中国药典版--薄层色谱讲义共63页

50 16
17
7
1 56
9
115
14 31
412 3 17 9 34
17 71
175 13 20 7 30
40 243 22 1138 15 25 16 32
28 217 1
505 47 37 31 34
操作方法
• 薄层色谱就是将吸附剂均匀地铺 在玻璃板上，把欲分析的样品加到薄 层上，然后用合适的溶剂展开而达到 分离、鉴别和定量的目的，因为层析 是在薄层上进行，所以称它为薄层色 谱法
因此，当溶剂流过时，不同物质在
吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附， 解吸附，再吸附，再解吸附。易被吸附 的物质（吸附性强的物质），相对地移 动慢一些，而较难吸附的物质相对地移 动快一些。经过一段时间的展开，不同 的物质就被彼此分开，最后形成相互分 离的斑点。
【实验装置】
前沿线
色斑 起始线 图3-6 薄层色谱示意图
2)分段萃取法：如龙胆泻肝丸先用 正己烷萃取，供当归鉴别用；经用丙酮 萃取，供用以鉴别马兜铃酸；最后用甲 醇萃取再经氧化铝小柱用甲醇洗脱，以 鉴别龙胆苦苷，是利用了各自不用的溶 解度，用不同极性的溶剂分段萃取，从 而达到样品供试液净化的目的
3）液液萃取法：如小儿化毒散中牛 黄的鉴别，先用稀碱液将胆酸类成分溶 出，用乙酸乙酯洗涤；再在酸性条件下， 用醋酸乙酯萃取，以减少其他成分和杂 质的干扰。
因而薄层色谱，尤其是常规薄层色谱，
有被视为是一种“难以驾驶”的技术。为 了充分发挥薄层色谱技术在中药分析方面 的优势，提高色谱的分离度和重现性，注 意控制影响色谱质量的因素是非常重要的。 以下所述的几个方面不仅对定量分析是必 须注意的问题，对提高定性分析的质量也 是不可忽视的。
一、样品的预处理
一般地将被检样品用合适的溶剂（常用 甲醇、乙醇）提取，直接上样，即可达到 分离，但未经处理的甲醇或乙醇提取液却 经常由于杂志太多无法得到高质量的薄层 色谱，尤其是复方中药制剂，样品的预处 理是一个值得注意的步骤。
前景
近年来，由于薄层扫描仪的出现以 及高质量的预制板、高效薄层板的应用 以及上样技术的改进。目前，薄层色谱 已经进入仪器化、高效化、定量化及数 据处理自动化阶段，即向仪器化薄层色 谱发展。
薄层色谱法作为一种敞开系统的 色谱技术对分析工作者仍具有吸引力。 尤其是对成分复杂的中药有着重要的 意义。中国药典2019年版共收载了784 个中药品种，其中就有1523项用于薄 层鉴别项目，含量测定45项，从而说 明了薄层色谱技术在中药鉴别方面的 重要性
采用卡玛Nanomat 4手动点样仪，它操作简 便，点样位置准确，不损伤薄层，结果优于传 统手工点样。
半自动点样仪 全自动点样仪
操作程序：
一、 制 板 二、 点 样 三、 展 开 四、 显 色
薄层色谱法的操作及应用
第三节 影响薄层色谱分析的 主要因素
常规薄层色谱因为是一种“敞开
系统”的色谱技术，与柱色谱的区别 之一是除材料及器材以外，外界环境 条件对被分离物质的层析行为影响很 大，分离机制也很复杂；其次由于分 析全过程是不连续的，所以操作技巧 也明显的影响色谱质量；
增修订项目
项目 类别
鉴别
检查
含量测定
特征
或指
纹图
显微
TLC
HP LC
GC
理化
通则
重金属 有害元
素
毒Hale Waihona Puke Baidu 成分
其 他
谱
HPLC
TL CS
UV GC
其 他
10版 新增
259
1818
25
9
54 426
8
中成药
05版 收载
281
1144
11
16
102 627
8
提取物
10版 新增
05版 收载
21
3
2
5
1
11
16
返回
技术参数 1.点样方式：喷雾式点样； 点样平台：最大可放
20x20cm薄板； 2.平台驱动：步进马达3200步/转，80步/mm，速
度10mm/s； 3.点样带长度：0（点状）-190mm；进样针规格：
100ul或500ul； 4.进样针驱动：步进马达1600步/转；（接下） 5.100nL/120步，100ul进样针；100nL/24步，
不足之处
薄层色谱法在仪器自动化 程度、分辨率及重现性等方面 不如后来发展起来的气相色谱 法和高效液相色谱法。
第二节 薄层色谱的基本技术
原理
薄层色谱法是色谱法中应用最普 遍的方法之一，薄层色谱法按分离机 制可分为吸附、分配、离子交换等方 法。其中吸附色谱是最常用的层析方 法，吸附色谱的原理是利用吸附剂对 不同物质的吸附力大小，从而达到分 离的目的。
17 10
12
10版 新增
374
526
3
中药材
05版 收载
339
347
5
2
26 1127 12
179 726 17
10版 新增
633
2492
31
12
134 1554
31
合计
05版 收载
620
1507
16
16
298 1363
37
32 162 6
709 12 8 24 1
10 90 1
321 33 16 19 4
• 第一节 概 述 • 第二节 薄层色谱的基本技术 • 第三节 影响薄层色谱分析的主要因素
第一节 概 述
• 薄层色谱法 是kirchner等人在五 十年代从经典柱色谱法及纸色谱的基 础上发展起来的一种色谱技术。薄层 色谱法具有设备简单、操作方便、分 离快速、灵敏度及分辨率高、显色剂 选择性大，以及制备薄层载量较纸色 谱大，而切割色带较柱色谱方便等优 点。并且在2019版药典中应用的更加广泛
例如：参苓白术散中的人参和甘
草的薄层鉴别，用甲醇直接提取有两 个扩斑点（黑红色）掩盖了人参很多 斑点。甲醇提取液用正丁醇处理后， 糖点去除后，图谱好多了。再经上注 后，则斑点分离更清晰了，可得到质 量高的薄层色谱。
样品供试液净化的方法通常有：
1)单一溶剂萃取法：如浙贝母、平 贝母、洋金花等均利用在碱性介质下用 氯仿或苯将其所含的生物碱有选择地萃 取出来，而舍弃其他成分，使供试液得 以净化.
4）固液萃取：将样品的提取液通过 小柱（如：硅藻土柱）萃取，萃取液再 经浓缩等处理后作为供试液。用固液萃 取或洗脱的方法制备样品，是色谱分析 常用的方法，目前用的较多的是AL2O3柱。
谢 谢！
薄层扫描仪 系指用一定波长的光 对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后 能发射出荧光的斑点，进行扫描，将扫 描得到的谱图和积分数据用于物质定性 或定量的分析仪器。