顺铂联合土贝母皂苷甲对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究

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顺铂联合土贝母皂苷甲对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究

顺铂联合土贝母皂苷甲对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究

顺铂联合土贝母皂苷甲对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究张秀玲;曲群;王桂贤;杨静;沈昕【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2010(18)10【摘要】目的:探讨土贝母皂苷甲与顺铂单独及联合应用对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用,以期对临床上药物治疗宫颈癌提供新的思路和理论依据.方法:采用MTT法检测单用土贝母皂苷甲、DDP及两药联合时对HeLa细胞的生长抑制率.用流式细胞仪测定细胞周期变化.结果:土贝母皂苷甲组(20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml)、顺铂组(10μmol/L)及联合组(40μg/ml土贝母皂苷甲+10μmol/L顺铂)宫颈癌Hela细胞株均有不同程度的生长抑制作用;土贝母皂苷甲组随着药物浓度增加,作用时间延长,对Hela细胞的生长抑制率逐渐升高;土贝母皂苷甲与顺铂联合用药较单一用药对Hela细胞的生长抑制率增高,具有浓度―时间依赖性.流式细胞仪分析结果显示:土贝母皂苷甲组、顺铂组及联合组作用于宫颈癌Hela细胞株24小时,可阻滞细胞周期于G2/M期.结论:土贝母皂苷甲对宫颈癌HeLa细胞株具有生长抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,其与顺铂联合应用具有协同作用,联合应用可减少顺铂用药剂量;土贝母皂苷甲与顺铂单独及联合作用于宫颈癌Hela细胞株24h可阻滞细胞周期于G2/M期.【总页数】4页(P1909-1912)【作者】张秀玲;曲群;王桂贤;杨静;沈昕【作者单位】西电集团医院妇产科,陕西,西安,710077;西安交通大学第二附属医院妇产科,陕西,西安,710004;西安交通大学第二附属医院妇产科,陕西,西安,710004;西安交通大学第二附属医院妇产科,陕西,西安,710004;西安交通大学第二附属医院妇产科,陕西,西安,710004【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡 [J], 杨萍;于廷曦;马润娣;于立坚;苏伟明;邵海艳;廖铭能;黄来珍2.4'-去甲峨参内酯的化学合成及对HeLa宫颈癌细胞和MG-63骨肉瘤细胞体外增殖的抑制作用 [J], 李永超;耿耘;马保玉;宋磊;郑康;赵志龙;雷博婷;马超英3.顺铂对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用 [J], 庞荣清;刘春生;张步振;潘兴华4.BGJ398与顺铂单独或联合作用对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制研究 [J], 宋前燕;毛熙光5.藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究 [J], 李萍;姬白嫣;魏娟;杜小敬;黄凤因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡_杨萍

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡_杨萍

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材料与方法
土贝母皂苷 含苷甲( 和苷乙( , 实验前定量称取, #>@ ) A=@ )
紫外线照射灭菌。 无菌蒸馏水溶解, B ADE 冰箱保存 备用。 !" # 试剂 F2’(+11&G) ,&H0I0+H J-K’+G) ,+H02, 3 F4J4 7 、 、 二甲基亚砜、 噻唑蓝 ( 、 核 胰酶、 碘化丙啶 ( LM) 4NN) 糖核酸酶( 购自 Q0K,- 公司。 小牛血清购自杭 OP-)+) 州四季青生物材料公司。 !" $ 细胞培养 R+S- 细胞以含 =D@ 小牛血清的 F4J4 培养 基,在 !#E 、T@ ;UA 、饱和湿度的孵箱中培养和传

槲皮素联合顺铂诱导宫颈HeLa细胞凋亡的实验研究

槲皮素联合顺铂诱导宫颈HeLa细胞凋亡的实验研究

槲皮素联合顺铂诱导宫颈HeLa细胞凋亡的实验研究韩立薇;罗喜平;赵秋生;宋悦【摘要】目的探讨槲皮素对HeLa细胞增殖和凋亡的影响以及联合顺铂的化疗效应.方法分别用不同浓度槲皮素、顺铂及不同浓度槲皮素联合顺铂处理HeLa细胞24 h;采用MTT法检测药物对HeLa细胞增殖的影响;流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用后的细胞凋亡情况;荧光显微镜观察用PI荧光标记的细胞核形态学变化.结果槲皮素能抑制HeLa 细胞增殖,且呈剂量依赖性;槲皮素联合顺铂与相同浓度槲皮素单用及顺铂单用处理HeLa细胞相比,前者对HeLa细胞的抑制作用更显著(p<0.01);不同浓度槲皮素与顺铂联合处理HeLa细胞与槲皮素单用及顺铂单用相比,前者显著提高了HeLa细胞的凋亡率(p<0.01).结论槲皮素联合顺铂比槲皮素单用及顺铂单用对HeLa细胞的抑制作用更显著,因而产生更强的抗肿瘤效果.【期刊名称】《现代医院》【年(卷),期】2011(011)011【总页数】3页(P15-17)【关键词】槲皮素;HeLa细胞;顺铂;宫颈癌;细胞增殖;凋亡【作者】韩立薇;罗喜平;赵秋生;宋悦【作者单位】广东省妇幼保健院,广东广州,510010;广东省妇幼保健院,广东广州,510010;广州中医药大学第三附属医院,广东广州,510240;广州中医药大学第三附属医院,广东广州,510240【正文语种】中文宫颈癌是妇女常见的恶性肿瘤之一[1],化疗作为宫颈癌手术或放疗的辅助治疗手段,其地位越来越受到重视,以顺铂(Cisplatin,CDDP)为基础的联合化疗已成为宫颈癌综合治疗的标准化疗方案。

但顺铂的肾毒性和耐药性等问题,使其临床应用受到了一定的限制。

槲皮素(Quercetin,Qu)是一种天然的黄酮类化合物,是人类饮食中最主要的生物类黄酮,具有多种生物活性[2]。

近年研究发现,槲皮素特别具有抗肿瘤及增强某些化疗药物的抗肿瘤敏感性作用,国外已将其作为抗癌药物应用于临床。

顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞化疗作用的对照研究

顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞化疗作用的对照研究

顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞化疗作用的对照研究郑小冬;朱雪琼;吕杰强;陈文兵;黄秋穗;胡越【期刊名称】《实用肿瘤杂志》【年(卷),期】2008(23)3【摘要】目的比较化疗药物顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞增殖的抑制作用,探讨子宫颈癌细胞的体外敏感性差异。

方法选用人子宫颈癌SiHa、HeLa细胞进行体外培养,以0.01-20mg/L浓度顺铂作用24、48小时,利用WST-8方法分别测定SiHa和HeLa细胞生长抑制率的变化。

结果顺铂对子宫颈癌SiHa和HeLa细胞生长均有抑制作用,并在一定范围内呈浓度和时间依赖性。

各浓度顺铂作用24小时,SiHa和HeLa细胞的抑制率无明显差异;而作用48小时,SiHa细胞的抑制率低于HeLa细胞(P〈0.05或P〈0.01)。

结论 SiHa细胞比HeLa细胞对化疗药物顺铂更容易耐药。

【总页数】3页(P233-235)【关键词】宫颈肿瘤;肿瘤细胞,培养的;顺铂/治疗应用;抗药性【作者】郑小冬;朱雪琼;吕杰强;陈文兵;黄秋穗;胡越【作者单位】温州医学院附属第二医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R737.33【相关文献】1.热疗增强顺铂对子宫颈癌细胞化疗作用的体外实验研究 [J], 凌斌;江森2.白细胞介素37对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的增强作用 [J], 邓子亮;王森;黎鹏;解奎龙;李淑贤;周世雄;贺晓舟;陈东;郭洪胜3.小剂量顺铂增加人宫颈癌Hela和Siha细胞对光动力治疗敏感性的研究 [J], 王海燕;张友忠;姜侃;焦慧;王兆婧4.超声联合微泡对比剂在宫颈癌SiHa细胞低浓度顺铂化疗中的增敏作用 [J], 胡贝;薛念余;牧启田;张盛敏;牟丹;许幼峰5.miRNA-21对宫颈癌Hela细胞顺铂化疗增敏作用的研究 [J], 徐文莉; 李康; 王娟; 林燕华; 廖长征; 罗艺; 张洪德因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

顺铂联合人参皂甙Rg3对荷宫颈癌鼠血管生成的抑制作用

顺铂联合人参皂甙Rg3对荷宫颈癌鼠血管生成的抑制作用

收稿日期:2008203217;修回日期:2008206216作者单位:442000湖北十堰,郧阳医学院附属人民医院通信作者:胡平,ymh 3011@作者简介:段迎春(19742),女,硕士,主治医师,主要从事妇科肿瘤临床治疗方面的研究DOI :10.3971/j.issn.100028578.2009.04.008顺铂联合人参皂甙Rg 3对荷宫颈癌鼠血管生成的抑制作用段迎春,胡 平,黄光荣,任 青,周玉萍Anti 2angiogenic E ffects of Cisplatin Combined with Ginsenoside R g 3in Nude Mice Cervical C ancerDUAN Y ing 2chun ,HU Ping ,HUAN G Guang 2rong ,REN Qing ,ZHOU Yu 2ping T he People ’s Hos pital of Yuny ang Medical College ,S hi y an 442000,China Corres ponding A uthor :HU Ping ,y m h 3011@y Abstract :Objective To study the anti 2angiogenic effects and anti 2tumor effect of cisplatin combined with ginsenoside Rg 3in nude mice cervical cancer.Methods 28female nude mice were randomly divided into 4groups to receive saline (0.5ml ,qd ),Rg 3(5mg/kg )alone ,cisplatin (5mg/kg )alone and Rg 3(5mg/kg )combined with cisplatin (5mg/kg )respectively.Rg 3was given by gastrogavage once a day ,for 5weeks ,cisplatin 3was injected introperitoneally once 4days for 5weeks.After treatments for 5weeks ,mice were killed and the sizes of solid tumors were measured ,the intratumor MVD (microvessel density )was exam 2ined by immunohistochemical staining.R esults The tumor weights of treated group s were significantly lower than those of the control group ,while the tumor weights of Rg 3combined with cisplatin group were the lowest.The MVD value of Rg 3group were significantly lower than that of cisplatin group and control group.Conclusion Rg 3combined with cisplatin can significantly inhibit the growth of transplanted hu 2man cervical cancer in nude mice.Rg 3can obviously reduce the intratumoral MVD by inhibiting angiogen 2esis of malignant tumor.K ey w ords :G insenoside Rg 3;Cisplatin ;Angiogenesis ;Microvessel density摘 要:目的 探讨人参皂甙Rg 3(简称Rg 3)与顺铂联合应用对人宫颈癌动物模型中肿瘤的生长及其对肿瘤血管生成的影响。

顺铂对Hela细胞辐射增敏的体外实验观察

顺铂对Hela细胞辐射增敏的体外实验观察

顺铂对Hela细胞辐射增敏的体外实验观察常萍;刘孜;王娟;苏进【摘要】目的探讨顺铂对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性和辐射增敏作用,并研究射线与顺铂联合应用的效应关系.方法 MTT法检测Hela细胞在不同浓度药物和不同辐射剂量下的细胞抑制作用;辐射与顺铂联合应用时,MTT法检测细胞抑制率,绘制细胞抑制率曲线,研究顺铂与辐射联合应用时协同效应的条件;克隆形成法研究药物的辐射增敏作用,多靶单击拟合模型方程测定各组细胞辐射增敏比.结果顺铂作用于Hela细胞的半数致死质量浓度(IC50)为10μg/mL,药物与辐射共同作用于Hela 细胞时,12 Gy辐射剂量下,顺铂1~5μg/mi对Hela的细胞毒性显示出明显的浓度依赖性和48 h内的时间依赖性,5μg/mL以上浓度顺铂对Hela的细胞毒性未见明显增加;集落形成法结果显示,顺铂辐射增敏比为1.320;辐射剂量小于10 Gy时,放射线与药物联合应用具有协同效应,而当辐射剂量大于10 Gy时,呈现相加效应或次相加效应.结论顺铂与辐射并用时对宫颈癌Hela细胞增殖具有显著抑制作用,药物具有最佳的辐射增敏剂量;且应尽早应用顺铂增敏化疗,以保证协同效应.【期刊名称】《西安交通大学学报(医学版)》【年(卷),期】2011(032)004【总页数】4页(P462-465)【关键词】宫颈癌;辐射增敏;协同效应;顺铂;Hela细胞;辐射剂量【作者】常萍;刘孜;王娟;苏进【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院放疗科,陕西西安710061;西安交通大学医学院第一附属医院放疗科,陕西西安710061;西安交通大学医学院第一附属医院放疗科,陕西西安710061;西安交通大学医学院第一附属医院放疗科,陕西西安710061【正文语种】中文【中图分类】R737.33宫颈癌作为我国常见的十大肿瘤之一,中晚期患者多采用同步放化疗的综合治疗方案。

合适的放疗剂量及最佳的药物选择,都与治疗效果及副反应密切相关。

顺铂耐药人宫颈癌HeLa细胞株的建立及其相关耐药微小RNA的表达情况

顺铂耐药人宫颈癌HeLa细胞株的建立及其相关耐药微小RNA的表达情况

顺铂耐药人宫颈癌HeLa细胞株的建立及其相关耐药微小RNA的表达情况李祎博;邓金桂;陈晶;孟斐【摘要】目的建立顺铂耐药的人宫颈癌HeLa细胞株,观察其耐药相关微小RNA(miRNA)的表达情况.方法采用小剂量诱导法建立对顺铂耐药的人宫颈癌细胞株(HeLa/顺铂细胞).比较HeLa细胞株和HeLa/顺铂细胞株的细胞倍增时间、半数抑制浓度(IC50)、耐药指数(RI)、相关耐药基因表达情况及其细胞培养液中肿瘤标志物水平,并分析两种细胞株间异常表达的miRNA表达情况.结果 HeLa/顺铂细胞倍增时间及IC50长于或大于HeLa细胞(均P<0.05),RI值为7.14.HeLa/顺铂细胞培养液癌胚抗原、糖蛋白抗原-125水平均高于HeLa细胞(P<0.05);HeLa顺铂细胞中肺耐药蛋白-1、多药耐药相关蛋白-1及谷胱甘肽S-π的mRNA相对表达量均高于HeLa细胞(P<0.05).HeLa/顺铂细胞miR-29a和miR-34a相对表达量高于HeLa细胞,而miR-99a、miR-92a、miR-155、miR-375、miR-195的相对表达量低于HeLa细胞(均P<0.05).结论成功建立顺铂耐药HeLa细胞株,其相关耐药miRNA的表达与HeLa细胞株存在差异.%Objective To construct cisplatin-resistant human cervical cancer cell line HeLa,and to observe the relevant drug resistance-associated microRNA(miRNA) expression of this cell line.Methods Cisplatin-resistant human cervical cancer cellline(HeLa/cisplatin cell) was constructed using low-dose induction.The cell doubling time,half maximal inhibitory concentration(IC50),resistance index(RI),relevant resistance-associated genes expressions and levels of tumor markers in cell culture solution were compared between cell line HeLa and HeLa/cisplatin.The miRNAs expressed abnormally between thetwo cell lines were analyzed.Results The cell doubling time and IC50 of the HeLa/cisplatin cells were longer or higher than those of the HeLa cells(all P<0.05).The RI of the HeLa/cisplatin cells was 7.14.The carcinoembryonic antigen and carbohydrate antigen-125 levels of cell culture solution were higher in the HeLa/cisplatin cells compared to the HeLa cells(P<0.05).The relative expressions of lung resistance protein 1,multidrug resistance-associated protein 1 and glutathione S-transferaseπ mRNAs were higher in the HeLa/cisplatin cells compared to the HeLa cells(P<0.05).The relative expressions of miR-29a and miR-34a were higher but the relative expressions of miR-99a,miR-92a,miR-155,miR-375 and miR-195 were lower in the HeLa/cisplatin cells compared to the HeLa cell(allP<0.05).Conclusion Cisplatin-resistant cervical cancer cell line HeLa is successfully constructed,and its relevant drug resistance-associated miRNAs expression is different from that of HeLa cell line.【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2017(039)008【总页数】5页(P1198-1202)【关键词】宫颈癌;HeLa细胞;顺铂;耐药;微小核糖核酸【作者】李祎博;邓金桂;陈晶;孟斐【作者单位】沈阳医学院附属中心医院妇产科,辽宁省沈阳市 110024;沈阳医学院附属中心医院检验科,辽宁省沈阳市 110024;沈阳医学院附属中心医院妇产科,辽宁省沈阳市 110024;沈阳医学院附属中心医院妇产科,辽宁省沈阳市 110024【正文语种】中文【中图分类】R737.33论著·基础研究宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,据估计我国每年新发病例数为13.2万,每年约有3万妇女死于宫颈癌[1]。

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡杨萍;于廷曦;马润娣;于立坚;苏伟明;邵海艳;廖铭能;黄来珍【期刊名称】《癌症(英文版)》【年(卷),期】2002(021)004【摘要】背景和目的:土贝母皂苷是由传统中药土贝母块茎中分离得到的,由土贝母苷甲(79%)和土贝母苷乙(21%)组成.本研究旨在探讨土贝母皂苷抗肿瘤作用的机制.方法:MTT法检测土贝母皂苷对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化.结果:土贝母皂苷对人宫颈癌HeLa细胞的生长具有强抑制作用,且这种作用呈时间剂量依赖关系,处理24、48和72h的IC50值分别为20.0、18.8和8.8μmol/L.流式细胞术分析显示,15、30、35μmol/L土贝母皂苷处理5h,HeLa细胞G2/M期细胞数从9 80%分别增加到21 90%、25 92%和27 00%;处理12h,G2/M期细胞数增加更显著,从8 20%分别增加到21 40%、31 15%和34 55%.40μmol/L土贝母皂苷处理一定时间,形态学检查发现细胞核明显皱缩、核染色质凝集边聚等特征,流式细胞术检测发现凋亡峰,DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显的梯形条带.结论:土贝母皂苷使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡可能在其抗肿瘤作用中具有重要意义.【总页数】5页(P346-350)【作者】杨萍;于廷曦;马润娣;于立坚;苏伟明;邵海艳;廖铭能;黄来珍【作者单位】湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025;湛江海洋大学广东省海洋药物重点实验室,广东,湛江,524025【正文语种】中文【中图分类】R979.1因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

211025964_褪黑素联合顺铂对宫颈癌HeLa_细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

211025964_褪黑素联合顺铂对宫颈癌HeLa_细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 2 期 311 ~ 317Current Biotechnology ISSN 2095‑2341研究论文Articles褪黑素联合顺铂对宫颈癌HeLa 细胞增殖、凋亡及侵袭的影响沈云燕 , 邱琦*苏州大学附属第二医院门诊办公室,江苏 苏州 215004摘要:探究了褪黑素(melatonin , MLT )联合顺铂(cisplatin , DDP )对宫颈癌HeLa 细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。

体外培养宫颈癌HeLa 细胞,利用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium , MTT)法测定MLT 、DDP 及其联合使用对宫颈癌HeLa 细胞增殖的影响;将HeLa 细胞分为对照组、褪黑素组、顺铂组和联合组;其中褪黑素组采用2.5 mmol ·L -1的褪黑素处理细胞;顺铂组采用5 μg ·mL -1的顺铂处理细胞;联合组采用2.5 mmol ·L -1的褪黑素+5 μg ·mL -1的顺铂联合处理。

采用克隆形成实验、流式细胞仪、划痕实验和Transwell 小室实验分别检测各组HeLa 细胞的增殖、凋亡、侵袭情况,蛋白质印迹法检测Ki -67、PCNA 、Bcl -2、Bax 、N 钙粘蛋白(N -cadherin )、E 钙粘蛋白(E -cadherin )和波形蛋白(Vimentin )蛋白表达情况。

MTT 结果显示MLT 、DDP 可以显著抑制宫颈癌HeLa 细胞的增殖(P <0.05),且随着使用浓度的升高抑制率显著升高;相比单独使用MLT 、DDP ,联合使用MLT 和DDP 可以显著升高对HeLa 细胞增殖的抑制率(P <0.05)。

相比对照组,褪黑素组和顺铂组细胞克隆形成率、单位面积侵袭细胞数目、划痕愈合率以及Ki67、PCNA 、Bcl -2、E -cadherin 蛋白相对表达水平均降低(P <0.05),细胞凋亡率和蛋白Bax 、N -cadherin 、Vimentin 相对表达水平升高(P <0.05)。

利用MTT法测定抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果.doc

利用MTT法测定抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果.doc

利用MTT法测定抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果摘要:目的:采用唾哇蓝(MTT)比色法来检测Hela细胞相对数和相对活力,利用已知浓度细胞培养后的吸光度生成细胞成长趋势曲线,从而推测抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果。

方法:采用MTT法先测出一组Hela细胞浓度的吸光值的指数方程,同时培养加入不同浓度的顺铂的Hela细胞,最后根据指数方程来计算不同浓度的顺铂抑制后的Hela细胞数量。

结果:抗癌药物顺铂对Hela 细胞增殖有抑制效果,不同浓度的顺铂抑制的效果都不一样,几乎呈线性关系。

结论:采用MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果;顺铂对癌细胞的增殖有一定的抑制作用。

关键词:MTT比色法顺铂Hela细胞前言检测细胞存活与增殖,过去常用的方法有染料排斥法和掺入同位素的释放法。

前者易受主观因素影响,误差大;后者因放射线同位素污染环境,并需要价格昂贵的仪器设备,整个过程所需时间长,实际应用受到限制。

1983年Mos- manntl〕首创了MTT比色分析法,其基本原理是活细胞线粒体脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色甲瓒(Formazan),从而可用比色法推测活细胞浓度〔1〕。

由于MTT法简单、灵敏、稳定;其检测结果与同位素掺入法有良好的一致性,同时又可避免同位素污染及特殊设备的需要,故可代替同位素掺入法,有效地应用于淋巴细胞转化[2j,IL一2[a],抗肿瘤药物的筛选等研究中。

我们以检测抗癌药物顺铂对Hela细胞增殖活性的抑制效果为例,对MTT法的操作步骤及条件进行了探讨,还探讨一下不同浓度的顺铂对癌细胞抑制效果。

1材料与方法1.1细胞培养将吹打的单细胞悬液调整细胞浓度约为500000个/ML,再稀释细胞浓度直到每孔的细胞约为10000个、5000个、2500个、1250个L、625个等这五个梯度,将其接种到96孔板内,一般同一浓度的细胞接种4孔作为重复实验,同时分别做一组空白对照和一组未知细胞浓度;与此同时,制造一组药物处理组细胞,有调整细胞浓度为20000~30000/ML,每孔接入200ul,使每孔细胞数为5000个左右,最后同时放到培养箱内培养,24~36h后吸掉药物处理组的培养液加入不同浓度梯度的顺铂(1 ug/ml、5 ug/ml、10 ug/ml、15ug/ml)〔2〕各200ul,继续培养。

利用MTT法测定不同浓度顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果.doc

利用MTT法测定不同浓度顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果.doc

利用MTT法测定不同浓度顺铂对Hela细胞增殖的抑制效果摘要:目的:观察不同浓度顺铂对Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨出最适合用于抑制Hela增殖的浓度梯度。

方法:采用MTT比色法对经不同浓度顺铂处理后的Hela细胞进行测定,检测不同浓度顺铂对细胞增殖的抑制情况。

结果:0.3~1μg/mL浓度的顺铂对Hela细胞的增殖主要起到促进作用;1~7.5μg/mL梯度内的顺铂作用不清晰,而7.5~80μg/mL这一浓度梯度内的顺铂则都是起抑制作用,且抑制作用随浓度升高而增强;只是在7.5~25μg/mL这一浓度梯度内,不同浓度顺铂间的抑制作用存在较大差异,而在25~80μg/mL这一范围内顺铂的抑制作用相差不大。

结论:高浓度顺铂对Hela细胞的增殖确实有抑制作用,而低浓度顺铂则不然,所以通过归结之后可知,较适合用于抑制Hela细胞增殖的顺铂梯度应在10~25μg/mL之间,可以是10μg/mL,15μg/mL,20μg/mL,25μg/mL。

关键词:MTT法,顺铂,Hela细胞,增殖,抑制MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazo-liumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,是一种黄颜色的染料。

MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法;其检测原理是:外源性MTT在哺乳类动物类活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶的作用下还原为水不溶性的蓝紫色(或蓝色)结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中;在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比[1]。

二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,因此用酶联免疫检测仪在490nm或570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。

而死细胞中不含琥珀酸脱氢酶,因此加入MTT 不会有反应。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

叠氮胸苷增强顺铂对HeLa细胞敏感性的实验研究

叠氮胸苷增强顺铂对HeLa细胞敏感性的实验研究
f m e p a tc ta so ma in o e r tm el/p o e i r n t e r n o l si r n f r to fn u a se c ls r g n t s i h o l o
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土贝母皂苷对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响

土贝母皂苷对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响

·论著·土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖及细胞周期的影响晁旭 赵英永 魏敏慧 党琳 马晓军 王文娟【摘要】 目的 探讨土贝母皂苷-Ⅱ对人肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期的影响及其抗肿瘤效应。

方法 用不同浓度土贝母皂苷-Ⅱ0、2、4、6、8、10、12μg/ml处理HepG2细胞后,MTT法检测细胞生长的抑制率,荧光染色和流式细胞术分别观察凋亡细胞形态和细胞周期的变化。

同时,以H22肝癌小鼠模型初步探讨土贝母皂苷-Ⅱ的抗肿瘤作用。

结果 土贝母皂苷-Ⅱ能剂量依赖性地抑制HepG2细胞生长,24-h半数抑制剂量(IC50)为4.05μg/ml。

HepG2细胞经土贝母皂苷-Ⅱ处理后,呈现典型的凋亡细胞形态,G2/M期细胞数量增加,而G0/G1期细胞数明显减少。

体内抗肿瘤实验结果证明,土贝母皂苷-Ⅱ对肿瘤的生长有显著的抑制作用。

结论 土贝母皂苷-Ⅱ可能是通过使肿瘤细胞滞留于G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖。

【关键词】 土贝母皂苷-Ⅱ;细胞增殖;细胞周期【中图分类号】 R966 【文献标识码】 A 【文章编号】 0253-3685(2012)15-1740-03Effects of tubeimoside-Ⅱon proliferation and cell cycle of human hepatocellular carcinoma cell lineHepG2 CHAO Xu,ZHAO Yingyong,WEI Minhui,et al.Shanxi College of Traditional ChineseMedicine,Xianyang 712046,CHINA【Abstract】 Objective To investigate the effects of tubeimoside-Ⅱon proliferation and cell cycleof human hepatocellular carcinoma cell line HepG2and evaluate its anti-tumor effect in vivo.MethodsAfter HepG2cells were treated with different concentrations of tubeimoside-Ⅱ0,2,4,6,8,10,12μg/ml,the inhibitory rate of cell growth was measured by MTT assay,and the shape of apoptoticcells and cell cycle were detected by fluorescence staining and flow cytometry,respectively.Moreover,the anti-tumor effect of tubeimoside-Ⅱin vivo was primarily evaluated by establishing hepatocellularcarcinoma model of H22rats.Results Tubeimoside-Ⅱinhibited cell growth in a does-dependentmanner and the IC50value was 4.05μg/ml.After HepG2cells were treated with tubeimoside-Ⅱ,cellappearance presented typical apoptotic phenomenon with increasing cell number in G2/M phase anddecreasing cell number in G0/G1phase.Anti-tumor experiment in vivo showed that tubeimoside-Ⅱcould obviously suppress tumor growth.Conclusion Tubeimoside-Ⅱcan inhibit cell proliferationprobably via promoting tumor cells to stagnate in G2/M phase.【Key words】 Tubeimoside-Ⅱ;Cell proliferation;Cell cycle[Jiangsu Med J,August 2012,38(15):1740-1742.] 基金项目:陕西省教育厅科研计划项目(11JK0682)作者单位:712046 陕西中医学院基础医学院(晁旭、魏敏慧、党琳、马晓军、王文娟);西北大学陕西省生物医药重点实验室(赵英永) 土贝母是一种传统中药,曾被用来治疗肿瘤、炎症和蛇虫叮咬等[1]。

胡桃醌及其与顺铂联用对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响

胡桃醌及其与顺铂联用对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响

胡桃醌及其与顺铂联用对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响张巍;朱文赫;李妍;赵行宇;罗军;徐俊杰;姜艳霞;金瑛【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2013(27)4【摘要】目的探讨胡桃醌及其与顺铂联合用药对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响.方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,加入胡桃醌10 ~200 μmol· L-1或者胡桃醌20 μmol· L-1+顺铂20 μmol· L-1继续培养8h或24 h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法测定细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞早期凋亡率.结果胡桃醌10,20,50,100和200 μmol·L-1与HeLa细胞作用24 h,随着胡桃醌浓度的增加,光镜下HeLa细胞逐渐变小、变圆;HeLa细胞存活率明显降低,分别由对照组的(100.0±0.0)%降低至(87.2±5.6)%,(66.2±4.8)%,(54.5±4.9)%,(42.5±6.4)%和(32.0±2.2)%(P<0.05,P <0.01);HeLa细胞G2/M期百分率逐渐增加,分别由对照组的(7.5±1.2)%增加到(12.9±1.2)%,(16.2±2.8)%,(23.6±3.9)%,(34.2±4.2)%和(52.6±7.8)%(P<0.05,P <0.01).胡桃醌联合顺铂作用24 h,光镜下脱壁细胞增加,细胞形态变圆,较胡桃醌和顺铂单用组更加明显;联合用药组细胞存活率为(35.0±6.1)%,较胡桃醌和顺铂单用组[(78.2±12.5)%和(58.5±10.9)%]明显降低(P<0.01).胡桃醌联合顺铂作用8h,HeLa细胞早期凋亡率为(24.6±5.7)%,高于胡桃醌和顺铂单用组[(6.7±1.5)%和(0.4±2.8)%](P<0.01).结论胡桃醌可抑制HeLa细胞存活,促进HeLa细胞凋亡,与顺铂联合使用具有协同作用.【总页数】5页(P663-667)【作者】张巍;朱文赫;李妍;赵行宇;罗军;徐俊杰;姜艳霞;金瑛【作者单位】吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生理教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院生物化学教研室,吉林吉林132013;吉林医药学院药物化学教研室,吉林吉林132013【正文语种】中文【中图分类】R285;R979.1【相关文献】1.胡桃醌联合顺铂对宫颈癌 HeLa 细胞的促凋亡作用及其机制 [J], 陈默然;赵行宇;罗军;朱文赫;李妍;张巍2.异常黑胆质成熟剂总酚与顺铂、多西他赛联用对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响 [J], 王国宁;李华;陈珂瑶;古扎丽努尔·阿不力孜3.BGJ398与顺铂单独或联合作用对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制研究 [J], 宋前燕;毛熙光4.雷公藤甲素联合顺铂对人宫颈癌顺铂耐药细胞株Hela/DDP生长、凋亡及侵袭的影响 [J], 周露秋;李艳;刘先喜;毛熙光5.雷公藤甲素联合顺铂对人宫颈癌顺铂耐药细胞株Hela/DDP生长、凋亡及侵袭的影响 [J], 周露秋;李艳;刘先喜;毛熙光因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

胡桃醌联合顺铂对宫颈癌 HeLa 细胞的促凋亡作用及其机制

胡桃醌联合顺铂对宫颈癌 HeLa 细胞的促凋亡作用及其机制

胡桃醌联合顺铂对宫颈癌 HeLa 细胞的促凋亡作用及其机制陈默然;赵行宇;罗军;朱文赫;李妍;张巍【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》【年(卷),期】2016(042)005【摘要】Objective:To explore the mechanism of promotion effect of juglone combined with cisplatin on the apoptosis of human cervical cancer HeLa cells,and to clarify the effects of its associated signal transduction pathways.Methods:The HeLa cells at logarithmic growth phase were divided into control group,juglone group, cisplatin group and juglone combined with cisplatin group (combined treatment group).The inhibitory rates of proliferation of HeLa cells were detected by MTT assay.The apoptosis was detected by Hoechst 33258 staining. The expressions of Bcl-2, Bax and caspase-3, AKt, and pAKt were detected by Western blotting method. Results:The MTT results showed that the HeLa cell proliferation at 24,48 72 h in each drug group was inhibited;compared with control group,the profileration of HeLa cells in juglone group and cisplatin group was significantly inhibited,especially in combined group. Compared with single drug group,the inhibitory effect in combined treatment group was more significantly.After treatment for 12 h,the typical morphological changes of apoptosis were found in juglone group and cisplatin group by Hoechst 33258 staining,especially in combined treatment group. The Western blotting results showed that the expression levels of Bcl-2 andpAKt in HeLa cells in juglone group and cisplatin group 12 h after treatment were decreased obviously,whereas the expression levels of Bax,Caspase-3,and&nbsp;AKt were increased significantly, especially in combined treatment group compared with control group.Conclusion:Juglone combined with cisplatin could inhibit the PI3K/AKt pathway,thereby promoting the apoptpsis of HeLa cells.%目的:探讨胡桃醌与顺铂联合应用对宫颈癌 HeLa 细胞促凋亡作用的机制,阐明其对相关信号转导通路的作用。

2,3′,4,4′-四甲氧基联苯对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

2,3′,4,4′-四甲氧基联苯对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响

2,3′,4,4′-四甲氧基联苯对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响隋新;孙志忠;天亮;龚显峰【期刊名称】《实用肿瘤学杂志》【年(卷),期】2011(25)4【摘要】目的研究2,3′,4,4′-四甲氧基联苯(2,3′,4,4′-tetramethoxybiphenyl,TMBP)对HeLa细胞的体外增殖抑制作用、凋亡诱导作用以及对相关蛋白Caspase-3表达的影响.方法用体外培养HeLa细胞与不同浓度TMBP作用,应用MTT法、荧光染色法、DNA凝胶电泳及Western blot法观察TMBP对细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用.结果 TMBP可时间、剂量依赖性的抑制HeLa细胞生长.100M的TMBP处理24h的细胞,Hoechst 33258荧光染色后可见细胞形态学变化.不同浓度的TMBP处理细胞36h后,出现明显的DNA ladder.Western blot法检测发现Caspase-3酶原蛋白被剪切.结论 TMBP可抑制人宫颈癌HeLa细胞生长并诱导其凋亡,作用机制可能与Caspase-3的活化有关.%Objective To study the effects of 2,3',4,4' - tetramethoxybiphenyl( TMBP )on the anti-proliferation, apoptosis and expression of procaspase - 3 in human cervical cancer HeLa cells in vitro. Methods HeLa cells were cultured in vitro and were incubated by TMBP in different concentrations. The cells were detected with MTT assay , fluorescent staining, DNA fragmentation assay , Western hlot assay to ohserve the anti - proliferation and apoptosis - inducing effects , respectively. Results TMBP induced HeLa cells apoptosis in a time - and dose - dependent manner. Treated with 100 M TMBP for 24 h, nuclearmorphological changes were observed by Hoechst 33258 staining. DNA fragmentation became obvious after various concentration TMBP - treated for 36 h.Cleavages of procaspse - 3 protein were observed with western blot assay. Conclusion TMBP could inhibited proliferation and induce apoptosis in HeLa cells,which may he related to the activation of caspase - 3.【总页数】4页(P325-328)【作者】隋新;孙志忠;天亮;龚显峰【作者单位】黑龙江大学化学化工与材料学院,哈尔滨,150080;黑龙江大学化学化工与材料学院,哈尔滨,150080;黑龙江大学化学化工与材料学院,哈尔滨,150080;黑龙江大学化学化工与材料学院,哈尔滨,150080【正文语种】中文【中图分类】R961;R73.36【相关文献】1.5,7-二甲氧基白杨素对体外培养人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响 [J], 刘昵;邹祝平;陈忠东2.β-榄香烯联合多西紫杉醇对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响★ [J], 曹爱玲;周剑;章永;曹喆;舒诚荣3.桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响 [J], 左亚奇; 高志红; 庞策; 刘赛娜; 张晓丽; 孙转友; 甄攀4.沉默ENO1对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响 [J], 蔡鑫;熊蓉;范佳杨;汤亚兰;刘康;刘先平;岳秋菊;梁婷;罗岳西5.人脐带间充质干细胞对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制 [J], 王琛;田君;程海玲因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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