实验十 人类染色体G显带技术及G带核型分析
G显带
实验三
人类G显带染色体核型分析
一、实验目的
观察G显带染色体的形态结构，掌握各号染色 体G显带特征。
掌握G显带核型分析方法。
二、实验原理
G显带是指以Giemsa染料染色后，使染色体显 带的技术。Giemsa染料是由噻嗪和曙红组成
的，着色时DNA 先与2个噻嗪分子结合，然后
再与一个曙红分子结合，形成沉淀物，而DNA
的某些部位对染料不敏感，由此形成明暗相
间的条带。
三、实验的方法与步骤
G显带染色体核型分析方法和各号染色体的带型 特点。 对正常人G显带中期染色体相片中每条染色体分 组列号，根据G带特点明确区分各号染色体。 分析核型，写出结论：正常女性46，XX或正常 男性46，XY。
正常人女性G显带核型分析：46，XY
染色体G带制备详细流程及核型分析
染色体G带制备详细流程及核型分析（一）染色体的形态结构体细胞的染色体是46个，23个，其中22对是常染色体。
一对是性染色体。
男性一对XY。
女性为XX。
染色体的形态随着细胞周期的不同而有所改变，在光学显微镜下所看到的染色体是细胞分裂中期染色体（metaphase chromsome）。
每个染色体含有两条染色单体，呈赤道状彼此分离。
只有着丝粒处相连。
根据着丝粒的位置分为三种类型，中部着丝粒型，亚中部着丝粒和端着丝粒型（图21-1）。
图21-1 正常人体细胞的三种染色体1．中部着丝点染色体；2.近中部着丝点染色体；3.近端部着丝点染色体1.非显带染色体特征分为七组A组（1～3）：为最大的具中部着丝粒染色体，这组染色体相互间很易区别。
第1号和第2号染色体大小相似，唯第2号染色体为近中部着丝粒染色体。
第3号染色体较1、2号染色体小，为中部着丝粒染色体。
B组（4～5）：为大的具中部着丝粒染色体。
2对染色体之间在形态和长度上较难区别。
C组（6～12号和X）：为中等大小的具中部或近中部着丝粒染色体。
这组染色体较难区分，其中第6、7、11号和X染色体为中部着丝粒染色体，第8、9、10和12号染色体为近中部着丝粒染色体。
女性为2个X染色体。
男性只有1个X染色体。
D组（13～15号）：为中等大小的具近端着丝粒染色体。
在其短臂上有随体。
与他组染色体有明显区别。
但3对染色体之间较难区别。
E组（16～18号）：为小的具中部或近中部着丝粒染色体。
第16号染色体为中部着丝粒染色体，第17号和18号染色体为近中部着丝粒染色体。
不过，着丝粒位置第18号较第17号染色体更近端部。
F组（19～20号）：为更小的中部着丝粒染色体。
2对染色体之间，形态上很难区别。
G组（21～22号和Y）：为最小的近端着丝粒染色体。
第21号和22号染色体大小相似，且短臂上常连有随体。
Y染色体常比第21和22号染色体大、染色深。
且无随体。
Y染色体长臂2个染色单体比较靠拢，长臂末端也较模糊。
人类显带染色体核型分析
医学遗传学实验报告【实验题目】人类显带染色体核型分析【实验目的】掌握染色体核型分析的常用方法及G分带的带型特征，会初步识别G分带人类染色体。
【实验原理】将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来构成的图像称为该细胞的核型（karyotype），这通常是用显微摄影得到的染色体相片剪贴而成。
在显带技术问世以前，人们主要根据染色体的大小、着丝粒的位置，将人类染色体顺次由1编到22号，并分为7组。
但要想精确、有把握地鉴别每条染色体是比较困难的。
70年代初出现了染色体显带技术，不仅解决了染色体识别困难的问题，而且为深入研究染色体异常及基因定位创造了条件。
将染色体标本用显带方法处理后，再用Giemsa染色，这类技术称为G分带，通过显微摄影，就可得到G带染色体的显微相片。
【实验方法和步骤】（1）胰酶液的配制：称取胰酶0.2g溶于100mlHanks液中，搅拌30min，用1mol/L NaOH调pH值至7.0～7.2，冷冻保存（最好现配现用）。
（2）先将胰酶液水浴加热到37℃。
（3）将染色体标本浸入胰酶液中，作用时间几秒到几十秒不等，依标本存放时间长短而定（标本需预先经60℃～70℃烤2h，或37℃恒温老化5～7d。
若标本太新鲜，则染色体有些毛糙）。
（4）取出玻片标本，在生理盐水中过一下，再用蒸馏水洗。
（5）Giemsa染液染色8min。
（6）自来水洗、晾干。
（7）镜检：选择分散及显带良好的分裂象，在油镜下观察。
如观察到染色体变粗并显得边缘毛糙，有时甚至呈糊状，是处理过度了。
观察细胞的标准：1）细胞完整，轮廓清晰，染色体在同一平面上均匀分布。
2）染色体形态和分散良好，最好无重叠现象，即使染色体个别重叠，也要能明显辨别。
3）所观察的染色体长短大致一样，处于同一有丝分裂时期。
4)在所观察的染色体周围没有多个或单个散在的染色体。
（8）显微摄影，将相片上的染色体逐个剪下，按丹佛和人类染色体遗传学命名的国际机制（ISCN）排列编号。
染色体G显带技术及其原理
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示中期染色体Ga显带结果
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示中期染色a体R显带结果
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示中期染色a 体C显带结果
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示中期染色体N显带结果
a
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实验原理(8)
G显带是最常用的，染色体经胰蛋白酶处 理后，使染色体的蛋白质变性，然后用一种 能结合DNA的化学染料吉姆萨染色，使染色 体呈深浅不同的带型，人类的24种染色体可 显示出各自特异的带纹。
a
DNA核苷酸的组成
9
实验原理(6)
非显带的标本上虽然可以根据染色体的 形态识别1，2，3，16，17和18号，有时还 可以识别Y染色体，但却不能有把握地鉴别其 他大多数染色体。自1970年Caspersson等首 次报道用喹吖因对人体染色体进行染色可在 各号染色体上显现出宽窄和位置不同带纹以 来，细胞遗传学工作者以不同的染色方法为 基础，提出了各种显带方法的名称。
染色体G显带技术 及其原理
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1
染色体G显带核型图
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实验原理 (1)
人们将用各种不同的方法，以及用不同 的染料处理染色体标本后，使每条染色体上 出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为 显带技术（banding technique）。本世纪70 年代以来，显带技术得到了很大发展，且在 众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、 T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。 因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带， 故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在 整个染色体上。
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实验原理(7)
如用芥子喹吖因作为染料,染出的荧光带称为Q 带,其方法称为Q显带法;用Giemsa作为染料,染出的 带称为G带,其方法称为G显带法。同样用Giemsa或 其他荧光染料作为染料，但在其中加上不同的预处 理而获得的与Q带或G带着色强度正好相反的带称为 R带，其方法称为反式显带法（R显带法）；将专一 的显示“结构性异染色质”的方法称为C显带法， 其带称为C带。其它一些显带技术还可以专门显示 染色体的端粒（T显带）和核仁组织区（N带）等。
人类染色体G显带标本制备与核型分析
G显带染色体的主要特征带型
1秃 2蛇 3蝶飘 4均匀 5黑腰 6号小白脸 7似戴帽 8三长两短 9细颈长两条 10三条带型好 11低 12高 X染色体一担挑 13、14、15 四二一、低中高 16 深带连着点17深带跑得远18人小肚子大 19点黑腰 20 头重脚轻 21 似像角 22 戴小帽
G显带染色体的命名
染色体号---臂的符号---区号---带号--亚带---次亚带 如：1q34 5p23.3 14q22.23
三、实验报告
人类染色体G显带染色体照片 核型分析图
3、染色：入37℃预温的Giemsa染液中染色 10min
4、冲洗：用自来水流水冲洗2min，晾干。 5、镜检：显微镜下观察
二、人类染色体G显带照片核型分析
照片来源：取外周血---体外培养---秋水仙素处理--低渗---固定---制片---老化处理---胰酶处理----染色---观察--显微摄影。
人类染色体 G显带标本制备与核型分析
实验目的： 1、熟悉人类染色体G显带标本的制备 2、掌握人类染色体G显带核型分析的方法 实验内容： 1、人类染色体G显带标本的制备 2、人类染色体G显带核型分析
一、人类体玻片1张置于37℃预
温的PH7.0－7.2的0.025％胰蛋白酶缸中处理 15s、30s、45s、60s。 2、漂洗：快速入0.85%的生理盐水中漂洗两次。
18 21
5
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13
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X
X
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8 12
7
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19
3
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人类染色体G带核型分析
人类染色体G带核型分析摘要人类染色体G带核型分析是一项重要的遗传学检测方法，可以帮助鉴定染色体异常，为临床诊断和疾病预后提供重要依据。
本文将介绍人类染色体G带核型分析的原理、操作步骤和临床应用，并探讨其在遗传疾病研究中的意义。
引言人类染色体是一条条长短不一的DNA分子，其中包含了人类遗传信息的全部。
染色体异常可以导致不同的遗传疾病和癌症的发生。
人类染色体G带核型分析是一种常用的染色体检测方法，利用一种特殊染色技术对染色体进行染色，然后通过显微镜观察和分析染色体的形态和数量，从而鉴定染色体异常。
方法样本采集与培养人类染色体G带核型分析需要获取患者的外周血、羊水或胎盘组织等样本。
对于外周血样本，使用抗凝血管采集一定数量的血液。
对于羊水或胎盘组织样本，可以在妊娠期间进行采集。
采集的样本需要进行细胞培养，目的是获取足够数量的细胞进行分析。
细胞处理细胞培养后，采用适当的方法和药物对细胞进行处理，停止细胞分裂并保留染色体的形态。
常用的方法包括用胆碱能抑制剂停止细胞有丝分裂、用高渗溶液进行裂解和固定等。
染色体染色和显微镜观察经过处理的细胞用一种特殊染料（一般为吉姆萨染料）进行染色。
染色后，通过显微镜观察细胞的染色体形态和数量。
根据染色体的形态和大小，可以对染色体进行鉴定，并进行核型分析。
数据分析与结果解读通过显微镜观察，可以得到染色体的形态和数量信息。
根据染色体的数量和形态，可以判断是否存在染色体异常，如染色体缺失、染色体重复或染色体结构异常等。
根据结果，可以进行遗传辅助诊断，帮助确定疾病诊断和预后。
临床应用人类染色体G带核型分析在临床诊断中具有广泛的应用。
其主要应用包括：遗传疾病的诊断人类染色体G带核型分析可以帮助确定染色体异常与遗传疾病的关系。
例如，唐氏综合征、爱德华氏综合征和Patau综合征等遗传性疾病都与特定的染色体异常有关。
通过染色体核型分析，可以准确诊断这些疾病，为咨询和治疗提供依据。
复杂遗传疾病的研究对于一些复杂的遗传疾病，人类染色体G带核型分析可以帮助鉴定潜在的遗传因素。
人类染色体标本的制备及G显带核型分析
安徽医科大学基础医学院生物学教研室
[目的和要求]
1. 掌握染色体标本的制备方法和G显带技术。 2. 熟悉人类外周血淋巴细胞的培养方法及G显带 染色体的核型分析技术。
[实验原理]
染色体作为细胞遗传信息的载体，出现于有丝分 裂期。用于人类染色体标本制备的材料可为骨髓细胞、 外周血淋巴细胞、绒毛细胞、羊水细胞等。其中最简 便的就是抽取少量外周静脉血进行短期培养，经秋水 仙素处理（秋水仙素可阻断有丝分裂期细胞中微管的 聚集，使纺锤体不能形成，从而使有丝分裂停滞在中 期时相，此时染色体具有最典型的形态），再经低渗、 固定等处理，获得更多的中期分裂相以用于核型分析。
基因组与核型 基因组：生物体内单倍体染色体组成叫做生物体的 基因组(genome)，它代表了一个生物体染色体中储 存的全部遗传信息。 人类体细胞的正常核型
组 染色体号
1 2 3
主要特征
中央着丝粒染色体 亚中着丝粒染色体
大
A组 B组
4 ———— 5 6 ———— 12、X 13 ———— 15 17 16 18
正常男性染色体G-显带核型
人类染色体G-显带特征口诀：
一秃二蛇三蝶飘 六号是个小白脸 十号长臂近带好 十三四十五 十六q2缢痕大 十八人小肚皮大 二十头重又脚轻 二十二头带小黑帽
四鞭炮五黑腰 七上八下九苗条 十一低来十二高 下、中、上 十七长臂带脚镣 十九一点腰 二十一象个葫芦瓢 X一担挑，Y是黑脚
[注意事项]
1. 染色体标本制备中的关键因素包括秋水仙素的用量 和作用时间、低渗和固定的处理。其中低渗时间很重要， 处理时间过长则细胞膜过早破裂导致染色体丢失，处理 时间不足则致染色体分散不好，不利于计数分析。 2. G显带过程中的关键因素包括胰蛋白酶的作用时间、 温度、pH等。其中胰蛋白酶溶液应37℃充分预热，溶液 pH应维持在6.8～7.2，以保证酶活性的发挥。另外消化 要适度，消化不足则带纹不清晰或不显示，消化过度则 带纹模糊甚至损失。
实验十 人类染色体G显带技术及G带核型分析
实验十人类染色体G显带技术及G带核型分析实验目的1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。
2、了解人类染色体的G显带的带型特征。
实验用品1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。
2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。
3、试剂：0.125％胰蛋白酶溶液、0.02％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、0.85％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。
实验原理人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。
本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T 带），G带是目前被广泛应用的一种带型。
因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。
研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。
每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。
关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。
有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。
比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。
用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。
一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。
人类G显带染色体核型分析 ppt课件
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Байду номын сангаас
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A组
第1号染色体：短臂的近侧 部一半有二个深带，但中部 的深带较宽，在处理较好的 标本上，远侧段可见3～4条 浅染的深带。长臂的次缢痕 紧贴着丝粒，着色甚深。且 是多态性的。近侧部为一窄 的浅带，中段和远侧段各有 二条深带。
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第15号染色体：与 第13染色体一样， 着丝粒和短臂均为 深染。长臂近侧部 1/2处有一着色甚深 的宽带。近侧部可 有另一较狭的深带。 在几乎接近末端处 往往有一着色不很 深的带。
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三、实验用品
1、器械：光学显微镜、擦镜纸。 2、试剂：乙酸乙酯、香柏油。 3、材料：正常人染色体G显带标本
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三、实验的方法与步骤
低倍镜下寻 找分散良好 染色体
油镜下仔 细观察分 析染色体
先计数 染色体 总数
注明染色体 号及核型
标明染色 体的组别
描绘染色 体线条图
第7号染色体：着丝粒染色甚深。 短臂上有2～3条深带，处于中部 的那条带通常着色很浅，有时不 明显，远侧端的那条带着色很深， 宛如“并盖”，为一末端带。这 一特征对于鉴别7染色体最有价值。 长臂可见三条明显的深带，近侧 部和中部的二条带着色深，带型 也较宽。
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人类染色体G带观察与核型分析
人类染色体G带观察与核型分析一、实验目的掌握人类体细胞染色体组型分析的方法二、实验原理○1核型：染色体组型又称核型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。
核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。
核型( karyotype )是指一个细胞内的整套染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像,通常是将显微摄影得到的染色体照片剪贴面成。
正常细胞的核型能代表个体的核型。
组型( idiogram )是以模式图的方式表示,它是通过对许多细胞染色体的测量取其平均值绘制而成的,是理想的、模式化的染色体组成。
它代表了一物种染色体组型的特征,核型的研究对人类医学遗传研究及临床应用,对探讨动植物起源、物种间亲缘关系、鉴定远缘杂种等方面都有重大意义。
○2带染色技术也称为改良的 iemsa 染色法。
因用 iemsa 染色,所以称为带。
它是目前应用最广泛的染色体分带技术之一。
染色体标本放到37℃胰酶中是带显示的一种预处理方式,它可以从染色体上抽取蛋白质特定的成分,从而经 iemsa 染色后获得良好一致的分带类型。
带的形成与 iemsa 染料的组成及染色特性分不开。
iemsa 染料即噻嗪-曙红染料,染色首先取决于两个噻嗪分子同DNA 的结合,在此基础上它们结合一个曙红分子,其次取决于一个有助于染料沉淀物积累的疏水环境。
通过胰前预处理可以使阴性带区的疏水蛋白被除去或使它们的构型变为更疏水状态。
从而造成了染色体蛋白质的差异,这种差异就是明暗相间的染色体带。
染色体带技术为染色体遗传病诊断、杂种细胞检定、特殊细胞株标记、染色体的识别等开创了一系列检测方法,大大加速了染色体研究的进展。
○3对任何一个染色体的基本形态学特征来说，重要的参数有3个：描述染色体的三个参数: 1.相对长度：指单个染色体长度与包括X（或Y）染色体在内的单倍染色体总长之比，以百分率表示。
染色体G显带核型分析
实验 染色体G显带核型分析 目的要求
1、熟悉人类染色体的G带形特征 2、掌握G显带染色体核型分析的方法 实验内容 G显带照片核型分析
照片和玻片标本的来源
取外周血---体外培养---秋水仙素处理---低 渗---固定---制片---老化处理---胰酶处理--Giemsa染色---观察---显微摄影。
• 2、全部G带特征： 剪贴配对后观察 （考试要求） 3、实验报告当堂交
1、主要特征带型
• 1秃 2蛇 3蝶飘 4均匀 5黑腰 • 6号小白脸 7似戴帽 8三长两短 • 9细颈长两条 10三条带型好 • 11低 12高 X染色体一担挑 • 13、14、15 四二一、低中高 • 16 深带连着点17深带跑得远18人小肚子大 • 19点黑腰 20 头重脚轻 • 21 似像角 22 戴小帽
G显带染色体的命名
染色体号---臂的符号---区号---带号---亚带--亚亚带
如：1q34 5p23.3 14q22.23
图8 人类C带核型，C带显示的是着丝相观察---实验报告纸准备 （A、B、C、D、E、F、G组横线并标注 1、2、3---22、X、Y号码）--剪取染色体---配对分析---粘贴---核型书写
实验G显带核型分析 实验课件
1. 计数并剪切
5……
1 2 3
4
2. 排列分组
2. 配对成23对
3.排列分组编号
1
2
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4
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XX 18 19 20 21 22 返回
4.写出结果
46,XX
都有
中（16号） 亚中（17、18号）
中 近端 21、22号 有，Y无
正常人染色体G显带带型模式图
A组
包括1～3号染色体，长度最长：1、3号着丝粒约 在1/2处，2号着丝粒约在3/8处。
一秃二蛇三蝶飘
B组
包括4、5两对，体积大，着丝粒约在1/4处，亚中着丝粒。
四鞭炮五黑腰
C组
包括6～12号和X染色体，中等长度，6、7、11号和X着丝 粒约在3/8处，其他号着丝粒约在1/4处。
核型分析（karyotyping）： 制作核型，进行染色体数目、 形态特征分析，确定正常与否，写出分析结果 的过程。
核型分析的类型？ 非显带染色体核型分析
显带染色体核型分析
G显带
人类染色体显带核型命名标准 依据：染色体大小、着丝粒位置、带纹 分组： A、B、C、D、E、F、G七组 编号：1～22号为常染色体，男女共有
三、实验用品
1、器材 电脑、打印纸
2、材料
人类中期染色体图片
四、内容及方法
G显带核型分析
1. 计数并剪切 2. 配对成23对 依据：同源染色体形态相同，带型一样 非同源染色体大小、形态、带型各异 3. 排列分组编号 依据：染色体大小、着丝粒位置 随体有无和G显带带型 4. 写出核型分析结果 如：46,XX或46,XY
人类G显带核型分析
人类G显带核型分析简介人类基因组由一系列的染色体组成，其中包含有关个体遗传特征的信息。
通过分析人类染色体的形态和结构，可以获取有关个体的核型信息。
在人类染色体核型分析中，G带染色体是一种常用的技术，它能够提供高分辨率的核型信息。
G带染色体技术G带染色体技术是一种常用的核型分析方法，它能够显现染色体的带状结构。
该技术利用了染色体的染色质中富含的AT和GC碱基对的差异，通过特定染色剂的作用，可以将染色体分成明显的带状结构。
G带染色体技术通常与显微镜观察相结合，可以得到高分辨率的染色体核型图。
G带染色体核型分析步骤G带染色体核型分析通常分为以下几个步骤：1.细胞培养：首先需要从个体的脐带血、外周血或骨髓等获得细胞样本，然后将其进行细胞培养，使细胞增殖到足够数量。
2.处理染色体：将细胞处理以使染色体展开，并进行固定。
通常通过加入适量的高渗液来使细胞膨胀，然后进行固定。
3.涂片制备：将处理后的细胞进行涂片制备，通常使用玻璃片或载玻片。
制备涂片时需小心操作，避免细胞损伤或重叠。
4.染色：将涂片进行染色，常用的染色剂包括吉姆萨染色剂或戈姆萨染色剂。
染色剂的选择会影响染色体的分辨率和对比度。
5.显微镜观察：使用显微镜观察染色后的涂片，通过对各染色体的形态和带状结构进行分析，得到染色体的核型信息。
G带染色体分析的应用G带染色体分析广泛应用于临床遗传学和生物学研究中，主要用于以下方面：1.检测染色体异常：通过G带染色体分析，可以检测到染色体数目异常、结构异常或重排。
这些异常经常与遗传疾病相关，对于儿童发育异常或个体的生育能力评估具有重要意义。
2.遗传咨询和筛查：G带染色体分析可用于进行遗传咨询和筛查，帮助家庭了解染色体异常的潜在风险。
例如，在孕期通过羊水细胞或绒毛组织进行G带染色体分析，可以帮助判断胎儿是否存在染色体异常。
3.种群遗传学研究：G带染色体分析也可以用于种群遗传学研究，通过分析不同种群的染色体组成和遗传变异，可以揭示人类种群间的遗传关系和进化历史。
人类染色体标本的制备与G显带核型分析报告
人类染色体标本的制备与G显带核型分析报告概述核型分析是指通过对细胞的染色体观察，了解它们的数量、形态，从而判断个体的性别以及是否存在染色体异常。
本文将介绍人类染色体标本的制备方法以及采用G显带染色技术进行核型分析的过程和结果。
材料与方法标本制备：1.通过体内生长的细胞系培养得到细胞，并将它们发送至染色体形态捕获系统实验室。
2.将收到的细胞进行样品准备。
先加入均浆剂净水，并初次混合。
待与细胞量相等的5％高马尔谷酸(Na2HPO4)特性缓冲液和1％偏硫酸，最后混合。
3.轻轻转动管子，并且离开它说较长时间，使得细胞得以与溶液完全变淡。
4.通过四氯化碳进行固定，直至样品中的细胞结构都没有被损坏。
5.利用各种化学剂处理样本，以预处理出更好的结构。
G显带染色：1.将钟室内的标本压片，使细胞的核形成按制定的标准排序，并在有机玻璃片底部粘贴。
2.加入如下染料：a. Giemsa液：Giemsa指的是罗马帝国时期的波尔多区Giemsa教授。
G显带染色技术将溶液中的Giemsa染色质直到他们的总量到达6倍于DNA总量。
Giemsa染料在滴定时间内还要使染色质呈现某些将染色质透过玻片清楚可见的颜色。
b. Sorenson’s Buffer：Sørensen’s缓冲液是一种被设计为模仿人类体液的缓冲液。
在G显带染色过程中，它发挥的作用是将不同颜色的细胞内组成分离出来，使得它们不会在一幅核型图像中混杂在一起。
3. 在加入染料后将玻璃片封起来，等待颜料与核相结合。
4. 将镜头放置在显微镜底座中，并通过显微镜观察标本。
分析：我们使用的显微镜是能见度很好的显微镜，能够让细胞结构非常清晰可见。
我们可以在屏幕上观察到标本图像。
我们首先计算出图像中每个单独的染色体的数目以及它们的大小和形状。
在一张图像上，我们可以很容易地区分每个单独的染色体，并根据它们的大小、形状和位置来确定它们在细胞核中的位置。
结果我们的细胞核型分析结果显示，这个体细胞核内的染色体数目为46个。
人类外周血染色体标本制备及G带观察及核型分析
实验报告课程名称：分子医学实验 指导老师： 成绩： 实验名称： 人类外周血染色体标本制备G 带观察及核型分析 同组学生姓名：一、实验目的及原理三、实验结果二、操作步骤 四、讨论分析一、 实验目的及原理熟悉人类外周血淋巴细胞的培养方法。
初步掌握人类染色体标本培养和制备的基本方法。
通过实验掌握Ｇ带标本制备的基本方法，学会在显微镜下直接观察G 带分裂相。
在细胞周期的不同阶段，染色体的结构不同，在细胞分裂间期，染色体呈现细长的丝状结构，分散于细胞核中，且交织成网状，难以识别其数目和每个染色体特有的结构；在细胞有丝分裂中期,染色体凝缩形成短的棒状结构，排列在赤道板上，此时染色体的形态、数目最清楚，所以一般选择有丝分裂中期的细胞来观察染色体的形态、数目。
在人类遗传分析中，普遍采用外周血培养的方法制备染色体标本。
但是在正常情况下，外周血中的淋巴细胞，几乎都处在G1期或G0期，因而外周血细胞中是没有分裂相的。
在细胞培养过程中加入植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA) ，可以刺激外周血淋巴细胞转变为淋巴母细胞，进行有丝分裂，再通过秋水仙素处理，将细胞阻断在有丝分离中期。
再通过离心、低渗、固定和滴片，就可以获得大量有丝分裂相。
最后通过染色就可以观察染色体的结构和数目。
本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。
有许多显示Ｇ带的方法，最常用的是将已经过老化的染色体制片放到37℃胰酶中进行处理，然后用Giemsa 染色。
胰酶可以从染色体上抽取蛋白特定的组成部分。
通过胰酶处理使Ｇ带区的疏水蛋白被除去或使它们构型变为更疏水状态。
由此可见在Ｇ带区中抽取的蛋白往往是疏水蛋白。
关于显带机理有多种论点，总的来说，还不能完全解释显带的机理问题。
二、操作步骤人类外周血染色体标本制备１、采血２、培养RPMI1640培养液，37℃ 0.5℃恒温中培养72小时。
3、秋水仙素(colchicine)处理在终止培养前２-３小时，加入秋水仙素。
[人体显微形态学]_实验：染色体G显带核型分析
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[人体显微形态学]_实验：染色体G显带核型分析
人体显微形态学的染色体G显带核型分析是实验室里一项非常重要的实验。
它主要是
为了研究人体染色体G显带核型，以了解非常微小部分染色体结构和功能，从而可以准确
评估人体染色体安全性和染色体病变。
染色体G显带核型分析实验，是微生物学实验室中常用的分子生物技术之一。
它包括
用荧光原子瞳（FISH）技术来检测和辨识人体染色体G显带上的特定片段，是按比例放大
微小结构的，目的是在极端放大的条件下观察其形状和染色体结构，以调查染色体G显带
核型的特征。
实验之前，需要准备染色体DNA样本，采用逆转录聚合酶反应（RT-PCR）技术，提取
染色体DNA样本。
取染色体DNA样本，用供体核酸进行探针结合，以染色技术对染色体进
行染色，并在特定稀释条件下进行配对图谱比较，以得出染色体G显带核型分析的结果。
染色体G显带核型分析的过程中，要采用专业的放大技术，如荧光显微镜和电子显微
镜等，来放大染色体核酸片段的结构，以准确观察染色体G显带核型。
采用特定稀释技术，给出多种图形，作为染色体G显带核型分析的依据。
最后，运用解剖切片、拍片、再加以染色，用荧光显微镜染色，最后才得出染色体G
显带核型分析的结论。
比较同一组DNA样本中染色体G显带核型分析的结果，便可得出染
色体上显带特征的特点；进而确定人体染色体的安全性及疾病的分析结果。
染色体G显带核型分析是一种十分详细、复杂的实验，其实验步骤也十分耗时，但是
它为弄清染色体G显带的结构提供了最佳的依据，直接关系到人类健康，因此在临床实践中，染色体G显带核型分析实验备受重视，具有极为重要的意义。
人类G显带染色体核型分析
人类G显带染色体核型分析引言人类基因组中的染色体是遗传信息的主要载体。
其中，性染色体在性别决定中起着重要的作用。
在人类中，性别由两种类型的性染色体决定：XX对应女性，XY对应男性。
正常情况下，人类的细胞核中共有46条染色体，其中44条为非性染色体，另外2条为性染色体。
本文将对人类G显带染色体核型进行分析。
G显带染色体G显带染色体技术是一种常用的染色体核型分析方法，它使用某些特定的染色剂对染色体进行染色，以便更好地观察和研究染色体的形态和结构。
G显带染色技术具有高分辨率和高对比度的特点，可以清晰地显示出染色体上的各种条纹和细节，有助于鉴定染色体异常和进行核型分析。
人类G显带染色体核型人类的G显带染色体核型是指对人类细胞中的染色体进行G显带染色后所观察到的染色体图型。
正常情况下，人类的核型为46,XX或46,XY，表示每个细胞核中都包含有22对自动染色体和一对性染色体。
其中，自动染色体按照从长到短的顺序编号为1-22号染色体，性染色体用X和Y表示，女性的核型为46,XX，男性的核型为46,XY。
核型异常与疾病关联核型异常是指染色体在数量或结构上发生异常变化。
在人类中，核型异常与一些遗传性疾病的发生和发展密切相关。
例如，唐氏综合征是由于21号染色体的三体性引起的，患者的核型为47,XX(+21)或47,XY(+21)。
爱德华综合征也是一种常见的核型异常疾病，其核型为47,XXY。
核型异常的检测对于某些疾病的早期诊断和预防具有重要意义。
G显带染色体核型分析的步骤进行G显带染色体核型分析需要经过以下几个步骤：1. 细胞培养和处理首先，需要从被检测的样本中提取出细胞，常用的样本包括外周血、羊水、胎盘组织等。
然后，将提取得到的细胞进行培养，使其增殖到一定数量。
接下来，使用适当的方法处理细胞，使其进入到有利于显带形成的状态。
2. G显带染色处理后的细胞要进行G显带染色。
染色方法一般采用G显带染色试剂盒，其中的染色剂对染色体具有亲和力。
实验人类染色体
短臂：一般在近侧段可见1条较宽的深带，远侧段 可见2条深带，其中远侧1条较窄，且着色淡，这 是区别3号染色体短臂的显著特征。在处理较好的 标本上，近侧段的深带可分为2条深带，此臂分2 个区，中段浅带为2区1带。
长臂：一般在近侧段和远侧段各有1条较宽的深带， 在处理好的标本上，近侧段的深带可分为2条深带， 远侧段的深带可分为3条深带，此臂分为2个区， 中段浅带为2区1带。该染色体的G带图有点象蝴 蝶结。
B组：4~5号染色体。 4号染色体 短臂：可见2条深带，近侧深带染色较浅，
短臂只有1个区。 长臂：可见均匀分布的4条深带，在处理较
好的标本上，远侧段的2条深带可各自分为2 条较宽的深带。此臂分为3区，近侧段第1和 第2深带之间的浅带为2区1带，远侧段两条 深带之间的浅带为3区1带。
5号染色体 短臂：可见2条深带，其远侧的深带宽且着
D组染色体：包括13～15号染色体，具有近 端着丝粒和随体。 E组染色体：包括16～18号染色体，16号染 色体着丝粒在 3/8处，17号和 18号染色体着 丝粒约在 1/4处。 F组染色体：包括19号和20号染色体，中央 着丝粒。 G组染色体：包括21号、22号和Y染色体， 是染色体组中最小的，为近端着丝粒的染 色体。21号和22号染色体具有随体。
三、实验用品
1、材料：常规方法制备的中期人类染色体 标本（标本片龄不超过30天为宜）。
2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒 温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片 架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。
3、试剂：0.125％胰蛋白酶溶液、0.02％ EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、 0.85％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、 Giemsa稀释液、1／15 mol ／L磷酸缓冲液。
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实验目的1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。
2、了解人类染色体的G显带的带型特征。
实验用品1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。
2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。
3、试剂：％胰蛋白酶溶液、％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。
实验原理人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。
本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。
因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。
研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。
每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。
关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。
有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。
比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。
用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。
一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。
总的来说，G显带的机理还未搞清。
内容与方法一、人类染色体G显带标本制备1、胰蛋白酶法①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。
②取％的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml，配成％的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。
③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。
④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理1～2分钟（精确的时间自行摸索）。
⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。
⑥染色。
将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液）中染色10分钟左右。
⑦自来水冲洗（用细水小心冲洗）、晾干。
⑧镜检显带效果。
在低倍镜下选择分散良好的长度适中的分裂相转换油镜观察，若染色体未出现带纹，则为显带不足；若染色体边缘发毛为显带过头，此时应根据具体情况增减胰蛋白酶处理时间重新处理一张标本。
2、EDTA一胰蛋白酶法①取25ml生理盐水和％的EDTA溶液倒入立式染色缸中混匀。
②取％的胰蛋白酶原液1ml加入到上液中混匀，并用5％NaHCO3调pH值至7左右。
置水浴箱预温至37℃。
③将染色体标本片浸入胰蛋白酶一EDTA溶液中处理5～20秒，同时轻轻摇动玻片。
④取出标本立即浸入生理盐水中洗两次。
⑤浸入37℃的Giemsa染液中染色5～10分钟。
⑥细水冲洗后晾干、镜检。
二、正常人各染色体的G带特征A组：1～3号染色体。
1号染色体。
短臂：近侧段有2条深带，第2深带稍宽，在处理较好的标本上，远侧段可显出3～4条淡染的深带。
此臂分为3个区，近侧的第1深带为lp 21；第2深带为1p31。
长臂：副缢痕紧贴着丝粒，染色浓。
其远侧为一宽的浅带，近中段与远侧段各有两条深带，此中段第2深带染色较浓，中段两条深带稍靠近，此臂分为4个区，副缢痕远侧的浅带为lp21号带、中段第2深带为lp31号带，远侧段第1深带为lp41号带。
2号染色体。
短臂：可见4条深带，中段的2条深带稍靠近，此臂分为2个区，中段两条深带之间的浅带为2p21。
长臂：可见7条深带，第3和第4深带有时融合。
此臂分为3个区，第2和第3深带之间的浅带为2p21带，第4和第5深带之间的浅带为2p31号带。
3号染色体。
在长臂与短臂的近中段各具有1条明显的宽的浅带。
短臂：一般在近侧段可见1条较宽的深带，远侧段可见2条深带，其中远侧1条较窄，且着色淡，这是区别3号染色体短臂的显着特征。
在处理较好的标本上，近侧段的深带可分为2条深带，此臂分2个区，中段浅带为2区1带。
长臂：一般在近侧段和远侧段各有1条较宽的深带，在处理好的标本上，近侧段的深带可分为2条深带，远侧段的深带可分为3条深带，此臂分为2个区，中段浅带为2区1带。
该染色体的G带图有点象蝴蝶结。
B组：4~5号染色体。
4号染色体短臂：可见2条深带，近侧深带染色较浅，短臂只有1个区。
长臂：可见均匀分布的4条深带，在处理较好的标本上，远侧段的2条深带可各自分为2条较宽的深带。
此臂分为3区，近侧段第1和第2深带之间的浅带为2区1带，远侧段两条深带之间的浅带为3区1带。
5号染色体短臂：可见2条深带，其远侧的深带宽且着色浓，此臂仅1个区。
长臂：近侧段2条深带，染色较淡，有时不明显，中段可见3条深带，染色较浓，有时融合成1条宽的深带，远侧段可见2条深带，近末端的1条着色较浓，此臂分为3个区，中段第2深带为2区l带，中段深带与远侧深带之间的宽阔的浅带为3区1带。
C组：6~12号和X染色体6号染色体短臂：中段有1条明显宽阔的浅带，形如“小白脸”，是此染色体的特征，近侧段和远侧段各有1条深带，近侧深带贴着丝粒。
在处理较好的标本上，远侧段的深带可分为两条深带。
此臂分为2个区，中段的明显而宽的浅带为2区1带。
长臂：可见5条深带，近侧1条紧贴着丝粒，远侧末端的1条深带着色较淡；此臂分为2个区，第2和第3深带之间的浅带为2区1带。
7号染色体着丝粒着色浓。
短臂：有3条深带，中段深带着色较淡，有时不明显，远测深带着色浓，形似“瓶塞”。
此臂分为2个区，远侧段的深带为2区1带。
长臂：有3条明显深带，远侧近末端的1条着色较淡；第2和第3带稍接近。
此臂分为3个区，近侧第1深带为2区1带、中段的第2深带为3区1带。
8号染色体。
短臂：有2条深带，中段有1条较明显的浅带，这是与10号染色体相鉴别的主要特征。
此臂分为2个区，中段的浅带为2区1带。
长臂：可见3条分界极不明显的深带，此臂分2个区，中段的深带为2区1带。
9号染色体着丝粒着色浓。
短臂：近侧段和中段各有1条深带，在处理较好的标本上，中段可见2条较窄的深带。
此臂分为2个区，中段深带为2区1带。
长臂：可见明显的2条深带，次缢痕一般不着色，在有些标本上呈现出特有的颈部区。
此臂分为3个区，近侧的1条深带为2区1带，远侧的1条深带为3区1带。
10号染色体着丝粒着丝浓。
短臂：近侧段和近中段各有1条深带，在有些标本上近中段可见2条深带，但与8号染色体短臂比较，其上深带的分界欠清晰。
此臂只有1个区。
长臂：可见明显的3条深带，远侧段的2条深带稍靠近，这是与8号染色体相鉴别的一个主要特征，此臂分为2个区，近侧段的1条深带为2区1带。
11号染色体短臂：近中段可见1条深带，在处理较好的标本上，这条深带可分为3条较窄的深带。
此臂只有1个区。
长臂：近侧有1条深带，紧贴着丝粒。
远侧段可见1条明显的较宽的深带，这条深带与近侧的深带之间是1条宽阔的浅带，这是与12号染色体相鉴别的一个明显的特征，在处理较好的标本上，远侧段的这条较宽的深带可分为2条较窄的浅带，两深带之间有1条很窄的浅带，一般极难辨认，但它是分区的一个界标，在有些标本上近末端处可见1条窄的淡染的深带。
此臂分2个区，上述远侧两条深带之间的那条很窄的淡带为2区1带。
12号染色体短臂：中段可见1条深带，此臂只有1个区。
长臂：近侧有1条深带，紧贴着丝粒，中段有1条宽的深带，这条深带与近侧深带之间有1条明显的浅带，但与11号染色体比较这条浅带较窄，这是鉴别11号与12号染色体的一个主要特征。
在处理较好的标本上，中段这条较宽的深带可分为3条深带。
其正中一条着色较浓，在有些标本上，远侧段还可以看到l～2条染色较淡的深带。
此臂分为2个区，中段正中的深带为2区1带。
X染色体其长度介于7号和8号染色体之间，主要特点是长臂和短臂中段各有1条深带，有“一担挑”之名。
短臂：中段有一明显的深带，宛如竹节状。
在有些标本上远侧段还可以看见1条窄的着色淡的深带，此臂分为2个区，中段的深带为2区1带。
长臂：看见3～4条深带，近中部1条最明显，此臂分为2个区，近中段的深带为2区1带。
D组：13~15号染色体，具有近端着丝粒和随体。
13号染色体着丝粒区深染。
长臂：可见4条深带，第1和第4深带较窄，染色较淡；第2和第3深带较宽，染色较浓。
此臂分为3个区，第2深带为2区1带，第3深带为3区1带。
14号染色体着丝粒区深染。
长臂：近侧和远侧各有1条较明显的深带。
在处理较好的标本上，中段尚看见1条着色较浅的深带。
此臂分为3个区，近侧深带为2区1带，远侧深带为3区1带。
15号染色体着丝粒区深染。
长臂：中段有一条明显深带；染色较浓，有的标本上近侧段可见l～2条淡染的深带。
此臂分为2个区，中段深带为2区1带。
E组：16一18号染色体16号染色体短臂：中段有1条深带，在较好的标本上看见2条深带，此臂只有1个区。
长臂：近侧段和远侧段各有1条深带。
有时远侧段1条不明显，次缢痕着色浓；此臂分2个区，中段深带为2区1带。
17号染色体短臂：有1条深带，紧贴着丝粒，此臂只有1个区。
长臂：远侧段看见1条深带，这条深带与着丝粒之间为一明显而宽的浅带，此臂分为2个区，这条明显而宽的浅带为2区1带。
18号染色体短臂：一般为浅带，此臂只有1个区。
长臂：近侧和远侧各有1条明显的深带，此臂分为2个区，两深带之间的浅带为2区1带。
19号染色体着丝粒及其周围为深带，其余为浅带。
短臂和长臂均只有1个区。
20号染色体着丝粒区浓染。
短臂有一条明显的深带，此臂只有1个区。
长臂：中段和远侧段看见1～2条染色较淡的深带，有时全为浅带。
此臂只有1个区。
此染色体有“头重脚轻”之名。
G组；21～22号染色体和Y染色体，21、22号有随体。
21号染色体着丝粒区着色淡。
其长度比22号短，其长臂上有明显而宽的深带。
此臂分2个区，其深带为2区1带。
22号染色体着丝粒区染色浓。
其长度比21号长，在长臂上可见2条深带，近侧的1条着色浓，而且紧贴着丝粒。
近中段的1条着色淡，在有的标本上不显现。
此臂只有1个区。
Y染色体长度变化大，有时整个长臂被染成深带，在处理好的标本上可见2条深带。
此臂只有1个区。
三、镜下带型分析每人用自己所作的G显带标本，选择分散好，染色体带型清晰的分裂相，在油镜下根据上述G显带各号染色体的特征，依次找出1至22号染色体和性染色体，绘成草图。