微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
146种培养基配方
146种培养基配方在微生物学研究中,培养基是非常重要的工具,用于维持和培养各类微生物的生长。
不同的微生物对培养基成分有着不同的需求,因此,有很多种不同的培养基配方被设计出来以满足微生物的需求。
下面是一些常用的微生物培养基配方。
1. 素琼脂葡萄糖培养基(Tryptone glucose yeast extract agar):- 牛肉提取物(Tryptone) 10g- 酵母提取物(Yeast extract) 5g- 葡萄糖(Glucose) 10g- Agar 15g-pH7.22. 红色半固体培养基(Red semi-solid medium):- 蛋白胨(Peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 7.5g- 酚红(Phenol red) 0.02g-pH7.23. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato glucose agar):- 马铃薯提取物(Potato extract) 4g- 葡萄糖(Glucose) 20g- Agar 20g-pH7.04. 大肠杆菌营养琼脂培养基(Escherichia coli nutrient agar): - 羊肉肉脏提取物(Peptone from meat infusion) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 3g-NaCl5g- Agar 15g-pH7.05. 硫磺琼脂培养基(Sulfur agar):- 素蛋白(Casein peptone) 10g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 硫磺粉末(Sulfur powder) 0.1g- Agar 15g-pH7.56. 罗氏琼脂培养基(Rogosa agar):- 葡萄糖(Dextrose) 20g- 麦粉汁(Malt extract) 10g- 柠檬酸(Citric acid) 5g- Agar 15g-pH5.27. 环境样品微生物菌落计数菌落计数琼脂培养基(Microbial Colony Count Agar):- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g-NaCl9g- Agar 15g-pH7.28. 活性炭琼脂培养基(Activated charcoal agar):- 木质纤维素(Cellulose) 5g- 活性炭(Activated charcoal) 1g- Agar 10g-pH7.29. 高盐基琼脂培养基(High salt base agar):- 兰氏海盐(Sea salt) 20g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- 蛋白胨(Peptone) 5g- Agar 15g-pH7.510. 大豆酪蛋白琼脂培养基(Soy peptone agar):- 大豆酪蛋白(Soy peptone) 5g- 水解酵母(Yeast extract) 5g- Agar 15g-pH7.0这只是一小部分微生物培养基的配方,实际上有很多种不同的培养基适用于不同类型的微生物。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学研究和实验室工作中常用的一种培养微生物的基础环境,其主要组成包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
下面是一些常用的培养基配方汇总。
1.琼脂培养基琼脂培养基是最常用的固体培养基之一,其主要成分为琼脂、蔗糖、牛肉膏粉和无机盐。
其配方如下:-琼脂:15g-蔗糖:10g-牛肉膏粉:3g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化镁:0.5g-氯化钾:0.2g-高锰酸钾:0.0001g-蛋白胨:3g-酵母提取物:3g- 菜子油:0.5ml- 蒸馏水:1000ml2.肉汤培养基肉汤培养基是一种常用的液体培养基,其主要成分为牛肉膏粉和蛋白胨。
其配方如下:-牛肉膏粉:3g-蛋白胨:5g-葡萄糖:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:2g-氯化镁:0.5g- 蒸馏水:1000ml3.紫砂培养基紫砂培养基是一种用于真菌培养的培养基,其主要成分为紫砂和蔗糖。
其配方如下:-紫砂:15g-蔗糖:30g-蛋白胨:2g-磷酸二氢钾:1g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g4.麦芽培养基麦芽培养基是一种用于酵母和酵母菌类培养的培养基,其主要成分为麦芽粉和蔗糖。
其配方如下:-麦芽粉:10g-蔗糖:30g-蛋白胨:5g-氯化钠:5g-氯化钙:0.1g- 蒸馏水:1000ml5.铁蛋白培养基铁蛋白培养基是一种用于菌类和细菌培养的培养基,其主要成分为铁蛋白和蔗糖。
其配方如下:-铁蛋白:10g-蔗糖:10g-蛋白胨:2g-氯化钠:5g-磷酸二氢钾:1g-氯化钙:0.1g这些常用的培养基配方可根据实验需要进行适当调整和改良,以提高微生物的生长和培养效果。
同时,在制备培养基的过程中要注意消毒和无菌操作,以避免试验的污染和杂质的干扰。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具,用于培养和繁殖微生物。
不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
以下是一些常用的培养基配方汇总。
1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基是最常用的培养基之一,适用于大多数细菌的培养。
其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.02. 紫砂培养基(Sabouraud培养基)紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。
其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。
它提供了真菌所需的碳源和能量源。
配方:-葡萄糖:40g-酵母提取物:10g-加水至1L,调节pH至5.63. TSB培养基(Tryptic Soy Broth培养基)TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。
其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。
它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:17g-胨肽:3g-大豆胨:5g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.34. MRS培养基(De Man, Rogosa and Sharpe培养基)MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。
其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。
它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。
配方:-蔗糖:50g-氯化镁:0.2g-氯化钠:5g-酵母提取物:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。
其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。
它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。
配方:-胨肽:0.5g-葡萄糖:0.5g-酵母提取物:0.5g-琼脂:15g-微量元素:1mL-加水至1L,调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总,适用于不同类型的微生物培养。
70种常用培养基配方
70种常用培养基配方培养基是一种在实验室中用于培养和生长微生物的基质。
根据微生物的不同需求,培养基可以分为许多不同类型。
下面列举了70种常用的培养基配方。
1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)Tryptone 10 gYeast extract 5 gNaCl10gAgar 15 g加水至1L,调pH至7.0用途:培养大肠杆菌等广泛应用于分子生物学实验。
2. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato Dextrose Agar)胰蛋白胨4g葡萄糖20g马铃薯提取物200gAgar 15 g加水至1L用途:用于真菌的培养和研究。
3.NIH3T3细胞培养基DMEM培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 500 mL胎牛血清 (Fetal bovine serum) 10%青霉素/链霉素 (Penicillin/Streptomycin) 1%用途:常用于培养和传代小鼠成纤维细胞株。
4. 酵母饼干培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Agar)酵母提取物10g蛋白胨10g葡萄糖20gAgar 15 g加水至1L用途:适用于酵母菌的培养和繁殖。
5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)大脑提取物17.5g胃蛋白胨10g葡萄糖2gAgar 12 gNaCl5g加水至1L用途:常用于培养细菌。
6. M9盐基液(M9 Minimal Medium)Na2HPO46gKH2PO43gNaCl0.5gNH4Cl1g1MMgSO41mL加水至1L用途:适用于大肠杆菌等菌种。
7. SJ培养基(Sabouraud Dextrose Agar)蔗糖40g蛋白胨10gAgar 15 g加水至1L用途:适用于真菌的培养。
8.R2A培养基Dipotassium phosphate 0.3 g Monopotassium phosphate 0.3 gSodium pyruvate 0.3 gSodium glutamate 0.3 gYeast extract 0.5 gPeptone 0.5 gTryptone 0.5 gGlucose 0.5 gAgar 15 g加水至1L用途:适用于环境中的微生物。
36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编
36种常用微生物培养基配制汇总之欧阳理创编微生物培养基是用于培养和繁殖微生物的营养液或固体基质。
不同的微生物对于营养成分的需求有所不同,因此有多种不同类型的培养基适用于不同的微生物。
以下是36种常用的微生物培养基的配制总结。
一、普通营养基1.爱德华氏琼脂培养基(Edward's Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母提取物5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.2-7.42.LB培养基(LB Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,酵母膏5g,NaCl10g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.0。
3.NB培养基(NB Medium)配方:纯培养基成分:牛肉精20g,酵母浸膏10g,蔗糖10g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.2二、选择性培养基1.MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨17g,胆盐16g,中性红紫晶1g,酸性红3.6g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.1-7.52.VR琼脂培养基(VR Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨10g,蔗糖10g,酵母浸膏10g,苏木素2.5g,酚红0.025g,碳酸钠10g,氧化钴0.0025g,碳酸锌0.025g,维生素B10.025g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH6.83.XLD琼脂培养基(XLD Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨3g,胆盐2g,蔗糖7.5g,腺苷鳖1g,素含色素蓝0.008g,溴酸钠0.0125g,菌落素1.5g,氧化铋1.5g,精盐75g,麦芽葡糖糖1g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.4三、富营养基1.TSA琼脂培养基(Tryptic Soy Agar Medium)配方:纯培养基成分:蛋白胨15g,酵母提取物5g,氯化钠5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
pH7.32.BHI琼脂培养基(Brain Heart Infusion Agar Medium)配方:纯培养基成分:牛心脏粉15g,牛脑粉8g,葡萄糖2g,酵母浸膏5g,琼脂15g,蒸馏水1L。
培养基配方
培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。
用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。
2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。
用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。
115℃,20min 灭菌。
3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分:牛肉膏或牛肉汤500克,葡萄糖10克,胰蛋白胨10克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分:NaCl300克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分:果胶5克,葡萄糖5克,NaNO32克,K2HPO40.2克,MgSO4·7H2O0.1克,CaCO30.02克,FeSO4·7H2O0.01克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分:土豆提取物4克,蛋白胨2克,乳糖10克,NaCl10克,胆盐0.75克,碱性蓝2克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分:石蜡300克,肉浸膏100克,大豆酪蛋白胨20克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分:肉膏1克,酵母提取物2克,葡萄糖2克,NaCl5克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani(LB)培养基成分:酵母提取物5克,酪蛋白胨10克,NaCl10克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖40克,醇20克,琼脂15克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分:鱼精膏20克,胆盐胆红素15克,玛琪琼脂25克,NaCl5克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分:马加提琼脂50克,蒸馏水1000毫升。
用途:适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分:葡萄糖20克,醇30克,琼脂20克,蒸馏水1000毫升。
实验室常用培养基配方
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基,用于微生物的一般培养、分离和鉴定,其配方如下:-水:1000mL-肉浸膏或胨:三到五克-水解酪蛋白:五克-氯化钠:五克-琼脂:十五克2. 培养基ONE(BHI Agar)培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏,配方如下:-砂糖:十五克-胨:二十克-水:1000mL-酵母膏:二十克-酵母蛋白胨:十克-溶血素:十克-十%NaCl:五百毫升-甘油:百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基(TCBS Agar)TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-TCBS粉:一百克4. MacConkey琼脂培养基(MacConkey Agar)MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基,用于大肠杆菌的分离和检测,配方如下:-水:1000mL-肉浸膏:十七克-水解酪蛋白:十五克-氯化钠:五克-紫蘑菇素:六十毫克-琼脂:十五克5. Sabouraud琼脂培养基(Sabouraud Agar)Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水:1000mL-葡萄糖:四十克-琼脂:十五克-氯化钠:五克-氯已二维硫酸钾:二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方,实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外,还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离,如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时,需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
微生物常用的培养基配方
微生物常用的培养基配方1、用于细菌培养——LB(Luria-Bertani)培养基LB培养基分为液体及固体两种形态的培养基,主要在分子生物学中应用。
(1) LB液体培养基,在90mL双蒸馏水中加入:胰蛋白胨1g氯化钠1g酵母提取物0.5g摇动容器直至溶质溶解后,用1当量NaOH调节pH至7.0,再用双蒸馏水定容至100mL。
而后进行高压蒸汽灭菌。
(2) LB固体培养基在100mL液体培养基的基础上,加入1.5g琼脂粉。
2、用于细菌培养——牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏 1.5g蛋白胨5g氯化钠 2.5g水500mL,pH调至7.4~7.6。
3、用于霉菌或酵母菌培养——马铃薯培养基(PDA)马铃薯(去皮)200g蔗糖(葡萄糖)20g水1000mL将马铃薯去皮切成小块放入锅中,加水至1000mL,煮至沸腾后维持20-30min,注意不时用玻璃棒搅拌防止糊底。
用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,弃去滤渣。
取滤液加糖(培养霉菌用加蔗糖,培养酵母菌用加葡萄糖),补充水至1000mL,自然pH。
4、用于V.P.反应和甲基红试验——葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨0.5g葡萄糖0.5g磷酸氢二甲0.2g水100mL,调节pH至7.2~7.4,115℃湿热灭菌20min。
5、用于吲哚实验——蛋白胨水培养基蛋白胨10g氯化钠5g水1000mL,调节pH至7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min。
6、用于厌氧菌培养——RCM培养基(强化梭菌培养基)酵母粉3g牛肉膏10g蛋白胨10g可溶性淀粉1g葡萄糖5gL-半胱氨酸盐酸盐0.5g氯化钠5g醋酸钠3g琼脂0.5水1000mL,调节pH至6.8±0.1,121℃高压灭菌15min。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
微生物实验培养基配方
微生物学实验常用培养基的配制1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。
121℃灭菌30min。
7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基121℃灭菌20min。
9、合成培养基加12 mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。
121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基培养基的配制:称新鲜豆芽100g,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。
常用微生物培养基配方大全
常用微生物培养基配方大全(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/m;(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷;(3)分离霉菌和酵母菌时,在培养基中加入青霉素、;(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓;一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其;1、细菌培养基;配方一牛肉膏琼脂培养基;牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠0.5克,;水1000毫升;在烧(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和酵母菌的生长。
(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。
加入氟哌酸(5mg/L)+制霉菌素(50mg/L)+青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。
(3)分离霉菌和酵母菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。
(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。
一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。
如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,水 1000毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
常用微生物培养基配方大全
常用培养基配方01 糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌1 5min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好1 0%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100mL培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d.迟缓反应需观察14~30d.02 ONPG培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG) 60mg(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1~3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1~3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d.哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06 丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07 葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20~100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08 Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09 马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10~15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8~7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH 应为6.8~7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18~24h.滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18~24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mLpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1~2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000mL20%尿素溶液100mLpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水1000mL0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17 氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中.试验方法:接种后在36±1℃培养1~4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19 细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20 过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1 mL.静置于室温(20℃)中30~60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL. 稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000mL.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000mLpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24 乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21) 10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25 肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL琼脂17~20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心) 1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000mL制法:1 称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2 加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃.3 加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小时摇动一二次.4 4h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5 加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6 煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜.7 次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8 校正pH7.4~7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000mL浓盐酸10mL制法:1 洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎.2 用绞肉机将猪血块绞碎.3 将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4 从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5 吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2~7.4.6 用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4~7.6) 1000mL琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100mL.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4~7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血) 5~10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33 乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐) 1.5g乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36 缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾 1.6g蒸馏水1000mL乙液氯化镁(化学纯) 40g蒸馏水100mL4.13.3 丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rappaport 10(R10)增菌液.38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000mL碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000mL将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O) 50g蒸馏水加至100mL碘溶液碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.58L-胱氨酸0.01g蒸馏水1000mL1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41 GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225mL,115℃高压灭菌15min.42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000mLpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18~20g蒸馏水1000mLpH7.5制法:1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解.3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50~55℃,倾注平皿. 注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44 DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18~20g蒸馏水1000mLpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH. 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板.45 HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18~20g蒸馏水1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrade指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2mL.46 SS琼脂牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐 3.5g琼脂17g蒸馏水1000mL再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100mL乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47 WS琼脂成分:②胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAndrade指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000mLpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g琼脂17g蒸馏水1000mL乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600mL加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000mLpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51 三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52 克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂 6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂2g葡萄糖1g0.2%酚红溶液5mL制法:1 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解.2 分别加入其他各种成分.将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内,每管约2mL.115℃高压灭菌10min.3 将上层培养基放在56℃水浴箱内保温;将下层培养基直立放在室温内,使其凝固.4 当下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5mL,放成斜面.53 克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨20g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g葡萄糖1g氯化钠5g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5mL,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到比较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.54 葡萄糖半固体发酵管成分:蛋白胨1g牛肉膏0.3g氯化钠0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖1g琼脂0.3g蒸馏水100mLpH7.4制法:将蛋白胨,牛肉膏和氯化钠加入于水中,校正pH后加入琼脂加热溶解,再加入指示剂和葡萄糖,分装小试管,灭菌121℃15 min.55 5%乳糖发酵管成分:蛋白胨0.2g氯化钠0.5g乳糖5g2%溴麝香草酚蓝水溶液1.2mL蒸馏水100mLpH7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH.将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌12 1℃15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内.注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于1d内发酵.56 CAYE培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内,如无此培养基,亦可用Honda氏产毒肉汤.57 Honda氏产毒肉汤成分:水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠 2.5g磷酸氢二钠15g。
36种常用微生物培养基配制汇总
36种常用微生物培养基配制汇总微生物培养基是一种用于培养和繁殖微生物的营养介质,通常包含碳源、氮源、无机盐、维生素和辅助物质。
不同微生物对培养基的要求不同,因此配制不同的培养基可以满足不同微生物的需求。
下面是常用的36种微生物培养基的配制方法。
1. Luria-Bertani培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g海藻糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
2. 马铃薯葡萄糖培养基:取马铃薯50g,洗净去皮切块,加入1000ml蒸馏水中,煮沸15分钟,过滤得到1000ml的马铃薯汁液,加入20g葡萄糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
3.BHIA培养基:取1L蒸馏水,加入37gBHIA粉,调pH至7.2-7.4,加入蒸馏水补足至1L。
4. 番茄汁琼脂培养基:取200ml番茄汁、20g琼脂,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的番茄汁琼脂培养基。
5. Sabouraud培养基:取1L蒸馏水,加入20g葡萄糖、10g蛋白胨、40g沙门氏糖,调pH至5.6-5.8,加入蒸馏水补足至1L。
6.TSB培养基:取1L蒸馏水,加入17gTSB粉,调pH至7.3-7.5,加入蒸馏水补足至1L。
7.LB培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
8.爱德华培养基:取1L蒸馏水,加入20g牛肉精、10g酵母提取物、5g胆汁、10g胆石脂、5g葡萄糖,调pH至7.4-7.6,加入蒸馏水补足至1L。
9.VC培养基:取1L蒸馏水,加入10g蔗糖、10g大豆蛋白酸水解物、2g柠檬酸钠、0.1g亚铁氯化物、0.1g亚铜硫酸盐、0.1g亚锰酸盐、0.02g硼酸、0.1g维生素B1、0.02g抗坏血酸,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
10. 铁琼脂培养基:取200ml铁琼脂粉,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的铁琼脂培养基。
微生物培养常用培养基配方
溶液名称用途吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法吕氏碱性美蓝染色液美蓝染色法结晶紫染色液革兰氏染色法革兰氏碘液革兰氏染色法沙黄复染液革兰氏染色法石炭酸品红染色液耐酸性染色法(萋-倪染色法)3%盐酸-乙醇耐酸性染色法(萋-倪染色法)复染液吕氏碱性美蓝染色液柯氏染色液柯氏染色法奥尔特氏染色液奥尔特氏荚膜染色法瑞氏染色液瑞士染色法鞭毛染色法染色液(甲液)鞭毛染色法鞭毛染色法鞭毛染色法染色液(乙液)鞭毛染色法鞭毛染色法碱性复红染色液碱性复红染色法甲基红实验甲基红(MR)实验氧化酶试验细胞色素氧化酶试验过氧化氢酶试验过氧化物酶试验磷酸盐缓冲液(储存液)磷酸盐溶液(稀释液)明胶磷酸盐缓冲液乳酸-苯酚溶液检查真菌形态硝酸盐还原试剂(甲液)硝酸盐还原试剂(乙液)靛基质试剂(柯凡客试剂)靛基质试剂(欧-波试剂)美蓝95%乙醇0.01%氢氧化钠溶液结晶紫95%乙醇1%草酸水溶液碘碘化钾蒸馏水沙黄95%乙醇蒸馏水碱性品红95%乙醇5%酚水溶液浓盐酸95%乙醇0.5%沙黄液0.5%孔雀绿液沙黄蒸馏水瑞氏色素甲醇单宁酸氯化高铁蒸馏水1%氢氧化钠溶液15%甲醛溶液硝酸银蒸馏水浓氢氧化铵溶液碱性复红溶液甲基红试剂1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液1%盐酸二甲基对苯二胺1%α-萘酚-乙醇溶液3%过氧化氢溶液2%茶酚溶液3%过氧化氢溶液磷酸二氢钾1mol/L氢氧化钠溶液蒸馏水储存液稀释至1000ML 明胶蒸馏水苯酚乳酸甘油蒸馏水对氨基苯磺酸乙酸甲萘胺乙酸对二甲氨基甲醛戊醇浓盐酸对二甲氨基苯甲醛乙醇浓盐酸。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法1.牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl 5g,水1000mL,pH7.4~7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g,KNO₃ 1g,NaCl 0.5g,K2HPO4•3H2O 0.5g,MgSO4•7H2O0.5g,FeSO4•7H2O0.01g•水1000mL•pH7.4~7.6。
配制时注意:可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏(Martin)培养基(用于从土壤中分离真菌)K2HPO 41g,MgSO4•7H2O 0.5g,蛋白胨 5g,葡萄糖 10g,1/3000孟加拉红水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55~60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮) 200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:将马铃署去皮,切成约2cm²的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g,NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4•7H2O 0.5g,KCl 0.5g,FeSO4•7H2O 0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液) 1000mL,蛋白胨 10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶 70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上) 0.5mL,以上混合后倾注平板。
146种常见培养基的配方
146种常见培养基的配方培养基是微生物学实验中常用的一种重要实验工具,通过调配合适的培养基,可以提供微生物生长所需的营养物质,从而促进微生物菌落的繁殖和生长。
下面将介绍一些常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
1.琼脂肉汤培养基(NB)-牛肉脱脂粉5g-酵母提取物2.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml2.大肠杆菌复合培养基(LB)-液体培养基-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g- 蒸馏水 1000ml-琼脂板-蛋白胨10g-酵母提取物5g-NaCl5g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml3. 肠杆菌选择性琼脂培养基(MacConkey琼脂培养基)-蛋白胨17g-紫胆汁盐1.5g-普鲁士蓝盐1.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml4. 脱氧胆盐琼脂培养基(Deoxycholate Agar)-脱氧胆酸钠20g-普鲁士蓝盐0.8g-蛋白胨7.5g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml5.阿米巴选择性琼脂培养基(KV培养基)- 鸡蛋清 20ml- 中性红溶液 12ml-NaCl0.5g-纤维素0.25g- 盐酸 1ml-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml6. 革兰氏阳性菌选择性琼脂培养基(Mannitol Salt Agar)-蔗糖10g-氯化钠75g-酵母提取物5g-麦芽提取物1g-琼脂15g- 蒸馏水 1000ml7. 维生素富集琼脂培养基(Burkholder's Basal Salt Medium)-NaNO31g-KCl0.5g-MgSO4·7H2O0.2g-CaCl2·2H2O0.02g-FeSO4·7H2O0.01g-琼脂14g- 蒸馏水 1000ml8. 三氯化铁琼脂培养基(Cetrimide Agar)-硫酸镁0.8g-氯化钴0.05g-氯化锌0.01g-氯化亚铁0.03g-三氯化铁0.03g-比色琼脂糖15g- 过滤蒸馏水 1000ml9. 库氏四甲基铵琼脂培养基(Chapman Agar)-高氯酸钠5g-脲7.5g-酵母提取物2g-海藻酸钠20g-紫胆汁盐0.25g-琼脂12g- 蒸馏水 1000ml10. 还原格兰氏琼脂培养基(Reduced Gram-negative Broth)-蛋氨酸0.5g-异亮氨酸0.5g-半胱氨酸0.5g-菜碱0.5g-胀氨酸0.5g-琼脂7g- 蒸馏水 1000ml这些是其中的一部分常见的培养基配方,涵盖了常用的总结培养基、选择性培养基和不同微生物类群的专用培养基。
各种培养基的配方
各种培养基的配方培养基是一种用于微生物培养和研究的营养物质。
不同类型的微生物需要特定的培养基来满足其营养需求和生长条件。
下面是一些常见的培养基的配方及其用途。
1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)- 水:1000ml-细胞营养素(肉膏、豌豆、蛋黄等):5g-NaCl:5g-琼脂:15g用途:通用的培养基,可满足大部分微生物的营养需求。
2. 大肠杆菌培养基(Luria-Bertani Agar)- 水:1000ml-酵母提取物:10g-大肠杆菌提取物:10g-NaCl:5g-琼脂:15g用途:专门用于大肠杆菌的培养。
3. MacConkey琼脂培养基- 水:1000ml-胆盐蓝:20g-肉薄粉:1g-蔗糖:20g-酵母提取物:3g-紫罗兰化合物:0.04g-琼脂:15g用途:用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性杆菌。
4. Sabouraud琼脂培养基- 水:1000ml-蔗糖:40g-蛋白胨:10g-硫酸镁:5g-纯净琼脂:20g用途:用于真菌的培养。
5.MRS培养基- 水:1000ml-葡萄糖:10g-柠檬酸:5g-蛋白胨:10g-亚硝酸钠:0.5g-丙酮酸:2g-磷酸二氢钾:2g-琼脂:20g用途:用于乳酸菌的培养。
6. 铺洒琼脂培养基(Spread Plate Agar)- 水:1000ml-蛋白胨:10g-蔗糖:10g-胆盐蓝:0.05g-琼脂:15g用途:用于微生物计数。
7. Tryptic Soy Agar(TSA)- 水:1000ml-维生素B混合物:1g-卵黄酯:1g-蛋白胨:15g-酵母提取物:5g-琼脂:15g用途:通用的培养基,适用于多种微生物的培养。
这些培养基的配方只是一些常见示例,实际上有许多其他种类的培养基可根据不同微生物的需要进行调整和定制。
合理选择和配制培养基是成功进行微生物培养和研究的重要一步。
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微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分:牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL,121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。
三、5%乳糖发酵管成分:蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121 ℃ 15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL ,121℃高压灭菌15min。
甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。
鲜红色为阳性,黄色为阴性,甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20 mL蒸馏水。
V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d。
哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养。
加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管,观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。
五、营养明胶成分:蛋白胨 5g牛肉膏 3g明胶 120g蒸馏水 1000mLpH 6.8~7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固,复查最终pH应为6.8~7.0。
用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间。
或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。
六、苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏 3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠 1g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面。
自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36士1℃培养4h或18~24h,滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。
七、蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min。
靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml。
欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内,然后缓慢加入浓盐酸20 ml。
试验方法:挑取小量培养物接种,在36士1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d。
加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。
蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。
每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。
八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏 3g酵母浸膏 3g蛋白胨 10g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000 mL制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固。
挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36士1℃培养1~2d,观察结果。
产硫化氢者使培养基变为黑色。
肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基。
九、尿素琼脂成分:蛋白胨 1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾 2g4%酚红溶液 3 mL琼脂 20g蒸馏水 1000 mL20%尿素溶液 100mL制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶。
121℃高压灭菌15min。
冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用。
挑取琼脂培养物接种,在36士1℃培养24h,观察结果。
尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。
十、氰化钾(KCN)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠 5g磷酸二氢钾 0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水 1000 mL0.5%氰化钾溶液 20 mLpH 7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
放在冰箱内使其充分冷却。
每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm*100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月。
同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。
十一、营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4。
加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。
此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。
如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。
十二、营养肉汤成分:蛋白胨 10g牛肉膏 3g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL ,121℃高压灭菌15min。
十三、缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨 10g氯化钠 5g磷酸氢二钠 9g磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水1000mLpH 7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。
临用时无菌分装每瓶225mL。
注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。
本培养基供沙门氏菌前增菌用。
十四、EC肉汤成分:胰蛋白胨 20g3号胆盐(或混合胆盐)1.5g乳糖 5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min。
最终pH为6.9±0.2。
十五、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基多胨或眎胨 5g胆盐 1g碳酸钙 10g硫代硫酸钠 3g蒸馏水 1000mL碘溶液碘 6g碘化钾 5g蒸馏水 20 mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。
分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀,121℃高压灭菌15min备用。
临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,,0.1%煌绿溶液1mL。
十六、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨 5g乳糖 4g亚硒酸氢钠 4g磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾 4.5gL-胱氨酸 0.01g蒸馏水 1000mL1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成。
制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷备用。
另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合。
再加入1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL。
分装于灭菌瓶中.每瓶100mL,pH应为7.0±0.1。
十七、亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨 10g牛肉膏 5g葡萄糖 5g硫酸亚铁 0.3g磷酸氢二钠 4g煌绿 0.025g柠檬酸铋铵 2g亚硫酸钠 6g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mLpH 7.5制法:1.将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。
2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。
3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃。
4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀,冷至50~55℃,倾注平皿。
此培养基不需高压灭菌。
制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性。
应在临用前一天制备,贮存于室温暗处,超过48h 不宜使用。
十八、三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨 20g牛肉膏 5g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁铵 0.2g硫代硫酸钠 0.2g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000 mLpH 7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。
加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管。
装量宜多些,以便得到较高的底层。
121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
十九、三糖铁琼脂换用方法成分:蛋白胨15g眎胨5g牛肉膏 3g酵母膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g葡萄糖 1g氯化钠 5g硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠 0.3g琼脂 12g酚红 0.025g蒸馏水 1000 mLpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。
加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。
121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。
二十、嗜盐性试验培养基成分:蛋白胨2g氯化钠按不同量加蒸馏水100 mLpH7.7制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。
每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。
待溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min。