TPPA试剂检测TP抗体假阳性原因分析
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨发表时间:2018-03-01T15:54:05.010Z 来源:《中国蒙医药》2017年第17期作者:贺安[导读] 为了提高梅毒检测的准确性,采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本,并进一步证实WB方法的结果。
郴州市第一人民医院湖南郴州 423000【摘要】目的:采用ELISA法检测梅毒抗体的假阳性结果,提高梅毒检测的准确性。
方法:酶联免疫吸附剂(ELISA)检测患者血清,通过梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和westernblot(WB)试验验证阳性标本,制定出消除假阳性结果的措施。
结果:ELISA发现313例阳性病例,193例为老年人(60岁以上),120例为中青年(20岁到60岁)。
在老年组,TPPA方法确诊186例阳性病例,假阳性率为3.63%(7/193)。
WB方法确认181例阳性,假阳性率为6.22%(12/193),WB法与TPPA法无统计学差异。
在中青年组,TPPA确认了117例阳性病例,假阳性率为2.5%(3/120)。
WB确认113阳性,假阳性率为5.83%(7/120),WB法与TPPA法无统计学差异。
结论:为了提高梅毒检测的准确性,采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本,并进一步证实WB方法的结果。
【关键词】酶联免疫吸附法;检测梅毒抗体假阳性;原因探析梅毒是梅毒螺旋体亚种之一,是一种古老的、性传播的疾病,但对全身各脏器有伤害,会造成人体组织损伤和病理改变,导致功能紊乱。
近年来,梅毒发病率呈上升趋势。
梅毒血清检测呈阳性,有些是梅毒感染,但有一部分没有诊断梅毒的依据。
据报道,梅毒血清学检测的假阳性率为3.08%。
梅毒检测结果正确与否是一个非常敏感的医学和社会问题,对患者及其家庭的稳定性有很大的影响。
梅毒的临床诊断主要根据临床症状和梅毒血清学试验。
梅毒螺旋体抗体血清学试验分为两大类型,一大类型为非特异性检测梅毒螺旋体抗体,如快速血浆反应素试验(RPR),甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等等,主要用于梅毒筛查和治疗效果;另一大类型为特异性检测梅毒螺旋体抗体,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和免疫印迹试验,荧光抗体的梅毒测试(FTA-ABS)吸收。
假阴性假阳性可能原因
试验干扰因素一、产生的假阳性的原因有:1、污染(无热源的试管、枪头和蒸馏水等)2、血液透析、腹膜透析3、纱布或其他医疗物品(外科手术)4、某些静脉制剂(白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白或血液制品等)5、抗肿瘤多糖(香菇多糖、裂殖菌多糖)6、某些疾病导致病人自身丙种球蛋白增高连续检测有助于降低假阳性的发生;葡聚糖的测定值在连续监测中出现快速较大幅度的变化提示假阳性,尤其是对还未开始抗真菌治疗的患者。
二、产生假阴性的原因有:1、不敏感菌:特殊真菌如接合菌(毛霉菌、根霉菌)细胞壁没有(1-3)-β-D 葡聚糖成分,隐球菌细胞壁外有荚膜致使(1-3)-β-D 葡聚糖释放不出,这些真菌无法检测到。
有临床症状,但G试验阴性临床医生便可以考虑这两种真菌感染的可能。
2、定植菌:多项研究显示,定植真菌几乎不引起(1-3)-β-D 葡聚糖升高,即使是严重定殖。
因此G试验阴性可以区分定植菌和侵袭性感染。
3、标本放置时间过长,导致分解代谢。
(标本及时送检)4、试验操作过程中离心时间过长。
(进行标准化操作)近20余年来,由于干细胞移植、实体器官移植、肿瘤化疗、大剂量广谱抗菌药物的长期应用,以及糖皮质激素、免疫抑制剂的广泛应用等因素,侵袭性真菌感染的患病率和病死率均呈显著上升趋势。
首先是念珠菌感染率显著上升,在20世纪80年代初期,住院患者念珠菌所致败血症的患病率为2%,20世纪80年代后期增至5%,而到了20世纪90年代后已达8%,有1组研究报道在ICU患者真菌败血症患病率竟高达12%。
与此同时,非白念珠菌引起的侵袭性感染比例也明显增多,上世纪60~70年代,白念珠菌感染高达85%~90%,然而在1988到1992年间,据一癌症研究中心研究发现,非白念珠菌感染的发生率超过白念珠菌,仅42%侵袭性念珠菌感染是由白念珠菌所致,而其余均为非白念珠菌,包括热带念珠菌(18%),近平滑念珠菌(17%),光滑念珠菌(11%),克柔念珠菌(4%)。
免疫学检验过程中假阴性与假阳性出现的原因与解决办法
免疫学检验过程中假阴性与假阳性出现的原因与解决办法现阶段,医院在使用各种免疫方法进行检验的过程中,会不同程度出现假阳性、假阴性。
为此,研究人员经过仔细的观察与实践,发现了在免疫检验中出现假阳性的几种原因,今天写出来与同行们共讨,以便在未来工作中尽量减少失误,提高医院的检验工作水平。
免疫学检测中出现的假阴性及假阳性,所有的实验室人员都不陌生。
那么何谓假阴性及假阳性呢?简单的讲,假阴性就是实际上是阳性的标本,但是检测结果显示阴性。
同样,假阳性就是实际是阴性的标本,经过检测显示是阳性。
每一种病毒对人体的感染都会有一个窗口期。
窗口期,是指病毒感染人体后但尚未产生抗体或者抗体产生较少,使用现代检测手段或设备无法测定感染与否的一段时间。
在“窗口期”,即使病人已感染了病毒,但由于针对病毒的抗体并不稳定,所以检查病毒抗体的结果却是阴性,容易造成漏诊。
针对不同病毒,窗口期的时间也是不一样的。
乙肝的潜伏期大致是6个星期到6个月之间。
但那是从感染到发病的时间区段.有可能感染了,但抗原或抗体的数目没有达到可以检测出的数量,也就是窗口期。
丙肝的窗口期为36个月。
艾滋病病毒与其他病毒性疾病一样,也有窗口期。
人体感染HIV后2周后,血液中出现HIV抗体,一月后95%以上的人可检出HIV抗体,个别人抗体出现较迟。
窗口期一般为2周—3月,有极少数人可长达6个月。
如恰逢在窗口期作HIV抗体检测,结果可呈“阴性”,但其血中已有病毒,可以传染给别人。
假阳性、假阴性的出现可能由以下几个方面导致而成的:首先是操作层面技术失误的造成。
包括:1、样本位置的错误;2、体内抗体或抗原非常弱,检测不出来,即窗口期。
3、加样时样本稀释过大;4、试剂盒质量不好;5、板底过高;6、孵育时间过长等。
以上几种情况的出现,除窗口期感染外,都可以尽量避免。
由本公司研发、生产的流水线式全自动酶联免疫工作站(以下简称酶免工作站)防护措施为:1、设备的全自动化,减少了人为误差;2、在前处理系统加样通道的管腔内增加一段的空气柱,避免了管壁残留的冲洗液对样本的稀释。
梅毒检测为什么会有假阳性,如何处理?
梅毒检测为什么会有假阳性,如何处理?上海市东方医院检验科陈存存综述, 范列英审校(一)梅毒体外诊断试验1.梅毒的体外诊断试验分类梅毒的体外诊断试验按试验所用抗原分为非密螺旋体抗体试验(nontreponemal antibody test, NTrAT)和密螺旋体抗体试验(treponemal antibody test, TrAT)。
NTrAT包括快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin circle card test, RPR)、不加热血清反应素试验、性病研究实验室试验和甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test, TRUST)等, 均以心磷脂、胆固醇和磷脂酰胆碱等为抗原检测非特异性的抗心磷脂抗体(反应素), 故存在生物学假阳性。
2.检测特异性抗TP抗体的筛查试验在检测特异性抗TP抗体的筛查试验中, 荧光TP抗体吸收试验(fluorescent treponemal antibody absorption, FTA-ABS)、TP血球凝集试验(treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA)和TP颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination assay, TPPA)等已沿用多年, 其中TPPA因凝胶颗粒的均一性较佳而在性能上优于TPHA[26]。
这几种试剂制备所用的抗原为TP天然抗原, 来源受限且制备复杂。
近年在基因重组TP抗原成功制备的基础上发展的检测抗TP抗体的ELISA和CLIA筛查试验, 因具有检测性能佳、适合自动化批量检测、易标准化且原始资料易保存的特点而得到广泛应用。
本节着重讨论ELISA和CLIA检测抗TP抗体筛查试验的假阳性问题及其对策, 因而未将NTrAT检测的生物学假阳性列为主要议题。
(二)ELISA和CLIA抗TP抗体筛查试验的假阳性现象及对策导致间接ELISA和CLIA检测抗TP抗体假阳性的原因与间接ELISA 和CLIA检测抗HCV抗体假阳性类似, 自身免疫病、HIV感染、孕期妇女、静脉药瘾者中均有可能出现抗TP抗体假阳性结果; 近年市售的双抗原夹心ELISA检测抗TP抗体出现假阳性的因素还与密螺旋体属中的其他非梅毒(苍白)螺旋体物种有关。
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素及解决办法
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素及解决办法分析化学发光法是一种常用的检测方法,可以在很短的时间内得到准确的分析结果。
在医学领域,发光法也被广泛应用于检测梅毒螺旋体抗体。
在进行梅毒螺旋体抗体检测时,有时会出现结果误差的情况。
本文将分析分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的结果误差因素,并提出解决办法。
一、结果误差因素1. 样本处理不当样本处理不当是导致结果误差的常见因素之一。
样本的质量和稳定性对于检测结果至关重要。
如果在样本采集、保存和运输过程中出现问题,就会导致梅毒螺旋体抗体的浓度发生变化,从而影响检测结果的准确性。
2. 试剂盒存储条件不佳分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体通常需要使用试剂盒,而试剂盒的存储条件对于检测结果至关重要。
如果试剂盒长期暴露在高温、潮湿或光照的环境下,就会导致试剂盒内的荧光物质和发光底物分解,结果误差将不可避免。
3. 操作不规范检测人员的操作技术和经验也会对检测结果产生影响。
操作不规范、操作技术不熟练都可能导致检测结果的误差。
二、解决办法1. 严格控制样本处理过程对于样本的采集、保存和运输过程,需要严格控制每一个步骤,确保样本的质量和稳定性。
在采集样本时,应尽可能避免输血过程中的血液凝结、溶血和污染现象;在保存和运输样本的过程中,应避免暴露在高温、潮湿或光照的环境中。
2. 优化试剂盒的存储条件对于试剂盒的存储条件,应当根据试剂盒的要求,严格控制存储温度和湿度,避免高温、潮湿或光照等不利因素的影响。
3. 加强操作规范培训对于检测人员,应加强操作规范的培训,提高他们的操作技术和经验。
在日常操作中,应严格按照操作规程进行操作,避免因为操作不规范而导致的结果误差。
除了以上三点,还有一些其他因素也可能对结果产生影响,比如仪器的性能和使用条件,环境条件等。
在实际检测中,需要结合具体情况,全面进行分析并加以解决。
分析化学发光法检测梅毒螺旋体抗体是一种准确、灵敏的检测方法,但在实际操作过程中,也存在一些因素可能导致结果误差。
(仅供参考)试剂条假阳和假阴现象出现的原因以及处理方法
技术发展基于胶体金技术快速检测试纸条的错误信号的处理John Chandler,Nicola Robinson and Karen Whiting 文liu_wei 战友译(声明:本文仅供丁香园战友内部交流使用,著作权属原文作者。
)在近些年来,体外诊断产业(IVD)增加了巨大的投入来开发基于膜技术的快速检测试纸条。
类似的的检测已经应用在临床和非临床领域。
在早期的论文中已有一篇是关于这些方法得到广泛应用的综述。
虽然基于膜技术的快速检测试纸条是相当简单的,但是此方法的实行的效果依赖于大量的关键参数,在《体外诊断技术》的早期论文中已经探讨了金标液(gold conjugate)的质量和与膜结合的蛋白捕捉的方式的重要性。
此篇论文探讨了导致产生假阳性和假阴性信号的错误的检测操作的可能原因,并且提供了一套解决此类问题和优化检测效能的系统方法。
虽然此文章是有针对性地说明了胶体金检测技术中的相关问题,但是在胶乳检测技术中也能发现类似的问题。
为了避免重复,我们假定读者熟悉快速检测技术的机理和快速检测试剂的基本特性——尤其是抗体、金标粒子、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸收垫——并且熟悉检测中用于处理不同试纸条和硝酸纤维素膜的各种化学试剂。
对于不熟悉这些概念的读者,在其他文章里已经对此进行了详细的解释。
假阳性结果和假阴性结果的特征假阳性结果是样品中没有待检测物时在检测带上出现了一条彩线(对于金标而言是红线)。
这条线可能在检测的初期或在一段明显的时间延迟之后出现。
假阴性结果是有可检的阳性样品时在抗体捕捉点上没有出现一条可见的线。
假信号可能在许多种样品中发生,也可能仅仅发生在一种特定类型或来源的样品中。
这个问题可能出现于一个单独检测批次的每个样品,也可能仅仅发生于一个样品检测中随机数量的检测带。
后一种情况说明了对于整个操作而言在进行下一步前进行每个步骤时对大量检测带的处理的重要性。
甚至在整个操作水平时从标准阴性样品中也可能发现假阳性结果,同样对于标准阳性样品亦是如此。
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab(ELISA)、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。
方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(TP-Ab)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。
结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法,P<0.05。
结论TPPA具有较高的特异性,可以将其作为梅毒确证实验;TP-Ab(ELISA)法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近,是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法;TRUST法的特异性较差,可以将其当成TP-Ab(ELISA)法的补充。
标签:TPPA;TP-Ab(ELISA);TRUST;检测;血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病,主要是因为梅毒螺旋体感染导致的,梅毒的病程较长,临床表现复杂,表现为多样性,会对患者的全身各个器官造成损害;疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯,疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。
现阶段因为人们滥用抗生素药物,导致部分梅毒患者表现为隐性感染,缺乏临床表现,因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。
世界卫生组织认为,全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。
所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式,对安全输血非常重要。
本研究主要分析了TPPA、TP-Ab(ELISA)、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果,现将情况做如下分析。
1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月~2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例,并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例,对血清进行分离后再进行检测。
1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的;TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供;TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供;选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。
梅毒抗体阳性要紧吗?
“梅毒抗体阳性”要紧吗?在日常门诊工作中经常会碰到进行孕检或助孕前常规检查的朋友,感染系列检查结果回报为:梅毒抗体(+)。
梅毒是由苍白(梅毒)螺旋体引起的性传播疾病,其主要通过性接触进行传播。
梅毒抗体阳性到底有没有传染性?是不是意味着这位朋友得了梅毒呢?首先,梅毒抗体有假阳性可能,从梅毒螺旋体感染人体后的病理学机制来说,它一般出现两种抗体:一种是特异性抗体(TPHA),对机体再次接触梅毒有保护作用。
即使梅毒已经治疗好啦,且没有传染性,TPHA还是有可能在体内存在很长时间甚至终生存在,所以梅毒治愈后的患者检查时TPHA仍是阳性,但其实并没有传染性;另一种是非特异性抗体(RPR),它的疾病特异性不高,所以某些自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、硬皮病等也会出现假阳性反应,但一般RPR 较弱,也就是存在梅毒抗体假阳性可能。
因此,当您的检查回报梅毒抗体阳性时,请不要太过于着急!我们医生需要根据筛查及滴度试验来评估疾病的严重程度。
一般情况下血清梅毒抗体检测(TPPA)为筛查实验,有假阳性可能,是否需要治疗,需要看滴度检查情况。
滴度是以1:1、1:2、1:16…来表示,后边的数字越大说明滴度越高,严重程度也越重。
您检查后结果可能出现以下几种情况:(1)如果TPPA(+),甲苯胺红不加热血清试验即TRUST(-),结合病史及治疗史等,可以是既往感染过梅毒或TPPA假阳性,一般不需要治疗;(2)如果TPPA(-),TRUST(-),一般可以排除梅毒;(3)其他TPPA(-),TRUST(+)是梅毒抗体假阳性;(4)如果TPPA(+)、TRUST(+),需要考虑是否正在感染梅毒,应该找正规三甲医院的皮肤科医生给您进行科学的评估,规范科学的治疗!另外在某些生理状态,比如怀孕的孕妇中也可以出现梅毒抗体的假阳性,我们医生会结合您的临床资料来综合分析,不会仅凭化验单就草率下结论,所以请不要盲目恐慌和病急乱投医。
当然如果您确实患有梅毒或者隐性感染时,应该积极治疗。
化学发光法检测老年人梅毒螺旋体抗体假阳性率偏高原因分析
化学发光法检测老年人梅毒螺旋体抗体假阳性率偏高原因分析【摘要】目的:探讨应用微粒子化学发光法检测老年人梅毒螺旋体特异性抗体易产生假阳性结果的原因。
方法:采用化学发光法检测来自本院门诊及住院患者共1890例。
其中老年患者670例,中青年患者1220例。
血清中的梅毒特异性抗体含量,测定结果为阳性者再用TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验)进行确诊。
结果:用微粒子化学发光法检测老年组梅毒特异性抗体有着较高的假阳性率,两组间存在差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:老年人本身是多种疾病的高发群体,而其本身的生理特征亦发生变化,从而导致化学发光法检测老年人梅毒特异性抗体易发生假阳性。
【关键词】梅毒螺旋体;微粒子化学发光法;老年人;假阳性;性传播疾病【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028(2015)5-0204-02梅毒是一种有较强传染性及复杂病程的性传播疾病,其病原体为梅毒螺旋体(TP), 因其透明不易染色,又称为苍白螺旋体。
梅毒主要通过性接触进行传播,占95%以上[1],此外还可通过垂直传播、输血和注射药品、吸毒等方式传播。
梅毒临床表现多样,病程复杂,其发病率在我国也呈现出上升趋势。
2005年国家卫生部公布,在全国27种法定报告的甲、乙类传染病中,梅毒的发病人数高居于第五位(2002年是第七位),仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病。
由此可见,梅毒在现代生活中依旧对我国人民的生命健康有着严重的影响作用。
梅毒的诊断主要依赖于患者的患病史、接触史、临床表现及实验室诊断等。
其中,实验室检查项目包括血清学检测、梅毒螺旋体核酸测定(PCR法)和直接查梅毒螺旋体(暗视野显微镜、直接荧光抗体法)。
其中血清学检测是最传统的也是目前常规开展的项目[2]。
目前我院常规使用的项目包括胶体金法、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)及化学发光法。
TP-ELISA法检测老年人梅毒抗体易产生假阳性原因分析
提供;TP-PA试剂由日本东京富士瑞必欧株式会式提供。
1.4检测方法先用TP’ELISA法检测老年组及中青年组
血清中梅毒特异性抗体。阳性者再用梅毒螺旋体诊断试剂
TP-PA进行确诊。
2结果 TP-ELISA法检测老年组梅毒特异性抗体假阳性率
3.1%明显高于中青年组假阳性率,两组间用t检验比较,有
显著性差异(P<O.05),见表l。
例,家犬咬伤8例,未被动物抓咬伤但曾护理过狂犬病人’
例,宰杀狗I例,潜伏期最短6个月,最长21年。
1.2对转诊医院医生调查的反馈信息 对19例患者的接
诊或主管医生进行电话回访或直接咨询,了解他们当初接诊
时的考虑或诊断依据,如是否考虑过狂犬病,是否问及有无
动物抓咬伤史或接触史,结果有5位县市区综合医院(含本
院、体检及部份门诊病人共1640例。其中老年组530例,平
均75岁(65~85岁);中青年对照组1 110例,平均年龄37
岁(20~54岁)。
1.2检测仪器仪器采用Anthos全自动酶标免疫检测仪
和Anthos Fluido全自动洗板机(奥地利)。
1.3检测试荆TFLELlSA试剂由北京万泰生物药业公司
医学理论与实践2008年第21卷第9期J Med Theor&Prae V01.21。No.9,Sep 2008
1085
房后,住院时间最短只有2~3h,最长3d,全部死亡。其中从
本院非感染病房转诊9例,本市区其它医院转诊6例。县乡
医院转诊4例;女8例,男11例。年龄最大79岁,最小11个
月;被猪咬伤1例,鸡啄伤1例,猫抓伤3例,宠物抓咬伤4
由于近年来狂犬病发病率急剧上升,医院要充分利用各 种宣传渠道,如在门诊印发一些健康教育小册子,宣传狂犬 病的防治知识,提高人们医学知识水平,使病人首先主动陈 ,诉病史,提示医生,帮助诊断。每个专科重视其它专科知识 学习’,若发现传染病病例,要在医务人员中通报。要把近期有 哪些传染流行形势告诉医生,引起大家重视,每年定期进行 传染病防治知识讲座,使医生的知识面更广。医生在接诊病 人中及时准确地查出病因,并给予合理的施治是天键,所接 诊医生在给病人诊断时不能带有主观情绪,检查一定要仔细 全面,要有鉴别诊断和排除诊断的临床思维方法,在问诊时, 应注意追问有无动物禽兽致伤史或密切接触史,任何参与狂 犬病兽或可能带有狂犬病病毒兽类宰杀、剥皮、切肉、烹煮、 玩弄尸骨者均有感染的可能_“。
TP—ELISA法检测心脏病患者易产生假阳性的原因分析
TP—ELISA法检测心脏病患者易产生假阳性的原因分析目的探讨应用梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)检测心脏病患者易产生假阳性结果的原因。
方法采用TP-ELISA法分别检测本院1 350例心脏病患者和2 780例非心脏病患者的血清,结果阳性者再用TPPA法进行确诊,并对两组患者的梅毒特异性抗体假阳性率进行对比分析。
结果TP-ELISA法检测心脏病患者假阳性率明显高于非心脏病患者组,两组差异有统计学意义(P < 0.01)。
结论脂质异常和年龄因素是造成TP-ELISA法检测梅毒抗体易发生假阳性的原因。
标签:TP-ELISA;心脏病;梅毒抗体;假阳性近年来,梅毒患者数量呈逐年上升趋势,血液传播、性传播和母婴垂直传播是梅毒的主要传播途径。
免疫血清学试验是诊断梅毒的重要途径之一,它对梅毒的诊断、治疗及研究均有重要意义[1],其检测价值已经超出术前及输血前的范畴,笔者在近年的工作中发现TP-ELISA在心脏病患者中阳性率远高于其他人群,现将本院2012年1月~2012年6月TP-ELISA检测结果分析如下:1 材料与方法1.1 研究对象选择2012年1~6月住院患者4 130例,其中,心脏病患者组1 350例,非心脏病患者组2 780例。
1.2 仪器及试剂仪器采用帝肯全自动酶标免疫检测仪。
梅毒抗体ELISA法试剂盒由上海科华生物有限试剂公司提供,TPPA法试剂盒由日本东京富士瑞必欧株式会社提供。
1.3 检测方法先用TP-ELISA法检测住院患者血清中梅毒特异性抗体,阳性者再用梅毒螺旋体诊断试剂TPPA进行确诊。
1.4 统计学方法采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,计数资料比较采用χ2检验,P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果TP-ELISA法检测心脏病患者组梅毒特异性抗体有54例阳性,以TPPA法8例阳性为标准,TP-ELISA法存在46例假阳性,假阳性率为3.41%(46/1 350);TP-ELISA法检测非心脏病患者组梅毒特异性抗体有69例阳性,以TPPA法35例阳性为标准,TP-ELISA法存在34例假阳性,假阳性率为1.22%(34/2 780)。
TPPA试剂检测TP抗体假阳性原因分析
TPPA试剂检测TP抗体假阳性原因分析TPPA试剂是将梅毒螺旋体(Nichols株)的精制菌体裂解成分包被在人工载体明胶粒子上(致敏粒子),这种致敏粒子含有TP抗原的全片段成分,致敏粒子和样本中的TP抗体进行交联反应发生凝集,产生粒子凝集反应,由此可以检测出血清或血浆中的TP抗体。
在试剂使用过程中,有时由于个别样本中干扰因素和操作偶然因素的影响,可能会出现个别结果不太准确的情况,根据目前收集到的资料分析,产生有异议的结果一般原因如下:一:试验操作产生的偶然误差TPPA试剂操作相对简单,但个别情况下也可能产生偶然误差,导致异常结果,如U型板孔划花(重复使用的U型板在清洗时用硬质刷,导致内孔划痕较多,阴性样本的致敏粒子不能正常沉淀而看上去像凝集图像)、静置过程中意外震动(导致沉淀粒子散开)等。
二:其他可能导致异常结果的干扰因素因为样本个体之间的差异,部分患有其他疾病的患者可能会产生与致敏粒子包被的抗原产生非特异性反应的因子,造成异常结果。
根据文献中对于异常结果分析,可能会造成异常结果的疾病是:自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮、盘状红斑狼疮、药物诱发的红斑狼疮类、风湿性关节炎、混合结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血等)、肿瘤(淋巴肉瘤、脑膜瘤、结肠癌)、皮肤病(皮肤相关的螺旋体引起)、生殖器疱疹、麻风、热性病、莱姆病、地方性密螺旋体病(雅司病、品他病)等。
以及说明书中提及的服用了含有免疫球蛋白血液制品而呈阳性反应的患者。
但以上情况中的人群也并不都出现异常结果,可能还和患者自身的个体差异有关。
除疾病外,在孕妇和老年人检测时,也有可能会产生较高概率的异常情况。
老年人曾患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体和/或抗T.pallidum抗体(特异性抗体)的交叉抗原,或者个别老年患者体内可能有口腔螺旋体、皮肤相关螺旋体、肠道螺旋体等螺旋体共生,诱导产生抗属、群或特异抗原的交叉反抗体。
孕妇在妊娠期间,机体会产生一些特殊物质,可能会导致TPPA检测异常结果(具体何种物质可能会产生影响上不明确)。
真阳假阳鉴定方法
真阳假阳鉴定方法真阳假阳鉴定方法是指判断某种测试结果是真实的还是虚假的方法。
在医疗诊断、病毒检测等方面,确保测试结果的准确性显得尤为重要。
下面将针对真阳假阳的意义、鉴定方法和注意事项进行探讨。
一、真阳和假阳的含义真阳(True Positive, TP)是指测试结果为正,且测试对象确实存在的情况。
比如,病毒检测实验中,实验结果为阳性,且被检测的样品确实含有目标病毒。
假阳(False Positive, FP)则是指测试结果为正,但测试对象实际不存在。
比如,在乙肝检测中,假阳性率高,有时候就需要经过多次鉴定才能确定测试结果的准确性。
二、真阳假阳鉴定方法1.准备工作进行真阳假阳鉴定时,首先需要准备好测试对象的相关信息,包括测试目的、方法、结果和相关疾病的可能性等等。
2.样本复检和重测在测试结果出现阳性后,可以对样本进行复检,并进行多次重测确定结果。
多次测试的结果是相互印证的,准确率会随着测试次数的增加而提高。
3.验证测试方法确保使用的测试方法是符合标准的,且能够精准地判断目标物质是否存在。
不同的测试方法在判断某些物质时结果有差异,如果方法不正确可能会导致测试结果出现偏差。
4.数据分析对大量数据进行分析,可以发现测试结果中的规律和共同点。
通过数据分析,可以挖掘出假阳的原因并进行相应的调整,以提高测试准确率。
三、注意事项1.标本标签应该准确无误,并密切跟踪样本在测试过程中的行踪变化。
2.在实验室中,应按照标准操作程序进行实验,避免差错和失误。
3.测试前务必阅读相关指南和要求,确保操作符合要求。
4.对于测试疾病的风险评估,应该根据患者的症状及其它相关指标进行全面的评估。
综上,真阳假阳鉴定方法是非常重要的,它能够保证测试结果的准确性,让相关部门能够及时采取措施,为人们的健康做出更好的保障。
因此,在医疗诊断、病毒检测等方面,我们需要加强真阳假阳鉴定方法的实践和研究,以提高测试结果的准确率,从而更好地服务人民群众。
三种实验梅毒检测(抗-TPTRUSTTPPA)联合检测在梅毒诊断中 应用
三种实验梅毒检测(抗-TPTRUSTTPPA)联合检测在梅毒诊断中应用梅毒是一种由梅毒螺旋菌引起的性传播疾病,其病原体可侵害全身各器官及系统,给患者带来严重的健康危害。
早期的梅毒症状并不明显,容易被忽视,但如果不及时进行诊断和治疗,会给患者的身体健康带来严重威胁。
及时准确地进行梅毒检测对于控制和治疗梅毒具有重要的意义。
近年来,随着医学技术的不断发展,三种实验梅毒检测(抗-TP/TRUST/TPPA)联合检测在梅毒诊断中得到了越来越广泛的应用。
本文将从这三种实验的原理、优点以及联合应用的意义等方面对其进行介绍和分析。
抗-TP是一种梅毒抗体检测试剂,其原理是检测患者血液中是否含有梅毒抗体。
在梅毒感染后,机体内会产生梅毒抗体,通过检测这些抗体的存在来判断患者是否感染了梅毒。
TP抗体测定对梅毒的诊断有很高的敏感性和特异性,因此被认为是梅毒诊断的金标准之一。
三种实验梅毒检测(抗-TP/TRUST/TPPA)在梅毒诊断中的联合应用,可以充分发挥各自的优势,提高梅毒的诊断准确性和可靠性。
抗-TP检测具有较高的特异性和敏感性,TRUST检测操作简便,结果可靠,TPPA检测结果对梅毒的诊断有很高的特异性和准确性,三者结合起来可以有效地提高梅毒的诊断准确性,避免漏诊和误诊的发生。
三种实验梅毒检测(抗-TP/TRUST/TPPA)联合检测还可以有效地降低假阳性和假阴性率,提高了梅毒的诊断准确性和可靠性。
梅毒的诊断往往受到许多因素的影响,包括患者的免疫状态、感染时间、抗体水平等,三种实验联合检测可以综合考虑这些因素,提高了梅毒的诊断准确性。
在临床实际应用中,三种实验梅毒检测(抗-TP/TRUST/TPPA)联合检测已经得到了广泛的认可和应用。
根据世界卫生组织(WHO)和国际性学术组织的共识建议,梅毒的诊断和鉴别诊断最好是采用多种实验联合检测的方法,以提高诊断的敏感性和特异性,降低假阳性和假阴性率,进一步保障患者的健康和生命安全。
试剂条假阳和假阴现象出现的原因以及处理方法.
技术发展基于胶体金技术快速检测试纸条的错误信号的处理John Chandler,Nicola Robinson and Karen Whiting 文liu_wei 战友译(声明:本文仅供丁香园战友内部交流使用,著作权属原文作者。
在近些年来,体外诊断产业(IVD增加了巨大的投入来开发基于膜技术的快速检测试纸条。
类似的的检测已经应用在临床和非临床领域。
在早期的论文中已有一篇是关于这些方法得到广泛应用的综述。
虽然基于膜技术的快速检测试纸条是相当简单的,但是此方法的实行的效果依赖于大量的关键参数,在《体外诊断技术》的早期论文中已经探讨了金标液(gold conjugate的质量和与膜结合的蛋白捕捉的方式的重要性。
此篇论文探讨了导致产生假阳性和假阴性信号的错误的检测操作的可能原因,并且提供了一套解决此类问题和优化检测效能的系统方法。
虽然此文章是有针对性地说明了胶体金检测技术中的相关问题,但是在胶乳检测技术中也能发现类似的问题。
为了避免重复,我们假定读者熟悉快速检测技术的机理和快速检测试剂的基本特性——尤其是抗体、金标粒子、硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫和吸收垫——并且熟悉检测中用于处理不同试纸条和硝酸纤维素膜的各种化学试剂。
对于不熟悉这些概念的读者,在其他文章里已经对此进行了详细的解释。
假阳性结果和假阴性结果的特征假阳性结果是样品中没有待检测物时在检测带上出现了一条彩线(对于金标而言是红线。
这条线可能在检测的初期或在一段明显的时间延迟之后出现。
假阴性结果是有可检的阳性样品时在抗体捕捉点上没有出现一条可见的线。
假信号可能在许多种样品中发生,也可能仅仅发生在一种特定类型或来源的样品中。
这个问题可能出现于一个单独检测批次的每个样品,也可能仅仅发生于一个样品检测中随机数量的检测带。
后一种情况说明了对于整个操作而言在进行下一步前进行每个步骤时对大量检测带的处理的重要性。
甚至在整个操作水平时从标准阴性样品中也可能发现假阳性结果,同样对于标准阳性样品亦是如此。
艾滋病假阳性的原因_艾滋病的病因是什么
艾滋病假阳性的原因_艾滋病的病因是什么推荐文章艾滋病假阳性的产生原因热度:灾区送温暖慰问信热度:党性的光辉爱心的传承征文热度:党员队伍建设先进性的表现热度:经典魔性的女高音英文歌曲推荐热度:现实中很多HIV抗体初筛阳性的朋友,在得知艾滋病假阳性的情况后都非常害怕,难道HIV抗体初筛阳性就是得了艾滋病吗?下面店铺给大家分析艾滋病假阳性的原因,希望能帮到大家。
艾滋病假阳性的原因一、受检者本身体质的原因:1、有一些特殊疾病,比如自身免疫疾病,容易产生非特异反应造成假阳性。
2、或者说一些特殊时期,比如孕期,其原因可能为间接法测抗HIV试剂盒中所用的酶标记抗人IgG可与非特异性吸附的IgM或RF、ANA等自身抗体结合,导致假阳性的产生。
3、感染其他疾病,如HBV、HCV、梅毒等,可能会造成一些非特异的交叉反应。
二、检测试剂的原因:任何一种试剂都难以达到100%准确,在HIV检测中使用的试剂灵敏度很高,为的是避免漏检,但过分的敏感也可能会带来副作用,出现较多的可疑对象,给HIV假阳性检测者造成虚惊一场。
三、操作不当的原因。
因为初筛检测工序繁多,有六七道,其中若有一道出现误差就可能影响检测结果,或者操作中出现交叉污染,都会造成假阳性或假阴性。
艾滋病抗体初筛假阳性的可能性较大,检测人员在艾滋病抗体初筛阳性时不可出具HIV抗体阳性报告单,而是要经过两次的其他实际的初筛HIV抗体检测,依然阳性后做艾滋病抗体确证实验,确证实验阳性后才可出具艾滋病抗体阳性报告单。
而受检者在得知艾滋病抗体初筛阳性后也不可有过激反应,确证实验阳性结果后疾控部门会出具艾滋病诊断证明,并指导后续治疗。
关于艾滋病病毒的检测,是一件很严谨的事情,谁也不可能通过一次的检测结果就告诉病人他感染了艾滋病,需要先筛查,如果是阳性的话,需要去正规的医院做二次检测。
很多做艾滋病病毒筛查的结果是不准确的,会出现假阳性,这种几率可达30%甚至更高,如果用艾滋病检测试纸进行检测,如果操作不当的话,也会出现假阳性。
ELISA法检测梅毒假阳性结果分析
ELISA法检测梅毒假阳性结果分析目的对梅毒酶联免疫吸附测定(TP-EIISA)法假阳性结果进行分析。
方法采用TP-ELISA法对2924例标本进行梅毒特异性抗体检测。
阳性标本分为吸光度/临界值比值低值组(1~2)和S/CO(>2)高值组;同时所有标本用TPPA法复检,对结果进行对比分析。
结果TP-ELISA法与TPPA法2种方法梅毒抗体检测结果无显著差别,但S/CO低值组与高值组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论TP-ELISA检测梅毒特异抗体可行;但对于S/CO低值标本应加用TPPA方法以排除假阳性。
标签:梅毒;假阳性;分析梅毒的血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一,它在梅毒的诊断、治疗及研究方面均有重要意义[1]。
目前检测梅毒螺旋体感染的血清学方法主要是酶联免疫吸附实验(ELISA),但常常遇到出现假阳性。
梅毒螺旋体明胶凝集试验(treponema pallidum particle assay,TPPA)特异性好、灵敏度高,是日前公认的梅毒血清确证试验[2]。
本研究通过以TPPA法与EIISA结果对比,试图对ELISA 检测假阳性结果进行分析。
1资料与方法1.1一般资料2012年1月~2014年12月在兵团第七师人民医院住院做输血前筛查的患者血清标本2924例,其中男1778例,女1146例,年龄17~75岁。
均采用常规静脉采血。
1.2 仪器和试剂TP-ELISA试剂由珠海丽珠试剂有限公司提供,TPPA试剂为日本富士株式会社产品。
酶标仪,Anthos 2010型(奥地利生产)。
洗板机,Anthos fluido 24200型(奥地利生产)。
试剂检测临界值(cutoff)为0.20+阴性对照平均吸光度值,使用Wellscan MK3酶标仪读取吸光度值,以吸光度/临界值比值[吸光度/临界值(absorbance of sample/cut-off rate,S/CO)]为判定标准,S/CO≥1为阳性,S/C00.05),见表1。
抗球蛋白试验结果假阳性及假阴性的原因
导致抗球蛋白试验结果假阳性及假阴性的原因
1、导致抗球蛋白试验结果假阳性的原因:
①免疫兔或羊制备的抗球蛋白中含有的种间抗体未吸收干净,可以引起假阳性。
用酶处理的细胞实验时因敏感性增加,极微量的种间抗体也能引起假阳性;
②红细胞用盐水洗涤时已有凝集;
③间接抗球蛋白试验中所用红细胞本身已是直接抗球蛋白试验阳性,造成间接抗球蛋白试验的假阳性;
④所用红细胞被污染;
⑤不抗凝标本在冷环境里经一段时间的保存后,自身冷抗体发生作用,激活补体,使补体成分(主要是C4的片段)结合在红细胞上,用多特异型抗球蛋白试剂则发生假阳性反应;
⑥离心过度,血细胞比容过紧致不易充分摇散,误认为阳性反应;
⑦所用盐水保存在质量较差的容器内,容器上脱落的硅胶可引起非特异型的红细胞凝集。
保存在金属容器中的盐水,如果有较多的金属离子可导致蛋白非特异地吸附到红细胞上而造成假阳性。
2、导致抗球蛋白试验结果假阴性的原因:
①致敏后的红细胞洗涤不充分,残留的球蛋白中和了试剂中的抗球蛋白而造成假阴性;
②操作过程不连续,时间过长,结合在红细胞上的抗体已经解离而
造成假阴性;
③红细胞、血清和抗球蛋白试剂保存不当都可能发生活性减弱或丧失,引起假阴性;
④离心过度使红细胞压得过紧、摇散时用力过大把较弱的凝块摇散,造成假阴性;
⑤红细胞过多致使反应减弱,红细胞过少致使看结果不准确,都影响结果而造成假阴性;
⑥所用血清抗体浓度过大或洗涤后的红细胞可能有结合的抗体游离下来,中和抗球蛋白造成假阴性;
⑦试剂中抗球蛋白浓度过大而有前带现象,造成假阴性;
⑧孵育时间和温度不当,会使反应结果减弱或变为假阴性。
化学发光法检测老年人群抗-TP抗体假阳性的原因分析
化学发光法检测老年人群抗-TP抗体假阳性的原因分析张云;高双双;江旭【摘要】目的探讨应用化学发光法检测老年人抗梅毒螺旋体抗体(TP)易产生假阳性结果的原因.方法选取我院2014年度进行抗-TP抗体检测的患者2120例,按年龄分组,老年组(年龄≥60岁)患者492例,对照组(年龄18~60岁)患者1628例,均采用磁微粒化学发光法分别检测抗-TP抗体,统计各组抗-TP抗体的阳性率,阳性者再用TPPA试验进行确证.结果老年组(年龄≥60岁)经化学发光法检测出的阳性率为5.89%,而经TPPR检测出的假阳性率为3.25%对照组中,年龄在18~30岁,经化学发光法检测出的阳性率为2.31%,而经TPPR检测出的假阳性率为0%;31~59岁,经化学发光法检测出的阳性率为2.97%,而经TPPR检测出的假阳性率为0.35%;经比较老年组与对照组出现的阳性率和假阳性率比较,老年组出现的阳性率和假阳性率均明显升高,比较有显著的差异(P<0.05).结论经磁微粒化学发光法检测老年抗-TP,出现抗体假阳性,可能因年龄与疾病等因素检测,经检测血清学试验结果为阳性,指表明患者体内存在抗类脂抗体或抗-TP抗体,不能作为感染梅毒的证据,临床医师应该慎重诊断.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2016(014)003【总页数】2页(P62-63)【关键词】磁微粒化学发光;梅毒;老年人;假阳性【作者】张云;高双双;江旭【作者单位】河南省南阳市中医院检验科,河南南阳473000;河南省南阳市中医院检验科,河南南阳473000;河南省南阳市中医院检验科,河南南阳473000【正文语种】中文【中图分类】R759.1梅毒是梅毒螺旋体(TP)引起的一种性传播疾病[1]。
2009年,在我国甲乙类传染病统计结果显示:梅毒报告病例数居第三位[2]。
在长期的临床免疫学检验工作中,我们发现磁微粒化学发光法检测梅毒在老年人中阳性率远高于中青年人,尤其是很多临床无症状,主诉无发病史和疾病接触史的老年人抗-TP抗体化学发光试验阳性[3-4]。
老年人梅毒抗体易产生假阳性原因分析
老年人梅毒抗体易产生假阳性原因分析摘要】目的探讨老年人梅毒特异性抗体容易产生假阳性结果的原因。
方法采用TP-ELlSA分别检测500例老年患者及1576例中青年患者血清中梅毒特异性抗体,阳性者再用梅毒螺旋体诊断试剂TPPA进行确诊。
结果 TP-ELISA法检测老年组梅毒抗体假阳性率明显高于中青年组,二组间有显著性差异(P<0.05)。
结论年龄、疾病及检测方法是造成老年人梅毒抗体易产生假阳性的重要原因。
【关键词】 TP-ELISA 老年人梅毒抗体假阳性【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)17-0203-02梅毒是性传播性疾病之一,临床上梅毒的诊断主要是根据临床症状和血清学检查,而在血清学检查中,对特异性抗体检测最常用的方法是梅毒螺旋体被动颗粒凝集试验TPPA(或梅毒螺旋体血球凝集试验TPHA)和梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验TP-ELISA。
TPPA(或TPHA)已被美国疾病预防控制中心(CDC)定为确诊方法,TP-ELISA法检测梅毒特异性抗体是目前检验科常用的免疫学方法,其操作简单,无需特殊设备,在国内广泛应用。
我们在工作中也注意到有很多临床无症状,主诉无发病史和疾病接触史的老年人TP-ELISA假阳性率高,这给医疗工作带来麻烦,甚至引起医疗纠纷。
为此对我院2011年1月—2012年10月期间2076例患者的梅毒血清学检查结果进行分析,现报告如下:1 材料与方法1.1. 研究对象2011年1月-2012年l0月期间我院住院、体检及部份门诊病人共2076例。
其中老年组500例,平均75岁(60~80岁);中青年对照组1576例,平均年龄37岁(20~60岁)。
1.2. 检测仪器仪器采用RT-2100C酶标仪和RT-2600C全自动洗板机。
1.3. 检测试剂 TP-ELlSA试剂由珠海丽珠生物有限公司提供;TPPA试剂由日本东京富士株式会提供,试剂均在有效期内,操作严格按说明书。
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TPPA试剂检测TP抗体假阳性原因分析
TPPA试剂是将梅毒螺旋体(Nichols株)的精制菌体裂解成分包被在人工载体明胶粒子上(致敏粒子),这种致敏粒子含有TP抗原的全片段成分,致敏粒子和样本中的TP抗体进行交联反应发生凝集,产生粒子凝集反应,由此可以检测出血清或血浆中的TP抗体。
在试剂使用过程中,有时由于个别样本中干扰因素和操作偶然因素的影响,可能会出现个别结果不太准确的情况,根据目前收集到的资料分析,产生有异议的结果一般原因如下:
一:试验操作产生的偶然误差
TPPA试剂操作相对简单,但个别情况下也可能产生偶然误差,导致异常结果,如U型板孔划花(重复使用的U型板在清洗时用硬质刷,导致内孔划痕较多,阴性样本的致敏粒子不能正常沉淀而看上去像凝集图像)、静置过程中意外震动(导致沉淀粒子散开)等。
二:其他可能导致异常结果的干扰因素
因为样本个体之间的差异,部分患有其他疾病的患者可能会产生与致敏粒子包被的抗原产生非特异性反应的因子,造成异常结果。
根据文献中对于异常结果分析,可能会造成异常结果的疾病是:自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮、盘状红斑狼疮、药物诱发的红斑狼疮类、风湿性关节炎、混合结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血等)、肿瘤(淋巴肉瘤、脑膜瘤、结肠癌)、皮肤病(皮肤相关的螺旋体引起)、生殖器疱疹、麻风、热性病、
莱姆病、地方性密螺旋体病(雅司病、品他病)等。
以及说明书中提及的服用了含有免疫球蛋白血液制品而呈阳性反应的患者。
但以上情况中的人群也并不都出现异常结果,可能还和患者自身的个体差异有关。
除疾病外,在孕妇和老年人检测时,也有可能会产生较高概率的异常情况。
老年人曾患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体和/或抗T.pallidum抗体(特异性抗体)的交叉抗原,或者个别老年患者体内可能有口腔螺旋体、皮肤相关螺旋体、肠道螺旋体等螺旋体共生,诱导产生抗属、群或特异抗原的交叉反抗体。
孕妇在妊娠期间,机体会产生一些特殊物质,可能会导致TPPA检测异常结果(具体何种物质可能会产生影响上不明确)。
总之,TPPA检测结果可以作为样本中是否含有TP抗体的判断依据,但由于人体自身干扰物质影响和个别疾病患者产生的干扰物质影响,可能导致误差的因素较多,在TPPA检测阳性的情况下,还需要结合其他检测结果和临床症状来进行综合评价。
技术服务部。