茶叶中茶多酚含量的测定
茶叶中茶多酚的检测方法
茶叶中茶多酚的检测方法,我们必须对茶多酚有一个比较详细的了解茶多酚因为其独特的分子结构,有很强的氧化性以及螯合性,所以能很好的清除人体内的自由基,起到抗氧化、抗衰老的效果;同样也因为其分子结构中的酚羟基,所以茶多酚有很好的螯合性能,能够与蛋白质,金属离子相结合。
据了解,茶多酚能与20多种离子产生络合,与其中10多种产生沉淀,再者,络合产物很多会产生明显的色泽变化。
所以茶多酚的检测方法有很多:1,蛋白质沉淀法:利用与蛋白质的络合沉淀特征检测茶多酚的含量;2,金属例子螯合法:就像GB/T8313-2002茶叶和GB/T21733-2008茶饮料中的检测方法一样,利用多酚羟基与铁离子的螯合变成蓝紫色的特性,在540nm出进行检测;3,氧化法:高锰酸钾与茶多酚的氧化滴定,但是这种方法误差较大,所以目前已经用的很少了;再就是GB/T8313-2008的福林酚法,利用福林酚能将茶多酚氧化然后自己被还原呈蓝色的特征。
目前使用的比较多的就是GB/T8313-2002的酒石酸亚铁法与GB/T8313-2008中的福林酚试剂法!酒石酸亚铁法作为茶多酚检测的经典方法在国内被应用了几十年,采用3.913的经验系数进行茶多酚的检测,但是在“食品添加剂茶多酚”的检测标准中则是以没食子酸作标准曲线,系数2.78。
同样的茶多酚检测,为什么会有不同的系数呢,很多人或许会疑惑?!但实际上3.913的的系数是以茶叶的乙酸乙酯分离物作为标定物质作标准曲线的,因为乙酸乙酯分离物中不仅仅包括了多酚类物质,还包括了一些其他内涵成分,所以检测结果会偏大,目前主要用于饮料行业中,而2.78的系数则主要用在植物提取物茶多酚领域,其主要区别在于采用的标定物不一致!当然酒石酸亚铁法也有自身的缺点:茶多酚是一种复合物,并非单一组分,其中包括了儿茶素,黄酮类,花青素等等,不同的组分与铁离子络合颜色并非完全一致,所以对于一般成分比较复杂的植物多酚并不适用!再来谈谈福林酚法:福林酚法主要利用福林酚的强氧化性,与多酚反应变蓝,在765nm处进行检测,当然了,福林酚还用于蛋白质的检测中,正是因为这点,所以福林酚并不能有效区分茶多酚,一些还原性氨基酸,植物中非多酚类酚性物质,抗坏血酸等等,这也是它的局限性。
茶叶中茶多酚含量的测定
本标准适用于茶叶中茶多酚含量的测定。
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物,均称茶多酚。
1 原理茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
2 仪器和用具实验室常规仪器及下列各项:2.1 分析天平:感量0.0001g。
2.2 分光光度仪。
3 试剂和溶液所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
3.1 酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L(溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。
3.2 pH7.5磷酸盐缓冲液:3.2.1 1/15M磷酸氢钠: 称取23.377g磷酸氢二钠(GB 1263-77),加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸二氢钾: 称取9.078g磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钾溶液85ml和1/15m的磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
4 操作方法4.1 取样按GB 8302-87《茶取样》的规定取样。
4.2 试样的制备按GB 8303-87《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
4.3 测定步骤4.3.1 试液的制备按GB 8305-87《茶水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
4.3.2 测定准确吸取上述(4.3.1)试液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液(3.1)5mL,充分混合,再加pH7.5的缓冲液(3.2)至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
5 结果计算5.1 计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:A×1.957×2 L1茶多酚(%)=──────×─────×100100 L2×M×m式中: L1——试液的总量,mL;L2——测定时的用液量,mL;M——试样的质量,g;m——试样干物质含量百分率,%;A——试样的吸光度;1.957——用10mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
茶叶茶多酚含量的测定
茶叶茶多酚含量的测定茶叶茶多酚含量的测定方法(以农贸一班2组数据为例)一、以没食子酸含量做标准曲线进行计算:上图中的横坐标为每25ml没食子酸标准液中没食子酸的含量,纵坐标为吸光度值。
样品待测液含量对应关系:25ml待测液中茶多酚含量=10ml1/10=0.2g茶叶中茶多酚总含量的1/100。
由对应关系进行公式推导:茶叶样品中茶多酚含量(%)=浸提液中茶多酚的含量/(样品质量*干物质含量)浸提液中茶多酚的含量=1ml中茶多酚含量*10ml=10ml稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml待测液中茶多酚的含量*10*10ml茶多酚含量(%)=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。
同时由于:A=K*X+b,所以此公式应该调整为:茶多酚含量(%)=[(A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量,本实验为-0.0134V----浸提液体积本实验为10mld----稀释因子,在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中,d=10L----标准曲线斜率m----样品质量,本实验为0.2m1----样品干物质含量,本实验为80%详细过程如下:A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784平均光度值A=(A1+A2+A3)/3=0.830将A值带入公式:茶多酚含量(%)= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%二、以没食子酸浓度作标准曲线上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度,纵坐标吸光度A此时的计算公式推导过程为:茶叶样品中茶多酚含量(%)=0.2g茶叶中茶多酚含量/(0.2*干物质含量)0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10浸提液浓度=10ml稀释液浓度*10010ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml25ml待测液浓度可以由标准曲线公式:A=L*X+b测得。
茶叶中茶多酚的检测
茶叶中茶多酚的检测一、原理:茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70℃的水浴中提取,福林酚试剂氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色,最大吸光度波长λ为765nm,用没食子酸做矫正标准定量茶多酚。
二、仪器分析天平:感量0.001g;水浴:70℃±1℃;离心机:转速3500r/min分光光度计三、试剂本标准所用水均为重蒸馏水,除特殊规定外,所用试剂为分析纯。
1、甲醇2、碳酸钠3、甲醇水溶液(体积比):7+34、福林酚试剂:试剂甲(①4%碳酸钠溶液;②0.2NNAOH溶液;③1%硫酸铜溶液;④2%酒石酸钾钠;(1)将试剂①和②等体积混合;(2)将试剂③和④等体积混合;(3)将(1)和(2)混合溶液按50:1比例混合。
)试剂乙(取10ml1%的乙液于100ml的容量瓶,加水定容)。
(4)将试剂甲和试剂乙按1:1的比例现配成福林酚。
5、将(4)中的福林酚20ml转移到200ml容量瓶中,用水定容并摇匀。
6、7.5%碳酸钠(质量浓度):称取37.50g±0.01g碳酸钠,加适量水溶解,转移至500ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀。
7、没食子酸标准储备溶液(1000μg/ml):称取0.110g±0.001g没食子酸(GA,相对分子质量188.14),于100ml容量瓶中溶解并定容至刻度,摇匀(现配)。
8、没食子酸工作液:用转移管分别移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml的没食子酸标准储备液溶液于100ml容量瓶中,分别用水定容至刻度,摇匀,浓度分别为10,20,30,40,50μg/ml。
四、操作方法1、供试液的制备母液的制备:称取0.2g(精确到0.0001g,本次实验0.2331g)均匀磨碎的式样于10ml的离心管中,加入在70℃中预热过的70%的甲醇溶液ml,用玻璃棒充分均匀湿润,立即移入70℃水浴中。
浸提10min(隔5min搅拌一次),浸提后冷却至室温,转入离心机在3500r/min转速下离心10min,将上清液转移至10ml容量瓶。
实验四茶叶中茶多酚含量的测定
实验四茶叶中茶多酚含量的测定——高锰酸钾直接滴定法一、目的:掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作二、原理茶叶中茶多酚易溶于热水,在用靛红作指示剂的情况下,样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数,可计算茶多酚的含量。
三、仪器与试剂仪器:分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂:1、0.1%靛红溶液:称取靛红1g加入少量水搅匀后,再慢慢加入相对密度为 1.84的浓硫酸50mL,冷却后用蒸馏水定容至1000mL,如果靛红不纯,可下法磺化处理是:称取靛红1g,加浓硫酸50mL,在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h,用蒸馏水定容至1000mL,过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液:准确称取草酸6.3034g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液:称取AR的高锰酸钾1.27g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL,放入250ml锥形瓶中(平行3份),加入蒸馏水50mL,再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL,摇匀,在70~80℃水浴中保温5分钟,取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴,待红色消失后再滴第二滴,以后可逐渐加快,边滴边摇,待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
四、测定步骤1、供测试液的准备:准确称取茶叶磨碎样品1g,放在250mL锥形瓶中,加入沸蒸馏水80mL,在沸水浴中浸提30分钟,然后抽滤、洗涤,滤液倒入100mL容量瓶中,冷至室温,最后用蒸馏水定容至100mL,摇匀。
2、测定:取200ml蒸馏水放入白瓷皿中,加入0.1%靛红溶液5mL,再加入供测试液5mL,开动磁力搅拌器,用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定,滴定速度以1滴/s为宜,接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止,记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶茶多酚测定
茶茶多酚测定茶茶多酚测定Tea—Determination of tea polyphenols contentGB/T8313—2002代替GB/T8313—19871 范围本标准规定了对茶叶中茶多酚测定的原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计算方法。
本标准适用于茶叶中茶多酚含量的测定,不适用于茶叶提取物制品中茶多酚的测定。
2 引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
本标准出版时,所示版本均为有效。
所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T8302—2002 茶取样GB/T8303—2002 茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定GB/T8312—2002 茶咖啡碱测定3 定义本标准采用下列定义。
茶多酚 tea polyphenols茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚类化合物。
4 原理茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
5 仪器和用具实验室常规仪器及下列各项:5.1 分析天平:感量0.001g。
5.2 分光光度仪。
6 试剂和溶液所用试剂应为分析纯(AR),水为蒸馏水。
6.1 酒石酸亚铁溶液:称取1.0g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5.0g酒石酸钾钠(C14H4O6KNa·4H2O),用水溶解并定容至1L(低温保存有效期10天)。
6.2 PH7.5磷酸盐缓冲液6.2.1 1/15mol/L磷酸氢二钠:称取23.9g十二水磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),加水溶解后定容至1L。
6.2.2 1/15mol/L磷酸二氢钠:称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钠(KH2PO4)9.08g,加水溶解后定容至1L。
取上述1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液85mL和1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液15mL混合均匀。
7 操作方法7.1 取样按GB/T8302的规定。
茶叶中茶多酚的提取和测定
茶叶中茶多酚的提取和测定一,主要仪器、药品及材料仪器: 722 - E可见分光光度计,干燥箱, 电子天平, pH计, 容量瓶, 真空泵, 布氏漏斗。
化学试剂:无水硫酸钠,硫酸亚铁( FeSO4 ·7H2O) ,酒石酸钾(KNaC4H4O6 ·4H2O) ,磷酸氢二钠(Na2HPO4 ·12H2O),磷酸二氢钾(KH2 PO4 ) ,乙酸乙酯。
材料:茶叶二,茶多酚的提取工艺。
采集茶叶→去灰尘,洗干净→晾干→干茶叶→粉碎→90℃接近沸水中搅拌浸提→过滤→乙酸乙酯萃取→得有机相→无水硫酸钠干燥→减压蒸馏→得黄色粉末状茶多酚→称量。
1 预处理。
粉碎干茶叶:将采集来的茶叶洗净、晾干,烘干,最后粉碎。
粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高。
由于试验条件的限制,用剪刀代替粉碎机,将干茶叶剪碎,并且用研钵研细。
干茶叶量为50. 00g。
2 提取。
在众多的提取方法中,选用了溶剂提取法,具体过程是称取经过预处理的干茶叶末30. 00g,加250mL 90℃接近沸水中搅拌浸提,过滤,先后用250mL 的乙酸乙酯萃取两次。
合并两次有机相,再用无水硫酸钠干燥,减压蒸馏除去乙酸乙酯溶剂得黄色粉末状茶多酚。
称量为0. 2945g,提取率为0. 98%。
三,测定1 定性测定。
从外观上看,为黄色粉末状。
物理性能为,易溶于水及乙醇,味苦涩。
2 定量测定方法。
光度法———酒石酸亚铁比色法。
其测定原理是茶多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
3 茶多酚标准溶液的配制。
称取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg纯品的标准溶液(mg/mL) 。
4 茶多酚的含量。
茶多酚标准曲线的绘制。
分别吸取茶多酚标准溶1.0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶中,各加水至10mL,再加酒石酸亚铁10mL,加入pH为7. 5的磷酸缓冲液至刻度,混匀后用1㎝比色皿,以空白试剂作参比,于540nm处测定吸光度(A) ,绘制出标准曲线表1茶多酚标准曲线y = 321. 16x + 0. 003R2 = 1。
茶多酚的检测方法
茶多酚的检测方法茶多酚是指茶叶中的一类重要营养成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降低胆固醇等多种保健作用。
茶多酚的检测方法可以分为传统方法和现代方法两种。
1. 传统方法:传统方法主要是基于化学反应原理进行测定,如铁离子还原法、显色法、比色法和滴定法等。
铁离子还原法:茶多酚具有还原性,可以通过与铁离子反应生成蓝色络合物的程度来测定其含量。
该方法操作简单,但结果受干扰较大,准确性较差。
显色法:茶多酚可以与某些试剂发生着色反应,形成显色产物,如费林试剂、氢氧化钠等。
该方法操作简单,但灵敏度较低。
比色法:茶多酚可以通过与某种标准溶液进行比色来测定其含量。
这种方法简单易行,但需要标准溶液的配制和标定。
滴定法:通过滴定法测定茶多酚的总酚含量,常用的滴定剂有高锰酸钾溶液、亚硫酸钠溶液和硫酸铁溶液等。
这种方法操作简单,但耗时较长,准确性受到影响较大。
2. 现代方法:现代方法主要是基于仪器分析的方法,如色谱法、质谱法、光谱法和电化学法等。
色谱法:茶多酚可以通过色谱柱进行分离,然后使用紫外光检测器进行测定。
常用的色谱方法有高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)。
这些方法操作复杂,但精确度和灵敏度较高。
质谱法:茶多酚可以通过质谱仪进行分析鉴定,如气质联用质谱(GC-MS)和液质联用质谱(LC-MS)。
质谱方法准确性高,但设备成本较高。
光谱法:茶多酚的检测可以通过紫外-可见光谱法(UV-Vis)进行,茶多酚在紫外光区域有特征吸收峰,可以通过测定吸光度来定量。
该方法快速、简单,但对样品的要求较高。
电化学法:茶多酚可以通过电化学方法进行检测,如循环伏安法、方波伏安法和电化学阻抗法等。
这些方法操作相对简单,较具灵敏度和准确性。
无论是传统方法还是现代方法,茶多酚的检测都需要一定的样品处理过程,如提取茶多酚、去除干扰物、浓缩和分离等。
不同的检测方法在选择上需要考虑实验条件、设备要求、样品种类和检测精度等因素。
目前,现代方法在茶多酚检测上具有准确性高、快速性好、灵敏度高的特点,逐渐取代了传统方法成为主流。
茶叶中茶多酚、氨基酸的测定
测定方法:
高锰酸钾直接滴定法 酒石酸铁比色法
酒石酸铁比色法原理:
酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物,络合物溶 液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色 方法测定。
仪器:分光光度计 水浴锅,锥形瓶,容量瓶(100mL,25ml) 试剂: (1)酒石酸亚铁溶液:称取 FeSO4· 7H2O 1.000g,含 4个结晶水的 酒石酸钾钠5.000g,加蒸馏水溶解后,用蒸馏水稀释至1000mL (2)PH7.5的磷酸缓冲液
准确称取茶叶磨碎样品3g于500ml烧杯中加入沸水350ml在沸水浴中浸提45min每隔10min摇动11次趁热抽滤残渣用少量热蒸馏水洗涤2233次滤液倒入500ml容量瓶中冷却至室温用蒸馏水定容至刻度摇匀备用
茶叶中茶多酚的测定
茶多酚
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20%~35%,由约30 种以上的酚类物质所组成,通称茶多酚。 茶多酚的性质: 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯,微溶于油脂。 对热、酸较稳定,2%的溶液加热至120 ℃并保持30min, 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。
茶多酚的功效:
1)茶多酚能清除活性氧自由基,且能有效消除脂 质过氧化产物丙二醛,具有降血脂的显著功效。 2)茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色 葡萄球菌等有害菌的作用。 3)具有较强的抗放射性作用,以及在抗衰老,抑 制瘤细胞,预防心脑血管疾病等方面都显示出很 好的效应。
是一种有开发前景的天然抗氧化剂。
实验步骤
(l)样品溶液的制备方法:准确称取茶叶磨碎样品3g于 500mL烧杯中,加入沸水350mL,在沸水浴中浸提45min, 每隔10min摇动1次,趁热抽滤,残渣用少量热蒸馏水洗涤 2-3次,滤液倒入500mL容量瓶中,冷却至室温,用蒸馏水 定容至刻度,摇匀,备用。
茶叶中茶多酚的提取与含量测定方案
设计性实验茶叶中茶多酚的提取与含量测定实验方案新疆农业大学食品科学与药学学院班级:葡工162班姓名:王勇峰学号:220162712指导老师:阿不都热依木茶叶中茶多酚的提取与含量测定一.实验目的及要求1.用无害溶剂从茶叶中提取茶多酚。
2.分离、纯化茶多酚粗品,掌握溶剂提取法提取茶多酚的原理及方法。
3.定量分析茶多酚产品含量。
二.实验原理有机溶剂萃取法:有机溶剂萃取法是传统的提取工艺。
是利用茶叶中不同化合物在不同溶剂中的溶解度不同进行提取分离。
在粗茶叶萃取溶液中,除含有茶多酚以外,还含有咖啡碱、酯质、色素、植物多糖、有机酸、以及悬浮物,且茶多酚含量仅为25%~40% ,所以大多数工艺用乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂反复萃取的方法进一步除杂、纯化、精制。
茶水用氯仿萃取可得到水层和有机层,咖啡碱存在于有机层,而茶多酚则存在于水层中,根据萃取及过滤原理,将有机层和水层分别进行浓缩、萃取,即可得到相应粗产物。
三.实验仪器及药品仪器:天平;分析天平;铁架台;抽滤装置;超级恒温水浴槽;长颈漏斗一个;滤纸若干张;分液漏斗一个;100毫升的烧杯(三个);玻璃棒一个;药品:1.乙醇水溶液(50%);2.干茶叶原料;3.氯仿(分析纯);4.Na2SO4溶液馏水四.实验步骤1、温度设定:打开超级恒温水浴电源开关,使温度达到90℃2、称量:称取30克干茶叶,放在100毫升小烧杯中。
3、溶解:用量筒量取40毫升50%乙醇水溶液,倒入小烧杯中,用玻璃棒轻轻搅拌,使干茶叶完全浸润在乙醇溶液中。
4、加热:将干茶叶和乙醇水溶液的混合液置于超级恒温水浴槽中,加热20分钟。
5、过滤:将加热完毕的混合液取出,冷却到室温;用长颈漏斗对混合液进行过滤,滤除茶叶残渣。
再对残渣进行乙醇萃取.6、分离萃取:1)对分液漏斗进行试漏,调整好铁架台高度;2)用量筒量取20毫升氯仿①,置于100毫升小烧杯中;将茶叶滤液倒入分液漏斗中,再将氯仿倒入其中,再倒入少量Na2So4溶液②,轻轻摇匀,使之混合充分,静置,分层,上层应为茶多酚水溶液,呈茶色,下层为氯仿乙醇混合液,为无色。
茶多酚的测定方法
茶多酚的测定方法茶多酚(tea polyphenols)是指茶叶中所含的一类天然化合物,属于类黄酮类化合物,具有很强的抗氧化和抗癌作用。
茶多酚在茶叶中的含量与茶叶品种、制作工艺、生长环境等因素有关,因此,需要进行茶多酚的测定来评估茶叶的品质和营养价值。
目前常用的茶多酚测定方法主要包括显色法、比色法、高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法。
下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。
1. 显色法:显色法是一种简单快速测定茶多酚含量的方法。
其原理是茶多酚与铁离子(Fe3+)在酸性条件下形成可见光吸收的蓝色络合物,通过检测吸光度来测定多酚的含量。
操作步骤:a. 将茶叶样品加入酸性溶液中(如硫酸)。
b. 加入一定浓度的铁离子。
c. 加热反应液,在紫外可见光谱仪上设置波长(一般为760 nm)进行吸光度检测。
d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。
2. 比色法:比色法是一种简化的茶多酚测定方法,它使用标准化学品来检测茶叶中的茶多酚含量,适用于快速测定大批量样品。
操作步骤:a. 将茶叶样品加入醇/酸混合溶液中,并进行超声处理,使茶多酚溶解。
b. 加入一定量的比色试剂(如费尔林试剂)。
c. 在紫外可见光谱仪上设置波长(一般为760 nm)进行吸光度检测。
d. 通过标准曲线法计算样品中茶多酚的含量。
3. 高效液相色谱法(HPLC):HPLC是一种常用的茶多酚测定方法,它通过分离和定量各种茶多酚组分,能够提供更准确的结果。
操作步骤:a. 提取茶叶样品中的茶多酚。
b. 茶多酚提取物通过色谱柱进行分离,选择合适的流动相体系(如乙腈-水溶液),并设定合适的流速。
c. 通过检测波长(一般为280 nm)对各组分进行定量。
d. 通过标准曲线法计算茶叶样品中茶多酚的含量。
4. 紫外分光光度法:紫外分光光度法是一种通过茶多酚在紫外光区域(200-400 nm)的吸光特性来测定茶多酚含量的方法。
操作步骤:a. 将茶叶样品提取得到茶叶样品溶液。
酒石酸法茶多酚含量测定
二、 仪器与试剂
▪ 仪器:分光光度计、天平、1ml移液枪、100ml容量瓶*6 100ml量筒、100ml烧杯*3、10ml EP管
▪ 试剂: ▪ (1)FeSO4•7H2O 1.000g,含4个结晶水的酒石酸钾钠5.000g ▪ (2) Na2HPO4•12H2O 6.020g ,NaH2PO4•2H2O 0.500g ▪ (3)茶多酚标准品 10mg
0.2
0.4
0.6
0.8
1
坐标轴标题
微克/毫升
线性 (微克/毫升)
1.2
1.4
四、 计算
▪ 茶多酚含量 W=C/1000×100%
W
茶多酚含量%
C
所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶l)
▪ (3)儿茶素标准液。称取10mg儿茶素,用蒸馏水定容至10ml, 浓度为1000μg/ml。分别稀释到200、400、600、800μg/ml, 得5个浓度标准品溶液。
▪ 2、 标准曲线:分别吸取1ml标准液,磷酸缓冲液3ml,酒石酸钾 铁1ml混匀,3000转离心10min。吸取上清液3ml加入玻璃比色 皿,用分光光度计测定540nm处的OD值三次求平均值,并绘制 浓度-OD标准曲线。以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作 空白对照。
▪ 3、取提取物10mg,用蒸馏水定容至10ml。取1ml,按上述同 样方法测定540nm处的OD值3次求平均值。以蒸馏水代替样品溶 液加入同样的试剂作空白对照。
标准曲线
坐标轴标题
1200 1000 800 600 400 200
0 0
微克/毫升
y = 840.35x + 24.753 R²= 0.9972
三、 操作步骤
▪ 1、溶液配制
茶多酚的含量测定
茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的:掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水,在用靛红作指示剂的情况下,样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数,可计算茶多酚的含量。
仪器与试剂仪器:分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂:1、0.1%靛红溶液:称取靛红1g加入少量水搅匀后,再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL,冷却后用蒸馏水定容至1000mL,如果靛红不纯,可下法磺化处理是:称取靛红1g,加浓硫酸50mL,在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h,用蒸馏水定容至1000mL,过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液:准确称取草酸6.3034g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液:称取AR的高锰酸钾1.27g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL,放入250ml锥形瓶中(平行3份),加入蒸馏水50mL,再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL,摇匀,在70~80℃水浴中保温5分钟,取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴,待红色消失后再滴第二滴,以后可逐渐加快,边滴边摇,待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
测定步骤1、供测试液的准备:准确称取茶叶磨碎样品1g,放在250mL锥形瓶中,加入沸蒸馏水80mL,在沸水浴中浸提30分钟,然后抽滤、洗涤,滤液倒入100mL容量瓶中,冷至室温,最后用蒸馏水定容至100mL,摇匀。
2、测定:取200ml蒸馏水放入白瓷皿中,加入0.1%靛红溶液5mL,再加入供测试液5mL,开动磁力搅拌器,用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定,滴定速度以1滴/s为宜,接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止,记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶多酚的检测国标
茶多酚的检测国标
茶多酚是一种在茶叶中常见的重要成分,它具有抗氧化、抗炎、降血脂等多种生理活性。
在中国,国家标准《GB/T 8313-2018 茶叶中茶多酚的测定》规定了茶多酚的检测方法。
根据该国标,茶多酚的检测方法主要包括以下步骤:
1. 样品制备:首先,将茶叶样品粉碎并过筛,然后取适量样品称重,用水提取或乙醇提取茶多酚。
2. 提取:将样品与适量的提取剂(如水或乙醇)混合,进行适当时间的提取。
3. 过滤:将提取液通过滤纸或其他过滤器进行过滤,以去除固体残渣。
4. 浓缩:将过滤后的提取液用适当的方法进行浓缩,通常使用旋转蒸发器或真空浓缩仪。
5. 溶解:将浓缩后的溶液溶解于适当的溶剂中,以得到茶多酚的测定溶液。
6. 分析:使用分光光度法或高效液相色谱法(HPLC)对茶多酚进行定量分析。
需要注意的是,具体的检测方法和步骤可能会因实验室设备和要求的不同而有所差异。
因此,在进行茶多酚检测时,应参考并遵守国家标准《GB/T 8313-2018 茶叶中茶多酚的测定》的相关规定,并在专业实验室或检测机构进行操作。
1。
茶叶中多酚类物质的含量测定与分析
茶叶中多酚类物质的含量测定与分析茶叶是一种广泛被消费的饮品,其独特的香气和味道深受人们喜爱。
而茶叶中多酚类物质的含量则是决定茶叶品质和保健功效的重要指标之一。
本文将介绍茶叶中多酚类物质的测定方法和分析结果。
一、茶叶多酚类物质简介1. 茶叶多酚类物质的种类茶叶中的多酚类物质主要包括儿茶素、黄酮类化合物以及茶多酚等。
其中,儿茶素是茶叶中最主要的成分,占据了茶叶多酚总量的约80%。
儿茶素又可分为儿茶素单体和儿茶素聚合物,其含量和比例会对茶叶的品质和风味产生重要影响。
2. 茶叶多酚类物质的健康功效茶叶中的多酚类物质具有多种保健功效,包括抗氧化、抗炎、降压、降血脂等。
其中,儿茶素作为一种有效的天然抗氧化剂,被广泛研究和应用于预防心脑血管疾病、抗癌等领域。
二、茶叶中多酚类物质的含量测定方法1. Folin-Ciocalteu法Folin-Ciocalteu法是一种经典的多酚类物质总量测定方法。
该方法基于多酚类物质与Folin-Ciocalteu试剂反应生成的蓝色化合物的光吸收特性。
通过比较未知样品的吸光度与已知标准物质的吸光度,可以计算出茶叶中多酚类物质的含量。
2. 高效液相色谱法(HPLC)HPLC是一种精确和高效的多酚类物质测定方法。
该方法通过将茶叶样品经过提取和净化处理后,利用高效液相色谱仪分离多酚类物质,并通过标准曲线计算出茶叶中多酚类物质的含量。
HPLC具有分离效果好、准确度高和灵敏度高的优点。
三、茶叶多酚类物质的分析结果通过上述测定方法,我们可以得到茶叶中多酚类物质的含量结果。
以绿茶为例,其多酚类物质含量一般在10%~30%之间,其中儿茶素单体的含量较高,茶多酚和黄酮类化合物的含量相对较低。
而红茶多酚类物质的含量较绿茶更低,一般在5%~10%之间。
根据茶叶多酚类物质的含量结果,可以对茶叶品质进行初步评估。
高含量的多酚类物质通常意味着茶叶的品质较好,并且具有更多的保健功效。
当然,茶叶的品种、产地、加工工艺等因素也会对多酚类物质的含量产生影响,因此在分析结果时需要综合考虑。
检测茶多酚的方法
检测茶多酚的方法
茶多酚的检测方法常用的有以下几种:
1. 分光光度法:利用茶多酚对特定波长的可见光的吸收能力进行测定。
可以使用紫外-可见分光光度计,在特定波长下测量茶多酚的吸光度,然后通过标准曲线计算茶多酚的含量。
2. 高效液相色谱法(HPLC):利用高效液相色谱仪进行分析和定量。
将茶样品提取后进样到色谱柱中,通过色谱分离后,根据参考物质进行定量计算。
3. 毛细管电泳法:利用毛细管电泳仪器进行茶多酚的分析。
通过电泳分离和检测,可以测定茶多酚的含量。
4. 气相色谱-质谱联用法(GC-MS):将茶样品提取后,通过气相色谱分离茶多酚,然后通过质谱仪器进行鉴定和定量。
5. 发光免疫分析法:利用茶多酚与特定抗体结合所产生的发光信号来测定茶多酚的含量。
这种方法具有高选择性和灵敏度。
需要注意的是,不同方法适用于不同茶多酚的检测和定量。
选取适当的方法应该根据具体的需求和分析对象进行选择。
实验三茶叶中茶多酚含量的测定
实验三 茶叶中茶多酚含量的测定一、实验目的:1、了解茶叶品质的检测与鉴定方法2、学习茶叶中茶多酚含量的测定方法二、实验原理茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70°C 的水浴上提取,福林酚试剂氧化茶多酚中-OH 其团并显蓝色,最大吸收波长为765 nm ,用没食子酸作校正标准定量茶多酚。
三、实验材料1、供试样品 普洱茶、绿茶、白茶。
2、主要试剂 甲醇,无水碳酸钠,福林酚,没食子酸,蒸馏水。
3、仪器设备 恒温水浴锅;电子天平;离心机;分光光度计四、实验方法1、准确称取0.2 g 已磨碎试样,置10 ml 离心管中,加入5 ml 70%甲醇,放入水浴锅(70°C )中,浸提10 min ,冷却后,于4000 r/min 转速下离心10 min ,转移上清液至10 ml 离心管中。
2、待测液:取浸提液1 ml 定容至100 mL ,备测。
以表1浓度测定没食子酸标准液系列的吸光度,以其为纵坐标,浓度为横坐标绘制没食子酸的标准曲线。
表1 没食子酸标准曲线浓度管号 1 2 3 4 5 610 µg/mL 没食子酸标准液 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 标准没食子酸含量µg 0 10 20 30 40 50 吸光度(A )取待测液10 ml ,分别置于25 ml 带塞比色管中,各加入5.0 ml R 10%福林酚试剂,揺匀,反应3~8 min ,加入4.0 ml 7.5%无水碳酸钠溶液加水定容至刻度,摇匀,放置60 min 后于波长765 nm 处测定吸光度A ,以吸光度为纵坐标,没食子酸含量(µg )为横坐标,制得标准曲线。
五、结果与分析按以下公式计算茶多酚含量:100m 10m L d V A )%(16⨯⨯⨯⨯⨯⨯=茶多酚含式中:A ——样品测试吸光度;V ——样品提取液体积(10 mL );d ——稀释因子(1 mL 稀释成100 mL ,稀释因子为100);L ——没食子酸标准曲线的斜率;m——样品干物质含量(%);m1——样品质量,单位为克(g )。
茶叶中茶多酚类物质的提取与含量测定
茶叶中茶多酚类物质提取与含量测定系别:生物医药工程系班级:食品科学与工程一、目的要求1、了解茶叶中茶多酚及茶多酚的组成及性状;2、掌握溶剂提取法提取茶多酚的原理及方法;3、掌握萃取法分离有机溶剂中的茶多酚的操作方法;二、茶多酚总述1、组成:茶多酚是茶叶中酚类及其衍生物的总称,因此常称为多酚类。
其主要成分是黄烷醇类、羟基-4-黄烷醇类、花色甘类、黄酮醇类和黄酮类。
这些化合物都具有2-苯基苯并吡喃的基本结构,故统称为类黄酮物质。
茶叶中绿原酸、鸡鈉酸、咖啡酸等酚酸类化合物也是茶多酚的组分之一。
在茶多酚各组分之一黄烷醇类为主,黄烷醇类优异儿茶素类物质为主。
2、性状:茶多酚是介于淡黄色至茶褐色之间的无定型粉末,味涩,略有吸湿性,易溶于水,可溶于乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯,微溶于油脂,不溶于氯仿及苯等有机溶剂。
茶多酚具有较好的耐酸性,在pH<7时较稳定,在pH>7时则不稳定且氧化变色加快,呈红色。
3.茶多酚的提取方法茶多酚提取工艺效果较好的是有机溶剂萃取法、离子沉淀提取法、树脂吸附分离法、超临界二氧化碳萃取法,其次是超声波浸提法、层析法、膜技术。
4.贮存方法:贮存于阴凉通风干燥环境,并与有毒、有气味的物品隔离,避免直接与三价铁离子及碱性物质接触。
三、实验原理有机溶剂萃取法:有机溶剂萃取法是传统的提取工艺。
是利用茶叶中不同化合物在不同溶剂中的溶解度不同进行提取分离。
在粗茶叶萃取溶液中,除含有茶多酚以外,还含有咖啡碱、酯质、色素、植物多糖、有机酸、以及悬浮物,且茶多酚含量仅为25%~40% ,所以大多数工艺用乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂反复萃取的方法进一步除杂、纯化、精制。
茶水用氯仿萃取可得到水层和有机层,咖啡碱存在于有机层,而茶多酚则存在于水层中,根据萃取及过滤原理,将有机层和水层分别进行浓缩、萃取,即可得到相应粗产物。
溶剂萃取法一般的工艺路线图所示溶剂萃取法一般的工艺路线本法的优点是:稳定、可靠;缺点是:有效成分的含量和提取率较低,通过以上工艺获得的茶多酚含量通常仅能达到50%~65%。
茶叶中茶多酚含量测定方法的研究
茶叶中茶多酚含量测定方法的研究引言:茶叶是一种常见的饮品和药材,已被广泛应用于全球各个地区。
茶多酚是茶叶中的重要成分,具有很多药理活性,例如抗氧化、抗炎、抗癌等功效。
因此,准确测定茶叶中茶多酚含量对于评估茶叶的品质和保健功效具有重要意义。
本文主要探讨了目前常用的茶多酚含量测定方法和一些新的研究方法。
常用的茶多酚含量测定方法:1.高效液相色谱法(HPLC):HPLC是目前最常用的茶多酚含量测定方法之一、该方法可对茶叶中的茶多酚进行定量分析,并且能够同时测定不同类型的茶多酚。
方法的基本原理是利用色谱柱对样品中的茶多酚进行分离,然后通过检测器测定其浓度。
这种方法不仅准确、灵敏,而且分析时间相对较短。
但是,该方法需要昂贵的仪器设备以及复杂的操作技术。
2.分光光度法:分光光度法是另一种常用的测定茶多酚含量的方法。
该方法基于茶多酚分子对特定波长的光有吸收作用,通过测量光的吸收强度来计算茶多酚的含量。
这种方法简单、快速,适用于处理大样品数量。
然而,该方法对于个别茶多酚成分的测定可能存在一定的误差。
3.毛细管电泳法:毛细管电泳法是一种新的茶多酚含量测定方法。
该方法利用毛细管作为分离柱,通过对茶多酚分子的电迁移性进行分析,实现对茶多酚的定量测定。
毛细管电泳法具有高分辨率、分析速度快以及对微量样品的分析能力等优势。
然而,该方法的设备和操作较为复杂,同时还需要对样品进行预处理才能得到准确的结果。
新的研究方法:1.生物传感器法:生物传感器法是一种新兴的茶多酚含量测定方法。
该方法利用生物传感器对茶多酚进行选择性和灵敏的检测。
传感器将茶多酚与特定的生物材料相互作用,产生可测量的信号。
这种方法具有灵敏度高、选择性好以及操作简便的特点,逐渐受到研究人员的关注。
2.光学显微镜法:光学显微镜法是一种非侵入性的茶多酚含量测定方法。
该方法通过观察茶叶组织中的色素沉淀,来推断茶多酚的含量。
这种方法无需复杂的实验设备,操作简单,并且可以直接在样品中观察茶多酚的分布。
茶饮料中茶多酚含量的测定注意事项
茶饮料中茶多酚含量的测定注意事项1、试剂选择和准备:①、选择适合的试剂,如甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂,以提取茶叶中的多酚类物质。
②、在使用有机溶剂时,需要特别注意安全,避免直接接触皮肤或吸入蒸汽。
2、测定方法选择:①、茶叶中茶多酚含量的测定实验需要选择合适的测定方法,如高锰酸钾直接滴定法或其他适当的化学分析方法。
②、总酚含量测定:常用的有效方法有尔斯反应、菲林试剂法、努利试剂法、硫酸及硫酸钾法等。
选择合适的直接方法进行测定,需根据实验室的仪器设备和实际情况进行选择。
③、高效液相色谱法测定:高效液相色谱法是目前测定茶多酚含量最常用的方法之一,具有快速、灵敏、准确等优点。
需配备相应的仪器设备,并进行方法学的验证和准确性测试。
3、样品处理与制备:①、样品的工作选择:应选取新、质量良好的亚铁普洱茶进行测定,以保证测定结果的式中准确性。
②、样品的体积处理:将普洱茶样品打碎并去掉杂质后,使用冷水或冷开水浸泡,浸泡时间需充分,一般为0.5-2小时,以保证茶叶中茶多酚的色杯释放。
4、严格控制实验条件:①、在测定茶饮料中茶多酚的含量时,应严格按照实验要求进行,包括标准品的配制、稀释和仪器的校准等步骤。
标准曲线的制备应覆盖茶多酚的浓度范围,并确保标准品的纯度和稳定性。
②、度控制:在测定茶多酚含量时,实验室的规定环境度应控制在适宜围内,避免度过高或过低对实验结果产生影响。
③、pH值控制:样品提取液的pH值对测定结果有一定影响,常用的茶多酚提取液的pH值为4-6,可通过添加适量的酸或碱来进行调节。
④、反应时间控制:不同的测定方法对茶多酚的反应时间有一定要求,需仔细控制反应时间,以保证实验结果的准确性。
5、进行重复实验:①、为了确保结果的可靠性,通常选择3次实验并取平均值。
在完成实验后,应对实验数据进行统计处理和分析,计算茶多酚的含量,并进行结果的评估和报告。
②、实验重复性:为了保证测定结果的准确性和可靠性,应进行多次实验测定,计算平均值,并计算实验数据的标准偏差。