水生生态系统藻类毒性实验

常用的测试指标有：干重、光密度、细胞计数、叶绿素a 含量的测定（减压过滤一定体积的藻类培养液到玻璃纤维 滤片上，加入1mL的MgCO3悬浮液后将水抽滤干净，把滤片 放到一个组织研磨管内的底部，加入2mL的90%的丙酮，弱 光下淹没1-2min，再用5mL的90%的丙酮把残留的样品洗入 15mL的有螺旋盖的离心管中，离心（2000g）1-5min，静 置于暗处1-2h，是色素充分被抽提，离心，将上清液在分 光光度计上，用1cm的比色皿分别读取750、663、645和 630波长处的吸收率，并以90%的丙酮作对照校正吸光度， 依据P298的公式计算得叶绿素的浓度。）
实验结果与报告
计算EC50设各组平行样品生物量的平均值分别为V空白,，V1， V2，V3，V4,，…，Vn，在半对数坐标纸上以受试毒物浓度 为纵坐标y，以（ V空白- Vn ）/ V空白为横坐标x，用内插 法计算生物量下降50%的毒物浓度，即相应时间段的EC50。
试验方法
1 水样的加工制备 利用滤膜在减压条件下过滤，以除去水样中原有的藻类生 物，在108kPa和121oC之下持续30min，高压处理水样， 杀灭水样中所有生物，以便测定水样中的全部营养。 2 藻类培养基的配制 分别取常量营养盐的每一种化合物储备液1mL和微量元素EDTA的混合液1mL加入去离子水中，定容至1000mL得标 准培养基，高压灭菌后分装三角瓶中备用。 3 藻类预培养 将事先准备的藻种移种至盛有培养基的三角瓶中，在试验 确定的温度和光强条件以及无菌条件下，培养2-3周，使 藻类达到同步生长阶段。用离心机离心收集培养物中的藻 细胞，去除上清液，在沉积的藻细胞中加入 10mLNaHCO3溶液（15g/L）使藻细胞悬浮于此溶液中， 再次离心，悬浮，再离心，悬浮，经此处理的藻悬浮物作 为试验藻接中原。
4 预备试验 目的在于探明毒物对藻类影响的半数有效浓度（EC50）的 范围，为正式试验打基础。 5 正式试验 (1) 试验浓度的选择 按等对数间距取5-7个毒物浓度，其中必须包括EC50并在 此浓度上下至少各设2个浓度，另设一个不含毒物的空白 对照。各浓度组均设3个平行样。 （2）种的制备和接种量 取上述达到同步生长的藻类培养液充分摇匀，取样计数细 胞密度后，用吸管转移相应体积的细胞悬浮液到受试水样 中。 （3）生物量的测定测定藻类生长的指标有多种，要考虑所 有相关的环境因素以及自己试验的目的和条件来选择指标
水生生态系统藻类毒性试验ห้องสมุดไป่ตู้
不常用词解释
半对数坐标纸:横坐标或纵坐标轴是按照相等的指 数变化来增加的，（距离来说：如果每1cm代表 10的1次方增加，则坐标轴刻度依次为0，10， 100，1000，10000。。。。） 内插法:
实验原理
生物测试能够弥补化学和物理的检验的不足，目 前水生生态系统藻类毒理试验已经成为许多国家 对环境质量监测的标准方法之一而得到广泛应用， 影响藻类生长的主要因子包括阳光、二氧化碳、 温度、PH及氮、磷、微量元素等营养成分。水环 境中的这些生态因子的变化会刺激或抑制藻类的 生长，而导致水体初级生产力的变化。如果外来 有毒有害化学物质进入水体，藻类的生命活动就 会受到影响，生物量也随之发生变化。