给学生《微生物遗传育种学》复习思考题1

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0710009_微生物育种学课后习题答案

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0710009_微⽣物育种学课后习题答案《微⽣物遗传育种》复习思考题01 绪论1、⼯业微⽣物菌种应具有哪些基本特征?①纯种;②遗传稳定;③易⽣长发育繁殖;④抗杂菌能⼒强;⑤对诱变剂敏感;⑥⽣产产物品质好、产量⾼、产出快。

02 第四章⼯业微⽣物育种诱变剂1.紫外线诱变育种的作⽤机制及步骤。

紫外线的光谱范围为40~390nm,其中有效的诱变波长为200~300nm,DNA 吸收峰值在254nm处,此时诱变效果最好。

UV 诱变的主要原因是单链相邻碱基或双链间形成嘧啶⼆聚体。

单链TT⼆聚体易造成复制在该处停⽌或碱基错误插⼊该缺⼝形成突变;双链间TT⼆聚体交联,减弱双键间氢键的作⽤,并引起双链结构扭曲变形,阻碍双链分开,使复制⽆法进⾏。

最终引起碱基置换、缺失或移码。

A和T的⽐例越⾼,对紫外线就越敏感。

步骤:①出发菌株;②前培养(加酵母膏等,⽬的是培养细菌到对数期;霉菌、放线菌孢⼦刚萌发);③制备菌菌悬液;④紫外线照射;⑤后培养(加⾊氨酸、异烟肼等,⽬的是抑制修复、减少死亡、促进正突变体增殖);⑥稀释涂⽫。

紫外辐射剂量:绝对剂量单位erg/mm2,要剂量仪测定,较⿇烦;相对剂量单位⽤照射时间或杀菌率表⽰,⼀般认为以杀菌率90%~99.9%较好。

15W紫外灯波长集中在253.7nm,诱变效果⽐30W的好。

2.突变后其基因型是否会很快表现?为什么?表型延迟2代以上,原因有:1、与诱变剂性质和细胞壁结构组成有关;2、当突变发⽣在多核细胞中的某⼀个核,该细胞就成为杂核细胞了;3、原有基因产物的影响。

(产⽣原因:①分离性迟延现象②⽣理性迟延现象)3.物理诱变剂主要有哪⼏类?请举例?紫外线,X射线,γ射线,快中⼦,α射线,β射线,微波,超声波,电磁波,激光射线和宇宙射线等。

4.化学诱变剂主要有⼏⼤类?碱基类似物;脱氨剂;烷化剂;羟化剂;⾦属盐类;吖啶类;秋⽔仙碱等。

5、使⽤化学诱变剂时需要注意什么?1.诱变剂量:主要取决于化学诱变剂浓度和处理时间,化学诱变使⽤剂量要以诱变效应⼤,⽽副反应⼩为原则。

微生物遗传育种作业(需要自己整理答案)

微生物遗传育种作业(需要自己整理答案)

《微生物遗传育种》试题1.基因发生移码突变后,基因编码的蛋白质一般是变得更长还是更短,为什么?不变或变短,当DNA进行复制时,就会造成多出一个或几个碱基,或少了一个或几个碱基而引起移码突变,但移码的时候最后可能剩下最后一个密码子的残余部分无法翻译。

如果是插入导致移码则增加的插入碱基和最后残余的一个无法翻译的碱基抵消,总长度不变。

如果是缺失突变则最后一个密码子缺少碱基无法翻译。

2.试述紫外诱变筛选Ecoil str r突变株的一般步骤,并说明主要步骤的目的及其注意事项。

抗药性突变型(resistant mutant)特点:基因突变使菌株对某种或某几种药物,特别是抗生素,产生抗性。

正选择标记表示方法:所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示str r表示对链霉素的抗性1、物理诱变:紫外线1)紫外线诱变机理:造成DNA链的断裂,或使DNA分子内或分子之间发生交联反应2)诱变过程中需要注意光复活作用:微生物等生物的细胞内存在光复活酶,光复活酶识别胸腺嘧啶二聚体,并与之结合形成复合物(此时的光复活酶没有活性),可见光光能(300-500nm)激活光复活打开二聚体,将DNA复原。

暗修复:细胞内还存在另一种修复体系,它不需要光激活,可修复由紫外线、γ射线和烷化剂等对DNA造成的损伤。

暗修复体系有四种酶参与反应。

紫外诱变的特点:方便、诱变效果很好的常用诱变剂由此说明紫外线照射引起微生物突体形成是一个复杂的生物学过程。

紫外线引起DNA结构的改变仅仅使微生物,于亚稳定状态,点亚稳定到稳定的突变体的形成需要“定时间和过程,所以在实际诱变工作中要采取某些措施避免以上的修复作用,要注意避光或加入某些物质,提高突变的频率。

因此,用紫外线进行诱变时,照射或分离均应在红光下进行。

初筛的目的:以多为主,尽量扩大筛选范围。

是将大多数未变异菌株或负变菌株去除,这时解决的主要是量的问题,因此每株菌培养时一般只在一种培养条件下培养一瓶;培养条件一般沿用出发菌株的培养条件,分析方法也选用适于处理大量样本的、操作简便而快速的方法。

微生物遗传育种试题库

微生物遗传育种试题库

C. 转 导 前 供 体 菌 D. 转 导 后 受 体 菌 答:( ) 18.以 下 不 是 专 性 转 导 特 点 的 是: A. 必 须 是 原 噬 菌 体 状 态 B. 供 体 细 胞 中 的 任 何 染 色 体 基 因 片 段 都 有 机 会 被 转 移 到 受
体细胞中 C. 通 常 包 括 了 一 个 基 因 如 半 乳 糖 (gal) 基 因 的 重 组 D. 原 噬 菌 体 转 导 导 致 噬 菌 体 某 些 基Leabharlann 因 留 在 了 细 菌 的 基 因 组
26.在 性 转 导 中,下 列 正 确 的 说 法 是: A. 基 因 交 换 通 常 发 生 在 Hfr 和 F- 细 胞 之 间 B. 与 F 因 子 相 邻 的 染 色 体 基 因 被 转 移 到 F- 细 胞 中 C. F 因 子 通 常 被 插 入 到 F- 细 胞 中 的 染 色 体 上 D. 如 果 杂 交 被 中 断, 则 只 有 F 因 子 全 部 转 入 F- 中 答:( )
A. 青 霉 素 B. 紫 外 线 C. 丫 啶 类 染 料 D. 转 座 子 答:( ) 10. 在 大 肠 杆 菌 (E.coli) 的 乳 糖 操 纵 子 中 , 基 因 调 节 主 要 发 生 在 __________ 水 平 上。 A. 转 化 B. 转 导 C. 转 录 D. 翻 译 答:( ) 11.转 座 子 ___________。 A. 能 从 DNA 分 子 的 一 个 位 点 转 移 到 另 一 个 位 点 B. 是 一 种 特 殊 类 型 的 质 粒 C. 是 一 种 碱 基 类 似 物 D. 可 引 起 嘌 呤 和 嘧 啶 的 化 学 修 饰 答:( ) 12.当 F+×F- 杂 交 时 A. F 因 子 几 乎 总 不 转 移 到 F+ 细 胞 中 B. F- 菌 株 几 乎 总 是 成 为 F+ C. 基 因 重 组 的 发 生 频 率 较 高 D. F 因 子 经 常 插 入 到 F- 细 胞 染 色 体 上 答:( ) 13.在 U 形 玻 璃 管 中,将 一 滤 片 置 于 二 株 菌 之 间 使 之 不 能 接 触,在 左 臂 发 现 有 原 养 型 菌 出 现, 这 一 现 象 不 是 由 于: A. 接 合 B. 转 化 C. 普 遍 转 导 D. 专 性 转 导 答:( ) 14.F 因 子 和 λ 噬 菌 体 是: A. 与 寄 主 的 生 活 能 力 无 关 B. 对 寄 主 致 死 C. 与 染 色 体 重 组 后 才 可 复 制 D. 仅 由 感 受 态 细 胞 携 带 答:( ) 15.细 菌 以 转 化 方 式 进 行 基 因 转 移 时 有 以 下 特 性: A. 大 量 供 体 细 胞 的 基 因 被 转 移 B. 包 含 有 F 质 粒 参 加 C. 依 靠 噬 菌 体 感 染 受 体 细 胞 D. 可 通 过 从 供 体 细 胞 中 提 取 DNA 片 段 来 完 成 答:( ) 16.一 个 大 肠 杆 菌 (E.coli) 的 突 变 株, 不 同 于 野 生 型 菌 株, 它 不 能 合 成 精 氨 酸, 这 一 突 变 株 称 为: A. 营 养 缺 陷 型 B. 温 度 依 赖 型 C. 原 养 型 D. 抗 性 突 变 型 答:( ) 17.转 导 子 是 指: A. 供 体 菌 B. 转 导 噬 菌 体

《微生物遗传育种学》复习题A专升本

《微生物遗传育种学》复习题A专升本

《微生物遗传育种学》复习题A(专升本)一、填空题1、工业微生物菌种的五大基本特征为:非致病性;;利于应用规模化产品加工工艺;;形成具有商业价值的产品或具有商业应用价值。

2、复制型转座涉及到两种酶:一是,作用在原来转座子的末端;二是,它作用在重复的拷贝上。

3、大肠杆菌的RecA蛋白在DNA 复制和损伤修复中共行使三种功能,即、和。

4、表达载体的四大结构要素:多克隆位点、、和。

5、反转录病毒RNA基因组是,因此反转录病毒具有二倍体基因组。

6、λ噬菌体侵入宿主细胞后5分钟内环化,环状DNA分子先进行复制,产生约20个DNA分子,约16分钟后进行复制产生多连体分子。

7、基因组序列的功能分析以及代谢途径的构建改造等都需要克隆目的 DNA,目前,获得大片段 DNA 序列的方法主要有:构建和筛选基因文库、PCR 扩增、、体外大片段 DNA 合成和组装,以及等方法。

二、判断题1、假基因是一段DNA序列,与正常基因相似,但丧失相应的正常功能。

2、R/M体系:即限制与修饰体系,用于保护外源DNA在细胞内稳定存在。

3、原核生物遗传物质复制时,需要多种酶参与,可形成灵活的多种相关酶的复合体结构。

4、DNA的碱基配对时,氨式的A和酮式的T配对,氨式的A异构化为亚氨式时和氨式的C配对。

5、在微生物工业应用中,微生物菌种工作主要包括以下四方面:菌种的分离筛选、菌种培育、菌种的保藏和退化菌种的复壮。

6、细菌染色体DNA 为环状形式,而真核生物中没有环状DNA。

7、目前发现的质粒都是cccDNA。

8、DNA结合蛋白常含有HTH结构。

9、Bam HI的酶切位点为G↓GATCC,Bgl II的酶切位点为A↓GATCT,所以可判断两者为同尾酶。

10、反义RNA指的是可以编码出目的蛋白的一段RNA序列。

三、名词解释1、反向代谢工程2、Z-DNA3、严谨反应4、基因的回复突变5、操纵子6、自主转移质粒7、呼吸现象四、简答题1、T4噬菌体末端冗余ab的亲本病毒是怎样产生cd、de、ef等末端冗余的子代的?2、简述切除修复的流程。

种子生物学复习思考题

种子生物学复习思考题

种子生物学复习思考题(必考题)1、论述影响种子化学成分的内在、外在因素?答:1.内部因素:作物的遗传特性及种子的成熟度或饱满度是影响化学成分的内部因素。

其中,遗传性是最重要的影响因素。

品种间化学成分的差异在较大程度上取决于种子化学成分的可遗传性。

因此即使是同一作物的种子,品种间化学成分的差异也很悬殊。

通过遗传育种的手段可以选育到其化学成分合乎理想的品种,这也是目前品质育种的常用技术。

种子的成熟度在一定程度上也决定了其化学成分的含量存在一定的差异。

成熟不充分的种子其可溶性糖、非蛋白质态氮的含量较高;而成熟度越好的种子,由于胚乳和子叶的蛋白体是随着种子的成熟度而增多的,种子中贮藏的蛋白质的含量和比例越高,种子的干重越高,角质率也越高。

此外,饱满度不同的种子,各部分所占的比例有一定程度变动,化学成分也就有差异。

饱满种子麸皮的比率较低,胚乳所占的比率相对较高;而不饱满的种子一般尚未充分成熟或者因环境条件不良而导致胚乳中的营养物质未充分积累,因此,一般和谷类的不饱满种子,其淀粉、油分含量较低,而纤维素和矿物质等含量则较高。

2.外部因素:影响种子化学成分的外部因素,主要是成熟期间的气候条件和土壤条件。

种子发育、成熟期间的温度、湿度以及土壤含水量等气候条件,对种子的化学成分也有较大的影响,约占变异的14%,这是导致相同作物或相同品种在不同地区、不同年份差异的主要原因。

除了湿度和温度外,土壤的营养状况对种子化学成分也有很大的影响。

一般来讲,植物生长必需的诸多元素对种子化学成分均有不同的影响,但是,其中影响最大的是氮素。

氮素水平直接影响种子中的蛋白质的含量。

适时合理的氮素供应,会达到既高产蛋白质含量又高的生产目的。

如果在植物的生长发育初期供氮充足而抽穗到种子成熟期供氮不足,则可能导致高产而蛋白质含量低;如果植株的生长发育前期供氮不足而种子发育成熟期供氮充足,则可能会导致低产而蛋白质含量高。

磷素、钾素和氮素共同构成作物营养的三大要素。

微生物遗传与分子生物学思考题

微生物遗传与分子生物学思考题

思考题:第一章绪论1.微生物基因突变一般分几种类型,突变有什么生物学意义?基因突变可从突变发生方式和突变引起的表型改变等方面进行分类。

根据突变体表性特征不同,可分为以下四类:(1)形态突变型:细胞形态变化或引起菌落形态改变的突变型。

如失去产孢、荚膜和鞭毛的能力;(2)生化突变型:无形态效应的突变型。

最常见的为营养缺陷型,由于代谢过程的缺陷而成为必须添加某种营养物质才能生长的突变型。

对抗生素增加耐性的抗性突变等都属于生化突变。

(3)致死突变:由于突变造成个体死亡或生活力下降的突变型。

(4)条件致死突变:突变体只在一定条件下因发生基因突变而死亡。

典型是温度敏感突变。

按突变引起的遗传信息改变进行分类:(1)错义突变:突变导致氨基酸发生变化(2)同义突变:碱基突变后编码的氨基酸与野生型相同(3)无义突变:碱基突变为终止密码子,蛋白合成终止。

根据遗传物质结构改变进行分类:(1)碱基置换:突变导致碱基发生变化(2)移码:在基因的编码区,碱基的插入或缺失引起阅读框的变化和翻译产物的改变。

(3)DNA片段插入和缺失:部分序列插入或缺失。

根据突变发生的方式分类:(1)自发突变:自然发生的基因突变,如在DNA复制过程中,由于碱基的错误配对和环出效应(DNA序列中存在重复碱基序列,在DNA复制过程中,DNA链发生错误配对,引起DNA碱基缺失)导致的。

(2)诱发突变:通过物理、化学和生物等外部因子处理,使DNA结构发生改变。

突变的意义:环境不断地变化,唯适者生存。

基因突变导致基因表达出的性状发生改变,能更好适应环境的个体将会生存下来。

因此可以说,突变是生物进化的内因,是进化的主要动力。

基因突变是新基因产生的途径,是生物变异的根本来源,是生物进化的原始材料。

第二章1.链霉菌信号分子有哪几种类型,GBL类型的信号分子在抗生素生物合成中如何发挥其功能?根据结构可将链霉菌信号分子分为六类:含有γ-丁酸内酯呋喃环结构的GBL家族、PI 因子、MMF、丁烯醇结构的avenolide和SRB以及二酮哌嗪类化合物。

微生物遗传育种(1)

微生物遗传育种(1)

微生物遗传育种答案第一章微生物的遗传物质一、名词1 转化: 指一种生物由于接受了另一种生物的遗传物质而发生遗传性状的改变2 cccDNA——共价、闭合、环状DNA3 复制子:指能独立进行复制的DNA部分, 一个复制子包括复制起点及其复制区4 启动子(promoter)——是位于结构基因5’端,启始结构基因转录的DNA顺序。

它决定转录的准确启始,并与转录效率有关。

5 Pribnow框(Pribnow box): 又称-10区或Rc区,与核心酶结合的位置,一致顺序:TATPuA二、问题1证明核酸是遗传物质有哪些实验证据答:肺炎双球菌的转化实验和噬菌体的侵染实验证明DNA为遗传物质。

烟草花叶病毒的遗传物质的发现及重组实验证明RNA也是遗传物质。

2 1928年, F Griffith 发现转化现象的过程答:肺炎双球菌野生型,有毒力菌落光滑产荚膜为S型;突变型无毒力菌落粗糙无荚膜为R 型,然而讲加热杀死的S型细菌与R型细菌混合培养,能分离得到S型细菌,说明加热杀死的S型菌中存在能将R型菌转化为S型菌的因子。

3 1944年,Avery证明DNA是遗传物质的过程答:Avery他们从S型细菌细胞物质中抽提并纯化出转化因子,将它用多种蛋白水解酶处理后,并不影响转化效果,如果用脱氧核糖核酸酶去处理则转化消失,从而直接证明了转化因子是DNA.四、选择题:1 E.coli含有一个cccDNA,约编码2000个基因。

2 E.coli的基因组测序1997年完成,E.coli cccDNA 有基因4.6×106 bp,含4288个基因第二章基因突变和损伤DNA的修复一、名词1基因突变(gene mutation) : 是指基因的分子结构(核苷酸顺序)的改变1.形态突变——可见突变2.生化突变:指没有形态效应的突变(去年考题)3.致死突变:指引起个体死亡或生活力下降的突变4.条件致死突变:指在某些条件下能成活, 而在另一些条件下是致死的突变二、问题1根据突变对表型的效应,基因突变分为哪些类型?(去年考题)答:1形态突变:肉眼可见,即有关形状、大小、生育状态、颜色、颜色分布等表型变化的突变;2:生化突变:没有形态:指没有形态效应的突变;3致死突变:引起个体死亡或活力下降的突变4:条件致死突变:指在某些条件下能成活而在另一些条件下是致死的突变。

微生物学复习思考题

微生物学复习思考题

微⽣物学复习思考题《微⽣物学》复习思考题第1章绪论1.名词解释:微⽣物,微⽣物学2.⽤具体事例说明⼈类与微⽣物的关系。

3.微⽣物包括哪些类群?它有哪些特点?4.为什么说巴斯德和柯赫是微⽣物学的奠基⼈?5.试根据微⽣物的特点,谈谈为什么说微⽣物既是⼈类的敌⼈,更是⼈类的朋友?6.简述21世纪微⽣物学发展的主要趋势。

第2章原核微⽣物1.名词解释:肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞2.根据⾰兰⽒阳性细菌与⾰兰⽒阴性细菌细胞壁通透性来说明⾰兰⽒染⾊的机制。

3.什么是芽孢?它在什么时候形成?试从其特殊的结构与成分说明芽孢的抗逆性。

渗透调节⽪层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的?4.⽴克次⽒体有哪些与专性活细胞内寄⽣有关的特性?它们有什么特殊的⽣活⽅式?⾐原体与⽴克次⽒体都为专性活细胞内寄⽣,两者有何差别?5.螺旋体和螺旋菌有何不同?6.什么是缺壁细菌?试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。

7.举例说明细菌的属名和种名。

8.试述古⽣菌和细菌的主要区别。

9.试根据细菌和古⽣菌细胞结构的特点,分析并举例说明为什么它们能在⾃然界中分布泛。

10.细菌(狭义)、放线菌、霉菌、酵母在繁殖⽅式上各有什么特点?第三章真核微⽣物1.名词解释:真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。

2.举例说明霉菌与酵母菌与⼈类的关系。

3.试列表说明真核微⽣物与原核微⽣物的主要区别。

4.试图⽰真核⽣物“9+2型”鞭⽑的横切⾯构造,并简述其运动机理。

5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同?6.试⽐较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并讨论它们的原⽣质体的制备⽅法。

7.丝状真菌的营养菌丝和⽓⽣菌丝各有何特点?它们可以分化出哪些特殊结构?8.试述真菌的孢⼦类型和特点。

第4章病毒1. 名词解释:病毒粒⼦、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、裂解量、类病毒、朊病毒。

2. 病毒区别于其他⽣物的特点是什么? 根据你的理解,病毒应如何定义?3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。

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《微生物遗传育种》复习思考题01 绪论1、工业微生物菌种应具有哪些基本特征?非致病性;适合大规模培养工艺要求;利于规模化产品加工工艺;具有相对稳定的遗传性能和生产性状;形成具有商业价值的产品或具有商业应用价值。

2、简述工业微生物遗传育种的分类。

天然菌种(native strain):通过自然筛选和分离获得的工业菌种;诱变菌种(mutagenized strain):通过物理、化学等诱变剂在实验室人工诱变自然筛选与分离的菌株所获得产量或/和性状改善的工业菌种;重组菌种(recombinant strain)是通过遗传重组技术对菌种进行定向遗传改良获得的工业菌种;遗传修饰生物体(genetic modification organisms, GMOs):经外源基因导入并因此发生遗传整合和性状改变的生物体。

3、试从微生物遗传学的不同角度阐述你对微生物多样性的认识。

一、微生物物种的多样性; 二、微生物遗传的多样性;三、微生物代谢的多样性 ;四、微生物的生态多样性;五、微生物利用的广泛性02 第四章工业微生物育种诱变剂1、什么是诱变剂?可分为哪几种类型?诱变剂:凡能诱发生物基因突变,并且突变频率远远超过自发突变率的物理因子或化学物质.可以分为三类:物理诱变剂;化学诱变剂:一类能对DNA起作用,改变DNA结构,并引起遗传变异的化学物质;生物诱变剂:采用某些噬菌体来筛选抗噬菌体突变菌株时,常常发现伴随着出现抗生素产量明显提高的抗性突变株。

因此,可以认为这些溶源性噬菌体是一种生物诱变剂。

2、什么是突变?突变的表现型有哪些?基因突变的特点有哪些?突变,从广义上讲,除了转化、转导、接合等遗传物质的传递和重组引起生物变异以外,任何表型上可遗传的突变都属突变范围,如染色体整倍性和非整倍性的变化及染色体结构上的畸变等都包括在内。

1、形态突变型,是一种可见突变,它包括微生物菌落形态变化,如菌落形状大小、颜色、表面结构等;2、生化突变型,;3、条件致死突变型;4、致死突变型;5、抗性突变型;6、营养缺陷型;普遍性;随机性(基因突变可以发生在生物个体发育的任何时期和生物体的任何细胞。

突变发生的时期越早,表现突变的部分越多,突变发生的时期越晚,表现突变的部分越少。

);突变率低;多数有害;不定向性(一个基因可以向不同的方向发生突变,产生一个以上的等位基因。

3、突变后其基因型是否会很快表现?为什么?变基因的出现并不意味着突变表型的出现,表型的改变落后于基因型的改变,即表型延迟,微生物通过自发突变或人工诱变而产生新的基因型个体所表现出来的遗传特性不能在当代出现,其表型的出现必须经过2代以上的繁殖复制。

表现延迟的原因有:1、与诱变剂性质和细胞壁结构组成有关;2、当突变发生在多核细胞中的某一个核,该细胞就成为杂核细胞了;3、原有基因产物的影响。

(产生原因:①分离性迟延现象②生理性迟延现象)4、物理诱变剂主要有哪几类?请举例?物理诱变剂包括:紫外线,X射线,γ射线,快中子,α射线,β射线,微波,超声波,电磁波,激光射线和宇宙射线等5、化学诱变剂主要有几大类?碱基类似物;烷化剂;脱氨剂;移码诱变剂;羟化剂;金属盐类;其他化学诱变剂6、使用化学诱变剂时需要注意什么?、在进行化学诱变处理时,控制使用剂量要以诱变效应大,而副反应小为原则。

处理时的温度对诱变效应也有一定影响。

绝大多数化学诱变剂都具有毒性,其中90%以上是致癌物质或极毒药品,使用时要格外小心,不能直接用口吸,避免与皮肤直接接触,不仅要注意自身安全防止污染环境,造成公害。

7、根据你所学的诱发突变的知识,你认为能否找到一种仅仅对某一基因具有特异性诱变作用的化学诱变剂?为什么?不能找到具有特异性诱变作用的化学诱变剂,因为对于一般的化学诱变剂:碱基类似物、碱基修饰剂、移码突变剂,均不具有特异性。

诱变的特异性是靠识别碱基对来进行的,而任一个基因都不可能有完全特异的碱基对供识别。

突变是随机性的。

因为从分子生物学的角度来看,所有的基因都是存在于DNA双链中,基因的信息都存在于由ATCG碱基对的排列顺序中。

即使有某些物质可以特异的识别某几个碱基的排列顺序,但这种排列也存在于其他基因之中,诱变是在整个基因组范围内发生的。

所以从现有的科研水平来看,不存在有特异性的理化诱变剂。

现在对基因的诱变可以通过传统的遗传学方法实现,可以构建带有诱变位点的基因载体,转入生物体中,达到特异诱变的目的。

8、表现延迟:微生物通过自发突变或人工诱变而产生新的基因型个体所表现出来的遗传特性不能在当代出现,其表型的出现必须经过2代以上的繁殖复制。

03 第五章菌种分离筛选1、工业微生物的来源?1、向菌种保藏机构索取有关菌株,从中筛选所需菌株;2、由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等,从中进行分离筛选;3、从一些发酵制品中分离目的菌株。

2、从土壤中筛选微生物时,采样应该注意一些什么问题?根据土壤特点:1、土壤有机质含量和通气情况;2、土壤酸碱度和植被状况;3、地理条件;4、季节条件;采样方法:用取样铲,将表层5cm左右的浮土除去,取5-25cm处的土样10-25g,装入事先准备好的塑料袋内扎好。

3、什么叫富集培养?是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株。

4、纯种分离的方法有哪些?简述菌种分离和筛选的步骤。

纯种分离通常采用梯度稀释涂布法和划线法。

划线法是用接种针挑取微生物样品在培养基上直接划线(一般采用梯度划线法),培养后获得单菌落。

划线法简便、快速,但所得到的单菌落不一定是纯种(可采用多次转接划线加以弥补)。

稀释法是先将样品经无菌水或灭菌生理盐水梯度稀释后,再涂布到固体培养基上,培养后获得单菌落。

稀释法使微生物样品分散更加均匀,获得纯种的概率更大。

通过控制营养和培养条件进行纯种分离:一般都采用筛选性平板辅以筛选性培养条件(1)控制分离培养基中的营养成分(碳氮源)(2)控制培养基的pH值(采用缓冲体系)(3)控制培养温度(嗜热性、大类特性如细菌35,霉菌27度)(4)供氧条件的控制(厌好氧)利用生化反应进行分离(初步分离):根据目的微生物的特殊生理特性或其代谢产物的生化反应进行设计。

常用方法:(1)透明圈法(培养基浑浊)(2)变色圈法(指示剂或显色剂)(3)生长圈法(采用营养缺陷菌作为指示)(4)抑菌圈法(抗生素敏感菌作为指示)可分为采样、富集、分离、产物鉴别几个步骤。

04 第六章微生物诱变育种1、用野生型的大肠杆菌为出发菌株,可用哪种诱变剂怎样进行诱变得到Leu-突变株,如何检出和鉴定该突变株?1。

先要获得野生型大肠杆菌的纯培养物2。

诱变:可以选择各种诱变法,如紫外线诱变法,将一定浓度的菌液(可分成好几等分分别做实验)放在一定强度的紫外灯下照射,那分成的几等分可以分别照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太浓,这个操作应该在黑暗的条件下进行,只允许有紫外光,以免光修复造成突变失败。

3.培养:将上述菌种分别涂抹在配好的完全培养基上(牛肉膏-蛋白胨培养基),倒置培养过夜4,筛选:配置好基本培养基,再往上面添加一定浓度的氨基酸营养液,除了不要添加你说要得到的营养缺陷的那种氨基酸,必需氨基酸都要添加,再用影印法将3中的菌落印到这些培养基上,倒置培养过夜。

5。

挑取:直接挑取4中培养基上的菌落,就是你要找的氨基酸营养缺陷突变菌株在2中,之所以要分成好几份做,再以不同时间长短去照射,是为了加大筛选的效率时间过短,可能得不到想要的突变菌种,而时间过长,菌株全死,也得不到想要的菌株,所以这样做也可以算是一个试验性的步骤!2、诱变育种工作中如何制备菌悬液?在诱变育种中,所处理的细胞必须是单细胞的均匀悬液状态。

原因:1、分散状态的单细胞可以均匀地接触诱变剂;2、可避免长出不纯菌落。

菌悬液由出发菌株的孢子或菌体细胞用生理盐水或缓冲液制备而成,其质量将直接影响诱变效果。

1、供试菌株的孢子或菌体要年轻、健壮;2、菌悬液制备方法:细菌经20h-24h培养的新鲜斜面,移接到盛有基本培养基的三角瓶中,于35-37℃振荡培养到对数期,在于6℃培养1h 使之同步生长,然后加入一定密度的嘧啶、嘌呤或酵母膏,继续振荡培养20-60min。

置于低温10min,离心洗涤,用冷生理盐水或缓冲液制备菌悬液,放在盛有玻璃珠的三角瓶内振荡10min,令其分散,用无菌脱脂棉或滤纸过滤。

通过菌体计数,调整菌悬液的浓度供诱变处理。

3、根据突变的光复活修复作用、原理,你认为在进行紫外线诱变处理时,应注意什么?为了使被诱变的细胞能均匀地受到紫外线照射,你将如何做?①必须在暗室或红光下进行,并且不能马上进行光照射②照射距离要合适,不能太远,否则达不到诱变作用,也不能太近,否则菌体会死③照射时间要恰当④紫外灯的功能要适宜。

在紫外线照射时,盛菌液的培养皿应置于磁力搅拌器上,边照射边搅拌使细胞能均匀受到紫外线照射。

4、紫外线引起的胸腺嘧啶二聚体对微生物有何影响?哪些修复系统可对此进行修复,其结果如何?微生物在正常情况下进行DNA复制时,首先DNA双链解开成为单链,然后两条单链各自与细胞内游离的碱基互补配对形成新链。

如果此时双链之间有嘧啶二聚体存在,则因二聚体的交联作用,阻碍双链分开,复制到此处就无法进行下去,造成DNA异常状态。

如果在一条单链上出现嘧啶二聚体,则会影响复制过程碱基的正常配对。

在正常情况下T与A配对,若二聚体形成,就要破坏A的正常掺入,复制就会在这一点突变停止或错误进行,以致在新形成的链上有了一个改变了的碱基序列。

有光修复、切补修复、重组修复、SOS修复系统。

还有聚合酶的校正作用。

光修复、是一种高度专一的修复方式,只作用由紫外线引起的DNA嘧啶二聚体的修复切补修复、发生在DNA复制之前,是对模板的修复,如大肠杆菌的Uvr修复系统,负责切除大量的胸腺嘧啶二聚体。

重组修复、不将损伤碱基除去,而是通过复制后,经染色体交换,使子链上的空隙部位不再正对T=T,而是面对正常的单链。

其中Rec系统负责消除那些没有被切除修复系统所切除的T=T可能造成的可怕的后果。

SOS修复系统、松懈DNA复制校对系统,允许新生DNA链越过T=T而延伸,不去管双螺旋结构的变形。

导致错误的碱基出现在生长链的任何位置,数量太大,错配修复和切除修复系统纠正一些,仍留有很多错配碱基,从而造成突变。

光修复、切补修复和聚合酶修复都是修复模板链。

而重组修复是形成一条新的模板链,SOS 是产生连续的子链。

SOS修复是唯一导致突变的修复,其余的修复机制都是将DNA损伤恢复到损伤前的状态或产生与亲本完全相同的子代DNA。

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