总前列腺特异性抗原(TPSA)作业指导书
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6.质量控制
用Elecsys TPSA质控品1和2（PreciControl Tumor marker）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
7.计算方法
对每一个标本，仪器会自动计算TPSA含量，单位是ng/ml或μg/l。
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：每批FTPSA试剂盒必须用新鲜试剂和TPSA Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：
Elecsys2010：
·一个月（同一批号试剂）
·7天（放置仪器上的同一试剂盒）
各实验室应对各自地区人群的tPSA正常值波动范围进行调查，如有必
要应自己测定一个参考值范围。
9.分析性能
10.干扰因素
该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（血红蛋白<2.2g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）和生物素<60ng/ml干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入
各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。
5.操作步骤（以E 170为例）
5.1校准操作步骤：
在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。
生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。28种常用药物经试验对本测定无干扰。tPSA浓度高达17000ng/ml也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。在少数患者中存在PSA异质体，可引起不同检测方法间的结果差异。Elecsys tPSA测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
R1：生物素标记的抗PSA单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.5mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，Ph6.0。含防腐剂。
R2：Ru(bpy)32+标记的抗PSA单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml，浓度1.0mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH6.0。含防腐剂。
校准品：
Cal 1阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质
在Calibration—Status菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。
检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
2.标本要求
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素、EDTA-K3或枸橼酸盐抗凝。其中用枸橼酸盐抗凝的血浆，测定结果需+10%。标本在2oC8oC可稳定5天，-20oC可稳定6个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。
标本和质控品禁用叠氮钠防腐。
标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
1.分析原理
采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
第1步：20l标本、生物素标记抗PSA单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗PSA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
Elecsys1010或2010分析仪
Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988
Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346
Elecsys系统清洗液（SysClean）货号11298500
4.仪器和校准
8.参考范围
244例各年龄组的健康男性血清tPSA含量见下表:
tPSA
年龄n中位数(ng/ml)第95%位数
<40 45 0.57 1.4
40-50 42 0.59 2.0
50-60 107 0.75 3.1
60-70 41 1.65 4.1
>70 9 1.73 4.4
Cutoff值定为4ng/ml时,阳性预测值是39%(活检证实是恶性病变)
Cal 2阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质
质控品：
Elecsys PreciControl Tumor marker ,货号11776452
PC TM1:2瓶，2×3.0ml质控血清
PC TM2:2瓶，2×3.0ml质控血清
其他所需材料：
Elecsys通用稀释液货号11பைடு நூலகம்32277
用Elecsys TPSA质控品1和2（PreciControl Tumor marker）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
7.计算方法
对每一个标本，仪器会自动计算TPSA含量，单位是ng/ml或μg/l。
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：每批FTPSA试剂盒必须用新鲜试剂和TPSA Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：
Elecsys2010：
·一个月（同一批号试剂）
·7天（放置仪器上的同一试剂盒）
各实验室应对各自地区人群的tPSA正常值波动范围进行调查，如有必
要应自己测定一个参考值范围。
9.分析性能
10.干扰因素
该方法不受黄疸（胆红素<65mg/dl）、溶血（血红蛋白<2.2g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）和生物素<60ng/ml干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入
各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。
5.操作步骤（以E 170为例）
5.1校准操作步骤：
在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。
生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。28种常用药物经试验对本测定无干扰。tPSA浓度高达17000ng/ml也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。在少数患者中存在PSA异质体，可引起不同检测方法间的结果差异。Elecsys tPSA测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
R1：生物素标记的抗PSA单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.5mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，Ph6.0。含防腐剂。
R2：Ru(bpy)32+标记的抗PSA单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml，浓度1.0mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH6.0。含防腐剂。
校准品：
Cal 1阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质
在Calibration—Status菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。
检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
2.标本要求
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素、EDTA-K3或枸橼酸盐抗凝。其中用枸橼酸盐抗凝的血浆，测定结果需+10%。标本在2oC8oC可稳定5天，-20oC可稳定6个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。
标本和质控品禁用叠氮钠防腐。
标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
试剂：
M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
1.分析原理
采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
第1步：20l标本、生物素标记抗PSA单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗PSA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
Elecsys1010或2010分析仪
Elecsys系统缓冲液（ProCell）货号11662988
Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346
Elecsys系统清洗液（SysClean）货号11298500
4.仪器和校准
8.参考范围
244例各年龄组的健康男性血清tPSA含量见下表:
tPSA
年龄n中位数(ng/ml)第95%位数
<40 45 0.57 1.4
40-50 42 0.59 2.0
50-60 107 0.75 3.1
60-70 41 1.65 4.1
>70 9 1.73 4.4
Cutoff值定为4ng/ml时,阳性预测值是39%(活检证实是恶性病变)
Cal 2阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质
质控品：
Elecsys PreciControl Tumor marker ,货号11776452
PC TM1:2瓶，2×3.0ml质控血清
PC TM2:2瓶，2×3.0ml质控血清
其他所需材料：
Elecsys通用稀释液货号11பைடு நூலகம்32277