大肠杆菌培养实验报告
大肠杆菌实验报告
大肠杆菌实验报告大肠杆菌实验报告引言：大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，广泛存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌在正常情况下对人体没有害处，但某些菌株可能引起食物中毒和其他健康问题。
本实验旨在探究大肠杆菌的特性和其对环境的适应能力。
实验目的：1. 了解大肠杆菌的形态和结构特征；2. 探究大肠杆菌的生长条件和适应能力；3. 研究大肠杆菌在不同环境下的生长情况。
实验材料和方法：1. 实验材料：- 大肠杆菌培养基- 灭菌培养皿- 灭菌试管- 灭菌移液管- 微量移液器- 恒温培养箱- 显微镜2. 实验步骤：1. 准备培养基：将大肠杆菌培养基按照说明书配制好，并灭菌处理。
2. 接种：使用微量移液器，将大肠杆菌接种到灭菌培养皿中。
3. 培养：将接种好的培养皿放入恒温培养箱中，并设置适当的温度和湿度条件。
4. 观察生长情况：每隔一段时间，观察培养皿中大肠杆菌的生长情况，并记录下来。
5. 形态和结构观察：取一部分培养物放在载玻片上，使用显微镜观察大肠杆菌的形态和结构特征。
实验结果：1. 大肠杆菌的形态和结构特征：在显微镜下观察，大肠杆菌呈现为短杆状，长度约为2-4微米，直径约为0.5微米。
细菌的表面有许多纤毛，这些纤毛有助于细菌的运动和附着。
大肠杆菌呈现为革兰阴性菌，其细胞壁主要由脂多糖和蛋白质组成。
2. 大肠杆菌的生长条件和适应能力：大肠杆菌在适宜的环境条件下能够迅速生长和繁殖。
它对温度、pH值和营养物的要求较为宽容。
一般来说，大肠杆菌的最适生长温度为37摄氏度，pH值在6.5-7.5之间。
此外，大肠杆菌对葡萄糖等简单糖类具有较高的利用能力，能够利用这些营养物进行代谢和生长。
3. 大肠杆菌在不同环境下的生长情况：大肠杆菌在不同环境条件下的生长情况可能有所不同。
例如，在高温环境下，大肠杆菌的生长速度会加快，而在低温环境下则会减慢。
此外，在酸性环境中，大肠杆菌的生长可能受到抑制。
然而，尽管大肠杆菌对环境的适应能力较强，但在极端条件下，如高温、高盐度等，它的生长可能会受到抑制或甚至死亡。
肠杆菌的培养实验报告
一、实验目的1. 掌握肠杆菌的培养方法。
2. 熟悉肠杆菌的形态、染色和生化反应。
3. 了解肠杆菌的分离、鉴定和纯化方法。
二、实验原理肠杆菌属于革兰氏阴性杆菌，广泛分布于自然界、人和动物的肠道中。
在实验室中，可以通过培养、染色和生化反应等方法对肠杆菌进行分离、鉴定和纯化。
本实验主要采用普通琼脂培养基进行肠杆菌的培养，通过革兰氏染色观察其形态，通过生化反应进行鉴定。
三、实验材料1. 肠杆菌菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）。
2. 培养基：普通琼脂培养基、双糖铁琼脂培养基、营养肉汤培养基。
3. 试剂：革兰氏染色液、酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、甘露醇、氯化钠、硝酸盐还原剂、葡萄糖氧化酶、吲哚产生试剂、硫化氢产生试剂等。
4. 仪器：高压灭菌锅、恒温培养箱、显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验方法1. 培养基制备（1）普通琼脂培养基：称取琼脂粉15g，加入500ml蒸馏水，加热溶解后加入10g 氯化钠，调节pH值为7.0-7.2，高压灭菌后备用。
（2）双糖铁琼脂培养基：称取琼脂粉15g，加入500ml蒸馏水，加热溶解后加入10g氯化钠，调节pH值为7.0-7.2，高压灭菌后备用。
（3）营养肉汤培养基：称取牛肉膏10g，蛋白胨5g，氯化钠5g，加入1000ml蒸馏水，加热溶解后调节pH值为7.0-7.2，高压灭菌后备用。
2. 肠杆菌培养（1）将菌种接种于营养肉汤培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
（2）取培养好的菌液，用接种环取少量菌液，接种于普通琼脂培养基平板上，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
3. 革兰氏染色（1）将培养好的菌落用无菌镊子挑取，置于载玻片上。
（2）滴加革兰氏染色液，染色时间为1-2分钟。
（3）水洗、干燥，观察菌落形态。
4. 生化反应（1）将培养好的菌液接种于双糖铁琼脂培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
（2）观察菌落是否产生红色沉淀，判断葡萄糖和乳糖是否发酵。
大肠培养实验报告
一、实验目的1. 了解大肠杆菌的生长特性。
2. 掌握大肠杆菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习使用显微镜观察大肠杆菌的形态。
4. 熟悉大肠杆菌的生理生化特性。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性、无芽孢、兼性厌氧的细菌，广泛存在于自然界和人体肠道中。
大肠杆菌的培养和鉴定是微生物学实验中的重要内容。
本实验通过分离、纯化和鉴定大肠杆菌，了解其生长特性，为后续研究提供基础。
三、实验材料与仪器1. 材料：普通琼脂、营养肉汤、乳糖、胆盐、伊红、美蓝、无菌水、无菌棉签、酒精灯、培养皿、显微镜等。
2. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、电子天平、无菌操作台、移液器、试管等。
四、实验步骤1. 分离大肠杆菌（1）取少量疑似大肠杆菌的样品，用无菌棉签涂抹于营养肉汤中。
（2）将营养肉汤置于恒温培养箱中培养24小时。
（3）取培养后的肉汤，用无菌移液器吸取少量，涂布于普通琼脂平板上。
（4）将平板置于恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况。
2. 纯化大肠杆菌（1）挑取单菌落，接种于新的营养肉汤中。
（2）将培养后的肉汤置于恒温培养箱中培养24小时。
（3）取培养后的肉汤，用无菌移液器吸取少量，涂布于新的普通琼脂平板上。
（4）重复上述步骤，直至获得纯化的大肠杆菌。
3. 鉴定大肠杆菌（1）革兰氏染色：取纯化的大肠杆菌，制作革兰氏染色片，观察细菌形态。
（2）生化试验：进行乳糖发酵试验、硫化氢试验、吲哚试验等，鉴定大肠杆菌的生理生化特性。
4. 观察大肠杆菌形态（1）将纯化的大肠杆菌接种于营养肉汤中。
（2）将培养后的肉汤置于恒温培养箱中培养24小时。
（3）取培养后的肉汤，制作涂片，置于显微镜下观察细菌形态。
五、实验结果与分析1. 分离大肠杆菌在涂布有疑似大肠杆菌样品的琼脂平板上，观察到典型的圆形、湿润、边缘整齐的菌落。
2. 纯化大肠杆菌经过多次纯化，获得纯化的大肠杆菌。
3. 鉴定大肠杆菌革兰氏染色结果显示，大肠杆菌为革兰氏阴性菌。
大肠杆菌实验报告
大肠杆菌实验报告
实验目的：研究大肠杆菌的生长规律和影响因素。
实验原理：
大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性菌，广泛存在于自然环境中，如土壤、水体和动物的消化道中。
大肠杆菌是一种强大的生物工程工具，被广泛用于基因克隆、蛋白表达和生物制药等领域。
大肠杆菌的生长主要受到以下因素的影响：
1. 温度：大肠杆菌的适宜生长温度一般为37℃。
过高或过低
的温度都会抑制细菌的生长。
2. pH值：大肠杆菌对酸碱度有一定的耐受能力，适宜生长的pH范围为6.5-7.5。
3. 氧气含量：大肠杆菌是一种厌氧菌，但也可以在氧气存在的条件下进行生长。
4. 营养物质：大肠杆菌需要碳源、氮源、磷源等营养物质来进行生长。
实验步骤：
1. 准备培养基：将大肠杆菌营养琼脂混合溶解，并进行高温高压灭菌处理。
2. 用无菌移液管取一小滴大肠杆菌液，滴入含有营养琼脂的平板培养基上，轻轻摇晃平板，使细菌均匀分布于培养基上。
3. 将培养基置于恒温培养箱中，调节温度为37℃，培养一定
时间，观察菌落的形成和生长情况。
4. 在不同温度、pH值、氧气含量和营养物质条件下，重复步
骤2和3。
实验结果：
根据实验观察，大肠杆菌在37℃左右的温度下生长最好，pH 值在6.5-7.5之间时生长最快，适宜的氧气含量是气体和液体的界面。
实验结论：
大肠杆菌的生长受到温度、pH值、氧气含量和营养物质的影响。
掌握这些影响因素，能够更好地培养和利用大肠杆菌进行实验和工程应用。
大肠杆菌检测实验报告
一、实验目的1. 掌握大肠杆菌检测的基本原理和方法；2. 学会使用国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数；3. 提高微生物实验操作技能，为后续相关实验奠定基础。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性菌，广泛存在于人类和动物肠道中，属于条件致病菌。
本实验采用国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数，主要利用大肠杆菌在LB培养基上生长繁殖的特性，通过计数菌落数来估算大肠杆菌的浓度。
三、实验器材1. 培养箱；2. 移液管（10只）；3. 锥形瓶（250ml，12只）；4. 大试管（5只）；5. 试管架；6. 平皿（45个）；7. 大烧杯（500ml，1个）；8. 电子天平；9. 纱布；10. 脱脂棉；11. 灭菌锅；12. pH计或pH试纸；13. 电炉；14. 石棉网；15. 铁架台；16. 量筒（100ml，1个）；17. 橡皮手套；18. 超净台。
四、实验药品1. 磷酸盐缓冲液；2. 蒸馏水；3. LB培养基；4. 琼脂；5. 5%NaOH；6. 5%HCl。
五、实验步骤1. 培养基制备（1）称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中；（2）用量筒量取125ml的蒸馏水加入锥形瓶中，制成培养基；（3）用棉花堵住锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢；（4）将培养基放入灭菌锅中，在121摄氏度下灭菌20min；（5）灭菌后放入超净台中备用。
2. 样本处理（1）取适量样本（如食品、水等）；（2）用无菌生理盐水进行梯度稀释；（3）取适量稀释液加入平皿中，制成平板；（4）将平板放入培养箱中，在37摄氏度下培养24h。
3. 菌落计数（1）观察平板，找出菌落数在30-300之间的平板；（2）用移液管吸取适量菌液，加入锥形瓶中；（3）在锥形瓶中加入适量的5%NaOH溶液，充分振荡；（4）将锥形瓶放入培养箱中，在37摄氏度下培养24h；（5）观察锥形瓶中的菌落生长情况，记录菌落数。
大肠杆菌培养实验报告
大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌检测实验报告国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl 实验步骤：一：10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。
灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。
3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4：灭完菌后放入超净台中备用。
三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS 2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。
3：取4只试管，编号1—44：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9：取4只平皿，编号1—410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。
缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。
大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告
大肠杆菌的斜面扩大培养实验报告
一、实验简介
本实验旨在通过斜面扩大培养的方法，探究大肠杆菌的生长特性，并对其进行初步鉴定。
二、实验材料与方法
1. 实验材料
（1）大肠杆菌液体培养基
（2）琼脂平板培养基
（3）斜面培养基
2. 实验方法
（1）制备斜面培养基：将琼脂平板培养基煮沸后冷却至50℃左右，倒入试管中，倾斜试管使其形成斜面，待凝固后储存备用。
（2）制备大肠杆菌液体培养基：按照说明书加入适量的培养基粉末和水，混合均匀后灭菌。
（3）接种：将大肠杆菌接种于液体培养基中，摇晃孵育12小时。
（4）制备斜面扩大培养：将液体培养物均匀地涂布于斜面上，垂直放置于恒温箱内孵育24小时。
（5）观察：观察并记录菌落形态、颜色等特征。
三、实验结果与分析
1. 实验结果
经过斜面扩大培养后，大肠杆菌在琼脂平板上形成了圆形、平整的菌
落，直径约为2-3mm，表面光滑、无色透明。
在显微镜下观察，可见到细长的杆状细胞。
2. 实验分析
大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在自然界中广泛存在。
其生长速度较快，在液体培养基中可以迅速繁殖。
而通过斜面扩大培养，则可以促进其单个菌落的生长和分化，使其更容易被观察和鉴定。
通过本次实验，我们成功地制备了斜面扩大培养，并对大肠杆菌进行了初步鉴定。
四、实验总结
通过本次实验，我们掌握了斜面扩大培养的方法，并成功地对大肠杆菌进行了初步鉴定。
我们还发现，在不同培养基条件下，同一种细菌可能会表现出不同的特征。
在进行细菌鉴定时，需要综合考虑多种因素，并采用多种方法进行鉴定，以确保结果的准确性。
大肠杆菌培养实验报告
一、实验目的1. 学习大肠杆菌的培养方法，掌握其生长规律。
2. 掌握无菌操作技术，培养纯化大肠杆菌。
3. 了解大肠杆菌在食品、环境及医学等领域中的应用。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性杆菌，广泛存在于人和动物的肠道中。
在实验室条件下，大肠杆菌可以通过人工培养获得纯化菌株。
本实验采用LB培养基培养大肠杆菌，通过观察菌落形态、显微镜观察等方法，了解大肠杆菌的生长特点。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）大肠杆菌菌种；（2）LB培养基；（3）无菌水；（4）无菌试管、培养皿、移液管、镊子、酒精灯等。
2. 实验仪器：（1）恒温培养箱；（2）显微镜；（3）酒精灯；（4）高压蒸汽灭菌器。
四、实验步骤1. 菌种复苏（1）将大肠杆菌菌种接种于LB培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
（2）待菌液生长旺盛后，取适量菌液，用无菌水进行稀释。
2. 培养基制备（1）按照LB培养基配方，称取相应的成分，加入去离子水溶解。
（2）将溶液煮沸，去除其中的氧气。
（3）将溶液冷却至50-55℃，加入适量的无菌水。
（4）用无菌滤膜过滤除菌。
3. 接种与培养（1）将制备好的LB培养基倒入培养皿中，待凝固后，用无菌移液管吸取菌液，均匀涂布于培养基表面。
（2）将培养皿倒置，置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
4. 观察与鉴定（1）观察菌落形态，记录菌落颜色、大小、边缘等特征。
（2）用无菌镊子挑取菌落，制成涂片。
（3）将涂片置于显微镜下观察，观察细菌的形态、排列等特征。
5. 结果与分析（1）菌落形态：大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、湿润，颜色为乳白色。
（2）显微镜观察：大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短粗，两端钝圆，呈杆状。
五、实验结果1. 菌落形态：大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、湿润，颜色为乳白色。
2. 显微镜观察：大肠杆菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短粗，两端钝圆，呈杆状。
六、实验讨论1. 在实验过程中，无菌操作非常重要，以免污染菌种。
大肠杆菌培养实验报告
大肠杆菌培养实验报告大肠杆菌培养实验报告实验目的：本次实验旨在通过培养大肠杆菌的方法，观察其生长特性以及对不同环境条件的适应能力，进一步了解大肠杆菌的生物学特性。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 大肠杆菌培养基- 培养皿- 无菌纱布- 灭菌的玻璃棒- 灭菌的移液器- 灭菌的试管- 灭菌的培养皿- 灭菌的培养瓶- 灭菌的显微镜玻片2. 实验步骤：a. 准备工作：- 将培养皿、试管、移液器等实验器材进行高温高压灭菌处理，确保实验环境的无菌性。
- 准备好大肠杆菌培养基，并将其分装到培养瓶中。
b. 大肠杆菌的采集与接种：- 用灭菌的玻璃棒在无菌纱布上擦拭待采集样品（如水龙头、土壤等），将擦拭得到的微生物转移到灭菌的试管中。
- 取适量的培养基，用灭菌的移液器将待采集样品中的微生物接种到培养基中。
c. 培养条件的控制：- 将接种好的培养基放入恒温培养箱中，控制温度在37℃左右。
- 观察培养基的酸碱度，保持在适宜的范围。
d. 观察与记录：- 在培养过程中，每隔一定时间观察培养基上的菌落形态和数量，并记录下来。
- 利用灭菌的显微镜玻片，取适量的培养基样品进行菌落形态的观察。
实验结果与讨论：通过实验观察与记录，我们得到了以下结果：1. 大肠杆菌的生长特性：- 大肠杆菌在37℃的恒温培养箱中，呈现出较快的生长速度。
- 菌落的形态呈灰白色，边缘整齐，表面光滑。
2. 大肠杆菌对不同环境条件的适应能力：- 在不同酸碱度的培养基中，大肠杆菌仍能生长繁殖，但在极端酸性或碱性条件下，生长速度明显减缓。
- 大肠杆菌对温度的适应能力较强，尤其在适宜的37℃下生长最为迅速。
3. 菌落形态的观察：- 大肠杆菌在培养基上形成的菌落呈圆形或不规则形状，直径约为1-2毫米。
- 菌落表面光滑，质地较软，有时会呈现出微小的凹陷。
通过以上实验结果，我们可以初步了解到大肠杆菌的生长特性和对环境的适应能力。
大肠杆菌作为一种常见的细菌，在人体肠道中起着重要的生理功能，但也可能引发一些疾病。
大肠杆菌检测实验报告
大肠杆菌检测实验报告一、实验目的掌握大肠杆菌的检测方法，了解其在水质检验中的重要性。
二、实验原理1. 大肠杆菌大肠杆菌是一种常见的肠道杆菌，是一类嗜热性、厌氧性以及革兰阴性杆菌。
该菌种常常是肠道菌群的组成部分，同时也是水污染的重要指示菌之一。
（1）标准培养基法经过富营养培养基的生长，大肠杆菌会形成显性和隐性的群体。
这种检测方法适用于水质样本、地球样品以及饮用水。
（2）膜过滤法样品通过过滤器滤过后，将过滤后的膜放入培养基上培养。
这种方法既适合于生物质量较小的样品，也适用于分析浓度高的样品。
（3）MPN法通过使用3组不同浓度的小管，并观察哪个浓度的小管有生长曲线的所有格子都被满足，来计算菌落形成单位的浓度。
可以适用于样品浓度较低的环境。
三、实验操作1. 实验材料大肠杆菌标准菌株、优化阳性对照菌株、培养基、蒸馏水、实验器材、滤纸、吸管、离心机、洗涤液和细胞硬度试剂。
2. 实验步骤（1）制备纯菌液：将大肠杆菌基配合缓冲液跳接种到营养琼脂平板上，并在37℃的恒温培养箱中培养过夜。
将菌落划入脱色水中，通过洗涤和离心的方式，获得纯化的细胞菌悬液。
（2）制备样品：将需要检测的水样分别过滤，过滤膜使用巨孔滤纸。
滤膜被慢慢放在脱色水上U型板中间的孔里，然后浸泡（3）培养过程: 将U型板接入温度为37℃的有氧培养箱内，在24 - 48小时内观察细菌进行生长，并做出相应的计数和检测。
四、实验结果与分析按照实验操作规程进行样品处理和培养后，确认样品中是否存在大肠杆菌。
如果在实验中产生的试样中出现了大肠杆菌生长，且其生长优于阳性对照；或者在某些水样中不能检测出大肠杆菌，说明该水质品质不满足相关规范的要求。
五、实验结论本实验通过不同的大肠杆菌检测方法，较为全面地了解了大肠杆菌的检测方法及其在水质检验中的重要性。
在实验的基础上，我们有理由相信，通过科学准确的操作，人们可以更好地保证饮用水的健全和安全。
仔猪大肠杆菌实验报告
仔猪大肠杆菌实验报告
仔猪大肠杆菌实验报告
摘要：
本实验通过对仔猪大肠杆菌的培养、观察和鉴定，了解了大肠杆菌的特性和生长规律。
实验结果表明，仔猪大肠杆菌为革兰阴性杆菌，具有快速繁殖和强大的附着能力。
引言：
大肠杆菌是一种常见的细菌，广泛存在于土壤、水体和动物的肠道中。
它是一种革兰阴性杆菌，可引起人和动物的多种疾病，如腹泻、尿路感染等。
由于仔猪生长速度快，易感染细菌，因此了解仔猪大肠杆菌的特点及其对仔猪的危害至关重要。
实验方法：
1.取一支仔猪粪便样本，加入0.9%氯化钠溶液，摇匀。
2.将混合液均匀涂布在用营养琼脂培养基制成的平板上。
3.标记培养基的种植板，放在37℃恒温箱中培养24小时。
实验结果：
观察培养基经过24小时培养后，发现有多个单个的、透明的、不同大小的菌落。
菌落表面平整，边缘光滑。
实验讨论：
通过对菌落的形态和特点进行观察，结合大肠杆菌的生长规律和特性，可以初步判断所培养的细菌可能为大肠杆菌。
大肠杆菌呈现典型的透明菌落，生长速度快，边缘光滑等特征与实验
结果一致。
由于本实验采取的是传统的培养方法，只能初步判断培养的菌落为大肠杆菌。
为了进一步鉴定菌落，可以采用生化试验等方法。
如进行革兰染色，大肠杆菌呈现红色，蓝色或紫色的杆菌，可以进一步确定。
结论：
通过本实验，初步判断仔猪粪便中培养得到的菌落为大肠杆菌。
大肠杆菌是一种革兰阴性杆菌，具有快速繁殖和强大的附着能力。
大肠杆菌在仔猪中易感染，可以引起腹泻等疾病。
了解大肠杆菌的特点和生长规律对预防和控制仔猪疾病具有重要意义。
大肠杆菌实验报告
大肠杆菌实验报告
实验目的：
探究大肠杆菌的特性及其培养、鉴定方法。
实验原理：
大肠杆菌是一种在肠内自然存在的细菌，主要是以葡萄糖和乳糖作为碳源。
其常见的形态为革兰阴性杆菌，具有强大的代谢能力和蛋白质生产能力。
因此，大肠杆菌广泛应用于微生物遗传学、生物化学和分子生物学等研究领域。
实验材料：
大肠杆菌、色氨酸、木糖、岩藻糖、年糕、矿物盐、琼脂等。
实验步骤：
1. 大肠杆菌的培养。
将新鲜无菌的大肠杆菌落接种到含有矿物盐和琼脂的培养基中，放入恒温箱中以37°C 培养 24 小时。
将培养好的大肠杆菌涂布到色氨酸、木糖和岩藻糖三个培养基上，分别在 24 小时内观察大肠杆菌的菌落形状和颜色。
实验结果：
在色氨酸培养基上，大肠杆菌的菌落形状为直径 1-3 毫米的圆形，呈淡黄色或橙色。
2. 大肠杆菌的代谢产物：
经过大肠杆菌代谢产物检测，发现大肠杆菌发生了年糕的发酵，后产生了醋酸和乳酸。
结论：
本实验探究了大肠杆菌的特性及其培养、鉴定方法。
通过观察菌落形态和检测代谢产物，我们可以进行大肠杆菌的鉴定并了解其代谢能力。
在实际生产和研究中，这对于正确应用大肠杆菌具有重要意义。
大肠杆菌培养实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌实验报告大肠杆菌紫外线诱变及抗药性菌株筛选0740063阿噟兰1.前言抗生素能破坏细菌细胞壁的结构，使细菌的繁殖和生长受到抑制。
但某些细菌对抗生素表现出抗性，原因是其基因发生了改变，产生能抵抗抗生素的性状。
在自然情况下，细菌的基因突变率很低，而且突变是不定向的，因此在自然条件下，想要获得有抗性的细菌是很困难的。
当给与适当的物理条件时，其突变率会大大增加。
如当用α射线、β射线、γ射线、Χ射线、中子和其他粒子、紫外线、微波等物理因素辐射时，能够促进遗传物质突变。
DnA对紫外线（uV）有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感。
紫外线引起DnA结构变化的形式有DnA链断裂、碱基破坏、胸腺嘧啶二聚体等。
因此，紫外线通常作为诱变剂，用于微生物菌种选育。
一般细胞分裂越旺盛，诱变剂量越大，突变率高，诱变最有效的波长253~265nm。
选择合适的诱变剂量对于获得较高突变率十分关键，过高或过低的辐射剂量会导致菌株死亡或诱变不充分而降低诱变效果。
在紫外线诱变下，菌株发生不定向的突变，想要得到需要的特向变异必须对诱变后的菌株做筛选。
本实验想要得到的是能够抵抗抗生素的菌株，因此可以用抗生素培养基作为筛选培养基对菌种进行筛选。
若菌株没有发生定向突变，则该菌株不能在抗性培养基上正常生长，只有发生了定向突变才可能在筛选培养基上正常生长。
紫外线对于菌株有诱变作用外，对菌株还有较强的致死作用，因为紫外线改变了菌株的基因结构导致菌株无法正常生长繁殖。
因此，通过本实验的操作，在合适的照射剂量的设置下，比较不同不同照射剂量下的致死效果和突变率，并初步分析两者的相关性。
在分析死亡曲线和诱变率曲线的基础上，能了解诱变育种的机理和方法，为做进一步的诱变实验做准备。
2.材料和方法2.1实验材料、仪器和试剂菌种：大肠杆菌仪器：超净台、离心机、高压灭菌锅、培养箱、磁力搅拌器、培养皿、涂布器、移液管、移液器试剂：牛肉膏蛋白胨培养基相关试剂、硫酸卡那霉素水溶液（50mg/ml）、生理盐水2.2实验方法2.2.1制备培养基普通培养基——牛肉膏蛋白胨培养基（400ml）：牛肉膏5g蛋白胨10gnacl5g琼脂20g蒸馏水1000mlph7.0按配方配制好培养基后置于灭菌锅中115℃15min，倒平板，4皿*15ml*5组+2皿*15ml=22皿*15ml=330ml筛选培养基(200ml)：含抗生素50mg/L。
细菌培养实验报告
细菌培养实验报告一、引言细菌培养是生物学和微生物学实验中常用的技术手段。
通过培养细菌，我们可以研究其生长特性、代谢途径、致病机制等多个方面的问题。
本实验旨在通过培养一种常见的肠道细菌（以大肠杆菌为例），观察其生长过程，并分析培养条件对细菌生长的影响。
二、材料与方法1. 实验材料：- 营养琼脂培养基- 大肠杆菌菌种- 恒温培养箱- 培养皿和试管- 移液管、移液器等实验仪器2. 实验步骤：1) 准备培养基：将营养琼脂培养基装入试管中，加热至溶解，再反复煮沸，使其无菌。
2) 接种菌种：在无菌条件下，将大肠杆菌菌种转接到试管中的培养基中，轻轻摇匀。
3) 培养条件设置：将含有菌种的试管置于恒温培养箱中，温度设置为37摄氏度，培养时间为24小时。
4) 观察菌落：使用肉眼或显微镜观察试管中是否出现菌落，并对其形态、大小、颜色等特征进行描述。
5) 记录观察结果：将观察到的菌落特征记录在实验记录表中。
6) 分析菌落数量：使用计数板或显微镜进行细菌计数，并根据计数结果计算细菌密度。
三、结果与讨论1. 观察结果：在培养基上，我们观察到了大肠杆菌形成的菌落。
菌落呈现典型的圆形、凸起状，边缘整齐，颜色为乳白色。
菌落直径大约为2-3毫米。
2. 菌落数量统计：通过计数板对菌落数量进行统计，我们得到了在培养基上每平方厘米的菌落数量。
根据计算结果，我们得到了细菌密度为XXXCFU/mL（CFU：Colony-Forming Units，菌落数量单位）。
3. 讨论：本实验观察到的大肠杆菌菌落符合该细菌的典型特征。
菌落的形态、颜色等特征与文献报道一致。
同时，根据菌落数量的统计结果，我们可以得出该菌株在营养琼脂培养基上的生长情况。
细菌的生长受到多种因素的影响，如温度、pH值、氧气含量等。
在本实验中，温度被设置为人体温度37摄氏度，这是因为大肠杆菌主要存在于人体消化道，适应于体温环境。
而培养基的选择也是实验中的一个重要因素。
营养琼脂培养基富含多种营养物质，能够满足大肠杆菌的生长需求。
大肠杆菌微生物培养实验报告及评价标准
实验1 微生物的分离、培养及计数实验原理纯化分离：人为提供适宜的菌落生长的条件（包括营养、温度、Ph 等）。
用平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞菌落。
筛选：转基因大肠杆菌有抗氨苄青霉素基因，所以在含有氨苄青霉素的LB 培养基中可以正常繁殖长成菌落。
而普通的大肠杆菌没有抗氨苄青霉素基因，咋含有氨苄青霉素的LB 培养基中不能繁殖。
由此可进行大肠杆菌的筛选。
梯度稀释并计数：通过浓度梯度稀释把液体培养基培养的大肠杆菌稀释到一定浓度，用稀释涂布平板法，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
由此可计数计算大肠杆菌的数量。
实验目的1. 通过制备LB 固体培养基，对平板进行划线等，学会使用固体LB 平板。
2. 通过用液体培养基，学会对微生物进行扩大培养。
3. 通过稀释，学会用计数器对微生物进行计数。
实验材料和药品待分离的大肠杆菌菌液、高压蒸汽灭菌锅、LB 固体培养基、LB 液体培养基、接种环、玻璃涂布器、培养皿、恒温培养箱、摇床、酒精灯、无菌水、移液枪、EP 管实验步骤（用简单的流程图表示）实验数据的记录与分析（如照片、表格等）实验结果与讨论结果：稀释了105计算出来的结果约为1.726×107ml/cm^3稀释了104计算出来的结果约为0.274×107ml/cm^3全组数据计算出来结果为2.233×107ml/cm^3讨论：在稀释倍数为104的试验中大肠杆菌菌落较少，原因可能是在稀释过程操作中，震荡不够，而且由于不小心洒了半管104稀释液，所以取液接种的时候底层的大肠杆菌数量偏少了。
也有可能是靠近酒精灯附近使得温度升高杀死了一部分细菌或者降低了活性。
大肠杆菌生化实验报告
大肠杆菌生化实验报告大肠杆菌生化实验报告引言：大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，广泛存在于人类和动物的消化系统中。
由于其简单的生长条件和高度适应性，大肠杆菌成为了许多生化实验的理想模型。
本报告旨在介绍大肠杆菌在生化实验中的应用和结果。
实验一：酶活性测定酶活性是衡量细胞代谢活跃程度的重要指标之一。
在本实验中，我们选择了大肠杆菌中的一种酶，β-半乳糖苷酶（LacZ），来进行酶活性测定。
实验步骤：1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品，并进行离心。
3. 悬浮细胞样品，并加入底物。
4. 反应一段时间后，停止反应，并测定底物的降解程度。
结果与讨论：通过测定底物的降解程度，我们可以得到β-半乳糖苷酶的酶活性。
实验结果显示，在不同培养条件下，大肠杆菌中的β-半乳糖苷酶酶活性存在差异。
这表明培养条件对细菌酶活性有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素，并优化培养条件，提高酶活性。
实验二：代谢产物分析大肠杆菌是一种典型的乳酸菌，其代谢途径复杂多样。
在本实验中，我们选择了大肠杆菌中的乳酸代谢途径作为研究对象，通过代谢产物分析来了解细菌的代谢特征。
实验步骤：1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品，并进行离心。
3. 提取细胞内代谢产物。
4. 使用色谱或质谱等技术，对代谢产物进行分析。
结果与讨论：通过代谢产物分析，我们可以了解大肠杆菌在不同培养条件下的代谢特征。
实验结果显示，大肠杆菌在不同培养基中产生的代谢产物有所差异。
这表明培养基成分对细菌代谢途径的选择有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素，并优化培养基配方，调控代谢途径，提高产物产量。
实验三：抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是评估细菌对抗生素的耐药性的重要方法之一。
在本实验中，我们选择了几种常用的抗生素，对大肠杆菌进行敏感性测试。
实验步骤：1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 制备不同浓度的抗生素溶液。
3. 在琼脂平板上涂布细菌样品。
大肠实验报告
实验名称：大肠杆菌的培养与鉴定一、实验目的1. 掌握大肠杆菌的培养方法。
2. 学习大肠杆菌的鉴定方法。
3. 培养学生严谨的科学态度和实验操作技能。
二、实验原理大肠杆菌（Escherichia coli），是一种革兰氏阴性短杆菌，广泛存在于人和动物的肠道中。
本实验通过培养大肠杆菌，观察其菌落特征，并进行鉴定，以掌握大肠杆菌的培养与鉴定方法。
三、实验材料1. 实验试剂：营养肉汤、琼脂、酚红指示剂、盐酸、生理盐水等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、无菌操作台、接种环、酒精灯、培养皿等。
3. 实验菌株：大肠杆菌标准菌株。
四、实验方法1. 菌种活化（1）将大肠杆菌标准菌株从冷冻保存的甘油管中取出，接种于营养肉汤中，37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
（2）将培养好的菌液用无菌生理盐水稀释至适宜浓度。
2. 菌落培养（1）将稀释后的菌液接种于琼脂平板上，用无菌接种环均匀涂布。
（2）将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养18-24小时。
3. 菌落特征观察（1）观察菌落的大小、形状、颜色、边缘等特征。
（2）记录菌落特征。
4. 鉴定实验（1）将培养好的菌落用无菌接种环挑取，接种于含有酚红指示剂的营养肉汤中。
（2）37℃恒温培养箱中培养24小时，观察酚红指示剂的颜色变化。
（3）若酚红指示剂变为黄色，则说明该菌为产酸菌，可能为大肠杆菌。
五、实验结果1. 菌落特征：菌落呈圆形、光滑、湿润、红色，边缘整齐。
2. 鉴定实验：酚红指示剂变为黄色，说明该菌为产酸菌，可能为大肠杆菌。
六、实验讨论1. 本实验成功培养了大肠杆菌，并观察到了其菌落特征，为后续的鉴定实验奠定了基础。
2. 在菌落培养过程中，无菌操作至关重要，要严格按照无菌操作规程进行，以避免杂菌污染。
3. 鉴定实验中，酚红指示剂的颜色变化可以作为判断菌种的一个依据，但还需结合其他实验结果进行综合判断。
七、实验总结本实验通过培养大肠杆菌，观察其菌落特征，并进行鉴定，使学生掌握了大肠杆菌的培养与鉴定方法。
大肠杆菌培养实验报告doc
大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌检测实验报告国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl 实验步骤：一：10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。
灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。
3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4：灭完菌后放入超净台中备用。
三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS 2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。
3：取4只试管，编号1—44：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9：取4只平皿，编号1—410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。
缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。
大肠杆菌培养实验报告.doc
大肠杆菌培养实验报告.doc
第一部分：实验目的
本次实验旨在了解细菌培养的基本原则和方法，掌握培养基的配制、灭菌和保存方法。
同时，培养并观察大肠杆菌的生长规律和形态特征，为后续实验打下基础。
1. 消毒方法
采用高压灭菌器进行消毒，其原理是利用压力和高温来杀灭菌体和孢子，常用于灭菌
培养基、器具和试剂等。
2. 培养基的配制
培养基是为了满足菌体生长所需要的全部营养物质和生长因子而设计的，用于培养、
繁殖和检测微生物。
常见的培养基有肉汤培养基、营养琼脂培养基、霍乱弧菌选择性富营
养琼脂培养基等。
3. 大肠杆菌的生长规律
大肠杆菌是一种革兰氏阴性杆菌，是一种重要的肠道菌群。
大肠杆菌的正常生长温度
为37℃，最适生长温度为42℃，pH值最适范围为6.8-7.2。
取营养琼脂粉30克，加入蒸馏水1000毫升中，调整pH值至7左右。
将混合溶液煮沸，加热消毒15分钟，制成琼脂培养基。
将琼脂培养基加入试管中，压紧塞子，放入高压灭菌器中，灭菌条件为121℃，压力
为0.1MPa，时间为20分钟。
取一小块纯培养的大肠杆菌菌群，放入琼脂培养基中，摇晃均匀，倒入无菌平皿中。
标记培养皿，放在恒温培养箱中，培养温度为37℃，观察24小时内的生长情况。
经过24小时的培养，观察到在琼脂培养基中，大肠杆菌呈现出乳白色半透明的菌落状，形态大小比较均匀，边缘光滑，质地较软。
各菌落之间并没有合并，整个培养皿表面布满
了菌落。
总之，本次实验使我们更好地了解了微生物学中的基础知识，并为我们的科学研究和
医学应用提供了基础和支持。
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大肠杆菌培养实验报告篇一：大肠杆菌检测实验报告国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理实验器材：培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl 实验步骤：一：10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。
灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。
用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min二：1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。
3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4：灭完菌后放入超净台中备用。
三：1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS 2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。
3：取4只试管，编号1—44：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9：取4只平皿，编号1—410：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。
缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。
11：将培养基在３6摄氏度条件下培养12小时。
12：取出培养皿，选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数。
四：实验结果（记得在操作过程和得到结果时拍照）1号，2号菌落个数多不可计，舍弃4号平皿中菌落数目小于10 cfu ，舍弃3号平皿中菌落分布较均匀，数3号中的菌落数，一共有210个 cfu 。
计算样品中细菌浓度为：1.05 × 105 Cfu/ml点评超净台中的实验步骤讲述详细，明确，不错。
前面的步骤叙述有点乱，建议按照如下标题重新调整顺序。
实验步骤：1、仪器清洗将烧杯，培养皿、试管等仪器用洗衣粉清洗，超声5min.然后用清水清洗，超声5min,最后用三蒸水清洗，放入烘箱中烘干。
2、培养基配制精确称量。
放入锥形瓶中，加入。
mL蒸馏水，摇匀3，灭菌包扎、灭菌，烘干备用3、超净台中的操作（如上）除了实验步骤和结果，还要有讨论和注意事项例如：实验讨论：1、评价该方法（操作简易程度，灵敏度如何，适用性）2、为何选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数？注意事项比如各种仪器的使用注意事项，以及保持洁净，防止染菌等。
篇二：微生物生理生化实验报告实验十一IMViC与硫化氢试验指导教师：李海花周六第三组学号：06012XX041 姓名：宋天佳专业：XX级水产养殖学号：03021XX025姓名：皇昊专业：XX级化学1班学号：06012XX055 姓名：续鹏辉专业：XX级水产养殖一、实验目的了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理IMViC是I－吲哚（indol test）、M－甲基红（methyl redtest）、V－伏-普（Voges-Prolauertest）和C－柠檬酸盐（citrate test）4个实验的缩写。
这4个实验主要用来快速鉴别产气杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。
大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一定指标，则表示水质受粪便污染。
产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将两者分开。
硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。
（一）吲哚试验（indol test）吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色。
色氨酸＋H2O色氨酸酶吲哚＋NH3＋丙酮酸吲哚+ 对二甲基氨基苯甲醛玫瑰吲哚（红色）只有部分细菌能产生色氨酸酶，从而具有分解色氨酸产生吲哚的能力，因此吲哚实验可以作为一个生化检测指标。
大肠杆菌产色氨酸酶实验结果为阳性（红色），产气肠杆菌不产色氨酸酶实验结果为阴性（无色）。
（二）M-甲基红试验（methyl red test）用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
细菌代谢糖产生酸使培养基变酸（pH下降），使甲基红指示剂变色：橘黄色（pH6.3红色（pH4.2）尽管，所有肠道微生物都能发酵葡萄糖产生有机酸，但大肠杆菌和产气肠杆菌有区别：两者在培养早期产生有机酸，但大肠杆菌在培养后仍能维持酸性pH4，而产气肠杆菌则将有机酸转化为非酸性产物，使pH上升至6左右。
因此，大肠杆菌为阳性（红色），产气肠杆菌阴性（黄色）。
（三）伏-普实验（Voges-Prolauer test）测定细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物（如丙酮酸）的能力。
丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基醇，此化合物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰。
二乙酰与蛋白胨中的精氨酸的胍基作用，生成红色化合物，及伏-普反应阳性，不产生红色化合物者为反应阴性。
碱性条件、加入少量含胍基的化合物可使反应更明显。
大肠杆菌不产丙酮酸实验结果为阴性（无色），产气肠杆菌产丙酮酸实验结果为阳性（红色）。
丙酮酸乙酰乳酸乙酰甲基甲醇胍基+二乙红色化合物（四）柠檬酸盐试验（citrate test）用来检测柠檬酸盐是否被利用，有些细菌以柠檬酸钠为碳源，培养基中的柠檬酸和磷酸铵被分解后，产生碱性化合物，使pH升高，当加入1％溴麝香草酚蓝指示剂时，培养基就会有绿色转变为深蓝色，溴麝香草酚蓝指示范围：pH＜6黄色，pH 6～7绿色，pH ＞7蓝色。
大肠杆菌不能利用柠檬酸盐实验结果为阴性（绿色），产气肠杆菌能利用柠檬酸盐实验结果为阳性（蓝色）。
（五）硫化氢实验用来检测硫化氢的产生，也是用于肠道细菌检查的常用生化实验。
含硫有机物（如胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸）能被部分细菌分解产生H2S，H2S和培养基中的铅盐或铁盐反应，形成黑色的硫化铅或硫化铁沉淀。
大肠杆菌不能分解含硫有机物实验结果为阴性（无沉淀），产气肠杆菌能分解含硫有机物实验结果为阳性（黑色沉淀）。
三、实验器材1、菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌斜面各一支。
2、培养基：蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、柠檬酸盐培养基、硝酸盐还原培养基、醋酸铅培养基3、溶液和试剂：甲基红指示剂，40％KOH，5％-萘酚溶液，乙醚，吲哚试剂4、仪器或其他用具：试管架，接种环等四、操作步骤一）实验准备1.葡萄糖蛋白胨水培养基配制：蛋白胨3g，葡萄糖3g，磷酸氢二钾1.2g，水600ml，溶解，调节Ph7.，0-7.2，分装于70支试管中，112℃灭菌30min。
2.柠檬酸盐培养基配制：NH4H2PO40.2g，K2HPO4 0.2g，NaCl1g，MgSO4 40mg，柠檬酸钠0.4g，琼脂4g，调节pH6.8，1%溴香草酚蓝乙醇液2ml，水200ml，溶解，分装于20支试管中， 121℃灭菌20min。
（pH不宜偏高，以淡绿色为宜）3. 硝酸盐还原培养基配制：蛋白胨 1.25g，氯化钠0.625g，硝酸钾0.25g，水125ml，溶解，调节pH7.4左右，分装于16支试管中，121℃灭菌20min。
4.硫化氢试验养基配制：蛋白胨5g，氯化钠1.25g，柠檬酸铁铵125mg，硫代硫酸钠125mg，琼脂5g，水250ml。
先将琼脂、蛋白胨融化，冷至60 ℃时加入其他成分，调pH7.2左右，分装于35支试管中，112℃灭菌20min。
二）接种与培养1.穿刺法分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支醋酸铅培养基（H2S），37℃培养48h。
2.分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支蛋白胨水培养基（I）、 2支葡萄糖蛋白胨水培养基（M＆V），37℃培养2d。
3.划S曲线法分别接种大肠杆菌、产气杆菌于2支柠檬酸盐斜面培养基（C），37℃培养2d。
三）结果观察1.H2S实验：观察是否有黑色硫化铅沉淀产生。
2.吲哚实验：2d后的培养物内加3～4滴乙醚，摇动数次，静至1～3min，待乙醚上升后，沿管壁徐徐滴加2滴吲哚试剂，在乙醚和培养物之间产生红色环状物者为阳性反应。
3.甲基红实验：2d后的培养物内加2滴甲基红试剂，培养物变为红色者为阳性，黄色者为阴性（注意甲基红不要过量，以免出现假阳性）。
4.伏－普实验： 2d后的培养物内加5～10滴40％KOH，然后加入等量的5％-萘酚溶液，用力振荡，红色为阳性。
5.柠檬酸盐实验：观察2d后的培养物上有无细菌产生及其颜色，蓝色为阳性，绿色为阴性。
五、实验结果将实验结果填入下表。
“＋”表示阳性反应，“—”表示阴性反应。
六、讨论1. 吲哚试验、甲基红试验、伏－普试验、柠檬酸盐试验的实验结果与理论结果一致。
H2S试验的实验结果与理论结果不一致，两支醋酸铅培养基中都产生黑色沉淀，均为阳性反应，可能的原因：接种操作时，先穿刺接种产气肠杆菌，之后，接种针未充分加热灭菌，再穿刺接种大肠杆菌时混入部分大肠杆菌；接种针在接种产气肠杆菌时，接种针上不粘上了产气肠杆菌，未被加热灭菌，再接种大肠杆菌时，将产气肠杆菌混入，使大肠杆菌产生假阳性反应。
2. 吲哚试验，实验现象不明显，可能的原因：培养基中的色氨酸含量不够高；吲哚试剂加入的量不够，一部分粘在试管壁上损失掉，之后补加时乙醚已挥发；滴加吲哚试剂时动作不够轻缓，破坏了红色化合物的生成。
3. 为什么大肠杆菌是甲基红反应阳性，而产气肠杆菌为阴性？这个试验与伏—普试验最初底物和最终产物有何异同？大肠杆菌、产气肠杆菌都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解代谢途径不同。
大肠杆菌，可产生乳酸、琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红，即甲基红反应阳性。
产气肠杆菌则使丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇，此化合物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰，二乙酰与蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成红色化合物，即伏-普阳性反应。
4. 说明在硫化氢试验中醋酸铅的作用,可以用哪种化合物代替醋酸铅？醋酸铅培养基（试纸）可检验硫化氢的产生，反应为：Pb(Ac)2+H2S=PbS↓+2HAc产生黑色的硫化铅。
所以培养基（纸带）变黑为阳性，不变为阴性。