发酵木糖高产乙醇酵母菌株的选育

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耐高温酿酒酵母的选育及其在乙醇发酵生产中的应用

耐高温酿酒酵母的选育及其在乙醇发酵生产中的应用齐显尼;甘雨满;王钦宏【摘要】酿酒酵母是乙醇发酵工业的生产菌株,增强菌株的耐温性可以减少乙醇生产中降温带来的成本等问题,保证工业发酵能在高温下正常进行.介绍了耐高温酿酒酵母的常用的和新兴的育种技术方法及主要进展,以及在以玉米、甘蔗、木薯及纤维素为原料的乙醇高温发酵生产中的应用,并讨论了耐高温酿酒酵母的选育工作的挑战和乙醇工业应用前景.【期刊名称】《生物产业技术》【年(卷),期】2018(000)004【总页数】6页(P84-89)【关键词】酿酒酵母;耐高温;育种;高温发酵;乙醇生产【作者】齐显尼;甘雨满;王钦宏【作者单位】中国科学院天津工业生物技术研究所,中国科学院系统微生物工程重点实验室,天津 300308;中国科学院天津工业生物技术研究所,中国科学院系统微生物工程重点实验室,天津 300308;中国科学院天津工业生物技术研究所,中国科学院系统微生物工程重点实验室,天津 300308【正文语种】中文酿酒酵母是被人类开发利用最早的，在酿酒工业、乙醇生产及食品工业等行业应用广泛的重要发酵微生物[1]。

但在工业生产过程中，酿酒酵母经常会面对多种环境因素的胁迫作用[2]，包括高温、渗透压和乙醇胁迫等。

这些胁迫会诱导基因调节作用，会改变细胞的许多重要生理功能，从而影响生物转化过程的效率。

传统的酿酒酵母乙醇发酵的最适温度在28～33℃，一般不会超过35℃。

在我国南方及盛夏时的北方，气温常达到40℃以上（甚至45～50℃），这会严重抑制酵母菌的生长、代谢，进而影响产品质量和产量，阻碍乙醇工业发展。

另外，乙醇发酵生产过程为放热反应，在标准压力、标准温度下，乙醇的标准摩尔生成焓是-227.69kJ/mol，生产1t乙醇共释放1 728 260kJ热量，为维持酵母的最适生长温度（30℃）需要额外提供68.9t冷却水并配置相应的冷却设备。

升高发酵温度可以减少冷却水的使用，降低生产成本。

发酵木糖产酒精菌株的筛选和驯化

第３Ｏ卷
ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＪＩＬＩＮＩＮＳＴＩＴＵＴＥＯＦＣＨＥＭＩＣＡＬＴＥＣＨＮ０Ｌ０ＧＹ
Ｖ０ｌ＿３ＯＮｏ．７
２０１３年７月
１３２０００）
摘要：从土壤中筛选到一株发酵木糖产酒精的菌株．对该菌株进行了形态学、生理生化特性的初步鉴
定，结果表明：该菌株为霉菌属．通过不断驯化和筛选，该菌株在３％木糖中发酵的酒精转化率０．３１６ｇ／ｇ，为理论值的６８．６％．
ＹＥＰＤ固体培养基：酵母粉１０ｇ／Ｌ，蛋白胨２０Ｌ，木糖２ＯＬ，琼脂粉２０ｇ／Ｌ，蒸馏水１Ｌ，ｐＨ为５．０，１２０ｃＩ二灭菌３０ｍｉｎ．
收稿日期：２０１３０６－－０３
摇床培养４８ｈ，摇速１４０ｒ／ｍｉｎ，温度３０ ℃．富集后的菌液依次稀释至１０～、１０～、１０浓度，每个稀
基金项目：吉林化工学院２０１２年度重点资助科技计划项目作者简介：李力群（１９５５．），男，江苏苏州人，吉林化工学院副教授，主要从事现代发酵技术方面的研究
关键词：木糖发酵；酒精；霉菌；生长曲线
文献标志码：Ａ中图分类号：Ｑ７８．４１
生物资源是地球上最丰富的可再生资源．随着矿产资源日渐枯竭，开发高效转化可再生纤维素物质的微生物技术，炼制生物燃料，具有极其重要的意义和广阔的发展前景．我国农业生产中形成的各种秸秆，每年约有７亿吨．在玉米秸秆等植物纤维水解液中木糖约占２５％～３０％，木糖的充分利用是植物纤维资源生产酒精经济可行性的关键之一＿１ｊ．将木糖转化为酒精，在理论上可提高酒精产量２５％ｌ２Ｊ，因此选育优良的木糖发酵酒

1株热带假丝酵母发酵木糖产乙醇的特性研究

果表明：氧浓度对乙醇的产量和产率有很大影响，中的溶氧浓度有利于菌体生长和乙醇的积累；高的起始溶适较
菌体浓度和尿素添加量对乙醇的生产积累有促进作用；在碳源和氮源充足的情况下，长发酵时间，醇的产量延乙最高达到２．８ｇＬ的稳定状态，体生长也趋于平稳，度为６５ ×１。ｍＬ５５／菌浓．４０／。关键词木糖；乙醇；热带假丝酵母ＴＳ２５８４．文献标识码Ａ文章编号１０—４１２１）６０２５００２２（０００—７７０中图分类号
株进一步进行分子改造以及该菌株在纤维素乙醇发板计数Ｅ］坫。酵中的实际应用提供参考。５高浓度接种对发酵木糖产乙醇的影响。将菌）
＿从自然界中可分离到多种发酵木糖产生乙醇的１２试验方法１发酵条件。接种量１，养基装液量为）Ｏ培菌种，常见的主要有树干毕赤酵母Ｐｓｐｔ、ｔｉｓ丝孢酵ｉｉ１０ｍＬ２０ｍＬ三角瓶）摇床转速为１０ｒｍｉ，０（５，８／ｎ母Ｔｉｈｓｏｏｐ、囊酵母Ｐｃｙｏｅａ — ｒｃｏｐｒｎｓ．管ａｈｓｌｔｎｎ温度为３０℃ ，发酵７Ｅ］２ｈｎ。ｎｐｉｓ４、热甲基营养酵母Ｈａｓｎｌｏｙｏｈｌ＿耐ｕ］ｎｅｕａｐｌ — ２乙醇质量浓度测定。发酵液蒸馏后ｌ］使用）ｌ，２ｍｏｐａｓ、哈塔假丝酵母Ｃｎｉａｓｅａａｒｈ休Ｅ３ａｄｄｈｈｔｅＥ、重铬酸钾比色法检测乙醇含量Ｅ］ ¨ 。本文中乙醇产粗糙脉孢菌Ｎｅｒｓｏａｃａｓ３ｕｏｐｒｒｓＥ等微生物类群，ａ７但量为乙醇的质量浓度（／；乙醇产率一ｇＩ）是上述菌种发酵木糖产乙醇的能力都不强ｌ。虽然４］

探讨以酵母菌发酵生产木糖醇之研究

探讨以酵母菌发酵生产木糖醇之研究发布时间：2023-06-02T03:48:02.457Z 来源：《科技潮》2023年8期作者：田强孟雯雯孔莉莉董睿于华贾海霞谢秀云石娜娜[导读] 木糖醇是一种应用于食品营养特性改善的多元醇。

由于木糖醇的传统生产工艺流程较长、耗水量、排污量大，因此发酵生产木糖醇近年来受到了广泛的关注。

山东福田药业有限公司山东德州 251200摘要：木糖醇是一种天然存在的糖醇，经发酵生产木糖醇，具有工序步骤短、产品更天然、生产安全容易保障优点。

要发酵生产木糖醇，首先微生物必须能够利用木糖，酵母在发酵生产木糖醇方面具有很大的优势。

本文主要综述了木糖在酵母细胞中的运输与代谢、影响发酵生产木糖醇的因素，以及优化发酵生产木糖醇的方法。

关键词：木糖醇；木糖代谢；酵母；木糖醇是一种应用于食品营养特性改善的多元醇。

由于木糖醇的传统生产工艺流程较长、耗水量、排污量大，因此发酵生产木糖醇近年来受到了广泛的关注。

从现在的微生物发酵工艺来看，要实现规模化生产，还需要通过代谢工程的优化。

1发酵生产木糖醇的微生物1.1 天然微生物发酵生产木糖醇在工业化发酵生产中，菌种的发酵性能直接关系到微生物代谢生产能力、发酵生产的成本以及工业化规模化生产的难易程度等方面的问题。

目前，木糖/木糖醇转化率和木糖醇产率依旧是限制微生物转化生产木糖醇规模化的瓶颈之一，因此获取一株性能优良的高产木糖醇菌株显得尤为重要。

自然界中能够利用木糖通过不同的代谢途径生产木糖醇的微生物种类很多，其中包括很少一部分细菌，部分霉菌，大部分酵母等。

但通过目前的报道来看大部分细菌发酵生产木糖醇的转化率不高。

真菌虽然可以通过木糖→木酮糖→木糖醇的途径来转化生产木糖醇，但真菌的生产效率普遍偏低。

通过综合分析发现酵母类，尤其是假丝酵母属在木糖醇发酵中具有优越的性能，其最高产量平均可达到理论值的84.5%。

1.2 构建基因工程菌株发酵生产木糖醇随着基因工程技术在近几年的迅猛发展，不断有研究者通过从自然界中筛选、克隆、转基因等手段获得高产菌株。

白酒酿造过程中耐高糖酵母的筛选及发酵产多元醇分析

白酒酿造过程中耐高糖酵母的筛选及发酵产多元醇分析发布时间：2021-06-16T01:40:59.523Z 来源：《当代教育家》2021年7期作者：谢俊[导读] 为了解白酒甜味物质来源，从衡水老白干生产大曲和发酵酒醅中筛选的30株酵母为出发菌株，由耐高糖实验筛选出12株酵母，通过高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）定性、定量分析酵母发酵液多元醇。

仁怀市中等职业学校摘要：为了解白酒甜味物质来源，从衡水老白干生产大曲和发酵酒醅中筛选的30株酵母为出发菌株，由耐高糖实验筛选出12株酵母，通过高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）定性、定量分析酵母发酵液多元醇。

结果显示，12株酿造酵母均具有产多元醇能力，发酵液测得酵母所产多元醇分别为核糖醇、赤藓糖醇、甘油、甘露醇、D-阿拉伯糖醇，12株酵母都产甘油，且其中11株酵母均产三种多元醇，菌株Y2产多元醇的总量最多，为16.97 g/L，除甘油外，以D-阿拉伯糖醇最为常见且产量最高。

关键词：耐高糖酵母；筛选；高效液相色谱-蒸发光散射检测法；老白干香型白酒以衡水老白干为代表，具有醇香清雅、酒体协调、醇厚甘冽、回味悠长的风格特点。

白酒的风格特点取决于特征风味物质的种类和含量，其中呈甜味物质的存在可以使得酒体更加的丰满醇厚、绵甜自然。

研究表明，多元醇是白酒醇甜味的重要来源之一，大多数多元醇都沸点高且不易挥发，白酒作为世界六大蒸馏酒之一，拥有独特的甑桶蒸馏技术，它的独特之处即通过蒸汽将酒醅中的风味物质先富集再随蒸汽带入酒体中，难挥发的多元醇进入酒体中为白酒增加甜味和醇厚感，同时也对白酒起助香的作用。

白酒中的多元醇种类繁多，主要包括甘油、阿拉伯糖醇、核糖醇、赤藓糖醇、木糖醇、山梨醇、甘露醇、半乳糖醇、麦芽糖醇等，且甜度随羟基数增多而增强。

1 材料与方法 1.1 材料与试剂 1.1.1 菌株 30株酵母菌（大曲中8株，发酵酒醅中22株）：衡水老白干技术中心从生产用大曲和发酵酒醅中筛选并保藏。

一株耐酒精酵母菌的选育研究

ｒ丌Ｃ下层培养基：ＰＹＤ琼脂。
产量，探索微生物抵抗不良环境的生命机制具有重要的实际
和理论意义［５１。尽管人们对酵母菌产酒精的过程、分泌、调节
及相关耐性机理还没有完全弄清楚，酵母菌耐酒精能力的对
１１．复筛培养基：．．４３麦芽汁（２Ｂｉ）１。ｒｘ１１．．．５酵母菌保藏用培养基：３麦芽汁琼脂培养基。
重以研究酵母发酵情况。１．．．４２菌数测定：２血球计数板法。
１．．．４３酒精度测定：取成熟发酵醪１０２０ｍＬ加入１０Ｌ蒸馏０ｍ水，混匀后用常法蒸馏，收集１０Ｌ馏出液，０ｍ用酒精计法测定酒精度，同时测出馏出液温度，换算成２时的酒精度体积Ｏ
ｏｔｍｒｅｔｔｎｔｍｐｒｔｒａ０￣ｔｅｏｔｍｒｅｔｔｎｐｗａ．．ｐｉｍｕｆｍｎａｉｅｏｅｅａｕｅｗｓ３Ｃ，ｐｍｕｆｍｎａｉＨｓ５ｈｉｅｏ４Ｋｅｒｓａｃｈｌｆｒｎａｉｎｉｈｔｌｒｎｅｙａｔｓａｎｒｅｉｇｙｗｏｄ：ｏｏｅｍｅｔｔ；ｈｇ－ｏｅａｃｅｔｉ；ｂｅｄｎｌｏｓｒ
作者简介：隋玉洁（９７）女，１６一，山东青岛人，中教二级，教师，毕业于青岛大学生物学专业。
将样品加入到含有玻璃珠的锥形瓶中。震荡２ｒｎ，０ｉ后过ａ
●
第四期
西良
酒
２１０１
滤取１ｍＬ滤液分别加入到已灭菌的含１％ｖｌ０ｏ酒精的培养基

以木糖为原料的酒精发酵研究

以木糖为原料的酒精发酵研究宋安东;康怀彬;王占彬;王艳婕;李春水;张百良【期刊名称】《郑州轻工业学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2003(018)003【摘要】对产朊假丝酵母As 2.120,嗜鞣管囊酵母As 2.1585和粗糙脉孢菌As 3.1598等3种菌株在以木糖为惟一碳源的培养基上的生长和发酵情况进行研究.结果表明:嗜鞣管囊酵母As 2.1585可以很好地发酵木糖生产酒精,在28℃,150 r/min 条件下,摇瓶发酵摩尔分数为3%的木糖72 h,酒精体积分数达到最大值0.63%,木糖利用率为91.67%,每100g木糖产酒精22.9 g,为理论酒精产率的48.7%.【总页数】3页(P41-43)【作者】宋安东;康怀彬;王占彬;王艳婕;李春水;张百良【作者单位】河南农业大学,生物技术与食品科学学院,河南,郑州,450002;河南科技大学,食品与生物工程学院,河南,洛阳,471003;河南科技大学,食品与生物工程学院,河南,洛阳,471003;河南农业大学,生物技术与食品科学学院,河南,郑州,450002;河南农业大学,生物技术与食品科学学院,河南,郑州,450002;河南农业大学,机电工程学院,河南,郑州,450002【正文语种】中文【中图分类】TS261.1【相关文献】1.耐酒精木糖酒精发酵菌种的诱变选育研究 [J], 刘天霞;刘雅琴;彭美月2.木糖发酵生产燃料酒精的研究进展 [J], 方春雷;修秀红;马风顺;贺东海3.固定化增殖酵母酒精发酵新技术研究——第一报薯类原料固定化增殖酵母酒精发酵技术研究(中间试验) [J], 谢振根;杨励生;何嘉波;曹淑娟;汪维芝;徐洪兴;刘锡兰4.固定化增殖酵母酒精发酵新技术研究——第四报薯类原料固定化增殖酵母酒精发酵新技术研究技术研究报告(工业性试验) [J], 谢振根;章芙蓉;何嘉波;罗申;谭树华;汪维芝;曹淑娟;汪李严5.固定化增殖酵母酒精发酵新技术研究——第五报薯类原料固定化增殖酵母酒精发酵新技术研究经济分析报告 [J], 谢振根;章芙蓉;何嘉波;罗申;谭树华;汪维芝;曹淑娟;汪李严因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效酒精酵母菌的选育及鉴定

高效酒精酵母菌的选育及鉴定李忠英;陈杰山;罗跃中;吴永尧【摘要】从各种腐败水果、葡萄园里土壤等不同基质中筛选分离得到144株酵母菌，采用耐热、耐酒精处理方法，结合TTC法初筛和复筛试验得到一株酒精发酵的高产酵母菌株，编号为TJ-18。

研究结果表明，该菌糖利用率较高，且发酵力突出，40℃培养72 h，CO2失重为10.4 g，酒精产率最高可达5.9%（体积分数）。

对其形态及特征做了常规鉴定实验，根据生理生化试验结果，并对照《TheYeast》对酵母的描述，确定TJ-18为酵母属的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。

%From all kinds of corruption fruit, in the vineyard to soiland so on the different matrix screening separation have 144 strains of yeast, use heat resistant, resistant to alcohol processing methods, combined with TTC method initial screen and complex screen test got a strain of alcoholic fermentation yield yeast strain. Numbers for TJ-18. The results show that the bacteria sugar utilization rate is higher, And fermenting power is outstanding, 40℃culture 72 h, CO2 weightlessness is 10.4 g, alcohol yield the highest can amount to 5.9%(v/v). The form and characteristics of the conventional do identification experiment, according to the physiological and biochemical test results, and control the TheYeast"on the description of the yeast, determine the TJ-18 for Saccharomyces wine yeast (Saccharomyces cerevisiae).【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】4页(P104-107)【关键词】耐高温酵母;筛选;鉴定;酒精发酵【作者】李忠英;陈杰山;罗跃中;吴永尧【作者单位】湖南化工职业技术学院，湖南株洲412004;湖南化工职业技术学院，湖南株洲 412004;湖南化工职业技术学院，湖南株洲 412004;湖南农业大学生物科学技术学院，湖南长沙 410128【正文语种】中文随着全球石油能源的日趋枯竭及环境污染的加剧，开发新的绿色能源势在必行。

利用木糖发酵生产乙醇的好食脉孢菌选育及其发酵条件优化

利用木糖发酵生产乙醇的好食脉孢菌选育及其发酵条件优化洪亚辉;谢伟国;程鹏;李俊【期刊名称】《东北农业大学学报》【年(卷),期】2014(045)001【摘要】通过高压富集法,从土壤中分离筛选得到一株纤维素降解菌株,并对其木糖发酵特性进行初步研究.根据菌株的形态特性和生理生化特征,初步鉴定为好食脉孢菌(Neurospora sitophila).结果表明,该菌株CMC酶活力为3 554.88U·g-1、FPA 酶活力为506.76 U·g-1,当紫外线照射剂量30W,照射距离20 cm,照射时间为8min时,致死率为77.28％.在木糖浓度20 g·L-1、发酵温度25℃、发酵时间96 h、转速140 r·min-1的条件下乙醇产量可达5.5 g·L-1,乙醇得率为理论值的59.8％.【总页数】7页(P70-76)【作者】洪亚辉;谢伟国;程鹏;李俊【作者单位】湖南农业大学生物科学技术学院,长沙 410128;湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室,长沙 410128;湖南农业大学生物科学技术学院,长沙 410128;湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室,长沙 410128;湖南农业大学生物科学技术学院,长沙 410128;湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室,长沙 410128;湖南农业大学生物科学技术学院,长沙 410128;湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室,长沙 410128【正文语种】中文【中图分类】S646.9【相关文献】1.好食脉孢菌固态发酵醋糟产木聚糖酶的工艺优化 [J], 段睿; 邓永平; 刘晓兰; 郑喜群; 姜欢笑; 马瑞2.好食脉孢菌和红酵母协同发酵秸秆产类胡萝卜素的研究 [J], 吴永存;李兰欣;辛嘉英3.好食脉孢菌和红酵母协同发酵秸秆产类胡萝卜素的研究 [J], 吴永存;李兰欣;辛嘉英4.好食脉孢菌与红酵母协同发酵醋糟的营养价值研究 [J], 高佳;项斌伟;陈书明;辛嘉英;张建新;王倩倩;卫阳;陈亚伟5.GRAS真菌好食脉孢霉固态发酵醋糟产类胡萝卜素的优化 [J], 邓永平;艾瑞波;刘晓兰;佟佳潞;辛嘉英;郭建华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效代谢木糖产乙醇的酵母菌株的选育

ＰｒｔｐｌｓｓｏｎｄＭｕｔｇｎｓｓｏｏａｔＦｕｉｎａａｅｉｉ
ＨＡＮ — ｉ，ＬｉｌＴＵｅ — ｎｇ，Ｚｈｎｄｏ２ＹＥＫａＬＩＹｏｇｅｇ，ｉ，ｎ－ｆｎＣＨＥＮｏｙＺＨＡＯａ，ＵｉＧａ－ｕｎ，Ｙｕｎ。ＬＩＭｎ。
木糖的乙醇发酵一直被人们视为植物纤维原料生物转化生产乙醇的关键因素Ｉ但自然界中缺少能将上述生物质有效转化Ｓ１。为乙醇的微生物菌种。以培育优质、所高产的微生物菌株十分
发展前景的可再生清洁能源之一… 微生物原生质体融合起源。于２世纪５００年代，又称细胞融合技术，指两种不同的亲株是酶法去壁后，到的原生质体（）置于高渗溶液中，得球，在一定融合剂的促融作用下使两者相互凝集并发生细胞之问的融合，而导致基因重组，进获得新菌株的育种方法［与其他育种２１。技术相比，具有杂交频率较高、受接合型或致育型的限制较小和遗传物质更为完整，并且存在着两株以上亲株同时参与融合形成融合子的可能性等优点Ｉ提高菌株产量和品质的潜力，较大。原生质体融合方法主要有：硝酸钠、高钙高ｐＰＧ法、Ｈ、Ｅ电击法等，其中简便经济且较为常用的方法为ＰＧ融合法和Ｅ电击融合法［４１。诱变技术是微生物育种的另一有效途径；紫外
关键词：木糖；乙醇；生质体融合；变育种原诱
中图分类号：３．；Ｓ６．１Ｓ６，５Ｓ６．Ｑ９９７Ｔ２１；２１１；２２９１ＴＴ２
文献标识码：Ｂ

土壤中产木糖醇酵母菌株的筛选其发酵条件优化

ＬＩＵＪｉａｎ－ｊｕｎＬ２，ＹｆＧＱｉ－ｙｉ，Ｚ＝ＥＩＡｏＸｉａｎｇ－ｙｉｎｇ３，ＨＡＮＹａｎ－ｌｅｉ２，ＺＨＡＮＧＪｉａ－ｘｉａｎｇ２，ＹＡＮＧＬｉ－ｐｉｎｇ￣
醇生成速率为１．６７ｇ／Ｌ・ｈ，木糖木糖醇转化率达到８０％ｖＹ，上，是—株具有良好工业化研究开发价值的木糖醇生产菌株。
关键字：木糖；木糖醇；发酵；条件优化
文章篇号：１６７３．９０７８（２０１３）１ — １６３２．１６３７
（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄａｎｄＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＳｈａｎｄｏｎｇＰｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｎａｉｎ２５０３５３，Ｃｈｉｎａ）（２．ＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｓｉｇｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＦｏｏｄｎｄａＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＩｎｄｕｓｔｒｉｅｓｏｆＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｎｃｉｅ，Ｊｉｎａｎ２５００１３，Ｃｈｎａｉ）
现代食品科技

ＭｏｄｅｒｎＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
２０１３，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．７

天然酵母对木糖利用的研究进展

天然酵母对木糖利用的研究进展任佳;颜涌捷;陈明强;王君【摘要】开发能有效利用木糖的微生物是纤维素乙醇生产的关键问题之一,能发酵木糖的天然酵母得到了广泛的研究.对微生物发酵木糖的机理、天然酵母发酵木糖的特性及该领域的有关进展进行了介绍.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2009(026)001【总页数】5页(P6-10)【关键词】天然酵母;木糖;发酵;乙醇【作者】任佳;颜涌捷;陈明强;王君【作者单位】华东理工大学生物质研究中心,上海,200237;华东理工大学生物质研究中心,上海,200237;安徽理工大学化工学院,安徽,淮南,232001;安徽理工大学化工学院,安徽,淮南,232001【正文语种】中文【中图分类】TQ353.2;TQ920.6在能源和环境问题日益严重的今天，纤维素制燃料乙醇工艺越来越有吸引力。

半纤维素占木质纤维素原料的30%左右，其水解产物以木糖为主，如能充分利用纤维素原料中的木糖生产乙醇，将使乙醇产量在原有的基础上增加25%，生产成本也可显著降低。

能发酵木糖的微生物分为两类，一类是基因工程微生物，主要有Saccharomyces cerevisiae(酿酒酵母)、E. coli(大肠杆菌)、Zymomonas mobilis(发酵运动单胞菌)等；另一类是天然微生物，主要是一些木糖利用酵母，研究得较多的有Pichia stipitis(树干毕赤酵母)、Candida shehatae(休哈塔假丝酵母)和Pachysolen tannophilus(嗜鞣管囊酵母)等。

一般情况下天然酵母的木糖利用效率没有基因工程微生物高[1]，但其稳定的遗传性有利于提高工艺的可靠性，故仍然获得了广泛的研究。

作者在此主要介绍天然木糖利用酵母的研究现状。

1 木糖代谢途径普通酿酒酵母不能利用木糖，但能够利用它的异构体木酮糖。

对微生物来说，将木糖异构成木酮糖是代谢木糖的关键，不同微生物有不同的代谢途径[2]，如图1所示。

代谢工程改善野生酵母利用木糖产乙醇的性能

张凌燕等：代谢工程改善野生酵母利用木糖产乙醇的性能９５５差不大：但对潮霉素Ｂ的最低抑菌浓度下降为１００肛ｇ／ｍＬ，仅需ｐＨ７．０下的４０％。

在ｐＨ８．０的条件下，可以提高敏感度，降低药物使用剂量。

图５重组表达载体ｐＹＸ２１２一ＸＹＬ２－Ｈｙｇｒｏ的酶切验证Ｆｉｇ．５ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｚｙｍｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｐＹＸ２１２－ＸＹＬ２－Ｈｙｇｒｏ表２热带假丝酵母对潮霉素Ｂ的最低敏感浓度Ｔａｂｌｅ２ｌｔｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｉｎｄｕｓｔｒｉａｌＣｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＳｔｒａｉｎＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎＢｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（肛∥ｍＬ）ｃ愀幽黑。

ｐＨ８．０１００２。

３，４木糖醇税氢酶酶活的攫１３定将重组载体ｐＹＸ２１２－ＸＹＬ２．Ｈｙｇｒｏ电穿孔转化法转化进人野生型热带假丝酵母中，通过潮霉素抗性平板筛选转化子，重新划线分离后，选取Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＸＹＬ２—１，ＣｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＸＹＬ２—７测定酶活（表３）。

表３重组子木糖醇脱氢酶比酶活Ｔａｂｌｅ３ＳｐｅｃｉｆｉｃＸＤＨａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＣｔｒｏｐｉｃａｌｉｓａｎｄＣｔｒｏｐｉｃａｌｉｓｔｒａｎｓｆｏｒｍａｎｔｓ从酶活测定可以看出，原始菌株木糖醇脱氢酶（ＸＤＨ）的比活为０．１３ｕ／ｒａｇ蛋白，两个重组菌株ＣｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＸＹＬ２．１和Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＸＹＬ２．７的酶活则分别达到０．３ｕ／ｍｇ蛋白、０．５ｕ／ｒａｇｐｒｏｔｅｉｎ，分别是原始菌株的２．３倍和３．８倍。

２。

３。

５重组酵母与原始菌株发酵实验比较热带假丝酵母Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ与重组酵母Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓＸＹＬ２．７进行发酵实验，并对木糖醇，乙醇生成情况进行对比。

儡瓷二盆＝膏ｋｏ！墨盖＝ｏ旨专％号墨０２０４０６０ｊｔ／ｈ—１卜Ｐａｒｅｎｔｓｔｒａｉｎｆｏｒｘｙｌｉｔｏｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ—●卜ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｓｔｒａｉｎｆｏｒｘｙｌｉｔＤｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ图６木糖醇得率曲线Ｆｉｇ．６ＸｙｆｉｔｏｌｙｉｅｌｄｃｕｒｖｅｓＯ２０４０巾—－Ｐａｒｅｎｔｓｔｒａｉｎｆｏｒｅｔｌｌａｎｏｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ—－－ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｓｔｒａｉｎｆｏｒｅｔｈａｌｌＯｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ图６乙醇得率曲线Ｆｉｇ．６Ｅｔｈａｎｏｌｙｉｅｌｄｃｕｒｒｅｓ从上图可以看出，原始菌株木糖代谢的主要产物是木糖醇，木糖醇得率为０．６∥ｇ，同时产生微量的乙醇，乙醇得率为０．０３ｇ／ｇ。

葡萄糖、木糖共发酵菌株扩培原料优选

收稿日期：2018-08-16作者简介：李秀荣(1978-)，女，黑龙江双城市人，工程师，从事纤维素乙醇技术研发工作。

本文详细评价XWS-Y 菌株，相同的扩培条件下，菌株在几种不同原料中增殖培养，增殖后菌株对酶解液葡萄糖木糖进代谢利用转化为乙醇，通过发酵的性能优选最佳扩培菌株原料。

1材料与方法1.1材料与试剂XWS-Y 菌株；无水葡萄糖；尿素；木糖；玉米浆；蛋白胨；KH 2PO 4；酵母膏；(NH 4)2HPO 4。

1.2设备与仪器BCN-1360型超净工作台；恒温摇床；冰箱冷柜；显微镜；1260液相色谱仪(Agilent)。

1.3方法1.3.1菌种扩培操作流程：培养基：YEPX （YEPD ）：酵母膏10g/L ，蛋白胨20g/L ，木糖20g/L (葡萄糖20g/L)，分装高温灭菌；30℃恒温摇床培养14h ～16h (12h~14h)。

葡萄糖、木糖共发酵菌株扩培原料优选李秀荣，魏拥辉，徐树峰，季文波[中粮生化能源（肇东）有限公司，黑龙江肇东151100]摘要:燃料乙醇将成为未来最重要的可再生清洁能源之一。

利用来源广泛的农、林废弃物等各类木质纤维质原料生产燃料乙醇具有极为广阔的前景。

纤维质原料含有大量的纤维素、半纤维素，XWS-Y 菌株能够同时代谢葡萄糖和木糖，共同发酵生成乙醇，从而提高发酵乙醇浓度。

最终发酵效果与XWS-Y 菌株的扩大培养有着直接关系，本文详细评价几种不同原料在相同的条件下扩培XWS-Y 菌株，在酶解液中的发酵性能。

关键词：燃料乙醇；纤维质原料；葡萄糖；木糖；菌株；扩培中图分类号：TS262.2；TS261.1；TS261.2文献标识码：BPreferred Raw Materials for Dilation and Culture of Glucose and XyloseCo-fermentation StrainsLI Xiurong,WEI Yonghui,XU Shufeng,JI Wenbo[China Food Biochemical Energy(Zhaodong)Co.Ltd.,Heilongjiang Zhaodong 151100，China]Abstract:Fuel ethanol will become one of the most important renewable clean energy sources in the future.The production of fuel ethanol from various kinds of wood fiber materials such as agricultural and forest waste from a wide range of sources is promising.Fibrous raw materials contain a large amount of cellulose and hemicellulose.XWS-Y strains can metabolize glucose and xylose at the same time and ferment together to produce ethanol,thereby increasing the concentration of fermented ethanol.The fermentation effect is directly related to the expanded culture of XWS-Y strain.In this paper,the fermentation properties of XWS-Y strain were evaluated in detail.Key words:fuel ethanol;Fibre raw materials;Glucose;xylose;Strains;Expansion一级二级YEPX ———→YEPD ———→扩培———→发酵表1几种扩培原料的制备序号扩培原料扩培条件1#酶解原液2#稀释酶解液3#葡萄糖溶液4#玉米糖化醪稀释5#玉米液化醪稀释6#玉米糖化醪---7#玉米液化醪---玉米浆、KH 2PO 4、(NH 4)2HPO 4接入扩培成熟的YEPD 种子液，加入尿素、青霉素等辅料，30℃恒温摇床培养12h~18h 。

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筛选高产乙醇突变株。结果表明，紫外诱变菌最佳稀释度为１０，最佳照射时Ｔ
为１０，最佳诱变时间为４ｎ ×１０ｍｉ，经３轮紫外和亚硝基胍（Ｔ）交替诱变，获得高产乙醇突变株Ｃ一０ＮＧ１，其乙醇产量最高为１．％，比原菌乙醇产量增加了８５３２．％，５次传代表现出较好的遗传稳定性。０关键词：乙醇；木糖；诱变育种中图分类号：Ｑ１８５文献标志码：Ａｄｉ０３６／ｓｎ１７ — ６６Ｘ）０１５０ｏ：１．９ｉ．１９４（．１．．９９ｊｓ６２００
第５期（总第２４４期）
２１年５月０１
农产品加工・学刊
ＡｃｄｍｉｅｉｄｉａｆＦｒＰｏｕｔｒｃｓｉｇａｅｃＰｒｏｃｌｏａｍｒｄｃｓＰｏｅｓｎ
Ｎｏ５．Ｍ．ｄｙ
文章编号：１７ — ６６（０）５０３ — ４６１９４２１０ — ０２０１
ｏｔｉｉｇｐｃｉｕｌｅｍｏｄｉａｔｒｎｔａｎ，ｉｒｅｏｏｔｉｈｉｈｙｅｄｓｒｉｆｅｈｎ１Ｔｅｒｓｌｈｗｔａｔｅｂａｎｎｉｈａｇｉｉｒｎｉｓｓａｔｇｓｒｉｌｉｎｏｄｒｔｂａｎｔｅｈｇ — ｉｌｔｎｏｔａｏ．ｈｅｕｔｓｏｈｔｈａｓ
发酵木糖高产乙醇酵母菌株的选育
解蕙铭１，闵伟红张，２，丹
（．１吉林农业大学食品科学与工程学院，吉林长春１０１；２长春医学高等专科学校生物工程系，吉林长春１０３）３１８．３０１
摘要：筛选获得的季也蒙毕赤酵母（ｉｈａｕｌｅｍｎｉＰｃｉｉｉｏｄｉｇｌｒ）为出发菌株，采用紫外线和亚硝基胍（Ｔ）复合诱变，ＮＧ
ｇｎｒｔｄｅｈｎｌｆｒｆｒｎａｉｎｈｓｉｃｅｓｄｔ．５ｅｅａｅｔａｏｔｅｍｅｔｔａｒａｅｏ８０％．ｔｓｏｈｔｇｏｎｔｏｔｒｙｈｓｇｏｅｅｉｔｂｌｙａｅｏｎｉｈｗｓｔａｏｄｗｏ５ｐｓｅｉａｏｄｇｎｔｓａｉｔ．ｔｃｉ