鲨鱼软骨血管生成抑制因子的研究进展
青鲨软骨血管生成抑制因子的制备【开题报告】
开题报告药学青鲨软骨血管生成抑制因子的制备一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义我国蕴藏着丰富的海洋生物资源。
现已证实，不少海洋生物活性物质具有抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗艾滋病、抗心脑血管疾病、抗老年痴呆症以及抗疲劳、增强免疫、延缓衰老等功效。
由此引起世界各国对开发海洋生物的极大兴趣，它已成为现代医药保健品开发研究的热点[1]。
近年来，肿瘤严重威胁着人类的生命和健康，是仅次于心脑血管疾病危害人类健康的第二大杀手。
据统计，全世界每年约有700万人死于癌症，约占总死亡人数的四分之一[2]。
目前，已有许多抗肿瘤药物应用于临床，但多因其副作用大而在应用上受到限制。
因此，人们逐渐将注意力转向从动植物中提取副作用小的抗肿瘤有效成分。
近20年来发现鲨鱼的整个内骨骼几乎全由软骨组成，并且鲨鱼不长肿瘤，推论鲨鱼体内存在某种抑制肿瘤生长的物质[3]。
1 对肿瘤细胞的杀伤作用在鲨鱼软骨中存在抗肿瘤因子，可直接杀伤肿瘤细胞，抑制细胞骨架的形成或使细胞骨架发生凝聚和固缩，破坏其结构完整性[4]。
2对新生血管生长的抑制作用鲨鱼软骨蛋白可以抑制鸡胚胎血管化和基质胶诱导的血管生成，抑制乳腺癌和人恶性胶质瘤的生长，阻止乳腺癌和Lewis肺癌的转移。
软骨的这种作用可能与其抑制金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶的作用有关[5]。
3 抗氧化作用鲨鱼软骨中提取的一种水溶性组分具有抗炎和止痛作用。
这种组分能清除活性氧自由基，保护细胞不发生突变，间接起到抗肿瘤作用[6]。
4 增强机体免疫力鲨鱼软骨活性物质抗肿瘤的另一原因是其可以激活机体的免疫系统，活化NK细胞及巨噬细胞以增强攻击癌细胞的能力。
活性物质通过抑制致敏红细胞，刺激CD4+和CD8+渗入肿瘤细胞增强迟发型超敏反应，从而增强免疫应答[7]。
鲨鱼软骨多糖对胸腺和脾脏具有刺激作用，同时能活化巨噬细胞，使其表面伸出较粗大的伪足，提高机体的免疫力，刺激白细胞分泌TNF[8]。
国内外愈来愈多的研究证实，鲨鱼软骨含有能阻止病理性血管生长的特殊物质，从而断绝肿瘤的血液供应，使肿瘤减缓生长，萎缩甚至消失,抗癌作用显著。
鲨鱼软骨低分子蛋白对新生血管形成的影响
２ ４孔板 ， 每孔 ５ ０ ｌ ０ ， 使其凝 固成胶。用灭菌刀片沿直径垂直切
下 ，去除二分 之一 的凝胶 ，在此处加 ２ ０ ｌ ５ ０ 细胞 ／ｌ ０ 含 １５ Ｘ ｍ
的培养基 ， 培养 ２ ４ｈ待细胞贴壁后 ， 心移去剩余 的一半凝 胶 ， 小
倾去原培养基并用 Ｐ Ｓ冲洗 。换含有低分 子蛋白 １０ ｇｎ 的 Ｂ ０ ，ｌ ｌ
值 Ｘ１０ ０ ％。
鲨鱼是一种特殊的海 洋生物 ，９ ２年在美国首先将 鲨鱼 １９ 软 骨（ｈｒ ａｔａ，Ｃ 粉直接用 于临床治疗 癌症 ， ｓａｋｃｒｌ Ｓ ） ｉｇ 取得 了一 定 的效果 。但未经提取的ｓ 粉其有 效成分含量不足 ， ｃ 直接用 于临床抗肿瘤难 于达到治疗 目的，因而许多学 者则纷纷采用 提取 鲨鱼软骨血管 生成抑制 因子 （ｈｒ ａｔａ ｎｉ ｅ ｅｉ ｓａｋｃｒｌｇ ｇｏ ｎｓ ｉ ａ ｇ ｓ ｉ ｉｔ ｇａｔ ，Ｃ Ｉ ） ｎ ｂ ｉ ｆ ｏ Ｓ Ａ Ｆ 来抗肿 瘤生长 ， ｈ ｉｎ ｃ ｒ 但是Ｓ Ａ Ｆ Ｃ Ｉ含量 较低 ， 易降解 ， 纯化困难 ， 进行其新药开发仍有许 多技术问题需 要解 决。 为此 ， 有许多研究就集中到 了鲨鱼软骨粗提物 的抗肿瘤作
ＨＵ Ｖ Ｅ Ｃ生 长 的影 响 取对 数生 长 期 的 ＨＵ Ｖ Ｅ Ｃ细胞 ，用 含 １％ ０
鱼软骨低分子蛋白能有效地抑 制新 生血管的形成。方法 以
鲨鱼软骨为原料 ， 粉碎后反复冻融 ， 离心去沉淀， 超滤 、 空干 真 燥后得到鲨鱼软骨低分子蛋 白。体 外实验测定它对 内皮 细胞
【 关键词 Ｊ鲨鱼软骨 内 皮细胞增殖
抑制血管生成
５Ｘ１５ ０ 细胞 ／ 。将细胞种入 ９ ｍｌ ６孔培养板 （０ ｌ孔 ）加入含低 ４ ， ， 分 子蛋 白 １０ ｇ 的无 血清 培 养液 ，于 ３ ０ ／ ｍｒ ７℃孵 育 ２ｈ 。用 Ｄ ｌｅｃ ’Ｂ ｕｂｃｏＰ Ｓ液（ Ｐ Ｓ清洗细胞 ４次 ， ＤＢ ） 除去未黏 附细胞 ； 黏附细 胞用 ２ ％甲醇稀释 的 ０５ ０ ．％结 晶紫染 色 、 固定 、 漂洗和空气晾干 。 用 比例 为 １： １的乙醇和 ０１ ｏ Ｌ枸橼酸钠溶 液洗涤染 色的细 ．ｍ ｌ ／ 胞， 用酶标仪在 ５ ０ｎ ４ ｍ波长测定 吸收度（ Ｄ ｏ Ｏ 黏附抑制率（ ＝ ％） （ 照 组平 均 Ｏ 对 Ｄ值 一试 验组 平 均 Ｏ Ｄ值 ）／对 照组 平 均 Ｏ Ｄ
鲨鱼软骨低分子蛋白的提取及其抑制新生血管形成的初步研究
鲨鱼软骨低分子蛋白的提取及其抑制新生血管形成的初步研究尚俊英;谢裕安;杨帆;杨志国;吴昊【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2008(30)2【摘要】目的研究一种从鲨鱼软骨简便、快速提取低分子蛋白的方法,并证实该方法提取的鲨鱼软骨低分子蛋白能有效的抑制新生血管的形成.方法以鲨鱼软骨为原料,粉碎后反复冻融,离心去沉淀, 超滤、真空干燥后得到鲨鱼软骨低分子蛋白.体外实验测定其对内皮细胞增殖、黏附和迁移的影响,用鸡胚绒毛尿囊膜实验测定对新生血管形成的影响.结果鲨鱼软骨低分子蛋白能显著抑制血管内皮细胞的生长抑制率为(36.77±2.98)%、黏附抑制率为(52.95±4.48)%和迁移运动抑制率为(68.05±4.04)%,可显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管的形成.结论本研究所提取的鲨鱼软骨低分子蛋白可以抑制内皮细胞生长、黏附和迁移运动, 进而抑制新生血管的生长.【总页数】4页(P156-158,封4)【作者】尚俊英;谢裕安;杨帆;杨志国;吴昊【作者单位】广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市,530021;广西医科大学附属肿瘤医院,南宁市,530021【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.胰蛋白酶水解鲨鱼鳍软骨提取粘多糖的研究 [J], 肖凯军;郭祀远2.鲨鱼软骨低分子蛋白对新生血管形成的影响 [J], 尚俊英;谢裕安3.鲨鱼软骨低分子蛋白抑制荷瘤小鼠肿瘤生长的实验研究 [J], 尚俊英;董红宇;李雪峰;张颖4.鲨鱼软骨血管形成抑制因子的分离纯化及其活性的初步研究 [J], 曾锋;谢团霞;杨伟兴;张展霞;余健秀;庞义5.鲨鱼软骨提取物对小鼠实体瘤抑制作用的实验研究 [J], 梁安民;匡志鹏;谢裕安;梁宁生;陆益;杨帆;莫钦国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
软骨源性血管形成抑制因子的研究进展
８ 培养基 中的血管形成 抑制 因子与 Ｔ ＭＰ２的 Ｎ＇ 端 氨基酸 ） Ｉ － 末 序列相同。Ｏｒｉ 发 现原 发肿 瘤产 生 了一种 抑制 肿瘤转 移 生 ｅｌ ｌ ｓ 长的血管形成抑制 因子。患有 肿瘤小 鼠的 血管 和小便 中出 现
的抑制因子经纯 化 ， 定 为纤维 蛋 白溶 酶原 内部 的一个片 段 ， 确 并命 名 为 ａｇ ｓａｉ。 当 全 身 给 药 时 ， ｎ ｉ ｔｔ ｎ ｉ ｔｔ ｏ ｎ ａｇ ｓａｉ 烈 抑 制 ｏ ｎ强
Ｆ Ｆ２在角膜 新 生 血管形 成 老 鼠模 型 中诱 导血 管生 成 作用 。 Ｇ－
因子 （ Ｄ ） ＤＩ Ｃ Ｉ 。Ｃ 与组 织金属蛋 白酶 一１ 抑制 因子（ Ｉ 一） Ｔ ＭＰ１二
抑制因子抑制 鼠肿 瘤生 长。Ｓ ｚｋ 等从 胎 牛软骨 提取 的大分 ｕｕ ｉ 子量片段软骨源 性抗 肿瘤 因子 （ Ａ ） 抑 制实 体 肉瘤 一１０ Ｃ ＴＦ ， ８ 生长 ， 而且说明对实体肉瘤 １０的抑制 作用不是 由于它对 肉瘤 ８ １０ ８ 细胞 直 接 作 用。Ｔ ｌ ａ ａ ｇｗａ也 证 明 Ｃ Ｔ ｄ Ａ Ｆ抑 制 培 养 中的 ＢＡ （ Ｐ Ｅ 牛肺动脉 内皮 细胞 ） 的增 殖和 Ｄ Ａ合成 。Ｔ ｌ ａ 将 Ｎ ａ ｇｗａ ｄ ＣＴ Ａ Ｆ用 Ｄ Ａ －ｅｈｒｓ Ｌ６ Ｅ Ｅ Ｓｐａｏｅ －Ｂ层 析 法 进 一 步 纯 化 ， 制 Ｃ 抑 ＢＡ Ｐ Ｅ细胞 ＤＮ Ａ合成的主要浓度高峰 ， 能抑制植入 Ｃ ７ Ｌ ６ ５ Ｂ １Ｎ 鼠爪 Ｂ ６ 色素瘤的生长 ， １黑 也能抑制鸡胚胎绒毛膜尿囊 Ｂ ６黑 １ 色素瘤诱导的血管形 成 。这些 结果表 明 Ｃ Ｆ是一个 阴离 子 ＡＴ 太分子 ， 制血 管形成 ， 能抑 从而抑 制 实体瘤 的生 长。Ｔ ｋ ａ ａ ａｉ ｗ ｇ 证 明：克隆人软 骨肉瘤细胞 系（ Ｃ －１ ） 生一 种抑制血管形 Ｈ ８２ ８ 产 成的抗肿瘤因子。Ｍｏｅ 等人由鸡胚胎 缄毛膜 和兔角膜测定证 ｓｓ 明软骨 含有强效抑制血管形成 物质 ， 他们命名 为软骨源性抑 制
复方鲨鱼软骨胶囊对小鼠S180抑瘤作用实验研究
复方鲨鱼软骨胶囊对小鼠S180抑瘤作用实验研究目的研究复方鲨鱼软骨胶囊的抗肿瘤作用。
方法采用小鼠移植性肉瘤180（S180）实体瘤模型的抑瘤试验。
结果复方鲨鱼软骨胶囊1g/kg·d-1、0.5g/kg·d-1连续用药14d，对小鼠移植性S180实体性生长有明显的抑制作用，抑瘤率分别为31.7%、25.08%。
结论鲨鱼软骨胶囊在试验条件下对小鼠移植性S180实体型有一定抑瘤作用。
标签：复方鲨鱼软骨胶囊；抑瘤；实验复方鲨鱼软骨胶囊由鲨鱼软骨，富含硒螺旋藻经科学摄取，药效学筛选并合成的复方制剂。
国内外研究表明，鲨鱼软骨中含有新生血管生成抑制因子和丰富的蛋白质粘多糖、氨基酸及多种微量元素等，对荷瘤小鼠的肿瘤生长有明显抑制作用[1，2]。
本文研究复方鲨鱼软骨胶囊对小鼠移植性肉瘤180的抑瘤效果，目的证实该组方的合理性与可靠性，以便为临床应用提供依据。
实验材料与方法药物：复方鲨鱼软骨素胶囊；本院提供，浅褐色粉沫，批号20080706，临用前以蒸馏水配制成实验所需要的不同浓度的使用液。
注射用环磷酰胺（CTX），上海第十二制药厂（20060305）。
实验动物与细胞株：昆明种小白鼠，19～22g，雌雄各半，C57BL/6J雌性小鼠，体重（18±2）g。
细胞株小鼠肉瘤180（S-180），中国科学院上海生命科学研究院。
方法：复方鲨鱼软骨素胶囊对小鼠移植性S-180实体瘤的影响按抗肿瘤药物体内筛选规程[3]，选取健康小鼠，体重18～22g，每鼠右腋窝皮下接种1：4S-180细胞悬液0.2ml，次日随机分成5组并开始给药。
阴性对照组给生理盐水（NS），阳性对照组隔日给CP15mg/kg，受试药组给复方鲨鱼软骨素胶囊高、中、低剂量分别为1g/kg、0.5g/kg及0.2g/kg，每天一次，连续给药14d。
给药结束后次日，处死小鼠，剥取瘤块，称重，计算其抑瘤率。
结果对小鼠移植性S-180实体瘤的影响结果，高、中剂量组平均瘤重均低于对照组（P＜0.05），而小剂量组与对照组比较无显著性差异（P>0.05）。
研究中药抗肿瘤血管的生成进展
研究中药抗肿瘤血管的生成进展【摘要】抗肿瘤血管生成为肿瘤的治疗提供了新的契机,中药均为有效的血管生成抑制剂,具有廉价无毒等优点,随着其抗肿瘤,血管生成等机制方面研究的不断深入,中草药极有希望成为理想而全面的癌症预防和治疗药物。
【关键词】肿瘤血管抑制因子综述近年来中药或有效成分抑制肿瘤血管生成研究非常活跃,也具有明显的广度和深度。
1 中草药研究动态去甲斑蝥素范跃祖等观察了去甲斑蝥素(NCTD)对胆囊癌肿瘤血管生成的抑制作用及其机制NCTD可有效抑制、破坏胆囊癌肿瘤血管生成,进而抑制胆囊癌的增殖与生长。
其机制可能与NCTD诱导血管内皮细胞凋亡、直接破坏血管内皮细胞、改变血管内皮细胞PCNA/凋亡比、下调血管生成因子VEGF、和上调血管抑制因子TSP、TIMP2表达有关。
小檗碱小檗碱(berberine)为黄连(毛茛科植物)、黄柏等(芸香科植物)植物的一种生物碱,作为抗菌药已有悠久的历史。
初步研究表明它在体内、体外对多种肿瘤细胞具有较强的抑制和杀伤作用。
娄金丽等研究小檗碱对bFGF 活化人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨其对肿瘤新生血管形成作用的机制。
方法:MTT法检测小檗碱对bFGF活化HUVEC的增殖作用;流式细胞仪检测用药后细胞周期的变化;激光共聚焦扫描显微镜下观察药物对细胞形态、细胞内钙的影响;流式细胞仪检测小檗碱对细胞凋亡的作用。
结果:小檗碱能明显抑制bFGF活化的HUVEC增殖,且存在剂量依赖关系;使细胞在期的比例明显增多;使细胞核浓缩、甚至裂解成碎块,同时使细胞内钙增多;并诱导活化HUVEC发生细胞凋亡。
结论:小檗碱可能通过将bFGF活化的HUVEC 细胞周期阻滞在期,抑制活化HUVEC的增殖;诱导活化HUVEC细胞发生凋亡等机制,阻止新生血管形成,发挥其抗肿瘤作用。
白藜芦醇白藜芦醇是广泛存在于葡萄、花生和多种药用植物中的一种多酚类化合物,目前至少已经在21个科,31个属的72种植物中发现了白藜芦醇。
鲨鱼软骨活性物质的研究现状
子， 可直接杀伤肿瘤细胞， 抑制细胞骨架的形成或使细胞骨
架 发生凝聚和固缩， 破坏其结构完整性 ［］ ｃ－ 可以抵抗 １。ｂｌ ２ ５
来， 用鲨鱼软骨处理 Ｄ Ａ则可因其保护作用而使 Ｄ Ａ免受 Ｎ Ｎ 损伤。对于过氧化氢所 造成 的致突变作用 ， 鲨鱼软骨也可 起
到相 同的保护 作用 。
ｃ ｕｄ ｉｈｂｔ ｎ ｉｇ ｎ ｓ ｃｉｉ ，ｇ ｏ ｈａ ｄｍｅａｔｓ ｏ ｔｍｏ ．Ａｎ ｈ ｙｔｄｄｅｈ ｎ ｅｔ ｅｉ ｏ ｌ ｎ ｉｉ ａ ｏ ｅ ｅｉ ｔ ｔ ｒｗｔ ｎ ｇ ｓａ ｖ ｙ ｔｓａｉ ｆ ｕ ｒ ｓ ｄｔｅ ｏ ｎ ａ ｃ ｈ ｍｍｕ ｉ ｕ ｃｉ ｎ ｅ ｅｉ ａ ｔ— ｎｔ ｎ ｔ ａ ｄｂ ｎ ｆｔ ｎｉ ｙｆ ｎ ｅ ｉｆ ｍｍａ ｏ ．Ｉ ｉｉａ，ｃｒｉ ｇ ｘｒ ｃｓｏ ｕ ｉｅ ｒｐ ｒｔ ｎｓ ｏ ｄｂ ｔｅ ｎ ｉｉｉ ｏ ｕ ｒ ｒｗｔ ． ｅａ ｔ—ｔｍｏ ｃｉｉ ｎａ ｌ ｉ ｔ ｎ ｎｄ ｎｃｌ ａｔ ａ ｅｅ ｔａ ｔ ｒｐ ｒｆ ｄｐｅ ａａｉ ｗｅ ｅｔｒｉｈｂｔ ｌ ｉ ｏ ｈ ￣ ｆｔｍｏ ｇ ｏ ｈ Ｔｈ ｎ ｉ ｕ ｒａｔ － ｖ
可以使微血管内皮细胞表面血管生长因子（ Ｇ ） Ⅵ Ｆ及其受体 鲨鱼患癌症的几率约为百万分之一…， 提示软骨中可能存在 表达减弱 ， 抑制 、陷 Ｆ ， １ 的作用 。
抗肿瘤的活性 物质。１７ 年， ｒ 等首 次发 现软骨 能抑制 ９ ５ Ｂｅ ｍ 肿瘤新生血管生长 。在随后 的研 究中。 多家实 验室各 自 分离 到 多种活性 物质（ 见表 １。 ） ２ 鲨鱼软 骨的作用 ２ １ 对肿瘤细胞的杀伤作 用 在鲨 鱼软骨 中存 在抗肿 瘤因 ． ２３ 抗 氧化作用 鲨鱼软骨 中提取 的一种水溶性组分具 有 ． 抗 炎和止痛作用 。这种 组分能清除活性氧 自由基， 护细胞 保 不发 生突变 ， 间接 起到 抗 肿瘤 作用【 ］ ２ 。将可 以产 生活性 氧 ３ 自由基 的氧化亚锡 处理 Ｄ Ａ Ｄ Ａ的超 螺旋结 构会舒展 开 Ｎ ，Ｎ
鲨鱼软骨制剂抑癌作用与诱发胃癌细胞凋亡
鲨鱼软骨制剂抑癌作用与诱发胃癌细胞凋亡陈 莉,陈小义,徐瑞成,谢荣厚摘 要:目的 研究鲨鱼软骨制剂(SCP )对人胃癌细胞(M GC 80-3)生物学行为的影响并探讨其抗癌作用机制。
方法 用不同浓度的SCP 加入体外培养的M GC 80-3细胞系中,用M T T 比色法,荧光显微镜,透射电子显微镜技术和琼脂糖凝胶电泳方法,观察M GC 80-3细胞形态学和生化方面的改变。
结果 SCP 明显抑制M GC 80-3细胞生长,I C 50值为1m g m l ;荧光显微镜下可见M GC 80-3细胞在形态学上出现典型的核固缩、破裂等凋亡细胞的形态学改变;透射电镜下可见细胞核染色质凝集呈帽状分布于核膜下,凋亡细胞附近可见多个高电子密度的凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”(DNA ladder )带。
结论 SCP 诱导人胃癌细胞凋亡是其抑制肿瘤作用机制的重要方面之一。
关键词:人胃癌细胞;鲨鱼软骨;凋亡作用中图分类号:R 73236;R 735.2 文献标识码:A 文章编号:100028578(2001)0120050202 收稿日期:1999212206;修回日期:2000204225 基金项目:武警部队科研基金资助项目(W KH 98027) 作者单位:300162天津,中国人民武装警察部队医学院生物教研室The An titu m or Activ ity of Shark Cartilage Prepara tionis A ssoc i a ted w ith ApoptosisCH EN L i ,CH EN X iao 2yi ,XU R u i 2cheng ,et alD ep a rt m en t of B iology ,M ed ica l Colleg e of Ch inese P eop le ’s A r m ed P olice F orces ,T ian j in 300162,Ch inaAbstract :Objective To study the b i o logical behavi o r changes and its m echan is m of shark cartilage p rep arati on (SCP )on hum an gastric cancer cells (M GC 8023).M ethods U sing exp eri m en t in vitro ,w e added SCP of differen t concen trati on s in to the m edium in w h ich the cells w ere cu ltu red .T he apop to sis w as detect 2ed by fluo rescen t ligh t m icro scop e ,tran s m issi on electron m icro scop e and gel electrop ho resis.Results T he effect of SCP on the grow th of M GC 8023cells w as evaluated by M T T assay .T he I C 50V alues of SCP fo r M GC 8023cells w ere found to be 1m g m 1;the typ ical nuclear conden sati on and fragm en tati on w ere ob 2served by flouo rescen t ligh t m icro scop e ;the typ ical apop to tic cells snd apop to tic bodies w ere ob served by tran s m issi on electron m icro scop e ;“DNA ladder ”app eared on a 1.5%agaro se gel .Conclusion Inducti on of apop to sis con tribu tes to the m echan is m s fo r an titum o r activity of SCP .Key words :H unam gastric cancer cell line ;Shark cartilage ;A pop to sis 胃癌是消化道最常见的肿瘤之一,目前,对其治疗仍缺乏有效的手段。
关于海洋生物论文4200字_关于海洋生物毕业论文范文模板
关于海洋生物论文4200字_关于海洋生物毕业论文范文模板关于海洋生物论文4200字(一)：海洋生物活性物质主要功能特性的研究现状论文摘要：随着人类对海洋的探究的不断深入，海洋中蕴藏着的多种对人类身体有益的功能性成分或生物活性物质受到越来越多人的关注。
海洋中的生物活性物质来源广泛、种类繁多，功能多样，并且具有良好的生产及科学应用价值，如今已成为全球研究的热点。
本文对海洋中不同生物活性物质的功能进行分析，并对其发展前景进行展望。
关键词：海洋；生物活性物质；功能我国从20世纪60年代初开始研究海洋生物活性物质，至今已发现2000多种具有生理及药理作用的化合物。
近几年来，国内海洋药物研究获得了很多成果，根据有关数据表明，截至2017年共发现具备药物价值的生物700多种[1]，其中很多种具有抗病毒、抗肿瘤、免疫等作用，还有多种作用于神经系统和心血管系统的生物活性物质被有效分离出来，同时实现了提纯处理，对具备较强作用和特殊功能的物质进行了人工改造、合成，以使其能为临床所用，从海洋生物中提取的活性物质类型较多，包括生物碱类、多肽类、聚醚类等物质，其中具有较好研发潜力和市场应用前景的是多肽类物质[2]。
1肽类毒素功能分析海洋肽类毒素的相关研究也是目前生物研究的热点，肽类毒素是一种具有攻击性和防卫性的武器，海洋肽类毒素种类较多，一般来说，以神经毒素为主，该毒素经分离纯化后可用于抗癌、抗菌，经过提炼可用于治疗心血管疾病以及神经系统疾病等，可以说将该物质用于临床药物具有较好的应用前景。
肽类毒素具有较强的适应性，且有效性是比较高的，剂量小效果好，其分子量较小，可以使用生物工程技术实现批量化生产，目前市场上已研发了40多种肽类毒素，其中以海葵毒素最多。
1.1海葵肽类毒素海葵属于一种腔肠动物，广泛分布于热带及温带海域中，在海葵触手中有大量神经毒素、细胞毒素，通常海葵肽类毒素分子较小，分子质量低于5000k。
具有较强的选择性离子通道作用，对人体神经系统和信息系统有较大影响，目前针对海葵肽类毒素的相关研究主要集中于钠通道毒素，这种毒素能够与钠离子通道上的特异受体进行结合。
中国姥鲨软骨源新生血管抑制因子(Sp8)的分离纯化及生物学活性
中国姥鲨软骨源新生血管抑制因子(Sp8)的分离纯化及生物学活性陈建鹤;焦炳华;缪为民;王路;王梁华;缪辉南【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2000(21)2【摘要】目的 :从中国姥鲨软骨组织抽提蛋白质中筛选具有新生血管抑制活性和抗肿瘤活性的分子。
方法 :盐酸胍抽提姥鲨软骨蛋白 ,采用超滤和分子筛柱层析等方法分离纯化获得相对分子质量为8.3× 10 3的蛋白质 (Sp8) ,以体外抑制血管内皮细胞增殖、体内抑制新生血管生长和抑制小鼠移植 S180肉瘤生长作为筛选指标。
结果 :Sp8可在体外抑制血管内皮细胞增殖,40μg/ml浓度时抑制率为 2 0 % ;在体内具有抑制新生血管生长的作用 ,兔角膜模型抑制率为 72 .7% ,鸡胚模型 (CAM)抑制率为 79% ;并能明显抑制小鼠体内移植 S180肉瘤的生长 (P<0 .0 0 1)。
结论 :Sp8介导了鲨鱼软骨中的抗肿瘤活性 ,其作用可能是通过抑制肿瘤诱生新生血管形成这一途径来实现的。
【总页数】4页(P107-110)【关键词】鲨鱼软骨;抑制因子;新生血管;抗肿瘤活性【作者】陈建鹤;焦炳华;缪为民;王路;王梁华;缪辉南【作者单位】解放军第422医院内二科;第二军医大学基础医学部卫生毒理学教研室;第二军医大学基础医学部微生物学教研室【正文语种】中文【中图分类】R259.43;R282.74【相关文献】1.17400鲨鱼软骨血管生成抑制因子的纯化及生物学活性研究 [J], 曾锋;杨伟兴;崔昆燕;刘威;张展霞;余健秀;庞义2.17400鲨鱼软骨血管生成抑制因子的纯化及生物学活性研究 [J], 曾锋;杨伟兴;崔昆燕;刘威;张展霞;余健秀;庞义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鲨鱼软骨制剂对人不同细胞生长抑制作用及其机制的探讨
２００２年第８卷第３期陈莉等鲨鱼软骨制剂对人不同细胞生长抑制作用及其机制的探讨２１３
经荧光双染法染色后可见对照组细胞核均匀一致，被Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２染成蓝色荧光（图１）。
经ＳＣＰ
处理２４ｈ后核染色质凝集、碎裂的凋亡细胞比例逐
渐增多（图２），至４８ｈ凋亡比例已达最高（表３～
７）。
表３ＳＣＩ’诱导ＭＧＣＳ０—３细胞凋亡率
表５ＳＣＰ诱导ＴＨＣ－８９０８细胞凋亡率
表７ＳＣＰ诱导ＶＥＣ－３４０细胞凋亡率
圈１ｘｔ照岛１１４，５６２（Ａ）和ＭＣＦＪ（Ｂ）细胞核染色质均匀，被Ｈｏ眦ｈｓ０３３４２染色蓝色荧光。
荧光显微镜，１００×
圈２实验纽Ｋ５６２细胞（Ａ）和ＭＣＦ－７细胞（Ｂ）经ＳＣＰ处理４８
ｈ后。
细胞大小不一，其中核染色质凝集、碎裂为凋亡细胞。
荧光显微镜，１００×。
鲨鱼软骨低分子蛋白的提取及其抑制新生血管形成的初步研究
［ ５ ｎ ａｎＬ Ｓ ｄ ｅｉｕ ， ｇ ｗ ｌ ．ｔ １ ｈ ａｅ ａｇ １ ］Ｅ ｇ ｎ ，ｌ ｋｖ ｉ Ｄ Ａ ｒ ａ Ｒ ｅ ａ Ｔ ｅ ｔ ｒ ｏ ｃ ｎｅ ｍ ａ ｃｓ ａ ． ｐ ｔ ｎｆ ｈ ｓ
ｉ ｖ ｒａ ｔ ｍａ ｎ ｔ ｒ ｅ ａ ｔｒ ｌｏ ｏ ｅｏ ｉ ｅ ｕ ｎ ｎ ｎ ｏ ａ ｉｎ ｓｒ ｌ ａ ｄ ｕ ｅ ｎ ｒｅ ｂ ｏ ｄ ｆ ｗ ｖ ｌｃ ｔ ｄ ｒ ｇ ｉ ｏ ｉ ｙ ｌ ｉ ｓ ｉ ｖｔｏ ｆｒｉ ｚ ｔ ｎ ｔｅ ｔ ｎ ｎ ｔ ｒ ｌｔ ｎ ｈ ｐ ｗｉ ｕ ｃ ｍｅ ｏ ｈ ｉ ｅ ｌ ａｉ ｒ ａ ｍｅ ｔ ａ ｄ ｉｓ ｅ ａ ｉ ｓ ｉ ｔ ｏ ｔ ｏ ｔ ｅ ｒ ｔ ｉ ｏ ｏ ｈ ｆ
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以鲨鱼软骨为原料 ， 粉碎后 反 复冻融 ， 离心 去沉淀 ， 滤 、 超 真空 干燥后 得 到鲨鱼软 骨低分 子蛋
的抑制新 生血管的形成。方法
白。体 外 实验 测 定 其 对 内皮 细 胞 增 殖 、 附 和 迁移 的影 响 ， 鸡胚 绒 毛 尿 囊膜 实验 测 定对 新 生 血 管形 成 的 影 响 。 结 果 鲨 鱼软 黏 用
ｆ ｔｉ ｔｎｅ ｂ ｏｔ ｎ ｅ ｃ ｌ ［ ］ Ｕｔ ｕ ｄＯ ｓ ｔ ｙｅｏ ｅ ｉ ａ ｏ － ｒ ａｓ ｒ ｙ ｅ ｊ ． ｌ ｒｌ ｉ ｍ ｙ ｒ ｆ ｃ ｓ ｚ ￣ ｎ ｂｔ ｎ ｌ ｅＧ ｃ ，
鲨鱼软骨对血管内皮细胞增殖的抑制作用研究
鲨鱼软骨对血管内皮细胞增殖的抑制作用研究
任岱
【期刊名称】《中国现代医学杂志》
【年(卷),期】1999(9)1
【摘要】采用牛肺动脉内皮细胞培养增殖试验（ＣＰＡＥ），观察鲨鱼软骨抽提
物对血管内皮细胞增殖的抑制作用，并用分光光度法测定其抑制百分率。
结果显示，试验组与对照组有显著差异，抑制百分率与活性成分浓度有明显的相关性。
【总页数】2页(P11-12)
【作者】任岱
【作者单位】湖南医科大学无机,分析化学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R931.74
【相关文献】
1.鲨鱼软骨制剂对三种细胞系增殖抑制作用的比较 [J], 张敏;陈莉;买霞
2.鲨鱼软骨制剂对人胃癌细胞增殖抑制作用的研究 [J], 陈莉;郭治昕;陈小义;徐瑞
成
3.鲨鱼软骨制剂对人结肠癌细胞增殖抑制作用的研究 [J], 张敏;陈莉;姜孟臣
4.鲨鱼软骨提取物对小鼠实体瘤抑制作用的实验研究 [J], 梁安民;匡志鹏;谢裕安;
梁宁生;陆益;杨帆;莫钦国
5.鲨鱼软骨粉对小鼠移植性肉瘤-180抑制作用的研究 [J], 李业鹏;韩春卉;李燕俊;
李玉伟;江涛;张靖;计融
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鲨鱼软骨血管形成抑制因子的分离纯化及其活性的初步研究
鲨鱼软骨血管形成抑制因子的分离纯化及其活性的初步研究曾锋;谢团霞;杨伟兴;张展霞;余健秀;庞义
【期刊名称】《高等学校化学学报》
【年(卷),期】2001(22)9
【摘要】以广东阳江鲨鱼软骨为原料, 研究了鲨鱼软骨新生血管形成抑制因子的分离纯化方法, 并对其生物学活性进行了初步研究. 采用盐酸胍抽提、膜超滤、丙酮分级沉淀、 Sephadex G-75柱层析和C4反相高效液相色谱等步骤, 分离纯化出一种新的鲨鱼软骨血管生成抑制因子-a(Shark Cartilage Angiogenesis Inhibitor-a, SCAI-a), 分子量为12 600 , 能显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管的形成.【总页数】4页(P1462-1465)
【作者】曾锋;谢团霞;杨伟兴;张展霞;余健秀;庞义
【作者单位】中山大学化学与化学工程学院;中山大学化学与化学工程学院;中山大学化学与化学工程学院;中山大学化学与化学工程学院;中山大学生命科学学院;中山大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】O657
【相关文献】
1.鲨鱼软骨中血管生成抑制因子的活性检测 [J], 杨伟兴
2.17400鲨鱼软骨血管生成抑制因子的纯化及生物学活性研究 [J], 曾锋;杨伟兴;崔昆燕;刘威;张展霞;余健秀;庞义
3.鲨鱼软骨低分子蛋白的提取及其抑制新生血管形成的初步研究 [J], 尚俊英;谢裕安;杨帆;杨志国;吴昊
4.17400鲨鱼软骨血管生成抑制因子的纯化及生物学活性研究 [J], 曾锋;杨伟兴;崔昆燕;刘威;张展霞;余健秀;庞义
5.中国姥鲨软骨源新生血管抑制因子(Sp8)的分离纯化及生物学活性 [J], 陈建鹤;焦炳华;缪为民;王路;王梁华;缪辉南
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陈建鹤等[20]最近报道了来源于姥鲨软骨的具有血管生
成抑制作用的溶菌酶样的活性分子SP15(相对分子量1.53
万)。对S180实体瘤荷瘤小鼠的抑瘤率,SP15在剂量为2.0、
4.0和8.0mg#kg-1时,分别为0%、23.3%和33.3%,SP15并可
延长腹水型S-180肉瘤荷瘤小鼠的生存期。
试验,结果表明:SCAIF1在剂量0.5、1.0和5.0mg#kg-1#d-1
时,抑瘤率分别为62.31%、80.06%和87.93%。SCAIF80给
Lewis肺癌荷瘤小鼠皮下注射后18d的抑瘤率为93.83%,黑
色素瘤荷瘤小鼠在SCAIF80皮下注射14d后的抑瘤率为49.
85%,腹腔注射组抑瘤率为31.72%[12、13]。
管生成抑制因子U-995。U-995可显著抑制人脐静脉内皮细
胞的增殖与迁移,阻止破坏由TNF-A诱导的鸡胚绒毛尿囊膜
血管生成,防止由胶原酶诱导的胶原溶解。
1999年,王树森等[10]从鲨鱼软骨中获得了相对分子量
为32 680的血管生成抑制因子CDAI。CDAI对1H11内皮细
胞的IC50为0.65mg#L-1,鸡胚绒毛尿囊膜试验显示,CDAI对
而有些蛋白多糖可以作为细胞因子的受体,保护器、失活器
和配体储存器等[18]。王路与Liang从鲨鱼软骨中分离纯化获
得的SCAIF分别为16kl的糖蛋白和10kl的蛋白多糖降解。
由此可以推测,由于不同作者使用不同的分离提取方法,造
成鲨鱼软骨中的蛋白多糖此类生物活性大相对分子降解程
度不一,最终获得分子量大小不一而具有抑制血管生成活性
过超滤分级分离,获得了对肿瘤和鸡胚胎血管生成具有明显
抑制作用的活性物质,而且两种检测结果均呈线性相关。该
物质存在于相对分子量1000~10 000的80%的丙酮沉淀部
分,经100e,37min和37e,2h处理后,其血管生成抑制活性
亦未受明显的影响,提示这种新的血管生成抑制剂对热处理
具有一定的抗性。
成也具有明显地抑制作用,并且都呈现剂量依赖关系。
综上所述,许多研究人员经过多年的努力,相继从不同
种类鲨鱼软骨中,采用不同的分离纯化方法,获得了纯度程
度不一,相对分子量大小不同,生物活性有所差异的SCAIF,
现列于表1。
表1 来源于鲨鱼软骨的血管生成抑制因子
Tab1 Angiogenesis inhibitor derived from shark cartilage
1996年[16]
6姥鲨
(SCDI)
1.61万
碱性亲水糖蛋白
1抑制胶原酶活性
2抑制内皮细胞DNA合成 3抑制血管生成
王路等
1997年[7、8]
7大青鲨
(U-995)
1万和1.4万的
两条多肽
1显著抑制人脐静脉内皮细胞增殖与迁移,有剂量
依赖关系
2阻止破坏TNF-A诱导鸡胚血管生成 3阻止胶
的降解片段。当然,其确切情况(活性部位及分子立体结构)
尚有待进一步研究证实。
#35# 解放军药学学报 2002年2月 第18卷 第1期 PharmJ Chin PLA Vol18 No1 Feb 2002 2 SCAIF的抗肿瘤药效学研究
2.1 SCAIF的抗肿瘤实验研究 我们实验室早在90年代初
原酶诱导的胶原溶解
Sheu等
1998年[9]
8 (CDAI)36280
蛋白质
1抑制内皮细胞增殖
2抑制鸡胚血管生成
王树森等
1999年[10]
9 (SCF2)1万含硫酸角质素和多肽的
蛋白多糖,具有热稳定性。对内皮细胞具有特异的血管生成抑制活性Liang等2000年[11]
10鲸鲨
制剂纯度和病例选择等因素有关。结论 应用高纯度的SCAIF于临床治疗,因其具有生物活性高,不易产生耐药性,天然而无
明显的毒副作用等优点,在治疗肿瘤及其它血管增生性疾病中,有着广阔的应用前景。
关键词 鲨鱼软骨;血管生成抑制因子;临床;应用
血管生成(angiogenesis)是指毛细血管从已存在的血管周
种相对分子量不等的血管生成抑制因子,Luer博士[14]曾对鲨
鱼软骨中蛋白质抽提物的研究证实,有6~7种蛋白质能抑
制肿瘤血管生成;而Folkman则认为鲨鱼软骨中能抑制肿瘤
血管生成的活性物质有13种。这些分子量不同的SCAIF之
间的关系,目前尚不十分清楚。鲨鱼软骨主要由软骨细胞和
含有胶原纤维及大量蛋白质多糖的细胞外基质组成。蛋白
由此可见,不同实验室来源的SCAIF,对不同瘤种的荷瘤
小鼠均具有确切的抑制效果,并可阻止肿瘤的转移,延长荷
瘤小鼠的生存期。
2.2 SCAቤተ መጻሕፍቲ ባይዱF的临床应用研究 软骨抗肿瘤制剂的临床应用
早在80年代中期就已开始。1985年,Prudden[21]利用从小牛
气管软骨制备的一种酸性粘多糖复合物Catrix,对31例恶性
#综 述#
文章编号:1008-9926(2002)01-0034-04 中图分类号:R965 文献标识码:A
鲨鱼软骨血管生成抑制因子的研究进展
贾福星¹,沈先荣
(中国人民解放军海军医学研究所,海洋生物研究中心 上海 200433)
摘 要:目的 综述鲨鱼软骨血管生成抑制因子(SCAIF)的研究进展,为改进制备工艺和临床治疗提供依据。方法 依据文献
1990年[6]
3角鲨
(AE-941或Neovastat)
<1万,1~3万,
3~10万>10万,水提取物
1直接抑制肿瘤细胞生长
2抑制血管生成 3抑制胶原酶活性
Dupont等
1995年[3]
4 0.3-10万1抑制血管生成
2抑制肿瘤生长
Burt
1995年[15]
5 <1万抑制人脐静脉内皮细胞增殖McGuire等
多糖是一类由一个核心蛋白和与其共价相连的糖胺聚糖构
成的非常大的复杂的高分子化合物,其分子中前者占6%~
20%,后者占80%~90%。鲨鱼软骨蛋白质多糖主要含有6
硫酸软骨素[17]。已往的研究表明,蛋白多糖在细胞粘附、细
胞间相互交流,信息传递,调节细胞增殖与分化等多方面扮
演重要角色。有些蛋白多糖本身可能具有细胞因子的活性,
can),经凝胶过滤层析(GFC)证实,SCF2的相对分子量大约为
#34# 解放军药学学报 第18卷第1期 鲨鱼软骨血管生成抑制因子的研究进展 贾福星
¹作者简介:贾福星(1942-),男,山东济宁人,研究员,研究方向:海洋生物药物及保健食品的研究与开发。Tel:(021)65481335-671051万。
从鲨鱼软骨中分离提取了含有血管生成抑制因子的粗制剂
SP1和SP2(相对分子量1万~30万)。它们除了兼有抑制血
管生成和直接抑制肿瘤细胞的生物活性外,对荷瘤小鼠也有
明显的抑制作用。SP1对Lewis肺癌及S-180肉瘤荷瘤小鼠的
抑瘤率分别为79.44%和58.40%,SP2的抑瘤率则分别为91.
SCDI具有对胶原酶、内皮细胞DNA合成和血管生成的抑制
活性,而对肿瘤细胞无直接的杀伤和抑制作用。由于其抑制
胶原酶活性属竞争性抑制,因此,推测SCDI可能具有与胶原
酶相似的结构。
1998年,我国台湾学者Sheu等[9]从青鲨软骨中分离纯
化了相对分子量分别为1万和1.4万两条多肽组成的新血
Inhibiting Factor,SCAIF)。自此以后的近10年期间,世界各国
的许多研究人员相继从各种鲨鱼软骨中分离提取纯度不等,
相对分子量大小不一,理化性质和生物学活性不尽相同的
SCAIF。本文就SCAIF的研究进展情况作重点介绍。
1 SCAIF的理化性质及生物学作用
1990年,Oikawa等[6]从日本鲨鱼软骨中,经胍盐提取,通
Sheu等[9]用U-995进行荷瘤小鼠抑制试验,发现当用
200mg U-995腹腔注射给药时,可以抑制S-180肉瘤小鼠的肿
瘤生长和B16-F10小鼠黑色素瘤的转移,但口服无效。
最近几年,我们用高度纯化了的SCAIF1(相对分子量1.8
万)和SCAIF80(相对分子量8万)对Lewis肺癌小鼠进行抑瘤
1995年,Dupont等[3]利用鲨鱼软骨水提取液,经离心过
滤后,固体物冷冻干燥制成小丸,或用其离心滤过后的上清
液提取物,具有血管生成抑制活性,经体内体外试验证实还
具有直接的抑制肿瘤生长的活性。此外,兼有抗胶原酶水解
等多种活性,体外试验对正常细胞无任何活性。作者利用快
速蛋白质液相层析等方法进一步分离鉴定,发现相对分子量
2.5万,<1万,1~3万,3~10万和>10万的组分对肿瘤细胞
都有直接抑制作用,而且随着分子量的递增抑制活性减弱。
1997年,王路等[7、8]从姥鲨软骨中获得新生血管抑制因
子(SCDI),其纯度为90.67%,得率1/60,000,相对分子量16
100,为一碱性(pH=8.15)的亲水性糖蛋白(含糖量8%)。
资料结合我们的研究成果,综述不同作者从不同鲨鱼软骨中提取的SCAIF的理化性质,生物活性,抗肿瘤试验研究及临床疗
效,评述其应用前景。结果 近10年来,不同实验室从不同鲨鱼软骨中获得了相对分子量大小不一,生物活性亦有差异的
SCAIF,但它们都具有抑制血管生成的生物活性和对荷瘤小鼠的确切抑瘤效果。尽管临床疗效观察结果不一,究其原因可能与