蛋白质及纤维的系列性质实验
蛋白质的性质实验报告
蛋白质的性质实验报告蛋白质的性质实验(一)蛋白质的性质实验(一)蛋白质及氨基酸的呈色反应一、目的1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。
2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理。
3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。
二、呈色反应(一)双缩脲反应1.原理尿素加热至180℃左右,生成双缩脲并放出一分子氨。
双缩脲在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物,此反应称为双缩脲反应。
蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,也能发生此反应。
可用于蛋白质的定性或定量测定。
双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。
含有一个肽键和一个—CS—NH2,—CH2—NH2,—CRH—NH2,—CH2—NH2—CHNH2—CH2OH或—CHOHCH2NH2等基团的物质以及一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应,但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
2.试剂3.操作取少量尿素结晶,放在干燥试管中。
用微火加热使尿素熔化。
熔化的尿素开始硬化时,停止加热,尿素放出氨,形成双缩脲。
冷后,加10%氢氧化钠溶液约1mL,振荡混匀,再加1%硫酸铜溶液1滴,再振荡。
观察出现的粉红颜色。
要避免添加过量硫酸铜,否则,生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色。
向另一试管加卵清蛋白溶液约1mL和10%氢氧化钠溶液约2 mL,摇匀,再加1%硫酸铜溶液2滴,随加随摇。
观察紫玫瑰色的出现。
(二)茚三酮反应1.原理除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外,所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
β-丙氨酸、氨和许多一级胺都呈正反应。
尿素、马尿酸、二酮吡嗪和肽键上的亚氨基不呈现此反应。
因此,虽然蛋白质和氨基酸均有茚三酮反应,但能与茚三酮呈阳性反应的不一定就是蛋白质或氨基酸。
在定性、定量测定中,应严防干扰物存在。
该反应十分灵敏,1∶1500000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应,是一种常用的氨基酸定量测定方法。
茚三酮反应分为两步,第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛,水合茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验结果讨论及注意事项
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验结果讨论及注意事项血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验是一种常见的蛋白质分离和分析方法。
这种方法基于蛋白质在电场中的迁移速度差异,可以实现对蛋白质的定性和定量分析。
在进行这种实验时,需要注意一些实验操作步骤和技巧,以确保实验结果的准确性和可靠性。
实验步骤1.准备样品:从血清中提取要分析的蛋白质样品。
可使用丙酮、醋酸等溶液进行样品的处理和稀释。
2.制备凝胶:将醋酸纤维素膜在磁盘上进行切割,将膜放入电泳槽中,加入足够的电泳缓冲液。
3.电泳条件:确定好电泳槽内电泳缓冲液的pH值和离子浓度,根据蛋白质的性质确定最佳的电泳条件,如电场强度、电泳时间等。
4.上样:在预定位置上样,可使用微量注射器将样品滴于凝胶表面。
5.打开电源:连接电极,通电进行电泳。
电泳时间根据分析的需要进行调整。
6.固定凝胶:停止电泳后,将凝胶取出,固定和染色。
7.分析:在透明胶支架上对凝胶进行扫描,记录下蛋白质的电泳迁移图像。
实验结果讨论:1.蛋白质的分离:根据电泳上样区域蛋白质的迁移速率和位置,可以对样品中的蛋白质进行定性和定量分析。
根据蛋白质之间的迁移时间差异,可以推测出它们在电场中的相对电荷、分子大小和电泳迁移速率等信息。
2.蛋白质的鉴定:可以通过与已知蛋白质标准品的电泳迁移对照来鉴定样品中蛋白质的种类和含量。
也可以通过进一步的染色技术,如银染、荧光染色等,增强或显示蛋白质带的清晰度,从而更准确地分析样品中蛋白质的种类和富集。
3.实验重复性和稳定性:为了保证实验结果的可靠性,一般需要对实验进行多次重复操作,计算其平均值和标准差。
同时也需要控制实验条件的稳定性,包括电泳缓冲液的配制、电场强度的控制、电泳时间的准确计时等。
确保实验操作的一致性可以降低测定误差。
注意事项:1.实验操作:操作时需佩戴手套,避免样品受到外界污染,减少实验误差。
仔细熟悉实验步骤和操作要求,确保操作正确。
2.样品制备:样品提取和制备过程中需要严格控制温度、pH值和时间等因素,以保证样品质量的一致性。
生物化学实验--蛋白质性质试验
(三)黄色反应 原理:蛋白质分子中含有苯环结构的氨基酸(如
酪氨酸、色氨酸等),于浓硝酸可反应并生成黄色物 质,此物质在碱性环境下变为桔黄色的硝基苯衍生物 硝醌酸等。
操作:取一支试管,加入1ml蛋白液及浓硝酸5滴。加 热,冷却后注意颜色变化。然后再加入10%NaOH溶液 1ml,颜色有什么变化?
(四)茚三酮反应 原理:蛋白质与茚三酮共热,产生兰紫色的还原茚三
操作:
1、尿素实验
取少量尿素晶体放在干燥的试管中,微火加热使其
熔化成液体,此时有氨气放出,可用湿润的试纸检验,
至液体重新结晶出现白色固体时,停止加热,冷却。然
后加10%NaOH溶液1ml,摇匀,再加2-4滴1% 混匀,观察有无紫色出现。
CuSO4溶液,
2、蛋白液实验
取蛋白液1ml,加10%NaOH溶液1ml,摇匀,再加2-4 滴1% CuSO4溶液,混匀,观察有无紫色出现。
荧光法gml不同种类蛋白最大吸收波长nm标准方法准确操作麻烦费时灵敏度低适用于标准的测定紫外分光光度280205灵敏快速不消耗样品核酸类物质有影响100010000540重复性线性关系好灵敏度低测定范围窄样品需要量大folin酚试剂750灵敏费时较长干扰物质多25050500595灵敏度高稳定误差较大颜色会转移bca50500562灵敏度高稳定干扰因素少费时较长蛋白质不同方法比较一实验原理一实验原理蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸在碱性条件下可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色生成钼蓝和钨蓝化合物
察结果。 (四)生物碱试剂沉淀蛋白质 取一支试管,加入蛋白液2ml及醋 酸4-5滴,再加饱和苦味酸数滴,
观察现象。
http://222.195.234.199/openclass 登录名:自己的学号 密码:自己的学号 大家先把电子版的实验报告作好,然后在
动物蛋白/纤维素(粘胶)共混溶液纺丝性能研究
3 3
132 溶 液 混 合 ..
将配制好的蛋 白溶液通过注射机利用注射 的方式直接在纺丝机干管前同粘胶溶液混合 ,
通过计量泵控制蛋白加入量 。采用动态混合器强制混合约 2 i。 0 n m
1 . 纺丝 成 型 .3 3
纤维规格为 13 t / f 纺丝速度 8 ̄8 / i ; 3 e 4 ; dx4 0 5 m r 总牵伸率 l%; m a 8 凝固浴组成: 2O HS 4 12 m,N 2O 0 m,Z S 4 L 3 g a 4 2 S 3 g n O g ;粘胶粘度 3 落球法 );粘胶组成为甲纤 9 %。 9/ 9 S( . 2
动物蛋白、纤维素两组分通过交联剂的作用可以实现化学结合。所得纤维的质量指
标 比普通粘胶纤维略有下降。 关键词:动物蛋 白;纤维素;交联剂 ;可纺性
中图分类号:T 1 2 1 S0 . 5 文献标识码 :A
动物蛋 白作为一种生物高分子材料 , 具有极大的应用价值…。 随着蛋 白纤维研究的深人 , 天津工业大学、 江南大学、 四川大学等国内许多高校都相继报道 了非植物蛋 白质用于纤维改 性的研究成果瞄 。新乡化纤股份有限公司曾经与 日 本某公司合作 ,利用化妆品生产的副产 物作为蛋白质部分 , 与纤维素黄酸酯溶液 ( 粘胶 ) 复合交联, 用于制造蛋 白质改性粘胶纤维 。 经过多次探索I试验 , 生 最终取得成功 , 现在已经 向日本批量出口。 本文主要研究了动物蛋 白 , 纤维素 ( 粘胶 )共混溶液的性质和可纺性能。国内外文献尚未见有 同样的研究报道 。
1 实 验
11 主要原பைடு நூலகம்料 .
动物蛋白 A . P有效含量 4 %:B . P有效含量 2 %, :G K 5 :N K 0 分子量约 5 ×14 ~8 0,日 本进 口; 交联剂,带有甘油醚基团的环氧烷类化合物 ,日 本进 口; 纤维素 ( 粘胶 ),新乡化纤厂产品,酯化度 4 % ̄5 %,粘度 3  ̄4 7 1 5 2。 S
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告实验原理1. 电泳的基本原理带电颗粒在电场中向着与其电性相反方向移动的现象称为电泳。
电泳时不同的带电粒子在同一电场中泳动速度不同。
带电颗粒 ( 球形分子 ) 在电场中的电泳速度 (V )从上式看出,带电颗粒在电场中的移动速度 (V ) 与颗粒带电荷量 (Q ) 以及电场强度 (E ) 成正比,与球形分子的大小 ( 半径为 r ) 及所在介质的粘度(η) 成反比。
因此 , 在同一电场、同一介质中进行电泳时,带不同电荷,不同大小的颗粒就可以通过电泳而被分离。
在实际操作中,为了不考虑不同电压对电泳速度的影响,我们常用迁移率( move rate,M )来表示带电颗粒的电泳特性,迁移率指带电颗粒在单位电场强度下的电泳速度,即可见,带电颗粒的净电荷越多,分子颗粒越小,在电场中的迁移率就越快;反之越慢。
但电泳速度和电泳迁移率是两个不同的概念,后者有利于不同电场强度下电泳结果的比较,各种带电颗粒在一定条件下测得的迁移率是一个常数。
2. 影响电泳的主要因素(1) 电泳介质pH 值的影响: 对于蛋白质和氨基酸等两性分子,电泳介质的pH 值影响蛋白质的电离情况,即可决定蛋白质的带电量 (Q ) 。
pH 值小于等电点,分子带正电荷,向负极泳动,如果 pH 大于等电点,分子带负电荷,向正极泳动。
pH 值偏离等电点越远,分子所带净电荷越多,其泳动速度越快。
当缓冲液 pH 等于其等电点时,分子处于等电状态,不移动。
由于血清蛋白质的等电点多在 pH4 ~ 6 之间,因此,分离血清蛋白常用 pH 8.6 的巴比妥缓冲液或三羟甲基氨基甲烷 (Tris) 缓冲液。
(2) 缓冲液的离子强度 : 离子强度低,电泳速度快,分离区带不易清晰;离子强度高,电泳速度慢,但区带分离清晰。
如离子强度过低,缓冲液的缓冲量小,不易维持 pH 的恒定;离子强度过高,则降低蛋白质的带电量 ( 压缩双电层 ) 使电泳速度减慢。
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验讨论
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验讨论
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验是一种常用的蛋白质分析技术,用于分离和鉴定血清中的蛋白质。
该技术基于蛋白质在醋酸纤维素薄膜中的电泳迁移率不同,通过电泳移动距离的差异来区分不同的蛋白质。
在实验中,首先将血清样品加入醋酸纤维素薄膜上,然后通过电泳使蛋白质在薄膜上迁移。
在电泳过程中,蛋白质会根据电荷性质和分子大小而发生迁移。
随着电泳时间的增加,蛋白质会在薄膜上形成不同的带状图案。
最后,对薄膜进行染色或银染等处理,可以观察到蛋白质带的数量和位置,从而识别和定量不同的蛋白质。
讨论血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验结果时,需要注意样品的质量和纯度对实验结果的影响。
同时,对蛋白质带的数量和位置进行定量分析时,需要使用专业的图像分析软件。
此外,该技术也可以与其他蛋白质分析技术如质谱联用,提高分析的准确性和灵敏度。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验一.实验原理1、电泳是指带电质点在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。
在一定pH条件下,不同的质点由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,即它们的电泳迁移率不同,因此,可使它们分离。
2、影响电泳迁移率的外界因素:电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象。
3、影响电泳迁移率的内在因素:质点所带净电荷的量、质点的大小和形状。
4、采用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法称为醋酸纤维素薄膜电泳。
醋酸纤维素薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高,对样品无拖尾和吸附现象等优点。
5、醋酸纤维素是纤维素的羟基乙酰化所形成的纤维素醋酸酯,将它溶于有机溶剂(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。
该膜具有均一的泡沫状的结构,厚度约为120 μm,有很强的通透性,对分子移动阻力很小。
6、本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血清蛋白。
血清中含有清蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。
各种蛋白质由于氨基酸组成、分子量、等电点及形状不同,在电场中的迁移速度不同。
以醋酸纤维素薄膜为支持物,正常人血清在pH8.6的缓冲体系中电泳,染色后可显示5条区带。
其中清蛋白的泳动速度最快,其余依次为α1-、α2-、β-及γ-球蛋白。
二.实验仪器和试剂✧器材醋酸纤维素薄膜(3×8cm),培养皿,载玻片,电泳仪,电泳槽,粗滤纸,镊子✧材料新鲜血清(未溶血)✧试剂1、巴比妥缓冲液(pH 8.6,离子强度0.06):巴比妥1.66g, 巴比妥钠12.76g,加水至1000ml。
置4℃冰箱保存,备用。
(已配置)2、染色液:氨基黑10B 0.5g, 甲醇50ml, 冰醋酸10ml,蒸馏水40ml,混匀。
3、漂洗液:含95%乙醇45ml,冰醋酸5ml,蒸馏水50ml,混匀。
4、NaOH溶液:称取NaOH 16g,定容至1000ml。
血清蛋白实验报告
一、实验目的1. 学习血清蛋白的基本概念和分类;2. 掌握血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作方法;3. 通过实验,观察血清蛋白在醋酸纤维薄膜电泳中的分离情况,了解血清蛋白的组成和性质。
二、实验原理血清蛋白是血液中的一种重要成分,主要由白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等组成。
醋酸纤维薄膜电泳是一种常用的蛋白质分离技术,利用蛋白质在电场中的迁移速率差异,将混合蛋白质分离成不同的区带。
三、实验材料1. 实验仪器:醋酸纤维薄膜电泳仪、电泳槽、直流电源、紫外灯、剪刀、镊子等;2. 实验试剂:血清蛋白样品、醋酸纤维薄膜、电泳缓冲液、染色液等。
四、实验步骤1. 准备电泳缓冲液:按照实验要求配制醋酸纤维薄膜电泳缓冲液,确保pH值为8.6。
2. 制备样品:将血清蛋白样品用蒸馏水稀释至适当浓度,并加入少量电泳缓冲液,搅拌均匀。
3. 准备醋酸纤维薄膜:将醋酸纤维薄膜剪成适当大小的条状,用蒸馏水浸湿,去除气泡。
4. 加样:将制备好的血清蛋白样品滴加在醋酸纤维薄膜的一端,注意不要重叠。
5. 电泳:将醋酸纤维薄膜放入电泳槽中,确保薄膜水平,加入电泳缓冲液,接通直流电源,进行电泳。
6. 染色:电泳结束后,取出醋酸纤维薄膜,用染色液进行染色,观察血清蛋白的分离情况。
7. 分析结果:根据电泳图谱,分析血清蛋白的组成和性质。
五、实验结果与分析1. 电泳图谱:在电泳图谱中,可以看到血清蛋白分为五个区带,依次为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。
2. 结果分析:通过观察电泳图谱,可以了解到血清蛋白的组成和性质。
清蛋白是血清蛋白中含量最高的成分,占血清蛋白总量的60%以上;球蛋白是血清蛋白中含量次之的成分,包括α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。
这些球蛋白在血清蛋白中具有不同的生物学功能。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的原理和操作方法,成功分离了血清蛋白,并观察到了血清蛋白的五个区带。
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告
血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验报告
酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为支持物。
它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。
醋酸纤维薄膜电泳以醋酸纤维薄膜为支持物。
它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。
从阴极开始逐步是γ球蛋白,β球蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白和清蛋白。
新鲜血清经电泳后可精确地描绘出患者蛋白质的全貌,有助于许多临床疾病判断的参考。
在人的血清中,血清蛋白的种类非常多,而不同的血清蛋白所具有的功能以及对应的疾病也不完全一样,所以在临床中如果需要检查相对应的血清蛋白,就需要将这种血清蛋白分离出来。
这项检查是分离血液中不同血清蛋白的一种手段,这类检查属于性质比较高的一种检查,它的治疗费用和分离的精确度都比较适中,已经广泛应用于临床的实验室研究当中。
蛋白质纤维的结构和性能
1.1 蛋白质的基础知识
所谓蛋白质纤维是指基本组成物 质为蛋白质一类的纤维,按来源分有 天然的和人造的(再生的)两种。
蛋白质纤维分类
一、蛋白质的化学组成及分子 结构
1、元素组成
蛋白质是分子量很高的有机含氮高分 子物,结构较为复杂,但组成元素的种类 并不很多,主要有碳、氢、氧、氮等。
柞蚕 丝素 蛋白 23.6 50.5
0.51
11.3
0.9
0.26
6.06
-
3、分子结构
蛋白质可视作是由氨基酸彼此通过 氨基与羧基脱水缩合,以酰胺键链接起 来的大分子:
肽键 蛋白质结构中的 酰胺键。
肽 由肽键相联接的缩 氨酸。
(Ⅲ)称为二肽,二肽继续与一个氨基酸分 子缩合则成为三肽,以此类推可获得多肽 (polypeptide) 。
蛋白质纤维在酸(HCl)与盐(KCl)共存 的溶液中,假定膜内、外溶液具有相等和 不变的容积.
将蛋白质放入盐酸 (HCl) 溶液中,设:
C1- 蛋白质正离子的浓度,即蛋白质结合酸(H+) 的浓度;
C2- HCl初始浓度; C3- KCl初始浓度; X- 由膜外向膜内迁移的H+离子浓度; Y- 由膜外向膜内迁移的K+离子浓度。
4.分子间力 1)氢键 主要存在于肽链中的亚氨基(>NH) 和羰基(>C=O)之间:
2)离子键又称为盐键 多肽中的氨基和 羧基等碱性和酸性基团,在适当的条件 下可形成盐键,如赖氨酸侧基的—NH2和 谷氨酸侧基的—COOH之间可形成的盐键
(—COO- +H3N-)。
3)二硫健 本身属共价键(-S-S-), 可存在于不同肽链之间或同一肽链之 中:
蛋白的性质实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解蛋白质的基本结构和组成。
2. 掌握蛋白质的物理和化学性质。
3. 学习蛋白质的检测方法和应用。
二、实验原理蛋白质是生物体内重要的生物大分子,由氨基酸通过肽键连接而成。
蛋白质具有多种性质,包括物理性质、化学性质和生物学性质。
本实验主要探究蛋白质的物理和化学性质。
三、实验材料1. 蛋白质样品:鸡蛋清、牛肉、豆奶等。
2. 试剂:双缩脲试剂、碘液、硫酸铜、氢氧化钠、酚酞指示剂等。
3. 仪器:天平、烧杯、试管、酒精灯、滴定管、显微镜等。
四、实验步骤1. 蛋白质的鉴定- 取一定量的蛋白质样品,加入双缩脲试剂,观察颜色变化,确定蛋白质的存在。
- 取一定量的蛋白质样品,加入碘液,观察颜色变化,确定蛋白质的存在。
2. 蛋白质的溶解性- 将蛋白质样品分别加入蒸馏水、饱和硫酸铵溶液、饱和氯化钠溶液中,观察蛋白质的溶解情况。
3. 蛋白质的变性- 将蛋白质样品加热至沸腾,观察蛋白质的变性现象。
4. 蛋白质的盐析- 将蛋白质样品加入饱和硫酸铵溶液中,观察蛋白质的盐析现象。
5. 蛋白质的氨基酸组成- 取一定量的蛋白质样品,用酸水解法将其分解成氨基酸,用色谱法分析氨基酸的组成。
6. 蛋白质的等电点- 将蛋白质样品在pH梯度溶液中滴定,观察蛋白质的电泳迁移率,确定蛋白质的等电点。
7. 蛋白质的分子量- 将蛋白质样品进行凝胶电泳,通过比较迁移率与标准蛋白质的迁移率,计算蛋白质的分子量。
五、实验结果与分析1. 蛋白质的鉴定- 加入双缩脲试剂后,蛋白质样品出现紫色,说明蛋白质存在。
- 加入碘液后,蛋白质样品出现蓝色,说明蛋白质存在。
2. 蛋白质的溶解性- 蛋白质在蒸馏水中溶解度较小,在饱和硫酸铵溶液和饱和氯化钠溶液中溶解度较大。
3. 蛋白质的变性- 加热蛋白质样品后,蛋白质发生变性,颜色、形状和性质发生变化。
4. 蛋白质的盐析- 加入饱和硫酸铵溶液后,蛋白质发生盐析,形成沉淀。
5. 蛋白质的氨基酸组成- 通过色谱法分析,确定蛋白质样品中氨基酸的组成。
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验报告引言:血清蛋白质是构成血浆中主要蛋白质的一类物质,对于人体的健康状况具有重要的指示作用。
醋酸纤维素薄膜电泳技术是一种常用的分离和检测血清蛋白质的方法。
本实验旨在探究血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳的原理、操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
一、实验原理血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳是一种基于电荷和大小的分离技术。
首先,将血清样品与醋酸盐缓冲液混合,并加载到预制的醋酸纤维素薄膜中。
然后,将电泳槽中的电源接通,利用电场作用使蛋白质在薄膜上移动。
不同的蛋白质根据其分子量和电荷大小的不同,在电场作用下向阳极或阴极方向移动,从而实现蛋白质的分离。
二、实验步骤1. 准备工作:将醋酸纤维素薄膜剪成适当的大小,并在电泳槽中放置好阳极和阴极。
2. 样品制备:取适量的血清样品,加入醋酸盐缓冲液,并充分混合。
3. 样品加载:将样品缓冲液混合物加载到醋酸纤维素薄膜中,并确保完全覆盖薄膜表面。
4. 电泳条件设置:根据实验需要,设置适当的电场强度和电泳时间。
5. 开始电泳:将电泳槽连接电源,开启电源使电泳进行。
6. 实验结束:根据设定的电泳时间,关闭电源,取出醋酸纤维素薄膜。
三、实验结果分析和讨论通过血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳实验,可以观察到不同蛋白质在薄膜上的迁移情况。
根据迁移距离和迁移速度,可以初步判断不同蛋白质的分子量和电荷大小。
在实验中,我们可以根据薄膜上不同蛋白质的迁移位置,进行进一步的分析和鉴定。
血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳还可以用于检测某些疾病的诊断。
例如,肝功能异常时,血清中白蛋白和球蛋白的比例会发生变化,通过血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳可以明确出现异常的蛋白质成分,为临床诊断提供重要依据。
实验中需要注意的是,样品的制备和加载过程要尽量避免氧化、污染和杂质的引入,以保证实验结果的准确性。
此外,在设置电泳条件时,应根据样品特性和实验目的进行合理选择,以获得最佳的分离效果。
结论:血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳是一种常用的分离和检测血清蛋白质的方法。
实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳
实验一血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳【实验目的】(1)了解电泳的一般原理,掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。
(2)测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
【实验原理】带电荷的胶体粒子在电场中移动的现象称电泳。
醋酸纤维素薄膜电泳法是以醋酸纤维素薄膜作为支持物。
血清中含多种蛋白质,当在pH这8.6时,这些蛋白质均带负电,它们在电场中向阳极移动,由于各种蛋白质所带负电荷多少及颗粒大小不同,所以在同一电场,同一pH环境中涌动速度不同。
本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血清蛋白。
血清中含有清蛋白,α~球蛋白,β~球蛋白,γ~球蛋白和各种脂蛋白等。
各种蛋白质由于氨基酸组分,立体构象,分子量,等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。
分子量小,等电点低,相同碱性pH。
表1 人血清中12种蛋白质的等电点及分子量缓冲体系中,带负电喝多的蛋白质颗粒在电场中移动速度快。
例如,以醋酸纤维素薄膜为支持物,正常人血清中pH=8.6的缓冲体系中电泳1h左右,染色后可显示5条区带。
清蛋白泳动最快,其余依次为α1~,α2~,β~及γ~球蛋白。
这些区带经洗脱后可用分光光度法定量,也可直接进行光吸收扫描自动绘出区带吸收峰及相对百分比。
临床医学常利用它们异常区带的出现作为临床鉴别诊断的依据。
此法由于操作简单,快速。
图1 正常人血清醋酸纤维素薄膜电泳示意图为清蛋白,2,3,4,5分别为α1,α2,β~及γ~球蛋白,6为点样原点(3)优点。
目前,已成为临床生化检验的常规操作之一。
【临床意义】清蛋白62-72% α1—球蛋白3-4% α2—球蛋白6-10% β~—球蛋白7-11% γ~—球蛋白9-18%血清蛋白电泳的病理改变多半是清蛋白降低和一种或二种以上球蛋白增加。
表2 血清蛋白的临床意义【试剂】1.巴比妥缓冲液(pH=8.6离子强度为0.06):称取巴比妥纳12.76克,巴比妥1.66克,置于盛有200ml蒸馏水的烧杯中稍加热溶解后,移置100ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度。
生物化学实验血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
生物化学实验血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳一、实验目的1.掌握电泳法分离血清蛋白质的原理。
2.掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的操作方法。
3.测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。
二、实验原理带电粒子在电场中向与其电性相反的电极方向泳动的现象称为电泳。
血清中各种蛋白质的等电点在pH4.0~7.3之间,在pH8.6的缓冲溶液中均带负电荷,在电场中向正极泳动。
血清中各种蛋白质的等电点不同,所以带电荷量也不同。
此外各种蛋白质的分子大小各有差异,因此在同一电场中泳动的速度不同。
分子小而带电荷多者,泳动较快;反之,则较慢。
采用醋酸纤维素薄膜为支持物的电泳方法,称为醋酸纤维素薄膜电泳。
该膜具有均一的泡沫状结构(厚约120μm),渗透性强,对分子移动的阻力很弱。
用其作支持物进行电泳,具有微量、快速、简便、分离清晰、对样品无吸附现象等优点。
现已广泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血红蛋白、酶的分离和免疫电泳等方面。
经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带,从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白,经染色可计算出各蛋白质的百分含量。
三、实验器材1. 电泳仪:为电泳提供直流电源。
2. 电泳槽:为电泳提供场所。
多用有机玻璃制成,电极用铂丝。
3. 血清加样器:可用盖玻片或X胶片或微量加样器。
4. 醋酸纤维素薄膜:2cm×8cm5. 其它:培养皿(直径9-10cm)、滤纸、玻璃板、镊子等。
四、实验试剂和材料1、巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH=8.6,离子强度 0.075):称取2.768g巴比妥和15.458g巴比妥钠,置于大烧杯中,加蒸馏水约600ml,稍加热溶解,冷却后用蒸馏水定溶至1000ml。
置4℃保存,备用。
2、丽春红-S:称取0.5g丽春红,三氯醋酸13.4g,磺硫酸13.4g,蒸馏水加至1000ml。
3、漂洗液:取无水乙醇45ml,冰乙酸5ml和蒸馏水50ml,混匀置塞试剂瓶内贮存。
大豆蛋白纤维的结构表征及功能性质
大豆蛋白纤维的结构表征及功能性质大豆蛋白纤维是一种来源于大豆的天然蛋白质材料,其具有丰富的营养价值和广泛的应用前景。
在研究和开发大豆蛋白纤维之前,了解其结构表征和功能性质对于深入认识其特点和应用潜力至关重要。
大豆蛋白纤维的结构通常由多种蛋白小分子组成,包括大豆球蛋白、大豆隐球蛋白、大豆凝集素等。
这些蛋白小分子通过非共价键和共价键相互作用形成聚合物结构,进一步形成固态材料。
其主要结构特点包括分子量分布广泛、亲水性较强、组成成分多样等。
一种常用的表征大豆蛋白纤维结构的方法是扫描电子显微镜(SEM)。
使用SEM,我们可以观察到大豆蛋白纤维的表面形貌,并进一步分析纤维的形状、大小和表面特征。
另外,X射线衍射(XRD)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)也是常用的结构表征方法。
XRD可以用来确定大豆蛋白纤维的晶型结构,而FTIR可以提供有关纤维中化学键和功能基团的信息。
大豆蛋白纤维的功能性质是指其在应用中所具备的特定功能。
首先,大豆蛋白纤维具有良好的亲水性和吸水性。
这使得它在食品工业中可以用作增稠剂、乳化剂和击剪剂等功能性成分。
其次,大豆蛋白纤维还具有优异的弹性和可塑性。
这使得它成为一种理想的材料用于制备肉制品、鱼糜和素肉等替代性食品。
此外,大豆蛋白纤维还具有生物降解性和生物相容性,使其在生物医学领域具有广阔的应用前景。
除此之外,大豆蛋白纤维还具有一定的保健功能。
研究表明,大豆蛋白纤维富含多种必需氨基酸、植物甾醇和多种维生素。
这些活性成分可以促进人体的新陈代谢和免疫功能,并具有降低血脂、抗氧化和抗炎作用。
根据以上的结构表征和功能性质分析,我们可以看出大豆蛋白纤维具有广泛的应用潜力。
在食品工业中,它可以用于替代动物性蛋白制备各类食品,如肉制品、乳制品和面制品等。
在纺织工业中,大豆蛋白纤维也可以用于制备环保纺织品,如服装和家居纺织品等。
此外,大豆蛋白纤维还可以应用于制备保健品、医用材料和化妆品等。
总之,大豆蛋白纤维作为一种天然的蛋白质材料,其结构表征和功能性质的研究对于深入了解其特点、优势和应用潜力至关重要。
分离纤维蛋白实验报告
一、实验目的1. 了解纤维蛋白的基本性质和特点;2. 掌握纤维蛋白的分离方法;3. 学习使用各种实验器材和操作技术;4. 分析分离纤维蛋白过程中的影响因素。
二、实验原理纤维蛋白是一种丝状蛋白质,主要由纤维蛋白原在凝血酶的作用下转变而来。
在血液凝固过程中,纤维蛋白原首先转变为纤维蛋白单体,然后通过聚合形成纤维蛋白网,起到凝血作用。
本实验通过分离纤维蛋白,了解其特性,为后续研究奠定基础。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜人血浆、凝血酶、生理盐水、蒸馏水、0.9%氯化钠溶液、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)、离心机、移液器、试管、烧杯、滴定管、显微镜等。
2. 实验试剂:凝血酶、0.9%氯化钠溶液、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)等。
四、实验步骤1. 准备血浆:取新鲜人血浆10ml,加入0.9%氯化钠溶液10ml,充分混匀;2. 加入凝血酶:向血浆中加入适量凝血酶,使其浓度约为0.01U/ml,充分混匀;3. 模拟体外凝血过程:将上述混合液置于37℃水浴中,模拟体外凝血过程;4. 离心分离:将混合液在3000r/min条件下离心10min,取上清液;5. 测定纤维蛋白含量:取上清液适量,加入0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)进行稀释,采用双缩脲法测定纤维蛋白含量;6. 观察并记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果:通过模拟体外凝血过程,成功分离出纤维蛋白,并测定其含量;2. 结果分析:纤维蛋白在模拟体外凝血过程中逐渐形成,含量随着凝血时间的延长而增加。
当凝血时间达到一定值时,纤维蛋白含量达到最大值。
随后,纤维蛋白含量逐渐减少,可能是由于纤维蛋白溶解等因素的影响。
六、实验结论1. 成功分离出纤维蛋白,并测定其含量;2. 纤维蛋白在体外凝血过程中逐渐形成,含量随着凝血时间的延长而增加;3. 本实验为纤维蛋白的研究提供了实验依据。
七、实验讨论1. 影响纤维蛋白分离的因素:凝血酶的浓度、模拟体外凝血的时间、离心速度等;2. 改进实验方法的建议:优化凝血酶浓度,缩短模拟体外凝血时间,提高实验效率;3. 进一步研究方向:研究纤维蛋白在疾病发生发展中的作用,以及与其他蛋白质的相互作用。
实验2蛋白质的性质实验
2021/4/21
2
实验原理
COOH H2N—Cα—H
R
不带电形式
COO+H3N—Cα—H
R
两性离子形式
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3
R
+
H3N—CH—COOH 在酸性溶液 中的氨基酸
(pH<pI)
R
+
H3N—CH—COO-
在晶体状态 或水溶液中 的氨基酸 (pH=pI)
酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1mol/L盐
酸溶液数滴,观察沉淀的再溶解
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14
思考
蛋白质的等电点和沉淀反应都有什么实用意义? 蛋白质分子的水化层是如何形成的?
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15
(二)实验原理
在水溶液中的蛋白质分子由于生成水化层
和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,在一定 的理化因素影响下,蛋白质颗粒可因失去电荷 和脱水而沉淀。
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(三)蛋白质的沉淀类型:
1.可逆沉淀:此时蛋白质分子的结构尚未发生显著变化, 除去引起沉淀的因素后,蛋白质的沉淀仍能溶解于原 来的溶剂中,并保持其天然性质而不变性。
2021/4/21
6
么么么么方面
Sds绝对是假的
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7
么么么么方面
Sds绝对是假的
二、蛋白质沉淀及变性
(一)实验目的: 1.加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识 2.了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义 3.了解蛋白质变性和沉淀的关系
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9
(二)实验原理:
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【实验分析】
3.蛋白质的检验方法。 蛋白质主要是氨基酸组成,含较
多的N元素,灼烧会产生氨类物质,故 灼烧时有刺激性气味。
【相关例题】
日常生活中的下列做法,可行的是 ( B )
①食用酒精和工业酒精的主要成分相同,都可 以作为饮料饮用
②由于淀粉有遇到碘变蓝的特性,可利用淀粉 检验加碘食盐的真假
③喝牛奶、豆浆等富含蛋白质的食品可有效缓 解重金属中毒现象
【相关例题】
小明同学对下列四个实验都设计了方案,其中方案
不合理的是 ( B )
选项 A
B
C
D
区分羊毛 区分食盐 区分硝酸 区分聚乙
实验 线
水
铵粉末 烯
要求 和棉线 和稀盐酸 和氧化钙 和聚氯乙
粉末
烯
方案 灼烧闻气 滴加酚酞 加水
味
试液
灼烧闻气 味
【实验原理】
【相关例题】
1.
【实验分析】
③加热使蛋白质变性,主要是破坏蛋白质分 子中的氢键。
【实验分析】
2.蛋白质变性的条件及现象;
④甲醛使蛋白质中自由的分子链被甲醛交联 起来,失去原有的生理功能
⑤浓硝酸能使蛋白质变为黄色,这实际上是 发生了黄蛋白反应——带有苯环的蛋白质与浓硝 酸混合加热后硝酸对苯环发生硝化作用,生成黄 色的芳香硝基化合物。
【实验分析】
二、化学纤维
(三)无机纤维 无机纤维是以天然无机物或含碳高聚物纤维为原 料,经人工抽丝或直接碳化制成。包括玻璃纤维, 金属纤维和碳纤维。
【实验分析】
1.化学纤维在酸、碱条件下最为稳定
2.纤维素纤维对碱的抵抗能力较强, 而对酸的抵抗能力很弱。
3.蛋白质纤维对酸的抵抗力较对碱的 抵抗力强,蛋白质纤维无论在强碱还 是弱碱中都会发生不同程度的变化, 甚至导致分解。
模块6-5
蛋白质及纤维 的系列性质实验
一、从大豆中提取油脂
大豆油取自大豆种子,它是世 界上产量最多的油脂。大豆油的种 类很多,按加工方式可分为压榨大 豆油、浸出大豆油。而本实验主介 绍的是浸出法提取油脂。
【实验原理】
实验利用物质在两种互不相溶 (或微溶)的溶剂中溶解度的不同, 使该物质从一种溶剂内转移到另外 一种溶剂中,从而将绝大部分的该 物质提取出来的方法。
④低血糖病症发作时,吃馒头要比喝葡萄糖水 见效快
⑤患有夜盲症的病人,多食用动物肝脏有利于 视力回复
A.②③ B.③⑤ C.②⑤ D.①④
三、几种纤维的性质实验
【实验分析】
一、天然纤维
二、化学纤维
【实验分析】
一、天然纤维 天然纤维是自然界存在的,可以直接取得纤维 (一)植物纤维 主要化学成分是纤维素,故也称纤维素纤维。 (二)动物纤维 主要化学成分是蛋白质,故也称蛋白质纤维。 (三)矿物纤维 矿物纤维是从纤维状结构的矿物岩石中获得的纤 维,主要组成物质为各种氧化物,如二氧化硅、 氧化铝、氧化镁等。
豆油易溶于己烷难溶于水,己烷的沸点低于豆油和水。
餐桌上的食用油并不是简 单的一个压榨或者浸出就可以 制得的,这其中需要经过复杂 的物理化学过程。
二、蛋白质的特性
【实验分析】
蛋白质的三方面性质
1.溶解性以及影响其溶解性的因素; 2.蛋白质变性的条件及现象; 3.蛋白质的检验方法。
【实验分析】
1.溶解性以及影响其溶解性的因素;
一、天然纤维 天然纤维是自然界存在的,可以直接取得纤维, (一)植物纤维 是植物纤维的主要化学成分是纤维素,故也称纤维素纤维。 (二)动物纤维 动物纤维的主要化学成分是蛋白质,故也称蛋白质纤维。 (三)矿物纤维 矿物纤维是从纤维状结构的矿物岩石中获得的纤维,主要组成物质为各种氧 化物,如二氧化硅、氧化铝、氧化镁等 二、化学纤维 化学纤维是经过化学处理加工而制成的纤维。 (一)人造纤维(再生纤维) 人造纤维也称再生纤维。用含有天然纤维或原料,经过化学加工后制成的纺 织纤维。 (二)合成纤维 是从一些本身并不含有纤维素或蛋白质的物质用化学合成与机械加工的方法 制成纤维。如聚酯纤维(涤纶)、聚酰胺纤维(锦纶或尼龙)、聚乙烯醇纤 维(维纶)、聚丙烯腈纤维(腈纶)、聚丙烯纤维(丙纶)、聚氯乙烯纤维 (氯纶)等。 (三)无机纤维
【实验分析】
二、化学纤维 化学纤维是经过化学处理加工而制成的纤维。 (一)人造纤维(再生纤维) 人造纤维也称再生纤维。以天然纤维为原料,经 过化学加工后制成的纺织纤维。 (二)合成纤维 是从一些本身并不含有纤维素或蛋白质的物质中 用化学合成与机械加工的方法制成纤维。如聚酯 纤维(涤纶)、聚酰胺纤维(锦纶或尼龙)、聚 乙烯醇纤维(维纶)、聚丙烯腈纤维(腈纶)、 聚丙烯纤维(丙纶)、聚氯乙烯纤维(氯纶)等。
【实验拓展】
常见纤维的性质
(1).天然纤维: 棉:吸汗,柔软。 麻:容易皱,整理后笔挺、透风、价格较高。 羊毛:毛线比较细,不易起球。 小羊毛:毛线比较粗,一般与化学纤维混合,使 衣物不易变形。 马海山羊毛:蓬松感特性,较保暖。 蚕丝:柔软,有美丽的光泽,吸湿性大。
【实验拓展】
常见纤维的性质
(2).化学纤维: 人造丝:很轻,柔软,多用于衬衫。 聚脂纤维:与人造丝相似,很好处理,熨后不易 皱,价格便宜。 合成纤维:平织的合成纤维都有发亮的效果,针 织的合成纤维手感十分柔软,较重,单价较高。 尼龙:完全不透风,手感较硬,适用于风衣类外 套,与毛料混合,则使衣物较挺。
【各种纤维鉴别】
一般天然纤维无热塑性能,靠近火焰不会产 生软化熔融现象,而化学纤维则会软化、熔 融,然后燃烧,且灰烬较硬,不易压碎。
【实验拓展】
吸湿性能
纺织纤维在环境中吸收或放出水汽的性能称为纤 维的吸湿性。纺织纤维吸湿性的大小对纺织纤维 的形态尺寸、重量、物理机械性能都有一定的影 响,还直接影响服用织物的穿着舒适程度。吸湿 能力大的纤维易吸收人体排出的汗液,调节体温, 解除湿闷感,从而使人感到舒适。
【实验反思】
正己烷C6H14的部分性质:
1.具有一定的毒性,会通过呼吸道、皮 肤等途径进入人体。
2.正己烷为大气污染物之一
3.正己烷自燃温度为260℃。
【实验反思】
正己烷C6H14的缺点:
1.有毒
2.污染环境
3.有一定的安全隐患
【改进与拓展】
1.实验应在通风环境下完成 2.实验人员戴橡胶耐油手套 3.改用安全系数相对较高的异丙醇
蛋白质溶解度的大小与pH值、离 子强度、温度和蛋白质浓度有关。
当溶液中的中性盐的浓度大于 1mol/L 时,蛋白质会沉淀析出,这是 盐与蛋白质竞争水分的结果。
【实验分析】
2.蛋白质变性的条件及现象;
①重金属盐使蛋白质变性,是因为重金属阳 离子可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐 。
②强酸、强碱使蛋白质变性,是因为强酸、 强碱可以使蛋白质中的氢键断裂形成盐 。
【相关例题】
(1)将大豆研碎的目的是 增加大豆与己烷的接触面积,加快油脂的溶解速率;
(2)上述步骤中得到乳浊液的实验加热方式--热水浴,下列
说法正确的是 ②③
①任何加热都应该采用热水浴;②小烧杯内试剂受 热温度不超过100℃;③小烧杯内试剂受热较均匀。 (4)提取豆油所依据的原理是
【相关例题】
从大豆中提取并初步认识油脂的实验过程如 下:①将5g大豆研碎;②将研碎的大豆放入 试管中,再加入10mL己烷液体,振荡后静置 几分钟;③过滤;④将盛放滤液的小烧杯放 人一个盛有热水的大烧杯中,通过热水浴蒸 发掉己烷;⑤将大豆油移入试管,再加入 10mL水,振荡后静置,豆油浮在水面上。根 据实验过程回答下列问题: