植物离体快繁技术PPT课件
合集下载
61第九章 植物离体繁殖PPT课件
16
• 原球茎是兰花种子发芽过程中的一种形态 学构造。种子萌发初期并不出现胚根，只 是胚逐渐膨大，以后种皮的一端破裂，肿 胀的胚呈小圆锥状，故称为原球茎。
• 原球茎是短缩的、呈珠粒状的、由胚性细 胞组成的、类似嫩茎的器官，它可以增殖 ，形成原球茎丛。由茎尖或腋芽外植体诱 导产生原球茎，切割原球茎进行增殖，或 停止切割使其继续培养而转绿，产生毛状 假根，叶原基发育成幼叶，将其转移培养 生根，形成完整植株。
3
（二）特点
1、繁殖效率高。 2、培养条件可控性强。 3、占用空间小。 4、管理方便，利于自动化控制。 5、便于种质保存和交换。
4
二、植物快繁器官形成方式
根据器官形成方式的不同，将植物器官的 再生分为五种类型，即短枝发生型、丛生 芽发生型、不定芽发生型、胚状体发生型 和原球茎发生型。
5
（一）短枝发生型
40
• 移栽小植株还应注意光、温控制。
• 移栽初期光照强度应较弱，经过一段时间 适应后，增加光照强度（漫射），如1 500 ～4 000 lx，甚至10000 lx。
• 移栽小植株生长所需的适宜温度与植物种 类有关，喜温性植物以25℃左右为宜，喜 凉性植物则以18～20℃为好。温度过高导 致蒸腾作用加强，水分失衡，微生物滋生 等；温度过低则使幼苗生长迟缓或不易存 活。如使基质温度高于空气温度2～3℃， 则有利于生根和促进根系发育，提高存活 率。
• 体细胞胚再生的小植株与丛生芽或不定芽 再生的小植株相比，具有两个显著差异： ①胚状体多起源于单细胞。 ②生理隔离。
14
菊花花瓣体细胞胚胎发生及体胚发育过程的扫描电镜观察
15
（五）原球茎发生型
原球茎发生型是兰科植物的一种快繁方式， 它是指茎尖或腋芽外植体经培养产生原球茎 （即扁球状体、基部生假根）的繁殖类型。
• 原球茎是兰花种子发芽过程中的一种形态 学构造。种子萌发初期并不出现胚根，只 是胚逐渐膨大，以后种皮的一端破裂，肿 胀的胚呈小圆锥状，故称为原球茎。
• 原球茎是短缩的、呈珠粒状的、由胚性细 胞组成的、类似嫩茎的器官，它可以增殖 ，形成原球茎丛。由茎尖或腋芽外植体诱 导产生原球茎，切割原球茎进行增殖，或 停止切割使其继续培养而转绿，产生毛状 假根，叶原基发育成幼叶，将其转移培养 生根，形成完整植株。
3
（二）特点
1、繁殖效率高。 2、培养条件可控性强。 3、占用空间小。 4、管理方便，利于自动化控制。 5、便于种质保存和交换。
4
二、植物快繁器官形成方式
根据器官形成方式的不同，将植物器官的 再生分为五种类型，即短枝发生型、丛生 芽发生型、不定芽发生型、胚状体发生型 和原球茎发生型。
5
（一）短枝发生型
40
• 移栽小植株还应注意光、温控制。
• 移栽初期光照强度应较弱，经过一段时间 适应后，增加光照强度（漫射），如1 500 ～4 000 lx，甚至10000 lx。
• 移栽小植株生长所需的适宜温度与植物种 类有关，喜温性植物以25℃左右为宜，喜 凉性植物则以18～20℃为好。温度过高导 致蒸腾作用加强，水分失衡，微生物滋生 等；温度过低则使幼苗生长迟缓或不易存 活。如使基质温度高于空气温度2～3℃， 则有利于生根和促进根系发育，提高存活 率。
• 体细胞胚再生的小植株与丛生芽或不定芽 再生的小植株相比，具有两个显著差异： ①胚状体多起源于单细胞。 ②生理隔离。
14
菊花花瓣体细胞胚胎发生及体胚发育过程的扫描电镜观察
15
（五）原球茎发生型
原球茎发生型是兰科植物的一种快繁方式， 它是指茎尖或腋芽外植体经培养产生原球茎 （即扁球状体、基部生假根）的繁殖类型。
植物离体繁殖PPT课件
2021/3/12
34
2021/3/12
35
2021/3/12
36
2021/3/12
37
兰科植物生产
2021/3/12
38
无菌苗快速繁殖
2021/3/12
39
2021/3/12
无菌苗驯化
40
2021/3/12
41
四、商业化生产应注意的问题
污染
– 污染的来源：培养基及器具、器皿污染；外植体灭菌不 彻底；操作原因；环境原因等
– 污染的控制：灭菌彻底；操作正确；保持操作区环境清 洁无菌。
遗传稳定性
– 影响遗传稳定性的因素：基因型；继代次数；器官发生 方式。
– 降低遗传变异的措施：选用合适的基因型；减少继代次
数；采用合适的器官发生方式；减少生长调节剂的使用
浓度。
2021/3/12
42
玻璃化：
– 生理失调症状，表现为叶片、嫩梢呈水浸透明或半透 明状。叶片脆弱易碎，角质层发育不全，没有功能性 气孔。器官分化能力低，生根难，移栽后不易成活。
第五章 植物离体繁殖
2006-4-3
2021/3/12
1
植物离体繁殖(Propagation in vitro) 植物快繁或微繁（Micropropagation）
指利用植物组织培养技术对外植体进行离体 培养，使其在短期内获得遗传性一致的大量 再生植株的方法。是工厂化育苗的技术基础。
2021/3/12
2021/3/12
48
2021/3/12
49
第一节 植物胚培养
一、胚培养的类型
– 成熟胚培养：培养较为容易，只需提供 简单的培养基即可。
– 幼胚培养：要求培养基成分相对复杂， 以保证胚的正常发育成熟后形成植株。
植物离体快速繁殖和脱病毒技术PPT课件
2021/6/19
6
2021/6/19
7
2021/6/19
8
• (3)诱导胚状体形成
• 是由植物器官、组织和细胞培养直接发生类胚结构， 最后以肧状体成苗的方式。在组织培养条件下胚状体 的发育过程类似于合子胚的发育：细胞经脱分化后， 发生持续细胞分裂增殖，并依次经过原胚期、球形胚 期、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期，进而成为成熟 的胚状体。
15
• 影响玻璃化苗发生的因素：
① 培养材料：材料种类和外植体不同都有影响。
② 环境因素：液体培养比固体培养更易玻璃化；蔗糖 浓度与玻璃化呈负相关；通气不良；温度过高等都 可导致玻璃化。
③ 培养基成分：铵离子过多可致玻璃化；6-BA浓度与 玻璃化呈正相关等。
2021/6/19
16
• 控制玻璃化苗的措施： ❖ 采用固体培养，提高蔗糖含量 ❖ 通气，适当提高光强，控制温度 ❖ 降低培养基中NH4+和细胞分裂素浓度 ❖ 其它措施
• 热处理方法主要缺陷是并非能脱除所有病毒，因此热 处理需与其他方法配合应用，才可获得良好的效果。
2021/6/19
21
• （2）化学方法
• 许多化学药品(包括嘌呤、嘧啶类似物、抗菌 素等)对离体组织和原生质体具有脱毒效果。 常用的药品有：8—氮鸟嘌呤、2—硫脲嘧啶、 杀稻瘟抗菌素、放线菌素D、庆大霉素等。例 如，将100μg 2—硫脲嘧啶加入培养基可除去 烟草愈伤组织中的PVY(马铃薯病毒)。
酶联免疫法是指采用酶标记抗原或抗体的定 量测定法。将抗原固定在支持物上，加入待检 血清，然后加入酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶) 标记的抗体，使待检血清中与对应抗原的特异 性抗体结合，最后用特殊分光光度计测定。此 法是现在灵敏度较高和常使用的方法。
6-2植物快繁ppt课件
20段 60d后
新茎芽长到3cm高
10-14d
3-4月后， 由一个茎 尖可产生 8000个植 株，且都 为二倍体
精选课件ppt
65
增强腋芽生枝能力增殖的植物
草莓 实质为在不存在顶芽的情况下，腋芽具
有取代主茎功能的能力，从而生枝（一 级枝条），枝条上再长现腋芽，再发育 成为枝条（二级枝条），这样重复，使 枝条的繁殖显著提高。
Banana field from vitroplantlets
精选课件ppt
21
Coffee mi精c选ro课c件uptpttings
22
Coffee somatic embryos
精选课件ppt
23
Stages in production of clonal plants from embryogenic tissue
精选课件ppt
3
1个茎芽 2个月 3-5个原球茎
小植株
切块 4-6块 1个月
由一个不到1mm 长的茎尖开始，在 一年中可以产生几 百万个植株
3-5个原球茎
精选课件ppt
4
精选课件ppt
5
精选课件ppt
6
快繁的应用
（1）良种快繁：新育成的、新引进的、新发现 的稀缺良种的快繁
（2）少量脱毒良种苗的快繁和无病毒苗大量繁 殖
精选课件ppt
60
培养物的建立
外植体的选择 消毒
精选课件ppt
61
茎芽增殖
兰花的原球茎增殖 通过愈伤组织增殖 通过不定芽增殖 通过增强腋芽生枝能力增殖 单节茎段扦插增殖
精选课件ppt
62
通过愈伤组织增殖的植物
柑橘、咖啡、小苍兰、棕榈 不足之外在于可能造成后代在遗传上的
植物离体快速繁殖和脱病毒技术课件
➢ ④连续转接 对容易褐变的材料可间隔12~24h的培养 后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-l0d 后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
➢ ③培养基成分 无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平过 高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而 使褐变现象加深。
➢ ④培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间 过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速褐 变程度。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第5章 植物离体快速繁殖和 脱病毒技术
• 5.1 植物快速繁殖技术 • 5.2 无病毒植物的培养
5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
➢ ③培养基成分 无机盐浓度过高、细胞分裂素的水平过 高等都会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而 使褐变现象加深。
➢ ④培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时间 过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速褐 变程度。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
• 特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工； 可大量繁殖脱毒苗；利于种质资源的保存和交换等；节约 空间，不受季节限制，有利于植物的工厂化生产；在无菌 条件下进行，不受病虫害侵害。
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
一是作为领导干部一定要树立正确的 权力观 和科学 的发展 观，权 力必须 为职工 群众谋 利益， 绝不能 为个人 或少数 人谋取 私利
第5章 植物离体快速繁殖和 脱病毒技术
• 5.1 植物快速繁殖技术 • 5.2 无病毒植物的培养
5.1 植物快速繁殖技术
• 概念：所谓快速繁殖，就是将外植体在人工培养基和合适 的条件下进行培养，以在短期内获得大量遗传性一致的个 体的方法。
植物离体快繁
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
第三节 离体无性繁殖的商业化 生产的范围和应用
园艺植物生物技术课件
五四 三二一 、、 、、、 用濒及雌用用 于危基雄于于 种植因异脱稀 质物工株毒缺 的的程植苗或 试拯植物的急 管救株、快需 保 的三速良 存 快倍繁种 及 速体殖植 交 繁、 物 换 殖单 的
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
• 7. 原球茎是兰花的种子发芽过程中特有的一种形 态学结构。 （判断正误）
• 8.玻璃化苗与正常苗相比生长速度下降，甚至最 后死亡（判断正误）
• 9.不定芽可 直接从植物器官、组织发生也可先形 成愈伤组织；然后形成不定芽。 （判断正误）
• 10.利用体细胞胚状体来进行无性系的大量繁殖其 特点是：A繁殖系数高、B成苗快、C结构完整、D 不存在嵌合现象（选择）
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
一般, 植物离体培养的温度低于15 ℃或高于35℃， 对分化和生长都不利。大多数植物最适的培养温度 在23-32 ℃之间，一般控制在(25±2) ℃条件下培养， 热带园艺植物培养温度稍高。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
离体培养中环境的湿度主要指培养容器内的湿度， 相对湿度常达100％，但液体培养与固体培养时湿 度可能有变化，固体培养时琼脂的用量与质量对培 养环境的湿度有影响。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
②外植体的生理状态对茎芽的反应能力有明 显的影响 选取相对较为幼嫩、生长能力较强的部位 的材料 生长季节 > 休眠季节 幼嫩部分 > 成熟组织
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
根据外植体的特点选择适宜的消毒剂种类、浓 度和消毒时间进行外植体的表面消毒。参考第一章外植
植物离体快繁技术
第三节 离体无性繁殖的商业化 生产的范围和应用
园艺植物生物技术课件
五四 三二一 、、 、、、 用濒及雌用用 于危基雄于于 种植因异脱稀 质物工株毒缺 的的程植苗或 试拯植物的急 管救株、快需 保 的三速良 存 快倍繁种 及 速体殖植 交 繁、 物 换 殖单 的
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
• 7. 原球茎是兰花的种子发芽过程中特有的一种形 态学结构。 （判断正误）
• 8.玻璃化苗与正常苗相比生长速度下降，甚至最 后死亡（判断正误）
• 9.不定芽可 直接从植物器官、组织发生也可先形 成愈伤组织；然后形成不定芽。 （判断正误）
• 10.利用体细胞胚状体来进行无性系的大量繁殖其 特点是：A繁殖系数高、B成苗快、C结构完整、D 不存在嵌合现象（选择）
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
一般, 植物离体培养的温度低于15 ℃或高于35℃， 对分化和生长都不利。大多数植物最适的培养温度 在23-32 ℃之间，一般控制在(25±2) ℃条件下培养， 热带园艺植物培养温度稍高。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
离体培养中环境的湿度主要指培养容器内的湿度， 相对湿度常达100％，但液体培养与固体培养时湿 度可能有变化，固体培养时琼脂的用量与质量对培 养环境的湿度有影响。
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
②外植体的生理状态对茎芽的反应能力有明 显的影响 选取相对较为幼嫩、生长能力较强的部位 的材料 生长季节 > 休眠季节 幼嫩部分 > 成熟组织
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
根据外植体的特点选择适宜的消毒剂种类、浓 度和消毒时间进行外植体的表面消毒。参考第一章外植
《植物离体培养育种》课件
基因编辑技术如CRISPR-Cas9为植 物离体培养育种提供了强大的工具， 可以精确地修改植物基因，提高离体 培养的成功率和效率。
通过基因编辑技术，可以创造具有优 良性状和抗逆性的新品种，满足农业 生产和环境保护的需求。
细胞培养生物反应器的研发
01
细胞培养生物反应器是植物离体 培养的重要设备，能够提供适宜 的细胞生长环境，提高细胞增殖 速度和培养效率。
通过选择适当的培养条件和基因工程 手段，可以降低植物离体培养过程中 的遗传变异，提高新品种的遗传稳定 性。
遗传稳定性是植物离体培养育种的重 要指标之一，它关系到新品种的品质 和产量。
PART 03
植物离体培养育种的技术 流程
材料的选取与处理
材料来源与选择
选择遗传性状优良的植物品种、品系或具有特殊价值的单株作为离体培养的原 始材料。
变异体的鉴定
对筛选出的变异体进行遗 传稳定性、生物学特性等 方面的鉴定，确保其具有 实际应用价值。
PART 04
植物离体培养育种的优缺 点
优点
高效快速
离体培养可以在短时间内快速繁殖大量植物，大 大缩短了育种周期。
无性繁殖
离体培养得到的植物是无性繁殖系，遗传性状稳 定，不易受外界环境影响。
ABCD
定义与特点
定义
植物离体培养育种是指通过离体培养 技术，在人工控制的条件下诱导植物 细胞、组织或个体发生遗传变异，再 从中选择和培育新品种的育种方法。
ห้องสมุดไป่ตู้特点
离体培养技术可以人为控制变异的方 向和幅度，提高变异频率，缩短育种 周期，并可实现基因资源的有效利用 。
植物离体培养育种的重要性
01
02
03
丰富种质资源
通过基因编辑技术，可以创造具有优 良性状和抗逆性的新品种，满足农业 生产和环境保护的需求。
细胞培养生物反应器的研发
01
细胞培养生物反应器是植物离体 培养的重要设备，能够提供适宜 的细胞生长环境，提高细胞增殖 速度和培养效率。
通过选择适当的培养条件和基因工程 手段，可以降低植物离体培养过程中 的遗传变异，提高新品种的遗传稳定 性。
遗传稳定性是植物离体培养育种的重 要指标之一，它关系到新品种的品质 和产量。
PART 03
植物离体培养育种的技术 流程
材料的选取与处理
材料来源与选择
选择遗传性状优良的植物品种、品系或具有特殊价值的单株作为离体培养的原 始材料。
变异体的鉴定
对筛选出的变异体进行遗 传稳定性、生物学特性等 方面的鉴定，确保其具有 实际应用价值。
PART 04
植物离体培养育种的优缺 点
优点
高效快速
离体培养可以在短时间内快速繁殖大量植物，大 大缩短了育种周期。
无性繁殖
离体培养得到的植物是无性繁殖系，遗传性状稳 定，不易受外界环境影响。
ABCD
定义与特点
定义
植物离体培养育种是指通过离体培养 技术，在人工控制的条件下诱导植物 细胞、组织或个体发生遗传变异，再 从中选择和培育新品种的育种方法。
ห้องสมุดไป่ตู้特点
离体培养技术可以人为控制变异的方 向和幅度，提高变异频率，缩短育种 周期，并可实现基因资源的有效利用 。
植物离体培养育种的重要性
01
02
03
丰富种质资源
第4章-植物快繁与脱毒培养PPT课件
▪病毒(Virus) 个体微小，结构简单，成熟的个体称为病毒 粒体，有球状、杆状、线条状和弹状以及分枝丝状体，直径 或宽度约为10-120nm，体积比细菌小得多，能通过细菌滤 器。是一种严格寄生性的专性寄生物，又称分子寄生物。
.
46
病毒在植株体内的扩散：
①短距离移动：通过胞间连丝在植物细胞间移动， 其扩散的速度很慢。如烟草普通花叶病毒运转 速度为6-13um/小时；
离体条件下，在外源细
胞分裂素的作用下可以使顶
芽和腋芽共同发育，形成多
枝多芽的小灌木丛状结构。
.
15
丛生芽增殖
.
16
单茎节增殖
.
17
以顶芽和腋芽发育进行增殖的特点：
利用外植体上已有的芽分生组织，促使其萌 发形成枝条或芽，方法简单，能高度保持遗传稳 定性，繁殖速度较慢。
适用于绝大多数植物的繁殖，对具有特殊观 赏价值的嵌合体(chimera)园艺植物来说，也是 唯一能够保持其原有嵌合特性的繁殖途径。
in vivo
试管苗的移植（stage4）
.
24
（一）供体材料的准备：Stage0
对供体植株及外植体的卫生、生理状态进行改进 。可以减少外植体的污染，易于消毒，并在离体培养 时启动生长较好。
常采用的方法：
供体植株在人工气候箱或温室栽培1-3月；
喷洒抗生素；
供体枝条预培养或黄化处理；
修剪、嫁接、避免顶部浇水和雨后取材等。
第四章 植物离体无性繁殖与脱毒技术
第一节 植物离体无性繁殖技术 第二节 植物脱病毒技术
.
1
有性繁殖 繁殖方式
无性繁殖
无融合生殖 营养繁殖
无融合生殖：在子房和胚珠内不经受精作用而以种子进行 繁殖的方式。
.
46
病毒在植株体内的扩散：
①短距离移动：通过胞间连丝在植物细胞间移动， 其扩散的速度很慢。如烟草普通花叶病毒运转 速度为6-13um/小时；
离体条件下，在外源细
胞分裂素的作用下可以使顶
芽和腋芽共同发育，形成多
枝多芽的小灌木丛状结构。
.
15
丛生芽增殖
.
16
单茎节增殖
.
17
以顶芽和腋芽发育进行增殖的特点：
利用外植体上已有的芽分生组织，促使其萌 发形成枝条或芽，方法简单，能高度保持遗传稳 定性，繁殖速度较慢。
适用于绝大多数植物的繁殖，对具有特殊观 赏价值的嵌合体(chimera)园艺植物来说，也是 唯一能够保持其原有嵌合特性的繁殖途径。
in vivo
试管苗的移植（stage4）
.
24
（一）供体材料的准备：Stage0
对供体植株及外植体的卫生、生理状态进行改进 。可以减少外植体的污染，易于消毒，并在离体培养 时启动生长较好。
常采用的方法：
供体植株在人工气候箱或温室栽培1-3月；
喷洒抗生素；
供体枝条预培养或黄化处理；
修剪、嫁接、避免顶部浇水和雨后取材等。
第四章 植物离体无性繁殖与脱毒技术
第一节 植物离体无性繁殖技术 第二节 植物脱病毒技术
.
1
有性繁殖 繁殖方式
无性繁殖
无融合生殖 营养繁殖
无融合生殖：在子房和胚珠内不经受精作用而以种子进行 繁殖的方式。
植物组织培养与快繁技术课件
（2）成熟胚培养：成熟胚培养是指将子叶期以后的胚进行离体培养。成熟胚已储备了能满足自身萌发和生长的养分，培养技术较为容易。
①材料的消毒与接种
健壮优良的个体自交种或杂交种子，常规消毒灭菌，剥离胚。
② 培养基与培养条件
培养基 大量元素和微量的无机盐为基本成分
谷氨酰胺作为氮源，可以促进胚生长 植物天然浸提物（YE）促进胚生长 硫氨素促进胚根的伸长 生长素低浓度促进胚的发育（胚根） 赤霉素促进有后熟作用的种子萌发
生长调节物质的影响 传粉子房：加入生长调节剂通常可以促进子房生长。 未传粉子房：必须加入生长调节剂。不同植物所要求的激素种类和配比各不相同。 单倍体的来源和发育途径 单倍体植株的来源和发育途径在不同的植株中各有不同。 大孢子和胚囊中的卵细胞、助细胞和反足细胞通过形成胚状体或愈伤组织两种途径产生单倍体植株。
附加成分
培养条件：光照：12h／d光照 温度：通常25－30℃
影响胚培养的因素
（1）胚龄 胚龄越大，成功率越高；胚龄越小，成功率越低。小于0.5mm的幼胚很难进行培养。心形胚时期以前，属异养期。 幼胚的培养的初期，处于异养阶段，需要提供完全的培养基。除通常需要的大量和微量无机盐外，还需要添加维生素、氨基酸和植物激素等，胚龄越小，培养基的成分就越复杂。 随着胚龄的增加,离体胚对外源营养的要求渐趋简单，自养期的胚能在基本的无机盐和蔗糖培养基上生长。
（2）培养基
无机盐 幼胚培养的培养基主要有MS(1962)、B5、Nitsch(1954)、Rijven(1952)、White(1963)、Rangaswang(1961)、Monnier(1978)等。 成熟胚培养Tukey(1934)、Cox(1943)、 White(1963)等。 碳水化合物 碳源，调节培养基渗透压，防止幼胚早熟萌发。 胚龄越小，要求的糖浓度越高。 成熟胚：2％蔗糖 幼胚培养：一般为6％－12％，可高到18％。在培养过程中，随培养时间增加，培养基的渗透压必须逐步降低。
修改第四章植物离体快速繁殖ppt课件
6. 鳞茎型 百合的鳞茎切块接种在不同激素配比的修改的MS培养
基上，鳞片基部近轴面或在边缘直接形成带根的小鳞茎。而 卷母的二、三年生幼嫩鳞片，可不经过愈伤组织直接形成小 瘤状或叶状体，再将其切块及时移入修改的ER培养基上，二、 三个月后诱导出与自然界条件下生长相同的贝母鳞茎。
系数高,首先证明 甘蔗、胡萝卜、
细胞的全能性
石刁柏等
原球茎型 球茎芽型
块茎型 鳞茎型
由茎尖或腋芽产生原 遗传稳定,原球茎可作
球茎
为繁殖系母体
兰花
叶柄表面产生圆球形 遗传稳定,球茎芽可直 球茎芽,一端出根另一 接放入土中种植
端出芽
观赏海棠
叶片叶柄上形成粒状 块茎芽可作为繁殖母体,
芋块,进一步分化出根 不断切割繁殖移栽,成
4. 球茎芽型 不同发育阶段的球茎都是茎或枝条的变态形式。由非
茎尖或侧芽的外植体不经脱分化的愈伤组织，直接从圆球茎 分化出芽和根器官的方式叫球茎芽型。
5. 块茎型 块茎是膨大的地下茎，其表面有芽眼。当花叶芋的
叶片或叶柄接种在培养基上，先形成类似愈伤组织的小硬突 起，并逐渐形成粒状的芋块。随着小芋块的增大，分化出的 芽也越密集并形成许多小苗，在小苗基部与芋块交接处分化 出白色的根，与正常块茎切块繁殖的幼苗相同，即首先形成 有分化能力的块茎（芋块），然后在块茎上分化出小芋块， 再在其上分化出芽和根，最后生长发育成小植株。
（4）利用2,4-D和IAA可延缓多酚合成，减轻褐化的产生， 但外植体在高浓度的2,4-D下培养时间过长，愈伤组织变得 松软、呈水渍状，失去分化能力。 （5）降低培养基中的pH值控制酚氧化酶活性和底物利用率， 因为这种酶在pH=6.5时活性最强。
（6）改变氧化-还原势常用的还原剂有维生素C、柠檬酸、 巯基乙醇、谷胱甘肽、二硫苏糖醇、半胱氨酸等。使用方法 可以在外植体材料消毒前快速浸入其中30秒～60秒，浸泡时 间不可过长，否则外植体褐变会更加严重，因为抗氧化剂对 外植体有一定毒害作用；或用它们浸湿滤纸并在其上进行外 植体的切割。
植物的离体快繁 ppt
-
31
提高小苗移栽成活率的方法
1、将小苗进行分级。 2、要进行炼苗。 3、选好定植场所。 4、要严格掌握移栽技术，科学确定合适的移
栽时间。 5、重视移栽后的管理。
-
32
四、植物离体快繁的常见问题
1、污染 2、遗传稳定性 3、玻璃化现象 4、褐变的发生
-
33
1、污染
污染
细菌污染
真菌污染
-
34
细菌污染的特点
-
7
-
8
-
9
２器官型
器官型：从器官外植体诱导不定芽，再 生成植株的方式。
特点：直接从器官上诱导不定芽，遗传 性比较稳定，但繁殖速度慢。
-
10
-
11
３器官发生型
器官发生型：从器官外植体诱导愈伤组 织，经愈伤组织细胞的分化再生成植 株的方式。
特点：繁殖速度快，由于经愈伤组织而 再生成植株，遗传性不稳定。
-
28
本时期可划分3个阶段：
培养物保存阶段、培养物大量增值阶段、培 养物生长和增壮阶段。
本时期的目标： 1、维持培养物的稳定状态 2、不断增值茎丛达到需要数量。
-
29
3、诱导茎芽生根形成小苗时期
本时期是使上一时期培养出来的微枝发出不 定芽，形成完整的小苗，以便经过训化， 培养成商品苗。
其功能是：
污染原因：
培养室湿度过大 瓶口积落有灰尘和孢子。
-
38
材料内部带菌
在培养基中表现的症状
外植体接触培养基部位长菌 外植体损伤部位长菌 外植体生长不良或表现出缺绿
-
39
防治措施
接种前的工作： 1、 接种室的灭菌 2、超净工作台的灭菌 3、 接种器皿、用具的灭菌 4、工作人员接种前应做的准备工作 5、 材料的灭菌
植物生物技术PPT
2011-11-6
3.促进中间繁殖体的增殖
4.壮苗与生根
5.试管苗移栽与管护
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
2011-11-6
2011-11-6
2.方式 2.
顶芽和腋芽的发育 不定芽的发育
遗传性能稳定，变异率相对较小，是植 物组织培养快速繁殖良种的基本技术路 线
体细胞胚状体的发生与发育 原球茎的发育 2011-11-6
3.研究进展
1960年Morel用兰花茎尖离体培养获得脱毒病毒植株后，国内外相继建立 兰花工业。
我国观赏植物试管快速繁殖研究起步较晚，但取得了令人瞩目的成绩： 20世纪70年代到80年代，主要花卉的离体扩繁技术已在我国较为成熟； 世纪 年代到 年代，主要花卉的离体扩繁技术已在我国较为成熟；
第三节 植物离体快速繁殖
一、离体快速繁殖的概念与研究进 展 二、离体快速繁殖商业性生产的范 围及应用 三、离体快速繁殖体系的建立
2011-11-6
一、离体快速繁殖的概念与研究进展
1.离体快速繁殖概念 1.
离体快速繁殖是指在无菌条件下，利用植物体的一部分在人工控制的 营养和环境条件下进行植物繁殖的一种方法。 由于其繁殖速率快，称之“快（速）繁（殖）”（rapid propagation) 或“扩繁”（multi-propagation),又由于其所用材料小，称之为“微（型） 繁（殖）”（micro-propagation） 实际上是一种特殊的营养繁殖方法，是植物扦插繁殖方法的扩展和延伸。
2011-11-6
2 诱导外植体生长和分比
（1）顶芽与腋芽的发育：顶芽与腋芽在离体培养中都可被诱导而发育。 （2）不定芽的发育：不定芽的发生大多有一个从外植体上产生愈伤组织的 阶段，这一阶段的长短和愈伤组织生长的程度，在不同植物种类和培养条 件而有极大的差异。从观赏园艺育苗的要求来说，应尽快出苗，减少愈伤 组织的发生，以免在长期的培养过程中细胞分不正常，失去观赏价值或失 去再生成苗的能力。 （3）体细胞胚状体的发生和发育：体细胞胚的发育途径类似，但不同于合 3 子胚，它通过球形、心形、鱼雷形和子叶形的胚胎时期，最后发育成完整 的小植株。 （4）原球茎的发育：在兰科等植物的组织培养中，常从茎尖或侧芽的培养 中产生一些原球茎，原球茎本身可以增殖，以后能萌发出小植株。原球茎 可理解为缩短的、呈球粒状的、由胚性细胞组成的类似嫩茎的器官。
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
-
3
组织培养与植物快速无性繁殖
• 无性繁殖：扦插、嫁接、压条、分离繁殖、 组织培养
• 有性繁殖：种子繁殖 • 兰花工业：欧洲兰花的工厂化生产 • 荷兰的球根花卉：郁金香、洋水仙、小苍
兰，能够准确控制开花期，运往世界各地。
-
4
• 利用组织培养快速繁殖已在粮食作物、经 济作物、观赏作物、药用等100多种植物上 获得成功。其中在生产上推广应用的有马 铃薯、甘蔗、三倍体无籽西瓜、葡萄、山 楂、菊花等。
•
-
29
2、操作过程
• 取材：在组培室中剪取1.5-2.0cm长的带顶 芽的茎段，余下部分可作继代扩繁培养。
• 生长素处理：所剪取茎段的基部在一定浓 度的生长素蘸过后，轻轻插入滤纸桥中， 放入棚内有一定营养液的的长方形容器内，
然后启动调控措施。
• 保养：在操作过程当中，要对茎段不时的
喷水雾以防止失水过多而萎蔫，通过观察
-
22
• 切割
• 调节激素种类和配比
• 外源激素的积累，过量会造成畸形芽、透 明芽，影响不定芽的质量，因此应适时降 低激素的浓度。
-
23
-
24
（3）完整小植株的形成
诱导根分化的技术关键： • 调节激素种类和浓度：提高生长素相对浓
度、降低细胞分裂素的浓度、无激素 • 调节基本培养基的营养组成：1/2或1/4MS • 适当降低渗透压：根分化低于芽分化的渗
• 不定芽型：抑制顶端优势，促进腋芽生长。 • 顶芽和腋芽萌发途径 • 胚状体途径：形成胚状体后成苗。特点：
繁殖率高，遗传性稳定 • 原球茎途径：兰属特有；种子、原球茎、
植株
-
21
• 不定芽型容易成苗，对培养基要求不高， 后代遗传性稳定；但取材受限制。
• 胚状体发生型对培养基要求高，但遗传性 稳定
-
13
• 细胞工程技术的研究和发展为芦笋的快速 繁殖开辟了新的途径，其不仅能够保持品 种的优良特性，而且能够加大繁殖系数。
• 如果每人每天接种500个来自母株的芽， 每隔3～4个月就可以得到350株能够移栽 的生根小植株。如果每人每年工作200天 可生产大约7万棵芦笋植株，繁殖速度比 常规分株繁殖高几万倍以上 。
• 我国山东、东北等省区建立了无毒马铃薯 原种场，广西柳城已建立了甘蔗快速繁殖 育苗车间。
-
5
芦笋
-
6
石刁柏
百合科植物石刁柏Asparagus officinalis L. 的块根
化学成分 含皂甙，其皂甙元为美洲菝葜皂甙元
润肺镇咳，祛痰杀虫
芦笋是指石刁柏的嫩茎，因其嫩茎形似芦苇的 嫩茎和竹笋，故称芦笋
苗途径
-
16
步骤
• 1.入：将预备接种的培养基、菌种、接种用具及 消毒用品全部放入接种箱，封闭接种箱
• 2.擦：接种前用75%的酒精棉球擦手，然后伸进接 种箱复擦一次，特别是手指夹内，并擦拭所有用 具。 3.烧：用酒精灯火焰外焰烧灼接种器具，待其冷 却待用。
• 4.喷：双手伸进接种箱，用已装好3%来苏水或5% 石碳酸的小喷雾器喷雾，沉降粉尘，净化接种箱。
透压 • 添加活性碳：造成黑暗的环境
-
25
诱导根分化的方法：
• 培养基内诱导 • 基质生根法：糠灰、蛭石、珍珠岩、沙 • 嫁接生根法：无籽西瓜嫁接在瓠子上长根
-
26
-
27
滤纸桥瓶外 生根技术
-
28
1、实验条件
• 在温室内搭建塑料拱棚，长2m，宽1m，在 薄膜上面加上微喷设施，以便调节温度， 在拱棚的一侧设有加湿器的通道，允许湿 雾进入棚内，并根据光强在拱棚上搭遮阴 网。
-
17
• 5.薰：将称量好的高锰酸钾倒入甲醛溶液 中产生蒸汽薰蒸，消毒30分钟，杀死箱内 杂菌，其比例为高锰酸钾5g/m3，加10ml甲 醛溶液。 6.照：用紫外线灯照射15-30分钟
• 7.轻：接种时轻拿轻放 8.除：指将无关物品全部清除出接种箱。
-
18
简化超净工作台
-
19
-
20
（2）不定芽的增殖
茎段的生根情况，并根据所出现的情况及
时调整光强，温度、湿度，筛选出最佳的
生根条件。
-
30
（4）小植株的驯化和移栽
芦笋雌雄异株，是一种多年生宿根性草本植物， 以食其嫩茎为主
-
7
-
8
-
9
-
10
芦笋
• 它是一种极好的保健蔬菜，为二十一世纪的“蔬菜之 王”“蔬菜中的贵族菜”。
• 芦笋营养丰富，香肥、脆嫩，视感极佳，并带有特殊 的芳香味。
• 具有人体所必需的多种氨基酸，含量比例也比较适当， 无机盐元素中有较多的硒、钼、镁、锰、铬等微量元 素，它们对防治癌症及心脏病有重要的作用
第三章 植物离体快繁技术
-
1
• 第一节 离体快繁的方法
-
2
一、植物的离体快速无性繁殖
1、概念 • 利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋
芽、叶片、鳞片等器官、组织或细胞进行离体培 养，在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。 2、特点： • 繁殖速度快、数量大； • 培养条件可控 • 占地小 • 管理方便，利于自动化 • 便于种质保存和交换
-
14
3、离体快繁的程序和技术关键
• 培养物的建立 • 茎芽的增殖 • 完整植株的形成 • 再生植株的锻炼和移植
-
15
（1）无菌外植体的制备方法
• 概念：在无菌条件下，用于试管内继代增殖的植 物材料，称为无菌外植体或繁殖外植体。
• 制备方法：田间取回嫩枝、消毒、接种、形成丛 芽
• 技术关键： ✓ 材料的灭菌：杀菌、材料成活 ✓ 培养基的筛选：考虑植物种类、芦笋为雌雄异株植物，在自然群体中，其单株之 间的遗传组成极为复杂，由于长期异交，种性退 化十分严重，所以通过种子繁殖不能保持品种的 优良性状。
• 分株无性繁殖速度慢，繁殖系数低，成为其产业 化进程中的限制因素。
• 目前，我国尚不能生产芦笋的种子，生产用种一 直靠国外进口。随着芦笋品种的更新，今后尚需 不断进口种子，不仅消耗大量外汇，而且种子纯 度差，直接影响其产量和品质。
• 还含有大量的天门冬酰胺为主体的非蛋白质含氮物质 和天门冬胺酸以及多种甾体、皂甙、芦酊、甘露聚糖、 胆碱等，对心脏病、高血压、心率过速、疲劳症、水 肿、膀胱炎、排尿困难等病症有一定的疗效。
• 含有天门冬酰胺酶，能治疗白血病.
-
11
• 石刁柏干种子———我国首次植物上太空
• 7天后，卫星载着石刁柏种子返回地面。 由于干种子水分含量少，对环境的忍耐力 高，种子没有任何改变。