实验一 植物组织自由水和束缚水含量的测定

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

2016年10月24日

姓名 专业年级 学号 同组者

题目 植物组织自由水和束缚水含量的测定 授课老师 一、 实验目的

学会植物组织含水量、自由水和束缚水含量的测定方法，学会电子天平和阿贝氏折射以等仪器的使用方法。

二、 实验原理

植物组织中水分有自由水和束缚水两种存在状态，自由水易于流动和蒸发，可以做溶剂，而束缚水与此相反难以蒸发，也不可以做溶剂。根据这两种水的性质不同讲他们分离，然后再测定其含量。分离的方法是将待测的植物组织放入浓度很高的蔗糖溶液中脱水，如果蔗糖溶液的浓度足够高，体积足够大，那么在达到平衡是组织绝大部分的自由水将进入蔗糖溶液，根据蔗糖溶液浓度的变化，重量以及植物组织的鲜重可以求出植物组织中自由水含量，同时用烘干的方法测定出植物组织的含水量，束缚水含量等于植物组织含水量与自由水含量的差。

设：A 为植物组织中自由水的质量（g ），W 为蔗糖溶液的质量（g ）；C1为处理前蔗糖溶液浓度（%）；C2为处理后蔗糖溶液浓度（%）；W y 为植物组织鲜重（g ）。 则

A=(W+A)(1-c 2)-W(1-c 2)

即

A=

y

W C C W )

(21-

自由水含量（%）=

%100)(%100221⨯-=⨯y

y W C C C W W A

三、 仪器试剂

1.仪器及器皿

阿贝氏折射仪，超级恒温水浴，1/1000电子天平，吸管，烘箱，扁型称量瓶，剪刀，5ml 移液管，滤纸，吸水纸。 2.试剂

65%一70%蔗糖溶液(W/V)。

四、 实验材料

新鲜白菜叶

五、 实验步骤

(1) 取称量瓶4个，编号、洗净、烘干，用电子天平称量、记录。

(2) 取待测的植物样品4份，每份在1g 左右(0. 900一1. 100 g )，用剪刀剪成1~2mm 长的小段，放人称量瓶中，盖上盖子，称量、记录。 (3) 其中两瓶用来测含水量。将盖子打开，放入100℃~105℃的烘箱中烘至恒重，称量，记录，代人公式计算植物组织含水量。

(4) 另外两瓶分别加人蔗糖溶液5 mL ，盖上瓶盖，称量、记录，放在实脸台上进行水分交换2~3小时，其间不时摇动。用阿贝氏折射仪分别测定处理前、后的重量百分比浓度。

(5) 将阿贝氏折射仪的进样旋钮打开，用吸管吸取待测蔗糖溶液1~2滴加人折射仪进样棱镜的磨砂表面上，将棱镜关闭，调节色散旋钮至色散消失调节读数旋钮，将黑白分界线调到望远镜筒的十字交叉点上，然后在读数镜筒中读出蔗糖的质量百分浓度。

六、 计算

样品含水量（%）=

%100-⨯鲜重

干重

鲜重

样品自由水含量（%）=

%100)(%100221⨯-=⨯y

y W C C C W W A

式中，

W——蔗糖溶液质量（g）

C1——处理前蔗糖溶液浓度（%）

C2——处理后蔗糖溶液浓度（%）

W y——植物组织鲜重（g）。

样品束缚水含量（%）=样品含水量（%）样品自由水含量（%）

数据记录表（室温19.4℃）

样品含水量测定结果表

样品自由水含量测定结果表

3号白菜叶的鲜重Wy=1.07g 3号瓶蔗糖质量W=6.84g 3号白菜叶自由水的含量=%100)(%100221⨯-=⨯y

y W C C C W W A =60.3%

4号白菜叶的鲜重Wy=1.02g 4号瓶蔗糖质量W=6.66g 4号白菜叶自由水的含量=%100)(%100221⨯-=⨯y y W C C C W W A =69.4% 由以上结果可得：

样品白菜总含水量=94.5%，自由水含量=64.9%，结合水含量=29.2%。

七、误差分析

植物细胞的含水量在70～90%左右，在不同的组织、同一组织的不同部位，植物的含水量也会有所差异，白菜叶的上部和下部含水量有差别。另外本次试验不是十分精细，故在误差允许的范围内，可认为植物组织的含水量测定准确。但是，植物自由水的含量与理论值（占含水量的95%）相比偏差较大，原因可能在于：

1）称量过程有误差

2）在切片过程中有水分损失，且对于实验材料的处理时间比较长。

3）因时间限制，烘干和交换等过程进行时间均较要求的时间有所缩减，均为十五分钟左右。

4）自由水的测量时所加的蔗糖溶液尚不足以盖过所有的植物叶片，因此自由水的测量误差可能较大。