雅培生化大型生化仪上岗培训(PPT 64页)

终点法 /速率法 –试剂空白
定标过程使用 R1 + R2 + (Sample) = Water, Saline or Calibrator A
错误代码
报警解释
Blank Absorbance
Range
BLK
一个或多个空白定标的吸光度超出BLK 限定的范围
Absorbanc e
BLK Abs Range
Chec k
N
解释
浓缩试剂使用水或稀释液的量
Total Volume in Cuvette: 反应杯最小量及最大量
Volume Tolerance: Volume range Min/Max Range Precision 20 to 50 µL nominal +/- 5% </= 2 % 51 to 345 µL nominal +/- 2.5% </= 0.5%
Glucose = 5.9 s
Total Protein = 14.8 s
Triglycerides = 14.2 s
Lambert-Beer's Law
当一束平行的单色光通过一定均匀的某吸 收溶液时，该溶液对光的吸收程度 与吸光 物质的浓度c和光通过的液层厚度b的乘积 成正比。这种关系称为朗伯-比尔定律，其 数学表达式为 。
反应类型–终点法2
Total Abs – Self blank Abs = D Abs 未知样本浓度= D Abs x cal Factor
A2
Absorbance
Total Abs D Abs
self blank 可读点范围
A1 Self blank Abs
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
1 – 16 (Blank)
17 – 33 (Reaction)
- 0.1 to 3.0 Abs
项目反应类型
终点法:
End – up End – down
速率法 (Kinetik):
Rate – up Rate - down
反应类型 –终点法1
终点法:
反应达到平衡 单双试剂都可以使用 双试剂推荐使用Self blank
** Water- and reagent volume entered determine the dilution ratio
光路详述
波长
光径 测量体积:
读数点: 吸光度范围 吸光度线性
Specifications
16
5 mm Min. 160 µL Max. 360 µL
1 – 33 (每 18 秒)
2 to 35 µL
0.1 µL steps
DS Vol = Diluted sample Volume:稀释样本
2 to 15 µL
0.1 µL steps
Reagent 1 Volume R1 试剂量:
Reagent 2 Volume R2 试剂量 :
Smartwash Volume 智能冲洗洗液量 Water/Diluent Vol for Conc. Reagent:
S R1
R2
正常样本
Abs Range Substrate Depletion 高浓度或高活性样本
Photometric Points
样本稀释
加样本 ( 2.0 to 35.0 µL)
混匀100 µL 或ห้องสมุดไป่ตู้更多
用来稀释的 用量反应的
反应杯
反应杯
4.5 s x 1 cycle
加入稀释液 (10 to 345 µL
16 17
t1
R2 addition
= Reaction Start
t2
33
Time
Abs reading points
反应类型– 速率法 1 速率法 :
酶类 - 使用因子
物质 - 定标曲线 - 未达到平衡时段
反应类型– 速率法 2
Absorbance
For Enzymes – 因子用于计算
Sample Dispense + R1
R2 addition =Reaction Start
Time
Absorbance
反应类型–终点法2
待测物浓度在定标的基础上进行计算
Conc. sample (unknown) = (A1 – A2) x cal factor A2
A1
1
Sample Dispense + R1
4.5 s x 1 cycle
加入稀释后的样本 ( 2.0 to 15.0 µL)
4.5 s x 2 cycles
样本稀释
CC Application Training
空白选 择
Reagent Blank 试剂空白 (R1 + R2 + Water as Sample)
Self - Blank
www,westgard,cin.qcapp4A2lbuAmlb BinCBGC15G.5 Albumin BCP
= s=
15.5 24.3
s s
Total Bilirubin = 11.9 s
Calcium = 10.1 s
Cholesterol = 9.1 s
Creatinine = 5.8 s
20 to 345 µL
1.0 µL steps
20 to 345 µl
1 µL steps
10 to 345 µL
1.0 steps*
0 to 345 µL
1.0 µL steps**
Min. 160 µl
Max. 360 µl * Not including over aspiration volume
Photometric Point
First Mix
Second Mix
CC Application Training
定标
Flaggings
定标的报警设置
7个检测功能:
试剂空白吸光度检测
定标重复次数间的离散度检测 斜率检测 Factor Comparison Check * SD 检测 Monotonic Check * Approximation Convergence Error *
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
Sample Dispense first Reagent Dispense First Mix
Second Reagent Dispense Second Mix
6 Sigma 在临床生化检测的应用:
Architect c16000
• Kasal C, et al. Evaluation of general chemistry
assays on the Abbott Architect c16000 clinical
chemistry system. Clin Chem 2007;53(S);A175.
(R 1 and Sample)
终点法 /速率法 –试剂空白
定标过程使用 R1 + R2 + (Sample) = 水, 生理盐水或定标液 A
错误代码
报警解释
Blank Absorbance
Range
BLK
一个或多个空白定标的吸光度超出BLK 限定的范围
Absorbanc e
BLK Abs Range
Photometric Points
定标－离散度检测
Absorbance
代码
解释
calibrator deviation
Calibrator absorbance
range
DEV
定标几次重复超出限定
C1
C2
Concentration
定标－ 斜率检测
Absorbance x
错 误 代 码
Slope SP
Photometric Points
终点法 - SELF BLANK
Main Read Time Option
Absorbance
Self-Blank
DAbs
1
5
10
16 17 20
25
30
33
Sample Dispense first Reagent Dispense
Second Reagent Dispense
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
Sample Dispense first Reagent Dispense First Mix
Second Reagent Dispense Second Mix
关于反应时间
• 反应时间包括反应杯 转盘的转动，转动的 时间和转盘周围组件 的位置
• 每次转动都发生在特 定的时间和到达特定 的位置
• 反应转盘按逆时针方 向每4.5秒旋转近1/4 圈（41个反应杯的位 置）使反应杯到达特 定位置
关于反应的几个点
1. 起始位置，样品探针将样品吸入反 应杯
2.
R1位置，试剂探针1将1试剂
（或样品稀释液）加入反应杯
3. 无动作
4. 混匀位置1，样品和1试剂（或样品 稀释液）被混匀
4~5.反应杯经过光路系统被读取吸光 度值
5. 以上总共转了4个1/4圈共164个反应 杯位置，此位置为起始1号位置的后 一个反应杯的位置（总共有165个反 应杯）。如果样品需稀释，在此位
置样品探针将稀释样品吸入放入1号 位置的反应杯。
Reaction (sample + R1+ R2)
132 136
last optic read
reagent 2
sample & R1
mix
sample
wash start
start
4.5"
9"
4.95' blank read option
4.5"
4.8'
18"
react. readtime / flex rate read option
31.如此样品进行ICT检测，在此位置 被ICT系统的探针从反应杯吸入稀释 样品进行检测
67.R2位置，试剂探针2将2试剂加入反 应杯（此前时间为5.1分钟）
68.混匀位置2，样品/试剂1和试剂2被
混匀
REACTION TIME TABLE
Cuvette position:
1
2
4
67 68
Sample + R1 (blank reading)
16 17
R2 addition = Reaction Start
33 Time
Abs reading points
雅培诊断
Flex Time Reading
酶的线性扩展
样本稀释
速率法 - FLEX TIME READING 弹性速
率 Absorbance
Flex Read Time
Main Read Time
未知待测物浓度 = D Abs 变化 / min x Enzyme Factor or D Abs 变化/ sec x Factor
1
Sample Dispense + R1
A5 A6 A7 A8... A1A2 A3 A4
D Abs change / min = U/L D Abs change /sec = µkat/L
read point 17 read point 18
read point 1
Total reaction time = 9.9 min. (same for each assay)
读数点示意图
雅培诊断
仪器详述
分配组件加液量
光路 反应时间 常见报警
各分配组件加液量详述
范围
步进
Sample Volume 样本体积:
Options
340 – 380 – 404 – 412 – 444 – 476 –
500 – 524 – 548 – 572 – 604 –628 –
660 – 700 – 748 - 804
Mono-/Bichromatic(单或双)
Mono Reag.: 1 – 33 points
Bi Reag.:
A = Kbc c=A *1/kb F=Kb 光的A称强为度吸，光b为度光，通I0和过I的分液别层为厚入度射，光c和为透吸射 光物质的浓度，K为比例常数。b的单位为 cm, 若c的单位以mol/L表示，则用ε表示K，
光学检测原理
• 光路系统为直接光检测，后分光，采用凹 面衍射光栅，有16个检测波长。光路系统 主要组成有：卤钨灯，隔热玻璃，凸镜， Shutter，狭缝，反光镜，光栅，线性硅 二极管矩阵，前置放大板，数据处理板和 CPU板等。光路组件将光聚焦后射入反应 杯，当反应杯中的物质发生化学反应时， 其吸光度会发生变化。光经狭缝到光栅后 被分成不同的波长，线性硅二极管矩阵根 据不同波长进行检测。用单波长或双波长 测定每个读数点，一般分析项目都使用双