肌动蛋白的聚合运用在钙离子载体A23187诱导的人精子顶体反应中的运用

第一章中文摘要

肌动蛋白的聚合作用在钙离子载体Ａ２３１８７诱导的人精子顶体

反应中的作用

硕士研究生：吴帅

导师：王新生副教授

孟凡会副教授

中文摘要

目的：探讨Ｆ～肌动蛋白在人精子顶体反应过程中的重要作用及可能机制。

方法：本实验采用Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ—ＰＳＡ荧光染色检测人精子顶体反应。以不同浓度的Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ处理正常的人精子，观察Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对精子活动力及其自发性顶体反应发生率的影响。在以链球菌溶血素Ｏ处理人精子制作的可以渗透大分子物质的精子模型中，钙离子载体Ａ２３１８７诱导精子产生顶体反应之前，先用Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ（鬼比环肽，～种Ｆ一肌动蛋白的稳定剂）对其进行预处理，然后测定其顶体反应发生率（ＡＲ％），与空白对照进行比较分析探讨Ｆ一肌动蛋白的聚合作用在人精子顶体反应过程中的重要作用及可能机制。

结果：不同浓度Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ处理的人精子，其活动力及自发性顶体反应发生率之间的差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。对经过链球菌溶血素Ｏ进行预处理形成的人精子渗透模型，加入ＰｈａＵｏｉｄｉｎ组的人精子顶体反应率与空白对照相比其差别具有显著的统计学意义（Ｐ＜０．０１）；而对未经过处理的完整的人精子，其顶体反应发生率与空白对照间的差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），但无显著的统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０１）。另外，在精子标本中加入链球菌溶血素Ｏ组与该试剂的空白对照组相比其顶体反应率差别具有显著的统计学意义（Ｐ＜０．０１）。

结论：钙离子载体Ａ２３１８７对人精予顶体反应具有明显的诱导作用；本实验中所采用浓度的Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对完整的人精子顶体反应、自发性精子顶体反应及精子活力均无影响；但可轻度降低顶体完整的人精子顶体反应发生率。链球菌溶血素Ｏ（ＳＬＯ）

第一章中文摘要

可以在不影响精予正常功能的情况下提高精子质膜的通透性：在以链球菌溶血素Ｏ制作的人精子模型中，Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ较空白组能显著降低人精子的顶体反应发生率，提示Ｆ一肌动蛋白的聚合作用对人精子项体反应具有重要意义。

关键词：肌动蛋白；链球菌溶血素０（ＳＬＯ）：Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ；顶体反应

２

第二章英文摘要

ＡｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｆａｃｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７一ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ

ｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅｓｈｕａｉｗｕ

Ａｂｓｔｒａｃｔ

ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｄｉｓｓｃｕｓｉｎｇｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｆａｃｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍ

ｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７－ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ

ａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈａｔ．

Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｒｅｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｄｅａｌｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎＰｈａｌｌｏｉｄｉｎ，ａｎｄｔｈｅｎｏｖｅｒｖｉｅｗｔｈｅａｆｆｅｃｔｉｏｎｏｆＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｏｎｔｈｅ

ｈｕｍａｎ

ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｍｏｔｉｌｉｔｙ．Ｉｎａｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎ

（ＳＬＯ）一ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｄｅｌ，ｔｈｅｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｒｅｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｉｎｃｕｂａｔｅｄｉｎｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｆｏｒ３０ｍｉｎｕｔｅｓ．ａｎｄｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７ｗａｓａｄｄｅｄａｎｄｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｃｏｎｔｉｎｕｅｄｆｏｒｌ５ｍｉｎｕｔｅｓｔｏｉｎｄｕｃｅｔｈｅａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ｔｈｅｎｗｅｃａｎａｃｃｅｓｓｔｈｅｒａｔｅｏｆｔｈｅｈｕｍａｎａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｆｉｎａｌｌｙ，ｗｅａｎａｌｙｓｉｓｔｈｅｄａｔａａｎｄ

ｄｉｓｓｃｕｓｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｅｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７－ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｃｏｒａｐａｒｅｄｗｉｔｈｂｌａｎｋｃｏｎｔｒａｓｔ．

Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄｔｈｅｒａｔｅｏｆｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖａｒｉｏｕｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｈａｖｅｎｏ

ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．ＩｎａＳｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ（ＳＬＯ）・ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎ

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Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：Ｃａｌｃｉｕｍ

ｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７Ｃａｌｌｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ

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第一章英文摘要

ａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｉｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｄｏｐｔｅｄｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｈａｓｒｉｏａｆｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄｉｔｓｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ，ｉｔＣａｌｌｗｏｒｋｓｌｉｇｈｔｌｙｏｎｔｈｅａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｉｎｔａｃｔｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ．Ｉｎａｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎ

Ｏ（ＳＬＯ）一ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｄｅｌ，Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎｃａｌｌｏｂｖｉｏｕｓｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｒａｔｅｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅｓｉｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ（ＳＬＯ）Ｃａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙ

ｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｐｅｎｅｔｒａｂｉｌｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｏｕｔｓｉｄｅａｃｒｏｓｏｍｅｍｅｍｂｒａｎｅａｎｄｅｘｔｒａｎｕｃｌｅａｒｍｅｍｂｒａｎｅ，ｗｈｉｌｅｉｔｄｏｎ’ｔｉｍｐａｃｔｏｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｆｕｎｃｕｔｉｏｎ．ＴｈｅＰｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｎ

ｐｌａｙａＮｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｃｏｔｌｌ＇ｓｅｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｃｔｉｎ；ｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ；Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ；ａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ

Ｄｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：ｘｉｎｓｈｅｎｇＷａｎｇｖｉｃｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒ

ｆａｎｈｕｉＭｅｎｇｖｉｃｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒ

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