血液样品预处理的标准操作
血液检验操作规程有哪些
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血液检验操作规程有哪些血液检验操作规程血液检验是临床诊断和治疗过程中必不可少的一环,合理的操作规程是确保结果准确性和患者安全性的关键。
下面是对血液检验操作规程的详细介绍,包括样本采集、标本处理、仪器操作、结果判读等方面。
一、样本采集1.准备工作:清洁工作台,确保无杂物,清洁抽屉中备有所需常用耗材和试剂。
2.选择合适的采血部位:通常使用的部位有指腹、耳垂、前臂等,根据检验项目选择合适的采血部位。
3.消毒:采用75%酒精和碘伏等消毒剂进行消毒,保持清洁。
4.采血:使用适量的血管针或浅表血管封闭器,按照技术要求进行采集,避免污染或改变血液成分。
5.采集管选择:根据检验项目选择合适的采集管,保证标本的安全和准确性。
6.采集量:根据实际需要及检验项目的要求采用适量的标本,保证结果的准确性。
7.采集后处理:密封采集管,轻轻摇匀,以充分混合抗凝剂或促凝剂等。
二、标本处理1.离心:对于全血样本,需离心分离血浆和红细胞,避免含有红细胞的血浆影响结果。
2.标本保存:按照项目要求及标本特性选择合适的保存方式,例如冷藏、冷冻或常温保存,注意避免污染或变质。
3.标本传递:严格按照标本保存和转运的规范进行传递,保证标本的安全性和可追溯性。
4.标本处理记录:记录标本的接收、固定、采集时间等信息,便于追溯和结果解读。
三、仪器操作1.仪器准备:根据需要进行仪器的开机、预热、校准、质控等准备工作,确保仪器处于正常工作状态。
2.样品装载:按照仪器要求,将标本放入仪器中进行测试,注意避免杂质或污染对结果的干扰。
3.仪器操作:根据仪器的操作流程和技术要求进行正确操作,确保测试结果的准确性。
4.质控处理:每天开始使用仪器前进行质控检测,校正仪器误差,保证结果的准确性。
5.仪器维护:定期进行仪器的维护和保养工作,确保仪器的长期稳定性和准确性。
四、结果判读1.结果记录:仪器出结果后及时记录,注意标注检测项目、日期和患者信息等,便于结果的快速、准确解读和追溯。
组织样品和血液样品处理方法
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组织样品处理方法
1、外科手术将新鲜组织切除分离后,立即快速从其上分离取出三份
癌组织、三份癌旁组织和三份正常组织(尽量远离癌块),分别至于9个细胞冻存管中,并投入液氮罐或置入负80度冰箱中暂时保存;
2、长期保存需按编号以及肿瘤类型分门别类按顺序依次排序。
注意:
组织标本转移过程中,需置于液氮或干冰中,以防其中的RNA降解!
血液样品处理方法
1、将人体新鲜血液取至抗凝真空取血管中,每个研究对象取三管血,
3000rpm离心15分钟,将上层血浆取出,分装于1.5ml的EP管中,并储存于负20度的冰箱中待用。
注意:上层与下层交界处为白细胞层,全血中基因组来自于其中的白细胞,因此且不可将交界处的白细胞吸走!
2、下层浓缩血细胞可直接于抗凝真空取血管中,放置于负20度冰箱
中待用,也可直接用于下一步全血基因组的提取。
血样的样品处理方法
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血样的样品处理方法血样样品处理方法是指在进行实验前对血样进行处理的步骤,以确保从中获取准确、可靠的实验结果。
血样是一种非常常见且有重要价值的生物样品,广泛应用于临床、生化、分子生物学等领域的研究。
正确的血样处理方法可以减少干扰物的存在,提高实验的准确性和可重复性。
下面将详细介绍血样的样品处理方法。
首先,血样的采集是样品处理的首要步骤。
血样的采集应从静脉或动脉血管进行,采用无菌技术,以避免污染和误差。
在采集血样之前,需要准备好采集所需的器材,如注射器、针头、采血管等。
采集前应将相关器械进行灭菌处理,以减少污染的可能性。
在采样过程中,应注意采血部位的清洁和消毒,避免空气进入采血管中,以避免造成氧气浓度的变化。
在采集血样后,尽快进行下一步处理,以避免血样的变化和失真。
其次,血样的处理要根据实验目的和内容而定。
常见的样品处理方法包括血液离心、血浆分离、白细胞分离等。
血液离心是将新鲜采集的全血标本进行离心分离,以得到血浆和红细胞等不同组分。
在离心过程中,应根据实验要求设置合适的离心条件,如转速、时间等。
离心结束后,需将血浆、血清等组分分离后储存,避免冻融的次数过多,以保证血样质量。
血浆是将全血离心后得到的液体部分,其中含有可溶性的细胞成分、蛋白质、糖类、脂类等。
血浆常用于血液生化学分析、蛋白质分析等实验。
在血浆处理中,应注意避免污染和氧化的问题。
处理时需使用无菌操作,避免受到外界微生物的污染。
同时,在处理过程中,应将血浆储存于低温条件下,避免因酶的活性等因素引起样本变化。
白细胞的分离是将全血中功能活跃的白细胞分离出来进行研究。
白细胞分离的方法有多种,如红细胞沉降法、密度梯度离心法、磁珠分选法等。
不同的方法适用于不同的实验目的和分离策略。
白细胞的分离需在低温、无菌环境下进行,以避免因外界因素影响分离效果。
分离后的白细胞需立即进行后续实验,避免因时间过长而导致细胞失活和变化。
除了上述的处理方法外,还有一些常见的样品处理技术和方法,如血细胞计数、血型鉴定、DNA提取等。
血液样品预处理的标准操作
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血液样品预处理的标准操作血液样品预处理是一个重要的实验环节,它关系到后续的实验结果和分析。
为了保证实验的准确性和可靠性,必须严格按照标准操作进行血液样品预处理。
本文将详细介绍血液样品预处理的标准操作。
一、实验前准备1. 准备实验所需的材料和仪器,包括血液收集管、离心管、离心机、移液器、试剂和清洗盘等。
2. 将仪器和材料清洗干净,消毒处理。
3. 确认实验所需的试剂和材料已经全部准备齐全,试剂应按照规定比例稀释好,避免浪费。
4. 准备好必要的防护措施,如穿戴实验服、手套、口罩等。
二、采集样品1. 预先准备好采集用的血液收集管,不同实验需要选择不同的血液收集管。
2. 注射针头应当充分消毒,依次采集血液样品。
采集时应遵循无菌无菌操作规范,避免使血液受到污染。
3. 采集血液后,将血液收集管轻轻颠倒,使血液与血凝素均匀混合。
三、离心处理1. 打开离心机,选择适当的离心参数,将血液收集管中的血液离心5-10分钟,使血凝素被离心到管壁上。
离心结束后应检查离心管底部没有留下任何可见的红色沉淀。
2. 用移液器吸取离心好的血浆,转移到干净的离心管内。
四、样品保存1. 将离心管盖好,标注好样品的编号、日期、时间等信息。
存放在-20℃以下冰箱内进行保存。
2. 如需运输至其他实验室,请使用干冰保存,避免样品在运输过程中发生融化。
五、实验后的处理1. 实验结束后,清洗和消毒实验室设备和仪器。
2. 丢弃废弃液和废弃材料,按照相关规定进行妥善处理。
3. 记录实验数据和结果,并保存实验记录。
总之,血液样品预处理是实验分析的重要一环,必须按照标准化的步骤进行操作,以保证实验结果的准确性和可靠性。
在操作中,必须掌握正确的技巧,遵循规范的无菌操作,严格按照操作流程进行,避免出现误差。
同时,实验后要及时清洗和消毒实验室设备和仪器,遵照规定的程序处理废弃液和废弃材料,以保证实验的安全和环保。
血液样本的采集与处理方法
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一、血液样品采集方法
(一)采血的物品准备
采样箱、针头、塑料试管、5 ml或10 ml注射器、离心管、离心管架、酒精棉球、干棉球、(猪嘴套)、不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、乳胶手套、防护服防护帽、一次性手套、一次性鞋套等物品。
(二)、各种动物采血方法
1、家禽血液采血方法:翼下静脉采血、心脏采血、跖骨内侧静脉采血、右侧颈静脉采血
特点:猪前腔静脉离头部越近,则离皮肤越浅,静脉越细,越向胸部静脉越粗,离皮肤越深。1周龄猪直径约5mm,成年猪约1cm。采血时应根据猪的大小、肥瘦程度选择适当的进针部位。
如小猪采血部位太靠前,则会由于血管太小很难扎中,因此,小猪采血部位应略微靠后,而中大猪由于血管比较大,如果太往后,针头就无去扎到血管,所以,大猪采血部位应略微靠前。
②助手右手抓住鸡双腿,左手握住两翅膀,使鸡右侧卧,左侧面向上,放在小桌或小凳子上。术者自龙骨突起前缘引一直线到翅基,再由此线中点向髋关节引一直线,此线前1/3和中1/3的交界处有一凹陷,即是心脏采血进针的部位,食指触摸该处可感觉心跳(15日龄内雏鸡更明显);
或找出由胸骨走向肩胛部的皮下大静脉,心脏约在该静脉分支下侧。局部拔毛,常规消毒,用7#~9#针头的采血器从肋骨间隙垂直进针,一般刺入2~3cm
B找准进针部位保定后,要选择最佳采血点,即为猪两侧胸前凹陷窝。凹陷窝可用目测,也可用手指沿胸骨柄两侧触摸(胸骨柄最高点至第一肋骨间Icm处有一凹陷的感觉),要掌握在左右两侧凹陷处进行,进针时要掌握好一定的方向、角度和深度。
特别是对仔猪采血时,不能太猛、太深,以免刺伤心包或心脏。如针头未扎入血管,可轻轻上下移动针头,直至针筒流入血液为止。但须注意的是,进针后摆动不要过大或反复多次进针,以免损伤血管造成血肿或伤及气管。
实验四血液样品的处理及组织样品的制备分析
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实验四血液样品的处理及组织样品的制备分析引言:在现代生物医学研究中,血液样品和组织样品是常用的研究材料。
血液样品可以用于检测生物体内的血液成分和生化指标,而组织样品可以用于分析生物体的组织结构和功能。
实验目的:本实验的目的是了解血液样品的处理方法,以及组织样品的制备分析方法,为进一步的研究提供基础。
材料和方法:1.血液样品处理:(1)采集新鲜血液样品,使用无菌技术,避免污染。
(2)将血样倒入一条干净的玻璃试管中,添加适量的抗凝剂,如肝素或乙二胺四乙酸二钠,用胶塞封住试管。
(3)轻轻颠倒试管,使抗凝剂和血样充分混合。
(4)将试管放置于离心机中,以适当的速度和时间离心,使血细胞和浆液分离开来。
(5)将离心后的血液样品取出,分别收集红细胞沉淀和上清液,进行后续的分析处理。
2.组织样品制备分析:(1)选择要分析的组织,如心脏、肝脏等。
(2)将组织样品取出,迅速切割成适当大小的块状,用生理盐水冲洗去除表面的血液。
(3)将组织样品置于离心管中,加入适量的显微刀切碎。
(4)加入适量的组织裂解液,如RIPA裂解液,用鼓状混匀器混匀至完全裂解。
(5)离心裂解后的混合溶液,分离上清液。
结果与讨论:血液样品的处理主要是为了分离血细胞和浆液,以便分别进行血细胞和血浆的分析。
血细胞可以用于检测血细胞计数、血型鉴定等指标,而血浆可以用于检测血糖、血脂等生化指标。
通过离心分离血细胞和浆液,可以得到纯净的血样,从而准确分析血液成分。
组织样品的制备分析主要是为了研究组织的结构和功能。
通过切割组织样品,使其细胞裂解,可以得到含有组织细胞的混合溶液。
离心后的上清液可以用于分析组织液中的细胞成分和生化指标,如蛋白质、酶活性等。
总结:实验四介绍了血液样品的处理方法,以及组织样品的制备分析方法。
血液样品处理主要是为了分离血细胞和浆液,方便后续分析不同的血液成分。
组织样品的制备分析则是为了研究组织的结构和功能,通过分析组织液中的细胞成分和生化指标,可以了解组织的生物学特性。
血液检测样本采集与处理程序
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血液检测样本采集与处理程序简介本文档旨在提供血液检测样本采集与处理程序的指导,以确保高质量的血液检测结果。
样本采集请按照以下步骤进行血液样本的采集:1. 洗手并戴上一次性手套。
2. 确保采集工具(如针头和收集管)是干净和消毒过的。
3. 选择合适的采集部位(通常是患者的上臂)。
4. 用一次性酒精棉球清洁采集部位。
5. 用采集工具在清洁的部位穿刺皮肤,使血液流入收集管中。
6. 采集足够数量的血液样本。
7. 在收集管中加入所需的抗凝剂或其它试剂(根据具体检测需求而定)。
8. 小心地取出采集工具,注意不要触及任何其他物品。
9. 堵塞收集管的入口,确保血液不外溢。
10. 轻轻搅动收集管,使抗凝剂或试剂与血液充分混合。
11. 完成采集后,在采集部位上贴上创口贴。
样本处理得到血液样本后,应按照以下步骤处理样本:1. 将收集到的血液样本放置在标有患者信息的标签或中。
2. 确保标签上的信息是准确和完整的,包括患者姓名、样本采集日期和时间。
3. 将标有信息的样本放入适当的样本袋或盒中,以防止污染或泄漏。
4. 将样本尽快送往实验室或相应的检测机构。
5. 在送样前,确保样本袋或盒上有正确的送样标签,并填写相关的送样单据。
6. 如果有必要,确保在特殊情况下采取适当的储存和运输措施。
注意事项在进行血液样本采集和处理时,请注意以下事项:1. 遵守个人防护措施,包括佩戴手套和避免任何可能的接触。
2. 确保采集工具和是干净和消毒过的,以避免交叉感染。
3. 严格按照标签上的信息进行记录,以确保样本的准确性和可追溯性。
4. 在采集和处理过程中保持标本的完整性,避免污染、破裂或泄漏。
5. 遵循实验室或检测机构的标准操作程序和指南。
6. 根据特定的检测要求,选择适当的抗凝剂、添加剂或试剂。
以上是血液检测样本采集与处理程序的基本指导,希望能够对您有所帮助。
如有任何疑问,请咨询相关专业人士或实验室技术人员。
生物样本的处理方法
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生物样本的处理方法生物样本的处理是生物学、医学、药学等领域中非常重要的一个环节,其目的是为了获得可靠的实验数据,为后续的研究和应用提供支持。
本文将介绍几种常见的生物样本处理方法。
1. 血液样本的处理血液样本处理是临床医学中常见的操作。
为了获得准确的结果,需要注意以下几点:(1)采血前应让被测者保持安静状态,避免运动和饮食过多。
(2)采血前应充分消毒,避免感染。
(3)采血时应选择正确的采血针头和采血管,避免对血液样本的影响。
(4)采血后应立即将血液样本送往实验室,避免时间过长影响结果。
2. 细胞样本的处理细胞样本处理是生物学和医学中常见的操作,常用于细胞培养和细胞分离。
为了获得可靠的结果,需要注意以下几点:(1)细胞培养前应准备好培养基和培养器具,避免污染和误操作。
(2)细胞分离时应选择正确的酶和处理时间,避免对细胞的损伤。
(3)细胞培养过程中应控制培养条件,包括温度、湿度、CO2浓度等。
(4)细胞培养后应及时进行细胞计数和鉴定,以保证实验数据的准确性。
3. 组织样本的处理组织样本处理是医学和生物学中常见的操作,常用于病理学和组织学研究。
为了获得可靠的结果,需要注意以下几点:(1)组织采集前应选择正确的工具和方法,避免对组织的破坏。
(2)组织采集后应立即进行固定和包埋,避免组织变性和脱落。
(3)切片时应选择适当的厚度和方法,避免切伤或切变组织。
(4)染色前应选择正确的染色剂和条件,避免染色不均或误判。
4. DNA/RNA样本的处理DNA/RNA样本处理是分子生物学和基因工程中常见的操作。
为了获得可靠的结果,需要注意以下几点:(1)DNA/RNA采集前应选择正确的采集方法和工具,避免对样本的污染和误操作。
(2)采集后应立即进行裂解和纯化,避免DNA/RNA的降解和污染。
(3)纯化后应进行质量和浓度的检测,以保证实验数据的准确性。
(4)DNA/RNA的储存应选择适当的方法和条件,避免降解和污染。
生物样本的处理方法直接影响实验结果的准确性和可靠性。
血液样品分离操作规程
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1.目的:
规范血液样品分离操作,保证实验样品的分离质量。
2.实验材料:
真空血液收集试管、一次性离心管、离心管架(盒)、移液器、枪头(尖)、注射器、包装瓶、个人防护用品等。
3.操作规程:
3.1检查仪器使用维护记录;
3.2按照采集血液样品量和要求选择不同型号的离心机,如角式和水平及低温离心机等;
3.3打开离心机电源开关;
3.4打开离心机盖,将待离心样品放置于离心机内,要保持对称等量;
3.5根据实验要求设定转速及时间(5—8G/5min),然后盖上离心机盖,按“开始”键离心;
3.6离心结束后,按“Stop”键打开离心机盖,将样品逐一取出,关闭离心机电源,填写仪器使用记录并签名;
3.7将分离的血清或血浆样品用移液器吸入相应的离心管内,扣好离心管盖;
3.8将分离的样品放入标记好的样品盒中,根据实验要求放置-20℃或-80℃冰箱储藏备用;
4.样品标签:
标签记录实验相关信息,样品放置冰箱前必须贴以标签;
项目名称
样品编号
采血时间
储藏者
储藏单位
存放日期年月日
5.样品储藏:
由于样品不能及时检测,需储藏于冰箱保存待测,样品放入冰箱前要填写样品储藏记录表(附表)并签名。
6.注意事项:
6.1盛血清或血浆管经核对后在侧壁标注样品号;
6.2血清或血浆分离时要做满足实验要求的数量。
附表:
样品冰箱储藏登记表-20℃。
检验室血液标本处理流程
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检验室血液标本处理流程
亲爱的小伙伴们,今天来和大家分享一下检验室血液标本处理的流程,这可是很重要的哦!
咱们收到血液标本的时候,可得小心轻放,千万别给弄洒了!然后,一定要仔细核对一下标签上的信息,看看患者的姓名、性别、年龄啥的对不对,这一步可不能马虎!要是信息不对,那可就麻烦大啦!
接下来,把标本放到合适的架子上,这里我觉得可以根据标本的数量和种类灵活摆放,不过还是尽量按照一定的规律来,这样找起来方便。
然后呢,就是准备检测啦!在这之前,要检查一下检测仪器是不是正常运行,要是仪器出了问题,那可就糟糕啦!一般情况下仪器都是好好的。
检测的时候,要认真操作,按照规定的程序来,刚开始可能会觉得有点复杂,但习惯了就好了。
这一步要特别注意!
检测完成后,别忘了记录结果哦!这可关系到患者的诊断和治疗呢。
把标本妥善处理掉,有的可以保存一段时间,有的就需要及时清理。
小提示:别忘了最后一步哦!
怎么样,小伙伴们,这个流程是不是还不算太难?希望大家都能顺利完成血液标本的处理工作!。
电解质及血气检查--血液样本的处理.
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血液样本的处理
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一、全血采集
采血→拔掉针头,将血注入绿头管(肝素管)→上下颠倒
混匀→用1mL注射器,吸取最少200ul 的全血 →小心的拔
掉针头,赶走注射器内气泡→盖好针头后备用。
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注意事项:
1. 采血后应立刻进行测试(5分钟内),采血超过1小时的检
1. 离心及平衡:当离心一支试管时,需使用另外一只同样的
试管并加入水作为平衡,但不必精确平衡。
2. 离心参数:选“Normal”即可,15800转/分,90秒; 3. 在每一次离心之前应确保转子以位于转子架底部。因此每 一次离心前,应用手轻按转子,确保其位于底部。否则可 能造成转子破碎。
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三、血浆样本制备
1. 采好的血液尽快装到绿头管(3/4满,将管子滚动约30秒以达混合。
2. 使用高速离心机(12000-16000rpm)离心90~120秒钟,立 即将血浆样本吸出。放入样本杯中。
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四、离心机的使用
体应废弃。 2. 只能用锂肝素当抗凝剂。 3. 检体最少需求量是125ul。但为预防气泡进到试剂片内,应 最少充满200ul。
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二、血清样本制备
1. 使用针筒采血后,将针头拿下来,尽快将血液装到红头管
或血清分离管中;
2. 让管子静置至少20分钟,以确定血液已完整的凝固; 3. 使用高速离心机(12000-16000rpm)离心120秒钟; 4. 尽快处理血清样本,如在4小时内不能进行分析,应将样 本冷藏在2-8℃;如在48小时内不能分析,应将样本冷冻 在-18℃。
血样的样品处理方法
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血样的样品处理方法
血样的样品处理方法通常包括以下步骤:
1. 采集血样:使用无菌针头采集静脉血样。
根据实验的目的,常采集2-10毫升的血液。
2. 防止凝血:血液采集后,立即将其加入抗凝剂管中,如EDTA抗凝剂管、肝素抗凝剂管或柠檬酸盐抗凝剂管。
这些抗凝剂能防止血液凝固,保持血细胞的完整性,使血液样品适合后续的实验操作。
3. 离心:将血样与抗凝剂充分混合后,立即进行离心,通常在2000-3000转/分钟的速度下离心10-15分钟。
离心的目的是将血液分离为血浆和红细胞。
4. 分离血浆和红细胞:离心后,可用无菌注射器吸取上清的血浆,并转移到干净的离心管中。
此步骤可重复数次,直至获得足够的血浆。
5. 处理血浆:根据实验需要,血浆可进一步处理。
例如,可以采用冷冻离膜技术将小分子物质从血浆中富集出来;或者进行蛋白质分离和富集。
6. 处理红细胞:离心后的红细胞常用于其他实验,如细胞计数、细胞培养等。
根据实验需要,可先对红细胞进行洗涤,去除残留的血浆或抗凝剂。
需要注意的是,以上方法是常见的血样处理方法,不同实验可能有特定的处理要求,具体步骤可能会有所不同。
在进行任何实验操作之前,请按照实验要求和相关实验室操作规范进行操作。
血样样本的采集和处理
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血液样本的采集和处理血液样本的采集和处理 (1)CD4+和CD8+ T淋巴细胞样品的采集和处理 (4)血液样本的采集和处理一、血清样品的采集和处理1、用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1〜2h,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min,吸出血清于血清管内备用。
2、如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其他物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
二、抗凝血样品采集和处理1、用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
2、应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+ /CD 8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选取K3EDTA或枸橼酸纳。
3、用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4〜8h内分离PBMC和血浆,否则应在24〜48h内分离血浆和血细胞。
三、采集样品注意事项1、采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
2、采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具(有条件者可用持针器),以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
四、样品的保存1、用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(一周)内进行检测的样品可存放于2-8℃。
2、用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃ 以下,进行病毒RNA检测的样品如需存放3个月以上应置于-80℃。
3、用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期存放,样品采集时间超过48h则不可检测。
五、样品的运送1、实验室间传递的样品应为血清和血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
(1)第一层容器:装样品,要求防渗漏。
样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。
血液样本的采集、运输、处理、保存
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血液样本的采集、运输、处理、保存一、引言血液样本是医学研究、临床诊断和疾病监测中不可或缺的重要资源。
高质量的血液样本可以为科研工作者和临床医生提供准确的实验数据和诊断依据。
因此,血液样本的采集、运输、处理和保存成为了一个严谨且关键的过程。
本文将详细介绍血液样本的采集、运输、处理和保存的方法和注意事项,以确保血液样本的质量和可靠性。
二、血液样本的采集1. 采集前的准备在采集血液样本之前,需要进行以下准备工作:(1)选择合适的采集时间:根据实验或诊断需求,选择最佳的时间点进行血液采集。
(2)受试者准备:告知受试者采集的目的、过程和可能的不适感,取得其同意并签署知情同意书。
受试者应保持平静,避免剧烈运动和情绪激动。
(3)采集物品准备:准备无菌采集针、采血管、酒精棉球、棉签、止血带等采集所需物品。
2. 采集方法(1)静脉采血法:是目前最常用的血液采集方法。
操作步骤如下:找到适合采血的静脉:通常选择受试者前臂的肘部静脉,也可选择其他部位的静脉。
消毒:用酒精棉球对采血部位进行消毒,待干。
穿刺:将采血针与皮肤成1530度角,迅速穿刺入静脉。
采血:待血液顺畅地流出后,将采血管连接到采血针上,采血至所需量。
拔针:采血完成后,迅速拔出采血针,用棉签压迫采血部位止血。
(2)指尖采血法:适用于需要少量血液样本的情况。
操作步骤如下:清洁:用酒精棉球清洁受试者的指尖。
穿刺:用特定的采血针刺破指尖皮肤。
采血:轻轻按摩指尖,使血液自然流出,用采血管收集所需量的血液。
3. 采集过程中的注意事项(1)采血前需确认受试者是否有采血禁忌症,如患有出血性疾病、感染性疾病等。
(2)采血时应严格遵守无菌操作原则,避免样本污染。
(3)采血过程中要确保采血管的真空状态,避免血液样本接触空气。
(4)采血完成后,及时将采血管轻轻颠倒混匀,使血液与抗凝剂充分混合。
三、血液样本的运输1. 运输前的准备(1)将采集好的血液样本放入专用的运输箱内,箱内应放置冰袋或干冰,保持低温。
1.血液标本采集处理标准操作规程
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血液标本采集及处理标准操作规程目的:血清(ELISA或化学发光法检测蛋白表达检测);血浆(游离核酸的检测);有核细胞(循环肿瘤细胞的检测)。
适用范围:肿瘤病人血液标本采集及处理。
责任人:操作流程:1.仪器设备:高速低温离心机、-80℃冰箱。
2.材料与试剂:试剂:10×红细胞裂解液(Cat NO:420301;试剂公司:Biolegend)胎牛血清(100ml;试剂公司:天津康源生物技术有限公司) DMEM(500ml;试剂公司:Thermo Cat NO:SH30033.01B)DMSO(100ml;试剂公司:材料:4ml血清真空采血管(黄盖无抗凝剂)4ml血浆真空采血管(紫盖含抗凝剂)移液器、50ml离心管、1ml冻存管、吸头等3.样本采集:3.1分离血清3.1.1血清管(黄盖无抗凝剂),标本于4℃,3300rpm离心10分钟。
3.1.2吸取血清分装于1.5ml 冻存管内,每管300 µl,分装4管,若血清量较多,则将剩余血清全部加入最后一个冻存管中。
3.1.3贴条形码标签,-80℃储存。
3.2分离血浆3.2.1血浆管(紫盖含抗凝剂),标本于4℃,3300rpm离心10分钟。
3.2.2吸取血浆分装于1.0ml 冻存管内,每管300 µl,分装4管,若血浆量较多,则将剩余血清全部加入最后一个冻存管中。
3.2.3贴条形码标签, -80℃储存。
3.2.4采血管扣紧管盖,放存旁边,准备下一步分离有核细胞的操作。
3.3分离有核细胞按每4ml全血需要配制40ml用量稀释红细胞裂解液。
3.3.1取50ml离心管, 加36ml去离子水,加4ml红细胞裂解液混匀。
3.3.2用移液器将分离血浆后剩余血液转移至装有裂解液离心管中,轻轻颠倒混匀,室温静置10min(观察裂解效果适当延长裂解时间,液体呈现透明状为宜)。
3.3.3于4℃,800g离心5min,吸去上清,加入4mlDMEM轻轻吹打混匀沉淀。
血液样品预处理的标准操作
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血液样品预处理的标准操作一、目的规范高效液相色谱分析中血液样品预处理的操作。
二、职责1. 实验室分析测试人员对本规程的实施负责。
2. 对于每一项具体的研究课题,具体的操作步骤应由实验室负责人负责制定,并由实验室分析测试人员严格实施。
3. 实验室负责人负责对本规程的修订。
三、血液样品预处理的标准操作(SOP)1. 实验仪器与设备的准备1.1 试管一般采用有盖子和刻度的尖底试管,要求密封性好,编号清楚准确,并摆放整齐。
1.2 EP管一般采用的规格有1ml、1.5ml、2 ml。
要求密封性好,编号清楚准确,并摆放整齐。
1.3 移液器要求定量准确,重复性好。
1.4 其它涡流混合器、离心机、真空泵、烧杯、量筒、记号笔、试管架、标签纸等。
2. 样品的均匀化2.1 将装有血浆(血清)样品的EP管放置在冰箱冷藏室内,缓慢解冻为血浆(血清)溶液。
2.2 然后取出放置至室温,置涡流混合器上混匀或往复振摇亦可到达均匀的目的。
3. 液-液提取3.1 提取溶剂的准备3.1.1 常用的溶剂有氯仿,二氯甲烷,乙酸乙酯,乙醚等。
3.1.2 提取溶剂可以是一种也可以是几种溶剂的混合溶液,目的是调整提取溶液的剂性,既保证待测样品被充分萃取进入提取溶剂,同时又有很好的选择性。
3.2 根据待测样品的需要用移液器定量吸取血浆(血清)至试管中,盖好试管塞。
3.3 必要时调整血浆(血清)溶液的pH值,根据待测样品的性质加入酸、碱或缓冲溶液。
3.4 用移液器定量吸取提取溶液至装有血浆(血清)的试管中,盖好试管塞。
3.5 溶液的混匀3.5.1涡流混匀将试管置于涡流混合器上进行旋涡,并保证样品溶液旋涡充分混匀,旋涡时间一般为2-3分钟。
3.5.2 摇床混匀将试管置于摇床上往复振摇,振摇时间一般为5-10分钟。
3.6 样品的离心将试管置于离心机中,分离过程中一般采用3000-4000r/min。
离心之前注意要平衡,加速时应注意缓慢逐步加速,以防加速过快试管炸裂,离心时间一般为15-20分钟。
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血液样品预处理的标准操作
一、目的
规范色谱分析中血液样品预处理的操作。
二、职责
1. 实验室分析测试人员对本规程的实施负责。
2. 对于每一项具体的研究课题,具体的操作步骤应由实验室负责人负责制定,并由实验室分析测试人员严格实施。
3. 实验室负责人负责对本规程的修订。
三、血液样品预处理的标准操作
1. 实验仪器与设备的准备
试管一般采用有盖子和刻度的尖底试管,要求密封性好,编号清楚准确,并摆放整齐。
EP管一般采用的规格有1ml、、2 ml。
要求密封性好,编号清楚准确,并摆放整齐。
移液器要求定量准确,重复性好。
其它涡流混合器、离心机、真空泵、烧杯、量筒、记号笔、试管架、标签纸等。
2. 样品的均匀化
将装有血浆(血清)样品的EP管放置在冰箱冷藏室内,缓慢解冻为血浆(血清)溶液。
然后取出放置至室温,置涡流混合器上混匀或往复振摇亦可到达均匀的目的。
3. 液-液提取
提取溶剂的准备
常用的溶剂有乙酸乙酯,乙醚,环己烷等。
提取溶剂可以是一种也可以是几种溶剂的混合溶液,目的是调整提取溶液的剂性,既保证待测样品被充分萃取进入提取溶剂,同时又有很好的选择性。
根据待测样品的需要用移液器(移液枪)定量吸取血浆(血清)至试管中。
必要时调整血浆(血清)溶液的pH值,根据待测样品的性质加入酸、碱或缓冲溶液,然后涡旋混匀。
用移液器定量吸取提取溶液至装有血浆(血清)的试管中,盖好试管塞。
溶液的混匀
涡流混匀将试管置于涡流混合器上进行旋涡,并保证样品溶液旋涡充分混匀,旋涡时间一般为2-3分钟。
样品的离心将试管置于离心机中,分离过程中一般采用4000r/min。
离心之前注意要平衡,加速时应注意缓慢逐步加速,以防加速过快试管炸裂,离心时间一般为10分钟。
离心分离后试管中样品分为上下两层,用移液器吸取上层有机相,转移至另一试管中。
溶剂的挥发
自然挥发将样品溶液放置在室温下挥发,有时还可适当加热,加速溶液挥发。
氮气吹干氮气流能防止发生氧化,为了加快挥散速度,将样品溶液置于氮气流下吹干。
减压蒸发在密闭容器内,通过抽真空以降低液体表面的压力,使其沸点降低,样品溶液很快挥发,减少了蒸发过程中样品与空气的接触,避免由此引起的分解等副反应,适于热不稳定的样品。
样品的复溶用于样品溶液残渣复溶的溶液通常采用流动相或其它有机溶剂。
用移液器准确定量吸取,并且复溶样品应充分混合均匀。
预处理样品的储存预处理后的样品应保存在冰箱冷藏室,样品应竖直放置、排列整齐、编号准确清楚。
待样品进样分析以前取出,以保证样品的稳定。
乳化现象
防止乳化可增加有机溶剂的体积,避免猛烈振摇或加入适当的试剂改变其表面张力等方法防止乳化。
破乳若已发生严重的乳化现象,应采取适当的方法消除乳化。
离心可将试管置于离心机中离心消除乳化。
冷冻可将试管置于冰箱中冷冻消除乳化。
加入电解质。
加入适当的稀释液稀释。
4. 去蛋白处理
有机溶剂的准备甲醇与乙腈是反相液相色谱法中常用的蛋白沉淀剂,因为它们与流动相的组成相同。
甲醇沉淀蛋白的优点是上清液清澈,沉淀为絮状易于分离;乙腈与之相反,产生细的蛋白沉淀,但沉淀效率较甲醇高。
根据待测样品的需要用移液器定量吸取血浆(血清)至试管中,盖好试管塞。
必要时调整血浆(血清)溶液的pH值,根据待测样品的性质加入酸、碱或缓冲溶液。
用移液器定量吸取有机溶液至装有血浆(血清)的试管中,盖好试管塞。
溶液的混匀有机溶剂使蛋白质变性而析出沉淀,从而把与蛋白质结合的药物解离出来。
与此同时待测样品大部分被萃取进入有机溶剂。
涡流混匀将试管置于涡流混合器上进行旋涡,并保证样品溶液旋涡充分混匀,旋涡时间一般为2-3分钟。
摇床混匀将试管置于摇床上往复振摇,振摇时间一般为5-10分钟。
离心去除蛋白将试管置于离心机中,分离过程中一般采用3000-4000r/min。
离心之前注意要平衡,加速时应注意缓慢逐步加速,以防加速过快试管炸裂,离心时间一般为15-20分钟。
离心分离后变性蛋白质沉淀于试管底部,用移液器吸取上层有机溶液,转移至另一试管中。
过滤经过去蛋白处理后的样品溶液用μm的滤膜过滤。
高速离心将过滤后的样品溶液转移至EP管中,采用25000-30000 r/min。
离心之前注意要平衡,加速时应注意缓慢逐步加速,以防加速过快试管炸裂,离心时间一般为5-10分钟。
经过以上处理后得到的样品溶液,如果待测物的浓度在定量限以上,而且溶剂对HPLC系统没有干扰,就可以直接进样分析。
如果需要除去溶剂,即浓缩甚至干燥样品,方法同。
预处理样品的储存预处理后的样品应保存在冰箱冷藏室,样品应竖直放置、排列整齐、编号准确清楚。
待样品进样分析以前取出,以保证样品的稳定。
5. 固相萃取
固相萃取柱的准备
柱管由血清级的聚丙烯制成(也有由玻璃制成的),一般为注射器性状。
柱管下断有一突出的头,尺寸已标准化。
烧结垫聚乙烯是常见的烧结垫材料,对于特殊要求也可采用特氟隆或不锈钢片。
SPE固定相根据样品溶液的性质和组成选择不同类型和重量的固定相。
SPE固定相最常见的是键合的硅胶材料,一般采用孔径60A不规则形状的40μ硅胶微粒作为原材料,然后将各种官能团键合上去。
正相CN、DIOL、Si、NH2等可作为正相固定相,用来保留极性物质。
反相C18、C8、C2、CH、PH等可作为反相固定相,用来保留非极性物质。
离子交换
固定相活化
净化固定相将第一溶液加入到固定相,真空抽滤,倒掉洗脱液。
用量约为1-2ml/100mg固定相。
将终溶剂加入固定相,真空抽滤,倒掉洗脱液。
用量约为1-2ml/100mg固定相,终溶剂应该与样品溶剂性质相似。
在活化的过程中和结束时,固定相都不能抽干,因为这将导致填料床出现干裂,如果在活化步骤中出现干裂,所有活化步骤都要重做。
根据待测样品的性质将酸、碱或缓冲溶液加入到血浆(血清)溶液中,溶解稀释血浆(血清)溶液并且调整pH值。
上样将样品溶液加入到固相萃取柱,然后真空抽滤,使样品进入固定相,倒掉洗脱液。
淋洗样品中分析物得到保留后,将淋洗液加入到固相萃取柱进行淋洗,真空抽滤,倒掉淋洗液,以洗掉干扰组分。
溶液体积可为-100mg固定相。
洗脱将洗脱液加入到固相萃取柱进行洗脱,真空抽滤,并收集洗脱液。
洗脱液一般为固定相。
经过以上处理后得到的洗脱液可以直接进样分析。
如果需要除去溶剂,即浓缩甚至干燥样品,方法同。
预处理样品的储存预处理后的样品应保存在冰箱冷藏室,样品应竖直放置、排列整齐、编号准确清楚。
待样品进样分析以前取出,以保证样品的稳定。
注意事项
在上样、淋洗、洗脱时注意溶剂极性的选择。
可以是一种也可以是几种溶剂的混合溶液。
溶剂的互溶性后一种流过柱床的溶剂必须与前一溶剂互溶。
如果使用互溶的溶剂有困难,就必须干燥柱床。
干燥的方法是让氮气或空气通过柱床10-15min;或把SPE在1000-1500r/min离心5min。