细胞毒理学实验四小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能损伤的检测

吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用 降解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬 泡的形成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的 吞噬作用也有影响。
通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬 百分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器、 载玻片、盖玻片、吸管等
1. 了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理。 2. 了解细胞吞噬作用的基本过程。 3. 了解吞噬百分数和吞噬指数的计算方法及其在物
质毒性检测中的应用。
吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等 动物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬 细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原 微生物或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化 性，会向异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡， 然后吞噬泡与溶酶体融合，将异物消化分解。
引颈处死
吸取腹腔液
分别取实验组和对照组小鼠各1只，同时准备好玻片，做 好标记，分别取材，制备腹腔液涂片。
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴 腹腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水， 待其稍干后，进行瑞氏染色(浓染1-2min，淡染3-5min)。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
2．试剂： 0.85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液； 蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用，环磷酰胺。
3．材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液
鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水， 调至鸡红细胞浓度为1%。
将小鼠分成实验组和对照组，实验组小鼠大剂量注射环磷酰胺溶 液一次。实验前三天，每天向小鼠（实验组和对照组）腹腔注射 2%的蛋白胨溶液1ml，实验前30min，向腹腔内注射1%鸡红细胞 1ml。
镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？ 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
吞噬百百度文库数=
活化的吞噬细胞的数量 100个吞噬细胞
活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量
吞噬指数=
100个活化的吞噬细胞
吞噬百分数
实验组
对照组
吞噬百分数平均 值
吞噬指数
吞噬指数平均值
在实验组和对照组小鼠腹腔液涂片上各随机选取多个视 野，统计各视野内的吞噬百分数和吞噬指数，并对结果 进行统计学分析（独立样本T检验），比较两组数据有无 显著性差异。
1. 在实验过程中如何保证吞噬百分数和吞噬指数的 计算更准确？哪些因素会影响到结果的准确性？
2. 你所了解的机体免疫功能检测指标还有哪些？