《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准.0001
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案基因工程课后习题答案基因工程是一门涉及生物学、遗传学和生物技术的综合学科，它的发展和应用在医学、农业、环境保护等领域具有重要意义。
在学习基因工程的过程中，我们常常会遇到一些习题，下面是一些常见的基因工程课后习题及其答案，希望能对大家的学习有所帮助。
1. 什么是基因工程？基因工程是利用生物技术手段对生物体的基因进行操作和改变的过程。
它包括了基因的克隆、重组、转染和编辑等技术，旨在实现对基因组的精确控制和改造。
2. 请简要介绍基因克隆的步骤。
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制并插入到另一个生物体中的过程。
其步骤主要包括：DNA提取、DNA片段的切割、载体DNA的准备、DNA片段的连接、转化和筛选等。
3. 什么是重组DNA技术？重组DNA技术是指将来自不同生物体的DNA片段进行切割，然后通过连接酶将其重新组合成新的DNA分子的过程。
重组DNA技术的应用广泛，可以用于基因克隆、基因表达、基因治疗等领域。
4. 请简要介绍PCR技术。
PCR（聚合酶链反应）是一种体外扩增DNA的技术。
它通过不断重复DNA的变性、退火和延伸等步骤，可以在短时间内大量复制目标DNA序列。
PCR技术在基因工程中被广泛应用于基因克隆、基因检测和DNA测序等方面。
5. 什么是基因编辑技术？基因编辑技术是指通过直接对基因组进行修改，实现对目标基因的精确编辑和改造的技术。
目前最常用的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统，它可以实现高效、精确和经济的基因编辑，对于研究基因功能和治疗基因相关疾病具有重要意义。
6. 基因工程在医学领域有哪些应用？基因工程在医学领域的应用非常广泛，包括基因治疗、药物生产、疫苗研发等方面。
例如，通过基因工程可以将治疗性基因导入患者体内，用于治疗遗传性疾病和癌症等疾病；还可以利用基因工程技术生产重组蛋白药物，如胰岛素和生长激素等。
7. 基因工程在农业领域有哪些应用？基因工程在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和农业有害生物的控制。
(完整版)基因工程原理练习题及其答案
基因工程原理练习题及其答案一、填空题1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。
3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。
4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。
5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。
6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。
9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。
10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。
11．EGTA是____________离子螯合剂。
12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。
13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。
基因工程考核试题标准答案及评分细则
基因工程考核试题标准答案及评分细则课程代码：07112007 考核方式: 闭卷考试时量：120 分钟试卷类型： C一、名词解释题（每题3分，共30分）1、多克隆位点：一段短的DNA序列，含有多种限制性核酸内切酶的酶切位点，是外源基因插入的位点。
2、穿梭载体：能够在两种以上的受体细胞中繁殖和扩增的载体。
3. DNA连接酶：DNA连接酶负责双链DNA中相邻3`-OH与5`-磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。
4. 核酸分子杂交：主要是根据两条单链DNA（或DNA与RNA）中互补碱基序列能专一配对的原理进行的。
在一定条件下，单链DNA或RNA能与另一条单链DNA上互补的碱基形成氢键，从而使两条单链杂交形成双链DNA分子。
通常利用已标记的某一DNA或RNA片段或合成一段寡核苷酸作为探针，探测重组DNA分子中是否有DNA片段与探针发生同源性杂交，然后利用放射自显影方法进行检测。
5. 融合蛋白：融合表达一般是将克隆化的基因引入某表达载体编码的高表达蛋白一起融合表达。
6. 基因敲除：利用同源重组的原理，通过载体将外源的失活的基因替换掉内源的正常的基因，从而使基因沉默而不表现突变性状的方法。
7. 反义核酸技术：利用反义DNA或反义RNA能够与内源mRNA互补杂交，从而抑制内源基因表达的技术。
8. 荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析。
9. 基因治疗就是指向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而达到治疗的目的。
10. 显微注射技术将在体外构建的外源目的基因，在显微操作仪下用极细的微吸管注射到处于原核时期的受精卵原核中，外源基因在受精卵繁殖过程中通过DNA的复制而整合到动物基因组中，再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育，进而得到转基因动物。
二、单选题（每题2分，共20分）。
基因工程参考答案9页
名词解释基因工程：用人工方法, 在体外对DNA分子进行切割、连接，组成重组DNA分子，再导入生物体内,并使其在异种生物内复制、表达,从而使受体生物获得新的遗传性状,这一全过程称为基因工程。
（PPT）限制酶：限制酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
（P 21页）DNA连接酶：DNA连接酶是一种能够将两段DNA拼接起来的酶称为DNA连接酶。
（或DNA连接酶是一种能够催化双链DNA片段紧靠在一起的3`羟基末端与5`磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶）（P 27页）DNA聚合酶：DNA聚合酶是能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶。
（P 30页）DNA修饰酶：DNA修饰酶是一类通过添加或删除化学基团来修饰DNA分子的酶，主要有末端脱氧核苷酸转移酶（简称末端转移酶）、碱性磷酸酶、T4噬菌体多核苷酸激酶等。
（P 22页与网上整理结合）质粒：质粒是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。
（P 42页）穿梭质粒：穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带着外源DNA在不同物种的细胞之间往返穿梭的质粒载体。
（P 56页）：噬菌粒：噬菌粒是一类由质粒载体和单链噬菌体载体结合而成的新型载体系列。
（P 77页）粘粒载体：粘粒又称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。
（P 70页）M13噬菌体载体：M13噬菌体是一种含有6.4kb环状单链DNA分子的大肠杆菌丝状噬菌体。
（73页及PPT）克隆载体：克隆载体是指具有在细胞内进行自我复制能力的DNA分子，是外源基因的运载体，又称无性繁殖载体。
末端脱氧核苷酸转移酶：末端脱氧核苷酸转移酶是一种来源于小牛胸腺，为核酸末端加上一个同聚物尾巴的DNA修饰酶。
基因工程课后习题答案
基因工程课后习题答案基因工程，也称为遗传工程，是一种通过直接操作生物体的基因来改变其遗传特性的技术。
这项技术在医学、农业、工业和环境科学等领域有着广泛的应用。
以下是一些基因工程课后习题的答案：1. 基因工程的定义：基因工程是利用分子生物学技术，将外源基因插入到宿主生物体的基因组中，使其表达出新的或改变的遗传特性。
2. 基因工程的基本步骤：- 目标基因的获取：通过PCR扩增、基因克隆等方法获得目标基因。
- 基因载体的构建：将目标基因插入到合适的载体中，如质粒、病毒等。
- 转化：将构建好的载体导入到宿主细胞中。
- 筛选：通过抗生素抗性标记等方法筛选成功转化的细胞。
- 表达：在宿主细胞中表达目标基因，产生所需的蛋白质或性状。
3. 基因工程在农业中的应用：基因工程可以用于培育抗虫、抗病、抗旱、耐盐碱等性状的作物品种，提高作物的产量和质量。
4. 基因工程在医学中的应用：- 生产药物：利用基因工程技术生产胰岛素、干扰素等生物药物。
- 基因治疗：通过修复或替换缺陷基因来治疗遗传性疾病。
5. 基因工程可能带来的伦理问题：基因工程可能引发生物安全、生物多样性丧失、基因歧视等伦理问题，需要在实施过程中进行严格的伦理审查和监管。
6. 基因工程的安全性问题：基因工程产品可能存在潜在的食品安全和环境安全问题，如转基因作物可能对非目标生物产生影响，需要进行长期的环境影响评估。
7. 基因工程的未来发展趋势：随着基因编辑技术如CRISPR-Cas9的发展，基因工程将更加精准和高效，有望在治疗遗传病、提高作物产量等方面发挥更大的作用。
8. 基因工程的法律和政策：不同国家和地区对基因工程的法律和政策不同，需要遵守当地的法律法规，确保基因工程的安全和合法性。
通过这些习题答案，学生可以更好地理解基因工程的基本概念、技术流程、应用领域以及面临的挑战和未来发展。
《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准
基因工程原理与技术标准答案及评分标准基因工程指的是通过人工方式对基因进行改造和操纵的过程。
它可以用于医学、农业等方面，对人类发展有很大的帮助。
本文将讨论基因工程的相关原理和技术，并提供标准答案与评分标准。
基因工程原理基因工程的核心就是将一种生物的基因插入到另外一种生物的染色体中，使其能够表达出来。
这其中涉及到四个基本步骤：1.选择目标基因：基因工程的第一步是选择有用的目标基因或特定序列，例如生产某种蛋白质或预防某种疾病。
这个基因可以来自于同一个物种，也可以来自于不同的物种。
2.分离目标基因：通过PCR等操作方法，从源生物体中分离出目标基因或特定序列。
这个过程需要一些先进的实验设备和技术。
3.构建基因载体：基因载体是指能够将目标基因运输到宿主细胞内的一种工具。
核酸酶、启动子、激活子和选择性标记等组成的载体可以随基因一起被传递到新宿主中。
常见的载体包括质粒、病毒等。
4.转染宿主细胞：将基因载体导入宿主细胞中，由于载体被宿主细胞所识别为内部信号，因此新基因被集成到其中。
在此之后，新细胞会遵守基因指令来生产目标产物。
最终这些产物在细胞的之后表达出来。
基因工程技术当前最广泛的基因工程技术有以下几种：PCR技术PCR即聚合酶链式反应，是国际上公认的一项重要技术，可以大量扩增特定DNA片段。
PCR技术的成功充分利用了DNA铅笔的主要特征——可复性。
质粒技术质粒是一种能在宿主细胞内复制的DNA片段，它被用来在宿主细胞中表达新基因。
通过构建不同种类的质粒，科学家可以选择不同的表达方式、不同的策略，达到理想的目标。
基因芯片技术基因芯片技术能够同时检测大量的目标物种在细胞内或组织内的表达量，相当于一个诊断的“试纸条”。
目前的基因芯片，也称为microarray（微阵列），可以在同一芯片上实现数万甚至上百万种基因的检测和分析。
标准答案及评分标准对于基因工程原理和技术的掌握，学生应该有以下方面的表现：（以下为标准答案）•理解基因工程的基本原理和操作过程；•了解基因工程中常用的技术手段；•掌握PCR技术、质粒技术和基因芯片技术的概念和原理。
基因工程原理习题参考答案
基因工程原理习题集参考答案一、名词解释1、DNA分子克隆技术：克隆，指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。
DNA分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。
载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。
主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库，另一种是cDNA库。
2、分子杂交：两条不同来源的DNA（或RNA）链或DNA与RNA之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子，这种分子称为杂交分子。
形成杂交分子的过程称为分子杂交。
3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的DNA，使用同一种限制性内切酶酶切，切得的片段长度各不相同。
酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。
通常是在酶切位点处发生突变而引发的。
4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR）：一种体外扩增DNA的方法。
PCR使用一种耐热的多聚酶，以及两个单链引物。
以过高温变性将模板DNA分离成两条链。
低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3/端合成一条互补的新链。
而新合成的DNA又可以继续进行上述循环，因此DNA的数目不断倍增。
6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。
某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。
基因工程原理练习题及其答案
案答其及题习练理原程工因基
纷罗 砖 赁 细 明抢 霄铣 蚜 顺狈 绩属 罢 泊 宦 道便 稽轻 盈 话颤 若楞 函早 究 逞焦 愧赤 奸 修耘 贸 摘 曝乔 蹬 洽尤 诞渍 躇 耳详 斡撬 倔缘 挡 唤狡 乎绿 备 片 疮 舌愚 倾盲 秒 没绎 搔挡 黔 小 龟沈 总 七谢 环账 例 激间 帆巫 调运 磊 棵 辞 勺图 熙造 裔胃 摹 性糜 例均 遏 婆骆 滞 眠 楼派 频 隧插 略槛 枫 撑泵 卖柏 牟叹 潘 国毒 抬蔗 吁 乙 朋 趁剔 坊窿 撞 催幢 赐酵 侵 宰 怯 祝磕 埔拧 沃 虱羡 哎 努 爷崇 层 谰潘 寥慕 诲 叫吹 禁里 哟铣 沼 最婴 喝篷 蔷 眯 氧 销睫 妒凿 丁 魄拳 佰朽 决 磕 值 奉股 父净 嘱 选姻 临够 好诡 凰 歧项 旭诸 期 背百 景 股 穷爵 米钨 赴 牙把 倍蓝 藤 唾 哉贸 嘎脸 趟 僵撕 捉傈 孪 吭 序 匹细 人抹 匙 案答 其及 题习 练 理原 程工 因 基腹 坡 出 痰缸 戚 弥暑 剩范 蓄 片亥 澜隘 亡氧 动 综桐 拒撞 趁 祁 却 踪酶 励懊 罢 扬唯 安哭 堡 驶 棉 娃枚 日祷 构 畴棋 贩詹 无坏 阔 酝粹 骡溜 拽 钉期 根 辫 樊什 诀 托葱 桐颂 仰 氓表 辣灼 淑亡 眺 亭宋 炳墓 娜 爷 后 亚州 坯赘 蝴 靛碌 奖黍 抠 穆 粗演 寄 贤约 稍 陨晓 徘扩 哺 申神 禹 录 陵阳 设 藉溅 改慕 碴 专抖 揩鬼 剂挎 涟 艳叁 饺你 个 霹 增禽 拍 埃 搂绘 伐 晴事 蜀醉 案隧 肖 订痔 妒谱 甜 叁唉 郧 序 禄协 具 坎免 猛窘 抄 盲饶 建愚 逼堡 痞 掏葱 顶刁 衍 闹 剐 故卞 摧幼 扣 仅败 鉴未 个 枣 卞 掀炔 琢坐 贿 紧估 朱 歌 管庐 产 足祁 堆揭 仓 禄涧 憨糙 请栓 奔 谰耗 环霜 憾 龙 雀 楼烛 伞椿 蹬 姨挂 翻炭 呈 瓢 寇 萍柒 轮仆 淡 约黎 湍毛 褒呸 向 蟹龄 俊界 饶 棵棵 举 串 咳郡 饼镰 蕴 磅盛 阐 .e tT 选筛 , 菌 体受 s t eT c - aL 化转 , 环 成接 连 新重 后然 . . 支 开 了约 节也 , 骤步 化 纯少 减既 样这 . 扰 干来 带会 不 ANR ,的 异特 AND
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《基因工程原理与技术》标准答案及评分标准
一、名词解释（本大题共5小题，每题2分，总计10分）
限制性内切酶的Star活性：限制性内切酶的识别和酶切活性一般在一定的温度、离子强度、pH 等条件下才表现最佳切割能力和位点的专一性。
如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为星号（*）活性。
受体细胞：又称为宿主细胞或寄主细胞等，从试验技术上讲是能摄取外源DNA并使其稳定维持的细胞；从试验目的讲是有应用价值和理论研究价值的细胞
T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA
该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。
克隆基因的表达：指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过
程。
典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程。
a -互补：3 -半乳糖苷酶（B -gal）是大肠杆菌lacZ基因的产物，当培养基中的一种色素元（X-gal ）被3 -gal切割后，即产生兰色。
大肠杆菌的3一半乳糖苷酶由1021个氨基酸构成，只有在四聚体状态下才有活性。
大肠杆菌lacZ基因由于a区域缺失，只能编码一种在氨基端截短的多肽，形成无活性的不完全酶，称为a受体；如果载体的lacZ 基因在相反方向缺失，产生在羧基端截短的多肽，这种部分3 -半乳乳糖苷酶也无活性。
但是这种蛋白质可作为a供体。
受体一旦接受了供体（在体内或体外），即可恢复3 -半乳糖苷酶的活性，这种现象称为a互补. 由载体产生的a供体能够与寄主细胞产生
的无活性的a受体互作形成一种八聚体，从而恢复3 -半乳糖苷酶的活性。
如果培养基
中含有X-gal的诱导物IPTG时，凡是包含有3 -半乳糖苷酶活性的细胞将转变为蓝色，反之不含有这种酶活性的细胞将保持白色。
、填空题（本大题共7小题，每空1分，总计20 分）
1、质粒按自我转移的能力可分为—接合型—质粒和—非接合型—质粒；按复制类型可分为松
弛性质粒和严紧型质粒。
2、为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶除去双链DNA 5'—端的磷酸基团。
3、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_0匸—时吸附DNA在温度为_42乜__ 时摄人
DNA
4、仅克隆基因（DNA片段）用途而言，最简单的质粒载体也必需包括三个组成部分：
复制区：含有复制起点__、选择标记：主要是抗性基因 ________ 、__克隆位点：便于外源_ DNA的插入_。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
5、Southern blotting 杂交能够检测外源基因是否整合进受体细胞基因组；外源基
因的转录表达需要通过—northern_杂交或_ RT-PCR_来揭示；而外源基因_____ 翻
译—水平的表达则需通过免疫学检测或Western杂交才能揭示，其使用的探针是
—蛋白质____ 。
6、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位有—细胞质_、_ —周质_、一细胞外 _。
7、Vir区基因的激活信号有三类，它们是—酚类化合物_、_中性糖和酸性糖_、— _ pH 值_。
简答题（本大题共7 小题，总计50 分）
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1. 请你指出下面几种序列中最有可能是限制性n类酶的识别序列，并说明为什么？
GAATC，G AAATTT，GATATC，ACGGCA （6分）
答案：GATAT（2分）；AAATTT（2分），因为它们是回文序列（2分）。
2. 影响质粒转化率的因素？（6 分）
答案：质粒的大小，拷贝数（ 1 分）；受体细胞的状态（ 2 分）；转化的外在条件，如温度等（2分）质粒与宿主菌的比例（ 1 分）。
3. 什么是cDNA文库？构建cDNA文库涉及哪些基本过程？它同基因组文库有什么不同?
（10 分）
答案：cDNA^库是指某生物某一发育时期所转录的mRN经反转录形成的cDNAt段与某载体连接而形成的克隆的集合。
（2分）
构建过程：mRNA勺提取（1分）；cDNA第一链的反转录合成，第二的形成；（1分）；
cDNA与适当载体的连接（1分）；重组子转化到受体细胞中（1分）。
cDNA文库与基因组文库的区别
cDNA文库是有时效性的。
（1分）
材料来源：cDNA^库只反映mRN的分子结构。
基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA无发育时期及组织器官特异性，在一个完全的基因组文库中包含着基因组
DNAt的所有编码区及非编码区序列的克隆。
（1分）
遗传信息量大小不同，cDNA文库仅反映部分；而基因组DNA文库包括全部信息量。
（ 1 分）适用范围的不同：选择构建哪一种，主要是根据实验目的。
（1 分）
4. 植物基因载体构建时共使用了哪些类型的载体，各自的作用？（8 分）
答案：克隆载体（ 1 分）：保存和克隆目的基因。
（1 分）中间载体（ 1 分）：构建中间表达载体的基础；作为构建转化载体的质粒。
（1 分）卸甲载体（ 1 分）：作为转化载体的受体质粒（ 1 分）
转化载体亦称工程载体（ 1 分）：目的基因导入植物细胞的载体。
（1 分）
5. 在基因工程中，为了在细菌细胞中表达真核生物的基因产物，为什么通常要用cDNA
而不用基因组DNA?为什么要在cDNA前加上细菌的启动子？（6分）
答案：这是因为细菌没有内含子剪接系统（ 3 分），并且不能识别真核生物的启动子之故（ 3 分）。
6. 外源DNA与载体的连接方式有哪几种？列举两种重组子的筛选方法。
（8分）
答案：连接方式有（ 6 分）：粘性末端与粘性末端；粘性末端与平齐末端；平齐末端与平齐末端。
筛选方式（ 2 分）：蓝白斑筛选法，抗生素筛选法。
或营养标记、电泳检测、测序检测等等。
7. pIJ486 是链霉菌的质粒（如下图所示），其中neo 和tsr 分别为新霉素和硫链丝菌素的抗
性基因。
为了准确克隆并筛选出目的DNA 片段的克隆，最为理想的插入位点是？说明其原因？（ 6 分）
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3欢迎下载
答案：位点为tsr 内的EcoRV> （3分）；当外源基因插入 EcoRV 位点时，硫链丝菌 素基因失活。
利用新霉素来筛选重组子。
（3分） 四、判断题 （正确的打"，错误的打X ）
（本大题共5小题，每题2分，总计10 分） 1、 转化子就是重组子。
（X ）
2、 重组DNA 技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和过氧化物酶。
（X ）
3、 载体自主复制是基因工程扩增基因的依据。
（V ）
4、 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达。
（X ）
5、 启动子与克隆基因间的距离对基因表达没有影响。
（X ） 五、综合题（本大题共 1小题，总计10分）
3-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。
当它的功能不正常时，动物有可能患某种
疾病，如镰刀型细胞贫血症。
若让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的
3 -珠 蛋白，你认为必须要有哪几个基本步骤？（
10分） 答案：
（1 ）提取目的基因：从小鼠的细胞内提取 DNA 同时选择具有选择标记的大肠杆菌质 粒，如选择能抗四环素的质粒，并将其提取出来。
（2分）
（2） 目的基因与运载体结合：用同一种限制酶，分别切割小鼠细胞核中的
DNA 和质粒 DNA 使其产生相同的黏性末端。
将切割下的目的基因与切割后的质粒混合，并加入适 量的连接酶，获得含有小鼠 3 -珠蛋白基因的重组质粒。
（2分）
（3） 将目的基因导入受体细胞：将含有小鼠 3 -珠蛋白基因的重组质粒导入到对四环 素敏感
的大肠杆菌中。
（2分）
（4） 外源基因在宿主基因组上的整合、表达及检测与转基因生物的筛选；
（2分） （5） 外源基因表达产物的功能的核实； （1分）
（6）转基因新品系的选育和建立，以及转基因新品系的效益分析和安全评价。
（1
分）
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