高中生物《转基因动物的培育》最新优秀PPT课件
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动物转基因技术 ppt课件
电击穿孔法
将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能 有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿 孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的 微小通道105～115μm ,这种通道能维持几毫秒到几秒,然后自行恢复。 在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞。 电穿孔的法的特点： 1理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官 2对导入的外源基因片段的大小没有限制 3电穿孔法操作简单快速,电穿孔的时间只有几秒钟,而且DNA片段不需要 特殊的纯化操作 缺点： 首先,外源基因表达持续的时间很短,虽然外源基因导入后最快可在215 小 时有表达,但大多1～2 月后表达量降至很低。外源基因表达的时间主要 由于所构建的表达载体和基因导入的靶细胞组织器官不同而存在巨大差 异。
医学研究
心血管疾病的研究 各种调节心血管功能的因子如转脂蛋白、转纤维蛋白溶酶原等都可通过转基因动物来了解 其生理功能及作用，建立如动脉粥样硬化、突发性高血压、静脉闭塞等转基因动物模型。 肿瘤学研究 肿瘤基因的发现是近10年来肿瘤学研究的重大突破，现已发现乳腺癌基因等100多个肿瘤 基因。实验证明，各种脊椎动物都携带肿瘤基因，在通常情况下并不引起细胞癌变，只有 在某些条件下才能被激活使癌细胞增生而导致癌变。建立带有肿瘤基因的转基因动物可了 解哪些组织对肿瘤基因转化活性敏感、肿瘤形成与其基因的关系、肿瘤基因生长分化影响 等等。 遗传病研究 通常是将功能正常的外源基因导入动物体的靶细胞内，用来弥补缺陷的基因，改变患病细 胞的遗传物质，进行基因治疗。相反的将显性疾病基因或一个、甚至多个外源基因人为地 导入动物体内，就可制备遗传性疾病的转基因动物模型，研究和治疗人类遗传性疾病。 免疫学研究 巴宾耐特(Babinet)发现虽然转基因小鼠产生HBsAg，但在6个月内没有任何病理变化，表 现为一种持续的带病毒状态。这些结果表明：乙型肝炎患者的肝细胞损伤不是由HBV的 HBsAg表达直接引起，而是通过对肝细胞膜上的病毒抗原发生免疫反应造成的。因此，可 以用转基因小鼠模型来研究免疫耐受与肝细胞损伤的关系以探讨发病机制。此外，转基因 小鼠还为研究第l和第Ⅱ类主要组织相容性抗原的功能提供了新手段。
《转基因动物》课件
转基因动物的产业 化
转基因动物的产业化现状
转基因动物在农业、 医药、环保等领域 的应用广泛
转基因动物产业化 面临技术、伦理、 法规等多重挑战
转基因动物产业化 需要加强技术研发 、伦理审查和法规 监管
转基因动物产业化 前景广阔，但需要 解决一系列问题
转基因动物的产业化前景
市场需求：随着人 们对食品、医药等 领域的需求不断增 长，转基因动物产 业化前景广阔。
伦理问题：公众对转基因动物 的接受程度和伦理争议
法规限制：各国对转基因动物 的法规限制和监管政策
市场风险：转基因动物的市场 接受度和竞争压力
转基因动物的社会 影响
转基因动物对人类健康的影响
转基因动物食品：可能含有新的过敏原，引发过敏反应 转基因动物药物：可能产生新的药物，治疗人类疾病 转基因动物实验：可能用于人类疾病的研究，提高医疗水平 转基因动物环境：可能对生态环境产生影响，影响人类健康
转基因动物的研究 进展
转基因动物的研究历程
转基因动物的研究现状
研究领域：基因编辑、基因表达调 控、基因功能研究等
应用领域：农业、医药、环境等领 域
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
研究进展：基因编辑技术不断成熟， 基因表达调控研究取得重要进展， 基因功能研究逐渐深入
研究挑战：伦理问题、安全性问题、 技术难题等
转基因动物对伦理道德的影响
基因编辑技术：改变动物基因，可能引发伦理道德争议 动物权益：转基因动物是否享有与人类同等的权益 生态平衡：转基因动物可能对生态系统产生影响，引发伦理道德问题 食品安全：转基因动物食品的安全性，可能引发伦理道德争议
转基因动物的未来 展望
转基因动物的技术发展趋势
转基因动物与克隆精精品PPT课件
模型 2、肿瘤转基因动物模型
3、代谢疾病转基因动物模型 （1）高歇氏病转基因动物模型 （2）家族性神经多发性淀粉样变
（FAP）转基因小鼠 （二）基因治疗的动物模型：
将外源生长激素基因导入“侏儒 症”小鼠——个头增大3倍，恢复生育 能力。
左侧为转移了大鼠生长激素基因的小鼠
1982年，Richard Palmiter 和 Ralph Brinster 领导 的一个小组将一个能够被锌调控的DNA元件与大鼠的生长激 素基因连在一起，并将其注射到了受精了的小鼠胚胎中， 从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。这些转基因小鼠 长期取食含有足量锌的食物后，就会长得非常大。转基因 小鼠的出现掀起了遗传学研究的新的浪潮。
第二节 克隆动物
一、克隆动物的概念—— 动物通过体细胞进行的无性生殖（也
称无性繁殖）以及由无性生殖形成的基因 型几乎完全相同的后代个体组成的群体。
世界卫生组织在关于克隆的非正式声 明中定义为：
遗传上同一的机体或细胞系（株）的 无性生殖。
二、动物克隆技术的基本方法 （一）胚胎分割 （二）细胞核移植：
6、 1989年，意大利拉维特拉纳运用精 子载体法转移外源性DNA，获得PSV2— CAT转基因小鼠。
7、我国1980年代开始转基因动物 研究，成功研制出转基因牛、小 鼠、猪、羊、兔、金鱼。
新进展：
2000年10月，世界首只 转基因猴在美国诞生， 取名“安迪”，这是世 界上首次培育成功转基 因灵长类动物。
料极少的转基因家畜。
（四）研制和生产生物活性物质：
将具有医学价值的生物活性物质
（如组织型纤溶蛋白元激活因子，tPA） 导入家畜或家禽的受精卵，从转基因 动物的体液如乳汁、血液、尿液、腹 水中收获基因产物。
3、代谢疾病转基因动物模型 （1）高歇氏病转基因动物模型 （2）家族性神经多发性淀粉样变
（FAP）转基因小鼠 （二）基因治疗的动物模型：
将外源生长激素基因导入“侏儒 症”小鼠——个头增大3倍，恢复生育 能力。
左侧为转移了大鼠生长激素基因的小鼠
1982年，Richard Palmiter 和 Ralph Brinster 领导 的一个小组将一个能够被锌调控的DNA元件与大鼠的生长激 素基因连在一起，并将其注射到了受精了的小鼠胚胎中， 从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。这些转基因小鼠 长期取食含有足量锌的食物后，就会长得非常大。转基因 小鼠的出现掀起了遗传学研究的新的浪潮。
第二节 克隆动物
一、克隆动物的概念—— 动物通过体细胞进行的无性生殖（也
称无性繁殖）以及由无性生殖形成的基因 型几乎完全相同的后代个体组成的群体。
世界卫生组织在关于克隆的非正式声 明中定义为：
遗传上同一的机体或细胞系（株）的 无性生殖。
二、动物克隆技术的基本方法 （一）胚胎分割 （二）细胞核移植：
6、 1989年，意大利拉维特拉纳运用精 子载体法转移外源性DNA，获得PSV2— CAT转基因小鼠。
7、我国1980年代开始转基因动物 研究，成功研制出转基因牛、小 鼠、猪、羊、兔、金鱼。
新进展：
2000年10月，世界首只 转基因猴在美国诞生， 取名“安迪”，这是世 界上首次培育成功转基 因灵长类动物。
料极少的转基因家畜。
（四）研制和生产生物活性物质：
将具有医学价值的生物活性物质
（如组织型纤溶蛋白元激活因子，tPA） 导入家畜或家禽的受精卵，从转基因 动物的体液如乳汁、血液、尿液、腹 水中收获基因产物。
《动物转基因技术》课件
生物制药与生物反应器
生物制药
利用动物转基因技术，可以生产出具有特定生物活性的蛋白质、酶等生物制品 ，用于治疗、诊断和预防疾病。
生物反应器
动物转基因技术还可以用于构建生物反应器，通过转基因动物的器官或组织作 为生物反应器，生产出大量的生物制品，降低生产成本和提高生产效率。
动物育种与改良
动物育种
利用动物转基因技术，可以对动物的 遗传物质进行改造和优化，培育出具 有优良性状的新品种。例如，转基因 猪、转基因牛等。
动物改良
通过转基因技术，可以改善动物的生 长性能、繁殖性能、抗病性能等性状 ，提高动物的产量和品质，为畜牧业 的发展提供有力支持。
05
动物转基因技术的安全性 问题
转基因动物的安全性评估
01
02
03
转基因动物的安全性评估是确保 转基因技术应用的重要环节，需 要从多个方面进行综合评估，包 括遗传稳定性、生物学特性、生 态影响等方面。
详细描述
转基因猪的实验研究主要通过胚胎移植、体 细胞核移植等技术手段，将外源基因导入猪 的受精卵或胚胎细胞中，从而获得携带外源 基因的转基因猪。这些转基因猪可用于研究 外源基因的表达、功能以及对生长发育、生 产性能等方面的影响。
转基因牛的实验研究
总结词
转基因牛是研究转基因技术的又一重要动物 模型，具有繁殖周期长、生产性能高、经济 价值大等优点，可用于提高牛的抗病能力和 生产性能等方面的研究。
安全性、毒理学等方面的评估。
评估过程中需要关注转基因食品的原料 来源、生产工艺、成分含量等方面的变
化，以及可能对人类健康的影响。
评估结果需经过严格的科学论证和审查 ，确保转基因食品的安全性和可控性。
转基因技术的伦理与法律问题
转基因动物的生产 PPT课件
16
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因生物40591838454页PPT文档
It is different from somatic cell gene therapy, transgenic organisms is to alter the germ line, it is inherited following reproduction
11.2
ClassifA virus is known and neither is ideally suited for gene cloning Caulimoviruses, Cauliflower mosaic virus, CaMV, 花椰菜 花斑病毒 Geminiviruses，GMV,番茄金花叶病毒
Permit growth of crops in areas that are physically unsuitable at present
Increase efficiency of energy conversion
Confer ability to fix atmospheric nitrogen to a wider range of species Improve nutritional value of storage proteins by protein engineering Extend shelf-life of fruits and vegetables
Make fruits and vegetables more appealing with respect to colour, shade, size
外植体:植物转基因的受体 外植体的选择:
优先叶片、子叶、胚轴等 年龄和最佳感受态期 转化体易于组织培养，易再生 易转化分生组织感受态细胞所在的部位及数量
用于转化的植物细胞需具备：
11.2
ClassifA virus is known and neither is ideally suited for gene cloning Caulimoviruses, Cauliflower mosaic virus, CaMV, 花椰菜 花斑病毒 Geminiviruses，GMV,番茄金花叶病毒
Permit growth of crops in areas that are physically unsuitable at present
Increase efficiency of energy conversion
Confer ability to fix atmospheric nitrogen to a wider range of species Improve nutritional value of storage proteins by protein engineering Extend shelf-life of fruits and vegetables
Make fruits and vegetables more appealing with respect to colour, shade, size
外植体:植物转基因的受体 外植体的选择:
优先叶片、子叶、胚轴等 年龄和最佳感受态期 转化体易于组织培养，易再生 易转化分生组织感受态细胞所在的部位及数量
用于转化的植物细胞需具备：
118第十八章 转基因动物48张幻灯片
2
转基因动物是实验动物学与分子生物学 紧密结合的成果，是在胚胎和重组DNA技术 发展的基础上产生的。能在生物体中接近真 实地再现某一特定基因的表达和所导致的后 果，把复杂系统简化进行研究，是目前层次 最高的究外源基因在整体 动物中的表达调控规律，能够观察基因调控的整 体效应。近十年来，转基因动物已被广泛应用于 脂蛋白代谢紊乱与动脉粥样硬化 （atherosclerosis,AS）的病因、发病机理及治 疗等方面研究，取得了令人瞩目的研究成果。
25
带有人生长激素基因的 转基因小鼠 正常小鼠
26
2000年，法国科学家利用转基因技术“制造”出了一只可 以发出绿色荧光的兔子“Alba”。应用了受精卵显微注射技 术，从水母身上采集了荧光蛋白，基因改造后，使它的发 光率提高了两倍，再将该基因转入到兔子的受精卵中，由 此培养出了会发光的兔子Alba。在普通光线下，它看上去 与其它同类没有区别，但是在较暗的光线下，它的身体就 会放射出奇异的绿光来。
13
一、DNA显微注射技术
2003 John Wiley and Sons Publishers
优缺点： 1.可靠性高、重复性好 2.对于小鼠来说，产生转基因动物的效率比较高 3.导入DNA片段的大小和类型不受限制 4.转基因在代与代之间传递的稳定性好 5.整合位点的随意性可能对转基因表达造成影响 6.可能会出现不希望的插入突变 14 7.开发装置和技术的花费大时间长 1980 PNAS 77,7380-7384
5
第二节 建立转基因动物的方法
1．目的基因的设计 在进行转基因动物研究时，首先要针对实验 目的设计待转移的目的基因。基因可以是单一基 因，也可来自于不同基因（拼接基因）。从结构 上看，待转基因可分为结构基因与调控序列两部 分。
转基因动物PPT.
本章目录
6.1 动物转基因技术 显微注射法 逆转录病毒法 胚胎干细胞法 精子载体法 体细胞核移植法
6.2 提高转基因效率的策略 6.3 转基因动物的应用 转基因动物在生命科学基础研究中的应用 转基因技术在动物育种中的应用 转基因动物在医药科学研究中的应用
6.4 转基因动物研究存在的问题及展望
毒。
受体 吞噬 脱外壳 逆转录 核蛋白复合
体
有丝分裂 复合体进入
核
病毒DNA－蛋白复合体中含有由一个病毒DNA的pol基因
所编码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，
而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂
的S期。 不吃腐烂变质的食物
主要面试者应严格控制面试的进程，为了在有限的时间内详细了解应聘者及其知识背景，一定要禁止任何人游离面试主题。（主要面试者的问题围绕简 历展开，技术方面的专家主要询问相关经验，人事经理对细节进行核实。） 与客户建立互信关系 a冬眠期间的蛇、青蛙等突然出洞。 b白天，猫头鹰、黄鼠狼会频繁活动。 客户不希望什么
一. 显微注射法
在显微镜下将体外构建的外源目的基因，用注射针注射到动物受 精卵中，使之与动物基因组整合，从而得到转基因动物的方法。
1、目的DNA的准备
构建目的基因的表达载体：目的基因应包含完整的ORF,顺式调控
序列，加尾信号。
线性DNA分子的准备
DNA浓度：1-3μg/ml .
2、小鼠的准备和要求
标记性状
标记性状鉴 定转基因果 蝇
显微注射法的效率
每天可注射几百个卵，但大约只有66%能存活；移入 子宫后，大约25%的受精卵能发育成幼鼠；其中又有 大约25%左右的幼鼠是转基因鼠。
理想情况下，30－50/1000 一般情况下， 1/1000
6.1 动物转基因技术 显微注射法 逆转录病毒法 胚胎干细胞法 精子载体法 体细胞核移植法
6.2 提高转基因效率的策略 6.3 转基因动物的应用 转基因动物在生命科学基础研究中的应用 转基因技术在动物育种中的应用 转基因动物在医药科学研究中的应用
6.4 转基因动物研究存在的问题及展望
毒。
受体 吞噬 脱外壳 逆转录 核蛋白复合
体
有丝分裂 复合体进入
核
病毒DNA－蛋白复合体中含有由一个病毒DNA的pol基因
所编码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，
而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂
的S期。 不吃腐烂变质的食物
主要面试者应严格控制面试的进程，为了在有限的时间内详细了解应聘者及其知识背景，一定要禁止任何人游离面试主题。（主要面试者的问题围绕简 历展开，技术方面的专家主要询问相关经验，人事经理对细节进行核实。） 与客户建立互信关系 a冬眠期间的蛇、青蛙等突然出洞。 b白天，猫头鹰、黄鼠狼会频繁活动。 客户不希望什么
一. 显微注射法
在显微镜下将体外构建的外源目的基因，用注射针注射到动物受 精卵中，使之与动物基因组整合，从而得到转基因动物的方法。
1、目的DNA的准备
构建目的基因的表达载体：目的基因应包含完整的ORF,顺式调控
序列，加尾信号。
线性DNA分子的准备
DNA浓度：1-3μg/ml .
2、小鼠的准备和要求
标记性状
标记性状鉴 定转基因果 蝇
显微注射法的效率
每天可注射几百个卵，但大约只有66%能存活；移入 子宫后，大约25%的受精卵能发育成幼鼠；其中又有 大约25%左右的幼鼠是转基因鼠。
理想情况下，30－50/1000 一般情况下， 1/1000
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转基因试管牛的培育过程
从甲雌牛 卵巢中获 得卵细胞 从乙雄牛 精巢中获 得精子
含人血白蛋白基 因的重组DNA
B
A
受精卵
C
卵裂
1
D
2
3
转基 因牛 “滔 滔”
注：1、2、3为胚胎发育时期；ABCD为生物操作技术
转基因试管牛的培育过程
从甲雌牛 卵巢中获 得卵细胞 从乙雄牛 精巢中获 得精子含人血白蛋白基 因的 Nhomakorabea组DNA
转基因动物的培育
青海省玉树县2010年4月14日晨发生两次地震，最高震级7.1级，地震震中位于县 城附近。截至4月20日17时，玉树地震遇难人数为2064人，失踪175人，受伤12135人 ，其中重伤1434人。为表达全国各族人民对青海玉树地震遇难同胞的深切哀悼，2010 年4月20日国务院决定，2010年4月21日举行全国哀悼活动，全国和驻外使领馆下半旗 志哀，停止公共娱乐活动。
C C T A G
动 手 试 一 试
形成相同且互补的黏性末端
G G A T C DNA连接酶 C C T A G
课堂巩固
1、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒， 便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是 一G↓GATCC一，限制酶II的识别序列和切点是一↓GATC一。 根据图示,判断下列操作正确的是（ A ） A．质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶II切割 B．质粒用限制酶II切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶II切割
含人血白蛋白基 因的重组DNA
显微 注射
如果想要快速繁殖转 基因牛，还可以辅以 其他什么技术？
受精卵
胚胎 体外 培养
卵裂
桑椹胚
胚胎 移植
囊胚
原肠胚
转基 因牛 “滔 滔”
思考：如何检测转基因试管牛是否含有人血白蛋白 基因和人血白蛋白基因是否表达？
基因表达的途径 （ 1）内容：
转录 翻译
DNA mRNA 蛋白质 ①检测转基因生物的染色体 DNA上是否含有目的基因
1999年2月，上海遗传研究所宣布转基因试管牛“滔 滔”诞生，其体内被检测到带有人的血清白蛋白基因，这项 成果被评为当年“中国十大科技进展”之一。
中国工程院院士、课题组 负责人曾溢滔教授 (左)
我国首例转基因试管牛“滔滔”。
转基因试管牛的培育过程
据曾溢滔教授介 绍：将人血清白蛋白 （hALB）基因通过显 微注射将其导入经过 体外受精（IVF）的奶 牛受精卵中，体外培 养到桑椹胚后期，将 整合胚移植于受体母 牛，足月分娩产下1头 含有人血清白蛋白基 因整合的转基因试管 牛“滔滔”。
（关键）
②检测目的基因是否转录出了mRNA ③检测目的基因是否翻译成蛋白质
•（2）常用的技术：
•①DNA分子杂交技术－－DNA与DNA杂交
•②分子杂交技术－－DNA与RNA杂交 •③蛋白质分子（抗原－抗体）间的杂交
课堂巩固
2、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。 下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（ D ） A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
思考：2 1、在构建含人血白蛋白基因的重组 DNA的过程中是否只有用同一种限制性核酸 的过程中需要借助哪些工具酶？ 内切酶切割的黏性末端才能连接？
G G A T C C C C T A G G
G A T C C T A G
限制酶Ⅰ切割
G G A T C C G
限制酶Ⅱ切割
G A T C
C T A G
B
A
受精卵
C
卵裂
桑椹胚
D
囊胚
原肠胚
转基 因牛 “滔 滔”
注：1、2、3为胚胎发育时期；ABCD为生物操作技术
想一想
获取目的基因的方法有哪些？
①人工化学方法合成目的基因，或用聚合酶链式反 应(PCR)技术扩增目的基因 （目的基因的序列已知） ②从基因中获取目的基因 （目的基因的序列未知）
资料：
卵母细 胞培养
试管
胚胎体外培养
胚胎移植
受体母牛
供体母牛
新鲜或解冻 的精液
……同期发情……
雌性激素 促性腺激素
获能 无需任 何处理 处理
供体公牛
超数排卵 配种 早期胚胎 受精卵
未配种配种 胚胎移植
受精卵
妊娠检查
分娩（胚胎移 植的犊牛）
转基因试管牛的培育过程
从甲雌牛 卵巢中获 得卵细胞
体外 受精
从乙雄牛 精巢中获 得精子
5‘ 3‘
3‘
5‘
• 什么叫黏性末端？
当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切 开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切 口，带有几个伸出的核苷酸的单链，他们 之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末 端。
限制性核 酸内切酶
氢键
磷酸二酯键
DNA连接酶 DNA聚合酶
解旋酶
资料：
含人血白蛋白基因的重组DNA： 曾溢滔教授等人构建了含人血清白 蛋白（hALB）基因的cDNA全序列、 内含子1以及山羊β-酪蛋白基因启 动子和5′端上游调控序列在内的乳 腺表达载体pcDNA3.1-CALBm
人血白蛋白是从健康人的血液中提取的，可直接静脉注 我国人血清白蛋白每年临床需要110-120吨，目前血浆 射到病人体内，主要用于失血创伤、烧伤引起的休克，脑水 供应不足，市场缺口高达 60吨至80吨。我国每年临床和疫苗 肿及损伤引起的颅压升高，肝硬化及肾病引起的水肿或腹水， 辅料需要 150—170吨人血白蛋白，完全从血浆中提取，相当 癌症术后恢复等方面的治疗，是临床急救的一种特殊药品。 于要 2亿人年均献血100毫升。 因其主要用于危重病人及大手术患者的术后康复，素有“救 命药”之称。
含人血白蛋白基因的重组DNA： 曾溢滔教授的课题组构建了含人血 清白蛋白（hALB）基因的cDNA全序 列、内含子1以及山羊β-酪蛋白基 因启动子和5′端上游调控序列在内 的乳腺表达载体pcDNA3.1-CALBm
思考：1、在构建含人血白蛋白基因的重组 DNA的过程中需要借助哪些工具酶？
大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别 GAATTC序列，并在G和A之间切开（水解 DNA分子骨架的磷酸二酯键）。
转基因试管牛的培育过程
从甲雌牛 卵巢中获 得卵细胞
体外 A 受精
从乙雄牛 精巢中获 得精子
含人血白蛋白基 因的重组DNA
显微 B 注射
受精卵
卵裂
桑椹胚
囊胚
原肠胚
D 胚胎 C 胚胎 移植 体外 培养1、2、3为胚胎发育时期；ABCD为生物操作技术 注：
转基 因牛 “滔 滔”
大家来找茬
体外受精
从卵巢中获得 卵母细胞