玻片标本制作技术
临时玻片标本的制作
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◇植物细胞的结构
细胞壁 细胞膜
细胞核 细胞质 液泡
叶绿体
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◇动物细胞的结构
细胞质
细胞核
细胞膜
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二、细胞是生命活动的基本单位
◇观察草履虫的生命活动
草履虫培养液 连桥
A
牛肉汁 B
在实验中，草履虫是怎样运动的？这些 现象说明了什么问题？部。
擦→滴→取→放、编展辑ppt →盖→ 染→吸 7
◇制作人体口腔细胞临时装片
1、擦：用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净
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生理盐水
2、滴把载玻片放在试验台上，用滴管在载 玻片的中央滴一滴生理盐水
。
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3、刮：用凉开水把口漱净。用消毒
牙签从口腔侧壁处轻轻刮几下，牙签 上就附着了一些碎屑。
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生理盐水
生理盐水
4、涂:把牙签放在载玻片放在载玻
片的生理盐水中均匀地涂抹几下。
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防止产生气泡
5、盖 ：用镊子夹起盖玻片，使它
的一侧先接触载玻片上的水滴，然
后缓缓放平。目的是防止产生气泡
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吸水纸
碘液
6、染：在盖玻片的一侧滴加碘液
，另一侧用吸水纸吸引，重复2～3次，
•人体口腔上皮细胞临时装片：一
擦、二滴、三刮、四涂、五盖、
六染。
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2、植物细胞的结构
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3、动物细胞的结构
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1、从细胞结构看，“种瓜得瓜，种豆得豆”这种现 象主要决定于（D ） A、细胞壁 B、细胞膜 C、细胞质 D、细胞核 2、下列哪一项不是人体细胞所具有的结构是（A ） A、细胞壁 B、细胞膜 C、细胞质 D、细胞核 3、制作人的口腔上皮细胞临时装片时，漱口的液体、 载玻片上滴加的液体、染色用的液体分别是（ ） A、B自来水、生理盐水、碘液 B、凉开水、生理盐水、碘液 C、生理盐水、自来水、碘液 D、碘液、生理盐水、凉开水
生物玻片标本制作工艺
生物玻片标本制作工艺一、引言生物玻片标本制作是生物学研究和教学中常用的一种方法。
通过将生物样本制作成玻片标本，可以使样本更加稳定，便于保存和观察。
本文将介绍生物玻片标本制作的工艺流程以及相关注意事项。
二、材料准备1. 生物样本：可以是细胞、组织、器官或整个生物体的部分。
2. 玻片：通常使用的是长方形的玻璃片，尺寸为26mm×76mm。
3. 组织固定剂：如福尔马林、乙醛等，用于固定生物样本。
4. 脱水剂：如乙醇、丙酮等，用于去除固定剂和水分。
5. 渗透剂：如甘油、丁醇等，用于使样本透明并增加折射率。
6. 嵌片剂：如冰片胶、丙烯酰胺等，用于固定样本和玻片。
7. 封片剂：如尼龙胶、丁基胶等，用于封闭玻片。
三、制作工艺流程1. 固定样本：将生物样本放入组织固定剂中，使其固定。
2. 剪切样本：将固定的生物样本从整体中切取出适当大小的部分。
3. 脱水处理：将剪切好的生物样本依次浸入浓度递增的脱水剂中，去除固定剂和水分。
4. 渗透处理：将脱水后的样本浸入渗透剂中，使其透明并增加折射率。
5. 嵌片固定：将渗透后的样本放入嵌片剂中，使其与玻片固定在一起。
6. 制备切片：使用切片机将嵌片好的样本切成薄片，厚度通常为5-10微米。
7. 干燥处理：将切好的样本放置在通风干燥的环境中，使其彻底干燥。
8. 封片处理：将干燥的切片放在玻片上，并使用封片剂将其封闭。
四、注意事项1. 操作环境要清洁，避免灰尘和杂质对样本的影响。
2. 操作过程中要小心轻柔，避免损坏样本。
3. 各步骤的时间和温度要控制好，避免对样本造成过度固定或损伤。
4. 不同样本需要采用不同的固定剂、脱水剂和渗透剂，要根据实际情况选择。
5. 切片时要保持刀片的锋利，避免切出的切片厚度不均匀。
6. 切片后的样本要避免阳光直射和潮湿环境，以免导致样本变质。
7. 制作玻片标本时要注意标注样本的相关信息，如名称、日期等。
五、总结生物玻片标本制作是一项重要的实验技术，它可以帮助我们更好地观察和研究生物样本。
玻片标本的制作步骤
玻片标本的制作步骤
制作玻片标本是在显微镜下观察和研究细胞、组织或其他微小结构的重要步骤之一。
以下是一般的玻片标本制作步骤：
1. 样本采集：从生物体或实验材料中采集样本。
样本的选择取决于研究的目的，可以是细胞、组织、细菌、植物等。
2. 固定：将采集到的样本迅速进行固定，防止细胞和组织结构的变形和腐败。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醛、Bouin 液等。
3. 脱水：将固定的样本逐渐浸泡在酒精或其他脱水剂中，以逐渐去除组织中的水分，使组织适于包埋。
4. 清理：在脱水后，对样本进行透明化处理，使用透明介质如苯酚、二甲苯等，以清理组织并使其透明。
5. 浸渍：将样本浸入熔点较低的石蜡或石蜡切片液中，以替代透明介质。
这个步骤有助于使样本更容易被切割。
6. 包埋：将样本置于熔化的石蜡中，并在冷却过程中形成坚固的块。
这个块包含了样本，以便于后续的切割。
7. 切割：使用组织切片机或切片刀，将包埋好的块切成非常薄的切片。
这些切片通常在准备的玻片上展开。
8. 贴片：将切好的组织切片贴附到玻片上。
这通常涉及到使用一些胶水或其他贴片剂。
9. 染色：为了增强细胞和组织的对比度，通常需要染色。
使用不同的染色剂可以突显细胞器和细胞结构。
10. 封片：在玻片上覆盖一层透明的封片剂，以保护样本，并确保标本的保存。
制作好的玻片标本现在可以在显微镜下进行观察和研究，从而获取细胞和组织的详细信息。
每个步骤的具体细节和使用的药物或化学试剂可能会根据具体的实验目的和样本类型而有所不同。
临时玻片标本的制作
记录时应保持记录的准确性和完整性避免遗漏或错误记录。
优点
制作简单：操作方便无需特殊设备
观察方便：可以直接在显微镜下观 察
添加标题
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成本低廉：材料易得制作成本低
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保存方便：可以长期保存便于后续 研究
滴加试剂：在标本上滴加一滴试剂如染 色剂、固定剂等
盖上盖玻片：用镊子轻轻将盖玻片放在 标本上避免产生气泡
观察标本：将玻片放在显微镜下观察记 录观察结果
注意事项
确保玻片清洁无灰 尘和污渍
标本应保持湿润避 免干燥
盖玻片应轻轻放置 避免产生气泡
染色时应注意浓度 和时间避免过度染 色
血液玻片标本
制作方法：取一滴血液滴在载 玻片上用盖玻片覆盖轻轻压平
应用：病理学、组 织学、细胞生物学 等领域
注意事项：切片要 薄载玻片要干净盖 玻片要平整
保存方法
保存环境：避免高温、潮湿、阳光 直射等环境
保存方式：使用专用的保存盒或保 存袋进行保存
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保存时间：尽量在短时间内完成保 存和运输
运输方式：选择合适的运输工具和 运输方式避免颠簸和碰撞
记录方法：记录使用的观察方法和工具 如显微镜、染色剂等
记录结果：记录观察结果如细胞形态、 细胞数量等
记录分析：对观察结果进行分析如细胞 形态变化、细胞数量变化等
观察与记录注意事项
观察时应保持显微镜的焦距和物镜的放大倍数不变避免因焦距和放大倍数的变化而影响 观察结果。
记录时应使用规范的术语和符号避免使用模糊不清或容易引起误解的词语。
玻片标本的制作步骤
玻片标本的制作步骤玻片标本是指将生物组织或细胞等微小物体制成玻片，用于显微镜下观察和研究。
制作玻片标本需要经过一系列的步骤，下面将详细介绍。
一、材料准备制作玻片标本需要准备以下材料：生物样品、切片刀、切片盘、显微镜玻片、盖玻片、荧光染色剂、脱水剂、透明剂、显微镜等。
生物样品可以是动植物组织、细胞、微生物等。
切片刀要选择锋利、切割平稳的刀片。
切片盘要选用透明的材质，以便观察切片过程。
显微镜玻片要选用清洁、无毛刺、无气泡的玻片。
盖玻片要足够大，以覆盖整个切片。
荧光染色剂用于标记细胞或组织中的特定蛋白质或核酸。
脱水剂用于去除样品中的水分，透明剂用于使样品变得透明，方便观察。
二、制作步骤1. 取样品从动植物组织、细胞、微生物中取出需要观察的部位或细胞，将其放置在切片盘中。
2. 固定样品将样品固定在切片盘中，可以使用甲醛、酒精、乙醇等固定剂，不同的固定剂会对样品的某些结构产生不同的影响。
3. 切片使用切片刀将样品切成薄片，薄片的厚度约为几微米至几十微米4. 荧光染色对于需要进行荧光染色的样品，可以在切片前或切片后进行染色。
荧光染色剂可以标记细胞或组织中的特定蛋白质或核酸，使其在显微镜下呈现出不同的颜色。
5. 脱水将切片放置在脱水剂中，去除样品中的水分。
脱水剂可以使用乙醇、丙酮等。
6. 透明将脱水后的切片放置在透明剂中，使其变得透明。
透明剂可以使用二甲苯、山梨醇等。
7. 制片将透明的切片放置在显微镜玻片上，用盖玻片覆盖，压平。
8. 固定用甲醛或其他固定剂将盖玻片固定在玻片上。
三、注意事项1. 切片时要注意刀片的锋利度和切割角度，以免样品被破坏或变形。
2. 染色时要注意荧光染色剂的浓度和染色时间，过度染色会影响观察结果。
3. 制片时要注意盖玻片的大小和厚度，以免影响观察效果。
4. 固定时要注意固定剂的浓度和时间，过度固定会影响样品的总之，制作玻片标本需要仔细的操作和专业的知识，只有在正确的方法和注意事项下才能得到准确的观察结果。
【教学实验】玻片标本种类和制作过程
优选精品资源欢迎下载选用常见生物玻片标本种类和制作过程：切片—是用从生物体上直接切取的薄片制成的，可用切片机切取或用徒手切片法切取涂片—用涂抹的方法，将动植物较为疏松的组织或游离的细胞均匀地散布在载玻片上装片—用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成，或直接用个体微小的生物制成特别提醒：①制作三种玻片的共同要求是所观察材料必须是薄而透明的，最好是一层细胞，特别微小的生物可直接做成玻片标本。
②三种玻片按保存时间的长短可分为临时和永久两大类。
③染色剂对细胞具有毒害作用，因此，制作生物玻片时尽量不染色，在材料各结构对比度较弱的情况下尽量使用毒害作用较小的染色剂。
洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作：（1）擦：用洁净的纱布吧载玻片和盖玻片擦拭干净（2）滴：把载玻片放在试验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水制作临时装片（3）撕：用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取内表皮，把其浸入载玻片上的水滴中，用镊子展平（4）盖：用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓放下，盖在要观察的材料上，避免出现气泡。
（5）染：滴一滴碘液在盖玻片的一侧，用吸水纸从盖玻片的令一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
特别提醒：①去除装片中气泡的方法：可用滴水引流法或镊子挤压法去除气泡。
②区分细胞和气泡：气泡在视野中是圆形或椭圆形，有黑而粗的边缘，用镊子或解剖针按压盖玻片。
气泡会变形、移动，而植物细胞不会变形，也不会移动。
切片，涂片，装片的辨析：用显微镜观察生物标本时要先做成玻片。
生物玻片根据制作方法可分为切片、涂片、装片三种，这三种玻片根据保存时间长短不同可分为两类，即永久性的和临时性的。
它们的相同之处是被观察的材料必须簿而透明，生物玻片无论从概念上还是从制作上都比较易混淆，需注意区分。
生物玻片标本制作工艺
生物玻片标本制作工艺生物玻片标本制作工艺简介•生物玻片标本制作是生物学研究中常用的手段之一，可以将生物样本制作成玻片，用于观察和研究。
•本文将介绍生物玻片标本制作的工艺和步骤，帮助读者了解该过程。
材料准备•活体生物样本•玻片•各种染色剂和溶液•显微镜和显微镜载物制作步骤1.样本采集–选择适当的生物样本，如细胞、组织等，确保其代表性和纯度。
–采集样本时注意卫生和安全，避免污染和伤害。
2.样本固定–使用适当的固定剂，如福尔马林、乙醛等，固定样本结构，防止其变性和降解。
–固定时间根据样本种类和目的而定，通常为几分钟到几个小时。
3.样本清洗–使用适当的缓冲液或盐水等，将样本从固定剂中清洗出来。
–清洗时间和次数根据样本的固定情况而定。
4.样本脱水–将清洗后的样本逐渐浸入浓度递增的乙醇溶液中，使其逐渐脱水。
–脱水时间和乙醇浓度根据样本的种类和大小而定。
5.样本透明化–使用透明剂（如苯胺、氯化苯和二甲苯等）处理脱水后的样本，使其透明。
–透明化时间根据样本的厚度和种类而定。
6.样本浸渍–将透明化的样本浸入合适的浸渍介质中，如石蜡、树脂等。
–浸渍时间和温度根据浸渍介质和样本需求而定。
7.样本切片–使用显微切片机或显微镜载物将浸渍后的样本切割成薄片。
–切割时需根据样本硬度和形状进行调整。
8.样本染色–使用合适的染色剂染色切片，增强结构的对比度。
–染色时间和染色剂种类根据样本和研究目的而定。
9.样本封片–将染色后的切片放置在玻片上，再覆盖一层透明覆盖物，如封片胶水或封片胶片。
–封片时需注意避免气泡和封片材料过多。
10.样本观察–将制作完毕的生物玻片标本放置在显微镜下观察。
–观察时需调节显微镜的倍率和焦距，以获得最佳观察效果。
结论•生物玻片标本制作工艺复杂而耗时，但是对于生物学研究至关重要。
•合理选择材料、严格控制步骤，可以制作出高质量的生物玻片标本，为研究和教学提供有力支持。
注意事项在进行生物玻片标本制作时，需注意以下几个方面：1.选择合适的固定剂：不同的生物样本需要使用不同的固定剂，选择合适的固定剂能够保持样本的形态和结构。
玻片标本的制作
玻片标本的制作(一)制作玻片标本的目的玻片标本在生物教学中是使学生认识生物形态结构的方法之一，通过观察玻片标本，可以验证课堂上已经学习过的知识。
学生通过制作简单玻片标本，还可获得观察生物的一些基本技能，所以通过玻片标本制作的教学，也是培养学生掌握学习技能的一种手段。
(二)玻片标本的种类从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。
从制作的方法来分，有涂片、压片、装片(也叫整装法)、磨片和切片等。
(三)载玻片和盖玻片的清洁法1．新玻片新买来的载玻片和盖玻片可按下法处理：（1）浸酸酒精。
将玻片浸入2％盐酸酒精(在95％酒精100份中，加入盐酸2份)中2～3小时。
（2）水洗。
用镊子取出放在糖瓷盘或玻璃水槽中，流水冲洗干净。
（3）保洁。
从水槽中取出，浸入95％酒精中备用(一般中学实验，从流水取出拭干，备用即可)。
2．旧玻片如利用陈旧或作废的永久切片标本的载玻片和盖玻片，可按下法处理。
（1）方法一。
①将旧标本片放在肥皂水中煮沸5～10分钟。
②放入热水中洗去残留的树脂等。
③清水冲洗。
④浸入玻璃清洁剂30分钟。
⑤用清水冲掉清洁剂。
⑥蒸馏水冲洗。
⑦浸入95％酒精中5～10分钟。
⑧取出拭干备用。
（2）方法二。
①将旧标本片置酒精灯火焰上稍稍加热。
②放入二甲苯或松节油中，以树脂完全溶化、盖玻片与载玻片分离开为止。
③用镊子取出移至5％重铬酸钾热水溶液中。
④每隔5分钟滴加工业用浓硫酸数滴，待溶液有泡产生，再持续约30分钟。
⑤静置1～2日等树脂去净。
⑥流水中冲洗，揩干备用。
(四)擦拭载玻片盖玻片法清洁好的载玻片和盖玻片，需用细软布(如清洁的纱布)揩干。
其方法是擦拭载玻片时，左手拇指和食指夹着其短边的边缘；右手拇指和食指持清洁的纱布沿长边往返，在上下两面同时轻轻擦拭。
擦拭盖玻片，因它是方形(或圆形)的，所以持相对的两边擦拭后，还须持着另两边(即转90°角)，再擦一次。
由于盖玻片小而薄，擦时必须注意。
(五)涂片法即用涂布的方法(Smear method)所制成的玻片标本，是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。
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一、草履虫装片 二、水螅的整体装片和横切片 三、涡虫的整体装片及切片 四、蛔虫横切片 五、果蝇唾液腺染色体的制片 六、脊髓的神经细胞涂片 七、骨密质磨片
草履虫接合生殖装片 水螅带芽整体装片
果蝇唾液腺染色体
人类脊髓神经细胞
“一别两宽，各生欢喜”出自敦煌山洞出土的唐朝人 “放妻协议”,这份离婚协议书的主要内容是：“凡为夫 妇之因，前世三生结缘，始配今生为夫妇。若结缘不合， 比是冤家，故来相对；即以二心不同，难归一意，快会 及诸亲，各还本道。愿妻娘子相离之后，”一别两宽， 各生欢喜“,意思就是：我们好聚好散吧
第二章 生物玻片标本制作技术
第一节 生物玻片标本制作方法 第二节 植物材料玻片标本制作技术 第三节 动物材料玻片标本制作技术
第一节 生物玻片标本制作方法
从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。从制作的方法 来分，有涂片、压片、装片(也叫整装法)、磨片和切片等 。
一、切片法
切片法即用刀片将材料切成薄片的方法。
几个重要环节步骤如下：
(1)固定 其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似；必须 对固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的 等加以注意。 (2)冲洗 (3)脱水 酒精是最常用的脱水剂，把酒精配成不同梯度的浓度缓慢进行。 (4)染色 (5)浸蜡 将已透明的材料投入熔化的石蜡中，取代透明剂，使组织中空 隙为石蜡透入而填满；
5.磨片法
一些含有矿物质的比较坚硬的动物组织要作成玻片标本时，常把材料 直接放在砂石上磨成薄片，此法即为磨片法。如珊瑚的骨骼、软体动 物的贝壳，脊椎动物的硬骨、角以及牙齿等都可以用此法制成玻片标 本。
第二节 植物材料玻片标本制作技术
一、常用实验种子植物的制片方 法
(一)洋葱表皮装片 (二)洋葱根尖纵切片(示细胞有丝分裂)
或许，当一段不知疲倦的旅途结束，只有站在 终点的人，才会感觉到累，其实我一直都明白， 能一直和一人做伴，实属不易。 茫茫人海，有多少人能风雨邂逅？尘缘万千， 事不出，不知谁近谁远。人不品，不知谁浓谁淡！ 有多少人能相依相伴？不是所有的遇见都能守候， 利不尽，不知谁聚谁散。人不穷，不知谁冷谁暖！
水不试，不知哪深哪浅，人不交，不知谁好谁坏！
二、非切片法
1.涂片法
是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的 一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液，含有细菌的 培养液以及精巢、花药等
2.压片法
将植物或动物比较疏松的材料，如花药、根尖、水螅，蠕虫的精巢、果蝇 (或其他双翅目)幼虫的唾液腺等，用较小的压力压碎在载玻片上使成一薄 层的一种制片法。
洋
葱
表
皮
细
胞
洋葱根尖细胞
(三)蚕豆根横切片 (四)南瓜茎纵切片及横切片
蚕豆幼根横切 南瓜茎纵切片二 Nhomakorabea常用实验孢子植物的制片 方法
(一) 衣藻装片
(二) 团藻装片
团藻装 片
衣藻装 片
（三）细菌三型涂片 （四）地钱生殖托纵切片 （五）藓原丝体装片
细
菌
三
型
涂
片
藓 原 丝 体 装 片
第三节 动物材料玻片标本制作技术
(6)切片 用石蜡包埋块包埋的石蜡块，经修整后一般使用旋转式切片机进行
切片； (7)透明 透明在两种情况下进行。
第一，透明是在组织脱水后浸蜡前进行，其目的不在于为了显微镜 观察，而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此，透明剂必须既能 与酒精混合，又能与石蜡融合无间，二甲苯即具此性质，故被选为常 用的透明剂。
第二，透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水 剂进入封藏剂的桥梁外，尚有使标本透明而便于观察的作用。 (8)封藏 常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便 于镜检。
3.火棉胶切片法
火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不 经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料(如脑)的切片，也因 火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织 (如脑、眼球)的切片 。
4.冰冻切片法
冰冻切片法是将已固定或新鲜组织块不经脱水和包埋先进行冰冻，然 后在切片机上切片的一种方法。这种方法的优点是：1.制片速度快， 因此常用于临床上的病理手术诊断；2.能保存组织内某些易被有机溶 剂所溶解的物质，例如脂肪和酶等。 同时还可以防止组织块的收缩保持原形。缺点：所切片子较厚，又不 能作连续切片还有易碎的毛病。
3.装片法
微小的生物如衣藻、水绵、青霉、变形虫和水螅等可以直接作为装片的 材料植物的叶表皮、鳞茎表皮等；动物中如昆虫的翅、腿、口器等；人 的口腔上皮细胞等都是从整个器官上取其一部分作为装片材料，可制作 成临时或永久装片，进行观察。
4.悬滴法
悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料(如变形虫的运动、 细菌的活动、花粉的萌发等)封闭在载玻片的小室里，供观察它 们活动的一种玻片标本。
1.徒手切片法
简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观 察形态构造的一种基本切片方法 。 （1）材料和夹持物 （2）材料的持法 （3）持刀方法 （4）切片 （5）取片 （6）选片、装片
材料和夹持物
切取 的标 本
滴水 加盖盖玻片
放置标本 叶的横切
2.石蜡切片法
所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀，还能作 连续切片，但制作手续较复杂 。
朋友是条路， 选对了帮着你， 选错了绕死你！
真诚的人，走着走着，就走进 了心里。虚伪的人，走着走着，就 淡出了视线。
不是所有的情缘都能拥有，不是所有的爱，都能 携手同行，不是所有的故事，都可以写下完美的 结局……
最近很流行的一段话： “如果我用
你待我的方式来待你，恐怕你早已 离去！” 这句话，适合任何关系 ! 凡事换个角度，假如你是我，未必 能有我大度。
男人是条狼， 选对了保护你， 选错了折磨你！
女人是条蛇，选对了缠着你， 选错了毒死你！