人α-突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒使用说明书
人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书
人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书上海樊克生物有限公司专业的提供elisa试剂盒，进口/国产elisa试剂盒，elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，专业elisa试剂盒说明书生产商,老品牌ELISA试剂盒,ELISA试剂盒报价,elisa试剂盒品牌,生化试剂，血清，标准品|对照品、培养基等科研生化试剂，品质保证，技术严格，无效果退款退货，欢迎来电咨询及订购。
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）供应商：上海樊克生物有限公司仓鼠甲状腺结合球蛋白，TBGELISA试剂盒 Prospective application: ELISA method for quantitative determination of related substances in human serum, plasma, cell culture supernatant or other related biological fluids.1 Kit preservation: -20 C (a longer time to use); 2-8 C (frequent use).2 washing liquid preserved at low temperature there will be precipitation, heating the water to help dissolve when diluted.3 Chinese and English instructions may be inconsistent, please refer to the specification in english.4 just open the enzyme linked plate hole may contain a little water samples, this isa normal phenomenon, will not have any effect on the results of the experiment.7 could not detect the NaN3 containing samples, because NaN3 inhibited the activity of horseradish peroxidase (HRP).人α1酸性糖蛋白ELISA试剂盒说明书Elisa试剂盒操作步骤：3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
人AGPsELISA试剂盒,阿拉伯半乳糖蛋白kit,(Human)人
人AGPsELISA试剂盒，阿拉伯半乳糖蛋白kit，（Human）人检测方法：ELISA酶联免疫（双抗夹心法）样品收集、处理及保存方法：1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人AGPsELISA试剂盒，阿拉伯半乳糖蛋白kit，（Human）人一、双抗体夹心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。
在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃。
次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
（简称洗涤，下同）。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。
然后洗涤。
（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。
37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。
也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
血清α-syn、Sirtuin-1_水平与急性腔隙性脑梗死患者病情进展及脑白质病变的关系
山东医药2023 年第 63 卷第 31 期血清α-syn、Sirtuin-1水平与急性腔隙性脑梗死患者病情进展及脑白质病变的关系任占霞，宋爱霞，梁盼盼，贺宏梅，武婧月，陈晓凡，张帆，张志伟河北北方学院附属第一医院神经内科，河北张家口075000摘要：目的 探讨急性腔隙性脑梗死（ALCI）患者血清α-突触核蛋白（α-syn）、沉默调节蛋白1（Sirtuin-1）水平与病情进展、脑白质病变的关系。
方法 选择ALCI患者130例，根据病情是否进展分为进展组（n=32）和非进展组（n=98），根据是否发生脑白质病变分为病变组（n=106）和非病变组（n=24），根据脑白质病变程度可分为轻度病变组（Fazekas评分1分，n=49）、中度病变组（Fazekas评分2~3分，n=36）、重度病变组（Fazekas评分4~6分，n=21）。
用酶联免疫吸附法检测血清α-syn、Sirtuin-1；用受试者工作特性（ROC）曲线评估血清α-syn、Sirtuin-1对ALCI患者病情进展的预测价值；用Pearson相关法分析血清α-syn、Sirtuin-1与Fazekas评分的关系。
结果 进展组血清α-syn水平高于非进展组，Sirtuin-1水平低于非进展组（P均<0.05）；病变组血清α-syn水平高于非病变组，Sirtuin-1水平低于非病变组（P均<0.05）。
血清α-syn水平随着ALCI患者脑白质病变加重而升高，Sirtuin-1水平随着ALCI患者脑白质病变加重而降低（P均<0.05）。
Pearson相关分析结果显示，脑白质病变ALCI患者血清α-syn水平与Fazekas评分呈正相关（r=0.534，P<0.05），血清Sirtuin-1水平与Fazekas评分呈负相关（r=-0.526，P<0.05）。
结论 血清α-syn水平升高、Sirtuin-1水平降低与ALCI患者病情进展及脑白质病变加重有关。
突触蛋白Ⅲ(SYN3)ELISA试剂盒说明书
突触蛋白Ⅲ(SYN3)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液突触蛋白Ⅲ(SYN3)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
突触蛋白Ⅲ(SYN3)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
α-突触核蛋白在人脑膜瘤组织中的表达
α-突触核蛋白在人脑膜瘤组织中的表达吴杨;苏玉金;李昕;刘光伟;李尧华;于顺【摘要】目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)在人脑膜瘤组织和对照脑组织中的表达及其与微管蛋白之间的关系.方法用抗人α-syn抗体对人脑膜瘤组织和对照脑组织进行免疫组织化学染色,观察、比较α-syn在脑膜瘤和对照脑组织中的表达和分布.用免疫荧光组织化学方法检测α-syn和β-微管蛋白以及突触素是否共存.结果对照脑组织中,α-syn主要存在于神经元的末梢和胞质部分,分别与突触素和β-微管蛋白共存.人脑膜瘤组织中,α-syn主要存在于肿瘤细胞的胞质,并且与β-微管蛋白在胞质共存,少部分存在于细胞核中.结论α-syn存在于脑膜瘤细胞的胞质和核中,并与β-微管蛋白在胞质中共存.%Objective To investigate the localization of a-synuclein ( a-syn) in human brain meningiomas tissues and its association with p-tubulin. Methods Immuohistochemistry with antibodies against a-syn was used to reveal the localizations of a-syn in normal brain and meningiomas tissues. Double immunofluorescent labeling was used to observe the co-localization of a-syn with p-tubulin. Results In normal brain tissues, a-syn was localized in presynaptic terminals and cytoplasms of the neuronal somata, which was co-localized with synaptophysin and p-tubulin, respectively. In meningiomas tissues, a-syn was observed in cytoplasms and nuclei of the tumor cells. A-Syn in tumor cells were found to be co-localized with β-tubulin. Conclusion a-Syn was localized in the cytoplasm and nucleus of the meningiomas cells, and colocalized with β-tubulin.【期刊名称】《首都医科大学学报》【年(卷),期】2011(032)006【总页数】5页(P793-797)【关键词】α-突触核蛋白;β-微管蛋白;脑膜瘤【作者】吴杨;苏玉金;李昕;刘光伟;李尧华;于顺【作者单位】首都医科大学宣武医院神经生物学研究室,教育部神经变性病重点实验室,北京100053;首都医科大学天坛医院神经科学研究所,北京100050;首都医科大学宣武医院神经生物学研究室,教育部神经变性病重点实验室,北京100053;首都医科大学宣武医院神经生物学研究室,教育部神经变性病重点实验室,北京100053;首都医科大学宣武医院神经生物学研究室,教育部神经变性病重点实验室,北京100053;首都医科大学宣武医院神经生物学研究室,教育部神经变性病重点实验室,北京100053【正文语种】中文【中图分类】R338α-突触核蛋白(α-synuclein，α-syn)由 140 个氨基酸组成，在中枢及外周神经组织中含量丰富，主要存在于成年人脑组织神经元的突触前终末端，与突触可塑性的形成有关［1］。
人(Human)γ-分泌酶(γ-Secretase)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）γ-分泌酶（γ-Secretase）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被γ-分泌酶（γ-Secretase）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的γ-分泌酶（γ-Secretase）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80U/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备：根据实验要求，准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。
例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。
3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。
人类Alpha 2-M ELISA试验试剂盒说明说明书
Human Alpha 2-M ELISA KitCatalog Number EH20RB (96 tests), EH20RBX10 (10 x 96 tests)Rev. 7Product descriptionThe Human Alpha 2-M ELISA Kit is a solid-phase sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) designed to detect and quantify the level of human Alpha 2-M in cell culture supernatants, plasma, and serum.Contents and storageUpon receipt, store at 2-8°C for 6 months or -20°C for 1 year.Components Cat. No. EH20RB(96 tests)Cat. No. EH20RBX10(10 x 96 tests)Human Alpha 2-M Antibody Coated wells, 96-well plate 1 plate10 plates Human Alpha 2-M Biotin Conjugate 2 vials20 vials Human Alpha 2-M Standard, recombinant human Alpha 2-M 2 vials20 vialsWash Buffer Concentrate (20X)25 mL12 x 25 mL Assay Diluent (5X)15 mL10 x 15 mL Streptavidin-HRP (700X)0.2 mL10 x 0.2 mLTMB Substrate12 mL10 x 12 mLStop Solution8 mL10 x 8 mL Adhesive Plate Covers220Materials required but not suppliedDistilled or deionized waterMicrotiter plater reader with software capable of measuring at 450 nmPlate washer-automated or manual (manifold dispenser)Calibrated adjustable precision pipettes and glass or plastic tubes for diluting solutionsProcedural guidelinesReview the Procedural guidelines and Plate washing directions in the ELISA Technical Guide at for details prior to starting the procedure.Reagents are lot-specific. Do not mix or interchange different reagent lots from various kit lots.Prepare 1X Wash Buffer1.Allow Wash Buffer Concentrate (20X) to reach room temperature and mix to redissolve any precipitated salts.2.Dilute 20 mL of the Wash Buffer Concentrate into 380 mL of deionized or distilled water. Label as 1X Wash Buffer.3.Store the concentrate and 1X Wash Buffer in the refrigerator. Use the diluted buffer within one month.Prepare diluentAssay Diluent should be diluted 5-fold with deionized or distilled water before use.Prepare biotin conjugate1.Briefly spin down the biotin conjugate before use.2.Add 100 µL of 1X Assay Diluent into the vial to prepare a biotin conjugate concentrate.3.Pipette up and down to mix gently (the concentrate can be stored at 4°C for 5 days).4.The biotin conjugate concentrate should be diluted 80-fold with 1X Assay Diluent and used in step 2 of ELISA procedure.Sample preparation guidelinesCollect samples in pyrogen/endotoxin-free tubes.Freeze samples after collection if samples will not be tested immediately. Avoid multiple freeze-thaw cycles of frozen samples.Thaw completely and mix well (do not vortex) prior to analysis.Avoid the use of hemolyzed or lipemic sera. If large amounts of particulate matter are present in the sample, centrifuge or filter sample prior to analysis.Pre-dilute samples1X Assay Diluent should be used for dilution of serum, plasma, and cell culture supernatant samples.Dilute serum and plasma 2,000-fold.Because conditions may vary, it is recommended that each investigator determine the optimal dilution to be used for each application.Dilute standardsNote: Use glass or plastic tubes for diluting standards.1.Briefly spin down a vial of lyophilized standard.2.Add 400 µL of 1X Assay Diluent (Assay Diluent should be diluted 5-fold with deionized or distilled water before use) into vial toprepare a 3,000 ng/mL standard. Dissolve the powder thoroughly by a gentle mix. Pipette 300 µL of 1X Assay Diluent into each tube. Use the stock standard solution to produce a dilution series (shown below). Mix each tube thoroughly before the next transfer.1X Assay Diluent serves as the zero standard (0 ng/mL).200200 200 200 200 200Diluentvolume300 µL300 µL300 µL300 µL300 µL300 µL300 µLStd1 3000 ng/mLStd21200 ng/mLStd3480 ng/mLStd4192 ng/mLStd576.8 ng/mLStd630.72 ng/mLStd712.29 ng/mLBlank0 ng/mLPrepare 1X Streptavidin-HRP solutionNote: Prepapre the Streptavidin-HRP within 15 minutes of usage.1.Briefly spin the Streptavidin-HRP and pipette up and down to mix gently before use, as precipitates may form during storage.2.Dilute Streptavidin-HRP 700-fold with 1X Assay Diluent.3.Do not store diluted solution for future use.Perform ELISA (Total assay time: 4 hours and 45 minutes)Allow all reagents to reach room temperature before use. Mix all liquid reagents prior to use.IMPORTANT! Perform a standard curve with each assay.Determine the number of 8-well strips required for the assay. Insert the strips in the frames for use. Re-bag any unused strips and frames, and store at 2 to 8°C for future use.1Bind antigen a.For the standard curve, add 100 µL of standards to the appropriate wells (see Dilute standards). Forsamples, add 100 µL of diluted samples (see Dilute samples) to the wells.b.Cover wells and incubate for 2.5 hours at room temperature or over night at 4°C with gentle shaking.c.Discard the solution and wash 4 times with 1X Wash Buffer. Wash by filling each well with WashBuffer (300 µL) using a multi-channel Pipette or autowasher. Complete removal of liquid at each stepis essential for good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Buffer byaspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.2Add biotin conjugate a.Add 100 µL of prepared biotin conjugate (see Prepare biotin conjugate) to each well.b.Incubate for 1 hour at room temperature with gentle shaking.c.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.3Add Streptavidin-HRP a.Add 100 µL of prepared Streptavidin-HRP solution (see Prepare Streptavidin-HRP solution) to eachwell.b.Incubate for 45 minutes at room temperature with gentle shaking.c.Discard the solution. Repeat the wash as in step 3.4Add TMB substrate a.Add 100 µL of TMB Substrate to each well. The substrate will begin to turn blue.b.Incubate for 30 minutes at room temperature in the dark with gentle shaking.5Add stop solution Add 50 µL of Stop Solution to each well. Tap the side of the plate gently to mix. The solution in thewell changes from blue to yellow.Read the plate and generate the standard curve1.Read the absorbance at 450 nm. Read the plate within 30minutes after adding the Stop Solution.e curve-fitting software to generate the standard curve. Afour parameter algorithm provides the best standard curve fit.Optimally, the background absorbance may be subtracted from all data points, including standards, unknowns and controls,prior to plotting.3.Read the concentrations for unknown samples and controlfrom the standard curve. Multiple value(s) obtained forsample(s) by the appropriate factor to correct for the sampledilution.Note: Dilute samples producing signals greater than that of thehigest standard in Standard Diluent Buffer and reanalyze.Multiply the concentration by the appropriate dilution factor.Performance characteristicsStandard curve (example)These standard curves are for demonstration only. A standardcurve must be run with each assay.Intra-assay precisionTo determine intra-assay precision, two standard curves and 3 samples for each standard curve are run. The standard curve concentration points as well as the samples are tested in duplicates on a single plate. Two different concentration values are obtained for each sample, using the two separate standard curves. The two concentration values for each sample is compared to each otherusing the CV% calculation. Intra-Assay CV%: <10%Inter-assay precision To evaluate inter-assay precision, the second standard curve is tested on a separate plate along with the second set of samples. Inter-Assay CV%: <12%RecoverySample TypeAverage % Recovery Range (%)Cell Culture Supernatants 12198-144Plasma 12199-148Serum10888-127SpecificityThis ELISA antibody pair detects human Alpha 2-M. Other species not determined.Linearity of dilutionThe cell culture supernatants, plasma, and serum samples were spiked with recombinant human Alpha 2-M, serially diluted in sample diluent and evaluated. Observed values were compared to expected values to calculate percent recovery and demonstrate the dilution linearity of the assay.Sample TypeAverage % Expected Range (%)1:2 Dilution1:4 Dilution1:2 Dilution1:4 DilutionCell CultureSupernatants121135114-128125-145 Plasma119126115-123115-133Serum126141118-134132-150SensitivityThe minimum detecable dose of human Alpha 2-M is 4 ng/mL.This was determined by assaying replicates of zero and thestandard curve. The mean signal of zero + 2 standard deviationsread in dose from the standard curve is the LLD. This value is thesmallest dose that is not zero with 95% confidence.Limited product warrantyLife Technologies Corporation and/or its affiliate(s) warrant theirproducts as set forth in the Life Technologies' General Terms andConditions of Sale found on Life Technologies' website at/us/en/home/global/terms-andconditions.html.If you have any questions, please contactLife Technologies at /support.Product label explanation of symbols and warningsCatalogNumberBatchCodeTemperaturelimitationUsebyManufacturerConsultinstructions for useCaution, consultaccompanying documentsDISCLAIMERTO THE EXTENT ALLOWED BY LAW, LIFE TECHNOLOGIES AND/OR ITS AFFILIATE(S) WILL NOT BE LIABLE FOR SPECIAL, INCIDENTAL, INDIRECT, PUNITIVE, MULTIPLE, OR CONSEQUENTIAL DAMAGES IN CONNECTION WITH OR ARISING FROM THIS DOCUMENT, INCLUDING YOUR USE OF IT. Important Licensing Information: These products may be covered by one or more Limited Use Label Licenses. By use of these products, you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses.Corporate entity: Life Technologies Corporation | Carlsbad, CA 92008 USA | Toll Free in USA 1 800 955 6288©2021 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified.For support visit /support or contact ************************.22-Nov-21。
四正柏生物 人IFN-γ ELISA试剂盒说明书
REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 11 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
人复制蛋白A(RPA-70)elisa试剂盒使用说明书
人复制蛋白A(RPA-70)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人复制蛋白A(RPA-70)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人复制蛋白A(RPA-70)水平。
用纯化的人复制蛋白A(RPA-70)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入复制蛋白A(RPA-70)，再与HRP标记的复制蛋白A(RPA-70)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的复制蛋白A(RPA-70)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人复制蛋白A(RPA-70)浓度。
建立人α突触核蛋白A30P突变的帕金森病大鼠模型
建立人α突触核蛋白A30P突变的帕金森病大鼠模型宋娜;苏蔚;赵铁锁;李雨姗;王海军;李宏彬;邵明龙;张伟;谷腾腾;胡庆;余建;张景航【摘要】目的建立人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-SYN)A30P突变型转基因大鼠的帕金森病(Parkinson's disease,PD)模型.方法利用慢病毒系统构建过表达野生型α-SYN载体pLKO-CMV-α-SYN-WT-P2A-GFP及α-SYN A30P突变载体pLKO-CMV-α-SYN-A30P-P2A-GFP,分别转染293FT细胞,瞬时转染24 h后WB 检测α-SYN的表达水平.之后经慢病毒包装、浓缩,利用立体定位技术分别对大鼠中脑黑质致密部注射病毒稀释液,过表达α-SYN野生型和A30P突变型的慢病毒颗粒.免疫荧光染色检测α-SYN和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的分布情况,并观察中脑黑质致密部多巴胺能神经元数量的变化.Rotating rod实验评价注射A30P慢病毒大鼠的行为改变情况.结果野生型和突变型A30P的基因表达载体在293FT细胞内能够高表达α-SYN蛋白.TH免疫荧光结果显示:与病毒稀释液组相比,过表达α-SYN野生型和A30P突变型大鼠均能导致中脑黑质致密部多巴胺能神经元数量的减少,而α-SYN A30P慢病毒注射组的中脑黑质神经元缺失的更多,具有显著性差异.对A30P转基因大鼠脑部神经元缺失部位进行免疫荧光发现,该区域TH 染色几乎呈阴性,α-SYN蛋白出现大量聚集,该结果表明脑部神经元的消失同时伴随着α-SYN蛋白的聚集及TH表达的剧烈减少,进一步揭示过表达α-SYN A30P可以导致多巴胺能神经元数量的减少和退化.此外,rotating rod实验结果显示过表达α-SYN A30P大鼠表现出明显的进行性运动能力障碍.结论通过慢病毒系统建立了人α-SYN A30P突变型转基因大鼠的PD模型,为PD发病机制的研究及药物开发奠定基础.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2018(026)005【总页数】7页(P567-573)【关键词】α-突触核蛋白;A30P;慢病毒表达载体;帕金森病;大鼠【作者】宋娜;苏蔚;赵铁锁;李雨姗;王海军;李宏彬;邵明龙;张伟;谷腾腾;胡庆;余建;张景航【作者单位】新乡医学院基础医学院,河南新乡 453003;新乡医学院第一附属医院,河南新乡 453003;新乡医学院基础医学院,河南新乡 453003;新乡医学院公共卫生学院,河南新乡 453003;新乡医学院基础医学院,河南新乡 453003;新乡医学院公共卫生学院,河南新乡 453003;河南省精神病医院,河南省生物精神病学重点实验室,新乡医学院第二附属医院,河南新乡 453003;新乡医学院基础医学院,河南新乡453003;新乡医学院基础医学院,河南新乡 453003;新乡医学院基础医学院,河南新乡 453003;新乡医学院第一附属医院,河南新乡 453003;新乡医学院第一附属医院,河南新乡 453003【正文语种】中文【中图分类】Q95-33帕金森病(Parkinson’s disease，PD)是一种慢性、进行性运动障碍疾病，是继阿尔茨海默氏症后第二常见的神经系统退行性疾病。
人α突触核蛋白αSYNELISA试剂盒使用说明书
人α-突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人α-突触核蛋白(α-SYN)含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α-突触核蛋白(α-SYN)水平。
用纯化的人α-突触核蛋白(α-SYN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α-突触核蛋白(α-SYN)，再与HRP标记的α-突触核蛋白(α-SYN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α-突触核蛋白(α-SYN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α-突触核蛋白(α-SYN)浓度。
样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
人α突触核蛋白αSYN酶联免疫分析ELISA
人α-突触核蛋白(α-SYN)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中α-突触核蛋白(α-SYN)含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α-突触核蛋白(α-SYN)水平。
用纯化的人α-突触核蛋白(α-SYN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α-突触核蛋白(α-SYN)，再与HRP标记的α-突触核蛋白(α-SYN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α-突触核蛋白(α-SYN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α-突触核蛋白(α-SYN)浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
重组人α-突触核蛋白原核表达系统的建立及纯化方法
重组人α-突触核蛋白原核表达系统的建立及纯化方法杨智源;吕春香;王鹏【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2011(031)009【摘要】目的构建α-突触核蛋白的原核表达系统,通过蛋白纯化的定量测定,确定表达这一蛋白的最合适载体和纯化方法,为进一步研究岶金森病病理机制奠定基础.方法将含有α-突触核蛋白DNA序列的质粒pET3a-Syn和pCEX-4T-1-Syn分别转入BL21(DE3),IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)诱导表达,分别采用HPLC和亲和层析的方法进行纯化.纯化后的蛋白进行SDS-PAGE电泳检测纯度,BCA法进行定量比较.结果构建了α-突触核蛋白两种载体的原核表达系统.pET3a-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得20.5 mg目的蛋白;pGEX-Syn表达的蛋白,每升菌液可获得4.8 mg目的蛋白.结论比较了两种α-突触核蛋白载体表达情况,确定了能够得到大量、高纯度α-突触核蛋白的纯化方法.【总页数】3页(P1616-1618)【作者】杨智源;吕春香;王鹏【作者单位】长春医学高等专科学校内科教研室,吉林长春,130031;吉林大学第二院妇产科;北华大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.老年神经变性疾病机制研究的基础:人α-突触核蛋白基因在原核细胞中的蛋白表达 [J], 李淑婷;陈彪2.老年神经变性疾病蛋白基因研究:3种α-突触核蛋白提取纯化方法的比较 [J], 李淑婷;陈彪3.高效制备重组人α-突触核蛋白原纤维方法的建立 [J], 罗海玉; 吴正存; 马开利4.猪传染性胃肠炎病毒重组核蛋白的纯化与Dot-ELISA抗体检测方法的建立 [J], 姜骞;唐丽杰;李一经;贾永清5.人Neuritin在原核表达系统的构建及表达纯化 [J], 唐娟;于娜;吴亮生;杨磊;仙玲玲;黄延红;张树军;黄瑾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
人α-突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人α-突触核蛋白(α-SYN)含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人α-突触核蛋白(α-SYN)水平。
用纯化的人α-突触核蛋白(α-SYN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α-突触核蛋白(α-SYN)，再与HRP标记的α-突触核蛋白(α-SYN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α-突触核蛋白(α-SYN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人α-突触核蛋白(α-SYN)浓度。
试剂盒组成：
样本处理及要求：
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中
如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟
左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标
准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为300ng/L，200ng/L ，100ng/L，50ng/L，25ng/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围：
20ng/L -400ng/L
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。