5.3-高效毛细管电泳分离模式
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2020/10/3
3. 不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同 (v=μE )，淌度大的离子区带电场强度小。
沿出口到进口，将不同区带依次排序1,2,3,4 …， 电场强度依次增大。假设“2”号中离子扩散到“3”号， 该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2” 号中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队。
4. 特点：界面明显，富集、浓缩作用。
2020/10/3
5.4.6 毛细管电渗色谱
Capillary electroosmostic chromatography ，CEC
在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定 液，以电渗流为流动相，试样组分在两相间的分配 为分离机理的电动色谱过程；
2020/10/3
2. 毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范 围的脂肪族多氨基多羧酸混合物），当施加直流电压 （6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的 pH梯度。
3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关， 在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时， 呈电中性，淌度为零。
2020/10/3
5.4.5 毛细管等速电泳
Capillary isotachophoresis ，CITP
1. 将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子 (充满毛细管)和尾随离子，试样离子的淌度全部位于两 者之间，并以同一速率移动。
2. 负离子分析时，前导电解质的淌度大于试样中所 有负离子的。所有试样都按前导离子的速率等速向阳极 前进，逐渐形成各自独立的区带而分离。阴极进样，阳 极检测。
阴离子：两种效应的运动方向相 反。v电渗流 >v电泳时，阴离子在负极 最后流出,在这种情况下，不但可 以按类分离，同种类离子由于差速 迁移被相互分离。
最基本、应用广的分离模式。
2020/10/3
5.4.2 毛细管凝胶电泳
Capillary gel electrophoresis ，CGE
将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。其具有 多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分离。能够 有效减小组分扩散，所得峰形尖锐，分离效率高。
第五章 毛细管电泳
Capillary electrophoresisBaidu Nhomakorabea CE
第四节 毛细管电泳分离
模式
Separate types of CE
5.4.1 毛细管区带电泳 5.4.2 毛细管凝胶电泳 5.4.3 胶束电动毛细管 色谱 5.4.4 毛细管等电聚焦 5.4.5 毛细管等速电泳 5.4.6 毛细管电渗色谱
4. 聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用 下迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中 性，停止移动，形成窄溶质带而相互分离。 5. 阳极端装稀磷酸溶液，阴极端装稀NaOH溶液。 6. 加压将毛细管内分离后的溶液推出经过检测器检测。 7. 电渗流在CIEF中不利，应消除或减小。
2020/10/3
3.中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水 性强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长。
4.可用来分离中性物 质，扩展了高效毛细管电
泳的应用范围。
5.色谱与电泳分离模
式的结合。
2020/10/3
5.4.4 毛细管等电聚焦
Capillary isoelectric focusing，CIEF
1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技 术。
micellar electrokinetic capillary chromatography
1.缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达 到临界浓度，形成一疏水内核，外部带负电的胶束。
在电场力的 作用下，胶束在 柱中移动。
2020/10/3
2. 电泳流和电渗流的方向相反，且v电渗流 > v电泳 ， 负电胶束以较慢的速率向负极移动。
2020/10/3
分离类型
八种分离类型，介绍常用的几种； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同。
2020/10/3
5.4.1 毛细管区带电泳
capillary zone electrophoresis ，CZE
带电粒子的迁移速率 = 电泳和电渗流速率的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出。 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响在阳离子后流出。
请选择内容
5.1 毛细管电泳的基本原理 5.2 高效毛细管电泳仪 5.3 毛细管电泳的分离模式 5.4 影响分辨率的因素及操作条件选择 5.5 高效毛细管电泳的应用
2020/10/3
结束
蛋白质、DNA等的荷/质比与分子大小无关，CZE模式 很难分离，采用CGE能获得良好分离，DAN测序的重要手 段。
特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低黏度的线性聚合物溶液代替高 黏度交联聚丙烯酰胺。柱便宜，易制备。
2020/10/3
5.4.3 胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）
3. 不同离子的淌度不同，所形成区带的电场强度不同 (v=μE )，淌度大的离子区带电场强度小。
沿出口到进口，将不同区带依次排序1,2,3,4 …， 电场强度依次增大。假设“2”号中离子扩散到“3”号， 该区电场强度大，离子被加速，返回到“2”区；当“2” 号中离子跑到“1”号区，离子被减速使之归队。
4. 特点：界面明显，富集、浓缩作用。
2020/10/3
5.4.6 毛细管电渗色谱
Capillary electroosmostic chromatography ，CEC
在毛细管壁上键合或涂渍高效液相色谱的固定 液，以电渗流为流动相，试样组分在两相间的分配 为分离机理的电动色谱过程；
2020/10/3
2. 毛细管内充有两性电解质（合成的具有不同等电点范 围的脂肪族多氨基多羧酸混合物），当施加直流电压 （6～8V）时，管内将建立一个由阳极到阴极逐步升高的 pH梯度。
3. 氨基酸、蛋白质、多肽等的所带电荷与溶液pH有关， 在酸性溶液中带正电荷，反之带负电荷。在其等电点时， 呈电中性，淌度为零。
2020/10/3
5.4.5 毛细管等速电泳
Capillary isotachophoresis ，CITP
1. 将两种淌度差别很大的缓冲液分别作为前导离子 (充满毛细管)和尾随离子，试样离子的淌度全部位于两 者之间，并以同一速率移动。
2. 负离子分析时，前导电解质的淌度大于试样中所 有负离子的。所有试样都按前导离子的速率等速向阳极 前进，逐渐形成各自独立的区带而分离。阴极进样，阳 极检测。
阴离子：两种效应的运动方向相 反。v电渗流 >v电泳时，阴离子在负极 最后流出,在这种情况下，不但可 以按类分离，同种类离子由于差速 迁移被相互分离。
最基本、应用广的分离模式。
2020/10/3
5.4.2 毛细管凝胶电泳
Capillary gel electrophoresis ，CGE
将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。其具有 多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分离。能够 有效减小组分扩散，所得峰形尖锐，分离效率高。
第五章 毛细管电泳
Capillary electrophoresisBaidu Nhomakorabea CE
第四节 毛细管电泳分离
模式
Separate types of CE
5.4.1 毛细管区带电泳 5.4.2 毛细管凝胶电泳 5.4.3 胶束电动毛细管 色谱 5.4.4 毛细管等电聚焦 5.4.5 毛细管等速电泳 5.4.6 毛细管电渗色谱
4. 聚焦：具有不同等电点的生物试样在电场力的作用 下迁移，分别到达满足其等电点pH的位置时，呈电中 性，停止移动，形成窄溶质带而相互分离。 5. 阳极端装稀磷酸溶液，阴极端装稀NaOH溶液。 6. 加压将毛细管内分离后的溶液推出经过检测器检测。 7. 电渗流在CIEF中不利，应消除或减小。
2020/10/3
3.中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水 性强的组分与胶束结合的较牢，流出时间长。
4.可用来分离中性物 质，扩展了高效毛细管电
泳的应用范围。
5.色谱与电泳分离模
式的结合。
2020/10/3
5.4.4 毛细管等电聚焦
Capillary isoelectric focusing，CIEF
1. 根据等电点差别分离生物大分子的高分辨率电泳技 术。
micellar electrokinetic capillary chromatography
1.缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达 到临界浓度，形成一疏水内核，外部带负电的胶束。
在电场力的 作用下，胶束在 柱中移动。
2020/10/3
2. 电泳流和电渗流的方向相反，且v电渗流 > v电泳 ， 负电胶束以较慢的速率向负极移动。
2020/10/3
分离类型
八种分离类型，介绍常用的几种； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同。
2020/10/3
5.4.1 毛细管区带电泳
capillary zone electrophoresis ，CZE
带电粒子的迁移速率 = 电泳和电渗流速率的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出。 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响在阳离子后流出。
请选择内容
5.1 毛细管电泳的基本原理 5.2 高效毛细管电泳仪 5.3 毛细管电泳的分离模式 5.4 影响分辨率的因素及操作条件选择 5.5 高效毛细管电泳的应用
2020/10/3
结束
蛋白质、DNA等的荷/质比与分子大小无关，CZE模式 很难分离，采用CGE能获得良好分离，DAN测序的重要手 段。
特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低黏度的线性聚合物溶液代替高 黏度交联聚丙烯酰胺。柱便宜，易制备。
2020/10/3
5.4.3 胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）