生物分离与纯化技术
生物活性物质的分离与纯化技术
生物活性物质的分离与纯化技术：从原理到应用生物活性物质的分离与纯化是生物学、生物工程以及药物化学等领域中非常重要的研究方向。
这种技术主要用于提取天然产物、发现新药物以及研究生物活性物质的信号转导机制等方面。
在对生物活性物质进行研究时，需要对其进行分离与纯化。
本文将从原理、方法及应用三个方面入手，介绍现代以及其应用。
原理：生物活性物质的分离与纯化是指将复杂的混合物中的有用成分索取出来，而该成分通常只是其中一小部分。
因此，分离和纯化的成果往往是非常少的，需要注意提高分离的效率和选择性。
生物活性物质通常是复杂多样的，并且在混合物中的浓度非常低。
因此，需要采用一系列的分离与纯化方法，才能使其荟萃反映出来。
生物活性物质的分离与纯化方法按照其物理、化学性质和分子的大小等因素进行分类。
常用的方法包括：离子交换、透析、层析、电泳等。
方法：离子交换是一种最常见的分离与纯化技术。
其基本原理是根据生物物质的电荷差异，在离子交换树脂上进行吸附和脱附。
离子交换树脂是一种将有机化合物固定在其中的高分子物质。
在离子交换分离过程中，生物物质溶液经过树脂的时候，离子交换树脂会对其带电的分子进行吸附，并将其吸附在树脂表面。
然后，根据逐渐增加溶液的离子强度，使得生物物质逐渐从树脂上脱离下来。
通过这样的多次处理，离子交换可以获得比较纯的生物物质。
透析是另一种分离技术。
其基本原理是根据不同大小的分子通过不同大小和孔径的透析膜来进行过滤分离。
透析膜的孔径通常比生物物质小，这使得生物物质可以通过，而较大的分子则无法通过。
层析是一种分离和纯化技术。
其基本原理是将混合样品注入到含有不同固定相的层次柱中，根据各种机制，在柱中形成不同的化学分析区段。
通过轻重分离，生物物质被不同的区段结合，直到最终获得纯化的物质。
电泳是一种根据电荷或大小分子的不同来进行分离的技术。
这种技术需要用到电极，将溶液浸泡在盐桶中，然后试管中的分子通过盐桶电极的分离进入试管腔。
生物大分子分离与纯化技术
生物大分子分离与纯化技术是生物学、生物医学和生物工程领域中非常重要的技术之一。
它可以用于提取和分离生物大分子，从而达到纯化的目的。
本文将着重探讨的原理、方法和应用。
一、原理在生物细胞中，不同的生物大分子有着不同的形态、结构和性质。
为了分离和纯化这些生物大分子，需要利用它们的理化性质差异。
例如，蛋白质可以通过电泳分离，根据电荷、分子量等差异分离出不同的成分；核酸则可以通过浓度梯度离心分离，根据密度差异分离出单独的成分。
还有一些生物大分子，如多肽、糖类、脂质等，可以通过其他特殊方法分离。
二、方法1. 柱层析法柱层析法是中常用的重要方法之一。
它利用固定相（柱子中的树脂）和流动相（洗脱缓冲液）之间的相互作用来分离和纯化生物大分子。
根据固定相和洗脱缓冲液的不同性质，可以选择不同的柱层析方法，例如离子交换层析、凝胶过滤层析和亲和层析等。
2. 电泳法电泳法是基于生物大分子的电荷差异和分子量差异的原理，将不同的生物大分子分离并捕获的技术。
根据电泳介质、运行方式以及电场的不同条件，可以选择不同的电泳方法，如蛋白质电泳、DNA电泳、脂质电泳等。
3. 超滤法超滤法是利用微孔过滤膜的不同截留分子量，将生物大分子按照大小分离纯化的技术。
超滤法分为正压式和负压式，正压式是通过液体压力将生物大分子向膜孔内压缩，从而分离得到小分子；负压式是通过负压将大分子向膜孔内吸附，难以通过的是大分子。
4. 溶剂萃取法溶剂萃取法是将生物大分子从混合物中溶解到特定的有机溶剂中，然后通过反萃取、扩散等工艺，使它在不同相中转移、分离和纯化的方法。
5. 其他方法生物大分子的分离和纯化方法还有一些其他方法，例如磁性珠法、浓缩法、冷冻干燥法等。
三、应用在生物医学、生物工程、食品工业、环境保护和新能源开发等领域中有广泛的应用。
具体来说，1. 生物医学领域生物医学领域的应用主要是分离和纯化蛋白质和多肽类物质，如酶、抗体、激素、血浆蛋白等。
这些物质可以作为药物、诊断试剂、生物治疗的原材料等。
生物化学工程中的生物分离与纯化技术研究
生物化学工程中的生物分离与纯化技术研究摘要：生物化学工程中的生物分离与纯化技术是一门重要的技术领域，对于生物制药、食品工业和环境保护等领域具有重要意义。
本文首先介绍了生物分离与纯化技术的研究背景和意义，然后综述了当前主流的生物分离与纯化技术，包括固定化酶技术、膜分离技术、离子交换技术和凝胶过滤技术等。
最后，讨论了生物分离与纯化技术在生物化学工程中的应用和发展趋势，并提出了未来研究的方向。
关键词：生物化学工程、生物分离、纯化技术、固定化酶、膜分离引言生物化学工程是将生物学、化学、工程学等多学科知识与技术相结合，应用于生物制药、食品工业、环境保护等领域的一门学科。
在生物化学工程的实践中，生物分离与纯化技术是一项关键的技术，它涉及到生物体内各种生物分子的提取、分离和纯化，对于获得高纯度的生物制品具有重要意义。
随着生物技术的不断发展和进步，越来越多的生物大分子如蛋白质、酶、抗体等被广泛应用于医药领域。
而这些生物大分子的提取、分离和纯化则面临着一系列的挑战。
首先，生物大分子在生物体内的含量相对较低，需要进行高效的分离和纯化才能得到足够的产量。
其次，生物大分子的结构复杂，需要选择合适的技术来实现选择性分离和高度纯化。
因此，生物分离与纯化技术的研究和发展对于生物化学工程的进一步发展具有重要意义。
当前，固定化酶技术是生物分离与纯化领域的研究热点之一。
固定化酶技术通过将酶固定在载体上，实现酶的稳定性和重复使用性，广泛应用于生物催化、生物制药和食品工业等领域。
另外，膜分离技术也是一种常见的生物分离与纯化技术，通过选择性透过和截留不同大小的分子，实现分离和纯化的目的。
离子交换技术则是通过固定化的离子交换基团与目标分子间的亲和作用实现分离和纯化。
凝胶过滤技术则是利用凝胶颗粒的孔隙来分离不同大小和形状的生物大分子。
尽管目前已有多种生物分离与纯化技术被广泛应用，但仍存在一些问题和挑战。
例如，某些生物大分子的纯化效率较低，且操作复杂；一些技术在大规模生产中存在成本较高的问题。
生物产品分离纯化技术
生物产品分离纯化技术
生物产品分离纯化技术是指将从生物系统中提取或获得的混合物或复杂混合物中的生物分子分离和纯化的一系列技术和方法。
这些技术包括但不限于以下几种：
1.色谱技术：如凝胶电泳、高效液相色谱(HPLC)、气相色谱(GC)等，可用于分离和纯化蛋白质、核酸、代谢产物等生物大分子。
2.超滤技术：可用于分离和纯化多糖、蛋白质、核酸等小分子。
3.亲和层析技术：利用配对结合剂将特定蛋白质、酶等生物大分子与树脂表面结合，实现富集和纯化。
4.透析技术：如透析膜、透析柱等，可用于分离和富集生物大分子。
5.离心技术：如高速离心机、超高速离心机等，可用于分离和纯化细胞、亚细胞组分等微小生物颗粒。
6.电泳技术：如聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、转移蛋白电泳等，可用于分离和纯化蛋白质、核酸等生物大分子。
这些技术的选用取决于具体的分离纯化目的和样品特性，以及实验条件和要求。
1/ 1。
生物活性物质的分离和纯化
生物活性物质的分离和纯化，是现代生物学、生物医学及药物化学等领域的关键技术之一。
随着科学技术的发展，越来越多的天然生物产物和人工合成的化合物被发现具有一定的生物活性，因此分离和纯化这些物质就显得尤为重要。
一、生物活性物质的分类生物活性物质可以分为多种类型，例如蛋白质、多肽、核酸、糖类、酶、细胞因子等。
这些物质具有不同的结构和功能，因此对它们进行分离和纯化需要选用不同的方法和技术。
二、分离和纯化方法1. 层析法层析法是目前分离和纯化生物活性物质最广泛应用的方法之一。
它的主要原理是根据生物活性物质在固定相和流动相之间的分配差异进行分离。
层析法可以分为多种类型，例如吸附层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等，每种层析法都有不同的适用范围和操作步骤。
层析法具有分离效率高、分离后的物质纯度高的优点，但是操作复杂，成本较高。
2. 薄层扩散法薄层扩散法是一种简单而有效的生物活性物质分离和纯化方法，它的原理是利用物质在固定相上的不同吸附特性进行分离。
薄层扩散法通常用于分离小分子化合物、蛋白质、核酸等生物活性物质。
它具有快速、易操作和成本低的优点，但是分离效率相对较低。
3. 超滤法超滤法是一种基于分子大小和形状差异进行分离的方法，它可以有效的分离不同分子量的生物活性物质。
超滤法主要应用于分离和纯化大分子生物活性物质，例如蛋白质、糖类、核酸等。
超滤法操作简单、速度快、分离效率较高，但是成本较高。
三、分离和纯化实践在实际应用中，分离和纯化生物活性物质常常需要结合多种方法和技术来进行，以达到更好的效果和高纯度的目的。
例如，可以将层析法与超滤法相结合，以克服各自存在的缺点。
在分离和纯化生物活性物质过程中，还需要考虑物质的保护和稳定性。
许多生物活性物质在分离和纯化过程中容易发生变性，影响分离效果和后续利用价值。
因此，需要选择合适的缓冲液、温度和pH值等条件，以保持物质的稳定性。
四、结语是一项十分重要的技术，它对于生物医学、药物化学和环境保护等领域具有重要的意义。
《生物分离与纯化》课件
精细分离的效果取决于目标物质 的性质、分离方法和分离条件的 选择，需根据实际情况进行调整
。
纯化与鉴定
纯化与鉴定的目的是进一步去除杂质，提高目标物质的纯度和鉴定其性质 。
常用的纯化方法有超滤、结晶和电泳等。鉴定方法包括光谱分析、质谱分 析和免疫分析等。
纯化与鉴定的效果取决于目标物质的性质、纯化和鉴定方法的选择以及实 验条件，需根据实际情况进行调整。
离心法
离心法
利用不同物质在离心力场中的沉降速度不同 ，将悬浮液中的物质进行分离的方法。
速率区带离心法
利用不同颗粒在离心力场中的运动轨迹不同 ，将颗粒按大小和密度进行分离。
差速离心法
通过逐渐增加离心力，将不同大小的颗粒分 离开。
密度梯度离心法
在离心管中加入密度梯度介质，使不同密度 的颗粒在离心力场中分离。
实验效率的提高
提高实验效率是生物分离与纯化的关 键，可以缩短实验时间并降低成本。
优化实验流程，如减少样品处理时间 、提高自动化程度等，也可以提高实 验效率。
选择高效的分离方法，如高效液相色 谱、快速色谱等，可以显著提高实验 效率。
06
生物分离与纯化的未来发展
新技术的应用
1 2
人工智能与机器学习
初步分离的目的是将破碎后的细胞混合物分离成 各个组分，如蛋白质、核酸和脂质等。
常用的初步分离方法有离心分离、过滤分离和沉 淀分离等。
初步分离的效果取决于分离方法和分离条件的选 择，需根据实际情况进行调整。
精细分离
精细分离的目的是从初步分离后 的组分中进一步分离出目标物质
，如蛋白质、酶和核酸等。
常用的精细分离方法有亲和色谱 、离子交换色谱、凝胶色谱和排
电泳法
生物分离与纯化技术
生物分离与纯化技术生物纯化篇一：生物分离与纯化技术期末材料一．填空题1.生物分离与纯化的一般工艺过程：原料的选取与预处理，分离提取，精制和成品制作2.预处理的目的：1.改变发酵液（培养液）的物理性质，以利于固液分离。
方法：加热，凝聚和絮凝2.去除发酵液（培养液）中的部分杂质以利于后续各步操作微滤的操作模式：常规过滤，错流过滤3.液膜的组成：膜溶剂（水和有机溶剂），表面活性剂，流动载体和膜增强剂4.液膜的分类：乳状液膜（流动载体液膜和非流动载体液膜），支撑液膜5.液膜分离的操作过程：制备液膜，液膜萃取，澄清分离，破乳6.常见的膜分离过程：a渗析b电渗析c微滤d超滤e反渗透f 纳滤g气体分离7.过饱和溶液制备的四种方法：饱和溶液冷却，部分溶剂蒸发，化学反应结晶法，解析法8.离子交换树脂的命名：第一位数字代表产品的分类，第二位代表骨架，第三位代表数字为顺序号9.双水相萃取的工艺流程：目的产物的萃取，PEG的循环，无机盐的循环二．名词解释1.超临界流体萃取：是一种新型的萃取分离技术，是利用超临界流体作为萃取剂，对物质进行溶解的和分离的过程。
2.交联度和交换容量的定义：1.表示离子交换树脂中交换剂的容量，如聚苯乙烯型树脂，交联度以二乙烯苯在树脂母体总质量中所占百分数表示2.是每克干燥的离子交换树脂或每毫升完全溶胀的离子交换树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数，是表示树脂离子交换能力的主要参数，实际上是表示树脂活性基团的数量多少的参数。
3.浓缩：低溶度溶液通过除去溶剂变为高溶度溶液的过程干燥：从湿的固体生化药物中除去水分或溶剂而获得相对或绝对干燥制品的工艺过程。
4.盐析：是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。
5.有机溶剂沉淀法：利用与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮等)能使蛋白质在水中的溶解度显著降低而沉淀的方法6.色谱法：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物的中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中7.中毒：由于活性炭是一种强吸附剂，对气体吸附能力很大，气体分子占据了活性炭的吸附表面，会造成活性炭中毒8.大网格聚合物吸附剂：又名大孔吸附树脂，是一种有机高聚物，具有与大网格离子交换树脂相同的大网格骨架，一般为白色球形颗粒。
生物学中的分离和纯化技术
生物学中的分离和纯化技术生物学是一门十分综合的学科，它囊括了生物在不同细胞和组织层次的多种结构和功能。
要研究具体的生物物质，必须进行分离和纯化，这是生物学研究中不可或缺的技术。
本文将对分离和纯化技术在生物学中的应用进行介绍和探讨。
一、离心分离技术离心分离技术是一种基于不同颗粒物质重量或密度差异的分离技术。
这种技术通常用于分离细胞和组织等样本中的细胞器、膜组分和其他分子。
例如，离心分离可以分离细胞中的线粒体、叶绿体和内质网等细胞器。
这种技术的原理是将细胞样本在离心机中离心，通过重力分离使得不同颗粒物质在不同的区域沉淀，从而实现分离。
二、电泳技术电泳技术是一种基于分子电荷和大小差异的分离技术。
这种技术通常用于分离和鉴定蛋白质和核酸等生物大分子。
例如，聚丙烯酰胺凝胶电泳可以将蛋白质按照分子大小和电荷进行分离。
这种技术的原理是将样本经过电泳，电荷带正的物质向负极移动，电荷带负的物质向正极移动，从而实现分离。
三、层析技术层析技术是一种基于分子相互作用的分离技术。
这种技术通常用于分离和纯化蛋白质、核酸等生物分子。
例如，离子交换层析可以将带电荷的分子与带相反电荷的分离柱上的离子进行竞争结合，从而实现分离。
这种技术的原理是将样品通过某些介质（如凝胶、树脂、硅胶等）让目标分子和其他分子之间相互作用，利用吸附性、离子交换、大小排异等原理进行分离和纯化。
四、亲和层析技术亲和层析技术是一种基于生物分子间特异性结合作用的分离技术。
这种技术通常用于分离和纯化某些具有特殊亲和力的生物分子，如酶、抗体、蛋白质、DNA等。
例如，亲和层析可以利用对应亲和物质如互补的DNA序列、配体、抗体来捕获目标分子。
这种技术的原理是利用生物分子之间特定的化学反应结合，在某些介质上捕获目标分子，从而实现分离和纯化。
五、过滤技术过滤技术是一种基于分子大小的分离技术。
这种技术通常用于分离和纯化蛋白质和其他生物分子。
例如，凝胶过滤可以根据分子大小筛选分子，大分子无法进入凝胶孔径而被过滤，从而实现分离。
生物产品分离纯化技术
生物产品分离纯化技术生物产品分离纯化技术是一种将混合物中的目标分子分离出来并纯化的技术。
这种技术在生物制药、食品工业、环境保护等领域都有广泛的应用。
本文将介绍生物产品分离纯化技术的原理、方法和应用。
生物产品分离纯化技术的原理是利用目标分子与其他分子之间的物理和化学性质的差异，通过一系列的分离步骤将目标分子从混合物中分离出来并纯化。
这些物理和化学性质包括分子大小、电荷、亲疏水性、亲和力等。
二、生物产品分离纯化技术的方法1. 色谱技术色谱技术是一种将混合物中的分子分离出来的方法。
它基于分子在固定相和移动相之间的相互作用，通过不同的分离步骤将目标分子从混合物中分离出来。
常用的色谱技术包括凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱、逆相色谱等。
2. 膜分离技术膜分离技术是一种利用半透膜将混合物中的分子分离出来的方法。
它基于分子在半透膜上的渗透性和选择性，通过不同的分离步骤将目标分子从混合物中分离出来。
常用的膜分离技术包括超滤、逆渗透、气体分离等。
3. 溶液结晶技术溶液结晶技术是一种将混合物中的分子分离出来的方法。
它基于分子在溶液中的溶解度和结晶性，通过不同的分离步骤将目标分子从混合物中分离出来。
常用的溶液结晶技术包括晶体生长、冷冻结晶、溶剂结晶等。
三、生物产品分离纯化技术的应用1. 生物制药生物制药是利用生物技术生产的药物。
生物产品分离纯化技术在生物制药中有广泛的应用。
例如，将重组蛋白从细胞培养物中分离出来并纯化，以制备生物制药。
2. 食品工业食品工业是利用生物技术生产的食品。
生物产品分离纯化技术在食品工业中有广泛的应用。
例如，将食品中的营养成分分离出来并纯化，以制备营养补充剂。
3. 环境保护环境保护是保护环境和生态系统的一种行动。
生物产品分离纯化技术在环境保护中有广泛的应用。
例如，将废水中的有害物质分离出来并纯化，以净化水质。
四、结论生物产品分离纯化技术是一种将混合物中的目标分子分离出来并纯化的技术。
它基于分子在固定相和移动相之间的相互作用，通过一系列的分离步骤将目标分子从混合物中分离出来并纯化。
生物分离和纯化技术的发展和应用
生物分离和纯化技术的发展和应用生物分离和纯化技术是生物制药过程中的关键步骤之一，随着现代化学、生物学和工程学等学科的快速发展，生物分离和纯化技术已经经历了多次重大突破，成为了生物制药领域不可或缺的重要技术手段之一。
本文将从技术基础、技术发展和应用三个方面阐述生物分离和纯化技术的发展和应用。
一、技术基础生物分离和纯化技术是一种将微生物、细胞、酶、蛋白质、核酸等生物大分子化合物从复杂矩阵中分离出来，以纯化、提纯和备份为目的的技术方法。
该技术基于生物大分子的理化性质，如电荷、氢键、亲疏水性、流动性等物理化学特性，通过化学改性、生物亲和层析、离子交换、凝胶层析、逆向相色谱、丙烯酰胺凝胶电泳、毒性吸附、超滤等方法进行纯化和分离，从而达到纯化和提高生物制品的质量和效价的目的。
二、技术发展1.化学改性技术化学改性技术是最古老的生物分离和纯化技术之一,它将某种物质与分离富集的生物大分子化合物发生共价键结合,以此来调节、改变或者增强生物大分子化合物的理化性质,从而实现生物制品的纯化目的。
其代表性技术是PEG化技术。
2.离子交换技术离子交换技术是生物分离和纯化技术中较为常见的一种方法。
通过对分离富集的生物大分子进行离子交换作用，在特定的离子强度和pH值条件下，通过电荷吸引和排斥的作用进行分离纯化。
其代表性技术是离子交换层析。
3.逆向相色谱技术逆向相色谱技术是以蛋白质的疏水性为基础，利用其与固定在贝壳藻酸钠或硅胶上的逆向相色谱质料表面的疏水相互作用，实现蛋白质的富集和分离纯化。
逆相色谱技术通常用于富集极性较弱或者不带电的生物大分子物质，具有处理量大、成本低的优点。
4.凝胶层析技术在凝胶层析技术中，通过将生物大分子物质流入凝胶薄片的孔道内形成的细小空腔内，发挥分子筛和作用的特点，实现物质的富集和分离纯化。
凝胶层析技术通常用于分离富集分子量较大的生物大分子物质，如蛋白质、核酸等。
5.毒性吸附技术毒性吸附技术是一种通过化学反应将生物大分子物质表面的毒性物质与处理物质表面的特殊基团化合，实现对生物大分子物质的富集、分离、纯化和去毒的技术方法。
生物发酵工程中分离和纯化的技术
生物发酵工程中分离和纯化的技术生物发酵工程是指利用微生物、细胞及其代谢产物进行某些化学过程的工程学科。
在生物发酵工程中，分离和纯化技术是至关重要的步骤，通过这些技术可以分离出所需的微生物、细胞或产物，并对其进行纯化和结构分析，以实现其在工业上的广泛应用。
一、分离技术生物发酵过程中，细胞或微生物的生长和代谢过程会产生大量的代谢产物，其中包括目标产物和非目标产物。
在分离技术中，目标产物的选择和富集是至关重要的。
常用的分离技术包括离心、过滤、超滤和萃取等。
离心是利用离心力将混合物中不同密度的组分分开的一种分离技术。
在生物发酵工程中，利用离心技术可以将微生物和细胞分离出来，以进行后续的培养和富集。
此外，离心技术还可以用于大分子物质的分离和纯化，如蛋白质、DNA等。
过滤是将混合物通过不同的过滤器进行分离的一种分离技术。
根据过滤器的孔径大小不同，可以将不同大小的分子筛选出来。
在生物发酵工程中，利用过滤技术可以将微生物和其代谢产物从培养基中分离出来，达到富集目的。
超滤是利用膜过滤的方式进行分离的一种技术。
在超滤过程中，通过选择合适的膜孔径和压力，可以将不同分子量的目标产物分离出来，并进行纯化。
超滤技术在生物发酵工程中的应用非常广泛，可以富集蛋白质、酶、激素等大分子物质。
萃取是利用溶剂的不同亲水性或亲油性，将混合物中的目标组分分离出来的一种技术。
在生物发酵工程中，萃取技术可以用于分离微生物培养液中的小分子化合物和产物。
二、纯化技术在生物发酵工程中，分离是实现目标产物富集的重要手段，但是分离出来的产物并不一定是纯品。
通过纯化技术，可以将目标产物从杂质中进一步纯化和提纯，以达到最终的纯度要求。
常用的纯化技术包括电泳、层析、析出和结晶等。
电泳是将混合物中的分子在电场的作用下按照大小和电性进行分离的一种技术。
在生物发酵工程中，电泳技术可以用于蛋白质、核酸和酶等大分子物质的纯化。
层析是利用分离材料将混合物中的组分分离的一种技术。
生物分子的分离和纯化技术
生物分子的分离和纯化技术生物分子的分离和纯化是生命科学研究中不可或缺的一环，也是许多生物医学应用和生产工艺的核心。
分子的分离和纯化技术包括多种方法，其基本原理是利用不同的物理和化学性质，将混合系统中的各个分子分离开来。
生物分子的分离和纯化技术通常是从含有目标分子的组织或细胞裂解液中开始的。
通常，该液体首先要通过离心等手段除去细胞碎片、核酸、脂质和其他杂质。
接下来，可以利用不同的分离和纯化技术分离和纯化目标分子。
下面将介绍几种通用的分子分离和纯化技术。
1.凝胶过滤chromatography凝胶过滤chromatography是一种分子分离技术，通常用于分离分子量不同时的生物大分子。
凝胶过滤chromatography基于分子体积的大小，通过孔径大小选择分子的峰值通过孔径大小选择分子的峰值。
较大分子通常沿着填充体的较周折的路径流过，而较小分子则会进入较细的分子而停留在其中。
由于这种技术可以清除大小不同的杂质，使样品更纯净并且不受影响。
它也可以用于分离游离的生物大分子，例如酶和蛋白质。
2.离子交换chromatography离子交换chromatography是一种电静力分离技术，通常用于分离带有相反电荷的生物大分子。
离子交换chromatography基于非共享原子、阴离子和阳离子之间的吸引力或排斥引力原理。
通过这种方式，样品中的阴离子分子可以被吸附到阳离子交换树脂中，而阳离子分子可以被吸附到阴离子交换树脂中。
这种技术通常用于纯化蛋白质和其他biomolecules3.氢氧化铝亲和chromatography氢氧化铝亲和chromatography是一种结合亲和原理的分离和纯化技术。
它是基于分子间的较强吸附相互作用，通常用于分离含有电中性、疏水基团或氢氧基团的蛋白质。
它列为具有很小结合物的可逆性和如外部pH和ionic强度等变量的影响，它是一种比较简单的结合方法。
4.亲和chromatographyС在纯化生物大分子中最常用的方法之一是使用亲和chromatography。
生物分离与纯化技术
成品加工 （浓缩、无菌过滤、干燥、成型）
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五、分离纯化方法选择的原则
检测纯化过程中产物产量和活性
n技术路线、工艺流程尽 量简单化；
做好准备工作；
尽可能采用低成本的 材料与设备；
采用成熟技术和可靠设备； 注意时效性；
将完整工艺流程划分为 不同的工序；
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1.分离纯化的准备工作
(1)软件材料的准备
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一、生物物质及来源
核酸及动物制剂 菌体制剂
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§氨基酸及其衍生物类 §活性多肽类 §蛋白质类 §酶类
§糖类 §脂质
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2.生物物质来源：
动物脏器；
血液、分泌物 和其他代谢产 物
海洋生物：主要是 海藻动物、鱼类、 软体动物等
植物：生化成 分众多
微生物： 主要有细 菌、放线 菌、真菌 和酵母菌
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2.原材料的选择
(1)来源
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(2)与目标产物含量相关的因素
①合适的生物品种 ②合适的组织器官 ③生物材料的种属特异性 ④合适的生长发育阶段 ⑤合适的生理状态
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3.天然生物材料的采后处理
处理原因：
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六、成品的保存
温度 水分
空气
保存期
影响 因素
pH
光线
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①低温下保存 ②制成干粉或结晶保存
浓缩过程也是一个分离过程，是溶剂与溶质 的相互分离，不同溶质并不相互分离，它们 在溶液中的相对含量(摩尔分数)不变。
富集涉及目标溶质与其他溶质的分离。富集 往往伴随着浓缩，因为以富集为目的的浓缩 往往使溶液体积减少。
4
纯化（purification）
纯化是通过分离操作使目标产物纯度提高的 过程，是进一步从目标产物中除去杂质的过 程。
生物大分子的分离和纯化技术
生物大分子的分离和纯化技术生物大分子是指具有较大分子量的生物分子，如蛋白质、核酸、多糖等。
要研究这些生物大分子的结构和功能，需要对它们进行分离和纯化。
生物大分子的分离和纯化技术是生物学和生物工程学中的重要内容，它们的发展和应用使得我们能够更深入地了解生命的奥秘，同时也推动了医药、农业、工业等领域的发展。
生物大分子的分离和纯化需要经过多个步骤，这些步骤通常包括细胞破碎、分子分离、分子鉴定等。
其中，分子分离是最基本、最关键的步骤之一，它可以使得目标分子从复杂混合物中被分离出来，并得到相对纯度较高的产物。
目前，生物大分子的分离和纯化技术包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析、尺寸排除层析、逆向相色谱层析和高效液相色谱层析等方法。
凝胶过滤层析是一种基于分子尺寸差异的分离方法。
在这种方法中，样品被加入到一列凝胶柱中，较大的分子无法穿过凝胶孔隙，而较小的分子则可以顺着凝胶孔隙通过。
因此，随着溶液通过凝胶柱，不同大小的分子会被分离出来。
这种方法适用于大小分子差异较大的生物大分子的分离。
离子交换层析是基于分子电荷的分离方法。
在这种方法中，一种带有正电荷或负电荷的树脂被用来吸附目标分子，通过控制溶液的pH和离子强度等参数，可以使得目标分子从树脂上逐渐被洗下来。
这种方法适用于分子之间的电荷差异较大的生物大分子的分离，如蛋白质。
亲和层析是一种基于分子亲和性的分离方法。
在这种方法中，一种特殊的树脂被用来吸附具有特定结构或性质的目标分子。
例如，可以将某种亲合剂固定在树脂上，然后用于吸附与该亲合剂有特异结合关系的目标分子。
这种方法适用于具有高度特异性活性的生物大分子的纯化。
尺寸排除层析是一种基于分子形状的分离方法。
在这种方法中，一种具有多孔性的材料被用来吸附目标分子，具有大分子尺寸和形状的目标分子沿着孔隙穿过，而具有小分子尺寸的分子则通过孔隙空隙。
这种方法常用于分离蛋白质和糖类等生物大分子。
逆向相色谱层析是一种基于亲水性的分离方法。
生物与天然产物分离与纯化技术
生物与天然产物分离与纯化技术随着科技的不断发展，生物与天然产物的研究越来越受到重视。
生物与天然产物的分离与纯化技术成为了解这些复杂化合物的关键步骤。
本文将介绍几种常用的生物与天然产物分离与纯化技术。
一、固相萃取技术固相萃取技术是生物与天然产物分离纯化中常用的一种技术。
它基于化合物在固定相（例如吸附剂）和流动相（如溶剂）之间的分配行为。
该技术可以有效地分离和富集目标化合物，并且操作简单、灵敏度高。
固相萃取包括前处理、样品加载、洗脱和干燥等步骤。
在前处理阶段，样品可能需要经过处理、提取或预处理来去除干扰物。
然后，样品被加载到固体相中，固体相能够选择性吸附目标化合物。
接下来，通过洗脱，将目标化合物从固体相中解吸出来。
最后，干燥样品以得到纯净的目标化合物。
二、柱层析技术柱层析技术是一种常用的生物与天然产物分离与纯化技术。
该技术基于化合物在由吸附剂充填的柱层析介质中的分配行为。
具体而言，样品通过柱层析柱，不同成分根据亲和性的不同在柱层析介质中发生相互作用，从而实现分离。
在柱层析过程中，需要选择合适的吸附剂和溶剂以实现目标化合物的分离。
常见的柱层析介质包括硅胶、凝胶和纤维素等。
根据柱层析的原理，可以进一步分为吸附层析、分配层析和离子交换层析等不同类型。
三、液相色谱技术液相色谱技术是生物与天然产物分离与纯化中广泛使用的一种技术。
它基于化合物在固定相（通常是固体颗粒）和流动相（液体）之间的分配行为。
液相色谱技术通过改变流动相的组成或性质来实现对目标化合物的选择性保留和分离。
常见的液相色谱技术包括高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）和超高效液相色谱（UPLC）等。
这些技术在分离与纯化天然产物、生物大分子和药物等方面具有广泛的应用。
四、电泳技术电泳技术也是生物与天然产物分离与纯化中常用的一种技术。
电泳技术基于化合物在电场作用下的迁移速度差异来实现分离。
根据迁移介质的不同，电泳技术可以分为凝胶电泳、毛细管电泳和等离子体电泳等多种类型。
生物分离与纯化技术-绪论（邱玉华版）
⽣物分离与纯化技术-绪论（邱⽟华版）第⼀章绪论第⼀节⽣物分离纯化的概念与原理学习⽬标熟悉⽣物物质的概念、种类和来源；了解分离纯化技术并掌握其基本原理。
突飞猛进，⽇益成熟的现代⽣物技术，正在成为推动世界新技术⾰命的重要⼒量，其产业化发展必将对⼈类社会的经济发展和⽣活⽅式产⽣越来越⼤的影响。
⽣物技术产业主要制备具有⽣活活性的⽣物物质并使其商品化，利⽤专门的设备和技术将⽣物物质从⽣物原料中分离纯化出来并保持其活性，其中以复杂、周期长、影响因素多。
分离纯化技术是现代⽣物技术产业下游⼯艺过程的核⼼，是决定产品的安全、效⼒、收率和成本的技术基础，在⽣物技术产业中起着重要的作⽤。
⼀、⽣物物质及其来源1.⽣物物质“⽣物物质”这个词汇是在20世纪末随着⽣物技术的发展逐渐出现的，它指的是来源于⽣物中天然的或利⽤现代⽣物⼯程技术以⽣物为载体合成的，从氨基酸、多肽等低分⼦化合物到病毒、微⽣物活体制剂等具有复杂结构和成分的⼀类物质。
它们存在于⽣物体内直接参与⽣物机体新陈代谢过程，并能与⽣物各种机能产⽣⽣物活化效应，因此也称为⽣物活性物质，⽽在产业中的⽣物物质的制成品被称为⽣物产品。
⽣物物质的种类繁多，分布⼴。
按照其化学本质和特性分类，常见的有如下⼀些类型。
（1）氨基酸及其衍⽣物类主要包括天然氨基酸及其衍⽣物，这是⼀类结构简单、分⼦量⼩、易制备的⽣物物质，约有60多种。
⽬前主要⽣产的品种有⾕氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、精氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和⾊氨酸等，其中⾕氨酸的产量最⼤，约占氨基酸总量的80%左右。
（2）活性多肽类活性多肽是由多种氨基酸按⼀定顺序连接起来的多肽链化合物，分⼦量⼀般较⼩，多数⽆特定空间构像。
多肽在⽣物体内浓度很低，但活性很强，对机体⽣理功能的调节起着⾮常重要的作⽤，主要有多肽类激素，⽬前应⽤于临床的多肽药物已达20多种以上。
（3）蛋⽩质类这类⽣物物质主要由简单蛋⽩和结合蛋⽩（包括糖蛋⽩、脂蛋⽩、⾊蛋⽩等）。
微生物制药中的微生物学研究方法与技术
微生物制药中的微生物学研究方法与技术微生物制药是指利用微生物（如细菌、真菌、病毒等）进行生产、加工或改造药物和生物医学制品的一种生物技术。
微生物学研究方法和技术在微生物制药中起着至关重要的作用，本文将就微生物制药中常用的微生物学研究方法和技术进行简要介绍。
一、微生物分离与纯化技术微生物分离与纯化技术是微生物学研究的基础和重要环节，用于分离和纯化目标微生物，以获取纯种菌株，进而进行后续的实验与生产操作。
常用的微生物分离与纯化技术包括:1. 常规分离：通过适当的培养基和培养条件，将微生物样品进行分离培养。
分离出来的单个菌落经过纯化培养，得到纯种菌株。
2. 筛选培养：根据微生物的形态、生理生化特性和产物特点进行筛选培养。
通过观察菌落形态和色素反应等特征，筛选出产生目标产物的菌株。
3. 选择培养：利用特殊培养基和条件选择目标菌株的生存或生长，而抑制其他微生物的生长。
例如，针对快速生长菌影响慢生长菌的情况，可以选择添加抗生素或厌氧条件下培养。
二、微生物鉴定与分类技术微生物的鉴定与分类是了解微生物的分类学信息和特征，以及进行微生物有效分类与命名的手段，常见的鉴定与分类技术包括：1. 形态学鉴定：通过对微生物形态特征的观察与描述，如菌落形态、细胞形态、芽胞和拟芽胞形成等，可以对微生物进行初步鉴定。
2. 生理生化鉴定：通过对微生物生理生化代谢特征的分析和检测，如生长温度、碳源利用能力、氧需求、产酶活性等，可以进一步确定微生物的种属。
3. 分子生物学鉴定：通过分析微生物基因（如16S rRNA基因）的序列信息，与已知的微生物数据库进行比对，可以快速而准确地鉴定微生物的种属和亚种。
三、微生物培养与发酵技术微生物培养与发酵技术是将微生物应用于生产和制备药物的关键步骤，包括菌种的预处理、培养基的选择、培养条件的优化等。
常用的微生物培养与发酵技术包括：1. 培养基优化：确定适宜的培养基成分和培养条件，以满足微生物生长和产物积累的需求。
生物分离和纯化技术在药物研发中的应用
生物分离和纯化技术在药物研发中的应用生物分离和纯化技术是一种被广泛应用于药物研发领域的技术，其作用是将从生物体中分离出的药物分子进行纯化和精确分离，以便于研究和应用。
在研发新的医药品时，这些技术的作用非常重要，因为药物分子的性质往往非常复杂，可能存在大量的杂质和不同分子。
本文将探讨生物分离和纯化技术的应用，并研究这些技术在药物研发中的作用。
一、生物分离和纯化技术的基本概念1. 生物分离的原则生物分离指的是从混合物中将生物分子分离出来的过程，其原则是根据生物分子之间的差异性，利用物理、化学等方法，将属于不同化合物的生物分子分离出来。
通常应用的方法有重力沉降、离心、渗透、电泳和色层分离等。
2. 纯化的原则生物分离的目的是为了得到纯净的生物分子，而生物分子的纯化主要应用了逐渐缩小筛选窗口的原则。
最初通过复杂的生物样品分离获得的分子是杂质和大量的非特异性物质，这时分离的关键是多次处理，消除这些杂质，直到得到高度纯净的药物活性分子。
二、生物分离和纯化技术在药物研发中的应用生物分离和纯化技术在药物研发中大量应用。
下面分别介绍这些技术在药物研发各个阶段中的应用。
1. 早期药物发现早期药物发现通常涉及大量的小分子化合物或化合物，这些分子化合物又被称为药物“候选体”。
在这个阶段，药物研发人员需要对候选体进行定量分析，以确定其分子量、对目标受体的亲和力、药物代谢和毒性等性质。
生物分离和纯化技术在这个阶段的主要应用是：使用高效液相色谱、质谱、核磁共振等技术进行组合，在原始混合物中分离和纯化药物分子，以确定其化学结构和需要绑定的目标。
2. 临床前研究在进入临床前的研究阶段后，药物研发人员需要对分离和纯化出的药物分子进行一系列的测试，以确定它们的药理学、毒理学、代谢学和药代动力学特性。
在这个阶段，生物分离和纯化技术的主要应用包括：高速液相色谱（HPLC）技术可以分离一种药物分子在溶液中的不同组分，从而检测药物分子是否需要进行纯化，在获得的样品中确定其纯度；电泳技术可以检测来自细胞的药物样品的杂质，并裂解成具有两栖生物学特性的清晰带。
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填空1、色谱分离的基本特点：分离效率高、应用范围广、选择性强、设备简单，操作方便。
2、高效液相色谱的特点：高压、高速、高灵敏度、高效、适用范围广。
3、膜分离技术的优点：a易于操作。
b成本低，寿命长。
c高效，特别是对于热敏性的物质的处理具有其他分离过程无法比拟的优越性。
d 常温下操作无相态变化，分离精度高，没有二次污染。
P1684、七种常见的膜分离过程：渗析（DS），电渗析(ED)，微滤（MF），超滤（OF），反渗透（RO），纳滤（NF），气体分离（GS）。
5、微滤的分离机理：a 表面层截留。
b 膜内部截留。
6、液膜的组成：膜溶剂（水和有机溶剂），表面活性剂，流动载体和膜增强剂。
7、液膜的分类：液膜按其构型和操作方式的不同可以分为乳状液膜和支撑液膜。
8、乳状液膜分类：根据是否含有载体可以分为流动载体液膜和非流动载体液膜。
9、液膜分离的操作过程：a 制备液膜。
b 液膜萃取。
c 澄清分离。
d 破乳。
10、预处理的目的：1）改变发酵液的物理性质2）取出发酵液中的部分杂质以利于后续各步操作。
11、杂志的去除方法：1）等电沉淀法：蛋白质等电时溶解度最小，能沉淀出去2)变性沉淀：使蛋白质从有规则的排列变成溶解度较小的无规则的排列而沉淀3吸附：利用吸附作用能经常有效的去除蛋白质杂质。
12、双水相萃取的工艺流程：主要三部分1）目的产物的萃取2）PEG的循环3）无机盐的循环。
13、过饱和溶液的制备一般有四种方法：饱和溶液冷却、部分溶剂蒸发、化学反应结晶法、解析法。
P7214、吸附的类型：物理吸附、化学吸附、交换吸附。
P83名词解释1、离子交换树脂的命名：有三位阿拉伯数字组成，第一位数字代表产品的分类；第二位数字代表骨架；第三位数字微顺序号。
2、交联度：离子交换树脂中交联剂的含量。
3、交换容量：每克干燥剂的离子交换树脂或每毫升完全溶胀的离子交换树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数。
4、色谱分离：一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在流动相和固定相中。
5、正相色谱法：流动相极性小于固定相的分配色谱法。
6、反相色谱法：流动相极性大于固定相的分配色谱法。
7、浓缩：是低浓度溶液通过除去溶剂（包括水）变为高浓度溶液的过程。
8、干燥：是从湿的固体生化药物中除去水分或溶剂而获得相对或绝对干燥制品的工艺过程。
9、差速离心法：采用逐渐增加离心速度或交替使用低速和高速进行离心，用不同强的的离心力是不同质量的目的产物分级分离的方法。
10、速率带离心法：在离心前于离心管内装入密度梯度介质，待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度液的中间，同梯度液一起离心。
11、超临界流体：:处于临界温度和临街压力以上的非凝缩性的高密度流体。
处于超临界状态时，气液两相非常接近，无法分别，成为超临界流体。
12、盐析：在高浓度中性盐存在的情况下，蛋白质（或酶）等生物大分子在水溶液中的溶解度降低并沉淀析出的现象叫做盐析。
13、活性炭“中毒”：由于活性炭是一种强吸附剂，对气体的吸附能力很大，气体分子占据了活性炭的吸附表面，会造成活性炭中毒，使其活力降低，因此使用前可加热烘干，以除去大部分气体。
P8414、大网格聚合物吸附剂：又称大孔吸附树脂，是一种有机高聚物，具有与大网格离子交换树脂相同的大网格骨架（由于在聚合时加入了一些不能参加反应的致孔剂，聚合结束后又将其除去，因而留下永久性孔隙，形成大网格结构），一般为白色球形颗粒。
简答1、离子交换树脂的构成是什么？答：1）惰性、不溶的具有三维空间立体结构的网络骨架，称为载体或骨架；2）与载体连成一体的、不能移动的活性基团，又称功能基团；3）与功能基团带相反电荷的可移动的活性离子，又称平衡离子或可交换离子。
2、离子交换树脂的分类是什么？答：1）按树脂骨架的主要成分分：1’聚苯乙烯性树脂2’聚苯烯酸型树脂3’多乙烯多胺-环氧氯苯烷树脂4’酚-醛树脂2）按骨架的物理结构来分：1’凝胶型树脂2’大网格树脂3’均孔树脂3、微滤的操作模式是什么？答：1’常规过滤（静态过滤或死端过滤）：原料液置于膜的上游，在压差的推动下，溶剂和小于膜孔的颗粒透过膜，大于膜孔的颗粒则被膜截留，该压差可通过上游加压或下游侧抽真空产生。
但是，常规过滤操作只能是间歇的，必须周期性的停下来清除膜表面的污染层或更换膜。
常规过滤操作简便易行，对于固体含量低于0.1%的料液常采用常规过滤；对于固体含量在0.1%~0.5%的料液则需要进行预处理或采用错流过滤；对于固体含量高于0.5%的料液则采用错流过滤操作。
2’错流过滤（动态过滤）：微滤的错流过滤操作类似于超滤和反渗透，原料液以切线方向流过膜表面。
溶剂和小于膜孔的颗粒，在压力的作用下透过膜，大于膜孔的颗粒则被膜截留而停留在膜表面形成一层污染层。
与常规过滤不同的是，料液流经膜表面产生的高剪切力可使沉积在膜表面的颗粒扩散返回主体流，从而被带出微滤组件，使污染层不能无限增厚。
当处理量大时，为避免膜被堵塞，宜采用错流操作。
P1764、生物分离与纯化技术的特点是什么？答：1）、目的产物浓度低，纯化难度大2）、活性物质性质不稳定，操作过程容易失活3）、生物材料中的生化组分数量大，分离困难4)、生物材料容易变质，保存困难5）、目标产品质量标准高1）、目的产物浓度低，纯化难度大：原料液中的目的产物浓度一般比较低，有的甚至极其微量，但杂质含量相对较高，这样就有必要对原料液进行高度浓缩2）、活性物质性质不稳定，操作过程容易失活：生物物质的生理活性大多是在生物体内的温和条件下维持并发挥作用的，目的产物大多数对热酸碱ph的变化比较敏感，容易失活，外部条件的不稳定和急剧变化容易引起生物活性的降低或丧失3）、生物材料中的生化组分数量大，分离困难：目的产物与杂志的理化性质相接近，所以比较困难4)、生物材料容易变质，保存困难：生物材料容易腐败，染菌、被微生物的活动所分解或被酶所破坏甚至日光，金属器械等都会是目的产物活性受到影响5）、目标产品质量标准高：生物产品一般用作医疗、食品和化妆，与人的生命息息相关5、生物分离与纯化的一般工艺过程是什么？答：1）原料的选取和预处理：选取来源丰富的材料，尽量一物多用，综合利用。
原料的预处理主要用过滤、离心等固液分离技术2）分离提取：利用产物的溶解性将产物与细胞的固形成分或其他成分分离使其转入液相或细胞内的生理状态转入特定溶液环境的过程3）精制：取出与目的产物的物理化学性质比较接近的杂质4）成品制作：根据产品的最终用途把产品加工成一定的形式。
6、生物分离与纯化技术的发展前景是什么？答：1）研究和开发新型和经济高效的分离纯化技术：新型分离介质的研制、脱分离的推广和应用、提高分离过程的选择性、强化生物分离过程的研究2）、生物工程上游技术与下游技术的结合：上游的工艺设计为下游的分离纯化创造条件。
生物分离与纯化技术在基因工程、酶工程、细胞工程，发酵工程和蛋白质技术方面的应用日益广泛。
7、制备性超离心与分析性超离心的定义及区别是什么？答：1）制备性超离心：主要目的是最大限度的从样品中分离高纯度目标组分进行深入的生化研究。
常有：差速离心法、速率区带离心法、等密度离心法。
2）主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构，而不知专门收集某一特定组分。
因此它使用了特殊的转子和手段，以便连续监视物质在一个离心场中的沉降过程。
8、萃取剂的选择依据是什么？答：1）萃取剂分子至少具有一个萃取功能基，通过它与被萃取物形成萃合物。
常见萃取功能基有O P N S等原子。
2）萃取剂分子中必须有相当长的链烃或芳烃，其目的是使萃取剂及萃合物容易溶于有机溶剂而难溶于水相。
萃取剂的链越长，油溶性增大容易与被萃取物形成难溶于水而易溶于有机溶剂的聚合物。
如果碳链过长，碳原子数过多，相对分子质量太大，不易做萃取剂因为它们粘度太大或可能是晶体，使用不便，萃取容量低。
工业上的萃取剂还要满足：选择性好、萃取容量大化学和辐射稳定性好、容易与原料溶液分层、易于反萃取或操作安全、经济性好、环境友好等。
9、超临界萃取的特点是什么？答：1）萃取和分离合二为一：当饱和溶解物的二氧化碳超临界流体经过分离器时，由于压力下降是二氧化碳与萃取物迅速形成两相而立即分离，不存在物料的相变过程，所以不需回收溶剂，效率高。
2）压力和温度都可以成为调节萃取过程的参数：临界点附近，温度和压力的微小变化都会影响二氧化碳的密度显著变化，从而引起待萃物的溶解度发生变化，通过可控制温度和压力的方法达到萃取目的；3）、萃取温度低：二氧化碳的临界温度是31.265度，临界压力为7.18MPa可有效地防止热敏性成分氧化和逸散，完整保留生物活性，可以把高沸点，低挥发度，容易热解的物质在其沸点以下温度萃取出来。
4）二氧化碳液体常态下为气体，无毒5）49超临界流体的极性可改变，：一定温度下，改变压力或加入适宜的夹带剂，可提取不同极性的物质。
10、盐析使蛋白质沉淀的原理是什么？答：A、高浓度的中性盐溶液中存在大量的带电荷的盐离子，它们能中和蛋白质分子的表面电荷，使蛋白质分子间的静电排斥作用减弱甚至消失而能相互靠拢，聚集起来。
B、中性盐的亲水性比蛋白质大，它会抢夺本来与蛋白质结合的自由水，使蛋白质表面的水化层被破坏，导致蛋白质分子之间的互相作用增大而发生凝聚，从而沉淀析出。
P61 11、有机溶剂沉淀的机理是什么？答：A、加入有机溶剂后，会使水溶液的介电常数降低，而使溶质分子（如蛋白质分子）之间的静电引力增加，从而促使它们互相聚集，并沉淀出来B、水溶性有机溶剂的亲水性强，它会抢夺本来与亲水溶质结合的自由水，使其表面的水化层被破坏，导致溶质分子之间的互相作用增大而发生凝聚，从而沉淀析出。
P6512、结晶的一般方法是什么？答：A、盐析法。
盐析法主要用于大分子如蛋白质、酶、多肽等物质的结晶。
盐析结晶法按照加盐的方式不同可分为加固体盐法、加饱和盐溶液的方法、透析法。
B、有机溶剂结晶法。
此法一般常用于一些小分子物质的结晶。
某些蛋白质也可以在稀的有机溶剂中进行结晶，但常保持比较低的温度以防止蛋白质变性。
其中又可以分为直接加有机溶剂结晶的方法和利用挥发性溶剂蒸发结晶方法。
C、等电点结晶法，多用于一些两性物质，D、其他。
主要有温度差法和加入金属离子法等。
P7713、生物分离纯化的应用是什么？答：例如：1）、反胶束萃取技术在分离蛋白质混合物上的应用：在Aliquat336/异辛烷反胶束分离枯草杆菌中两种酶——淀粉酶和中性蛋白酶时，通过加入助表面活性剂丁醇，有效地分离了这两种不同等电点的酶。
2）双水相萃取在分离和提取各种蛋白质(酶)上的应用：用聚乙二醇(PEG)/羟丙基淀粉酶(Reppal PEG)体系经两步法可从黄豆中分离磷酸甘油酸激酶(PGK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)。