铁皮石斛的种质保存及其与共生真菌关系的初探

铁皮石斛的种质保存及其与共生真菌关系的初探本文以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）为实验材料,以带节间的茎段作为外植体,建立了一套适宜铁皮石斛种质保存和快速繁殖的组织培养体系。通过比较基本培养基、激素、天然提取物浓度等多个因素,筛选了铁皮石斛快速繁殖体系的适宜培养基及培养条件。

从形态学角度,对外植体诱导愈伤组织并分化成幼苗的过程以及影响因素进行了总结。以GeO₂为锗源,利用生理生化指标测定,研究了不同浓度的锗对铁皮石斛原球茎生长的影响。

对野生铁皮石斛根部共生真菌进行了分离培养,并利用rDNA ITS区全序列,对部分共生真菌进行了分子鉴定。论文研究结果总结如下: 建立了以铁皮石斛茎段作为外植体,保存种质的一种新的有效途径。

1/2MS培养基是诱导丛生芽的适宜培养基,以6-BA（2.0mg/L）和NAA（0.2mg/L）的组合对丛生芽的诱导率最高,附加10%的香蕉汁对诱导丛生芽的生根是最合适的。丛生芽经过生根诱导后就可以形成完整植株,从而极大的缩短了繁殖周期。

愈伤组织在同一培养基上可以形成拟原球茎,拟原球茎的分化经历Ⅰ型、Ⅱ型两种类型,Ⅱ型原球茎还可分化形成不定芽,两者都能进一步形成完整幼苗。外植体的大小、部位和生理状态都可以对愈伤组织的诱导造成影响。

由愈伤组织、不定芽和拟原球茎交错在一起的团块可以多次切割继代培养,这大大提高了无性繁殖的系数。铁皮石斛原球茎富锗研究表明,低浓度锗明显促进铁皮石斛原球茎的生长,增强多个保护酶活性,维护膜系统的稳定性,浓度过高则对原球茎的生长起抑制作用。

在适宜的锗浓度下,利用铁皮石斛原球茎建立快速增殖的生物反应器,以实

现锗的生物转化,应用前景是非常广阔的。对野生铁皮石斛根部共生真菌进行了分离培养,初步研究了共生真菌对原植物体生长的作用,并利用rDNA ITS区全序列对部分真菌进行了分子标记。

以期为石斛的大规模人工栽培提供更为有效的方法,为铁皮石斛的居群研究提供更为丰富的证据。