肌动蛋白的聚合运用在钙离子载体A23187诱导的人精子顶体反应中的运用
精卵识别的分子机制与受精过程
精卵识别的分子机制和受精过程樊国达（生命科学学院，河北大学，保定 071002）摘要哺乳动物精卵识别以及受精过程是一系列有序而复杂的过程，包括精子的获能，精子识别卵子的透明带；与透明带结合后发生顶体反应，完成顶体反应后的精子与卵子的质膜融合，融合后精子对卵子的激活，卵子对精子的激活，雄原核和雌原核的融合。
关键词获能；顶体反应；质膜融合；受精The molecular mechanisms of sperm-egg recognition andfertilization processFan guoda(College of Life Sciences，Hebei University，Baoding 071002，China)Abstract Mammalian sperm-egg recognition and fertilization process is a series of orderly and complex process, including sperm capacitation, sperm identify zona pellucida; acrosome reaction after Combined with zona pellucida, the fusion of plasma membrane of egg and sperm after completion of acrosome reaction, the activation of sperm to egg after the fusion, the activation of eggs to sperm, and the fusion of male pronucleus and female pronucleus.Key words sperm capacitation; acrosome reaction; he fusion of plasma membrane; fertilization哺乳动物精卵识别以及受精过程是一系列有序而复杂的过程，首先精子必须获能，使自身超活化，超活化后的精子能识别卵子的透明带，而且这种识别具有特异性，主要是一些糖蛋白的相互结合，与透明带结合后发生顶体反应，完成顶体反应后的精子与卵子通过一些膜上的蛋白物质进行质膜融合，融合后精子对卵子的激活，并且伴随着预防多精受精，卵子对精子的激活主要体现在对精核的重编程，最后雄原核和雌原核进行融合形成合子，完成受精。
高三生物一轮复习：第38讲 胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题
(1)原始生殖细胞的增殖方式为有丝分裂
联系
(2)产生精子和卵子的方式均为减数分裂。该过程中均经过
一次染色体复制和两次分裂,子细胞中染色体数目减半
2.受精过程中的“三大反应”和“两道屏障”
胚胎工程技术是在体外的条件下,模拟自然状态下的受精和胚胎发育过程,因 此了解和掌握哺乳动物受精和胚胎发育规律,十分重要。 (1)精子与卵细胞结合,首先发生 顶体 反应,释放的物质的作用 是 水解卵丘细胞之间的物质,形成精子穿越放射冠的通道,并溶解透明带(或
。
溶解放射冠和透明带) 。
[解析] (1)精子与卵细胞结合,首先发生顶体反应,释放顶体酶,水解卵丘细胞之 间的物质,形成精子穿越放射冠的通道,并溶解透明带(或溶解放射冠和透明 带)。
(2)防止多精入卵的两道屏障是 透明带反应和卵细胞膜 反应。 [解析] (2)防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。
4.胚胎移植的生理学基础
哺乳动物发情排卵后,同种动物的供、受
胚胎移入的基础 体
生殖器官
的生理变化是 相同的
哺乳动物的早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子
胚胎收集的基础 宫建立组织上的联系,而是处于
游离
状态
移入胚胎存活的 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 免疫排斥反应
基础
生理和组织联系
保留遗传特性的 供体胚胎可与受体子宫建立正常的
。
程;后者比前者多了胚胎移植前的“遗传学诊断”过程 。
1.胚胎的早期培养与动物细胞培养的比较
项目 原理 目的
培养液成分
盐类 营养物质 调节物质 特有成分
早期胚胎培养 动物细胞培养
细胞的分裂、分化 细胞分裂
整理全部：动物胚胎工程
1.绪论动物胚胎工程就是以胚胎为研究对象，为了加速繁育经济动物，培育动物的优良品种，或挽救濒危动物使用的一系列工程技术方法，一般来说包括胚胎移植、试管动物（体外受精）、胚胎冷冻、胚胎分割、胚胎干细胞、核移植（克隆）技术等。
动物胚胎工程又称胚胎生物工程或胚胎生物技术，主要是对动物的卵子、精子和胚胎在体外条件下进行各种操作，以加速繁育经济动物，培育优良品种，或挽救濒危动物而使用的一系列工程技术方法。
生物工程包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程。
胚胎工程是细胞工程中的分支。
繁殖技术：同期发情、超数排卵、人工授精胚胎移植、体外受精、胚胎冷冻、胚胎分割、性别控制、动物克隆、发情鉴定、妊娠诊断、生殖免疫、助产技术、生殖疾病控制技术繁殖管理：从群体角度研究提高动物繁殖效率的理论与技术措施繁殖障碍及其防治：从畜牧学的角度分析动物繁殖障碍的发病率和病因，探讨防治繁殖障碍的方法与技术措施。
动物胚胎工程的研究内容：胚胎移植，胚胎分割，胚胎冷冻，体外受精，胚胎干细胞技术，转基因技术，动物克隆，性别控制，嵌合体技术胚胎移植：是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出，移植到另外一头或数头同种的、生理状况相同或相似的母畜生殖道的适当部位，使之继续发育成新个体的过程。
胚胎分割技术：通过对胚胎进行显微操作，将一枚胚胎用显微手术等方法分割成二分、四分甚至八分胚，经体内或体外培养,然后移植入受体中，以得到同卵双生或同卵多生后代的技术。
其理论依据是早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性胚胎冷冻：胚胎的冷冻保存，是将胚胎贮存在－196℃，超低温下长期保存的方法。
胚胎的冷冻方法大体分为常规冷冻方法（慢速冷冻法）和玻璃化冷冻法两种。
胚胎干细胞技术：胚胎干细胞（embryonic stem cells，ES细胞）主要来自囊胚的内细胞团、早期胚胎的种细胞或胎儿的原始生殖细胞。
转基因技术：转基因动物就是用实验室方法将人们需要的目的基因导入动物的受精卵，使外源基因与动物本身的基因整合在一起，并随细胞的分裂而增殖，在动物体内得到表达，并能稳定地遗传给后代。
RhoGDI_在人睾丸_精子中表达及其与体外受精成功率相关性的初步分析
1 资料和方法
1. 1 临床标本 在知情同意原则下, 在南京医科大 学遗体捐献中心获得正常人睾丸标本, 在南京医科 大学附属南京市妇幼保健院生殖中心获得 25 例进 行体外受精 ( IVF )治疗的男性不育患者的精液标本 和 10例正常生育的男性精液标本。正常生育男性 标本质量均达到世界卫生组织精液变量参考值的标 准 [ 5] 。参考文献 [ 6] , 25例患者标本根据受精率高 低分为两组: 受精率 ∀ 60% 为高受精率组 ( 12 例 ) , 受精率 < 60% 为低受精率组 ( 13例 ) 。 1. 2 主要试剂 P erco ll细胞分离液购自美国 phar m acia公司; RhoGD I 兔抗人多克隆抗体购自美国 Santa C ruz公司; 微管蛋白 ( tubu lin) 兔抗人多克 隆抗体购自美国 Abcam 公司; 人输卵管液 HTF 购自 美国 InV itro Care公司; Ca2+ 载体 A 23187购自美国 S igm a公司; 聚偏二氟乙烯 ( PVDF ) 膜购自美国 Am ersham 公司, 其他试剂均购自南京基因生物公司。
某工业大学生物工程学院《细胞生物学》考试试卷(886)
某工业大学生物工程学院《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（45分，每题5分）1. 细胞外基质中的分泌蛋白主要是从高尔基体分泌小泡中分泌到细胞外的。
（）答案：正确解析：分泌蛋白主要在粗面内质网上合成，在开启高尔基体加工修饰，通过膜泡运输的方式分泌到细胞外基质中。
2. 膜周边蛋白与生物膜结合比内在膜蛋白更紧密。
（）答案：错误解析：内在膜蛋白与生物膜结合更紧密。
3. 所谓Hayrick界限就是指细胞分化的极限。
（）答案：错误解析：Hayrick界限是指正常的体外培养的细胞寿命不是无限的，而只能进行有限系数的增殖，即有丝分裂的极限。
4. 样品经免疫酶标记后必须在荧光显微镜下进行观察。
（）答案：错误解析：样品经免疫酶标记后可在普通显微镜下观察。
5. 在生物膜中，每个类脂分子都带有一条糖链，而且都分布在非胞质面。
（）答案：错误解析：在生物膜中，并非每个类脂分子都带有一条嘧啶。
6. 在电子显微镜制样中，锇酸主要染色蛋白质，铅盐容易染色脂肪，醋酸铀主要用来染色核酸。
（）答案：错误解析：锇酸主要染色脂肪组织，铅盐容易染色脂质，醋酸铀主要用来染色核酸。
7. 受体都分布于质膜表面，在信息传递和细胞识别过程中起信号接收器的作用。
（）答案：错误解析：受体分为胞内受体和胞外受体两种类型。
8. 通过重组DNA技术使表达的溶酶体蛋白C端加上KDEL序列，那么重组蛋白将从高尔基体返回内质网，不能进入溶酶体。
（）答案：正确解析：KDEL为回收信号序列，C端含有该序列的多肽将通过COPⅠ有被小泡运回内质网。
9. 引起细胞转型的RNA肿瘤病毒其复制过程与DNA病毒及RNA病毒基本一致，没有根本的区别。
（）答案：错误解析：引起细胞转型的RNA肿瘤病毒其复制过程与DNA病毒及RNA病毒有根本不同。
用顶体反应释放的顶体酶活性评价顶体反应功能的研究
用顶体反应释放的顶体酶活性评价顶体反应功能的研究王洪亮;刘睿智;张红国;赵丁;许宗革【期刊名称】《中国妇幼保健》【年(卷),期】2007(22)18【摘要】目的:研究用顶体反应释放的顶体酶活性评价人类精子顶体反应功能。
方法:10例健康生育男子精液,采用Percoll密度梯度分离法优选精子,用FITC-PSA荧光染色法分析顶体反应(acrosome reaction,AR),顶体酶活性采用分光光度比色法测定。
结果:A23187和孕酮诱导的精子AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。
随A23187浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.01)。
A23187诱导AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率呈明显正相关关系(r=0.950,P<0.001)。
随孕酮浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。
孕酮诱导的AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率亦呈明显正相关关系(r=0.921,P<0.001)。
结论:孕酮可诱导人精子顶体反应,用顶体反应释放的顶体酶活性可评价人精子顶体反应功能。
【总页数】4页(P2576-2579)【关键词】人类精子;顶体反应;顶体酶活性;孕酮【作者】王洪亮;刘睿智;张红国;赵丁;许宗革【作者单位】吉林大学第一医院泌尿外科;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室;东北师范大学遗传与细胞研究所【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.生育与不育男性精子顶体反应释放的顶体酶活性比较 [J], 刘睿智;高元奇;张红国;许宗革;王洪亮2.钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精结局的关系研究 [J], 郭小桥;余波澜;周华;司沙沙;曹定娅;刘见桥;孙筱放3.低氧对大鼠精子体外顶体反应和顶体酶、透明质酸酶活性的影响 [J], 廖卫公;高钰琪;黄碱;范有明;蔡明春;吴艺4.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析 [J], 周欢群;蒋满波;周文;谢妍;吴爱华;王爱爱;倪运萍;陆杉5.优选和冻融对精子顶体反应及顶体反应释放的顶体酶活性影响 [J], 张红国;刘睿智;许宗革;王洪亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
γ-氨基丁酸诱发人精子顶体反应及其受精能力
γ-氨基丁酸诱发人精子顶体反应及其受精能力袁玉英;何春娜;石其贤【期刊名称】《生理学报》【年(卷),期】1998(50)3【摘要】本文的目的是为了探讨γ-氨基丁酸（GABA）是否可激发人精子顶体反应（AR）。
受精能力及其可能的作用方式。
实验采用金霉素荧光染色法（CFC）、胞内游离Ca2＋测定和精子穿透去透明带仓鼠卵（SPA）试验，分别评价GABA诱发人精子AR及其穿卵能力。
结果表明：CABA可诱发人获能精子发生AR，且随精子获能进程而显著增加，并存在明显的量效关系，该作用可被P4加强。
GABA还可明显地激发胞内钙［Ca2＋］i升高。
然而，GABA诱发精子AR不仅可被Ca2＋螫合剂EGTA所桔抗，而且为Ca2＋通道阻滞剂La3＋所阻断。
此外，GABA还可明显地促进人精子的穿卵能力。
据此推论，GABA通过Ca2＋介导，调节人精子AN，促进受精率提高。
上述结果为激活精子表而GABAA受体及其引起信息传递的研究奠定了基础。
【总页数】7页(P326-332)【关键词】GABA;精子;顶体反应;精子穿卵试验;受精能力【作者】袁玉英;何春娜;石其贤【作者单位】浙江省医学科学院;中国人民解放军空军454医院【正文语种】中文【中图分类】Q492;R339.2【相关文献】1.γ氨基丁酸诱发马鹿精子顶体反应 [J], 刘伟石;李和平;邹琦;任艳玲2.钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精结局的关系研究 [J], 郭小桥;余波澜;周华;司沙沙;曹定娅;刘见桥;孙筱放3.人卵泡液诱导精子顶体反应预测体外受精能力 [J], 黄敏珍;吴敬之;史哲;陈创奇;杨少芬4.γ—氨基丁酸诱发人精子顶体反应及其对若干离子转运影响的研究 [J], 王春年;袁玉英5.人卵泡液诱导的顶体反应、精子形态与体外受精率的关系 [J], 李建平;钟影;吴东;艾玲;王胜;谭超;曾伟前;刘敬;马光平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠中的精卵结合透明带糖蛋白对顶体反应的诱导及一系列事件
小鼠中的精卵结合：透明带糖蛋白对顶体反应的诱导及一系列事件摘要：在这个研究中，小鼠精子与未受精卵及胚胎，从卵和胚胎中分离出来的溶解的透明带和纯化过的透明带糖蛋白ZP1,2和3（JDBleil和PM Was-sarman，（1989b）Den Bid 76,185-202）的相互作用都已经通过光学、电子显微镜在体外进行了检验。
所述实验是为了确定体外精卵互作过程中事件的短时顺序并且鉴定出诱导小鼠精子发生顶体反应的透明带中的成分。
精卵互作系列的“脉冲追踪”分析揭示了小鼠精子首先疏松接触然后才会紧密地结合到未受精卵的透明带上。
精子与卵子透明带的结合之后紧接着是对顶体反应的诱导。
顶体反应的诱导可以通过透明带介导，因为从未受精卵中分离出的溶解的透明带被发现和钙离子载体A23187在体外诱导顶体反应时同样有效。
此外，从未受精卵而不是二细胞胚胎中分离出来的透明带中纯化的ZP3也和卵中分离的溶解的透明带以及钙离子载体A23187 一样在诱导顶体反应中十分有效。
卵子和排太重ZP1,2以及胚胎中的ZP3和对照组相比对顶体反应几乎没有影响。
这些实验及其他实验（JDBleil和PMWassarman，（1980b）Cell 20,873-882）的结果强烈表明，至少在体外，小鼠精子识别并结合到卵子透明带的ZP3上，并有道顶体反应。
受精后的ZP3的修饰减少了精子和透明带的结合，最终导致对顶体反应的诱导接触、、解除。
引言对于几乎所有的卵细胞，他们都又不止一层的保护层完全包裹质膜。
在棘皮动物中，卵子具有卵黄膜和凝胶膜，而在哺乳动物卵子中则存在透明带。
因为精子必须结合并遗物中特异性方式渗透到外层膜中，他们参与调控了受精前后的精卵互作。
为了使得精子渗透到卵子的外层膜并抵达质膜，他们必须经历“顶体反应”。
该反应包括精子质膜以及顶体膜的融合和大量的膜泡形成，导致内部顶体膜暴露在外(Gwatkin, 1976,1977; Epel 和 Vacquier, 1978; Yanagimachi, 1978; Shapiro 等 1981)。
精子顶体反应的研究进展
《动物生殖与生理学》课程论文（2011-2012学年第一学期）论文题目：顶体反应及其研究进展指导教师：朱士恩等院系：动物遗传育种与繁殖学号：S*********名：***顶体反应及其研究进展摘要顶体反应是动物受精过程不可或缺关键过程，了解并掌握顶体反应的机理有利于我们对受精过程的调控，从而达到控制动物授精率的高低。
本文介绍了精子顶体的结构、顶体反应结构变变化及其机制、顶体反应的调控，而且还阐述了评估检测顶体反应的一些基本方法。
Acrosome reaction is essential for animal fertilization process，the key process to understand and grasp the mechanism of the acrosome reaction will help us control the process of fertilization，so as to achieve the level of control of animal fertilization rate。
This article describes the structure of the sperm acrosome，acrosome reaction structural changes and its mechanism，the regulation of the acrosome reaction，but also describes the assessment of acrosome reaction test some of the basic methods.关键词:顶体反应结构变化机制检测Key words: acrosome reaction structural changes mechanism detect顶体是精子特化的结构，动物精子进入雌性生殖道以后，并不能立即获得受精能力而是需要在雌性生殖道内停留一段时间。
【国家自然科学基金】_a23187_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140801
2012年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
科研热词 钙离子 酪氨酸氨基转移酶 迷迭香酸 血管内皮保护 苯丙氨酸解氨酶 肌质网atp酶 心脏保存液 心脏保存 强直收缩张力 去负荷比目鱼肌 内皮依赖性超极化因子 丹参
推荐指数 1 1 1 1 1 11 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
推荐指数 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
2011年 科研热词 推荐指数 序号 骨肉瘤 2 1 slingshot-1l(ssh-1l) 2 2 钙调磷蛋白激酶(calcineurin/pp2b/cna/cn) 1 3 钙离子载体 1 4 钙(ca~(2+))/钙调素依赖蛋白激酶ⅱ(camkⅱ) 1 5 绵羊精子 1 6 精子预处理 1 7 猪 1 8 巯基乙酸 1 9 孤雌激活 1 10 咖啡因 1 11 原核形成 1 12 卵母细胞激活 1 13 卵母细胞 1 14 体外获能 1 15 icsi 1 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51
2011年 科研热词 推荐指数 小鼠 2 孤雌激活 2 人脐静脉内皮细胞 2 马 1 顺铂 1 顸体反应 1 镉离子 1 钙调蛋白 1 钙离子载体 1 透明带 1 血栓形成 1 血小板聚集 1 葡萄糖调节蛋白94( grp94) 1 获能 1 苯丙氨酸解氨酶 1 花青苷 1 脂多糖 1 胞浆型磷脂酶a2 1 肺癌 1 耐药 1 绵羊精子 1 红叶石楠 1 精子顶体反应 1 离子载体 1 破骨细胞抑制性凝集素 1 白血病 1 瘦素 1 玫瑰精油 1 牛 1 树突细胞 1 手工克隆 1 成骨细胞 1 异种克隆 1 巯基亚硝基化 1 壬基酚 1 同型半胱氨酸 1 卵母细胞 1 前列腺素e2 1 信号通路 1 体外成熟 1 体外 1 人类肺腺癌系 1 二倍体 1 一氧化氮 1 vp-16耐药 1 k562细胞 1 grp94 1 fyn 1 eu3+ 1 enos 1 a23187 1
精子顶体反应率与精液相关参数之间关系的研究
精子顶体反应率与精液相关参数之间关系的研究杜鹏;黄志承;史哲;汪李虎;郑毅春;肖宗辉【期刊名称】《临床医学工程》【年(卷),期】2013(020)010【摘要】目的研究精子顶体反应率与精液相关参数之间的关系,探讨精子顶体反应对男性不育的影响.方法收集2012年10月至2013年4月间在广东省妇幼保健院生殖中心就诊的180例男性患者的精液标本,采用钙离子载体A23187诱导精子发生顶体反应(AR),按照顶体反应值,分AR＞3％、AR≤3％两组,对AR与各项精液参数进行相关性分析.结果两组间精子活动力、精液量、精子密度、精子总数无显著差异(P＞0.05),而精子正常形态率与精浆抗精子抗体(antispermantibody,AsAb)差异显著(P ＜0.05).结论精子顶体反应与精子质量有关,是相对独立的男性不育因素,是男性生育能力评估的重要参考指标.【总页数】3页(P1206-1208)【作者】杜鹏;黄志承;史哲;汪李虎;郑毅春;肖宗辉【作者单位】广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010;广东省妇幼保健院生殖健康与不孕症科,广东广州510010【正文语种】中文【中图分类】R698+.2【相关文献】1.不育男性精液常规参数与年龄、精子DNA碎片率和精子顶体功能的相关性研究[J], 刘树沅;韦剑洪;许小琴;陈伟辉2.精子顶体反应与精液分析参数相关性的探讨 [J], 朱玉蓉;邱惠麒;楼丽君3.精子正常形态率、顶体完整率、顶体反应率与卵子体外受精率的相关性研究 [J], 张冉;丘映4.精子DNA碎片率与精液相关参数、体外受精胚胎移植结局的关系 [J], 张丹;吴尊凤;庞敏5.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析 [J], 周欢群;蒋满波;周文;谢妍;吴爱华;王爱爱;倪运萍;陆杉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
动物克隆技术
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首例体细胞克隆奶牛“顺华” 首例体细胞克隆奶牛“顺华”
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克隆马及其“母亲兼姐姐” 克隆马及其“母亲兼姐姐”
36
克隆非洲猫“ 克隆非洲猫“Caty”和“Madge” 和
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克隆人“三剑客” 克隆人“三剑客”： 安蒂诺里、扎沃斯、布瓦瑟里耶
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雷尔教派成员、 雷尔教派成员、法 国女科学家布里吉 特·布瓦瑟利耶在 布瓦瑟利耶在 新闻发布会上称， 新闻发布会上称， 克隆女婴“夏娃” 克隆女婴“夏娃” 已于2002年12月 已于 年 月 26日降生，但她既 日降生， 日降生 没有提供“夏娃” 没有提供“夏娃” 的照片， 的照片，也未能出 示任何其他科学证 据。 39
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二、精子穿过卵丘，与透明带相互作用 精子穿过卵丘， 精子穿过卵丘 1．精子穿过卵丘，与透明带相互作用：这一过程是由ZP3 （卵母细胞特异性糖蛋白3）介导的，是特异性的受体-配 体作用。 2．顶体反应：顶体是暴露于精子头前部的内膜包裹的帽子 结构，内含大量的水解酶，如透明质酸酶、顶体素、蛋白 酶与磷酸酶等。 3．机制：大量Ca2+内流，直接或间接激活顶体素原成为顶 体素，→激活磷脂酶，将精子膜上的磷脂分解为溶血磷脂 和脂肪酸→使精子质膜与顶体外膜形成多处融合→形成小 泡→顶体内容物外流。 • 顶体反应对精子通过透明带，穿过卵母细胞与卵膜融合是 不可缺少的一步。 4．诱导物：] • 体内：①卵泡细胞和透明带是诱发顶体反应的主要因素； ②离子、PH和温度也必须达到一定程度。 • 体外：用钙离子载体A23187可诱导获能精子发生顶体反 应，利用这一原理测定体反应，有助于预测精子的受精能 力；有的中心用顶体反应作为筛查适合作ICSI病人的方法， 16 但它的临床价值还不明确。
钙离子载体A23187 肝素
钙离子载体A23187目的观察钙离子载体A23187联合嘌呤霉素对卵母细胞质内单精子注射(ICSI)后未受精卵母细胞的激活作用。
方法将体外成熟(IVM)-ICSI和常规ICSI后未受精卵母细胞,按行ICSI后体外培养的时间,分为IVM-ICSI22h组(33个)、IVM-ICSI44h组(18个)、ICSI44h组(37个)、ICSI68h组(25个),分别采用钙离子载体A23187联合嘌呤霉素进行激活处理。
应用荧光原位杂交(FISH)技术,对来源于双原核合并第二极体合子的激活胚胎进行性染色体分析。
结果钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能激活行ICSI后22~68h未受精的卵母细胞。
其中IVM-ICSI22h组卵母细胞激活率为88%(29/33)、总卵裂率为62%(18/29)、4细胞阶段胚胎发育率为28%(5/18),1个胚胎发育到桑椹胚阶段;而IVM-ICSI44h组、ICSI44h组、ICSI68h组的未受精卵母细胞激活率分别为56%(10/18)、65%(24/37)、52%(13/25);总卵裂率分别为20%(2/10)、42%(10/24)、46%(6/13),仅ICSI44h组有1个胚胎发育到4细胞阶段。
FISH对激活胚胎的分析显示,4个胚胎为XX,9个胚胎为XY。
结论钙离子载体A23187联合嘌呤霉素能有效激活行ICSI失败的卵母细胞;行ICSI后22h内,是对未受精卵母细胞进行辅助激活较为理想的时机。
激活的双原核合并第二极体胚胎中有雄原核的存在。
肝素肝素首先从肝脏发现而得名，天然操作于肥大细胞，现在主要从牛肺或猪小肠黏膜提取。
肝素是一种由葡萄糖胺，L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂。
制剂分子量在1200～40000，抗血栓与抗凝血活性与分子量大小有关。
肝素具有强酸性，并高度带负电荷二、药理作用1、抗凝血。
2、抑制血小板，增加血管壁的通透性，并可调控血管新生。
智慧树知到《动物生理学》章节测试含答案
B.错误 正确答案：A 第一章测试 1.氨基酸跨膜转运进入一般细胞的形式为：（） A泵转运 B.通道转运 C.载体转运 D.吞饮 E.单纯扩散 正确答案：A .受体的化学本质是：（） A.蛋白质 B.核酸 C.糖类
D.脂质 正确答案：A .在静息时，细胞膜外正内负的稳定状态称为：（） A.去极化 B.极化 C.超极化 D.反极化 E.复极化 正确答案：B .细胞膜电位变为外负内正的状态称为：。 A.极化 B.反极化 C.超极化 D.去极化
A.正确 B.错误 正确答案：A 13.当环境温度变化时，体表温度可随之发生相应的波动。 A.正确 B.错误 正确答案：A 14.小汗腺受交感神经支配，其节后纤维为胆碱能纤维，末梢释放的递质是乙酰胆碱。 A.正确 B.错误 正确答案：A 15.体温的稳定全靠机体产生热量来维持。 A.正确 B.错误
B.乙酰胆碱 C.肾上腺素 丫-氨基丁酸 正确答案：B .下述哪些是终板电位的特点：（） A不是“全或无”的 B.成电紧张性扩布 C.无不应期 D.能形成反极化 正确答案：D .下述兴奋在神经-肌肉接头传递的特点有（）。 A.单向传递 B.时间延搁 C.易受环境因素的影响
D.化学传递 .肌肉的初长度取决于后负荷。 A.正确 B.错误 正确答案：B .骨骼肌的物理特性包括展长性、弹性和粘滞性。 A.正确 .错误 正确答案：A 第四章测试 1.血液的组成是：（） A.血浆+红细胞 B.血清+血浆 C.血清+红细胞
1.下列对肺通气的描述正确的是。 A.组织液与细胞间的气体交换 B.肺与外界气体交换 C.血液与组织液间的气体交换 D.肺泡与血液气体交换 正确答案：B 2.使血红蛋白易与氧结合的情况是（） C02分压增高 C。中毒 02分压增高 PH增高 正确答案：C .肺牵张反射的感受器位于答（） A.主动脉弓
2016年高中生物人教版选修三教师用书3.2体外受精和早期胚胎培养
一、试管动物技术1．含义：指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。
2．应用：良种动物的快速大量繁殖。
3．技术手段：体外受精、早期胚胎的培养和移入母体子宫。
二、体外受精的步骤1．卵母细胞的采集和培养(1)实验动物(小鼠、兔、羊等)⎩⎪⎨⎪⎧ 方法：用促性腺激素处理，再从输卵管中冲取卵子处理：可直接与获能的精子在体外受精 (2)大型动物 (牛等)⎩⎪⎨⎪⎧ 方法：从卵巢中采集卵母细胞处理：在体外培养成熟后才能与获能的精子受精2．精子的采集和获能(1)3.体外受精获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
三、胚胎的早期培养1．培养液的成分：一般包括无机盐、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。
2．胚胎早期培养的目的(1)精子和卵细胞在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。
(2)当胚胎发育到适宜的阶段时，进行受体移植或冷冻保存。
3．胚胎的去向(1)向受体移植：不同动物胚胎移植的时间不同。
牛、羊一般要培养到桑椹胚阶段或囊胚阶段进行移植。
人的体外受精胚胎，可在8～16个细胞阶段移植。
(2)冷冻保存。
一、体外受精阅读教材P69～72，分析图3－14，探讨下列问题：1．有些动物在采集卵母细胞时，为了获得更多的卵子，应用什么激素处理？该激素能否口服？提示：用促性腺激素处理雌性动物，使其排出更多的卵子。
用促性腺激素处理时，只能注射不能口服，因为促性腺激素是肽类化合物，口服会因消化道的消化作用而失去原有的效应。
2．从卵巢中采集的卵子为什么不能与获能精子直接受精？提示：卵巢中卵子不成熟，需要培养到减数第二次分裂中期时才具有受精能力。
3．哺乳动物体外受精过程中，需对精子进行离心处理的原因是什么？提示：精液由精子和精清(精浆)两部分组成。
精清中含有一种能抑制精子获能的物质，在一般情况下，精液中的精子无法获能。
载脂蛋白A1抗体通过抑制Ca^(2+)载体A23187诱导的Ca^(2+)内流降低精子活力
载脂蛋白A1抗体通过抑制Ca^(2+)载体A23187诱导的Ca^(2+)内流降低精子活力林静;池秀平;梁臻龙;向代军;王成彬【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2024(39)4【摘要】目的分析载脂蛋白A1(apo A1)抗体对Ca^(2+)载体A23187诱导的精子Ca^(2+)内流的影响,探讨apo A1抗体与精子活力的关系。
方法收集健康男性精液样本38份。
采用免疫荧光法观察apo A1在人精子中的定位和apo A1抗体对精子顶体反应的影响。
采用免疫印迹法检测精子获能相关蛋白酪氨酸磷酸化情况。
分别采用正常兔Ig G(正常兔Ig G组)和40μg·m L^(-1) apo A1抗体(apo A1抗体组)处理样本,以正常精液样本作为空白对照组,比较各组精子总活力和前向运动精子百分率差异。
分别采用正常兔Ig G和10、20、40μg·m L^(-1) apo A1抗体处理Fluo-4AM负载的精子样本,以未作处理的Fluo-4AM负载的精子样本作为空白对照,采用10μmol·L^(-1) A23187诱导30 min,采用流式细胞术检测精子内Ca^(2+)水平。
结果 apo A1蛋白定位于人精子头部。
apo A1抗体组精子总活力和前向运动精子百分率均显著低于空白对照组和正常兔Ig G组(P<0.001),空白对照组与正常兔Ig G组之间2项指标差异无统计学意义(P>0.05)。
流式细胞术结果显示,A23187诱导后,精子内Ca^(2+)荧光强度升高;采用apo A1抗体处理后,Ca^(2+)浓度显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。
40μg·m L^(-1) apo A1抗体+A23187组顶体反应率显著低于A23187组和正常兔Ig G+A23187组(P<0.001),且apo A1抗体对精子自发顶体反应无影响。
免疫印迹法结果显示,apo A1抗体处理前后精子的蛋白酪氨酸磷酸化无显著变化。
利血平对人精子顶体反应的影响
利血平对人精子顶体反应的影响
张国荣
【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》
【年(卷),期】1993(000)001
【摘要】用间接免疫荧光法对利血平作用后的人精子顶体反应进行了观察和分析。
结果表明:利血平对由ionophore A23187(A23187)诱导的人精子顶体反应有明显的抑制作用,其抑制强度随利血平浓度的降低而减弱。
提示利血平有希望成为一种
新的外用避孕药。
【总页数】1页(P1)
【作者】张国荣
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R321.1
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1.异氟烷对人精子运动功能和顶体反应影响研究 [J], 刘庆德;王志丰;虞利民
2.一氧化氮对人精子获能及顶体反应的影响 [J], 杨麦贵;杨阳;黄萍;郑善銮;樊爱琳;程晓东;周铁成;李娟;张竹映;郝晓柯
3.荧光染色法分析17β-雌二醇对获能人精子细胞顶体反应及细胞外Ca^(2+)和蛋白激酶C抑制剂的影响 [J], 王嵘;何彦芳;郑洁
4.17β-雌二醇影响人精子顶体反应机制的初步研究 [J], 何彦芳;郑洁;岳利民;何亚
平;张金虎;王嵘
5.IL-6对人精子顶体反应影响机制的初步探讨 [J], 资捷;宋平
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小鼠透明带溶解液诱导人精子顶体反应
小鼠透明带溶解液诱导人精子顶体反应
林芸秀;江一平
【期刊名称】《福建医科大学学报》
【年(卷),期】1998(032)001
【摘要】目的研究小鼠透明带溶解液诱导人精子顶体反应的效果，建立人精子顶体反应模型，方法正常生育力人精子经ＢｉｇｇｅｒｓＷｈｉｔｔｅｎａｎｄＷｈｉｔｔｉｎｇｈａｍｍｅｄｉｕｍ（ＢＷＷ）获能５～６ｈ后，分别用小鼠透明带溶解液（ｍＺＰＳ），ｍＺＰＳ的缓冲液ｈａｌｏｇｅｎｂｕｆｆｅｒ（ＨＢ），Ｃａ＾２＋载体Ａ２３１８７处理１ｈ，对实验和对照组精子用经典的豌豆凝集素（ＰＳＡ）法检测顶体反应。
结果ｍＺＰＳ组的顶体
【总页数】4页(P22-25)
【作者】林芸秀;江一平
【作者单位】福建医科大学组织学与胚胎学教研室;福建医科大学组织学与胚胎学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R321.2
【相关文献】
1.重组人透明带蛋白3诱导精子的顶体反应 [J], 王弘珺;张家颖;左文静;许宗革;王忠山;王野
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张韫;李文星;张春雪;肖銮娟;潘善培
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4.豚鼠精子顶体反应期间卵透明带诱导激活磷酸脂酶A2活性 [J], 袁玉英;陈文颖;石其贤;毛丽珍;俞淑清;方昕;E．R．S．Roldan
5.透明带诱导绵羊精子顶体反应的研究 [J], 刘烈琴;顾申;周卫宾;杨飞鸽;张宏;郭勇;刘云海;倪和民
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第一章中文摘要肌动蛋白的聚合作用在钙离子载体Ａ２３１８７诱导的人精子顶体反应中的作用硕士研究生：吴帅导师：王新生副教授孟凡会副教授中文摘要目的：探讨Ｆ～肌动蛋白在人精子顶体反应过程中的重要作用及可能机制。
方法：本实验采用Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ—ＰＳＡ荧光染色检测人精子顶体反应。
以不同浓度的Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ处理正常的人精子，观察Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对精子活动力及其自发性顶体反应发生率的影响。
在以链球菌溶血素Ｏ处理人精子制作的可以渗透大分子物质的精子模型中，钙离子载体Ａ２３１８７诱导精子产生顶体反应之前，先用Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ（鬼比环肽，～种Ｆ一肌动蛋白的稳定剂）对其进行预处理，然后测定其顶体反应发生率（ＡＲ％），与空白对照进行比较分析探讨Ｆ一肌动蛋白的聚合作用在人精子顶体反应过程中的重要作用及可能机制。
结果：不同浓度Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ处理的人精子，其活动力及自发性顶体反应发生率之间的差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）。
对经过链球菌溶血素Ｏ进行预处理形成的人精子渗透模型，加入ＰｈａＵｏｉｄｉｎ组的人精子顶体反应率与空白对照相比其差别具有显著的统计学意义（Ｐ＜０．０１）；而对未经过处理的完整的人精子，其顶体反应发生率与空白对照间的差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），但无显著的统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０１）。
另外，在精子标本中加入链球菌溶血素Ｏ组与该试剂的空白对照组相比其顶体反应率差别具有显著的统计学意义（Ｐ＜０．０１）。
结论：钙离子载体Ａ２３１８７对人精予顶体反应具有明显的诱导作用；本实验中所采用浓度的Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对完整的人精子顶体反应、自发性精子顶体反应及精子活力均无影响；但可轻度降低顶体完整的人精子顶体反应发生率。
链球菌溶血素Ｏ（ＳＬＯ）第一章中文摘要可以在不影响精予正常功能的情况下提高精子质膜的通透性：在以链球菌溶血素Ｏ制作的人精子模型中，Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ较空白组能显著降低人精子的顶体反应发生率，提示Ｆ一肌动蛋白的聚合作用对人精子项体反应具有重要意义。
关键词：肌动蛋白；链球菌溶血素０（ＳＬＯ）：Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ；顶体反应２第二章英文摘要ＡｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｆａｃｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７一ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｐｏｓｔｇｒａｄｕａｔｅｓｈｕａｉｗｕＡｂｓｔｒａｃｔｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＤｉｓｓｃｕｓｉｎｇｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｏｆａｃｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７－ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｒｅｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｄｅａｌｅｄｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎＰｈａｌｌｏｉｄｉｎ，ａｎｄｔｈｅｎｏｖｅｒｖｉｅｗｔｈｅａｆｆｅｃｔｉｏｎｏｆＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｏｎｔｈｅｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎａｎｄｍｏｔｉｌｉｔｙ．Ｉｎａｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎ（ＳＬＯ）一ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｄｅｌ，ｔｈｅｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｒｅｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｉｎｃｕｂａｔｅｄｉｎｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｏｒｗｉｔｈｏｕｔＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｆｏｒ３０ｍｉｎｕｔｅｓ．ａｎｄｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７ｗａｓａｄｄｅｄａｎｄｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｃｏｎｔｉｎｕｅｄｆｏｒｌ５ｍｉｎｕｔｅｓｔｏｉｎｄｕｃｅｔｈｅａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ｔｈｅｎｗｅｃａｎａｃｃｅｓｓｔｈｅｒａｔｅｏｆｔｈｅｈｕｍａｎａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｆｉｎａｌｌｙ，ｗｅａｎａｌｙｓｉｓｔｈｅｄａｔａａｎｄｄｉｓｓｃｕｓｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆａｅｔｉｎｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｃａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７－ｉｎｄｕｃｅｄａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｃｏｒａｐａｒｅｄｗｉｔｈｂｌａｎｋｃｏｎｔｒａｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄｔｈｅｒａｔｅｏｆｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖａｒｉｏｕｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｈａｖｅｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．ＩｎａＳｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ（ＳＬＯ）・ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｄｅｌ，ｔｈｅｄｉｆｆｃｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓｗｉｔｈｏｒｗｉｍｏｕｔＰｈａＵｏｉｄｉｎｈａｓｏｂｖｉｏｕｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ：ＣａｌｃｉｕｍｉｏｎｏｐｈｏｒｅＡ２３１８７Ｃａｌｌｉｎｄｕｃｅｄｔｈｅｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ３第一章英文摘要ａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅＰｈａｌｌｏｉｄｉｎｉｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｄｏｐｔｅｄｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅｈａｓｒｉｏａｆｆｅｃｔｉｏｎｏｎｔｈｅｓｐｅｒｍｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄｉｔｓｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ，ｉｔＣａｌｌｗｏｒｋｓｌｉｇｈｔｌｙｏｎｔｈｅａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｉｎｔａｃｔｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ．ＩｎａｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ（ＳＬＯ）一ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚｅｄｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｍｏｄｅｌ，Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎｃａｌｌｏｂｖｉｏｕｓｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｒａｔｅｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．ＴｈｅｓｉｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ（ＳＬＯ）Ｃａｎｅｘｔｒｅｍｅｌｙｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｐｅｎｅｔｒａｂｉｌｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｏｕｔｓｉｄｅａｃｒｏｓｏｍｅｍｅｍｂｒａｎｅａｎｄｅｘｔｒａｎｕｃｌｅａｒｍｅｍｂｒａｎｅ，ｗｈｉｌｅｉｔｄｏｎ’ｔｉｍｐａｃｔｏｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａｆｕｎｃｕｔｉｏｎ．ＴｈｅＰｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｎｐｌａｙａＮｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｔｈｅｃｏｔｌｌ＇ｓｅｏｆｈｕｍａｎｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｃｔｉｎ；ｓｔｒｅｐｔｏｌｙｓｉｎＯ；Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ；ａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙ：ｘｉｎｓｈｅｎｇＷａｎｇｖｉｃｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒｆａｎｈｕｉＭｅｎｇｖｉｃｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒ４第三章引言引言顶体ａｃｒｏｓｏｍｅ）是覆盖在精子头前端２／３的帽状结构，是一种特化的溶酶体，外包以单位膜。
紧包细胞膜的一层称为顶体外膜，贴近核膜的一层称为顶体内膜。
精子质膜及顶体外膜在形态学上的完整性对精子顶体的功能状态有着极其重要的意义。
顶体反应（ａｃｒｏｓｏｍｅｒｅａｃｔｉｏｎ，ＡＲ）是精子受精过程中的一个必要过程。
精子正常的顶体反应是哺乳类受精的前提，精子和卵细胞结合并形成受精卵之前，首先要经历获能和顶体反应。
细胞骨架是细胞中一种呈纤维状的结构，使细胞保持一定的形态，并可形成细胞纤毛（ｃｉｌｉａ）和鞭毛（ｆｌａｇｅｌｌａ）等细胞器官，参与细胞的移动、细胞分裂、物质运输等多种细胞功能过程，对于细胞膜分子的移动也起到重要的作用。
其中肌动蛋白（ａｃｔｉｎ）是细胞骨架中一种重要的组成成分。
肌动蛋白单体为分子质量４５ｋＤａ球形Ｏ．肌动蛋白（ｇｌｏｂｕｌａｒａｃｔｉｎ，Ｇ．ａｃｔｉｎ），在一定条件下，聚合形成纤维状的肌动蛋白（ｆｉｂｒｏｕｓａｃｔｉｎ，Ｆ．ａｃｔｉｎ）。
据有关研究证实精子的质膜和顶体外膜中含有Ｆ一肌动蛋白。
目前关于Ｆ一肌动蛋白对精子受精过程中各个环节的影响一直是比较热门的探讨领域。
Ｆ一肌动蛋白的凝集状态对精子的顶体反应有着重要意义。
目前人们已经通过各种试验进一步证实肌动蛋白骨架参与精子顶体的构成、顶体反应及精子的活动。
本实验中Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ是一种Ｆ一肌动蛋白的稳定剂。
Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ可以专一性地与Ｆ．ａｃｆｉｎ结合，从而极大地稳定了Ｆ．ａｃｔｉｎ的结构，干扰精子的质膜和顶体外膜的功能。
在相当程度内，在基质稀释后，Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ并不影响Ｇ．ａｃｔｉｎ的结合速率，而是完全阻止了新生的Ｆ．ａｃｔｉｎ在两端的解离，可以使Ｆ一肌动蛋白保持凝集状态，起到稳定细胞骨架的作用。
这种肌动蛋白骨架结构位于精子质膜和顶体外膜上。
可以起到一种抑制胞吐过程的物理屏障的作用，从而可以进一步影响精子顶体反应的发生。
Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对钙离子载体Ａ２３１８７诱导的人精子顶体反应的影响在国内尚未见报道，目前仅见国外有个别报道。
如果我们通过该实验能够证实Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ的这种抑制精子顶体反应的作用，从而可以论证关于精子的质膜和顶体外膜中含有Ｆ一肌动蛋白的观点及探讨肌动蛋白的状态转变在精子顶体反应中的作用，从而为精子与卵子之间相互作用的研究工作提供有力的理论依据，另外，亦可为临床避孕药物的研制开辟一条新的途径。
第四章正文肌动蛋白的聚合作用在钙离子载体Ａ２３１８７诱导的人精子顶体反应中的作用硕士研究生：吴帅导师：王新生副教授孟凡会副教授实验对象选择具有正常生育能力的健康男性３０人，禁欲２—３天后手淫取精，精液分析符合ｗＨＯ标准（２０００）。
试剂和仪器试剂：ＨＴＦ液、ＰＢＳ液、Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ（Ｓｉｇｍａ公司）、钙离子载体Ａ２３１８７（Ｓｉｇｍａ公司）、链球菌溶血素０（ＳＬＯ，Ｓｉｇｍ公司）、Ｒｈｏｄａ【ｆＩｉｎｅ－－ＰＳＡ（Ｖｅｃｔｏｒ公司）、甲醇、二甲驻砜（ＤＭＳＯ，Ｓｉｇｍａ公司）、二硫苏糖醇（ＤＴＴ）、蔗糖、ＥＧＴＡ、Ｈｅｐｅｓ仪器和器械：玻璃试管（５ｍ１）、离心管（１．５ｍｌ、１５ｍ１）、移液器（１～１０ｕｌ、２０～２００ｐｌ、０．５ｍｌ、ｌｍｌ）、容量瓶（５０ｍ１）、普通离心机、ｃ０。
恒温培养箱、载玻片、荧光显微镜（ＮｉｋｏｎｅｃｌｉｐｓｅＴｓｌ００）实验方法、步骤１标本的制备（１）每份糟液取出后置于５０ｍｌ量杯内充分液化、搅匀，进行计算机辅助精液分析（ＣＡＳＡ）符合ＷＨＯ标准（２０００）。
否则弃用。
（２）取２支无菌玻璃管，各管依次加入２ｍｌＨＴＦ液，于每只试管底部缓缓注入０．５ｍｌ充分液化的精液，使精液和培养液形成清晰的界面。
（３）将试管倾斜３０。
角，于３７℃含有５％Ｃ０：恒温培养箱培育静置培养１小时，期间活动精予可自行游入上层培养液中。