实验室常用技术参数资料_(精)

常见实验用溶液的配制方法

一.常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺（Spermidine : 溶解2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为

10ml。分装成小份贮存于-20C。

1mol/L精胺（Spermine :溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml 。分装成小份贮存于-20C。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate :将77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白（BSA:加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶于9.5ml水中（为减少变性，

须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白，盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml ,然后分装成小份贮存于-

20C。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT :在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20E。或转移100mg的二硫苏糖醇

至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate : 溶解78.5g 乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾（KCl :溶解7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml 。

3mol/L乙酸钠（sodium acetate : 溶解40.8g 的三水乙酸钠于约90ml水中, 用冰

乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml 0

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L,混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g 的Na2EDTA 2H2O和20g的NaOH ,并溶于水中，定容至1L。

1mol/L HEPES :将23.8gHEPES 溶于约90ml 的水中，用NaOH 调pH （6.8- 8.2,然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl :力卩8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/ml IPGT :溶解250mg的IPGT （异丙基硫代-B -D-半乳糖苷于10ml 水中,分成小份贮存于-20°C。

1mol/LMgCI2:溶解20.3g MgCI2 -6H2O于足量的水中，定容到100ml。

100mmol/L PMSF :溶解174mg的PMSF （苯甲基磺酰氟于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹

或贮存于-20 C。

20mg/ml蛋白酶K （proteinase K : 将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水

中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml ,然后分装成小份贮存于-20C。

10mg/mlRnase（无DNase （DNase -free RNase : 溶解10mg 的胰蛋白RNA 酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH 5.0。溶解后于水浴中煮沸15min , 使DNA 酶失活。用1mol/L的Tris -HCl 调pH至7.5,于-20C贮存。（配制过程中要戴手套5mol/L氯化钠（NaCl :溶解29.2g 氯化钠于足量的水中,定容至100ml。

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四.常用抗生素

氨苄青霉素(ampicillin (100mg/ml

溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml o分装成小份于-

20C贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素

(carbe nicilli n (50mg/ml

溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml °分装成小份于-20C贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。甲氧西林(methicillin (100mg/ml

溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml °分装成小份于- 20C贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin (10mg/ml

溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20°C 贮存。

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