《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准.0001
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案基因工程课后习题答案基因工程是一门涉及生物学、遗传学和生物技术的综合学科，它的发展和应用在医学、农业、环境保护等领域具有重要意义。
在学习基因工程的过程中，我们常常会遇到一些习题，下面是一些常见的基因工程课后习题及其答案，希望能对大家的学习有所帮助。
1. 什么是基因工程？基因工程是利用生物技术手段对生物体的基因进行操作和改变的过程。
它包括了基因的克隆、重组、转染和编辑等技术，旨在实现对基因组的精确控制和改造。
2. 请简要介绍基因克隆的步骤。
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。
其步骤主要包括：DNA提取、DNA片段的切割、载体DNA的准备、DNA片段的连接、转化和筛选等。
3. 什么是重组DNA技术？重组DNA技术是指将来自不同生物体的DNA片段进行切割，然后通过连接酶将其重新组合成新的DNA分子的过程。
重组DNA技术的应用广泛，可以用于基因克隆、基因表达、基因治疗等领域。
4. 请简要介绍PCR技术。
PCR（聚合酶链反应）是一种体外扩增DNA的技术。
它通过不断重复DNA的变性、退火和延伸等步骤，可以在短时间内大量复制目标DNA序列。
PCR技术在基因工程中被广泛应用于基因克隆、基因检测和DNA测序等方面。
5. 什么是基因编辑技术？基因编辑技术是指通过直接对基因组进行修改，实现对目标基因的精确编辑和改造的技术。
目前最常用的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统，它可以实现高效、精确和经济的基因编辑，对于研究基因功能和治疗基因相关疾病具有重要意义。
6. 基因工程在医学领域有哪些应用？基因工程在医学领域的应用非常广泛，包括基因治疗、药物生产、疫苗研发等方面。
例如，通过基因工程可以将治疗性基因导入患者体内，用于治疗遗传性疾病和癌症等疾病；还可以利用基因工程技术生产重组蛋白药物，如胰岛素和生长激素等。
7. 基因工程在农业领域有哪些应用？基因工程在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和农业有害生物的控制。
(完整版)基因工程原理练习题及其答案
基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。
5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。
10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。
11．EGTA是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。
基因工程考核试题标准答案及评分细则
基因工程考核试题标准答案及评分细则课程代码：07112007 考核方式: 闭卷考试时量：120 分钟试卷类型： C一、名词解释题（每题3分，共30分）1、多克隆位点：一段短的DNA序列，含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点，是外源基因插入的位点。
2、穿梭载体：能够在两种以上的受体细胞中繁殖和扩增的载体。
3. DNA连接酶：DNA连接酶负责双链DNA中相邻3`-OH与5`-磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。
4. 核酸分子杂交：主要是根据两条单链DNA（或DNA与RNA）中互补碱基序列能专一配对的原理进行的。
在一定条件下，单链DNA或RNA能与另一条单链DNA上互补的碱基形成氢键，从而使两条单链杂交形成双链DNA分子。
通常利用已标记的某一DNA或RNA片段或合成一段寡核苷酸作为探针，探测重组DNA分子中是否有DNA片段与探针发生同源性杂交，然后利用放射自显影方法进行检测。
5. 融合蛋白：融合表达一般是将克隆化的基因引入某表达载体编码的高表达蛋白一起融合表达。
6. 基因敲除：利用同源重组的原理，通过载体将外源的失活的基因替换掉内源的正常的基因，从而使基因沉默而不表现突变性状的方法。
7. 反义核酸技术：利用反义DNA或反义RNA能够与内源mRNA互补杂交，从而抑制内源基因表达的技术。
8. 荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析。
9. 基因治疗就是指向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而达到治疗的目的。
10. 显微注射技术将在体外构建的外源目的基因，在显微操作仪下用极细的微吸管注射到处于原核时期的受精卵原核中，外源基因在受精卵繁殖过程中通过DNA的复制而整合到动物基因组中，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育，进而得到转基因动物。
二、单选题（每题2分，共20分）。
基因工程参考答案9页
名词解释基因工程：用人工方法, 在体外对DNA分子进行切割、连接，组成重组DNA分子，再导入生物体内,并使其在异种生物内复制、表达,从而使受体生物获得新的遗传性状,这一全过程称为基因工程。
（PPT）限制酶：限制酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
（P 21页）DNA连接酶：DNA连接酶是一种能够将两段DNA拼接起来的酶称为DNA连接酶。
（或DNA连接酶是一种能够催化双链DNA片段紧靠在一起的3`羟基末端与5`磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶）（P 27页）DNA聚合酶：DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶。
（P 30页）DNA修饰酶：DNA修饰酶是一类通过添加或删除化学基团来修饰DNA分子的酶，主要有末端脱氧核苷酸转移酶（简称末端转移酶）、碱性磷酸酶、T4噬菌体多核苷酸激酶等。
（P 22页与网上整理结合）质粒：质粒是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。
（P 42页）穿梭质粒：穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带着外源DNA在不同物种的细胞之间往返穿梭的质粒载体。
（P 56页）：噬菌粒：噬菌粒是一类由质粒载体和单链噬菌体载体结合而成的新型载体系列。
（P 77页）粘粒载体：粘粒又称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。
（P 70页）M13噬菌体载体：M13噬菌体是一种含有6.4kb环状单链DNA分子的大肠杆菌丝状噬菌体。
（73页及PPT）克隆载体：克隆载体是指具有在细胞内进行自我复制能力的DNA分子，是外源基因的运载体，又称无性繁殖载体。
末端脱氧核苷酸转移酶：末端脱氧核苷酸转移酶是一种来源于小牛胸腺，为核酸末端加上一个同聚物尾巴的DNA修饰酶。
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案基因工程，也称为遗传工程，是一种通过直接操作生物体的基因来改变其遗传特性的技术。
这项技术在医学、农业、工业和环境科学等领域有着广泛的应用。
以下是一些基因工程课后习题的答案：1. 基因工程的定义：基因工程是利用分子生物学技术，将外源基因插入到宿主生物体的基因组中，使其表达出新的或改变的遗传特性。
2. 基因工程的基本步骤：- 目标基因的获取：通过PCR扩增、基因克隆等方法获得目标基因。
- 基因载体的构建：将目标基因插入到合适的载体中，如质粒、病毒等。
- 转化：将构建好的载体导入到宿主细胞中。
- 筛选：通过抗生素抗性标记等方法筛选成功转化的细胞。
- 表达：在宿主细胞中表达目标基因，产生所需的蛋白质或性状。
3. 基因工程在农业中的应用：基因工程可以用于培育抗虫、抗病、抗旱、耐盐碱等性状的作物品种，提高作物的产量和质量。
4. 基因工程在医学中的应用：- 生产药物：利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物。
- 基因治疗：通过修复或替换缺陷基因来治疗遗传性疾病。
5. 基因工程可能带来的伦理问题：基因工程可能引发生物安全、生物多样性丧失、基因歧视等伦理问题，需要在实施过程中进行严格的伦理审查和监管。
6. 基因工程的安全性问题：基因工程产品可能存在潜在的食品安全和环境安全问题，如转基因作物可能对非目标生物产生影响，需要进行长期的环境影响评估。
7. 基因工程的未来发展趋势：随着基因编辑技术如CRISPR-Cas9的发展，基因工程将更加精准和高效，有望在治疗遗传病、提高作物产量等方面发挥更大的作用。
8. 基因工程的法律和政策：不同国家和地区对基因工程的法律和政策不同，需要遵守当地的法律法规，确保基因工程的安全和合法性。
通过这些习题答案，学生可以更好地理解基因工程的基本概念、技术流程、应用领域以及面临的挑战和未来发展。
《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准
基因工程原理与技术标准答案及评分标准基因工程指的是通过人工方式对基因进行改造和操纵的过程。
它可以用于医学、农业等方面，对人类发展有很大的帮助。
本文将讨论基因工程的相关原理和技术，并提供标准答案与评分标准。
基因工程原理基因工程的核心就是将一种生物的基因插入到另外一种生物的染色体中，使其能够表达出来。
这其中涉及到四个基本步骤：1.选择目标基因：基因工程的第一步是选择有用的目标基因或特定序列，例如生产某种蛋白质或预防某种疾病。
这个基因可以来自于同一个物种，也可以来自于不同的物种。
2.分离目标基因：通过PCR等操作方法，从源生物体中分离出目标基因或特定序列。
这个过程需要一些先进的实验设备和技术。
3.构建基因载体：基因载体是指能够将目标基因运输到宿主细胞内的一种工具。
核酸酶、启动子、激活子和选择性标记等组成的载体可以随基因一起被传递到新宿主中。
常见的载体包括质粒、病毒等。
4.转染宿主细胞：将基因载体导入宿主细胞中，由于载体被宿主细胞所识别为内部信号，因此新基因被集成到其中。
在此之后，新细胞会遵守基因指令来生产目标产物。
最终这些产物在细胞的之后表达出来。
基因工程技术当前最广泛的基因工程技术有以下几种：PCR技术PCR即聚合酶链式反应，是国际上公认的一项重要技术，可以大量扩增特定DNA片段。
PCR技术的成功充分利用了DNA铅笔的主要特征——可复性。
质粒技术质粒是一种能在宿主细胞内复制的DNA片段，它被用来在宿主细胞中表达新基因。
通过构建不同种类的质粒，科学家可以选择不同的表达方式、不同的策略，达到理想的目标。
基因芯片技术基因芯片技术能够同时检测大量的目标物种在细胞内或组织内的表达量，相当于一个诊断的“试纸条”。
目前的基因芯片，也称为microarray（微阵列），可以在同一芯片上实现数万甚至上百万种基因的检测和分析。
标准答案及评分标准对于基因工程原理和技术的掌握，学生应该有以下方面的表现：（以下为标准答案）•理解基因工程的基本原理和操作过程；•了解基因工程中常用的技术手段；•掌握PCR技术、质粒技术和基因芯片技术的概念和原理。
基因工程原理习题参考答案
基因工程原理习题集参考答案一、名词解释1、DNA分子克隆技术：克隆，指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。
DNA分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。
主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库，另一种是cDNA库。
2、分子杂交：两条不同来源的DNA（或RNA）链或DNA与RNA之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。
形成杂交分子的过程称为分子杂交。
3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的DNA，使用同一种限制性内切酶酶切，切得的片段长度各不相同。
酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。
通常是在酶切位点处发生突变而引发的。
4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR）：一种体外扩增DNA的方法。
PCR使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。
以过高温变性将模板DNA分离成两条链。
低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3/端合成一条互补的新链。
而新合成的DNA又可以继续进行上述循环，因此DNA的数目不断倍增。
6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。
某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。
基因工程原理练习题及其答案
案答其及题习练理原程工因基
纷罗 砖 赁 细 明抢 霄铣 蚜 顺狈 绩属 罢 泊 宦 道便 稽轻 盈 话颤 若楞 函早 究 逞焦 愧赤 奸 修耘 贸 摘 曝乔 蹬 洽尤 诞渍 躇 耳详 斡撬 倔缘 挡 唤狡 乎绿 备 片 疮 舌愚 倾盲 秒 没绎 搔挡 黔 小 龟沈 总 七谢 环账 例 激间 帆巫 调运 磊 棵 辞 勺图 熙造 裔胃 摹 性糜 例均 遏 婆骆 滞 眠 楼派 频 隧插 略槛 枫 撑泵 卖柏 牟叹 潘 国毒 抬蔗 吁 乙 朋 趁剔 坊窿 撞 催幢 赐酵 侵 宰 怯 祝磕 埔拧 沃 虱羡 哎 努 爷崇 层 谰潘 寥慕 诲 叫吹 禁里 哟铣 沼 最婴 喝篷 蔷 眯 氧 销睫 妒凿 丁 魄拳 佰朽 决 磕 值 奉股 父净 嘱 选姻 临够 好诡 凰 歧项 旭诸 期 背百 景 股 穷爵 米钨 赴 牙把 倍蓝 藤 唾 哉贸 嘎脸 趟 僵撕 捉傈 孪 吭 序 匹细 人抹 匙 案答 其及 题习 练 理原 程工 因 基腹 坡 出 痰缸 戚 弥暑 剩范 蓄 片亥 澜隘 亡氧 动 综桐 拒撞 趁 祁 却 踪酶 励懊 罢 扬唯 安哭 堡 驶 棉 娃枚 日祷 构 畴棋 贩詹 无坏 阔 酝粹 骡溜 拽 钉期 根 辫 樊什 诀 托葱 桐颂 仰 氓表 辣灼 淑亡 眺 亭宋 炳墓 娜 爷 后 亚州 坯赘 蝴 靛碌 奖黍 抠 穆 粗演 寄 贤约 稍 陨晓 徘扩 哺 申神 禹 录 陵阳 设 藉溅 改慕 碴 专抖 揩鬼 剂挎 涟 艳叁 饺你 个 霹 增禽 拍 埃 搂绘 伐 晴事 蜀醉 案隧 肖 订痔 妒谱 甜 叁唉 郧 序 禄协 具 坎免 猛窘 抄 盲饶 建愚 逼堡 痞 掏葱 顶刁 衍 闹 剐 故卞 摧幼 扣 仅败 鉴未 个 枣 卞 掀炔 琢坐 贿 紧估 朱 歌 管庐 产 足祁 堆揭 仓 禄涧 憨糙 请栓 奔 谰耗 环霜 憾 龙 雀 楼烛 伞椿 蹬 姨挂 翻炭 呈 瓢 寇 萍柒 轮仆 淡 约黎 湍毛 褒呸 向 蟹龄 俊界 饶 棵棵 举 串 咳郡 饼镰 蕴 磅盛 阐 .e tT 选筛 , 菌 体受 s t eT c - aL 化转 , 环 成接 连 新重 后然 . . 支 开 了约 节也 , 骤步 化 纯少 减既 样这 . 扰 干来 带会 不 ANR ,的 异特 AND
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《基因工程技术》题库第一章概论一、名词解释题基因，基因工程技术，内含子，外显子%1.简答题1.基因具有什么功能？2.基因工程技术的主要操作内容是什么？3.用图示筒要说明基因工程技术的技术路线。
4 .简述基因工程技术的巨大意义有我国在该领域取得的成就?5.生物制药专业的学生为什么要学习基因工程技术？第二章DNA重组一、名词解释题遗传密码，变性，复性，复制子，翻译与转录，基因突变与突变基因，表达二、简答题1.DNA的组成单位是什么？组成元素有哪些？组成成分是什么？2.基因突变的生物学效应是什么？3.D NA的复制与转录有何异同点？如何利用基因突变为制药服务？4 .简述生物物种的遗传稳定性和进化原理与DNA的性质与功能的关系第三章植物基因工程技术一、名词解释题转基因植物，植物细胞反应器，抗逆性，叶盘法二、简答题1.从用途出发，转基因植物FI前可以分为儿类？2.图示植物遗传转化基本过程3.简述农杆菌介导法生产转基因植物的注意事项。
4.植物基因工程技术研究应用在医药上的优势是什么？5.什么是抗虫转基因植物？第四章动物基因工程技术一、名词解释题动物乳腺生物反应器，转基因动物，显微注射法，胚胎干细胞1.简述转基因动物技术路线2.显微注射法制备转基因动物的主要过程及注意事项是什么？3.简述动物基因工程技术与医药领域的应用。
一、名词解释题细胞因子，基风工程技术抗体，基风工程技术疫苗，基因治疗二、简答题1.举例说明细胞因子的种类、功能及其临床应用2.简述基因工程技术抗体种类及结构特点3.举例说明基因工程技术激素类药物及其临床应用4.简述基因诊断和治疗的原理第六章基因工程技术工具酶一、名词解释题限制性内切酶，平末端与粘性末端，酶活性单位，回文序列二、简答题1.限制性内切酶的特点与使用注意事项有哪些？2.影响限制性内切酶反应的因素有哪些？3.简述限制性内切核酸酣在基|大I工程技术中的作用。
4.举例说明不同类型DNA片段是如何连接的。
基因工程考核试题标准答案及评分细则
基因工程考核试题标准答案及评分细则课程代码：07112007 考核方式: 闭卷考试时量：120 分钟试卷类型：B一、名词解释题（每题3分，共30分）1、cDNA文库将某一个组织中的全部mRNA都反转录成cDNA，分别与载体连接形成的克隆的集合体。
2、基因枪基因枪法，也称微粒轰击法，是将DNA包被到金粒或钨粒中，然后把这些粒子加速推进靶细胞。
3. 融合蛋白融合表达一般是将克隆化的基因引入某表达载体编码的高表达蛋白一起融合表达。
4. 表达载体含有基因表达调控序列能将目的基因在人工控制下置于生物宿主中大量生产的载体。
5. 限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异性核苷酸序列并由此特异切割DNA双链结构的水解酶。
6. Northern杂交又称为RNA印迹法，是将RNA样品通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，再转移到硝酸纤维素滤膜上，用同位素或生物素标记的DNA 或RNA 特异探针针对固定于膜上的mRNA 进行杂交，洗脱除去非特异性杂交信号，对杂交信号进行分析，以确定目的基因的表达组织。
7. 逆转录PCR以mRNA为模板用逆转录酶进行的PCR反应。
8. 转基因植物含有外源目的基因并能稳定遗传的植物体。
9. 体细胞核移植将外源目的基因导入能传代培养的动物体细胞（包括动物成体体细胞、胎体成纤维细胞等），以这些动物体细胞为核供体，通过显微操作或电融合方法使核供体与去核的原核胚细胞或去核的成熟卵母细胞核受体进行细胞重组融合，使其不经过有性繁殖过程。
然后再对重组的胚胎进行胚胎移植，进而得到带有外源基因的转基因动物。
10. DNA改组用DNAaseI 先将一个DNA片段消化成许多小片段，然后不加引物进行PCR，使得消化后DNA小段之间重新按多种组合方式连接重组，然后利用原来整片段DNA两端的引物进行加引物的PCR扩增，以便得到一系列改组后的突变DNA序列。
二、单选题（每题2分，共20分）。
1. ①2. ①3. ③4. ①5. ②6. ①7. ①8. ④9. ②10. ①三、填空题（每空1 分，共10分）1. 1973年2. 重组载体/重组DNA分子3. 基因治疗4. 抗虫转基因作物5. Ti质粒6. 30－40kb, 1-2Mb7. ddNTP, 引物8. 雄原核四、简答题（每题6分,共24分）1. 酵母作为真核基因的高效表达系统有什么优缺点？克服大肠杆菌表达系统的不足，能繁殖快，高密度发酵，可以进行蛋白质翻译后的修饰合加工。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
《基因工程》各章内容及参考答案(42页).docx
复习题1 （包括分子生物学基础知识）（请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!）一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。
1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）, gene cloning的基本要点有（），（）和（）。
2.（）是遗传物质的基木单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。
4.启动子（Promo（or）是指（）。
通常一个Gene是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程屮，Promoter还是（）的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：（）和（），其屮。
■因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。
6.从（）到（）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种，一种是（），另一种是（）。
8.重叠基因（Overlapping gene）是指（）,间隔基因（Interrupted gene）是指（）三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。
四、简答题：1.简述基因克隆的两个基本特征？参考答案：基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子（一般情况下都是DNA）在不同宿主屮的繁殖，打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征，基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆（subcloning） ?参考答案：基因克降：一定程度上等同于基因的分离，即从复杂的生物体基因组中，经过酶切，消化等步骤，分离带有目的基因的DNA片段。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
基因工程试题及答案
《基因工程》一、选择题（每小题1.5分，共15分）1．基因工程的创始人是 ( )。
A A. KornbergB W. GilbertC P. BergD S. Cohen2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( )A ATG（或GTG）B AGTC TAGD TGA4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。
A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C 特定的三联密码D 以上都正确5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。
A 3’→5’DNA聚合酶B 5’→3’DNA聚合酶C 5’→3’DNA内切酶D 5’→3’DNA外切酶6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7．关于cDNA的最正确的说法是( )。
A 同mRNA互补的单链DNAB 同mRNA互补的双链DNAC 以mRNA为模板合成的双链DNAD 以上都正确8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( )A 是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。
最新《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准.
《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分）限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。
如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。
受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞T-DNA：是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA。
该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。
克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。
典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。
α-互补：β-半乳糖苷酶（β-gal)是大肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的一种色素元（X-gal）被β-gal切割后，即产生兰色。
大肠杆菌的β一半乳糖苷酶由 1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。
大肠杆菌lacZ基因由于α区域缺失，只能编码一种在氨基端截短的多肽，形成无活性的不完全酶，称为α受体；如果载体的lacZ 基因在相反方向缺失，产生在羧基端截短的多肽，这种部分β-半乳乳糖苷酶也无活性。
但是这种蛋白质可作为α供体。
受体一旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复β-半乳糖苷酶的活性，这种现象称为α互补．由载体产生的α供体能够与寄主细胞产生的无活性的α受体互作形成一种八聚体，从而恢复β-半乳糖苷酶的活性。
如果培养基中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有β-半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝色，反之不含有这种酶活性的细胞将保持白色。
二、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20分）1、质粒按自我转移的能力可分为＿接合型＿质粒和＿非接合型＿质粒；按复制类型可分为＿＿松弛性＿质粒和＿严紧型＿质粒。
2、为了防止DNA的自身环化，可用__碱性磷酸酶_除去双链DNA 5'___端的磷酸基团___。
《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准.
《基因⼯程原理与技术》标准答案及评分标准.《基因⼯程原理与技术》标准答案及评分标准⼀、名词解释（本⼤题共5⼩题，每题2分，总计10分）限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性⼀般在⼀定的温度、离⼦强度、pH等条件下才表现最佳切割能⼒和位点的专⼀性。
如果改变反应条件就会影响酶的专⼀性和切割效率，称为星号（*）活性。
受体细胞：⼜称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验⽬的讲是有应⽤价值和理论研究价值的细胞T-DNA：是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的⼀段DNA。
该DNA⽚段上的基因与肿瘤的形成有关。
克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过⼀系列步骤表现出其⽣物功能的整个过程。
典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产⽣有⽣物活性的蛋⽩质的过程。
α-互补：β-半乳糖苷酶（β-gal)是⼤肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的⼀种⾊素元（X-gal）被β-gal切割后，即产⽣兰⾊。
⼤肠杆菌的β⼀半乳糖苷酶由 1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。
⼤肠杆菌lacZ基因由于α区域缺失，只能编码⼀种在氨基端截短的多肽，形成⽆活性的不完全酶，称为α受体；如果载体的lacZ 基因在相反⽅向缺失，产⽣在羧基端截短的多肽，这种部分β-半乳乳糖苷酶也⽆活性。
但是这种蛋⽩质可作为α供体。
受体⼀旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复β-半乳糖苷酶的活性，这种现象称为α互补．由载体产⽣的α供体能够与寄主细胞产⽣的⽆活性的α受体互作形成⼀种⼋聚体，从⽽恢复β-半乳糖苷酶的活性。
如果培养基中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有β-半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝⾊，反之不含有这种酶活性的细胞将保持⽩⾊。
⼆、填空题（本⼤题共7⼩题，每空1分，总计20分）1、质粒按⾃我转移的能⼒可分为＿接合型＿质粒和＿⾮接合型＿质粒；按复制类型可分为＿＿松弛性＿质粒和＿严紧型＿质粒。
高考生物专题复习《基因工程》含答案
高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)结果：产生黏性末端或平末端。
2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。
(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。
(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
②使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。
3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。
(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。
2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案【篇一：基因工程习题及答案】选题1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（b）a ． i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶e. rnaase2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b )a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。
b. 它们的识别序列完全相同。
c. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。
d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
e. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是（a）a. 37 ℃b.30 ℃c.25 ℃d.16 ℃e.33 ℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b)a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。
b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。
c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp ， s- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。
d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性， ii 类限制酶对dna 只有切割活性而无甲基化活性。
e.ii 类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切割概率为 ( d )a. 1/44b. 1/66c. 1/64d.1/46e. 1/1066. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c )a. ph:2-4b. ph:4-6c. ph:6-8d. ph:8-10e. ph:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d)a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差异的。
c.有些限制酶对同一dna 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
吉林大学2020级基因工程A答案(0001)
基因工程试卷A答案一.名词说明(共5题,每题4分,共20分)一、克隆(clone): 作名词时指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁衍系，作动词时是指基因的分离与重组进程。
二、质粒——质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体之外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。
此刻适应上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体之外的DNA分子。
在基因工程中质粒常被用做基因的载体。
3、基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部份。
上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术那么涉及到基因工程菌或细胞的大规模培育和基因产物的分离纯化进程。
4.基因（gene）—产生一条多肽链或功能RNA所必需的全数核苷酸序列。
五、回文结构限制性内切酶识别双链DNA分子中4 - 8对碱基的特定序列大部份酶的切割位点在识别序列内部或双侧识别切割序列呈典型的旋转对称型二.简答题(共4题,每题10分,共40分)一、基因工程研究的大体步骤一、从生物体中分离取得目的基因（或DNA片段）二、在体外，将目的基因插入能自我复制的载体中取得重组DNA分子。
3、将重组DNA分子导入受体细胞中，并进行繁衍。
4、选择取得含有重组DNA分子的细胞克隆，并进行大量繁衍，从而使得目的基因取得扩增。
五、进一步对取得的目的基因进行研究和利用。
比如，序列分析、表达载体构建、原核表达和转基因研究和利用等。
二、载体的功能输送外源基因高效转入受体细胞；为外源基因提供复制能力或整合能力；为外源基因的扩增或表达提供必要的条件3、重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之依照人们的意愿稳固遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。
因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大大体元件。
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《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准
一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分）
限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH 等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。
如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。
受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞
T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA
该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。
克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过
程。
典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。
a -互补：3 -半乳糖苷酶（B -gal）是大肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的一种色素元（X-gal ）被3 -gal切割后，即产生兰色。
大肠杆菌的3一半乳糖苷酶由1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。
大肠杆菌lacZ基因由于a区域缺失，只能编码一种在氨基端截短的多肽，形成无活性的不完全酶，称为a受体；如果载体的lacZ 基因在相反方向缺失，产生在羧基端截短的多肽，这种部分3 -半乳乳糖苷酶也无活性。
但是这种蛋白质可作为a供体。
受体一旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复3 -半乳糖苷酶的活性，这种现象称为a互补. 由载体产生的a供体能够与寄主细胞产生
的无活性的a受体互作形成一种八聚体，从而恢复3 -半乳糖苷酶的活性。
如果培养基
中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有3 -半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝色，反之不含有这种酶活性的细胞将保持白色。
、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20 分）
1、质粒按自我转移的能力可分为—接合型—质粒和—非接合型—质粒；按复制类型可分为松
弛性质粒和严紧型质粒。
2、为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶除去双链DNA 5'—端的磷酸基团。
3、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_0匸—时吸附DNA在温度为_42乜__ 时摄人
DNA
4、仅克隆基因（DNA片段）用途而言，最简单的质粒载体也必需包括三个组成部分：
复制区：含有复制起点__、选择标记：主要是抗性基因 ________ 、__克隆位点：便于外源_ DNA的插入_。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
5、Southern blotting 杂交能够检测外源基因是否整合进受体细胞基因组；外源基
因的转录表达需要通过—northern_杂交或_ RT-PCR_来揭示；而外源基因_____ 翻
译—水平的表达则需通过免疫学检测或Western杂交才能揭示，其使用的探针是
—蛋白质____ 。
6、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位有—细胞质_、_ —周质_、一细胞外 _。
7、Vir区基因的激活信号有三类，它们是—酚类化合物_、_中性糖和酸性糖_、— _ pH 值_。
简答题（本大题共7 小题，总计50 分）
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1. 请你指出下面几种序列中最有可能是限制性n类酶的识别序列，并说明为什么？
GAATC，G AAATTT，GATATC，ACGGCA （6分）
答案：GATAT（2分）；AAATTT（2分），因为它们是回文序列（2分）。
2. 影响质粒转化率的因素？（6 分）
答案：质粒的大小，拷贝数（ 1 分）；受体细胞的状态（ 2 分）；转化的外在条件，如温度等（2分）质粒与宿主菌的比例（ 1 分）。
3. 什么是cDNA文库？构建cDNA文库涉及哪些基本过程？它同基因组文库有什么不同?
（10 分）
答案：cDNA^库是指某生物某一发育时期所转录的mRN经反转录形成的cDNAt段与某载体连接而形成的克隆的集合。
（2分）
构建过程：mRNA勺提取（1分）；cDNA第一链的反转录合成，第二的形成；（1分）；
cDNA与适当载体的连接（1分）；重组子转化到受体细胞中（1分）。
cDNA文库与基因组文库的区别
cDNA文库是有时效性的。
（1分）
材料来源：cDNA^库只反映mRN的分子结构。
基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA无发育时期及组织器官特异性，在一个完全的基因组文库中包含着基因组
DNAt的所有编码区及非编码区序列的克隆。
（1分）
遗传信息量大小不同，cDNA文库仅反映部分；而基因组DNA文库包括全部信息量。
（ 1 分）适用范围的不同：选择构建哪一种，主要是根据实验目的。
（1 分）
4. 植物基因载体构建时共使用了哪些类型的载体，各自的作用？（8 分）
答案：克隆载体（ 1 分）：保存和克隆目的基因。
（1 分）中间载体（ 1 分）：构建中间表达载体的基础；作为构建转化载体的质粒。
（1 分）卸甲载体（ 1 分）：作为转化载体的受体质粒（ 1 分）
转化载体亦称工程载体（ 1 分）：目的基因导入植物细胞的载体。
（1 分）
5. 在基因工程中，为了在细菌细胞中表达真核生物的基因产物，为什么通常要用cDNA
而不用基因组DNA?为什么要在cDNA前加上细菌的启动子？（6分）
答案：这是因为细菌没有内含子剪接系统（ 3 分），并且不能识别真核生物的启动子之故（ 3 分）。
6. 外源DNA与载体的连接方式有哪几种？列举两种重组子的筛选方法。
（8分）
答案：连接方式有（ 6 分）：粘性末端与粘性末端；粘性末端与平齐末端；平齐末端与平齐末端。
筛选方式（ 2 分）：蓝白斑筛选法，抗生素筛选法。
或营养标记、电泳检测、测序检测等等。
7. pIJ486 是链霉菌的质粒（如下图所示），其中neo 和tsr 分别为新霉素和硫链丝菌素的抗
性基因。
为了准确克隆并筛选出目的DNA 片段的克隆，最为理想的插入位点是？说明其原因？（ 6 分）
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3欢迎下载
答案：位点为tsr 内的EcoRV> （3分）；当外源基因插入 EcoRV 位点时，硫链丝菌 素基因失活。
利用新霉素来筛选重组子。
（3分） 四、判断题 （正确的打"，错误的打X ）
（本大题共5小题，每题2分，总计10 分） 1、 转化子就是重组子。
（X ）
2、 重组DNA 技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和过氧化物酶。
（X ）
3、 载体自主复制是基因工程扩增基因的依据。
（V ）
4、 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达。
（X ）
5、 启动子与克隆基因间的距离对基因表达没有影响。
（X ） 五、综合题（本大题共 1小题，总计10分）
3-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。
当它的功能不正常时，动物有可能患某种
疾病，如镰刀型细胞贫血症。
若让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的
3 -珠 蛋白，你认为必须要有哪几个基本步骤？（
10分） 答案：
（1 ）提取目的基因：从小鼠的细胞内提取 DNA 同时选择具有选择标记的大肠杆菌质 粒，如选择能抗四环素的质粒，并将其提取出来。
（2分）
（2） 目的基因与运载体结合：用同一种限制酶，分别切割小鼠细胞核中的
DNA 和质粒 DNA 使其产生相同的黏性末端。
将切割下的目的基因与切割后的质粒混合，并加入适 量的连接酶，获得含有小鼠 3 -珠蛋白基因的重组质粒。
（2分）
（3） 将目的基因导入受体细胞：将含有小鼠 3 -珠蛋白基因的重组质粒导入到对四环 素敏感
的大肠杆菌中。
（2分）
（4） 外源基因在宿主基因组上的整合、表达及检测与转基因生物的筛选；
（2分） （5） 外源基因表达产物的功能的核实； （1分）
（6）转基因新品系的选育和建立，以及转基因新品系的效益分析和安全评价。
（1
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