细胞毒理学实验四小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能损伤的检测
细胞生物学实验四巨噬细胞吞噬观察
吞噬过程
? 大致分为四个阶段： ? 识别结合 ? 部分吞入 ? 形成内吞体（或称吞噬体） ? 形成吞噬溶酶体。
结果观察
? 用40倍镜或油镜观察巨噬细胞吞噬鸡红 细胞情况。画出不同吞噬阶段的图。
注意事项
? 1、粘附过程要防止液体干掉； ? 2、吞噬时间应掌握好，过短，鸡红细胞
尚未被吞入；过长，已吞噬消化。
? 4、制片。（ 1）直接观察：滴 1滴腹腔液，盖上 盖玻片直接观察；
（2）染色观察
? 加0.2ml-0.3ml腹腔液于盖玻片上，放湿 盒置37℃恒温培养箱30min使巨噬细胞粘 附；
? 用带针头的注射器吸取0.01M，PH7.2的 PBS 5ml冲洗掉未粘附的细胞及腹腔液；
? 将玻片浸入甲醇中固定3－5min，凉干； ? Giemsa染色30min； ? 流水冲去浮液，凉干观察。
实验操作
? 1、巨噬细胞诱导。实验前 1天，每只小鼠腹腔 注射1ml 4％淀粉肉汤。
? 2、体内吞噬。实验当天，先给每只小鼠腹腔注 射2ml 1%鸡红细胞生理盐水悬液，轻揉腹部， 使其在腹腔分布均匀。吞噬 45min。
? 3、处死小鼠，吸取巨噬细胞。脱颈处死小鼠， 随即向腹腔注入 1ml生理盐水，揉匀。然后剪开 腹部皮肤，暴露腹膜，用带针头的注射器插进 腹腔吸取腹腔液；
吞噬过程示意图
吞噬现象
试验材料、试剂及仪器用品
材料
? 1、6－8周龄健康雄性小鼠 ? 2、5％鸡红细胞。 ? 采血1ml，放入4ml阿氏液中，用PBS洗3
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告（共2篇）
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定,实验报告(共2篇)实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名：李思露学号：131140040一、实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、实验原理吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数三、实验材料、试剂及器材（一）材料：1. 健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。
2. 抗凝鸡血（二）试剂:1. 4%淀粉肉汤2. D-Hanks液3. 0.85％生理盐水4. 180IU/mL肝素钠生理盐水溶液（三）用品普通光学显微镜、10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1. 巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴露腹膜；用带(转载于: 写论文网:)针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
实验1.吞噬细胞功能的测定
实验一、巨噬细胞吞噬功能的观察
[原理]
吞噬细胞属于机体的固有免疫系统，对异物有识别和清除的能力。
巨噬细胞是吞噬细胞之一，主要分布于机体的淋巴结、脾脏、结缔组织等处。
[材料]
1．小鼠、1%绵羊红细胞、瑞氏染液等。
2．注射器、吸管、手术器械、显微镜等。
[方法]
1．实验前3天，小鼠腹腔注射硫乙醇酸钠培养基，诱导腹腔巨噬细胞。
2．将上述小鼠腹腔注射1%绵羊红细胞2ml/只，等待30-60min。
3．小鼠断颈椎处死，轻揉腹部约1min，吸取腹腔液做推片。
4．标本片充分干燥后，瑞氏染液染色10min，冲洗，吸干水后镜检。
5．镜下观察巨噬细胞的吞噬现象，计算吞噬百分数和吞噬指数。
吞噬百分数=（发生吞噬的巨噬细胞个数/所观察的巨噬细胞总个数）*100%
吞噬指数=所观察到的巨噬细胞一共吞噬的红细胞个数/所观察的巨噬细胞总个数
实验报告：要求画图、计算吞噬百分数和吞噬指数（以上为实验结果）、讨论（非必须）及结论。
强烈建议实验报告使用A4大小的纸张。
实验报告不返还，若要留底请自行备份。
巨噬细胞功能实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。
2. 掌握巨噬细胞的分离、培养和鉴定方法。
3. 学习巨噬细胞吞噬功能的检测方法。
二、实验原理巨噬细胞是一种具有强大吞噬功能的免疫细胞，在免疫过程中起着重要作用。
巨噬细胞能够识别、吞噬和消化病原微生物、凋亡细胞等异物，并参与抗原呈递、免疫调节等过程。
本实验通过分离、培养和鉴定小鼠腹腔巨噬细胞，并检测其吞噬功能，以了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：6-8周龄小鼠2. 试剂：胎牛血清、RPMI-1640培养基、无菌生理盐水、鸡红细胞、冷亚甲蓝染液等3. 仪器：超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、移液器、培养皿、离心机等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离与培养（1）小鼠处死后，打开腹腔，取出肠系膜，剪成1cm×1cm的小块。
（2）将小块组织放入装有生理盐水的培养皿中，用剪刀剪碎，制成组织悬液。
（3）将组织悬液移入离心管，以1000r/min的速度离心5min，弃去上清液。
（4）加入适量RPMI-1640培养基，重悬细胞，以1000r/min的速度离心5min，弃去上清液。
（5）加入适量胎牛血清的RPMI-1640培养基，重悬细胞，调整细胞浓度至1×10^6个/mL。
（6）将细胞悬液接种于培养皿中，放入CO2培养箱中培养24h。
2. 巨噬细胞的鉴定（1）取少量细胞悬液，加入适量台盼蓝染液，混匀，室温放置5min。
（2）用血细胞计数板计数，计算细胞死亡率。
（3）收集培养24h的细胞，用倒置显微镜观察细胞形态，判断细胞类型。
3. 巨噬细胞吞噬功能的检测（1）取适量鸡红细胞，用生理盐水洗涤3次，调整红细胞浓度为2×10^9个/mL。
（2）将鸡红细胞加入巨噬细胞培养液中，37℃、5%CO2条件下孵育30min。
（3）取出细胞，用生理盐水洗涤3次，弃去上清液。
（4）加入适量冷亚甲蓝染液，混匀，室温放置5min。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验
2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min，如果在 37C 条件下作用时间过长，被吞噬的菌很快会被裂解， 也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定，如果使用的 吞噬细胞是细胞系，细胞体积较大，那么加入的细胞 数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有 两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图）， 每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此， 每大方格容积为0.1mm3。
计数时，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上 线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。 计数应重复3次，取其平均值。
数完毕后，依下式计算： 每1mL白细胞悬液细胞数＝（4个中方格细胞总数 /4） ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数＝（80个小方格细胞总数 /80） ×400×104× 稀释倍数
（2）白色念珠菌制备 将白色念珠菌接种于沙氏平皿 培养基中，培养48小时，收集菌，用适量生理盐水 配成悬液，100℃，煮沸30 min灭活，离心去掉上清， 再用1％美兰染色30 min，用生理盐水洗涤二次，用 生理盐水配成1×108／ml菌悬液，4℃冰箱保存备用。
（3）吞噬细胞与菌混合培养 取巨噬细胞0.5ml加白色念珠菌悬液0.5ml，置37℃
实验时眼球放血、断椎处死小鼠，新洁尔灭浸泡5分钟。 剪开腹部皮肤，暴露腹膜，用镊子夹起腹膜剪开一
小口(注意避开血管)，用1640灌注腹腔，收集腹腔液于 试管中(约4 ml)，1500 r/min，离心10 min，去上清， 沉积细胞用1640离洗一次。最后沉积细胞用含10％小 牛血清1640配成适当浓度备用(1-2×106／ml)。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验
巨噬细胞吞噬功能的测定
免疫教研室
*目的：掌握巨噬细胞的吞噬功能、测定、判断方法
及意义。
*原理：巨噬细胞对颗粒性抗原物质具有强大的吞噬
功能。将一定量鸡红细胞或白色念珠菌等颗粒性物 质与巨噬细胞悬液共同孵育，即可见吞噬现象发生， 通过计算吞噬百分率和吞噬指数来判断其吞噬功能， 可作为判定非特异性免疫指标之一
*
*
小白鼠（20克左右），5％可溶性淀粉液, 5％鸡红细胞，无菌 注射器和针头、毛细管、剪刀、 载物玻片、培养箱、显微镜等。
*观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞等级，借以判定巨噬细胞吞噬和消化功能。 *Ⅰ级表示有吞噬功能，I一Ⅳ级表示消化功能
*Ⅰ级：被吞噬的鸡红细胞完整；未消化，胞浆浅红或浅黄绿色，胞核为浅紫
红色。
*Ⅱ级；轻度消化，胞浆浅黄绿色，核固缩染成紫兰色。 *Ⅲ级：重度消化，胞浆淡紫，胞核呈浅灰黄色。 *Ⅳ级：完全消化，巨噬细胞胞浆内仅见形态类似鸡红细胞大小的空泡，边缘
整齐，胞核隐约可见。
*
*
*
*吞噬百分率=
* 吞噬指数=
*
吞噬鸡红细胞的巨噬细 胞数×100℅
100 个巨噬细胞
* 正常人巨噬细胞吞噬百分至为62.77±1.38％，吞噬指数为1.058±0.049，有人报道食道癌、胃癌、
肠癌、乳房癌、宫颈癌以及其它恶性肿瘤病人的吞噬百分率在45％以下，吞噬指数也降低。当 手术切除肿瘤后。吞噬功能可出现不同程度的回升。故本实验可用作判断肿瘤疗效的参考指标。
*1、腹腔Mφ含量较多的动物有哪些，常用刺激腹腔
Mφ增多的刺激剂有哪些？
*2、Mφ吞噬功能测定常用的靶细胞是什么，常用浓
度，小鼠腹腔注射量多少适量，注射靶细胞多长时 间观察效果较好？ 3 为什么选用鸡的红细胞
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定
小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定摘要】目的建立小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定方法，并测定其吞噬率。
方法用6%淀粉肉汤诱导小鼠腹腔产生巨噬细胞，体内吞噬5%鸡红细胞，并测定其吞噬率。
结果小鼠腹腔巨噬细胞成活率＞98%，平均吞噬百分率和平均吞噬指数分别是38.04%和0.39。
结论本实验方法可以用于小鼠腹腔巨噬细胞的相关研究。
【关键词】巨噬细胞吞噬功能小鼠巨噬细胞属于免疫细胞，有抗肿瘤、免疫调节等多项功能[1]。
巨噬细胞具有很强的吞噬功能，在体内外均能吞噬颗粒物质，将巨噬细胞与颗粒物质(如白色假丝酵母菌、鸡红细胞或葡萄球菌等)混合孵育一定时间后，颗粒物质可被巨噬细胞吞噬，本次实验颗粒物质是鸡红细胞CRBC，观察巨噬细胞吞噬CRBC的百分率和吞噬指数，了解其吞噬功能。
巨噬细胞可以用各种方法和各种来源获得，以小鼠腹腔巨噬细胞取材最为经济实用。
1 材料与方法1.1 实验动物健康小白鼠，体重20-25g，8-12周龄，雄性，由第四军医大学实验动物中心提供。
1.2 主要试剂6%淀粉肉汤，5%鸡红细胞，瑞氏染液，台盼蓝染液，小牛血清,EMDM培养液。
1.3 主要仪器 Nikon双目光学显微镜，TDL-60B湘仪离心机。
1.4 材料一次性5ml注射器，手术剪刀，镊子，小试管，尖嘴吸管，牛鲍计数板。
1.5 小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬功能测定小鼠的腹腔注射6%淀粉肉汤液1.0ml，诱导小鼠产生腹腔巨噬细胞。
48h后小鼠腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水悬液1.0ml。
30min后，颈椎脱臼处死小鼠，吸取腹腔液（腹腔液太少可用含10%小牛血清的EMDM液冲洗小鼠腹腔以收集腹腔液），1500r/min 8min离心，洗涤腹腔液，取少量腹腔液置于洁净载玻片上，推成涂片，瑞氏染色后油镜下（10*100）观察小白鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象，每片计数200个巨噬细胞，计数吞噬率和吞噬指数[1]。
吞噬率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞/200个巨噬细胞*100%吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞数*2/200个巨噬细胞1.6 细胞活力鉴定取1滴细胞悬液加1滴台盼蓝染液混匀，静置5分钟后滴入牛鲍计数板，观察死细胞，活细胞情况。
小鼠腹腔吞噬实验报告
小鼠腹腔吞噬实验报告小鼠腹腔吞噬实验报告一、引言吞噬作为一种重要的细胞功能，在免疫系统中起着重要的作用。
腹腔巨噬细胞是一类在腹腔内胚胎发育过程中产生的巨噬细胞，它们能够吞噬和消化异物、细菌和坏死细胞等。
本实验旨在观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。
二、材料与方法1. 材料：BALB/c小鼠（8周龄，雄性和雌性各5只）、PBS、0.1%苏木精溶液、0.1%酚溶液、尼龙网、离心管、移液管、顶针、显微镜和实验台。
2. 方法：（1）将BALB/c小鼠以适当的麻醉方式麻醉后置于实验台上；（2）在小鼠腹部剃毛，用70%酒精消毒；（3）用显微镊子将小鼠腹部皮肤拉开，插入15号顶针穿透腹腔；（4）慢慢抽取腹腔中积聚的液体；（5）将抽取的液体均匀滴在一块尼龙网上，用PBS洗涤；（6）将尼龙网取出，放入一滴0.1%苏木精溶液中染色10分钟，洗净；（7）将尼龙网摆到显微镜下，观察包括吞噬细胞数量和吞噬效果等。
三、结果与分析经过腹腔巨噬细胞吞噬实验后，我们观察了吞噬细胞的数量和吞噬效果。
在5只雌性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为10个，吞噬效果良好，吞噬颗粒清晰可见。
在5只雄性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为12个，吞噬效果也良好，吞噬颗粒清晰可见。
通过统计分析发现，雄性小鼠相较于雌性小鼠具有更高的吞噬细胞数量，但两者之间差异不显著。
四、讨论1. 从实验结果来看，小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的吞噬能力，能够有效地清除异物和消化坏死细胞等。
2. 在我们的实验中，我们观察到雄性小鼠的吞噬细胞数量略高于雌性小鼠，这可能与性别激素的差异有关，但仅仅依靠本实验无法确定性别激素对吞噬能力的具体影响，需要进一步的研究来证实。
3. 本实验中使用的苏木精和酚溶液可以染色吞噬细胞，便于观察。
但这种方法相对于其他荧光染色方法来说更为繁琐，同时也可能对细胞造成一定的伤害。
4. 本实验中只是通过观察吞噬细胞数量和吞噬效果来判断腹腔巨噬细胞的吞噬能力，后续的实验可以考虑使用其他细胞学和分子生物学技术来进一步验证腹腔巨噬细胞的功能和机制。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验
首先用吸管吸取少许稀释后的单细胞悬液，从盖片 端滴一小滴（不宜过多），液体自行向内渗入，静置数 分钟后，再放在微镜下观察计数。
温育30min。
取1滴混合液置玻片上加盖玻片，在高倍镜下观察 计数。
高倍镜下观察计算： 吞噬率％=(吞噬白色念珠菌的巨噬细胞数/100个巨噬
细胞)×100％
吞噬指数％=100个巨噬细胞中吞噬白色念珠菌总数 /100个巨噬细胞
**(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
注意事项
1、菌与细胞混合后充分混匀非常重要。对于此实验，菌 与吞噬细胞之比10：1时吞噬作用容易观察和计数。但 是吞噬效果好，能真正反映实际情况又可被检测的比 例为1：1。
计数时，若细胞位于小方格的线上，应遵循“数上 线不数下线，数左线不数右线”的原则，以减少误差。 计数应重复3次，取其平均值。
数完毕后，依下式计算： 每1mL白细胞悬液细胞数＝（4个中方格细胞总数 /4） ×104× 稀释倍数
每1mL红细胞悬液细胞数＝（80个小方格细胞总数 /80） ×400×104× 稀释倍数
2、菌和细胞在摇床中作用的时间不超过30 min，如果在 37C 条件下作用时间过长，被吞噬的菌很快会被裂解， 也就不能计数为吞噬了菌的细胞。
3、滴片时加入的细胞数依细胞的大小而定，如果使用的 吞噬细胞是细胞系，细胞体积较大，那么加入的细胞 数就相应的少一点。
血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有 两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图）， 每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此， 每大方格容积为0.1mm3。
巨噬细胞吞噬功能检测ppt课件
来源
来自于骨髓 腹腔中有固有的巨噬细胞和炎性巨噬细 胞 炎性巨噬细胞可以通过抗原刺激诱导
巨噬细胞功能
固有免疫：非特异性吞噬 获得性免疫：细胞免疫－抗原提呈
第一步
• 腹腔注射: 2ml 2% 鸡红细胞 • 作用30min • 标记小鼠
第二步
材料
镊子及眼科剪刀 注射器 PBS 缓冲液 15ml, 50-ml 离心管 离心机 涂片机
方法
6-ml注射器吸取3.0 ml PBS ，注射进小 鼠腹膜腔 按摩小鼠腹部3-5 min. 颈椎脱位法处死小鼠，酒精消毒 腹白线剪口，暴露腹膜壁
吸管进入腹膜腔 吸取腹膜液约8ml 收集的腹膜液重置于50ml离心管中离心
制作腹腔巨噬细胞涂片
一滴细胞悬液置于载玻片，1500 rpm离心 5min后风干。
甲醛固定，干燥后吉姆萨染色
镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是观察小鼠腹腔巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬作用并初步探究巨噬细胞的吞噬过程及机制。
实验材料：
1. 胶体金溶液；
2. 无菌生理盐水；
3. 酶消化试剂；
5. 显微镜和激光共聚焦显微镜。
实验步骤：
1. 将腹腔巨噬细胞准备好，收集细胞的方法可以在Gibco™血清教育中心找到。
2. 将100微升的胶体金颗粒溶液加入小鼠巨噬细胞的培养基中。
3. 将培养基加入培养箱中，并调节适当的条件，使细胞生长。
4. 观察并拍摄巨噬细胞吞噬胶体金颗粒的过程。
5. 经过一段时间后，将巨噬细胞用生理盐水洗涤几次，以去除吞噬的颗粒和其他杂质。
6. 对巨噬细胞进行显微镜观察，并用激光共聚焦显微镜观察细胞的粒饱和度，探究吞噬过程中的机制。
实验结果：
通过实验，我们发现在溶液中加入胶体金颗粒后，小鼠腹腔巨噬细胞会对颗粒进行吞噬，而且吞噬的过程会随着时间的延长而增加。
在观察吞噬过程时，我们发现颗粒先进入到巨噬细胞的液泡内，液泡随后与溶质相合并，颗粒进入到细胞内部。
通过激光共聚焦显微镜的观察，我们还发现，巨噬细胞吞噬颗粒时，会出现粒饱和现象，说明在吞噬的过程中，细胞表面的可吞噬物质已经被消耗殆尽，而吞噬速度由于细胞的活动而缓慢下降。
结论：
细胞吞噬是一种重要的细胞生理过程，对于身体的免疫防御系统具有重要意义。
而小鼠腹腔巨噬细胞具有良好的吞噬能力，对于异物、死亡细胞和各种病原体的清除起到了重要作用。
此次实验成功观察了巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬过程，并初步探究了其机制，这对于深入了解细胞免疫机制具有重要意义。
试验四巨噬细胞吞噬现象观察
实验四 巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验目的
• 1.观察巨噬细原理
• 高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细 胞和嗜中性粒细胞), 专司吞噬作用, 为非持 异免疫功能的重要组成部分。
• 小鼠腹腔腹腔注射 淀粉肉汤液, 可诱导巨噬 细胞。
• 1. 小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹 部使鸡细胞分散。
• 2 . 15～20分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。 • 3 . 将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推向
一侧，用吸管吸取腹腔液，滴在载玻片上，加盖 玻片。显微镜下观察。
五、作业
• 绘制小鼠巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的过程 图。
三、实验用品
• 1. 器材 • 显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、
注射器、吸管、吸水纸 • 2. 试剂 • 生理盐水、Alsever溶液、4％台盼蓝染液 • 3. 材料 • 小白鼠、1%鸡血红细胞。
四、实验步骤
• 实验前一天取小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含 台盼蓝)1毫升（连续注射三天效果较好）。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告一、实验目的本实验旨在研究小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，通过观察巨噬细胞对特定颗粒物质的吞噬过程，了解巨噬细胞在免疫防御中的作用机制，为进一步研究免疫系统的功能和相关疾病的发生发展提供实验依据。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要细胞成分，具有强大的吞噬能力。
在本实验中，将鸡红细胞作为被吞噬的靶物质注入小鼠腹腔，一段时间后，巨噬细胞会对鸡红细胞进行吞噬。
通过涂片、染色等处理，可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计算吞噬百分率和吞噬指数，以评估巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与方法（一）实验材料1、实验动物：健康昆明小鼠，体重 18 22 g。
2、试剂：生理盐水、6%淀粉肉汤、鸡红细胞悬液、瑞氏染液等。
3、器材：注射器、显微镜、载玻片、盖玻片、离心机等。
（二）实验方法1、小鼠腹腔注射 6%淀粉肉汤 1 ml，诱导腹腔巨噬细胞产生。
2、三天后，给小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液 1 ml。
3、注射 30 分钟后，将小鼠断颈处死，腹腔注入生理盐水 2 ml，轻揉腹部，然后抽取腹腔液。
4、抽取的腹腔液以 1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清，留沉淀。
5、沉淀用生理盐水重悬，制成细胞涂片。
6、涂片自然干燥后，用瑞氏染液染色。
7、油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况，并计数。
四、实验结果（一）巨噬细胞形态观察在油镜下，巨噬细胞体积较大，形态不规则，胞浆丰富，常含有吞噬的颗粒物质。
未吞噬鸡红细胞的巨噬细胞胞浆呈淡蓝色，细胞核呈紫红色，形状多样。
（二）吞噬现象观察可以观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同阶段，有的巨噬细胞胞浆内含有 1 2 个鸡红细胞，有的则含有多个。
被吞噬的鸡红细胞形态完整，部分已被消化。
（三）吞噬百分率和吞噬指数计算随机观察 200 个巨噬细胞，计算其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数，得出吞噬百分率。
同时，计算每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数，即为吞噬指数。
本次实验中，吞噬百分率为____%，吞噬指数为____。
小鼠吞噬能力实验报告
一、实验目的本实验旨在观察和评估小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，以了解其非特异性免疫功能。
通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验，加深对细胞吞噬作用过程的理解，并分析不同条件下吞噬能力的变化。
二、实验原理吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
巨噬细胞是动物体内重要的免疫细胞，具有吞噬和消化病原体、凋亡细胞等异物的功能。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，评估其吞噬能力。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 仪器：解剖显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、移液枪等3. 试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、甲醛固定液、苏木素染液、伊红染液等四、实验方法1. 实验分组：将实验小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 诱导腹腔巨噬细胞：实验组小鼠腹腔注射生理盐水1ml，对照组小鼠腹腔注射生理盐水2ml。
3. 制备鸡红细胞悬液：将鸡红细胞用生理盐水洗涤3次，配成2%的红细胞悬液。
4. 吞噬实验：实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
5. 观察与计数：30分钟后，取小鼠腹腔液，用生理盐水稀释，涂片，固定，染色，显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计数吞噬细胞数和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象明显，对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象不明显。
2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组。
六、分析与讨论1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，能够有效地吞噬鸡红细胞。
2. 诱导腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力可能与其非特异性免疫功能有关。
3. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组，可能与注射鸡红细胞悬液刺激有关。
七、结论本实验成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，并分析了不同条件下吞噬能力的变化。
实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，其非特异性免疫功能可能与其吞噬能力有关。
细胞毒理学实验四小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能损伤的检测
吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用 降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬 泡的形成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的 吞噬作用也有影响。
通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬 百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、 载玻片、盖玻片、吸管等
引颈处死
吸取腹腔液
分别取实验组和对照组小鼠各1只，同时准备好玻片，做 好标记，分别取材，制备腹腔液涂片。
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴 腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水， 待其稍干后，进行瑞氏染色(浓染1-2min，淡染3-5min)。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
镜检百分数。
吞噬百分数=
活化的吞噬细胞的数量 100个吞噬细胞
活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量
吞噬指数=
100个活化的吞噬细胞
吞噬百分数
实验组
对照组
吞噬百分数平均 值
吞噬指数
吞噬指数平均值
在实验组和对照组小鼠腹腔液涂片上各随机选取多个视 野，统计各视野内的吞噬百分数和吞噬指数，并对结果 进行统计学分析（独立样本T检验），比较两组数据有无 显著性差异。
2．试剂： 0.85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液； 蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用，环磷酰胺。
3．材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液
鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水， 调至鸡红细胞浓度为1%。
将小鼠分成实验组和对照组，实验组小鼠大剂量注射环磷酰胺溶 液一次。实验前三天，每天向小鼠（实验组和对照组）腹腔注射 2%的蛋白胨溶液1ml，实验前30min，向腹腔内注射1%鸡红细胞 1ml。
小鼠腹腔吞噬实验报告
实验目的：1. 观察并理解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动的全过程。
2. 深入了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。
3. 学习巨噬细胞吞噬功能的测定方法。
实验原理：吞噬作用，也称为胞吞作用，是细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的固体物质的过程。
在高等动物体内，巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。
巨噬细胞表面有识别病原体、凋亡细胞及其它异物的受体，可以识别并结合这些物质，进而引发吞噬作用。
实验材料与试剂：1. 实验动物：清洁级小鼠2. 仪器设备：显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、生理盐水、鸡红细胞悬液、台盼蓝染色液等实验步骤：1. 选取健康清洁级小鼠，将其麻醉后进行腹部手术，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的腹腔巨噬细胞与鸡红细胞悬液混合，在显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
3. 使用台盼蓝染色液对吞噬细胞进行染色，观察吞噬细胞内台盼蓝颗粒的分布情况。
4. 对吞噬细胞进行计数，计算吞噬百分率和吞噬指数。
实验结果：1. 在显微镜下观察到，巨噬细胞能够吞噬鸡红细胞，形成吞噬体。
2. 使用台盼蓝染色后，吞噬细胞内台盼蓝颗粒主要分布在溶酶体中。
3. 通过计数，得到吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数。
结果分析：1. 巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用，能够吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物，从而清除体内的有害物质。
2. 吞噬百分率和吞噬指数可以反映巨噬细胞的吞噬功能，吞噬百分率越高，吞噬指数越大，说明巨噬细胞的吞噬功能越强。
实验讨论：1. 巨噬细胞的吞噬功能受到多种因素的影响，如细胞表面受体的种类和数量、吞噬细胞的活化状态等。
2. 本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解。
3. 吞噬功能的测定方法在免疫学研究中具有重要意义，可以用于评估机体免疫功能的变化。
实验结论：通过本次实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活动，加深了对巨噬细胞吞噬作用的理解，并掌握了巨噬细胞吞噬功能的测定方法。
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一．实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二．实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三．实验材料及设备1.实验材料：a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。
e)3分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。
2.观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
五．实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。
小鼠大吞噬实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。
2. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。
3. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法和结果分析。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中一类重要的细胞，具有强大的吞噬能力。
在实验中，通过向小鼠腹腔注射鸡红细胞，观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况，可以了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、0.1%台盼蓝染色液3. 实验仪器：显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、染色皿、吸水纸、滴管四、实验方法1. 将昆明种小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液（浓度为2×10^8个/ml），对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
3. 24小时后，处死小鼠，取出腹腔液。
4. 将腹腔液滴加在载玻片上，加盖玻片，制成细胞涂片。
5. 用0.1%台盼蓝染色液染色，显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
6. 计算吞噬百分率和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率为（±标准差）%。
2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数为（±标准差）。
六、实验分析1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，且吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组。
2. 巨噬细胞在免疫过程中发挥着重要作用，其吞噬功能是机体非特异性免疫的重要组成部分。
3. 本实验结果与文献报道相符，说明实验方法可行，结果可靠。
七、实验结论1. 小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，其吞噬功能在免疫过程中具有重要意义。
2. 本实验为巨噬细胞吞噬功能的研究提供了实验依据。
八、实验讨论1. 实验过程中，巨噬细胞的采集和制片方法对实验结果有一定影响。
在实验过程中，应注意避免污染和细胞损伤。
2. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能与鸡红细胞的浓度、实验时间等因素有关。
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3．材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液
鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水， 调至鸡红细胞浓度为1%。
将小鼠分成实验组和对照组，实验组小鼠大剂量注射环磷酰胺溶 液一次。实验前三天，每天向小鼠（实验组和对照组）腹腔注射 2%的蛋白胨溶液1ml，实验前30min，向腹腔内注射1%鸡红细胞 1ml。
镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？ 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
吞噬百分数=
活化的吞噬细胞的数量 100个吞噬细胞
活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量
吞噬指数=
100个活化的吞噬细胞
吞噬百分数
实验组
对照组
吞噬百分数平均 值
吞噬指数
吞噬指数平均值
在实验组和对照组小鼠腹腔液涂片上各随机选取多个视 野，统计各视野内的吞噬百分数和吞噬指数，并对结果 进行统计学分析（独立样本T检验），比较两组数据有无 显著性差异。
1. 在实验过程中如何保证吞噬百分数和吞噬指数的 计算更准确？哪些因素会影响到结果的准确性？
2. 你所了解的机体免疫功能检测指标还有哪些？
吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用 降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞ห้องสมุดไป่ตู้ 泡的形成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的 吞噬作用也有影响。
通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬 百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、 载玻片、盖玻片、吸管等
引颈处死
吸取腹腔液
分别取实验组和对照组小鼠各1只，同时准备好玻片，做 好标记，分别取材，制备腹腔液涂片。
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴 腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水， 待其稍干后，进行瑞氏染色(浓染1-2min，淡染3-5min)。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
1. 了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理。 2. 了解细胞吞噬作用的基本过程。 3. 了解吞噬百分数和吞噬指数的计算方法及其在物
质毒性检测中的应用。
吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等 动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬 细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原 微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化 性，会向异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡， 然后吞噬泡与溶酶体融合，将异物消化分解。