化学发光法技术概要
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磁珠
基本材质：Fe3O4/Fe2O3，褐色磁性物质 直径大小：1μm左右 磁珠类型：
分为氨基磁珠、羧基磁珠、苯甲磺酰基磁珠和链霉 亲和素磁珠等四种磁珠 磁珠特性： 不同供应商的不同类型磁珠，亲水性不同，在溶液 中的状态也不同，所需的磁吸时间也不同。磁吸时 间过短，会造成丢磁；磁吸时间过长，会造成磁珠 聚集，不宜分散。
洗涤液加量不小于350 µl。 发光检测恒温为宜。PMT能达到实验所需要求。 带有内置计算浓度功能及校准功能。
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需要解决的关键点（1）
洗涤模块：
洗涤次数？洗涤液种类？洗涤液体积？洗涤是否 带超声？洗涤流速？是否预洗？加液速度？
磁分离模块：
底吸还是侧吸？磁力大小的选择？磁分离时间？ 永磁还是顺磁？
第一个结果报告时间（min ） 10 15.6 <15.6 18 15 15 30 16 16 15 35 24 9 9
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检测通量（T/hour） 68-120 200 1200 240 100 100 60 250 165－700 120 200 90 88 55
全自动仪器实验流程要求（1）
主要实验流程（1）——一步法
DPC公司
Immulite系列：基于粒子离心分离技术的化学发光检测。
强生公司
Vitros系列：管式包被的化学发光检测技术。
罗氏公司
Elecsys系列：基于磁分离的电化学发光检测技术。
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各种全自动仪器主要技术参数
HCG Axsym Architect i2000 Architect ci8200 ADVIA Centaur Access Access2 Vidas Dimension Xpand Dimension RXL Immulite Immulite2000 Vitros Elecsys 2010 Elecsys 1010
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
洗涤3-5次； 加入发光底物，5-15分钟检测。
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全自动仪器实验流程要求（2）
主要实验流程（2）——一步半法
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
加入试剂3， 37℃孵育5－30分钟； 洗涤3-5次； 加入发光底物， 5-15分钟检测。
化学发光法技术概要 及自动化免疫分析仪 技术要点
科华生物研发中心光免小组 李基
2010.7.14
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化学发光法反应基本原理
➢ 抗原-抗体反应
抗体能够特异性识别相对应的抗原，并与之结合，这种反 应称之为抗原抗体反应。 抗原-抗体反应具有特异性、敏感性、可逆性等特点。
➢ 酶促底物发光
将检测试剂中的抗原或抗体用碱性磷酸酶（AP）加以标 记，通过发光底物测定相对光子数（RLUs值），来检测 目标抗体或抗原的浓度。
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பைடு நூலகம்
需要解决的关键点（2）
混匀模块：
试剂架的混匀功能？混匀频率和混匀方式？反应 槽是否带有混匀功能？
样品针和试剂针：
怎样防止样品与试剂，试剂与试剂之间的交叉污 染？怎样保证加液量准确？怎样防止针头堵塞？
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谢谢观看！
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化学发光法反应模式
一步法 （15min反应+15min显色）
➢ 夹心法 ➢ 竞争法
两步法 （15min+15min反应+15min显色）
➢ 间接法 ➢ 捕获法
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一步法：夹心法
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一步法：竞争法
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两步法：间接法
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两步法：捕获法
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化学发光法反应介质
✓ 固相介质：磁珠 ✓ 酶标记物：碱性磷酸酶（AP） ✓ 发光底物：AMPPD
Architect系列：基于磁分离的化学发光检测。 拜尔公司
ADVIA Centaur：基于磁分离的化学发光检测。
贝克曼公司
Access系列：基于磁分离的化学发光检测。
生物梅里埃公司
Vidas系列：管式包被的酶促荧光检测。
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市场上主要全自动仪器机型及应用（2）
德灵公司
Dimension系列：多种技术的复合体，基于粒子的酶标 检测及粒子增强与非增强的免疫比浊测定等。
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全自动仪器实验流程要求（3）
主要实验流程（3）——两步法
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
洗涤3-5次，加入试剂3（或试剂3+试剂4）， 37℃孵育5－30分钟；
洗涤3-5次； 加入发光底物， 5-15分钟检测。
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全自动仪器其他要求
样品加量10µl~200 µl，试剂加量50µl~200 µl， 随检测项目不同而有所增减。
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碱性磷酸酶（AP）及发光底物
RLUs值范围
板式发光范围1,000-20,000,000RLUs 管式发光范围0-10,000,000RLUs
分辨率要求
对于测定不同浓度的标本，至少在试剂盒标准曲 线范围内能明显区分两者的RLUs。
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市场上主要全自动仪器机型及应用（1）
雅培公司
Axsystem: 基于粒子的荧光偏振技术。
磁珠
基本材质：Fe3O4/Fe2O3，褐色磁性物质 直径大小：1μm左右 磁珠类型：
分为氨基磁珠、羧基磁珠、苯甲磺酰基磁珠和链霉 亲和素磁珠等四种磁珠 磁珠特性： 不同供应商的不同类型磁珠，亲水性不同，在溶液 中的状态也不同，所需的磁吸时间也不同。磁吸时 间过短，会造成丢磁；磁吸时间过长，会造成磁珠 聚集，不宜分散。
洗涤液加量不小于350 µl。 发光检测恒温为宜。PMT能达到实验所需要求。 带有内置计算浓度功能及校准功能。
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需要解决的关键点（1）
洗涤模块：
洗涤次数？洗涤液种类？洗涤液体积？洗涤是否 带超声？洗涤流速？是否预洗？加液速度？
磁分离模块：
底吸还是侧吸？磁力大小的选择？磁分离时间？ 永磁还是顺磁？
第一个结果报告时间（min ） 10 15.6 <15.6 18 15 15 30 16 16 15 35 24 9 9
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检测通量（T/hour） 68-120 200 1200 240 100 100 60 250 165－700 120 200 90 88 55
全自动仪器实验流程要求（1）
主要实验流程（1）——一步法
DPC公司
Immulite系列：基于粒子离心分离技术的化学发光检测。
强生公司
Vitros系列：管式包被的化学发光检测技术。
罗氏公司
Elecsys系列：基于磁分离的电化学发光检测技术。
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各种全自动仪器主要技术参数
HCG Axsym Architect i2000 Architect ci8200 ADVIA Centaur Access Access2 Vidas Dimension Xpand Dimension RXL Immulite Immulite2000 Vitros Elecsys 2010 Elecsys 1010
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
洗涤3-5次； 加入发光底物，5-15分钟检测。
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全自动仪器实验流程要求（2）
主要实验流程（2）——一步半法
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
加入试剂3， 37℃孵育5－30分钟； 洗涤3-5次； 加入发光底物， 5-15分钟检测。
化学发光法技术概要 及自动化免疫分析仪 技术要点
科华生物研发中心光免小组 李基
2010.7.14
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化学发光法反应基本原理
➢ 抗原-抗体反应
抗体能够特异性识别相对应的抗原，并与之结合，这种反 应称之为抗原抗体反应。 抗原-抗体反应具有特异性、敏感性、可逆性等特点。
➢ 酶促底物发光
将检测试剂中的抗原或抗体用碱性磷酸酶（AP）加以标 记，通过发光底物测定相对光子数（RLUs值），来检测 目标抗体或抗原的浓度。
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பைடு நூலகம்
需要解决的关键点（2）
混匀模块：
试剂架的混匀功能？混匀频率和混匀方式？反应 槽是否带有混匀功能？
样品针和试剂针：
怎样防止样品与试剂，试剂与试剂之间的交叉污 染？怎样保证加液量准确？怎样防止针头堵塞？
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谢谢观看！
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化学发光法反应模式
一步法 （15min反应+15min显色）
➢ 夹心法 ➢ 竞争法
两步法 （15min+15min反应+15min显色）
➢ 间接法 ➢ 捕获法
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一步法：夹心法
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一步法：竞争法
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两步法：间接法
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两步法：捕获法
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化学发光法反应介质
✓ 固相介质：磁珠 ✓ 酶标记物：碱性磷酸酶（AP） ✓ 发光底物：AMPPD
Architect系列：基于磁分离的化学发光检测。 拜尔公司
ADVIA Centaur：基于磁分离的化学发光检测。
贝克曼公司
Access系列：基于磁分离的化学发光检测。
生物梅里埃公司
Vidas系列：管式包被的酶促荧光检测。
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市场上主要全自动仪器机型及应用（2）
德灵公司
Dimension系列：多种技术的复合体，基于粒子的酶标 检测及粒子增强与非增强的免疫比浊测定等。
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全自动仪器实验流程要求（3）
主要实验流程（3）——两步法
样本+试剂1（或试剂1+试剂2），37℃孵育5－ 30分钟；
洗涤3-5次，加入试剂3（或试剂3+试剂4）， 37℃孵育5－30分钟；
洗涤3-5次； 加入发光底物， 5-15分钟检测。
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全自动仪器其他要求
样品加量10µl~200 µl，试剂加量50µl~200 µl， 随检测项目不同而有所增减。
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碱性磷酸酶（AP）及发光底物
RLUs值范围
板式发光范围1,000-20,000,000RLUs 管式发光范围0-10,000,000RLUs
分辨率要求
对于测定不同浓度的标本，至少在试剂盒标准曲 线范围内能明显区分两者的RLUs。
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市场上主要全自动仪器机型及应用（1）
雅培公司
Axsystem: 基于粒子的荧光偏振技术。