离体蛙心灌流实验PPT
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生理实验课件：蛙心灌流
收缩力↓
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
3. 3%CaCl2（1～2滴）
[Ca2+ ]o↑ Ca2+内流↑
[Ca2+]i↑
*舒张期Ca2+与肌钙蛋 白不完全解离，产生 Ca2+强直，基线上移。
兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照 4. 1%KCl（1滴）
AP平台期缩短 Ca2+内流↓
自律细胞：(特殊传导系统)： 窦房结P细胞(pacemaker cell) 浦肯野细胞(Purkinje cell) 有兴奋性、传导性，自律性，收缩功能基本
丧失
(一)心室肌的静息电位和动作电位 1.静息电位(resting potential)：-90mv其形成机制与骨骼肌和
神经纤维相似。 2. 动作电位(action potential)：
与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓
[Ca 2+ ]i↓ E-C耦联↓
收缩力↓
最大复极电位↑ 4期K+外流↑
自律性↓
心率 ↓
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
7. 3%乳酸（1滴）
乳酸 碳酸氢钠
ห้องสมุดไป่ตู้
H+与Ca 2+竞争肌钙蛋白，Ca2+不能与 肌钙蛋白结合，收缩力↓。
8. 2.5％NaHCO3 （2-4滴）
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
5. 1:10000E（1～2滴）
与心肌β1受体结合
cAMP
Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑
4期 If 、I CaT通道↑ 4期自动去极速度↑
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
3. 3%CaCl2（1～2滴）
[Ca2+ ]o↑ Ca2+内流↑
[Ca2+]i↑
*舒张期Ca2+与肌钙蛋 白不完全解离，产生 Ca2+强直，基线上移。
兴奋-收缩耦联↑ 收缩力↑
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照 4. 1%KCl（1滴）
AP平台期缩短 Ca2+内流↓
自律细胞：(特殊传导系统)： 窦房结P细胞(pacemaker cell) 浦肯野细胞(Purkinje cell) 有兴奋性、传导性，自律性，收缩功能基本
丧失
(一)心室肌的静息电位和动作电位 1.静息电位(resting potential)：-90mv其形成机制与骨骼肌和
神经纤维相似。 2. 动作电位(action potential)：
与心肌M受体结合 K+外流↑, Ca2+内流↓
[Ca 2+ ]i↓ E-C耦联↓
收缩力↓
最大复极电位↑ 4期K+外流↑
自律性↓
心率 ↓
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
7. 3%乳酸（1滴）
乳酸 碳酸氢钠
ห้องสมุดไป่ตู้
H+与Ca 2+竞争肌钙蛋白，Ca2+不能与 肌钙蛋白结合，收缩力↓。
8. 2.5％NaHCO3 （2-4滴）
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
【结果分析】
1. 任氏液：正常对照
5. 1:10000E（1～2滴）
与心肌β1受体结合
cAMP
Ca2+内流↑ 肌浆网释放Ca2+↑
4期 If 、I CaT通道↑ 4期自动去极速度↑
考研课件生理学实验蛙心灌流hanPPT
4.加入肾上腺后，曲线幅度明显加大，可见蛙心收 缩增强，基线下降，说明心脏舒张完全，从而提 高心输出量。肾上腺具有正性变力，正性变时， 正性变传导作用。
机理为：肾上腺与心肌细胞上的β受体相结合， 激活腺甘酸环化酶，使胞内cAMP浓度增加，通过 下游的信号转导机制使得钙通道开放的概率增加， 平台期钙内流增加，心肌收缩能力增强。 另外，肾上腺还有促使肌钙蛋白与Ca2+的释放， 提高肌浆网膜对Ca2+的回收，使心肌舒张速度增 快，舒张完全。
正常蛙心收缩曲线
• 曲线幅度：代表心脏收缩的强弱。 • 曲线密度：代表心跳频率。 • 曲线的规律性：代表心跳的节律性。 • 曲线的基线：代表心室舒张的程度。 • 曲1. 心肌的收缩活动是由钙离子触发的，由于心肌细胞 的肌浆网不发达，故心肌收缩的强弱与细胞外钙离 子的浓度成正比。任氏液中含有0.65%的NaCl，也 含有Ca离子，但全部换成0.65%NaCl，没有Ca离 子，造成灌流液中缺少钙离子，以致心肌细胞动作 电位2期内流的钙离子减少，胞浆内Ca离子浓度减 少，所以心肌的收缩活动减弱。如果长时间用0.65 ％的NaCl溶液灌注蛙心，心脏最终会停止收缩，但 心肌仍能产生动作电位，这种现象称为兴奋－收缩 脱耦联，是心肌细胞内缺少Ca离子的表现。
目的
学习离体蛙心的灌流方法
观察钠、钾、钙三种离子、肾上腺素、乙 酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
操作步骤：
• 破坏脑和脊髓 • 开胸，暴露心脏 • 穿两根线，一线在两根主动脉下方，另外一
根线穿在左主动脉下方，接扎左主动脉
• 左主动脉根部剪口，插管：先入主动脉圆锥， 插管稍稍后退，旋转90度，在心室收缩期 将插管插入心室，此时瓣膜打开，容易进入。 如插好，插管内的任氏液面会随心室的舒缩 而上下波动。还会喷到插管内血液
离体蛙心灌流及某些离子幻灯片PPT
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.观察心脏的解剖结构
（腹面）
（背面）
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一
松结；在左主A下再穿一 线结扎。
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备
1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一 斜口，将插管插入动脉 圆锥， 在心室收缩时 将插管插入心室，结扎 固定。
实验对象 蟾蜍
实验仪器设备
RM6240生物采集系统 张力换能器 蛙类手术器械 蛙心插管 试管夹 缝合线 蛙心夹 铁支架 滴管
实验药品
任氏液 l％KCl 3％CaC12 l：10,000 E l：10,000 ACh 3％乳酸 2.5％NaHCO3
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.破坏脑和脊髓 2.暴露心脏
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上 腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变 力、正性传导、正性变时等效应。
实验目的
1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。
2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ 肾上腺素（E）
乙酰胆碱（Ach）
对心脏活动的影响
7. 3%乳酸灌流
H+与Ca2+竞争肌钙蛋白， Ca2+不能与肌钙蛋白结
合，心肌收缩力↓。
思考题
通过本次实验结果，分析离子、药物和递对 心搏曲线有什么影响？为什么？
收缩力↑
结果分析与讨论
3. 1%KCl灌流： [K+ ]o↑
AP平台期缩短 Ca2+内流↓
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
生理课蛙心灌流-PPT课件
滴加1:10000乙酰胆碱
结果分析——ACh的作用
ACh与心肌细胞膜M受体结合 K+通透性↑，Ca2+通透性↓ K+外流↑
3期K+外流↑、最大复极电位↑ 最大复极电位与阈电位差距↑ 自律性↓→心率 ↓
Ca2+内流↓ [Ca2+]i↓
兴奋-收缩耦联↓
收缩力↓
滴加2%氯化钙
结果分析——CaCl2的作用
曲线的疏密 —— 心率的快慢
曲线的规律性 —— 心跳的节律性 曲线的基线 —— 心室舒张的程度
滴加1:10000肾上腺素
结果分析——Adr的作用
Adr与心肌1受体结合 cAMP↑ 激活心肌膜上的钙通道 Ca2+内流↑、肌浆网释放Ca2+↑
心率加快、房室交界传导加快、 心房肌心室肌收缩能力加强 心肌收缩收缩力↑
[Ca2+]o ↑ → Ca2+内流↑ → [Ca2+]i↑ → 兴奋—收缩耦联↑ →收缩力↑ 舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离，基线 上移，产生Ca2+强直
滴加1%氯化钾
结果分析——KCl的作用
[K+]o ↑
K+与Ca2+在心肌细胞膜上有 膜内外K+浓度梯度减小 竞争性抑制作用 工作细胞静息电位绝对值减少
识别静脉窦、心房和心室
观察心脏结构
（腹面）
（背面）
两栖类动物的心脏为两心房、一心室。
心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动 节律最高，心房次之，心室最低。 正常情况下，心脏的活动节律服从静脉 窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心 房、心室。
4、主动脉干的后方备线
（腹面）
5、左动脉干根部向心方向剪一斜口
课件蛙心灌流
3次，以免心肌受损，而且必须待心脏恢复正常后方能进行下一
步实验，以形成前后对照。
滴加药品和换取新鲜林格溶液时，须及时标记，以便观 察分析。
化学药物作用不明显时，可再适量滴加，密切观察药物剂 量添加后的实验结果。
随时用林格溶液润湿蛙心表面。
第18页，共20页。
◆ 思考与探索
设计一个新的、更简单的离体心脏插管方法。 设计一个兔心离体灌流的方法。 设计一个实验，用于了解某种药物对心房肌收缩力与
林格溶液， 4％CaCl2，4％KCl，0.01％肾上腺素，0.01％乙酰 胆碱（Ach），0.1%普萘洛尔， 0.1%阿托品
八木氏套管
万能滑轮
第6页，共20页。
◆ 实验步骤
离体蛙心的制备 暴露心脏：
取一只蟾蜍，双毁髓后背位固定于蛙板上。剪开 胸腹部皮肤、肌肉，剪断左右乌喙骨和锁骨。将 整个胸腔暴露。
第10页，共20页。
◆ 实验步骤
* 标本与仪器连接：
用蛙心夹在心脏舒张期夹住心尖部 ，蛙心夹上的棉线通过万能滑轮转 换后与张力换能器相连。
第11页，共20页。
斯氏插管法
斯氏插管法 仪器连接
第12页，共20页。
◆ 实验步骤
观察离子对心脏活动的影响： 打开软件→选择实验（实验→循环→蛙心灌流）→开始示 波 →开始记录 →记录正常心搏曲线。 向静脉插管内林格溶液中滴加4％CaCl2 2滴，观察心搏出现 变化后立即将灌流液全部吸出，用新鲜林格溶液换洗2－3
↓
正常心搏曲线
↓
4％CaCl2， 6滴 ↓一旦出现现象
立即换洗，2-3次
↓ 正常心搏曲线
↓
4％KCl， 1-2滴
↓一旦出现现象
立即换洗，2-3次
步实验，以形成前后对照。
滴加药品和换取新鲜林格溶液时，须及时标记，以便观 察分析。
化学药物作用不明显时，可再适量滴加，密切观察药物剂 量添加后的实验结果。
随时用林格溶液润湿蛙心表面。
第18页，共20页。
◆ 思考与探索
设计一个新的、更简单的离体心脏插管方法。 设计一个兔心离体灌流的方法。 设计一个实验，用于了解某种药物对心房肌收缩力与
林格溶液， 4％CaCl2，4％KCl，0.01％肾上腺素，0.01％乙酰 胆碱（Ach），0.1%普萘洛尔， 0.1%阿托品
八木氏套管
万能滑轮
第6页，共20页。
◆ 实验步骤
离体蛙心的制备 暴露心脏：
取一只蟾蜍，双毁髓后背位固定于蛙板上。剪开 胸腹部皮肤、肌肉，剪断左右乌喙骨和锁骨。将 整个胸腔暴露。
第10页，共20页。
◆ 实验步骤
* 标本与仪器连接：
用蛙心夹在心脏舒张期夹住心尖部 ，蛙心夹上的棉线通过万能滑轮转 换后与张力换能器相连。
第11页，共20页。
斯氏插管法
斯氏插管法 仪器连接
第12页，共20页。
◆ 实验步骤
观察离子对心脏活动的影响： 打开软件→选择实验（实验→循环→蛙心灌流）→开始示 波 →开始记录 →记录正常心搏曲线。 向静脉插管内林格溶液中滴加4％CaCl2 2滴，观察心搏出现 变化后立即将灌流液全部吸出，用新鲜林格溶液换洗2－3
↓
正常心搏曲线
↓
4％CaCl2， 6滴 ↓一旦出现现象
立即换洗，2-3次
↓ 正常心搏曲线
↓
4％KCl， 1-2滴
↓一旦出现现象
立即换洗，2-3次
蛙类离体心脏灌流PPT课件
直接引用
直接引用参考文献中的原文或数据，需要在文中注明出处，并在末尾列出相应的参考文献 。
THANKS
感谢观看
使用蛙心夹夹住心脏，确保心脏保持一定的张力， 便于插管。
实验方法与步骤
插管
将蛙心插管插入心脏， 确保插管与心脏紧密 连接，无漏液现象。
灌流
将灌流装置与插管连 接，打开灌流装置， 使生理盐水或其他实 验试剂流入心脏。
观察与记录
观察心脏的跳动情况， 记录相关数据，如心 率、收缩压等。
实验结束
实验结束后，断开灌 流装置与插管的连接， 取出插管，用生理盐 水冲洗心脏，取出蛙 心夹，取出心脏。
实验的局限性
我们指出了实验的局限性， 包括实验条件、样本量等 方面的问题。
04
实验结论与展望
实验结论
实验表明，蛙类离体心脏灌流实 验是一种可靠的生物学实验方法， 可用于研究心脏生理和药理机制。
在实验过程中，我们观察到了心 脏的收缩和舒张过程，以及药物 对心脏功能的影响，证明了该实
验方法的可行性和有效性。
通过深入研究蛙类心脏的生理和 药理机制，可以为人类心脏相关 疾病的防治提供更多有益的思路
和方法。
未来发展方向
我们计划进一步优化实验条件和方法， 提高实验的准确性和可靠性，为更多 的科研工作者提供更好的服务。
在未来的发展中，我们将不断更新实 验技术和方法，加强与其他科研机构 的合作与交流，共同推动相关领域的 发展和进步。
实验注意事项
实验前应仔细检查所有实 验材料是否完好，如有损 坏应及时更换。
在实验过程中要保持安静， 避免干扰到心脏的正常跳 动。
插管时要小心操作，避免 损伤心脏组织。
在灌流过程中要保持恒温， 以免影响实验结果。
直接引用参考文献中的原文或数据，需要在文中注明出处，并在末尾列出相应的参考文献 。
THANKS
感谢观看
使用蛙心夹夹住心脏，确保心脏保持一定的张力， 便于插管。
实验方法与步骤
插管
将蛙心插管插入心脏， 确保插管与心脏紧密 连接，无漏液现象。
灌流
将灌流装置与插管连 接，打开灌流装置， 使生理盐水或其他实 验试剂流入心脏。
观察与记录
观察心脏的跳动情况， 记录相关数据，如心 率、收缩压等。
实验结束
实验结束后，断开灌 流装置与插管的连接， 取出插管，用生理盐 水冲洗心脏，取出蛙 心夹，取出心脏。
实验的局限性
我们指出了实验的局限性， 包括实验条件、样本量等 方面的问题。
04
实验结论与展望
实验结论
实验表明，蛙类离体心脏灌流实 验是一种可靠的生物学实验方法， 可用于研究心脏生理和药理机制。
在实验过程中，我们观察到了心 脏的收缩和舒张过程，以及药物 对心脏功能的影响，证明了该实
验方法的可行性和有效性。
通过深入研究蛙类心脏的生理和 药理机制，可以为人类心脏相关 疾病的防治提供更多有益的思路
和方法。
未来发展方向
我们计划进一步优化实验条件和方法， 提高实验的准确性和可靠性，为更多 的科研工作者提供更好的服务。
在未来的发展中，我们将不断更新实 验技术和方法，加强与其他科研机构 的合作与交流，共同推动相关领域的 发展和进步。
实验注意事项
实验前应仔细检查所有实 验材料是否完好，如有损 坏应及时更换。
在实验过程中要保持安静， 避免干扰到心脏的正常跳 动。
插管时要小心操作，避免 损伤心脏组织。
在灌流过程中要保持恒温， 以免影响实验结果。
实验 蛙心脏灌流、蛙心起搏点的观察、收缩与代偿间歇ppt课件
2. 仰卧位固定于蛙板上。
3.翻开胸腔暴露心脏 ，察看心脏的构 [实造验。结果及实际分析]
4. 斯氏结斯氏扎结，扎记记录录表结〔果次/。分钟〕
静脉窦
心房
心室
对照
第一扎
第二扎
;
二、蟾蜍心室的期前收缩与代偿间歇
[实验目的]
1．学习在体蟾蜍心跳曲线的记录方法。
2．察看心脏在兴奋过程中兴奋性的变 化。
[实验原理]
实验四 蛙心脏灌流 蛙心起搏点的察看 期前收缩与代偿间歇
;
一、蛙心起搏点的察看
[目的要求]
1.学习暴露蛙类心脏的方法，熟 习心脏的构造。
2.察看心脏起搏点以及各部分的 自律性高低和心脏的兴奋性传导 顺序。
[实验原理]
1. 两栖类动物的心脏解剖 2. stannius结扎;
[方法步骤]
1.破坏脑脊髓 。
些受体激动剂和阻断; 剂，可以察看到心
[实验方法]
1、标本的制造：
〔1〕将毁损脑脊髓后的蟾蜍固定在蛙板 上，
从腹上部正中至两前肢剪开皮肤，翻 开胸
腔，暴露心脏。
〔2〕用眼科剪剪开心包膜。
;
〔4〕插管：在总自动脉下穿一线，打活结。在 左自动脉干根部向心脏方向剪一小切口， 将装有少量任氏液的蛙心插管从切口处插 入自动脉球。将蛙心插管与心尖部呈45度 角，并将插管外旋插入心室。见液面上下 动摇，心室部可触及插管，即插管已进心 室，用备用线结扎血管及插管。将插管中 的血液冲洗干净。游离心脏，勿伤静脉窦
;
2、仪器设备的安装衔接：
〔1〕将蛙心插管用木夹子固定在铁三脚架 上。
〔2〕在木夹子的下方，将张力传感器固定 在铁
三脚架上。
〔3〕将夹在蛙心尖上的蛙心夹上的丝线系 在张
心脏灌流ppt课件
离体心脏灌流方法
两栖类动物： 蟾蜍、青蛙等 Straub法、八木法
哺乳类动物：大鼠、家兔、猫等
Langendroff 法
经典的离体蛙心灌流——Straub法
特点：
灌流途径与正常循环途径不同，蛙心插管
通过主动脉瓣直接插入心室腔内，灌流液通过 同一蛙心插管进入心室腔和流出，前负荷和后 负荷相等。
方
将插有蛙心插管的心脏取出与记录装置连接。
注
意
① 不能损伤或结扎静脉窦；
② 主动脉内的插管不要过深以免抵住主动脉瓣
③ 两根插管有一定相对位置，插管前要考虑好方 向，插管后应避免血管扭曲，保证灌流畅通 ④ 避免气泡进人心脏。
哺乳类动物离体心脏灌流 ——Langendorff 法
Langendorff首次描述了保持哺乳动物离体心脏存活的方法，采用恒
优缺点
优点： 1.排除在整体情况下体内各种复杂因素的干扰，直接观测离 体心脏标本的各项指标。
2.易于严格控制实验环境，方法简便精确，有利于分析作用 机制及对药物的药效作定量研究。
3.易于获得准确、精细的结果。
4.缺点和局限性：
5. 失去了机体完整统一的内环境和神经体液调控作用， 失去了体内各种组织、细胞之间的相互关系，不能完全反映 心脏在整体情况下的活动规律与正常整体情况。
滑肌灌流用的恒温浴槽或麦氏浴槽）中，浴槽内加入Ringer’s液或Krebs— Henseheit缓冲液，利用恒温水浴使这一装置保持在 37℃。经主动脉插管
灌 注 氧 饱 和 的 Ringer’s 液或 Krebs—Henseheit 缓冲液 ， 并持续保持 400
mmHg灌注压。
4. 连接记录装置：将一特制的金属小钩固定在心尖部， 利用张力传感器与多导记录仪相连并描记心脏收缩曲线和测 定收缩力等指标。 Langendorff 离体心脏灌流装置可用于测 定不同种生理学试剂和药物的直接效应，以及对这些药物的 拮抗作用。还可观察冠脉流量的变化。
蟾蜍离体心脏灌流PPT课件
实验四
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流方法 观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离
体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。 离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的
环境中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地 产生兴奋和收缩。 利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏 模型, 来观察药物和电解质水平对心肌活动的 影响。
第3次结扎：左\右肝静脉\后腔静脉
5. 第四次结扎：
在左主动脉下穿线→在动脉上剪一斜口→蛙心套管 动脉插管插入动脉（不要插入动脉球内）→结扎固 定
在静脉插管中灌入任氏液，可见液体从动脉插管端泵出， 并且直至心脏颜色变成黄白浅色，血液全部泵出后进行离体。
6. 蛙心离体：
剪断右主动脉—剪断左主动脉—剪断静脉插管— 再将多余的长线头剪断—提起第二次结扎的线头、 动脉插管、静脉插管及心脏 小心将蛙心离体。 将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离体蛙心固定在铁架台上
4 2%KCl
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
注意事项
同学最容易犯的错误是第二次结扎:要让一个同 学将蛙心提起来，然后另一个同学进行结扎， 以免将蛙的静脉窦结扎进去。
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线，包 括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
实验项目
1 正常曲线
心收缩力
心输出量
最大 波谷值 心率 记录滴 心输出 每搏输出
收缩力 （g） （g）
蟾蜍离体心脏灌流
实验目的
学习离体蛙心灌流方法 观察K+、Ca2+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离
体心脏活动的影响。
实验原理
心肌具有自动节律性、传导性和兴奋性。 离体和脱离神经支配的动物心脏,保持在适当的
环境中,在一定的时间内,仍然能够有节律性地 产生兴奋和收缩。 利用心肌细胞的这一特性,可用来制作离体心脏 模型, 来观察药物和电解质水平对心肌活动的 影响。
第3次结扎：左\右肝静脉\后腔静脉
5. 第四次结扎：
在左主动脉下穿线→在动脉上剪一斜口→蛙心套管 动脉插管插入动脉（不要插入动脉球内）→结扎固 定
在静脉插管中灌入任氏液，可见液体从动脉插管端泵出， 并且直至心脏颜色变成黄白浅色，血液全部泵出后进行离体。
6. 蛙心离体：
剪断右主动脉—剪断左主动脉—剪断静脉插管— 再将多余的长线头剪断—提起第二次结扎的线头、 动脉插管、静脉插管及心脏 小心将蛙心离体。 将与蛙心套管静脉插管和动脉插管的离体蛙心固定在铁架台上
4 2%KCl
注意事项
每次换液时液面应保持一定的高度。 每次换液或滴加试剂时应打标记。 每个试剂瓶的滴管不能混淆。 心脏表面随时滴加任氏液。 待心跳恢复正常后进行下一项实验。
注意事项
同学最容易犯的错误是第二次结扎:要让一个同 学将蛙心提起来，然后另一个同学进行结扎， 以免将蛙的静脉窦结扎进去。
实验要求
每一项实验记录出一段有代表性的曲线，包 括连续三部分: (1)正常对照 (2)加药后的反应 (3)更换灌流液后恢复至正常状态。
实验项目
1 正常曲线
心收缩力
心输出量
最大 波谷值 心率 记录滴 心输出 每搏输出
收缩力 （g） （g）
离体蛙心灌注及药物的影响PPT幻灯片课件
32
图3 0.65%NaCl对蛙心收缩活动的影响 的影响
图4 2%CaCl2对蛙心收缩活动
图5 1%KCl对蛙心收缩活动的影响 响
图6 NA对蛙心收缩活动的影
33
图7 Ach对蛙心收缩活动的影响 动的影响
图8 先加阿托品再加Ach对蛙心收缩活
图9 强心甙对蛙心收缩活动的影响 动的影响
图10 4℃冷林格液对蛙心收缩活
+1:100000Ach （1滴）
25
实验步骤
4) 应用强心甙类药
0.025%毒毛幻花苷K溶液（1~2滴）
5）观察温度的影响
换入等量4℃的冷林格液
6）观察酸碱的影响
① 1～2滴 2.5% NaHCO3 ② 1～2滴 3% 乳酸， 出现变化后，再加1-2滴 2.5% NaHCO3
26
5.实验后处理
NA与心肌β 受体结合后，激活AC，Ca2+通道 开放增加，正性变力、变时、变传导
30
Ach与心肌细胞膜上M-R结合，抑制钙通道，同 时激活GK蛋白， K+外流增加，负性变力、变时、 变传导
6.阿托品+Ach，无明显变化 阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神
经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用； 再加入Ach，由于阿托品已将M胆碱受体阻 断，故Ach无作用。
9
【实验后处理】
打印结果 写实验报告
10
【注意事项】
勿伤静脉窦，插管时注意方向和手法 保持心脏湿润 保持液面高度一致 滴管勿混用，勿碰蛙心插管，加药勿过量 做好标记，出现作用立即换新鲜林格液
11
12
13
14
2、连接实验装置
15
蛙心结构图
右主动脉弓 右心房 动脉圆锥
图3 0.65%NaCl对蛙心收缩活动的影响 的影响
图4 2%CaCl2对蛙心收缩活动
图5 1%KCl对蛙心收缩活动的影响 响
图6 NA对蛙心收缩活动的影
33
图7 Ach对蛙心收缩活动的影响 动的影响
图8 先加阿托品再加Ach对蛙心收缩活
图9 强心甙对蛙心收缩活动的影响 动的影响
图10 4℃冷林格液对蛙心收缩活
+1:100000Ach （1滴）
25
实验步骤
4) 应用强心甙类药
0.025%毒毛幻花苷K溶液（1~2滴）
5）观察温度的影响
换入等量4℃的冷林格液
6）观察酸碱的影响
① 1～2滴 2.5% NaHCO3 ② 1～2滴 3% 乳酸， 出现变化后，再加1-2滴 2.5% NaHCO3
26
5.实验后处理
NA与心肌β 受体结合后，激活AC，Ca2+通道 开放增加，正性变力、变时、变传导
30
Ach与心肌细胞膜上M-R结合，抑制钙通道，同 时激活GK蛋白， K+外流增加，负性变力、变时、 变传导
6.阿托品+Ach，无明显变化 阿托品为M胆碱受体拮抗剂，但离体蛙心无神
经支配，无ACh释放，加入阿托品后无明显作用； 再加入Ach，由于阿托品已将M胆碱受体阻 断，故Ach无作用。
9
【实验后处理】
打印结果 写实验报告
10
【注意事项】
勿伤静脉窦，插管时注意方向和手法 保持心脏湿润 保持液面高度一致 滴管勿混用，勿碰蛙心插管，加药勿过量 做好标记，出现作用立即换新鲜林格液
11
12
13
14
2、连接实验装置
15
蛙心结构图
右主动脉弓 右心房 动脉圆锥
离体蛙心灌流实习课件
离体蛙心灌流实习课件
CONTENTS
• 实验原理 • 实验材料与器具 • 实验步骤与方法 • 实验结果分析 • 实验注意事项与安全防护
01
实验原理
蛙心灌流实和生理学研究中的经典 实验，用于研究心脏的生 理功能和药物作用机制。
历史背景
该实验方法自19世纪中叶 以来一直被广泛应用于学
术研究和教学。
实验目的
通过离体蛙心灌流实验， 观察心脏的收缩活动和药 物对心脏的影响，了解心 脏的生理功能和药物作用
机制。
实验的基本原理
蛙心离体
将蛙类的心脏取出并置于适宜的灌流液中 ，保持其生理活性。
灌流系统
建立有效的灌流系统，确保心脏得到足够 的氧气和营养物质，同时排除代谢废物。
观察指标
通过心电图机或心脏张力记录仪等设备， 观察和记录心脏的收缩活动。
实验安全注意事项
01 7
实验操作前应熟悉实验步骤和
操作规程，确保实验过程的安
全性。
7
02
7
实验过程中应佩戴适当的防护
用具，如实验服、手套、护目
7
镜等，以防止意外伤害。
03
避免使用未经消毒的器具直接 接触实验对象，以免引起感染 。
04
在操作过程中，应保持安静， 避免干扰和影响实验结果。
实验废弃物处理
记录仪
用于记录蛙心活动 数据。
试剂与药品
肾上腺素
用于增强心肌收缩力，提高心 率。
CaCl2
用于提高灌流液中的Ca2+浓 度，增强心肌收缩力。
任氏液
常用的灌流液，维持蛙心离体 状态下的生理功能。
乙酰胆碱
用于降低心肌收缩力，减缓心 率。
MgSO4
用于降低灌流液中的Mg2+浓 度，增强心肌收缩力。
CONTENTS
• 实验原理 • 实验材料与器具 • 实验步骤与方法 • 实验结果分析 • 实验注意事项与安全防护
01
实验原理
蛙心灌流实和生理学研究中的经典 实验，用于研究心脏的生 理功能和药物作用机制。
历史背景
该实验方法自19世纪中叶 以来一直被广泛应用于学
术研究和教学。
实验目的
通过离体蛙心灌流实验， 观察心脏的收缩活动和药 物对心脏的影响，了解心 脏的生理功能和药物作用
机制。
实验的基本原理
蛙心离体
将蛙类的心脏取出并置于适宜的灌流液中 ，保持其生理活性。
灌流系统
建立有效的灌流系统，确保心脏得到足够 的氧气和营养物质，同时排除代谢废物。
观察指标
通过心电图机或心脏张力记录仪等设备， 观察和记录心脏的收缩活动。
实验安全注意事项
01 7
实验操作前应熟悉实验步骤和
操作规程，确保实验过程的安
全性。
7
02
7
实验过程中应佩戴适当的防护
用具，如实验服、手套、护目
7
镜等，以防止意外伤害。
03
避免使用未经消毒的器具直接 接触实验对象，以免引起感染 。
04
在操作过程中，应保持安静， 避免干扰和影响实验结果。
实验废弃物处理
记录仪
用于记录蛙心活动 数据。
试剂与药品
肾上腺素
用于增强心肌收缩力，提高心 率。
CaCl2
用于提高灌流液中的Ca2+浓 度，增强心肌收缩力。
任氏液
常用的灌流液，维持蛙心离体 状态下的生理功能。
乙酰胆碱
用于降低心肌收缩力，减缓心 率。
MgSO4
用于降低灌流液中的Mg2+浓 度，增强心肌收缩力。
【医学ppt课件】离体蛙心灌流
❖ 向套管内加入2—4滴5%的NaCL溶液，立 即用专门滴管轻轻混匀，同时作好加药标 记，观察心搏曲线的频率振幅变化。
❖ 向套管内加入1—2滴2 %的CaC12溶液，立 即用专门滴管轻轻混匀，同时作好加药标 记，观察心搏曲线的频率振幅变化。
观察项目
❖ 向套管内加入1—2滴1%KCL溶液，同上所述，混 匀、标记、描记并观察心搏曲线。
实验原理
心脏受交感神经和迷走神经的支配。交感神 经兴奋时，其末梢释放递质---去甲肾上腺素 （NA），作用于心肌细胞上的β受体，使心肌收 缩力增强；迷走神经兴奋时，其末梢释放递质— 乙酰胆碱（Ach），作用于心肌细胞膜上的M受 体，对心肌细胞起抑制作用，使心肌的自律性降 低。用受体阻断剂（心得安）阻断受体，则相应 的递质不能发挥作用。
❖ 向套管内加入1—2滴0.01%肾上腺素溶液，同上所 述，混匀、标记、描记并观察心搏曲线。
❖ 向套管内加入1—2滴0.01%心得安溶液，描记并观 察心搏曲线变化。然后加入与前一步等量的肾上 腺素溶液，描记并观察心搏曲线变化。
以上每步当曲线出现明显变化时，立即吸去套 管内的灌流液，用新鲜的任氏液换洗几次，同时 作好换洗记号。使灌洗液面保持原高度。等待心 搏恢复正常。然后做下一观察项目。
待心跳恢复正常后，再进行下一步骤。 6. 实验顺序可以根据心搏情况临时改变，如心搏变慢变
弱时，可先加入肾上腺素或Ca2+ 。
支架 计算机
蛙心 套管
离 体
蛙
心ห้องสมุดไป่ตู้
灌
流
实
蛙心
验
装
置
换能器
• 暴露心脏：左手持镊提起胸骨后端的皮肤，右手持剪将皮 肤剪一小口，然后将剪刀由开口处伸入皮下，朝向两侧下 颌角方向剪开皮肤，并将皮肤掀向头端。用镊子提起胸骨 后方的腹肌，在腹肌上剪一小口,将粗剪刀紧贴胸壁伸入 胸腔(避免损伤下面的心脏和血管)，沿皮肤切口方向剪开 肌肉，剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口成一个倒三角形。 左手持眼科镊，小心提起心包膜，右手用眼科剪剪开心包 膜,将心包膜剥离,使心脏完全暴露。用眼科剪小心剪去左 右主动脉干周围的心包膜和系膜。
❖ 向套管内加入1—2滴2 %的CaC12溶液，立 即用专门滴管轻轻混匀，同时作好加药标 记，观察心搏曲线的频率振幅变化。
观察项目
❖ 向套管内加入1—2滴1%KCL溶液，同上所述，混 匀、标记、描记并观察心搏曲线。
实验原理
心脏受交感神经和迷走神经的支配。交感神 经兴奋时，其末梢释放递质---去甲肾上腺素 （NA），作用于心肌细胞上的β受体，使心肌收 缩力增强；迷走神经兴奋时，其末梢释放递质— 乙酰胆碱（Ach），作用于心肌细胞膜上的M受 体，对心肌细胞起抑制作用，使心肌的自律性降 低。用受体阻断剂（心得安）阻断受体，则相应 的递质不能发挥作用。
❖ 向套管内加入1—2滴0.01%肾上腺素溶液，同上所 述，混匀、标记、描记并观察心搏曲线。
❖ 向套管内加入1—2滴0.01%心得安溶液，描记并观 察心搏曲线变化。然后加入与前一步等量的肾上 腺素溶液，描记并观察心搏曲线变化。
以上每步当曲线出现明显变化时，立即吸去套 管内的灌流液，用新鲜的任氏液换洗几次，同时 作好换洗记号。使灌洗液面保持原高度。等待心 搏恢复正常。然后做下一观察项目。
待心跳恢复正常后，再进行下一步骤。 6. 实验顺序可以根据心搏情况临时改变，如心搏变慢变
弱时，可先加入肾上腺素或Ca2+ 。
支架 计算机
蛙心 套管
离 体
蛙
心ห้องสมุดไป่ตู้
灌
流
实
蛙心
验
装
置
换能器
• 暴露心脏：左手持镊提起胸骨后端的皮肤，右手持剪将皮 肤剪一小口，然后将剪刀由开口处伸入皮下，朝向两侧下 颌角方向剪开皮肤，并将皮肤掀向头端。用镊子提起胸骨 后方的腹肌，在腹肌上剪一小口,将粗剪刀紧贴胸壁伸入 胸腔(避免损伤下面的心脏和血管)，沿皮肤切口方向剪开 肌肉，剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口成一个倒三角形。 左手持眼科镊，小心提起心包膜，右手用眼科剪剪开心包 膜,将心包膜剥离,使心脏完全暴露。用眼科剪小心剪去左 右主动脉干周围的心包膜和系膜。
心脏灌流ppt课件
优缺点
优点： 1.排除在整体情况下体内各种复杂因素的干扰，直接观测离 体心脏标本的各项指标。
2.易于严格控制实验环境，方法简便精确，有利于分析作用 机制及对药物的药效作定量研究。
3.易于获得准确、精细的结果。
4.缺点和局限性：
5. 失去了机体完整统一的内环境和神经体液调控作用， 失去了体内各种组织、细胞之间的相互关系，不能完全反映 心脏在整体情况下的活动规律与正常整体情况。
与腔静脉交界处作一结扎，注意避免不要损伤静脉窦，在结扎线外侧 剪断所有组织，将蛙心游离出来。
4.用新鲜任氏液反复换洗
蛙心插管内含血的任氏液， 直至蛙心插管内无血液残留。 将蛙心插管固定在支架上， 用蛙心夹在心室舒张期夹住 心尖，并将蛙心夹的线头连 至张力传感器上，记录蛙心 搏动曲线。 5. 改变灌流液成分或在 灌流液中滴加药液，记录和 观察心脏活动的变化。
滑肌灌流用的恒温浴槽或麦氏浴槽）中，浴槽内加入Ringer’s液或Krebs— Henseheit缓冲液，利用恒温水浴使这一nger’s 液或 Krebs—Henseheit 缓冲液 ， 并持续保持 400
mmHg灌注压。
4. 连接记录装置：将一特制的金属小钩固定在心尖部， 利用张力传感器与多导记录仪相连并描记心脏收缩曲线和测 定收缩力等指标。 Langendorff 离体心脏灌流装置可用于测 定不同种生理学试剂和药物的直接效应，以及对这些药物的 拮抗作用。还可观察冠脉流量的变化。
要求设定不同的前负荷和后负荷。
实验步骤
1. 破坏蟾蜍脑脊髓，暴露心脏。
2. 依次将右主动脉、左右前腔静脉、左右肺静脉、后腔静脉和右肝
静脉分离穿双线，双结扎后剪断，只保留左主动脉和左肝静脉。在左肝 静脉下穿线打虚结备用，在左肝静脉剪一斜口，将充有任氏液的蛙心插 管插入左肝静脉，结扎固定。 3．用任氏液将心脏中血液冲洗干净后、在左主动脉下穿线打虚结， 在动脉壁上剪一小口将另一根蛙心插管插入，若立即有液体流入插管， 说明插管正确，将插管口结扎固定。 4．在左主动脉、左肝静脉结扎部位外侧剪断与心脏相连的组织，
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实验步骤
（3）.在两个主动脉干下穿一根细线，将心脏翻向头侧，在静脉窦的 远端结扎，阻断静脉回流。
实验步骤
（3）.在两个主动脉干下穿一根细线，将心脏翻向头侧，在静脉窦的 远端结扎，阻断静脉回流。注意不要结扎静脉窦，会导致心脏停跳
实验步骤
（4）.将心脏翻回原位置，结扎右侧主动脉干，左侧主动脉干远心端 结扎并剪口。
离体蛙心灌流及化学影响因素的作用
实验目的
学习离体蛙心的灌流方法
观察Na+、K+、Ca2+ 3种离子、肾 上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动 的影响
实验原理 （1）心肌具有自动节律性。
（2）心肌细胞生物电活动的基础 是离子的跨膜移动，因此改变灌流 液的离子浓度或成分，可以引起心 脏活动的改变。
（3）神经、体液因素对心脏活动 的调节是通过神经递质或激素与心 肌细胞膜上相应的受体结合，引起 增强或减弱心脏活动的效应。
（5）将含有肾上腺素 的任氏液吸出,用新鲜的 任氏液反复换洗,待曲线 恢复正常后,再在任氏液 中加1:100000的乙酰胆 碱溶液1或2滴,观察心跳 变化。
思考题
（1）正常蛙心搏动曲线的各个组成部分分别反映了什么 收缩峰的上升部分表示心脏的收缩过程，收缩峰的下降部 分表示心脏的舒张过程，峰高反映了心肌细胞收缩的强度， 两相邻峰距反映了心肌细胞产生动作电位的频率
曲线的规律性：代表心跳的节律性。
曲线的幅度：代表心室收缩的强弱。
曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。
曲线的基线：代表心室舒张的程度。
观察项目
（1）把蛙心插管内的任氏液全部 更换为0.65%NaCl溶液,观察心跳 变化规律。
观察项目
（2）把0.65%NaCl吸出,用新鲜 任氏液反复换洗数次,待曲线恢复 正常时,再在任氏液内滴加 3%CaCL2,1或2滴,观察心跳变化
观察项目
（3）将含有CaCl2的任氏液 吸出,用新鲜的任氏液反复换洗, 待曲线恢复正常后,在任氏液中 加1%KCL或2滴,观察心跳变化
观察项目
（4）将含有KCl的任氏液 吸出,用新鲜的任氏液反复 换洗,待曲线恢复正常后,再 在任氏液中加1:1000的肾 上腺素溶液1或2滴,观察心 跳变化。
结果分析
(1）取一只蛙，破坏脑和脊髓，仰卧位固定于蛙板上。在胸骨剑突软骨下方将皮肤 向上剪一“V”形切口，用普镊提起切口处皮肤，手术剪沿两侧向外上方剪开胸壁至 锁骨下，剪断两侧锁骨，然后剪掉胸骨。用眼科剪小心打开心包，充分暴露心脏。
实验步骤
(2）观察蛙的心脏各部位，识别心室、左心房、右心房、动脉圆锥、 主动脉、静脉窦和前后腔静脉。
谢谢观看
心搏曲线：心脏自动节律 的收缩活动可以用机械的 方法描记所记录的曲线
实验器材
实验对象
蛙或蟾蜍
实验器材
BL420生物采集系统，张力换能器，蛙类手术器械，蛙心插管，试 管夹，缝合线，蛙心夹，铁支架，滴管
实验药品
任氏液，1%KC1，3 %CaC12，1: 10,000NE，1: 10,000 ACh
实验步骤
实验步骤
（4）.将心脏翻回原位置，结扎右侧主动脉干，左侧主动脉干远心端 结扎并剪口。
实验步骤
（5）.提起远心端线，用眼科剪在右主动脉靠近动脉圆锥处剪一斜切口，将盛有 少量任氏液的蛙心插管插入切口，使尖端向动脉圆锥背部后方及心尖方向推进。 在心室收缩时蛙心插管向左后、向下旋转，于心缩期插入心室内。
实验步骤
（6）.将预置线的活结扎死,并固定于插管壁的小钩上，于各结扎线远端将心脏连 同静脉窦一起剪下。
实验步骤
（5）连接实验装置，用双凹夹将蛙心套管固定于铁支架上备用.在心室舒张时， 用蛙心夹夹住心尖,连接到张力换能器
注意事项
（1）.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时， 必须用任氏液冲洗3次。
（2）.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内 液体吸出。
（3）.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。
（4）.各种试剂的滴管不要混淆,以免影响实验结果。
观察项目
描记正常的蛙心搏动曲线，注意观察心跳频率、幅 度，心室的收缩和舒张和舒张程度
曲线的疏密：代表心跳的频率。