POLARstar OPTIMA多功能荧光酶标仪
多功能酶标仪SpectraMaxi3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3部门Department 签名/日期Signature/Date起草人：Prepared by 樊小川，Xiaochuan Fan QC审核人：Reviewed by 黄思佳，Sijia Huang QC审核人：Reviewed by 褚夫兰，Fulan Chu QA批准人：Approved by 张伯彦，Boyan Zhang 质量负责人1 目的建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。
2 适用范围本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作3 术语或定义多功能酶标仪：指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度（Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光（TRF)、化学发光（Lum)等。
4 责任4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保证运行正常。
4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。
5 EHS要求N/A6 程序6.1 仪器安装仪器与电脑连接完毕并连接电源以后，按仪器背面的按钮可以直接启动仪器，经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。
在连有电源的情况下，保持24小时开机，不要罩防尘罩以保持透气，隔1-2月关机重启一次。
6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤6.2.1 打开软件点击“SoftMax Pro 6.3”图标，打开SoftMax Pro 软件，出现"Plate Setup Helper"对话框。
若无则点击图标。
6.2.2 连接仪器点击‘Choose a diffecient instrument’，打开‘Instrument Connection’对话框，在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。
多功能酶标仪原理及应用
Enzyme Concentration (units/ml)
OD 405 nm
/pubs/abl/articles/b9812/b9812log.pdf
Another useful reference for DELFIA kinase assay: Gaarde WA, etc., “Development of a Nonradioactive, Time-Resolved Fluorescence Assay for the Measurement of Jun N-terminal Kinase Activity J Biomol Screen 1997 Aug 2:4 213-23
2
技术原理
光吸收 化学发光 荧光强度 荧光偏振
时间分3
光吸收
物质对光的吸收 比耳定律 A=KCL K：吸收系数；C：物质的浓度；L：溶液光径长度 物质浓度测定 DNA：260 nm Protein：280 nm BCA：562 nm Elisa：450 nm MTT：490 nm NADH：340 nm Bacteria: 600 nm Plate：Clear
Large Stoke’s shift
Prompt signal
Delay Double D Decay
Time resolved signal
时间延迟后的信号
立即检测的信号
13
时间分辨荧光应用
14
DELFIA Proliferation protocol
Cell culture (1 – 5 days, +37C) BrdU Labeling (2 – 24 h, +37C) Cell fixation and denaturation (30 min, RT) Remove labeling medium (suspension cells have to be centrifuged)
多功能酶标仪
多功能酶标仪设备用途：该酶标仪具有吸光、荧光、发光、时间分辨荧光等检测功能，可进行多时间点检测和动力学研究，用于酶活测定、蛋白互作和活性分子检测等。
一、技术指标（一）吸收光检测参数：*1.光源：高能量氙闪灯2.波长选择：单色器，一次最多可进行6种波长测量3.波长范围：230-999 nm, 1 nm 步进*4.带宽：4nm (230-285nm), 8nm(>285nm)5.测量范围：0-4.0 OD6. OD 准确性：< 1% @ 2.0 OD7. OD 重复性：< 0.5% @ 2.0 OD*8. OD分辨率：0.0001 OD9.散射光：< 0.03% @ 230nm*10.检测模式：终点法，动力学法，波长扫描及孔域扫描，检测速度可调；可实现孔板内的不连续跳跃检测；可实现随时选孔随时检测，便于根据实验结果随时进行检测孔的操作和检测调整；可实现模拟检测，预先进行程序操作的模拟演练，提高检测成功率。
*11.光路径校正：专利光路径长度校正功能，可将微孔板光路径长度转化为标准的1cm光路径长度，校正误差，无须标准曲线即可准确定量12.孔板类型：兼容6、12、24、48、96、384孔标准平底、圆底及V-型底微孔板，并可进行加盖检测。
（二）荧光强度检测参数：*1.光源：高能量氙闪灯（荧光强度检测，时间分辨荧光，光谱扫描），光源能量可根据样品信号强度进行调整，有低、高两种能量强度可选；能量低检测速度更快，能量高检测更为敏感。
2.波长范围：250-700 nm3.波长选择：单色器，一次最多可进行6种不同波长的检测4.带宽：激发16nm，发射16nm；*5.顶部检测灵敏度：2.5 pM 荧光素( 0.25 fmol/孔384孔板)*6.底部检测灵敏度：4 pM 荧光素( 0.4 fmol/孔384孔板)7.检测器：PMT8.荧光光谱扫描：可进行激发光及发射光扫描，1nm步进，绘制扫描曲线，确定荧光染料光谱特性*9.检测模式：终点法，动力学法，波长扫描及孔域扫描，单孔最多可进行225次检测；检测速度可调。
多功能酶标仪操作流程
多功能酶标仪操作流程酶标仪是一种常用的实验设备，广泛应用于生物学、医学等领域。
多功能酶标仪结合了吸光度测量、荧光测量、发光测量等多种测量模式，能够满足不同实验需求。
下面将介绍多功能酶标仪的操作流程。
一、准备工作1. 清洁酶标仪：使用干净的纸巾或者专用擦拭布轻轻擦拭仪器外壳及工作台面，确保无灰尘和杂质。
2. 开启仪器：按下电源开关，等待酶标仪启动。
启动后，系统会进行自检，确保仪器正常工作。
3. 准备实验样本：根据实验设计的需要，准备好待测样本及相应的试剂。
二、设置参数1. 选择测量模式：根据实验需求，选择合适的测量模式，如吸光度测量、荧光测量或发光测量。
2. 设置波长：根据实验所需测量的波长范围，设置合适的波长。
可通过菜单栏或者旋钮进行设置。
3. 检查校准：使用预先校准好的标准品进行波长校准和背景校准，确保准确的测量结果。
4. 设置实验参数：根据实验要求，设置吸光度、荧光或发光相关参数，如积分时间、增益等。
三、测量样本1. 样品装载：将待测样本稀释至合适浓度，并分别装入专用的石英比色皿、荧光皿或发光皿中。
2. 放置样品：将装有样品的皿放置在仪器工作台上，注意对位和固定，确保与检测光源完全接触。
3. 开始测量：按下测量按钮，酶标仪会根据设置的参数自动进行测量，待测量过程完成后，结果将显示在仪器屏幕上。
四、结果分析1. 数据记录：将测量结果记录下来，包括吸光度、荧光值或发光值等，根据实验需要可进行多次测量并取平均值。
2. 数据处理：进一步根据实验设计要求，对测量结果进行数据处理和分析，如绘制标准曲线、计算浓度等。
3. 结果解读：根据实验目的和研究问题，对结果进行解读，得出相应的结论。
五、清洁和关闭1. 清洁皿和工作台：将使用过的皿清洁干净，可使用去离子水或者适当的清洁剂清洗，并用纸巾擦拭干燥。
2. 关闭仪器：长时间不使用酶标仪时，应将仪器关闭，按下电源开关即可完成关闭流程。
本文介绍了多功能酶标仪的操作流程，包括准备工作、设置参数、测量样本、结果分析以及清洁和关闭等步骤。
酶标仪荧光强度统计方法
酶标仪荧光强度统计方法本文介绍了酶标仪荧光强度统计方法的背景、原理和具体操作步骤，以及注意事项。
下面是本店铺为大家精心编写的5篇《酶标仪荧光强度统计方法》，供大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
《酶标仪荧光强度统计方法》篇1引言酶标仪是一种常用的实验室设备，用于检测生物分子的浓度和活性。
其中，荧光酶标仪是一种利用荧光物质的特性进行检测的设备。
在荧光酶标仪中，荧光物质被激发后发出荧光，通过检测荧光强度来判断生物分子的浓度和活性。
本文将介绍酶标仪荧光强度统计方法的背景、原理和具体操作步骤，以及注意事项。
原理酶标仪荧光强度统计方法的原理是基于荧光物质在被激发后发出的荧光强度与生物分子的浓度和活性之间的关系。
当荧光物质进入生物分子后，其荧光强度会发生变化，这种变化与生物分子的浓度和活性成正比。
因此，通过检测荧光强度的变化，可以判断生物分子的浓度和活性。
具体操作步骤酶标仪荧光强度统计方法的具体操作步骤如下：1. 准备样本：将待检测的生物分子加入到酶标仪中，使其与荧光物质发生反应。
2. 设置酶标仪：设置酶标仪的激发波长和发射波长，以及荧光物质的浓度和体积。
3. 测量荧光强度：将样本放入酶标仪中，测量其荧光强度。
4. 统计分析：根据测量得到的荧光强度数据，计算出生物分子的浓度和活性。
注意事项在酶标仪荧光强度统计方法中，需要注意以下几点：1. 样本的制备：样本制备的好坏直接影响到检测结果的准确性。
因此，需要严格控制样本的制备条件，如温度、pH 值等。
2. 酶标仪的设置：酶标仪的设置对检测结果也有很大的影响。
因此，需要根据实际情况合理设置酶标仪的激发波长、发射波长、荧光物质浓度和体积等参数。
3. 测量条件的控制：在测量过程中，需要控制好酶标仪的温度、pH 值和离子浓度等条件，以保证测量结果的准确性。
结论酶标仪荧光强度统计方法是一种常用的生物分子检测方法，具有灵敏度高、操作简便等优点。
《酶标仪荧光强度统计方法》篇2酶标仪荧光强度统计方法是通过酶标仪对样本进行荧光检测，然后对检测结果进行统计分析的方法。
多功能酶标仪测荧光步骤
多功能酶标仪测荧光步骤多功能酶标仪（Multifunctional Microplate Reader）是一种常用于生物学和医学研究中的实验设备，可以用于测量荧光信号。
下面将详细介绍多功能酶标仪测荧光的步骤。
步骤一：准备工作1.确保多功能酶标仪处于正常工作状态，并且已经校准和预热至适当温度。
2.准备所需的试剂和样品，并按照实验方案进行稀释或处理。
步骤二：设置测量参数1.打开多功能酶标仪软件，并选择适当的测量模式，如荧光强度测量、发射光谱扫描等。
2.根据实验要求，设置激发波长和发射波长，以及相应的滤光片或光栅。
3.设定吸收或发射光程，通常为96孔板或384孔板，确保正确安装样品板。
步骤三：样品加载与校准1.将待测样品加载到合适的孔板中，并确保每个孔的样品量相同。
2.在每个孔中添加适当的缓冲液或稀释液，以达到所需的反应体系条件。
3.在测量之前，进行校准操作。
根据仪器说明书，使用已知荧光标准品进行校准。
步骤四：测量信号1.将样品孔板放置在多功能酶标仪的载物台上，并确保其位置正确。
2.点击软件上的“开始测量”按钮，启动测量过程。
3.多功能酶标仪将自动进行荧光测量，根据设置的参数记录每个孔的荧光信号强度或发射光谱。
步骤五：数据分析与结果1.测量完成后，多功能酶标仪会生成一个数据文件，其中包含测量到的荧光信号数值。
2.使用相关的数据分析软件（如Excel、GraphPad Prism等）对数据进行统计和图形化处理。
3.根据实验要求，计算样品之间的差异、标准曲线的拟合等，得出最终的结果和结论。
步骤六：清洁和维护1.测量结束后，关闭多功能酶标仪并断开电源。
2.清洁样品孔板和载物台，避免污染和交叉感染。
3.定期检查和维护多功能酶标仪，如清洁光栅或滤光片、校准仪器等，以确保其正常运行。
需要注意的是，以上步骤仅为一般性指导，具体操作可能会因实验要求、仪器型号和实验方案而有所不同。
在进行实验前，请务必参考仪器的使用手册，并按照相关的实验方案和安全操作规程进行操作。
多功能酶标仪常见配置及参数
多功能酶标仪常见配置及参数Infinite M200 PRO1．一般参数：支持的检测模式：光吸收、荧光顶部底部、时间分辨荧光（TRF）、连续发光、瞬时发光、双色发光、BRET、光吸收和荧光波长扫描1.1 光源：UV高能闪烁氙灯，10^8次闪烁寿命，自带光强监测、校准，免维护无需预热1.2 光栅杂光率：＜10^-61.3 支持板型：6-384孔板，预设常用品牌型号；自动扫描并定义特殊规格板型，NanoQuant微量检测板，4位卧式比色杯，立式比色杯（选配）1.4 孔内多点读数（光吸收/荧光顶底）：6-384孔板，最多15×15个点（依板型模式可有不同），覆盖全孔，7种点布局1.5 温度控制：环境温度+5℃至42℃（选配）1.6 振荡：线性或圆形可选；振幅1-6mm，0.5mm步进；1-1000秒可调1.7 多标记多模式检测：单个实验中可进行无限制的多波长、多模式检测（光吸收、荧光、发光、波长扫描）1.8 最快读板速度：96孔板：20秒；384孔板：30秒1.9 波长扫描速度（FI EX/EM）：150秒；450-550nm，5nm步进，96孔板1.10 认证：DLReady，Transcreener Red FI2.光吸收模块2.1 波长范围：230-1000nm，1nm连续可调2.2 波长选择：双光栅2.3 带宽：＜5nm（λ≦315nm），＜9nm（λ＞315nm）2.4 波长准确性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm）2.5 波长重复性：＜±0.3nm（λ≦315nm），＜±0.5nm（λ＞315nm）2.6 检测器：紫外硅光电二级管2.7 检测范围：0-4 OD2.8 检测分辨率：0.0001 OD2.9 检测准确性：＜0.5% @260nm2.10 检测精确性：＜0.2% @260nm2.11 260/280nm精度：±0.073.荧光模块3.1 波长范围：Ex 230-600nm，Em 330-600nm，1nm步进3.2 波长选择：Quad4四光栅3.3 带宽：Ex ＜5nm（λ≦315nm），＜9nm（λ＞315nm）；Em＜20nm3.4 光栅杂光率：＜10^-63.5 波长准确性：＜±1nm（λ≦315nm），＜±2nm（λ＞315nm）3.6 波长重复性：＜±0.5nm（λ≦315nm），＜±1nm（λ＞315nm）3.7 检测器：光电倍增管（PMT），可选紫外和红外敏感型3.8 荧光灵敏度：顶部：170 amol/孔，（1.7 pM；384孔板），Fluorescein；底部：1.2 fmol/孔，（6 pM；96孔板），Fluorescein3.9 检测线性范围：7个数量级，扩展范围模式3.10 增益（Gain）值：1-255，四种模式：手工、自动、从孔计算、扩展范围3.11 顶部荧光Z轴聚焦：14800μm-23000μm连续可调，手工设定或自动探测，最强信号或最高信噪比两种模式4.时间分辨荧光模块4.1 灵敏度：90 amol/孔，（0.9 pM；384孔板），Europium4.2 延迟时间Lag time：0-2000 μs4.3 积分时间Integration time：10-2000 μs5．发光模块5.1 波长范围：380-600nm5.2 检测器：低暗电流单光子计数光电倍增管5.3 发光灵敏度：连续发光：225 amol ATP/孔，（9 pM；low volume 384孔板）；5.4 瞬时发光：12 amol ATP/孔，（218 fM；384孔板）5.5 检测范围：6-8个数量级（扩展动态范围功能）5.6 积分时间：100-20,000 ms5.7 孔间干扰：＜0.01%，黑板6．Nanoquant微量检测板模块6.1 用途：核酸定量：dsDNA，RNA，ssDNA，cDNA，Oligos 等；蛋白定量：280nm；核酸纯度：260/280nm 或260/230nm；荧光探针标记效率：Cy3，Cy5，Alexa 555，Alexa 647及其他6.2 样品量：2μL6.3 材质：全金属与聚光石英6.4 光程：严格0.5 mm，误差<±5μm6.5 检测范围：1-2900 μg/ml，dsDNA6.6 准确度：CV＜3%6.7 重复性：CV＜1%6.8 清洁：70%乙醇擦拭，或超声水浴，无需重新校准6.9 样品数量：16个6.10 检测时间：核酸定量：~1 分钟；荧光探针标记效率：~1分45秒7.气体控制模块7.1 范围：CO2：0 - 15%；O2：0.1 - 21%7.2 数据监控：实时测量内部气体浓度，精确到0.1%，LCD屏幕显示7.3 数据记录：通过i-control软件记录气体浓度变化7.4 海拔校准：自动-500米至4000米海拔高度校准8.软件模块配置Magellan软件预设多种实验模板，Nanoquant专有应用，内置DNA/RNA定量及纯度计算，图形界面，拖放式操作，检测结果直接导出至Excel，中文软件操作，强大的数据处理功能，可以进行定性、定量、波长扫描、动力学检测、IC/EC50等复杂计算。
FLUOstar OPTIMA 多功能酶标仪
无论是对灵敏度、灵活性或宽动力学范围等方面的需求，来自德国BMG LABTECH公司的FLUOstar OPTIMA都是科研和制药研究的最佳选择。
·内置式的智能注射器能够进行试剂的配给并启动动力学反应·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term和快速动力学检测·实时动力学检测·8位滤光片轮，激发光和发射光各8个滤光片位置·快速滤光片转换适应比率检测的应用·自动光学元件转换性能适应顶读和底读的转换·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数·孔扫描功能让细胞学检测更加简易·专有的发光检测系统·精确的温度控制可达60ºC·Stacker和机械臂兼容检测模式：FLUOstar OPTIMA是一款整合了共振能量转移检测(FRET, BRET)功能、由四个独立检测模块组成的多功能酶标仪：· 荧光强度，包括FRET和就、多种应用FLUOStar OPTIMA· 时间分辨荧光，包括DELFIA@· 发光（快速发光和持续发光，DLReady@）· 吸收光（UV/Vis，光程校正）FLUOstar OPTIMA在所有检测模式中都可以检测384-孔微孔板。
标配用于动力学曲线检测的自动进样器。
由于每个检测孔的进样体积都是独立可调的，因此可以在整个酶标板范围内产生不同的稀释梯度和浓度区域。
顶部和底部检测模式、最高45°C （60°C可选）的精确控温功能、孔扫描、多振荡模式和气体控制功能增强了FLUOstar OPTIMA的应用灵活性。
..多种规格酶标板优化的动力学反应检测功能动力学分析，如Ca2+ 荧光和瞬时荧光素酶化学发光，都可以很容易的进行高精确度和高重复性的检测。
两个高精度的进样器进样端都直接位于微孔板的读数位置，使得进样与读数可同时进行，确保不丢失任何实验数据。
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3部门签名/日期 Department Signature/Date 起草人: XX， Xiaochuan X Prepared by QC审核人: XX， Sijia XX Reviewed by QC审核人: XX， Fulan X Reviewed by QA批准人: XX， Boyan XX Approved by 质量负责人颁发部门执行日期质量保证部-QA Issued by Effective Date 替换文件复审日期 Version 00 Replaced For Review Date分发部门 QA，QC Distributed to1 of 7编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程1 目的建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序，规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。
2 适用范围本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作3 术语或定义多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。
4 责任4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护，出现故障时负责联系厂家维修，保证运行正常。
4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行，保证仪器正常使用，每次用完后填写仪器使用记录，且使用后及时清理台面，保持仪器洁净。
碧云天酶标仪用户手册说明书
质量保证........................................................................................................................................... 4
重要说明........................................................................................................................................... 5
1.2 仪器的光路系统.......................................................................................................7
1.3 规格和参数（包括 RS-232C 接口参数，打印机等） ...........................................8
2.4 屏幕介绍...................................................................................................................9
2.5 定义.........................................................................................................................10
3.5.5 记录查询.........................................................................................................32
矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制血小板趋化因子介导的THP-1细胞迁移
矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制血小板趋化因子介导的THP-1细胞迁移陈彦球;张献丹;覃楠;李卿;杨燕【摘要】[目的]探讨花色苷单体矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cy-3-g)对血小板分泌的炎症相关因子,及对血小板趋化因子诱导的单核细胞迁移的影响.[方法]健康人纯化血小板分别与不同浓度Cy-3-g(0、0.5、5、50 μmol/L)孵育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血小板分泌的上清液中TGF-β1、β-TG、CCL5的水平;不同浓度Cy-3-g与健康人外周静脉血共同孵育60 min,流式细胞仪检测白细胞表面的CCR5水平;使用Calcein AM标记THP-1细胞,然后与不同浓度Cy-3-g孵育后的纯化血小板上清共同作用120 min,于显微镜下观察细胞迁移情况;将THP-1细胞株分别与不同浓度Cy-3-g和CCR5抑制剂Maraviroc干预60 min,然后和重组蛋白分子CCL5(100 nmol/L)共同作用120 min,显微镜观察细胞迁移情况.[结果]与对照组相比,5、50 μmol/L的Cy-3-g能显著抑制纯化血小板分泌的TGF-β1、β-TG、CCL5与白细胞表面CCR5水平(P<0.05);同时,5 μmol/L和50 μmol/L的Cy-3-g 能显著抑制血小板上清诱导的THP-1细胞的迁移(P<0.05);Cy-3-g也可显著抑制重组蛋白分子CCL5诱导的THP-1细胞的迁移(P<0.05).[结论]花色苷Cy-3-g可以在体外通过抑制CCL5/CCR5介导的THP-1细胞迁移而有效抑制炎症,为花色苷抗炎及防治心血管疾病提供新的思路.%[Objective]To evaluate the effects of anthocyanin cyanidin-3-o-β-glucoside(Cy-3-g)on monocyte migra-tion mediated by platelet derived factors in vitro.[Methods]Thrombin-activated human gel-filtered platelets were incubated with different concentrations(0,0.5,5 or 50 μmol/L)of Cy-3-g.The level of TGF-β1,β-TG,CCL5 in platelet superna-tant was determined by ELISA.The peripheralvenous blood from healthy volunteers were incubated with different concentra-tions of Cy-3-g. The expression of CCR5 on leukocytes was detected by flow cytometer. Calcein AM labeled THP-1 cells were incubated with the releasates of Cy-3-g-treated gel-filtered platelets for 120 min,and then the number of the THP-1 cells were counted by a microscope.Moreover,THP-1 cells were pre-incubated with different concentrations of Cy-3-g with or without CCR5 inhibitor maraviroc(200μmol/L)for 60 min,then treated with recombinant CCL5(100 nmol/L)for 120 min.The number of the THP-1 cells were counted as well.[Results]Cy-3-g significantly inhibited platelet TGF-β1,β-TG,CCL5 secretion and decreased CCR5 expression of leukocytes compared with thecontrol(P<0.05).Moreover,the sig-nificant inhibitory effects of Cy-3-g on THP-1 cell migration toward the releasates of Cy-3-g-treated platelets were also ob-served(P<0.05). In addition,THP-1 cell migration toward recombinant CCL5 was significantly suppressed by Cy-3-g.[Conclusions]Anthocyanin Cy-3-g inhibited inflammation of atherosclerosis by platelet TGF-β1,β-TG,CCL5 secretion and CCL5-mediated monocyte migration.Our results provided new ideas for prevention and treatment of atherosclerosis.【期刊名称】《中山大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2018(039)001【总页数】7页(P41-47)【关键词】花色苷;血小板趋化因子;THP-1细胞;CCL5;CCR5【作者】陈彦球;张献丹;覃楠;李卿;杨燕【作者单位】广州市妇女儿童医疗中心,广东广州510623;广西壮族自治区人民医院营养科,广西南宁530000;广州医科大学附属第二医院,广东广州510260;广东省膳食与健康重点实验室,广东广州510080;中山大学公共卫生学院营养学系,广东广州510080;广东省膳食与健康重点实验室,广东广州510080;中山大学公共卫生学院营养学系,广东广州510080【正文语种】中文【中图分类】R151.2血小板作为一种多功能的细胞，在动脉粥样硬化的发生、发展等全过程中都发挥重要作用。
多功能酶标仪操作步骤
多功能酶标仪操作步骤
多功能酶标仪操作步骤
仪器保持24⼩时开机！
微孔板选择：
可见光吸收――全透明微孔板、
紫外吸收――紫外可透全透明
发光和时间分辨荧光―――⽩⾊不透明
荧光强度和荧光偏振――⿊⾊不透明板；
⼀、仪器参数设定：
1.点击桌⾯上的SoftMax5.2，打开软件。
2.选择M5仪器、COM1、输出格式“plate”、⾃动保存数据到“D：share”中。
3.分别设定快捷键中的温度、振板条件。
4.快捷键开闭微孔板槽健，和仪器上的Drawer键功能相同。
按⼀次开，再按关。
⼆、试验条件设定：
1.从菜单的Experiment选择增加板⼦，出现Plate界⾯。
2.选择plate、⽐⾊⽫，点击箭头按钮即可打开或关闭栏⽬。
3.点击Setting：4个快捷键可选择终点法、动⼒学法、波长扫描、单孔多点。
在所选择的界⾯下，依次设置实验条件。
AutoCutoff⼀直打勾，sensitivity⼀般6～10次，PMT选择Automatic可以⾃动回算。
全部选择完毕，点击界⾯下的OK。
3.Template按钮可以进⾏样品分组设定：
可以设定空⽩、样品标准曲线、设定未知样品并根据标准样品计算相应的浓度。
三、检测：放⼊检测板，点击read，结束后显⽰结果。
荧光酶标仪的用法
荧光酶标仪的用法荧光酶标仪是一种广泛应用于生命科学研究和临床诊断的仪器，在分子生物学、细胞生物学、生物化学等领域具有重要的应用价值。
本文将介绍荧光酶标仪的用途、使用方法和注意事项，以帮助用户更好地理解和正确使用荧光酶标仪。
一、荧光酶标仪的用途荧光酶标仪主要用于检测和定量分析样品中的荧光信号，常见的应用包括但不限于：1. 免疫荧光分析：用于检测和定量分析细胞或组织中的特定免疫荧光标记物，如抗原、抗体等，广泛应用于免疫组化、免疫细胞化学等领域。
2. 荧光酶标实验：用于检测和定量分析核酸、蛋白质等生物分子的荧光信号，用于基因表达分析、蛋白质定量等研究。
3. 生物化学荧光检测：用于检测和定量分析生物化学反应中产生的荧光信号，如酶活性检测、荧光底物检测等。
二、荧光酶标仪的使用方法1. 准备工作：打开仪器前，确保工作台面整洁，符合实验要求。
准备好样品、荧光底物、控制物等实验材料。
2. 打开仪器：按照仪器操作手册的指引打开荧光酶标仪，并进行必要的预热和校准工作。
3. 装样品：按照实验要求，将样品加入到仪器提供的专用样品皿中，注意避免气泡和污染物的混入。
4. 设定参数：设置荧光酶标仪的工作参数，如激发波长、发射波长、积分时间等，确保符合实验要求。
5. 启动检测：启动荧光酶标仪，开始对样品中的荧光信号进行检测和定量分析。
6. 数据处理：将测得的荧光信号数据进行处理和分析，根据实验要求得出结论和结果。
三、荧光酶标仪的注意事项1. 实验环境：在使用荧光酶标仪时，要保持实验环境的整洁和安静，避免对荧光信号检测产生干扰。
2. 样品处理：在进行样品处理和加样过程中，要避免样品受到污染或受损，影响荧光信号的准确检测。
3. 仪器维护：定期进行仪器的维护和校准工作，保持仪器处于良好的工作状态。
4. 安全操作：在使用荧光酶标仪时，要遵守相关的安全操作规程，避免发生意外事故。
5. 数据保存：在完成实验后，及时保存和备份测得的数据，确保数据的可靠性和安全性。
酶标仪技术参数
测量范围：0.000-4.000Abs
主要技术参数
分辨率:0.OOlAbs
线性误差：±1.0%
精确度：±1.0%
重复性：≤0.005A
显示：LCD大屏幕全点阵中文液晶显示屏
测定速度：读板速度3秒/96孔
程序储存容量：常规存储500个检测程序和IloO次96孔检测结果（或可根据用户需求进行拓展）
外部接口：串行接口，外接计算机；并行接口，外接打印机
技术认证：取得ISO、CMA标准、源自盟CE认证酶标仪技术参数光源：卤鸨灯，寿命2500小时以上
波长范围：400-750nm,具有单、双波长设定
滤光片位置：8个滤光片位置（标配405、450、492、630nm；
选配414、546、578、690nm）
传输方式：8道光纤（可增配参比通道）
测量方式：单波长检测，双波长检测，两点法，动力学法，多波长检测，外部计算机控制测量等
多功能酶标仪技术参数
多功能酶标仪技术参数1．★主要功能具有光密度检测、荧光顶部检测、荧光底部检测、发光检测、时间分辨荧光检测2．光源闪烁式高能氙灯3．微孔板6、12、24、48、96、384孔4．自动波长校准每次测读在设好读数的波长范围后，进板测读前会进行自动波长校准5．比色杯检测功能有光密度检测参数6．波长选择可调节的光栅式连续波长(1nm递增)，双单色器7．波长范围200-900nm8．带宽≤5.0nm9．测读精确度< ±0.003 OD±1.0%，0-2.0 OD10．测读准确性<±0.006 OD±1.0%,0—2.0 OD(微孔板)；<±0.005 OD±1.0%,0—2.0 OD (比色皿)11．测读范围0-4OD12．光程校正功能具有光径传感器，可将光密度值校正为标准1cm光径下的读数，可使用998nm的光进行校正不受限制13．杂色光≤0.05%@230nm14．光度测定分辨率0.001OD15．线性范围0-4OD（96微孔板）16．读板速度96孔板15秒以下荧光检测功能17．波长范围激发：250-800nm发射：280-800nm18．带宽激发：9nm发射：12nm19．灵敏度顶部测读：1fmol/孔荧光素底部测读：4fmol/孔荧光素20．检测器PMT21．时间分辨荧光灵敏度：≤150amol Eu发光检测22．检测器暗电流光量子计数PMT23．双色发光检测功能有24．灵敏度≤7amol荧光素/孔25．温控功能室温+4℃至42℃，准确性：±0.5℃（37℃），均一性：<1℃（37℃）26．振板功能有27．分液器有28．软件功能具有强大分析功能，无需把数据导出后分析。
软件可自动进行数据的运算及存储；可完成图表曲线制作，并可完成坐标轴的自由定义和转换，多种曲线拟合方式；完成自编公式和程序的存储及运行，并可对多个特征波长的OD值进行同时运算；29．电源100－240V，50－60赫兹交流电30．配置主机，电脑（惠普或IBM品牌笔记本电脑，处理器类型:英特尔酷睿双核二代T5600（Merom核心），Intel 945PM芯片组，1024MBDDR2 533MHz内存，120G 5400转高速硬盘，支持双层刻录的内置Super Multi光驱，独立NVIDIA Geforce 7200显示核心，14.1寸WXGA液晶宽屏，内建千兆网卡、802.11a/b/g无线网络模块、调制解调模块。
多功能酶标仪技术规格要求
多功能酶标仪技术规格要求一、采买内容序号名称数目1多功能酶标仪 1 台二、技术要求1、系统性能多模式检测模块：可见光 /紫外光汲取、荧光强度〔顶读 & 底读〕、超高敏捷化学发光、时间分辨荧光和超敏捷Alpha 检测。
2、激发光源：2.1 光汲取、荧光强度、TRF 模块光源采纳高能闪耀氙灯，波长范围230-1000 nm。
*2.2 Alpha 光源采纳 680 nm 高能固态激光光源，激光输出功率>200 mw。
*3 、检测器：多模式检测模块：同时配置两个PMT：一个红敏 PMT 和一个独立超高敏捷度 PMT 。
4、可见 /紫外汲取光：双光栅系统可进行光汲取检测，波长范围230-1000 nm，双光栅分光步进〔 increments〕。
*5、荧光强度〔顶读和底读〕：高精度四光栅系统，要求前置cut-off 滤光片，波长范围 250-850nm；分光步进〔 increments〕。
*6、超敏感动学发光：独立于荧光检测以外的独自光路，独立超敏感PMT 检测器。
7、时间分辨荧光：激发配置320 nm/340 nm 滤光片 /二向色镜优化组合，保证激发光强度。
发射光路为双光栅，知足包含 615nm 和 665 nm 在内的单 /多波长检测。
*8 、超敏捷Alpha检测：优化独立Alpha专用光路，采纳高能固态激光+独立超Alpha检敏捷PMT优化高速组合，以抵达最正确的检测效率和敏捷度。
要能供给测试剂盒及特别应用的定制化效力。
9、温控模块：保证样品检测温度稳固到室温+3 至65 摄氏度。
10、拥有三种振荡模式：线形、圆形、8 字形，可设定震荡速度、振幅及振荡时间。
拥有仪器外〔 outside〕振荡功能，在程序运转的过程中，微孔板能够伸出仪器外面振荡，便于实现程序运转中察看振荡成效，而不用中断程序。
11、拥有板孔扫描功能：可选孔内圆形或方形地区中的多点扫描检测，合用于贴壁细胞或不平均样本检测，以减少因样品散布不平均造成的检测误差。
多功能酶标仪(共50张PPT)
抗原抗体反应
抗原与抗体的反应统称为免疫学反应。 在体内进行的抗原抗体反应称为免疫反 应，在体外进行的抗原抗体反应称为血 清学反应。 没有抗原的刺激，机体不能产生抗体； 利用抗体可以检测抗原物质。
ELISA法特点
ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反 应的基础上，因而，具有特异性。
酶标仪的分析原理与分光光度法一样， 服从朗伯比尔定律。物质的含量与显色 液的颜色深浅成正比，而颜色深浅可用 吸光度表示，所以物质的含量与吸光度 值成正比。
酶标记抗原或者抗体发生免疫学反应后 ，与底物的结合物，在特定波长下有最 大吸收，可通过测定显色液的吸光度对 待测物进行定量。
ELISA法知识
多功能酶标仪的实验应用
ATP检测 微生物生长 绿荧光蛋白分析 药代毒性分析 膜渗透分析 荧光偏振分析
三、酶标仪操作
1. 注意事项
2. 酶标板
3. 操作要点
1.注意事项
1）反复研读试剂盒说明，熟悉操作步骤。 2）加样的准确性。操作中须注意显色剂和
终止的加量准确，最好使用加样枪加液 以保证比色时吸光度的准确性。枪头不 要混用。 3）洗涤时间。一般按照说明书要求，起码 洗涤5次，切要把残液甩干。
由于测定中需要酶标记抗原或抗体，酶 分子与抗原或抗体分子的结合物可以催 化底物分子发生反应，产生放大作用， 正因为此种放大作用而使本法具有很高 的敏感性。
2.常用的ELISA分析
一般酶标仪比色应该首选双波长。 但每批微量反应板对抗原或抗体蛋白质的吸附性能是有显著差别的。 推开测定盖，将酶标板小心正确放到测定槽内，合住盖。 返回原显示，set analysis 的□D/S □Filt□Mix,按enter出现set analysis的Mode。 测定完成后，取出酶标板，合上盖，关仪器开关和电源，盖上防尘罩。
多功能酶标仪中荧光检测技术介绍
荧光分析技术是一种强大的分析手段，广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，是多功能酶标仪的重要应用，如TECAN(M1000、M200等)，Thmeral(Varioskan Flash)，Bio-tek（Synergy 4等），MD（M2、M5）都可以应用于荧光检测。
1.概述室温下，大多数分子处于基态的最低振动能级，处于基态的分子吸收能量（光能、化学能、电能或热能）后跃迁至激发态，激发态不稳定，将很快衰变到基态，以光的形式放出能量，这种现象称为“发光现象”。
分子发光包括荧光，磷光，化学发光，生物发光等。
受到光照时发光，光照切断时发光立即消失的叫荧光，光照切断时，发光逐渐变弱以致消失的叫磷光，吸收化学反应的化学能量而发光叫化学发光，由生物能转变为光辐射的称作生物发光。
由于发光物质不同荧光有分子荧光和原子荧光之分，分子荧光为带光谱，原子荧光为线光谱，通常所说的荧光为分子荧光。
通过测定所发射荧光的特性和强度，可以对物质进行定性、定量分析。
2.荧光检测技术2.1荧光强度(FI)荧光强度与荧光物质的浓度成正比，这是荧光分析法是量分析的依据。
在生物学上的应用非常广泛，可以进行生物大分子定量，酶活性分析，荧光免疫分析，细胞学分析（细胞增殖，细胞毒理，细胞吸附等）和分子间相互作用。
2.1.1细胞凋亡检测Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-3为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。
Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。
但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase-3的活性明显下降。
设计出荧光物质偶联的短肽Z-DEVD-AMC。
在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光（图1）。
LUMIstar Omega 化学发光多功能酶标仪
仪器介绍：BMG LATECH 公司为您专门开发出一款LUMIstar Omega 化学发光多功能酶标仪，为快速发光和持续发光提供了高灵敏度的分析检测平台。
在需要时可以升级到FLUOstar Omega 或者POLARstar Omega。
LUMIstar Omega化学发光多功能酶标仪应用：·荧光素酶报告基因分析, 启动子分析。
·化学发光免疫分析·细胞基础分析(如：细胞毒性、凋亡和增殖）·胞内水母发光蛋白Ca2+分析·ATP分析·GUS分析(ß-葡萄糖醛酸酶)·ROS (reactive oxygen species)·BRET检测监控分子间的相互作用控制和分析软件BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。
并完全符合FDA 21CFR Part 11。
控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。
数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。
数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。
该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值：线性回归拟合4-参数拟合点对点拟合分段回归拟合三次样条函数拟合2nd和3nd多项式拟合MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。
利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析，让MARS软件更为完善。
只需按一下鼠标，通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果，实验步骤设计，和用户自定义数据处理。
LUMIstar Omega化学发光多功能酶标仪指标参数：香港伯齐科技有限公司广州伯齐生物科技有限公司400 600 9639 marketing@香港北京上海广州厦门昆明。
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仪器介绍：
POLARstar OPTIMA多功能荧光酶标仪是在
FLUOstar OPTIMA多功能酶标仪平台上构
建的多功能酶标仪，它包括了FLUOstar
OPTIMA的所有功能，并在此基础上新增荧
光偏振(FP)和同时双发射光检测(SDE)的
功能，可以同时检测两个发射波长。
POLARstar OPTIMA具体两个光电倍增管，
可用于FP，FRET和BRET分析的同时双通
道检测，具有超快的速度和超高的精确度，
POLARstar Optima 同一块板只要测读一次就可以获取检测结
果,与其他的同类型产品相比，通量和灵敏
度大大提高，%CVs低，并且在同一价格范
围内，只有POLARstar OPTIMA能提供同时
双发射功能。
功能包括：
·荧光偏振
·荧光强度，包括FRET和多种应用
·时间分辨荧光，包括DELFIA@
·吸光度(UV/Vis光程校正)
·发光(快速发光和持续发光)，包括BRET,DLReady TM认证
其他特点：
·顶部和底部测度
·即使在全波长扫描时，内置式的智能注射器仍然能够同时进行试剂的配给并启动动力学反应·精确的温度控制可达60ºC
·孔扫描功能让细胞学检测更加简易
·自动光学识别和转换
·Stacker自动堆板机机械兼容
·MARS软件直观的实验步骤设置和全面综合的数据分析
·模板管理器能够进行多种数据处理
·多功能的动力学软件可用于终点法，long-term和快速动力学检测
·实时动力学检测
·”QuickStart”模式允许用户只需点击3次鼠标键即可进行读数
POLARstar OPTIMA多功能荧光酶标仪可应用于以下研究中：
·分子相互作用检测(FRET/BRET/荧光偏振)
·Ca2+检测(如 Ca2+ Flux with Fura-2, Indo-1, FLUO-3/4)
·酶活测定
·DELFIA@分析
·免疫分析, ELISA
·报告基因分析：GFP,YFP,荧光素酶和DLR
·ORAC和ABEL抗氧化分析
·260/280
·蛋白质和核酸定量测定(如 Bradford, Lowry, DNA, 260 nm / 280 nm)
·迁移测定
控制和分析软件
BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。
并完全符合FDA 21CFR Part 11。
控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤，功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数，以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。
数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。
数据可以通过预设的模板进行处理，也可以对通过改变统计数据来进行处理。
该软件同样能够制作标准曲线，并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值：
线性回归拟合
4-参数拟合
点对点拟合
分段回归拟合
三次样条函数拟合
2nd和3nd多项式拟合
MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算，所以很容易得到如：S/N，Delta F%和Z’等重要参数。
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