微量淋巴细胞毒试验操作规程
HLA2
HLA抗原与抗体并非一把钥匙一把锁,常为 一个抗体与多个抗原反应;同一组抗原在 分子结构上存在共性。
目前发现的抗原决定簇有HLA I类110个(A 位点34个、B位点44个、C位点4个、A—B位 点20个、B—C位点5个和A.B.C位点3个);
HLAⅡ类83个(DR位点60个、DQ位点l8个、 DP位点5个)
HLA命名组织
世界卫生组织命名委员会下属的HLA系统 命名委员会负责HLA系统的国际命名及管理
大写的HLA(说明是HLA的检测),HLA后面一个横杠, 横杠后的大写字母A代表A位点,B代表B位点,以 此类推
位点后面如果加*号,提示为分子生物学检测结果, 后至少为4位数字,如HLA-A* 0101
分型方法 1.血清学:侧重于分析HLA抗原的特异性 2.细胞学:侧重于分析HLA抗原的特异性 3.分子生物学:侧重于分析基因本身的多态性
HLA分型方法的历史
六十年代初期,HLA的血清学研究拉开序幕; 1964年Terasaki发明了HLA微量淋巴细胞毒实验 90年代初期,HLA的研究进入了DNA分型研究阶段 1991年第11届国际组织相容性专题研讨会,对HLA
HLA抗原命名原则
4. 专题讨论会承认的特异性能,给予临时命名, 在特异性编号之前加字母w,在得到WHO命名委 员会认可后取去w
5. HLA-C座位的Cw1-Cw10等的特异性已经得到公认, 但是为了避免与补体系统混淆,仍保留字母w, 即以Cw为所有C座位特异性命名。
HLA等位基因表述
HLA基因以4位数字表示,前2位表示最相近的HLA特异性,后2 位表示亚型的等位基因,如A*0101和A*0102两个基因的产物都 是血清学检出的A1抗原,但DNA序列不同
微量淋巴细胞毒试验简介
微量淋巴细胞毒试验简介
目录
•1拼音
•2英文参考
•3注解
•4参考资料
1拼音
wēi liàng lín bā xì bāo dú shì yàn
2英文参考
microlymphocytotoxicity test[WS/T 203—2001 输血医学常用术语]
LCT[WS/T 203—2001 输血医学常用术语]
3注解
微量淋巴细胞毒试验(microlymphocytotoxicity test,LCT)是指淋巴细胞膜上的HLA抗原,若暴露于相应抗体并在补体参与下,淋巴细胞膜则被损伤,该损伤可被某些染料着色而检出,根据该原理,用已知的HLA抗原(或抗体)检查未知HLA抗体(或抗原)的血清学试验方法[1]。
4参考资料
1.^ [1] 中华人民共和国卫生部.WS/T 203—2001 输血医学常用术语[Z].2001720.
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改良一步法微量淋巴细胞毒交叉试验
淋巴细胞毒交叉试验也称补体依赖细胞毒试验(cdc)。
它是检查器官移植受者体内有无针对供者,或者供者针对受者的hla抗体,在器官移植前一定要进行cdc检测。
如果受者血清中检出针对供者的hla抗体,一般认为是配合禁忌,移植后受者会发生超急性排异反应,导致移植失败。
由于试验是在施行器官移植术前临时进行匹配的试验,要求在短时间内报告结果,因此我们对该技术作了改良并与传统方法进行比较,收到满意效果。
现报告如下:一、材料和方法1.被检对象:标本来源于我院近10个月住院和门诊280例拟做肾移植待诊病人和其他器官移植待诊病人,采静脉血2 ml不抗凝待测。
2.试剂:免疫磁珠、荧光染液由美国o l公司提供,抗全淋巴细胞抗体试剂购自武汉生物制品研究所。
3.方法:(1)改良一步法:采用免疫磁珠3~5 μl分离出淋巴细胞,在terasaki板上每孔加入无菌矿物油5 μl,每排第1孔加生理盐水1 μl做阴性对照,第2孔加抗全淋巴细胞抗体1 μl做阳性对照,第3~6孔各加受者血清1 μl(即重复4孔试验),每孔各加供者淋巴细胞1 μl(细胞浓度为2 000个/μl),每孔各加补体1 μl,置22~25℃室温下反应45 min左右,每孔加荧光染液5 μl,倒置荧光显微镜下观察细胞毒性反应,分析判断结果。
(2)传统常规法见参考文献[1]。
二、结果采用改良一步法进行了400次淋巴细胞毒交叉试验,有9次检出阳性(阳性率为2.25%)。
其中1例患者反复多次cdc阳性,后进行hla抗体检测,特定细胞群反应抗体 (panel reactive antibody, pra) 阳性率为53.5%,提示抗hla-a2抗体增多,故放弃移植。
一步法与传统法试验比较:样本用量一步法1 μl,传统法40 μl;试验全过程一步法1.5 h内完成,传统法需2.5~4 h;补体用量一步法1 μl,传统法40 μl;30例标本用双盲法同时试验,结果一致。
三、讨论改良一步法cdc缩短和简化了试验时间、操作步骤,整个试验过程在1.5 h内完成。
护理技能操作规程及评分标准
一、广东医学院成人教育医学检验专业学生技能考核实施方案我校的成人本科或大专学生均已拥有大专或中专学历,经过2年和3年在校成人本专科教育,学生的理论水平得到了相应的提高。
成人本、专科学生在毕业前都经过1年临床实习,毕业后又有多年的临床实践,因此有部分学生可能已达到了普通医学检验本专科生毕业前的水平。
当前我校的成人本专科教育进行教学改革,采取了学分制,成人本科学生参加2年的理论学习、成人专科参加3年的理论学习取得足够的学分后,可由检验学院、继续教育学院和临床技能培训中心共同组织专家利用本考核纲要对学生进行考核,内容包括基本理论知识和临床实践能力,如果学生能达到合格水平,可以提前毕业。
管理机构:由检验学院、继续教育学院和各临床检验教研室专家组成一个考核管理小组,负责考核人员和考务的组织与安排。
组长:刘新光成员:罗辉、郭春华、庄海旗、袁汉尧、马丽、吴进军、许逢明1.基础理论考核:检验学院各教研室试题库进行命题2.考试内容:临床微生物检验学20%、临床生物化学检验20%、临床免疫学检验20%、临床基础检验学20%、临床血液学检验20%五门课程。
从命题的指导思想上,各教研室命题根据成人本专科各专科教学大钢对成人检验本专科学生的培养目标以及培养基本要求,来选择考试内容。
此外在考核内容选择上还应结合医学检验专业课程内容安排,临床微生物检验学、临床生物化学检验、临床免疫学检验、临床基础检验学、临床血液学检验为主要学科,所占学时多,涵盖专业内容广。
而且临床基础检验知识和技能运用在整个实习和工作过程中,因此医学检验专业考核主要是检查学生通过在校的理论学习和实习中对知识、技能的运用,对医学检验知识和技能掌握程度,临床疾病诊断、治疗、愈后观察、药效评价,对病人标本进行机能学和形态学研究,病因的确认、疾病的诊断做出准确评价,从中考查学生综合分析问题、解决问题的能力。
考试内容中,综合分析类占60%,应用占40%。
技能考核临床检验基础操作考核,考核内容为医学检验常用技术操作,考核内容及评分标准由临床基础检验教研室确定,学生随机抽签确定自己考核项目。
微量淋巴细胞毒试验原理
微量淋巴细胞毒试验原理微量淋巴细胞毒试验(Microcytotoxicity Assay)是一种常用的体外细胞毒性试验方法,用于评估各种细胞毒性物质对淋巴细胞的毒性作用,以及测定血清中的细胞毒性抗体水平。
本文将详细介绍微量淋巴细胞毒试验的原理、步骤以及相关应用。
原理:微量淋巴细胞毒试验是通过观察淋巴细胞在体外与毒性物质作用后的死亡情况来评估其毒性作用。
该试验通常使用杀伤细胞(如大鼠淋巴瘤细胞线T-Lymphoma Cell line)和靶细胞(如人的白血病细胞)进行共培养,并加入待测物质,观察细胞死亡情况,从而判断待测物质对细胞的毒性作用。
步骤:1.准备试验样本:收集待测物质(如药物、化合物、血清等)和细胞悬液。
2.划定试验板:将细胞悬液和待测物质依次加入96孔板的对应孔中,以确保每个孔的浓度相同。
3.孵育混合物:将孔板孵育在合适的温度下,通常是37℃,并充分孵育一定的时间(如2小时)。
4.加入染色剂:在每个孔中加入染色剂,如溴化乙啶(Ethidium Bromide,EtBr),以染色活细胞和死细胞区分开。
5.观察和记录:使用荧光显微镜观察细胞的存活情况,根据染色剂的染色情况,可以判断待测物质的细胞毒性作用。
应用:1.评估药物的细胞毒性:微量淋巴细胞毒试验可用于评估药物对淋巴细胞的毒性作用,帮助药物研发人员选择合适的候选药物。
2.检测细胞毒性抗体:通过微量淋巴细胞毒试验,可以检测血清中的细胞毒性抗体水平,用于诊断和监测某些自身免疫性疾病,如溶血性贫血和自身免疫性甲状腺炎等。
3.评估环境毒性:微量淋巴细胞毒试验也可用于评估环境样品(如水源、土壤和空气)中的毒性物质,帮助判断环境污染的严重性和对人体健康的影响程度。
4.评估化妆品安全性:微量淋巴细胞毒试验可用于评估化妆品中添加的化学物质对细胞的毒性作用,以确保化妆品的安全性。
优势和限制:微量淋巴细胞毒试验具有以下优势:-简单易行:试验步骤简单,操作相对容易,不需要复杂的设备和技术。
异型淋巴细胞检测操作规程
异型淋巴细胞检测操作规程异型淋巴细胞检测是一种重要的临床检验技术,用于评估血液中淋巴细胞的形态及数量的异常变化。
下面是一个关于异型淋巴细胞检测的操作规程,供参考。
一、实验室准备1. 准备所需设备:显微镜、染色剂(如Wright-Giemsa染色剂)、玻璃载玻片、荧光显微镜(如有必要)、计数室等。
2. 准备所需试剂:生理盐水、异型淋巴细胞检测试剂盒等。
3. 确保实验室环境符合检验要求,确保设备及试剂的清洁和有效性。
二、标本采集及前处理1. 标本采集:采集血液标本,遵循标本采集和处理的规范操作流程。
2. 标本处理:将采集到的标本转移到试验室,并按照检验前处理要求进行处理(如血液离心、血清分离等)。
三、染色1. 准备染色液:根据染色剂的使用说明,准备适量的染色液。
2. 涂片制备:将标本中的淋巴细胞制作成薄层涂片,直径一般为2-3cm。
3. 固定:用热空气对涂片进行固定,使细胞附着在载玻片上。
4. 涂染:将载玻片用染色液浸泡5-10分钟。
5. 洗涤:用生理盐水或蒸馏水洗涤载玻片,去除多余的染色剂。
6. 干燥:将载玻片晾干或用吹风机对其进行干燥。
四、显微镜检查1. 准备显微镜:打开显微镜,进行调焦和对比度调节。
2. 检查涂片:将染色后的载玻片放置在显微镜物镜下检查。
首先以低倍镜检查全涂片的结构和颜色,然后逐个细胞进行检查。
3. 异型淋巴细胞的识别:根据具体的标准和判定要求,对涂片中的细胞进行鉴定和分类。
4. 记录结果:将每个细胞的结果记录下来,并根据所采用的标准进行异型淋巴细胞的计数和分类。
五、结果判读1. 根据异型淋巴细胞的计数和分类结果,判断标本中的异型淋巴细胞情况。
2. 结果判读应根据实验室的规范和所采用的标准进行,避免主观判断和误判。
3. 需要注意不同异型淋巴细胞类型的临床意义和诊断价值。
六、质量控制1. 定期进行内部质量控制:使用已知结果的标本进行质控,确保实验结果的准确性和可靠性。
2. 参加外部质量评估:定期参加相关的外部质量评估项目,与其他实验室进行对比,提高检验水平。
t淋巴细胞斑点试验操作流程
t淋巴细胞斑点试验操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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细胞毒实验
A A. 对照组
B B. 实验组
注意事项: 台盼蓝染色后放置时间不能太长,5min之内观察结果,否则出 现假阳性,需要重新染色。
操作步骤
二、细胞毒实验:
按下表加样
PBS PBS
振荡混匀,置37C水浴箱,10min
Ag+Ab
振荡混匀,置37C水浴箱,20min 分别取100ul细胞,各加100ul 0.4%台盼蓝,混匀,室温2min
补体依赖的细胞毒实验
Complement-dependent cytotoxicity
本次实验目的
1
掌握细胞毒实验 的原理
2
补体依赖细胞毒实 验基本操作步骤
3
了解补体依赖细胞 毒实验的应用
补体的作用和激活途径
补体的作用 溶菌和溶细胞 促进中和溶解病毒 调理吞噬 炎症介质 补体的激活途径 经典途径 旁路途径 MBL途径
complement
振荡混匀,滴片加盖玻片,镜检
补体依赖细胞毒实验的应用
检查细胞膜抗原
鉴定抗体的特异性
微量淋巴细胞毒试验 检测人体的组织相容性 选择性地去除某一细胞亚群
实验原理
抗原与抗体结合
+ 补体
台盼蓝染液
实验主要材料
实验材料
1. 小鼠 2. 抗血清(Ab) 3. 补体 新鲜豚 鼠血(补) 4. PBS缓冲液, 载玻片、盖玻 片、一次性试 管 5. 台盼蓝染色液
需要收回的
剪刀、镊子、铜网 玻璃培养皿。
操作步骤
一、小鼠胸腺细 胞悬液的制备
4~6周龄小鼠 断颈处死,取出胸 腺放至含有1~3 mL PBS的平皿中,以 剪刀和镊子将组织 处理成单细胞悬液。
complement
淋巴细胞毒交叉配合试验标准操作程序
淋巴细胞毒交叉配合试验标准操作程序1 目的规范抗淋巴细胞抗体检测的操作程序,以保证临床检测结果的准确性。
2 检测方法和原理被检血清中的抗体与供体淋巴细胞膜表面相应抗原结合后激活补体,引起细胞膜破损,这种抗体称细胞毒抗体。
如将含有此抗体的血清与淋巴细胞和补体共同温育。
根据着色的死细胞数目,可以估计淋巴细胞毒的强度。
3 性能参数特异性为 100%,敏感性为 100%。
4 原始样品要求供体肝素抗凝血 2~3ml 及受体血清 2ml。
5 容器和添加剂类型受者用黄色胶头促凝试管,有促凝剂。
抽取静脉血 2~3ml 置黄头试管内送检。
供体用肝素抗凝血 2~3ml。
6 试剂和设备6.1 试剂:淋巴细胞分离液、抗淋巴细胞抗体、2%台盼蓝。
6.2 试剂保存与有效期6.2.1 新购试剂保存于 2-8℃,勿冷冻,在有效期内使用。
6.2.2 若有剩余试剂,应立即放回冰箱,保存于 2-8℃。
6.3 质控:试剂盒自身带有阴性、阳性质控。
7 操作程序7.1 常规分离淋巴细胞:取供者肝素化全血 3ml,用 PBS 或生盐水作等量稀释,沿管壁滴加于预先加有 2 ml 淋巴细胞分离液的 10ml 试管内,水平式离心机 1800 转/分,离心 20 分钟,吸取白膜表层之淋巴细胞于6ml 洗涤液中,2500 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,重复洗涤二次,调整细胞浓度至 2000个/ul。
7.2 微量淋巴细胞毒试验方法(两步法试验程序),见下表:7.3 结果观察:从各管取样,滴加于血细胞计数板内,用普通生物显微镜高倍镜计数 200 个淋巴细胞,计算出着色死细胞的百分率。
7.4 判读标准:被染色的死细胞呈蓝色,无折光,细胞肿胀,活细胞则具有很强的折光能力,呈明亮状,两者很容易区分。
8 质量控制程序每一次实验中有阴性、阳性对照。
9 干扰和交叉反应无。
10 生物参考区间10%为阴性。
11 临床意义一般而言,死淋巴细胞数10%可进行器官移植,11%~20%结合临床考虑,超过 20%一般不考虑器官移植。
复发性流产的常用
抗精子抗体(ASA)
? 是机体产生的针对精子抗原的抗体,由于机 械屏障的破坏、炎症等原因,男女双方的机 体可产生ASA。ASA可通过干扰精子穿过宫 颈黏液、透明带及卵细胞膜,使受孕率降低
? 其与RSA是否有关尚无定论,有研究认为引 起自然流产的ASA主要是女方血清中的抗精 抗体,其机理可能为ASA作用于滋养细胞层 细胞,从而影响胚胎的发育,导致流产
抗卵巢抗体
? 抗卵巢抗体是由于卵巢炎或自身免疫因素引 起的卵巢免疫性疾病
? 分类: 1.抗颗粒细胞抗体 2.抗卵母细胞抗体 3.抗透明带抗体
抗颗粒细胞抗体
? 抗颗粒细胞抗体→孕酮分泌减少,孕酮是维 持妊娠的基本激素
? 孕妇的淋巴细胞具有特异性的孕酮结合点+ 孕酮→释放一种具有特异性功能的蛋白质, 称为孕酮诱导的封闭因子(PIBF) →抑制NK细 胞活性→肿瘤坏死因子(TNF-2) ↓
复发性流产的常用治疗方法
中山二院
定义
? 复发性自然流产 (recurrentspontaneousabortion,RSA)是指与 同一性伴侣连续遭受2次或2次以上在妊娠20 周前的胎儿(体重≤500g)丢失者,是育龄妇女的 常见病
? 国内仍把3次或3次以上在妊娠28周之前的胎 儿丢失称习惯性流产
? CD56+NK细胞的正常值为2%~12%,>12% 为异常
? 这类细胞能产生包括TNFα的TH1型细胞因子, 妨碍受精卵的着床、损害蜕膜和滋养细胞而 引起流产
? 早孕时超声观察,可发现胎心缓慢、孕囊不规 则、孕囊和胚芽小于孕周、羊水过少以及绒 毛下出血
? CD19+NK细胞正常值为2%~10%,>10%为 异常
? ③在孕5~9周,IVIG剂量为25 g/次,每周1 次,9周后为每2周1次,直至孕14周
输血医学常用术语 中英文.
Standard Terminology for Blood Transfusion Medicine 输血医学常用术语 A Antigen A抗原Acid Citrate Dextrose B Solution ACD-B液Acquired Immune Deficiency Syndrome,Aids 获得性免疫缺陷综合征Acute Phase Protein 急性期蛋白质 Adjusted Agreement 调整一致性Adult T-Cell Leukemia,Atl 成人T细胞白血病Adverse Donation Reactions 献血反应Aged Serum 久置的血浆Agglutination 凝集Agreement On Blood Transfusion 输血协议书AIHA 自体免疫溶血性贫血Air Embolism 空气栓塞Air Purification 空气净化Air Shower 风淋Alanine Aminotransfease,Alt 丙氨酸氨基转移酶Albumin 人血浆白蛋白Allel 等位基因Allogeneic Bone Marrow Transplantation,Allo-Bmt 异基因骨髓移植Anaphylactic Reaction 过敏反应Antecubital Area 肘前区域Anti-A 抗AAnti-A Typing Reagent 抗A定型试剂Anti-A、B Typing Reagent 抗A、B定型试剂Anti-B 抗BAnti-B Typing Reagent 抗B定型试剂Antibodies To Hepatitis B Core,Anti-Hbc 乙型肝炎核心抗体Antibodies To Hepatitis C Virus,Anti-Hcv 丙型肝炎病毒抗体Antibodies To Human Immunodeficiency Virus,Anti-Hiv 人类免疫缺陷病毒抗体Antibody Identification Test 抗体鉴定测试Anticoagulant 抗凝剂Antigen Receptor 抗原受体Anti-Human Globulin 抗人球蛋白Anti-IgG 抗-IgGApheresis 单采Aseptic Procedure 无菌操作Aseptic technique 无菌技术Autologous 自体的Autologous Blood Transfusion 自身输血Autologous Bone Marrow Transplantation,Abmt 自身骨髓移植B Antigen B抗原Babesiasis,Babesiosis 巴贝虫病Bacteria Transfusion Reaction 细菌性输血反应Bar Code For Blood Transfusion 输血条码Basoophilic Granulocyte,Basophil 嗜碱性粒细胞Blood 血液Blood Transfusion Service Record 血站记录Blood Bag 血袋Blood Center 血液中心Blood Collecting Bag 采血袋Blood Collection 采血Blood Component Donor 成分献血者Blood Components 成分血Blood Delivery 送血Blood Density 血液密度Blood Donation 献血Blood Donation Room 献血点Blood Donor 献血者Blood For Clinical Use 临床用血Blood Group 血型Blood Group Serological Investigations 血型血清学检查Blood Inspection Prior To Acceptance 血液入库验收Blood Inspection Prior To Issue 血液出库核对Blood Inventory Control 血液库存调控Blood Irradiation 血液照射Blood Order 血液预约Blood Programme 血液规划Blood Quality 血液质量Blood Recipient 受血者Blood Record Inquiry 血液记录查询Blood Refused To Acceptance 拒收血液Blood Resources 血源Blood Safety 血液安全性Blood Sample Label 血样标签Blood Station 血站Blood Temperature Monitoring 血液温度监控Blood Transfusion 输血Blood Transfusion Administration 输血管理Blood transfusion recipients 受血者Blood Transportation 血液运输Blood Unit 血液单位Blood Validity 血液有效性Bombay Phenotype 孟买型Bone Marrow Recipient 骨髓受者Bone Marrow Transplantation,BMT 骨髓移植Buffer Coat 白膜层Capillary Method For Hematocrit Assay 毛细管比积法Card For Blood Donation 献血卡Caution 警示说明Cell Grouping 细胞定型Cell-Suspending Medium 细胞悬浮介质Cellular Fraction 细胞层Central Blood Bank 中心血库Central Blood Station 中心血站Centrifugation 离心Certificate For Volunteer Blood Donation 无偿献血证Circulation Overload 循环超负荷Cis-Ab Group 顺式AB型Citrate Phosphate 2 Dextrose Adenine Solution CP2D-A液Citrate Phosphate 2 Dextrose Solution CP2D液Citrate Phosphate Dextrose Adenine Solution CPD-A液Citrate Phosphate Dextrose Solution CPD液Citrate Poisoning 橼酸盐中毒Class Ⅰ Genes HLA-Ⅰ类基因Class Ⅱ Genes HLA-Ⅱ类基因Class Ⅲ Genes HLA-Ⅲ类基因Clean Areas 洁净区Clinical Surveillance Of Blood Transfusion 输血监护Cold-Reactive Agglutination 冷凝集反应Collection Of Stem Cells 干细胞采集Compatibility Testing 相容性试验Component Transfusion 成分输血Confirmatory Test 确证试验Convulsions 惊厥Copper Sulfate Method 硫酸铜法Creutzfeldt-Jakob Disease 克-雅病Criteria For Blood Donation 献血标准Cross Lymphocytotoxicity Tests 交叉淋巴细胞毒试验Cross Matching 交叉配血Cross Matching For Newborn 新生儿配血Cross-Match Test 交叉配血试验Crude Agreement 粗一致性Cryoprecipitate 冷沉淀Cryoprecipitated Antihemophilic Factor(Ahf 抗血友病因子冷沉淀Cut Off Value 界限值D Antigen D抗原Decant 缓慢倒出Delayed Hemolytic Transfusion Reaction 延迟性溶血性输血反应Department Of Blood Transfusion 医院输血科Detection 检测Direct Agglutination 直接凝集Direct Antiglobulin Test, DAT 直接抗球蛋白试验Disinfection 消毒Disinfection By Ultraviolet Radiation 紫外线辐射消毒Dry Button 干扣Dominant Inheritance 显性遗传Donor Checking 确认献血者Eluates 洗出液Enmeshed 残留沉积Ensure Confidentiality For Record 记录保密Enzyme Linked Immunosorbent Assay,Elisa 酶连免疫法Eosinophilic Granulocyte,Eosinophil 嗜酸性粒细胞Error 误差Erythrocyte,Red Blood Cell 红细胞Exchange Transfusion 换血Expected Antibody 预期抗体External Quality Assessment, EQA 室间质量评价Extravascular Hemolysis 血管外溶血False Negative 假阴性False Positive 假阳性Family History Of Creutzfeldt-Jakob Disease 克-雅病家族病史Febrile Transfusion Reaction 发热输血反应Fibrinogen 纤维蛋白原First Testing 初检Forward Typing 正定型Fresh Frozen Plasma,FFP 新鲜冰冻血浆Frozen Plasma,FP 冰冻血浆Frozen Red Blood Cells 冰冻红细胞G6Pd 葡糖六磷酸脱氢酶Gene 基因Gene Frequency 基因频率Genetic Polymorphism 遗传多态性Ghost 血影血站质量管理规范Good Manufacturing Practice For Blood TransfusionServiceGoods Flow 物流Graft Versus Host Disease,GVHD 移植物抗宿主病Granulocytes 粒细胞Grass-Roots/Basic-Level Blood Station 基层血站Gross Hemolysis 大致溶血状况Group A A型Group A Reagent Red Cells A型试剂红细胞Group Ab AB型Group B B型Group B Reagent Red Cells B型试剂红细胞Group O O型H Antigen H抗原Hematoma 血肿Hematopoietic Reconstitution 造血重建Hematopoietic Stem Cell 造血干细胞Hemoglobin,HB 血红蛋白 Hemoglobinometry 血红蛋白测定法Hemoglobinuria 血红蛋白尿Hemolysis 溶血Hemolytic Disease Of The Newborn 新生儿溶血病Hepatitis B Surface Antigen,HBSAG 乙型肝炎表面抗原History Of Viral Hepatitis 病毒性肝炎史HLA Class Ⅰ Antigens HLA-Ⅰ类抗原HLA Class Ⅱ Antigens HLA-Ⅱ类抗原HLA Typing Antisera HLA分型试剂HLA -Abclocus Antigens 人类白细胞A、B、C座位抗原HLA -D Locus Antigens 人类白细胞D座位抗原HLA -Dq Locus Antigens 人类白细胞DQ座位抗原HLA -Dr Locus Antigens 人类白细胞DR座位抗原Homogeneic Bone Marrow Transplantation 同基因骨髓移植Human Leukocyte Antigens,HLA 人类白细胞抗原Hyperammonemia 高血氨症Hyperkalimia 高血钾症Identification 鉴定Identification Of Blood 核对血液IgG-sensitized IgG-致敏的Immediate Hemolytic Transfusion Reaction 急性溶血性输血反应Immediate-spin phase 即旋测试阶段Immunoiogical Transfusion Complications 免疫性输血并发症Incompatibility 不相容性Incubation 孵育Indeterminate 可疑Indirect Antiglobulin Test 间接抗球蛋白测试Indirect Antiglobulin Test, LAT 间接抗球蛋白试验Infectious Agents Screening 传染病筛选Infectious Markers 传染病标志物Informed Consent For Apheresis 单采协议书Inheritance 遗传Instruction 使用说明Internal Quality Control 室内质控Intravascular Hemolysisi 血管内溶血Iodine Tincture 碘酊Irradiated Red Blood Cells 照射红细胞Irregular Antibody 不规则抗体Iso-Osmotic Concentration 等渗浓度Isotonic Saline 等渗盐水Kappa Clinical diagnosis Consistency 诊断一致性Kappa系数Label Color As Blood Group Marker 血型标志色Label Of Blood Collection Bag 血袋标签Label Of Blood Collection Date 采血日期标签Label Of Blood Components 成分血标签Label Of Blood Group 血型标签Label Of Expiration Date 失效期标签Label Of Unit Identification 原血标签Landsteiner′S Rule 兰斯坦纳法则Law Of Blood Donation 献血法Leukocyte Filtrated 滤除白细胞Leukocyte,White Blood Cell 白细胞Leukocyte-Reduced Red Blood Cells 少白细胞红细胞Liquid Nitrogen Pool 液氮贮槽Locus 基因座位Low-Ionic-Strength 低离子强度Lymphocyte 淋巴细胞Major Cross Matching 主侧配血Malaria 疟疾Management Of Blood Resources 血源管理Marrow Donor Programme Registry 骨髓库Massive Transfusion 大量输血Matrix 基质MDS 骨髓增生异常综合征 Medical History Questionaire 健康状况征询表Microlymphocytoxicity Test, LCT 微量淋巴细胞毒试验Microtubes Gel Test, MGT 微柱凝胶试验Minor Cross Matching 次侧配血Mix well 充分混合Mixed Lymphocyte Culture 混合淋巴细胞培养Monocyte 单核细胞Multiple Myeloma 多发性骨髓瘤Natural Antibody 天然抗体Negative 阴性Neutrophilic Granulocyte,Neutrophil 中性粒细胞Nonconsanguinity 非血缘关系Nonimmunologic Hemolytic Transfusion Reaction 非免疫性溶血反应Nonimmunological Transfusion Complications 非免疫性输血并发症Optical Density O.D 光密度Optimal Conditions Variance,OCV 最佳条件变异Packed RBC 红血球浓厚液Paid Donor 有偿献血者Panel Cells 谱细胞Para-Bombay Phenotypes 类孟买型Parenteral Drugs 非肠道用药Paternity Probability 亲子关系概率Paternity Test 亲子鉴定Pedestrian Flow 人流Period Of Blood Validity 血液有效期Perioperative Autologous Blood Collection 术中回收血Peripheral Blood Stem Cells,PBSC 外周血干细胞Pheresis Granulocytes 单采粒细胞Pheresis Plasma 单采血浆Pheresis Platelets 单采血小板Phlebitis 静脉炎Phosphate-Buffered Saline 磷酸盐缓冲液Pipettes 移液管Plasma 血浆Plasma Center 血浆站Plasma Exchange 血浆置换Plasma Frozen Within 24 Hours Or Collection 2 4小时内冰冻血浆Platelet 血小板Platelet Concentrate 浓缩血小板Platelet Incubators 血小板保存箱Pllyribosome 多核糖体PNH 阵发性睡眠性血红蛋白尿 Polyethylene Glycol 聚乙二醇Polymerase Chain Reaction, PCR 聚合酶链反应Pooled Red Blood Cells 谱红细胞Positive 阳性Postphlebotomy Adverse Reaction 晕针Post-Transfusion Hepatitis 输血后肝炎Post-Transfusion Purpura,PTP 输血后紫癜Potentiator 增效剂Precipitate 沉淀物/使沉淀Predictive Value 预示值Preoperative Autologous Blood Collection 前采血Preproalbumin 前白蛋白原Preservatives 保存液Pretransfusion Blood Warming 血液预温Proalbumis 白蛋白原Pseudo-Agglutination 假凝集Pyrogen Reaction 热原反应Pyrogen-Free 无热原Quality Assurance 质量保证Quality Control 质量控制Quality Control Serum 质控血清Quality Management 质量管理Quality Policy 质量方针Rapid Freezer 速冻冰箱Rapid Plasma Regain Assay,RPR 快速血浆反应素试验Reactivity 活性Reagent 试剂Recessive Inheritance 隐性遗传Recipient Blood Sample 受血者血样Recombinant Immunoblot Assay. 重组免疫印迹法Record-Keeping Systerm 记录保管系统Red Blood Cell Button 红细胞扣Red Blood Cells 红细胞Red Cell Surface Antigen 红细胞表面抗原Red Cells Blood Group System 红细胞血型系统Red Cells Concentrate 浓缩红细胞Red Cells Suspension 悬浮红细胞贮血冷藏箱Refrigerator Used For Stored Blood And BloodComponentRegistration For Stored Blood 库存血液登记Regular Interval 定期间隔Regulation For Blood Donation 献血法规Rejuvenated Red Blood Cells 复壮红细胞Reliability 可靠性Repeat Testing 重验Resuspension 重悬Retesting 复检Reticulocyte 网织红细胞Reverse Typing 反定型Rh Antigen Rh抗原Rh Blood Group System Rh血型系统Rh D Negative Rh D阴性Rh D Positive Rh D阳性Rh D Typing Rh D血型鉴定Rh Haplotype Rh单型Rh Phenotype Rh表型Risk Behavior 风险行为Roulearx Formation 缗钱状凝集Routine Condition Variance,RCV 常规条件变异Screening 筛选Sensitivity 灵敏度Separation Using A Sterile Closed System 全密封分离Serum 血清Serum Typing 血清定型Sodium Azide 叠氮钠Special Label 特殊标签Specificity 特异性Specimen 测试样本血站标准操作规程Standard Operating Procedures For Blood Transfusion ServiceStandard Terminology For Blood Transfusion Medicine 输血医学常用术语Stem Cell-Mobilizing Agent 干细胞动员剂Stem Cells 干细胞Stem Cells Viability Rate 干细胞存活率Sterile Disposable Syringe 一次性使用无菌注射器Sterility 无菌Sterilization Storage Freezer Subgroups Of A Subgroups Of B Supernatant Surrogate Testing Suspension Syphilis Syphilis Plasma Regain Syphilis Spirillum Antibody Hemoagglutination Assay Test Mixture The Care Of Blood Donors Therapeutic Apheresis Therapeutic Cytopheresis Therapeutic Plasmapheresis Titer Transfer Bag Transfusion Medicine Transfusion Request Form Transfusion-Related Acute Lung Injury,TRALI Transfusion-Transmitted Diseases Transplantation Match Trypanosomiasis Umbilical Cord Blood Stem Cells 灭菌贮存冰箱 A 亚型 B 亚型久置的血浆替代物检测悬液梅毒梅毒血浆反应素梅毒螺旋体血凝试验测试混合物献血护理治疗性成分单采治疗性血细胞单采治疗性血浆单采滴定量转移袋输血医学输血申请单输血相关急性肺损伤输血传播性疾病移植配型南美洲锥虫病脐带血干细胞Unbound Protein Unexpected Antibodies Unexpected Antibody Screening For Blood Recipient Unexpected Blood Group Antibodies Urgent Requirement For Blood Validity Volunteer Donors Of Blood Washed Rbc Washed Red Blood Cells Washing Waterbath WBC Concentrate Weak D Recipient Weak D Type Weak D Type Blood Donor Western Blot Whole Blood Whole Blood For Component Preparation Window Period Worker Cleaning Youden’s Index 人血浆白蛋白意外抗体受血者抗体筛选血型意外抗体紧急用血真实性,可靠性,有效性无偿献血者嗜碱性粒细胞洗涤红细胞洗涤水浴箱白细胞浓缩液弱 D 型受血者弱D型弱 D 型献血者蛋白印迹法全血成分用全血窗口期人员净化约登指数。
淋巴细胞和病毒载量测定的技术要求(12.25)
样品接收
样品到达以后立即检查试管及其所装的血 样。 当天不检测,立即放进-20或-80度冷冻 做好样品登记和记录
病毒载量测定结果的国际单位
由于不同病毒载量测定结果存在较大变异,为了 增强可比性、便于不同实验室和不同方法的比较, WHO组织了10个国家26个实验室的协作研究, 利用人工制备的三种标准品建立了病毒载量测定 结果的国际标准。本次研究的结果显示,含量为 100000IU/ml的标本用bDNA、Monitor和 NucliSens三种方法检测的结果分别是 4.61log(4.51log-4.69log)、4.71log(4.37log5.16log)和 5.01log (4.94log-5.12log),也就是国 际单位(IU)与拷贝数(cp/ml)的换算大约是1: 0.92~1:1.00。
注意事项
1、病毒载量试剂合理使用、严禁浪费 检测试剂量按照每市、县的检测任务分配;每份 试剂成本较高,注意节约。 2、耗材 专用耗材,按照试剂量成套配备,注意节约使用。 3、硅胶等试剂的存放注意温度。 4、严禁CD4检测剩余标本自然沉淀后直接收集, 一定要经过离心处理,标本去RNA酶管保存,戴 无份手套操作。 5、酶和引物加样准确度。 6、上机时间。
设施和设备
根据检测项目配备相应的设施和设备。
试剂准备区:冰箱、洁净工作台、离心机、加样器、 振荡器、废弃物容器、紫外灯。 样品处理区:冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、 振荡器、恒温水浴、上下水设备、废弃物容器、紫外 灯。 扩增区:核酸扩增设备、冰箱、离心机、加样器、废 弃物容器、紫外灯。 扩增产物分析区:冰箱、离心机、加样器、电泳仪、 振荡器、恒温水浴、紫外透射仪、摄影/像设备、上下 水设备、废弃物容器、核酸污染物处理设备,紫外灯 等。 测定HIV RNA应配备-80℃冰箱,上述其它冰箱为28℃和-20℃。
微量淋巴细胞毒法检测HLA
微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27试验的质量保证岳文勇(152医院检验科,河南平顶山 467000)[关键词]微量淋巴细胞毒法 HLA-B27试验质量保证国内外研究表明,强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原阳性率为83%-95.19%[1,2]。
对患者进行 HLA-B27检测已经成为临床排除、提示或预防强直性脊柱炎的一个重要的辅助手段。
目前,检测血清中HLA-B27的方法有微量淋巴细胞毒法、ELISA法、流式细胞仪法、PCR-SSP 法等。
相比而言,ELISA法特异性和敏感性较差;流式细胞仪和PCR-SSP两种方法试验要求高,均需价格昂贵仪器而普及受限;微量淋巴细胞毒法特异性好、操作无须特殊仪器,适合二级以下医院推广使用[4,5]。
但由于试验条件难以控制、HLA高度多态性等因素,微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27时容易出现误判漏判,因此临床检验工作者更应该加强微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27试验时的质量保证意识。
2003年-2007年,笔者临床应用微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27共1886人份,总结出几点经验,供大家交流探讨。
.微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27试验原理简介:通过淋巴细胞分离液分离外周抗凝血中有活性的淋巴细胞,与检测板上已知的B27抗体反应,若待检淋巴细胞膜上有B27抗原存在, 则在补体的参与下,在细胞膜上打孔,细胞死亡,加入染料透入后而着色。
1 实验材料的质量保证1.1 淋巴细胞分离液与HLA-B27反应板1.1.1 淋巴细胞分离液保存淋巴细胞分离液必须避光、无菌、4℃冷藏保存,保证分离液的成分不受破坏。
笔者的经验是:根据平常工作所需要的量,一次性把250ml分离液无菌操作,分装在多个大玻璃试管中,随用随取,可以避免批次间交叉污染。
1.1.2 HLA- B27反应板选择 HLA- B27反应板必须选择有质量保证和批准文号的合格试剂板,保证检测结果高度稳定性。
1.2 外周血抗凝剂选择抗凝剂EDTA-K2较肝素好。
输血(血库)考试题及答案
输血(血库)一、是非题1。
洗涤红细胞是采用生理盐水洗涤去除红细胞以外的血液成分后而制备的红细胞制品.( )2。
白细胞输注在临床应用越来越普遍.()3.血浆是全血的液体部分,约占全血容积的55~60%。
()4。
新鲜冰冻血浆中保存了不稳定的凝血因子Ⅴ、Ⅷ的活性.( )5.急性溶血性输血反应指输血后4小时内发生的反应。
()6。
迟发性溶血性输血反应主要属于血管内溶血.( )7.大量输血的定义为48小时内输入的血液量等于或超过患者自身的血容量。
()8.血小板输注无效主要是受者体内产生了血小板同种抗体.()9。
正定型就是用已知A红细胞和B红细胞来测定血清中有无相应的抗A和抗B抗体.( )10。
输全血容易发生代谢性酸中毒。
()二、填空题1.红细胞悬液是全血移除大部分血浆后,用或等加入红细胞内代替移出的血浆。
2。
红细胞悬液在临床上适用于,的患者。
3.洗涤红细胞适用于、、和等患者.4 根据血小板输注目的不同,临床上分为和两类。
5. 血小板制品主要有三种,即、及,临床常用的是。
6. Rh血型的D抗原的孕妇,抗体通过进入胎儿体内,导致胎儿溶血病。
7。
血小板血型抗原通常可分为 , 8。
A BO血型基因位于第号染色体,ABO基因产物是 .9。
HLA常用分型技术包括、、等。
10. 输血的不良反应主要有、、、。
三、选择题1.新鲜冰冻血浆(FFP)和普通冰冻血浆(FP)的主要区别是:A.FFP中保存了凝血因子Ⅴ、Ⅷ的活性 B、FP中保存了凝血因子Ⅴ、Ⅷ的活性C.FFP中保存了凝血因子Ⅶ、Ⅻ的活性 D.FP中保存了凝血因子Ⅶ、Ⅻ的活性 2.Rh血型系内有46种不同的抗原,其中最为重要的是: A.C B.E C.D D.M 3.在ABO血型正定型中,抗A(+),抗B(−),抗A(+)抗B(+),此血型结果为A.B B.A C.AB D.O 4.在ABO血型反定型中,A红细胞(−),B 红细胞(+),O红细胞(−),此血型结果为 A.A B.B C.O D.AB 5.以下哪一种不是经输血传播的疾病。
输血试题(附参考答案)
输血试题(附参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、关于RhD抗原,下列说法错误的是( )A、在Rh血型系统中抗原性最强,属多肽抗原B、在胚胎时期就充分发育并维持一生C、存在于人类所有血细胞膜上D、临床根据D抗原有无,分为Rh阳性和Rh阴性E、正常情况下,红细胞有1万-3万个D抗原正确答案:C2、和全血相比,悬浮红细胞的特点是()A、血小板和白细胞的碎屑较多B、可以以较小的容量提高患者的携氧能力C、传播病毒的风险大D、引起输血不良反应的几率较大E、保存损害产物较多正确答案:B3、下列对献血后的生理恢复,说法错误的是()A、血流动力学与血液流变学无明显影响B、白细胞、血小板受影响很小C、全血粘度、血浆粘度、血细胞比容比献血前有所降低D、红细胞的恢复需120天,男性较快(4-5天)E、血容量的恢复约1-2小时正确答案:D4、国内2U冷沉淀凝血因子通常由( )新鲜全血制备A、400mlB、200mlC、300mlD、500mlE、100ml正确答案:A5、以下哪项是自体输血技术的优点( )A、节约血液资源B、避免经血液传播的疾病C、减少异体输血产生的不良反应D、解决稀有血型或者疑难交叉配血供血困难问题E、以上选项都是正确答案:E6、《医疗机构临床用血管理办法(卫生部85号令)》实施时间( )A、1989年10月B、2012年8月C、2012年10月D、2000年8月E、1998年10月正确答案:B7、输血的适应证不包括A、凝血障碍B、高蛋白血症C、严重感染D、出血E、严重贫血正确答案:B8、有关输血科(血库)参加输血相容性检测室间质评活动,下列说法不正确的是( )A、不得指定专门人员进行检测B、应当按照常规检测方法进行C、为保证结果准确,应单独进行检测D、不得另选检测系统E、应当按照常规检测标本进行正确答案:C9、《献血法》规定:我国实行()献血制度。
A、临床动员B、有偿C、社会互助D、家庭互助E、无偿正确答案:E10、不属于HBV感染的高危人群的是()A、接种过乙肝疫苗且存在抗体者B、多个性伴侣者C、接触血液的医务工作者D、血友病患者E、HBsAg阳性母亲的新生儿正确答案:A11、下列病原体一般不会通过输血传染的是()A、甲型肝炎病毒B、梅毒螺旋体C、HIVD、西尼罗病毒E、疟原虫正确答案:A12、机体从感染传染性病原体开始至抗原或抗体能检测出的这段时间称之为()A、窗口期B、休眠期C、潜伏期D、恢复期E、感染期正确答案:A13、因HLA抗体引起的输血反应,最常见的是A、溶血反应B、非溶血性发热反应C、输血后紫D、循环超负荷E、过敏反应正确答案:B14、冷沉淀1个单位的概念,是指由多少毫升的血制备而成?()A、800mL全血B、600mL全血C、400mL全血D、200mL全血E、300mL全血正确答案:D15、输血后患者出现酱油色尿,意味着可能出现A、过敏反应B、发热反应C、溶血反应D、喉部水肿E、呼吸困难正确答案:C16、与新鲜冰冻血浆相比,普通冰冻血浆不含有( )A、凝血Ⅰ因子B、凝血Ⅶ因子C、凝血Ⅳ因子D、凝血Ⅱ因子E、凝血Ⅴ因子正确答案:E17、诊断AB0新生儿溶血病的实验室检查有( )A、血红蛋白下降.B、网织红细胞增高C、外周血有核红细胞增多D、红细胞抗体释放实验阳性E、以上选项都是正确答案:E18、哪些血型系统的抗原具有剂量效应( )A、RhB、KiddC、DuffyD、MNE、以上选项都是正确答案:E19、根据《血站技术操作规程》,血清HIV检测结果判定规则为( )A、两种试剂检测均为“无反应性”,则报告结果为“阴性”B、两种试剂结果中任一种“可疑”或“反应性”,则报告结果“待查”C、两种试剂结果中均为“可疑”或“反应性”,则报告结果“待查”D、三项都是E、三项都不是正确答案:D20、我国要求单采血小板的数量为()A、2.0×1011/袋B、4.0×1010/袋C、2.0×1010/袋D、2.5×1011/袋E、6.0×1091/袋正确答案:D21、新生儿溶血病患者若需要输血,输注( )最为合适A、去白红细胞B、洗涤红细胞C、冷冻红细胞D、浓缩红细胞E、悬浮红细胞正确答案:B22、关于粒细胞输注,应具备以下什么条件( )A、中性粒细胞绝对值低于0.5×10B、有明显的细菌感染C、强有力的抗生素治疗48小时无效D、骨髓造血功能短期内能恢复E、以上选项都是正确答案:E23、全血保存过程中,未增加的是( )A、血钾B、血氨C、ATPD、血细胞碎屑E、酸性物质正确答案:C24、关于成分输血的叙述,不正确的是A、其原则是只给患者输注其需要的血液成分B、提高输血治疗效果C、可以节约血液资源D、不利于选择各种血液成分的保存条件E、减少输血传播病毒的危险正确答案:D25、Rh血型基因位于人类第( )号染色体A、1B、2C、9D、6E、4正确答案:A26、CPDA保养液保存血液的有效天数是()A、14天B、21天C、28天D、35天E、42天正确答案:D27、机采血小板1U的容量及其血小板含量为( )A、250-300mL,血小板含量≥2.5×10B、150-200mL,血小板含量≥2.5×10C、250-300mL,血小板含量≥2.5×10D、150-200mL,血小板含量≥2.5×10E、200-250ml,血小板含量≥2.5×10正确答案:C28、下列血型抗体中,属于规则抗体的是( )A、抗A抗体B、抗D抗体C、抗A1抗体D、抗H抗体E、抗E抗体正确答案:A29、患者输血前,医护人员将做哪些工作A、病房工人持输血申请和血样送输血科B、医生下医嘱,护士执行C、医生写输血申请后,由患者家属同意后直接联系治疗D、医护人员持输血申请单,贴好血样标签,共同核对患者姓名、性别、年龄、病案号、病室门诊序号、血型和诊断、采集血样送输血科或血库E、无须核对,只要医生写好输血申请,即可送输血科正确答案:D30、关于引起过敏性输血反应的病因,下列说法正确的是( )A、IgA缺乏患者B、过敏体质者C、免疫球蛋白多聚体D、被动获得性抗体E、以上选项都是正确答案:E31、红细胞保养液中不包括下列哪项( )A、肝素B、葡萄糖C、枸橼酸盐D、腺嘌呤E、磷酸盐正确答案:A32、要求单采血小板的供者外周血血小板计数应为()A、(150~250)×109/LB、(100~200)×109/LC、(150~450)×109/LD、(80~150)×109/LE、(50~80)×109/L正确答案:C33、含40%甘油的冰冻红细胞可储存在()A、0℃以下B、-120℃以下C、-30℃以下D、-20℃以下E、-65℃以下正确答案:E34、预防输血相关性移植物抗宿主病应选用A、新鲜冰冻血浆B、少白细胞红细胞C、粒细胞D、洗涤红细胞E、辐照红细胞正确答案:E35、成分输血的优点( )A、容量小、纯度高、疗效好B、使用安全,输血不良反应少C、综合利用,一人献血,多人受益D、便于血液成分保存及运输E、以上选项都是正确答案:E36、下列关于ABO亚型的说法,正确的是( )A、A1亚型只含有A1抗原B、A1亚型含有A1抗原、A抗原C、A2亚型只含有A2抗原D、A2亚型含有A2抗原、A抗原E、以上选项都是正确答案:B37、输血科及血库的主要职责不包括( )A、定期监测.分析和评估临床用血情况,开展临床用血质量评价工作,提高临床合理用血水平B、参与推动自体输血等血液保护及输血新技术C、负责输血相关免疫血液学检测D、负责血液预订、入库、贮存、发放工作E、参与特殊输血治疗病例的会诊,为临床合理用血提供咨询正确答案:A38、制备洗涤红细胞时,一般用生理盐水洗几次( )A、4次B、1次C、5次D、3次E、2次正确答案:D39、微量淋巴细胞毒实验原理,下列说法错误的是( )A、HLA抗体与淋巴细胞上的HLA抗原结合,形成抗原抗体复合物,B、抗原抗体复合物在补体的参与下,细胞膜破坏,导致细胞死亡C、死亡细胞经染料(伊红)染色后,在胞内着黑色D、无相应抗原淋巴细胞则有完整细胞膜,并着红色E、通过观察着色细胞比例,进而判断抗原抗体反应的强度正确答案:D40、全血采集后,制备成成分血的不同层面,血小板位于()A、下层B、中层C、血浆层D、上层E、红细胞层正确答案:B41、采集血液时,静脉穿刺部位消毒区域应不小于A、15cmB、10cmC、20cmD、6cmE、15cm正确答案:D42、在新生儿溶血病血清学检查中,下列哪项是最有价值的( )A、母体免疫血型抗体效价测定B、患儿血清游离抗体试验C、患儿血型鉴定D、患儿红细胞直接抗人球试验E、患儿红细胞抗体放散试验正确答案:E43、血小板的适宜保存条件( )A、4℃保存B、室温保存C、37℃保存D、20-24℃振摇保存E、6-8℃保存正确答案:D44、输血不良反应中死亡率最高的是哪一类( )A、ABO血型不合引起的急性溶血性输血反应B、过敏反应C、发热反应D、输血传播疾病E、输血相关急性肺损伤正确答案:A45、两次全血捐献血时间间隔是A、男女无差别B、六个月C、四个月D、三个月E、男性三个月,女性四个月正确答案:B46、制备冷沉淀的最佳温度应为()A、37℃B、-80℃C、-20℃D、4℃E、22℃正确答案:D47、在自体输血技术中,其中( )由输血科负责血液的采集和贮存A、急性非等容性稀释式自体输血B、急性高容性稀释式自体输血C、急性等容性稀释式自体输血D、储存式自体输血E、回收式自体输血正确答案:D48、在血型鉴定和交叉配血,红细胞缗钱状形成的主要原因是( )A、血清中含有冷凝集素B、血浆球蛋白增高C、自身免疫性温性抗体D、被检红细胞浓度过高E、以上选项都是正确答案:B49、在下列输血反应中,最严重的不良反应是A、输血后紫癜B、非溶血反应C、过敏性皮疹反应D、急性溶血反应E、发热反应正确答案:D50、冷沉淀凝血因子解冻后,在2-6℃条件保存最长不能超过( )A、4小时B、12小时C、24小时D、48小时E、8小时正确答案:C51、关于孟买血型,下列说法错误的是( )A、1952年在孟买发现,缺失H基因B、红细胞无ABH抗原C、临床工作中可当做O型对待D、血清中存在抗-E、抗-B和抗-H抗体F、孟买型个体只能输注孟买型血液正确答案:C52、HLA-Ⅱ类抗原主要表达在( )A、红细胞B、B淋巴细胞C、T淋巴细胞D、血小板E、中性粒细胞正确答案:B53、输血相容性检测项目包括( )A、ABO血型鉴定B、RhD血型鉴定C、不规则抗体筛查D、交叉配血试验E、三项都是正确答案:E54、血液发出后,供血者和受血者的血标本应在2-6℃条件下保存( )A、10天B、5天C、7天D、3天E、15天正确答案:C55、保存血小板的恒温室的温度应为()A、37±1℃B、22±2℃C、4±2℃D、28±2℃E、10±2℃正确答案:B56、输血后紫癜是由于( )引起的免疫反应A、HLA抗原抗体反应B、RBC抗原抗体反应C、HPA抗原抗体反应D、Rh抗原抗体反应E、以上选项都是正确答案:C57、自身免疫性溶血性贫血病人输血时,应首选( )A、冰冻红细胞B、悬浮红细胞C、洗涤红细胞D、浓缩红细胞E、冰冻红细胞正确答案:C58、ABO抗原在下列物质中无表达的是( )A、红细胞C、乳汁D、脑脊液E、唾液正确答案:D59、关于过敏性输血反应,下列说法正确的是( )A、患者有多次输血史,尤其是有多次粒细胞输注B、患者输血后出现面色潮红,腰酸背痛,并有酱油色尿C、患者以发生荨麻疹为主,并伴有嗜酸性粒细胞增高D、患者血小板明显减少,有呼吸困难,恶心呕吐症状E、患者以体温升高为主要症状,并无其他临床体征正确答案:C60、血液库存预警划分的等级颜色分别有( )A、绿色.黄色.橙色B、黄色.橙色.红色C、绿色.橙色.红色D、绿色.黄色.紫色E、绿色.黄色.红色正确答案:B61、冰冻解冻去甘油红细胞主要用于( )A、再生障碍性贫血者B、稀有血型患者C、器官移植患者D、有输血过敏史者E、已产生血小板抗体患者正确答案:B62、关于血小板输注的注意事项错误的是()A、输注前要轻摇血袋,混匀B、以患者能够耐受的最快速度输注C、Rh阴性患者要输Rh阳性血小板D、要求ABO同型输注E、使用Y型标准输血器进行输注正确答案:C63、用于交叉配血试验的标本必须是输血前( )天内采集的。
临床输血检验:HLA抗原检测
台离淋巴细胞
HLA血清学分型试验
微量淋巴细胞毒试验
待检淋 巴细胞 悬液
静置30-40分钟
兔补体
静置60-70分钟
5%伊红
死细胞体积大,着黑色,无折光性;活细胞 大小正常,未着色,折光性强,较透亮;
HLA血清学分型试验
质量控制
HLA抗原抗体
• 最好选用单克 隆抗血清
C.具有快速、耗时较短和结果判断简便的特点
D.引物5'端第一个碱基与模板配对起关键作用
A.过敏性输血反应
B.溶血性输血反应
C.输血相关性循环超负荷 D.输血相关性急性肺损伤
2.有关微量淋巴毒试验的特性描述错误的是( )。
A.死细胞明亮折光性强
B.需要活的淋巴细胞
C.HLA抗原指定的标准方法 D.一般在相差显微镜下观察结果
3.有关HLA基因分型PCR-SSP方法描述错误的是( )。
A.是目前大多数实验室常用的方法之一 B.可能出现假阳性条带或漏孔现象
• 抗体效价适宜 • 存在剂量效应
淋巴细胞
• 要求活性和纯 度高
• 浓度为2~ 4×106/mL
• 病理状态下 HLA可能会表 达异常
孵育温度和时 间
• 严格掌握孵育 时间
• 最适温度为 20-25℃
其他
• 补体 • 染液应进行预
试验;用甲醛 固定 • 设置阳性和阴 性对照
想一想
1.由HLA抗原与HLA抗体引起的输血不良反应是( )。
HLA抗原检 测技术
不松劲 不大意
学习目标
1.熟悉HLA血清学分型试验的原理及质量控制。 2.淋巴细胞毒交叉配合试验的原理及质量控制。 3.HLA分子生物学分型方法
HLA血清学分型试验
淋巴细胞毒试验
淋巴细胞毒试验淋巴细胞毒试验介绍:当特异的效应T淋巴细胞在体外与靶细胞接触时,可表现出破坏和溶解靶细胞的特性,称为淋巴细胞毒作用(cytotoxicity)。
靶细胞可以是肿瘤细胞或其它组织细胞。
淋巴细胞杀伤靶细胞的方式可通过直接杀伤或产生淋巴因子破坏靶细胞。
本试验方法有形态检查法和同位素释放法两种。
前者不需特殊设备,只需用显微镜计数靶细胞的存活数,操作比较方便。
后者则是用125I-脱氧脲嘧啶核苷或51Cr标记靶细胞,以放射性同位素的释放作为靶细胞受损伤的指标。
此法需要特殊设备如液闪仪等,但可自动测量,结果重复性好。
淋巴细胞毒试验正常值:形态学检查法:比较受检组与对照组,P<0.05。
125I或51Cr法:P>0.05。
淋巴细胞毒试验临床意义:本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标;也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力,来判断肿瘤患者的预后;还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。
淋巴细胞毒试验注意事项:(1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时,实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞,对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。
若检测其它样品如肿瘤抗原或免疫原、治疗药物等与细胞免疫的关系,则应增设第3组,在此试验组中先使淋巴细胞与待测样品作用,继经洗涤后再观察此“致敏淋巴细胞”对肿瘤靶细胞的杀伤作用。
此时前两组成为对照组。
(2)靶细胞与淋巴细胞的活率要处于最佳状态,一般要>90%。
(3)加入培养液中的小牛血清须先作毒性试验。
(4)接种靶细胞和淋巴细胞的计数要准确。
(5)实验组和对照组应安排在同一块板上以减少误差。
(6)培养液的pH以6.8~7.2最为适宜。
淋巴细胞毒试验检查过程:暂无相关信息。
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微量淋巴细胞毒试验操作规程 SXYJ-GZ-0214
1目的规范微量淋巴细胞毒试验操作,正确进行HLA抗体鉴定。
2适用范围适用于HLA抗体鉴定。
3职责检测者负责依据此程序进行微量淋巴细胞毒试验操作。
4材料与设备肝素抗凝剂、淋巴细胞分离液、凝血酶、补体、伊红染液、12%甲醛、甘油;
空白72孔微量反应板、微量加样枪(1µl、2µl、5µl)、倒置相差显微镜、水平式离心机、血细胞计数池、KUBOTA KA5100型离心机等。
5操作方法
5.1待检标本准备及要求移植前交叉淋巴细胞毒患者不抗凝标本3ml,供者肝素抗凝静脉
血5ml;习惯性流产女方不不抗凝标本3ml,男方肝素抗凝静脉血5ml。
不抗凝标本充分退缩,分离出血清备用;肝素抗凝静脉血充分混匀,室温放置备用。
5.2淋巴细胞制备
5.2.1肝素抗凝静脉血,室温放置20分钟,2000转/分离心10分钟,吸取白膜层于装有2ml
盐水的试管中,混匀;
5.2.2缓慢加在装有3ml Ficoll液面上,2000转/分离心30分钟,取淋巴细胞层,于另一
小试管中,加盐水至3ml,3400转/分离心1分钟(SERO 3键);
5.2.3弃掉上清,加1ml盐水,将细胞轻轻吹起,3400转/分离心15秒钟(SERO 2键),去
除血小板的干扰;
5.2.4弃掉上清,加入3ml的生理盐水,并将细胞轻轻吹起,3400转/分离心1分钟(SERO 3
键),弃掉上清,用1640保养淋巴细胞;
5.2.5淋巴细胞浓度调节混匀淋巴细胞后冲入血细胞计数池,倒置相差显微镜下观察细胞浓
度为2500-3000个/µl(中方格内的每个小格约20-30个细胞)。
5.3加样
5.3.1在空白72孔微量反应板中加液体石蜡,8ul/孔;
5.3.2每孔加相应血清1ul(阴性对照孔加血小板配型试剂中阴性对照血清);
5.3.3每孔加淋巴细胞1µl 置室温35分钟;
5.3.4每孔加补体5µl,室温65分钟;
5.3.5每孔加伊红2µl,室温2分钟;
5.3.6每孔加甲醛8µl,盖板;
5.3.7将反应板置湿盒内至少4小时或过夜再读板,若是急诊可以600转/分离心5分钟后读
板。
6结果判定将反应板置于倒置相差显微镜下观察淋巴细胞死亡情况,死细胞(被染色细胞)体积大,颜色暗,无折光性;活细胞(未被染色细胞)体积小而亮,有折光性。
通过估计各孔死细胞的百分数判定结果(见下表)
结果死亡细胞(%)打分
阴性0-10 1
可疑阴性11-20 2
可疑阳性21-40 4
阳性41-80 6
强阳性81-100 8
7注意事项
7.1血清分离时,血块退缩要充分自然,避免退缩不彻底时纤维蛋白干扰。
7.2淋巴细胞提纯去血小板时,注意凝血酶不要加过量,防止淋巴细胞被去除物包裹而丢失。
7.3判定结果时,应先观察阴性对照孔,以此判定试验的可信程度。
8依据《全国临床检验操作规程》(第3版)中华人民共和国卫生部医政司。