ｓｈｏｗｅｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ（ｒ＞０．９９９ ６）ｗｉｔｈｉｎ ｔｅｓｔ ｒａｎｇｅ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｔａｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉｇｉｎｓ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｍｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｎｉｎｇｘｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｏｄｅｒｎ Ｈｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｎｉｎｇｘｉａ Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ）
［８］ 史伯安，王望峰，曾艳，等．反相流动注射化学发 光 法 测 定 盐 酸 小檗碱［Ｊ］．湖北 民 族 学 院 学 报 （自 然 科 学 版 ），２００５，２３（０３）： ２３９－２４２．
［９］ 温 金 莲 ，刘 丹 ，宋 粉 云 ．毛 细 管 电 泳 法 测 定 一 清 胶 囊 中 盐 酸 小
檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀 和 盐 酸 药 根 碱 的 含 量 ［Ｊ］．中 药 材 ，２０１１，３４ （０３）：４６９－４７１． ［１０］ 王峰，黄 薇，李 倩．胶 束 增 敏 荧 光 光 度 法 测 定 小 檗 碱 的 含 量 ［Ｊ］．理 化 检 验 （化 学 分 册 ），２００９，４５（０３）：３０８－３０９＋３１２． ［１１］ 马秋菊，任佳佳，褚志杰，等．高效液相色谱法同 时 测 定 马 黄 酊 中士的宁、马钱子碱和小檗碱的含量［Ｊ］．中 国 医 院 药 学 杂 志， ２０１４，３４（１９）：１６８４－１６８７． ［１２］ 张倩，蔡丽芬，钟 国 跃，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ 法 同 时 测 定 关 黄 柏 中 小 檗碱、药根碱、巴马汀及黄柏酮含量的方法 学 研 究［Ｊ］．中 国 中 药 杂 志 ，２０１０，３５（１６）：２０６１－２０６４． ［１３］ 陈玉兰，陶凌晖，侯华，等．核磁共振氢谱内标法 测 定 盐 酸 小 檗 碱 的 含 量 ［Ｊ］．第 三 军 医 大 学 学 报 ，２００９，３１（２２）：２２１７－２２１９． ［１４］Ｌｉ Ｎ，Ｎｇ Ｔ Ｂ，Ｗｏｎｇ Ｊ Ｈ，ｅｔ ａｌ．Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ ｐｈｅｎｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ ａｎｄ ｃａｆｆｅｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ ｍｕｓｈｒｏｏｍｓ ｂｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｐｏｌｙｍｅｒ ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ，２０１３，１３９（１／４）：１１６１－１１６７． ［１５］ 董学芝，赵海兰，魏林恒，等．氧 氟 沙 星 选 择 性 电 极 的 制 备 及 其 性 能 研 究 ［Ｊ］．分 析 测 试 技 术 与 仪 器 ，２００１，７（２）：７８～８０ ［１６］ 中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：２８６－２８７．
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｍａｉｎ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｉｎ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉ－ ｇｉｎｓ，ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｄａｔａ ｓｕｐｐｏｒｔｓ ｆｏｒ ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ，ａｎｄ ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｆｏｒ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ ｏｆ １２ ｂａｔｃｈｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｉｇｉｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂ－ ｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ＨＰＬＣ／ＤＡＤ ｍｅｔｈｏｄ．Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｃａｍｐａｎｕｌｉｎ ａｎｄ ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ／ＤＡＤ ｍｅｔｈｏｄ． Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ （４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，５μｍ），ｗｉｔｈ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ａｃｅ－
黄 芪 （Ｒａｄｉｘ Ａｓｔｒａｇａｌｉ）为 豆 科 植 物 蒙 古 黄 芪 Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．ｖａｒ．ｍｏｎ－ ｇｈｏｌｉｃｕｓ（Ｂｇｅ．）Ｈｓｉａｏ和膜荚黄芪 Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍ－ ｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｃｈ．）Ｂｇｅ．的 干 燥 根 ［１］，主 产 于 内 蒙 古 、 山 西 、甘 肃 、黑 龙 江 、宁 夏 等 地 ，现 代 药 理 实 验 研 究 表
有文献报道黄芪黄酮类成分Байду номын сангаас为黄芪药材的主要成
分之一，具有抗心 肌 缺 血、抗 肿 瘤、抗 损 伤、抗 炎、抗
突变等多种重要药理作用［３－６］，但目前黄芪药 材 指 纹
图谱的研究方法多 针 对 于 对 皂 苷 类 成 分 的 研 究，因
此 本 文 针 对 黄 酮 类 成 分 的 测 定 ，建 立 １２ 批 次 黄 芪 药 材指纹图谱并测定 黄 酮 类 主 要 成 分 的 含 量，为 黄 芪
明黄芪具有增强肌 体 的 免 疫 功 能，利 尿、抗 疲 劳、抗
病毒、镇痛等作用，临 床 主 要 用 于 气 虚 乏 力、食 少 便
溏、中 气 下 陷、久 泻 脱 肛、血 虚 萎 黄、内 热 消 渴 等
病 。 ［２］ 黄芪是常用 补 气 类 中 药 材，在 宁 夏 六 盘 山 地
区广泛种植，是 西 北 区 域 大 宗 药 材 之 一。 近 年 来，
［收 稿 日 期 ］２０１４－０９－２３
不同产地黄芪 ＨＰＬＣ／ＤＡＤ 指纹图谱及主要黄酮成分含量测定
李婷婷１，舒志恒２，于良２，郝文静２，付雪艳１，２ （１．宁夏医科大学·回 医 药 现 代 化 省 部 共 建 教 育 部 重 点 实 验 室 ，宁 夏 银
川 ７５０００４；２．宁夏医科大学·宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏 银川 ７５０００４）
［基金项目］宁夏回族自治区卫生计生委重点科研项目：黄芪药材黄酮成分的抗炎、耐缺氧的谱效关系研究（编号：２０１４－ＮＷ－００９）；国家 自 然 科 学基金（编号：８１４６０５９９） ［作者简介］李婷婷，女，硕士，研 究 方 向：中 （回）药 药 效 物 质 基 础，Ｅ－ｍａｉｌ：ｎｘｌｔｔ７０８８＠１６３．ｃｏｍ ［通 讯 作 者］付 雪 艳 ，女 ，副 教 授 ，博 士 ，研 究 方 向 ：中 （回 ）药 提 取 分 离 与 结 构 鉴 定 ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｆｕｘｕｅｙａｎ１２１５＠１６３．ｃｏｍ
［摘要］ 目的：建立黄芪 ＨＰＬＣ 指纹图谱并测定黄酮类成分的 含 量，为 黄 芪 药 材 标 准 化 种 植、谱 效 关 系 研 究 及 药 材 质 量 标 准 全面提升提供数据支撑。方法：采用 ＨＰＬＣ／ＤＡＤ 法建立１２批次黄芪 药 材 指 纹 图 谱，并 对 毛 蕊 异 黄 铜 苷、芒 柄 花 黄 素 进 行 含 量测定，色谱柱：Ｗｅｌｃｈｒｏｍ－Ｃ１８色谱柱（４．６ ｍｍ×２５０ ｍｍ，５μｍ）；梯 度 洗 脱 流 动 相 为 甲 醇 －乙 睛－０．０２ ｍｏｌ·Ｌ－１磷 酸 二 氢 钠 溶 液，流速１．２ ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测波长２５４ ｎｍ。结果：应用指纹图谱相似度评价软件 找 出 １５ 个 共 有 峰，指 认 ２ 个 色 谱 峰，９ 个 样 品 相似度都在０．９００以上，毛蕊异黄酮苷和芒柄花黄素进行定量检测，检测 范 围 内 线 性 关 系 良 好 。 结 论：本 研 究 建 立 黄 芪 药 材 指 纹 谱 方 法 稳 定 ，数 据 可 靠 ，可 用 于 控 制 黄 芪 药 材 质 量 。 ［关 键 词 ］ 黄 芪 ；指 纹 图 谱 ；含 量 测 定 ；不 同 产 地 ［中 图 分 类 号 ］Ｒ９２７．２ ［文 献 标 识 码 ］Ａ ［文 章 编 号 ］１００１－５２１３（２０１５）１３－１１８２－０６ ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１５．１３．０５