建立动物模型
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1、建立动物模型
实验组:采用腹腔注射法定期注射定量抗生素到5只大鼠体内,,然后每只大鼠注射等量的LPS到体内,注射一周后观察大鼠体征(体重、食欲、运动情况),检测肠道菌群和SYN。
对照组:采用腹腔注射法定期注射定量抗生素到5只大鼠体内,确保肠道无菌,然后每只大鼠注射等量的安慰剂到体内,注射一周后观察大鼠体征(体重、食欲、运动情况),检测肠道菌群和SYN。
2、观察动物体征
体重:每天称量每一只大鼠的体重,并记录,进行横纵比较。
食欲:每只给相同足量食物,计量每只老鼠的摄入量,记录进行横纵比较。
运动情况:在固定时间给予相同刺激,观察每只老鼠的反应情况和运动能力。
3、肠道菌群检测
肠道菌群失调检测:
早期诊断菌群失调是正确有效治疗的前提。
菌群失调的诊断包括三部分:
①有无菌群失调。②菌群失调的程度。③菌群失调的诱因。
菌群失调患者常表现为严重腹泻或慢性腹泻,在应用抗生素治疗过程中,如突然发生腹泻,或原有腹泻加重,即有可能已发生了菌群失调。
菌群失调的程度可分为三度:
Ⅰ度(轻度)为可逆性轻度菌群失调,去除致病因素后即可恢复好转,症状消失,临床上多见于急性疾病引起的肠道功能紊乱;
Ⅱ度(中度)菌群失调较重,去除病因常不能恢复,多有慢性肠道症状;
Ⅲ度(重度)菌群失调,表现为菌群交替或二重感染。详细地了解粪便性状并结合实验室检查可以确定一些有特异性诱因的菌群失调,如志贺菌、沙门菌、空肠弯曲菌、艰难梭菌和轮状病毒感染等。
粪便切片观察:
4、syn检测
利用免疫荧光手段,通过激光扫描共焦显微镜检测了过表达α-syn各片段后与线粒体分布情况。结果证明,α-synN端能够与线粒体共定位;JC1染色流式细胞术检测结果提示,该组细胞线粒体存在膜电位降低趋势。同时被截去N末端的突触核蛋白不会形成高分子量复合体,也不会影响线粒体功能。