放射自显影放射自显影autoradiography放射自显影的原理是利用

放射自显影

放射自显影(autoradiography)

放射自显影的原理是利用放射性同位素所发射出来的带电离子(α或β粒子)作用于感光材料的卤化银晶体，从而产生潜影，这种潜影可用显影液显示，成为可见的"像"，因此，它是利用卤化银乳胶显像检查和测量放射性的一种方法。

放射性核素的原子不断衰变，当衰变掉一半时所需要的时间称为半衰期。各种放射性核素的半衰期长短不同(表)，在自显影实验中多选用半衰期较长者。对于半衰期较短的核素，应选用较快的样品制备方法，所用剂量也应加大。

表自显影实验中常用核素的半衰期与能量名称半寿期粒子类型能量(MeV) 名称半寿期粒子类型能量(MeV)

3H 12.3 yr β 0.018 45Ca 152 d β 0.26

11C 20 min β 0.981 59Fe 45 d β 0.46

14C 5700 yr β 0.155 γ 1.30

32P 14.3 d β 1.71 60Co 5.3 yr β 0.308

35S 87.2 d β 0.167 64Cu 12.8 hr β 0.657

131I 8.0 d β0.25 γ 1.35

放射自显影技术

放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影术（radioautogra phy；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量，放射自显影的切片还可再用染料染色，这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。这种技术与电镜样品处理，则为电镜放射自显影。由于有机大分子均含有碳、氢原子，故实验室一般常选用14C和3H标记。14C和3H均为弱放射性同位素，半衰期长，14C为5730年，3H为12.5年。一般常用3H胸腺嘧啶脱氧核苷（3H-TDR）来显示DNA，用3H尿嘧啶核苷（3H-UDR）显示RNA；用3H氨基酸研究蛋白质，研究多糖则用3H甘露糖、3H岩藻糖等。

放射自显影法

autoradiography 放射自显影法。是使用照相乾板或乳剂来观察生物体内放射性物质的摄取，借以测量生物体内物质的分布、转移、代谢的细胞化学和组织化学的方法。即摄取了特定的放射性物质的压展标本和切片标本或活体在暗室中与照相乳剂紧密接触放置。在由生物体内摄取的放射性物质发出的射线而感光的部位上，经过显影，黑色呈像的银粒子就显示出来了。根据观测水平的不同可分为宏观放射自显影法（可见放射自显影法）、显微放射自显影法（光学显微镜显示的放射自显影法）、超微放射自显影法（电镜显示的放射自显影法）。宏观放射自显影法除用于组织切片内物质分布的检查外，也与纸层析法和电泳法一起用于微量物质的测定。所用的放射性核素，宏观放射自显影法有131I、32P、35S、90Sr、59Fe、45Ca、14C；而显微和超微放射自显影法主要是使用14C和3H。