血凝操作规程
全自动血凝仪操作规程
全自动血凝仪操作规程1 PT 检测步骤1.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
1.2 设置测试项目和病人编号：按”1“键设置测试项目，按“←”“→”选择“PT”，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。
按“2”键设置病人编号，直接输入病人号后，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。
1.3 将PT应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37C1.4 加血浆20ul于空比色杯内（样本应加入杯子底部，不能有气泡），置于测试通道或预温位预温2分钟。
1.5 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道1”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取40ulPT工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
1.6质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
1.7关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
2 APTT检测步骤2.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
2.2 设置测试项目和病人编号：方法同6.1.22.3 加血浆20ul于空比色杯内，再取APTT试剂20ul加入比色杯内，混匀后，置于测试通道或预温位预温3分钟。
2.4 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道3”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取20ul CaCl2（CaCl2预温3分钟）加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
2.5 质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
2.6 关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
3 TT检测步骤3.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单3.2 设置测试项目和病人编号：方法同6.1.23.3 加血浆30ul于空比色杯内，置于测试通道或预温位预温2分钟。
血凝仪操作规程
血凝仪操作规程
《血凝仪操作规程》
一、目的
本规程旨在规范血凝仪的操作流程，确保血液凝固检测的准确性和可靠性。
二、适用范围
本规程适用于所有使用血凝仪进行血液凝固检测的操作人员。
三、操作流程
1. 检查设备
在进行检测之前，操作人员应当检查血凝仪的状态，确保设备无损坏和故障。
2. 样本采集
操作人员应当根据标本采集的规范进行操作，确保采集到干净、无污染的血液样本。
3. 样本处理
将采集到的血液样本进行适当处理，如抗凝剂处理或者离心等。
4. 校准仪器
在每次使用血凝仪进行检测前，应当进行仪器的校准，确保读数的准确性。
5. 操作血凝仪
按照设备操作手册的要求，将处理好的血液样本加入到血凝仪中，并按照仪器指示进行操作。
6. 记录结果
在检测完成后，应当准确记录血凝仪的结果，并及时保存相关
数据。
四、注意事项
1. 操作人员应当接受相关的培训，并熟悉血凝仪的操作流程。
2. 检测过程中应当避免样本受到外界因素干扰，确保实验结果的准确性。
3. 对于异常结果，应当及时进行核查与处理，避免因误操作导致结果错误。
五、附则
本规程的制定、执行和修订由相关部门负责，对于违反规程的行为将依据公司相关规定进行处罚。
六、执行日期
本操作规程自颁布之日起执行。
七、修订日期
本操作规程自颁布之日起修订。
凝血四项操作规程(共4张PPT)
血浆活化部分凝血活酶时间测定
（APTT）
• 方法原理：用部分凝血活酶代替血小板膜磷脂，为凝 缩方短法， ：见冯于克先劳天斯性法因、子光学5增法多和、磁口珠服法避及孕P药T衍和生血法栓{形PT成完性成疾时病，。全部纤维蛋白原转变成纤维蛋白，纤维蛋白产生的浊度与纤维蛋白含量成正比
。血浆凝血酶时间测定（TT）
维生素K缺乏症、严重肝脏疾病及血中抗凝物质增加； 减用少激为 活先剂天激性活纤12维、蛋11白凝原血含因量子低。下。
血方浆法纤 ：维冯蛋克白劳原斯测法定、（光学FIB法）和磁珠法及PT衍生法{PT完成时，全部纤维蛋白原转变成纤维蛋白，纤维蛋白产生的浊度与纤维蛋白含量成正比
浆浊度、粘稠度增加直至凝固。 。待检血浆中加入足量的激活剂、部分凝血活酶悬液和钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血浆浊度、粘稠度增加直至凝固。
减血少浆为 凝先血天酶性时纤间维测蛋定白（原TT含）量低下。
• 临床意义：延长，见于内源凝血系统因子（12、11、 待减检少血 为浆先中天加性入纤足维量蛋的白激原活含剂量、低部下分。凝血活酶悬液和钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血浆浊度、粘稠度增加直至凝固。
。减少为先天性纤维蛋白原含量低下。
钙离子用来启动内源凝血系统来形成纤维蛋白，使血 缩（短AP，TT见是于监先测天肝性素因治子疗5增剂多量、的口首服选避指孕标药）和血栓形成性疾病。
方法原理：将在稀凝释血的酶血作浆用加下入，足待量检的血凝浆血中酶纤使维纤蛋维白蛋原白转原变转成变纤成维纤蛋维白蛋，白使，血测浆定浊其度凝及固粘时稠间度，增凝加血 直时至间凝的固长。短与血中纤维蛋白原含量成反比
缩短，见于先天性因子5增多、口服避孕药和血栓形成 方，法利原 用理浊：度将的稀变释化的测血得浆纤加维入蛋足白量原的含凝量血（酶散使射纤比维浊蛋法白和原透转射变比成浊纤法维，蛋原白理，为测将定测其得凝的固浊时度间变，化凝与血 校时准间血的浆长浊短度与的血变中化纤比维较蛋而白得原到含其量含成量反）比}
MC血凝仪标准操作规程
M C血凝仪标准操作规程文件管理序列号：[K8UY-K9IO69-O6M243-OL889-F88688]H Q B J S／Y Q－C G－3－2015S O P文件YQCG-3MC-2000双通道血凝仪标准操作程序3.1【原理】凝固法（CiottingMethod）:试剂与血浆混合后，可溶性纤维蛋白原转变成不可溶解的浑浊的纤维蛋白而凝固，致使检测标本光密度增加，这种明显的光密度改变被检测器检出，仪器已收集到的光电信号为基础，作“第一微分”，并以第一微分的最大点作为该样本的凝固时间。
3.2【仪器的参数设定】参数设定：按“Menu”进入定标用“↑↓’键+“Enter”键输入ISI值用“↑↓’键+“Enter”键输入正常值当前试验定标完成其他TT，APTT,Fg以此类推。
3.3【开、关机程序】3.3.1开机：屏幕显示软件版本。
预温屏幕仪器需要3-4分钟，平衡HQBJS／YQ－CG－3－2015SOP文件至37℃，系统准备就绪。
3.3.2关机：每日用完，关掉仪器开关后，再拔掉电源。
3.4【标准程序】3.4.1按照仪器的要求输入参数。
3.4.2确认各种试剂，打印纸是否满足当天处理标本的需要。
3.4.3质控的测量，每日跟做一次质控，其结果在控后，方可进行其它的标本的检验，否则应查找质控的原因。
3.5【常规操作程序】3.5.1打开电源，开机。
3.5.2预温，仪器需3-4分钟平衡到37℃。
3.5.3按“TEST”键进入测试选择，用↑↓键选择测试项目。
3.5.3.1PT:正常值：11-15秒。
3.5.3.1.1将50ul血浆和试剂分别放于V型小杯及小试管内预温1分钟；3.5.3.1.2将50ul血浆+100ul试剂混合，按（1）optic或（2）optic键便开始测量；3.5.3.1.3显示结果并打印；3.5.3.2TT:正常值：10-18秒。
3.5.3.2.1将100ul血浆和试剂分别放于V型小杯及小试管内预温1分钟；3.5.3.2.2将100ul血浆+50ul试剂混合，按（1）optic或（2）optic 键便开始测量；HQBJS ／YQ －CG －3－2015SOP 文件3.5.3.2.3显示结果并打印；3.5.3.3APTT:正常值：24-38秒。
血凝分析仪项目标准操作程序
SOP_09-17 血凝分析仪项目标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围：血栓/止血检验项目三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：凝血酶原时间PT测定1、检测原理:待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶原时间PT。
是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。
2、试剂盒组成PT凝血活酶：10支本批试剂国际敏感指数ISI值：1.20标本来源与保存静脉采血，置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液（1份抗凝液+9份全血）的塑料试管或硅化玻璃管中，3000rpm离心10分钟，收集上层液（血浆，黄色）。
2-8℃保存，不宜超过12小时。
3、方法3.1取PT凝血活酶冻干品一支，加入2.2ml蒸馏水轻摇溶解。
3.2取待测血浆（参比血浆）0.1ml，37℃孵育2分钟，加入37℃预温凝血酶溶液0.2ml（上机加0.1ml），混匀，立即启动秒表，记录凝固时间，即为PT值。
4、数据处理凝血酶原时间比值（PTR）=待测血浆PT/参比血浆PT国际标准化比值（INR）=PTR ISI正常值1.以时间表示：11-15秒2.以PTR表示：0.95-1.243.以INR表示：0.94-1.295、注意事项1）采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，贮血升微使用塑料试管或硅化玻璃管。
不宜使用普通玻璃管，避免凝血因子活化。
2）血时止血带不可束缚过紧，并不应超过5分钟，否则导致凝血及纤溶因子活化。
3）浆制备必须及时，血浆分离应尽量去除血小板。
血浆分离后应尽快测定。
4）血浆预温不宜超过10分钟。
5）凝血活酶预温不可超过30分钟。
6）用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血会影响测定结果，此时宜用手工法或电子机械式凝血仪测定。
7）红细胞比容超过55%时，应调整抗凝剂用量。
血凝操作流程
血凝操作流程
一、开机前准备：
1、检查电源连接是否正常；
2、检查打印机是否开启；
3、检查试剂是否充分，试剂不足需立即更换；
4、检查废液是否溢满，如废液满及时处理；
5、检查工作台是否清洁。
二、操作程序：
试剂配制或复溶：各试剂从冰箱中取出待其恢复至室温后，严格按试剂说明加入复溶液如需复溶（配制试剂）。
1、现将样品杯中加入磁珠，然后按表1操作；
2、按“通道选择”，选择将要开始测试的通道，*号指示的通道将要测试的通道；！指示的通道表示正进在测试的通道；
3、按“预温时间”可对四个大项目的预温时间进行设置；
4、按“预温开始”启动预温计时，预温时间到后，发出“滴滴”响声，再按一次该键，停止响声；
5、按“•”键，内置打印机走纸；
6、按“菜单”可以进入菜单，根据里面的子菜单，完成各项设置和信息查阅。
表1 凝血仪各项目测试简易操作表
三、标本要求：
1、必须按要求采取2毫升样本，采完样本立即混匀几次；
2、样本不能发生溶血，如有可以结果需复查后才报告主任才能发出报告；
3、定期做质控已确保结果准确性。
四、关机前准备：
1、检查所有样本是否已处理完毕；
2、整理工作台面；
3、倒掉当天废液；
4、按程序点击维护关机。
ACL9000血凝仪操作规程
ACL9000血统仪操作规程1.仪器分析原理和分析参数1.1原理：光学法是目前血凝仪使用最多的一种检测方法。
当血浆在样品杯中逐渐凝固时，纤维蛋白原转变成纤维蛋白，其理学性状也随着变化；当一束光通过样品杯时，其透射光和散光的强度也会随之变化。
ACL9000采用散射比浊法：是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。
在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90。
直角，当向样品中加入凝血激活剂后,随着样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光强度逐步增加，仪器把这种光学变化描绘成凝固曲线，当样品完全凝固以后，散射光的强度不再变化。
通常是把凝固的起始点作为0%,凝固终点作为100%,把50%作为凝固时间。
光探测器接收这一光的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线。
当测定含有干扰物（高脂血症、黄疸和溶血）或低纤维蛋白原血症的特殊样本时，由于本底浊度的存在，其作为起始点0%的基线会随之上移或下移，仪器在数据处理过程中用本底扣除的方法来减少了这类标本对测定的影响。
但是这是以牺牲有效信号的动态范围为代价的，对于高浊度标本并不能有效解决问题。
1.2分析参数：TT・凝血酶时间、PT■凝血酶原时间、APPF- 部分凝血活酶时间、FIB■纤维蛋白、凝血因子分析（II、V、X、训、IX、XI、刈）、抗胞浆素、）肝素抗・Xa、蛋白C 及活性蛋白C、狼疮抗凝物、蛋白C和S抗凝物等。
2.仪器参数2.1试剂位：18个，具冷藏功能。
2.2样本位：40个，可通过换盘连续添加。
3.操作规程3.1准备工作:3.1.1清空废反应杯，加足新的反应杯。
3.1.2检查参比液（Reference Emulsion）是否充足，不够应重新加入。
3.1.3检查试剂存量，不够应及时加足。
3.2开机：ACL的开关在仪器的左侧后边。
开机后仪器自检, 预温15分钟3.3从一开始进入的界面中，将前一天的标本删除。
选“回收筐”进入Delete Sample界面,选“All Sample M后，按delete。
试述血凝试验的操作步骤
试述血凝试验的操作步骤
血凝试验是一种常用的临床试验，用于评估血液凝固功能。
下面是血凝试验的一般操作步骤：
1. 收集标本：使用细长的无菌针从患者的静脉或指尖取得血液标本。
通常需要抽取约5ml的血液。
2. 采样管处理：将采样的血液标本转移到无菌采样管中，并轻轻倒置搅拌混合，确保血液和抗凝剂彻底混合。
3. 样本准备：用无菌塑料移液器将混合好的血液标本转移到一个无菌的试管中。
4. 血管外皮细胞分离：用适量的无菌生理盐水稀释血液样本，然后进行离心，将血浆与血细胞分离。
抛弃上清液，保留血细胞沉淀。
5. 血小板去除：用适量的凝血因子激活，将其加入待测的血细胞沉淀中，然后进行轻轻搅拌，使血小板聚集在一起。
6. 凝集剂处理：将适量的含有凝集剂的溶液加入血细胞沉淀中，并轻轻搅拌，直到血凝聚集。
7. 时间记录：根据试验要求，等待一定时间（通常为5-10分钟），观察血液的凝固现象并记录凝固时间。
8. 结果解读：根据实验结果，判断血凝试验的结果是否正常。
正常情况下，血液会在规定的时间内凝固，若出现异常，则可能存在凝血功能障碍。
需要注意的是，血凝试验的具体操作步骤可能因具体试剂和仪器的不同而略有差异，因此在进行血凝试验时应按照试剂和仪器的说明书进行操作。
同时，为了确保结果的准确性，操作人员应具备相关的实验室技能和操作经验，同时遵守严格的无菌操作规范。
血凝实验步骤
血凝血抑试验一、1%红细胞准备：新鲜鸡抗凝血、PBS缓冲液或生理盐水、离心管、低速离心机步骤：1、抗凝血第一次离心：1500rpm，5min。
去除上层白细胞血浆等2、加入PBS或生理盐水，颠倒混匀3、第二次离心：1500rpm，5min。
去除上层白细胞血浆等4、第三次离心：2000rpm，10min。
去除上层白细胞血浆等5、 99ml生理盐水或PBS+1ml红细胞。
二、血凝物品准备：待检测的样品、1%鸡红细胞、96孔血凝板、移液器及吸头、恒温箱试验步骤：1、用PBS（生理盐水）铺板：采用50微升体系进行试验。
调节移液器至50微升，吸取PBS缓冲液加入96孔血凝板中，有几个样品就加几排孔。
2、倍比稀释：吸取50微升待检样品依次加入第1纵排孔中，吹打15下后吸取50微升再加入第2纵排孔，再吹打15下，吸取25微升加入第3纵排孔中，依次类推，直至第11纵排孔，吹打混匀后吸50微升后连同吸头一起弃去，第12纵排为红细胞对照。
3、加红细胞：加1%红细胞，每孔50微升，然后置于37℃温箱或者室温反应20-40分钟左右，读数即可。
4、读数时，以出现完全凝集的孔作为病毒的血凝滴度。
三、4单位抗原1、物品准备：病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移液器及吸头、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板2、测定病毒滴度：血凝，假设测得的血凝滴度为2的8次方，则四单位病毒的稀释倍数为2的6次方（2的8次方除以4），即64倍稀释。
3、计算抗原用量根据所需的四单位抗原的总量来确定抗原液的用量。
比如，需四单位抗原总量为20ml，则利用公式：抗原原液*64（稀释倍数）=20ml，求出抗原原液的体积为0.312ml，需要PBS缓冲液的体积约19.7ml，根据计算的结果配置即可。
4、取PBS缓冲液19.7ml，加入20ml的小青瓶中，取0.312ml的病毒抗原液，加入到缓冲液中，盖上塞子，充分混匀，最好用涡旋仪混匀，至此，四单位抗原配制完成。
血凝实验步骤
⾎凝实验步骤⾎凝⾎抑试验⼀、1%红细胞准备：新鲜鸡抗凝⾎、PBS缓冲液或⽣理盐⽔、离⼼管、低速离⼼机步骤：1、抗凝⾎第⼀次离⼼：1500rpm，5min。
去除上层⽩细胞⾎浆等2、加⼊PBS或⽣理盐⽔，颠倒混匀3、第⼆次离⼼：1500rpm，5min。
去除上层⽩细胞⾎浆等4、第三次离⼼：2000rpm，10min。
去除上层⽩细胞⾎浆等5、 99ml⽣理盐⽔或PBS+1ml红细胞。
⼆、⾎凝物品准备：待检测的样品、1%鸡红细胞、96孔⾎凝板、移液器及吸头、恒温箱试验步骤：1、⽤PBS（⽣理盐⽔）铺板：采⽤50微升体系进⾏试验。
调节移液器⾄50微升，吸取PBS缓冲液加⼊96孔⾎凝板中，有⼏个样品就加⼏排孔。
2、倍⽐稀释：吸取50微升待检样品依次加⼊第1纵排孔中，吹打15下后吸取50微升再加⼊第2纵排孔，再吹打15下，吸取25微升加⼊第3纵排孔中，依次类推，直⾄第11纵排孔，吹打混匀后吸50微升后连同吸头⼀起弃去，第12纵排为红细胞对照。
3、加红细胞：加1%红细胞，每孔50微升，然后置于37℃温箱或者室温反应20-40分钟左右，读数即可。
4、读数时，以出现完全凝集的孔作为病毒的⾎凝滴度。
三、4单位抗原1、物品准备：病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移液器及吸头、20ml青瓶及塞⼦、96孔微量⾎凝板2、测定病毒滴度：⾎凝，假设测得的⾎凝滴度为2的8次⽅，则四单位病毒的稀释倍数为2的6次⽅（2的8次⽅除以4），即64倍稀释。
3、计算抗原⽤量根据所需的四单位抗原的总量来确定抗原液的⽤量。
⽐如，需四单位抗原总量为20ml，则利⽤公式：抗原原液*64（稀释倍数）=20ml，求出抗原原液的体积为0.312ml，需要PBS缓冲液的体积约19.7ml，根据计算的结果配置即可。
4、取PBS缓冲液19.7ml，加⼊20ml的⼩青瓶中，取0.312ml的病毒抗原液，加⼊到缓冲液中，盖上塞⼦，充分混匀，最好⽤涡旋仪混匀，⾄此，四单位抗原配制完成。
血凝仪操作规程
血凝仪操作规程血凝仪操作规程一、前言：血凝仪是一种用于检测血液凝血功能的仪器，广泛应用于临床诊断和监测血栓疾病等领域。
正确操作血凝仪是保证测试结果准确可靠的重要环节。
本操作规程旨在规范血凝仪的使用，提高检测的准确性和科学性。
二、准备工作：1. 检查血凝仪的运行状态，确认仪器无故障。
2. 准备试剂及标准品，检查试剂的有效期和保存条件。
3. 准备好所需的仪器和耗材。
三、操作流程：1. 打开仪器电源，启动血凝仪，等待仪器初始化完成。
2. 根据实验目的，在仪器界面上选择相应的实验方法和测试参数。
3. 取出一张试剂盒，并将试剂盒放入试剂槽中，确保试剂接触到指定的探测位置。
4. 根据试剂盒的要求，将待测试的样本加入试剂中，并按照仪器的要求进行试剂搅拌、温育等处理。
5. 在仪器界面上设置好样本的信息，包括样本编号、浓度等。
6. 将样本加入血凝仪，按照仪器要求设置好测试时间。
7. 等待测试完成后，观察结果，并将结果记录下来。
8. 根据需要，可以进行数据分析和存档等后续处理。
四、注意事项：1. 操作前应仔细阅读仪器和试剂的说明书，了解具体操作步骤和注意事项。
2. 检查仪器的状态和试剂的有效期，确保其符合要求。
3. 严格按照试剂盒的要求和仪器的参数进行操作，避免误操作对结果造成影响。
4. 注意仪器的清洁和维护，定期进行润滑和验证，确保仪器的正常运行。
5. 准确记录样本信息和测试结果，确保数据的有效性和可追溯性。
6. 对于异常结果要及时解释和分析，避免误判。
7. 注意个人防护，避免接触有毒有害物质。
五、故障处理：1. 如遇到仪器故障或试剂异常，应立即停止测试，并进行故障排查或试剂更换。
2. 如遇到测试结果异常，应及时检查操作是否正确并进行结果分析。
3. 如仪器长时间无法恢复正常状态或试剂失效，应及时通知技术支持或更换试剂。
六、仪器维护：1. 根据仪器的使用频率和要求，定期进行内部和外部的清洁。
2. 定期进行润滑和验证，确保血凝仪的稳定性和准确性。
检验科凝血检测标准操作规程
检验科凝血检测标准操作规程1.【目的】为保障检验科CA-1500血凝分析仪的安全正常运转，特制作本规程。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】1．标本类型1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）,只能冻融1次，在37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。
抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
2.患者准备早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
3.容器、添加剂类型3.8％枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
4.仪器设备1. 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪2. 仪器厂家:日本Sysmex公司3. 仪器型号:Sysmex CA-15004. 仪器技术参数:4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时4.2 试剂位:36个,具冷藏功能。
4.3 样本位:50个,可自动连续添加。
5. 仪器校准程序:5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂批号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)5.实验试剂德国Dade Behring Marburg 公司的D-Dimer测定试剂（60人份/套）,未开封试剂2～8℃贮存到说明书上有效期，开封试剂2～8℃保存不超过5天。
4.【测定原理】1.凝固法（散射光加百分终点法）：将血液凝固过程中的混浊度变化转换成散射光的变化后进行检测。
包括PT、APTT、FIB、TT及血浆凝血因子的测定。
2.发色底物法：激活剂激活相应待测标本中的相应酶原，使其转变为相应的酶，后者使相应的底物发生显色反应，显色的程度与被测物浓度成正相关，通过与标准曲线比较，可测出标本中待测物的相对含量，如ATⅢ的测定。
(完整版)血凝试验操作程序
血凝试验操作程序用法与判定一、稀释1、1×PBS溶液的配置：NaCl 8克。
NaH2PO4·2H2O 1.561克，Na2HPO4·12H2O 3.582克，加水至1000ml，调ph值至7.2。
2、稀释：抗原和血清开启后，按每瓶标签上所示的产品规格用1ml或2ml PBS溶液充分溶解，备用。
二、血凝（HA）试验操作方法1、在V型微量反应板中，每孔加0.25ml PBS；2、在1孔中加入0.025ml抗原，依次作0.025ml的对倍稀释至第11孔；3、每孔加0.25ml PBS；4、每孔加入0.25ml 1%（V/V）鸡红细胞悬液；5、将反应板在振荡器上震荡1—2分钟或轻叩反应板混合反应物。
室温（20—25℃）静置40分钟或2—8℃60分钟，当对照孔的红血细胞呈显著钮扣状时判定结果。
6、结果判定：将反应板倾斜，观察红细胞有无呈泪滴样流淌，完全无泪滴样流淌（100%凝集）的最高稀释倍数为血凝效价。
三、血凝抑制（HI）试验操作方法1、根据HA试验测定的效价，计算配制4单位抗原。
HA效价除以4即为含4单位抗原的稀释倍数。
例如，HA效价为1:256，则4单位抗原的稀释倍数即1:64（256除以4）。
2、反应板中第1—11孔加入0.025ml PBS；3、第1孔加入0.025ml血清；4、在反应板上将血清作0.025ml的4单位抗原，室温下（20—25℃）静置30分钟或2—8℃60分钟。
5、每孔加入0.025ml 1%（V/V）的鸡红细胞悬液，轻晃混匀后，室温（20—25℃）静置30分钟或2—8℃60分钟。
，当对照孔红细胞呈显著钮扣状时判定结果。
四、结果判定以完全抑制4单位抗原的最高血清稀释倍数为该血清的HI 效价。
当阳性对照血清的试验结果符合HI试验的要求，阴性血清小价不高于1:4时，试验方可成立。
备检样品HI效价≤1:4判为阴性；=1:8判为可疑（可疑样品应重检1次，重检效价≥1:8判为阳性，<1:8判为阴性）≥1:16判为阳性。
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血凝项目标准操作规程1．一般注意事项1.1样品采集●静脉抽血；●穿刺要一针见血，避免淤血，气泡，溶血和组织液污染；●如果使用真空采集管，以第二或第三管样品为佳；如果从导管取样，则需用生理盐水冲洗管道，前面5ml血不能使用；●采血后立即与抗凝剂充分混合，尽快送往实验室；●采血量必须准确，如果少于计划量的90%，则不能使用；●不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。
1.2样品处理●使用3.8%或3.2%(W/V)枸橼酸钠溶液作为抗凝剂；●血样与抗凝剂的比例为9：1，如果血球压积﹤20%或﹥55%，则需调整这个比例，方法是：0.00815X血液毫升数X(100-压积)=抗凝剂毫升数；●血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；——采样后60分钟内进行；——离心速度为1000g/10分钟●盛血浆容器应加塞，防止PH改变；●血浆应保存在2-8℃；●血浆存放时间不能太久；●低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。
●与样品接触的所有器材（注射剂，样品管，检测杯等）必须采用塑料袋或硅化玻璃材质。
●全部器材均不得含去污剂或清洗液。
1.3影响测定结果的几种因素●抗凝剂：草酸钠、EDTA、肝素不适于作抗凝剂；●黄疸，脂血，重度溶血和冰冻血浆影响测定结果不准；●使用纤溶药物，如双香豆素，链激酶，尿酶等可使凝固时间延长；●超过治疗试剂量的肝素使凝固时间延长；●FDP增加使凝固时间延长；●某些药物，如口服避孕药，雌激素，天门冬酰胺酶，钠络酮等影响测试结果；●样本采集和处理不当，都会使凝固时间缩短或延长；●妊娠和急性炎症会影响某些测试结果。
1.4干粉试剂及血浆溶解●保证干粉完全溶解；●溶解时，轻轻转动容器，避免剧烈震荡；●确认溶剂种类，一般溶解液包括：蒸馏水/生理盐水/缓冲液/厂家特定溶解液，按说明书选择；复溶后，室温放置5-10分钟后方可使用二．具体项目操作注意事项1.PT凝血酶原时间I. 概述凝血酶原时间(Prothrombin Time)测定用来作为外科手术前对某一凝血因子的评价，以及用于监视抗凝治疗，当进行凝血酶原时间测试时，对于正常结果需有2、3级所有因子。
因此，该实验对因子I、II、V、VII和X的量减少或不足是很灵敏的。
除了因子IX，凝血酶原时间测试对于其它所有因子缺乏是灵敏的，它已被证明在监视抗凝治疗是有效手段。
凝血酶原时间测定也用于因子II、V、VII和X的定量分析(因子分析)。
II.试剂干粉试剂需复溶，液体试剂直接使用，使用前轻轻混合，可使用一些备件如搅拌。
使用期间保持适当的悬浮液状态。
如质控结果在范围之外，或试剂颜色发生变化，可能表明产品变质。
然而，差的性能、结果也可能是由于其他因素包括试验系统引起的。
警告：PT-DS试剂含有叠氮钠，勿服、勿接触皮肤和黏膜。
III. 样本收集3.8%(0.109M)枸橼钠做为抗凝剂。
避免溶血和其他组织液的污染。
样本体积不得少于所需体积的90%。
在3000×g下离心10分钟，如样本在22—24℃下，须在2小时内测定。
有关样本收集和储存的详细资料，请参见NCCLS文件。
IV. 步骤提供材料PT试剂另需材料：①纯化水②合适的计时器③精密移液管：0.1ml和0.2ml④正常和异常质控物，（凝血质控血浆三个水平)PT适合于手工、仪器、光度计和其它凝固的测定方法。
手工方法A：在37℃预热PT试剂；B：加0.1ml血浆到比色杯中，在37℃下预热；C: 用力加0.2ml预热的PT试剂到血浆中凝结形成，并记录时间建议至少使用一正常和一异常对照血浆，每40份病人样品至少一次轮换，逐日测定对照血浆，建议每个实验室应做好室内质控范围。
V. 结果用最近的0.1秒报告每个血浆的凝固时间，所得PT时间结果与正常参考范围值一起列入报告。
(勿报告相对于商业质控血浆凝结时间的病人比值。
质控仅仅是为了保证试验系统的准确性。
)VI. 局限性血凝生物化学包含一系列受许多预试验条件影响的反应。
这些变异性必须被控制，以获得好的结果：样本收集勿延迟血液与抗凝剂的混合；避免样本产生泡沫；用塑料或硅硼酸盐玻璃容器；混浊、溶血、脂血或黄疸的样本，可能会引起错误结果；冷冻和解冻包含残留细胞血浆，会裂解细胞膜而影响结果；急性炎症反应由于纤维蛋白原的升高，会缩短PT结果；红细胞压积在20—55%范围以外，所加抗凝剂需调整比例。
技术：如果血浆暴露到空气中pH将升高；PT工作要求37℃±0.5℃。
经常检查加热部分的温度。
在4—8℃保持的血浆可能会引起冷激活而导致PT缩短；所有的实验器皿必须清洁，没有脏物痕迹；按照仪器供应商的要求，保养仪器。
影响物质：草酸钠，EDTA和肝素不适合做抗凝剂；口服避孕药物、天门冬氨酰胺酶、皮质酮、EDTA、红霉素、酒精、四环素和抗凝剂如肝素和华法令可能引起PT延长。
抗组织胺药、布塔巴比妥、咖啡因、口服避孕药、苯巴比妥、维生素K.可能引起PT缩短。
VII. 期望值PT对正常人评估可获得以下结果平均±2SD范围仪器11.9 11.0—15.0可见光度计12.5 10.7—14.3这些值仅作为一个指导，每个实验室应建立自己的正常参考范围。
试剂、仪器操作、血样收集技术或抗凝剂的改变，都应重新建立新的正常参考范围。
有关性能特征、因子分析精密度等详见英文说明书。
2.APTT测定试剂I. 概述APTT(Activated partial Thromboplastin time)测试广泛应用已有数年，用作外科手术对某些凝结因子的评价，以及监视肝素治疗。
当测定APTT 时，所有内途径因子对于正常结果是必需的。
然而它主要地用于检测2级因子的不足，即因子VIII、IX、XI和XII，以及Fletcher因子(4)。
APTT测试也用于监视肝素治疗，测定结果显示延长0.1单位以上(5)。
此试验也用在因子VIII、IX、XII和Fletcher因子的定量测度(因子分析)。
II. 摘要与原理APTT的延长直接与肝素量的增加成正比。
APTT时间测定就是加入APTT试剂混合物在此37℃孵育3分钟“激活”，再加CACl2计数凝块形成时间。
III. 试剂试剂在2—8℃保存，勿冷冻，开瓶后在2—8℃可稳定30天。
长时间储存后，可能会出现黄色沉淀。
在使用前轻轻混合。
不稳定值、超出质控范围之外的值或产品颜色变化，可能表明试剂变质。
然而其它因素包括试验系统也可能引起这些误差。
IV. 样本收集3.2%(0.105M)或3.8%(0.109M)柠檬酸作抗凝剂，避免溶血和其它组织液体污染。
样本体积不得少于所需体积的90%。
在3000×g离心10分钟，如样本放在22—24℃下，需在2小时内测定。
有关样本收集和储存的详细资料，请参见NCCLS文件。
V. 步骤提供材料：APTT试剂。
另需材料：①美创公司提供的CaCl2(0.025M)，高纯度、高质量；②适当的计时器(秒表和时间表)；③精密移液管：0.1ml；④正常和异常质控，(凝血质控血浆，1、2、3、三个水平)APTT是适用于手工、仪器、光度计和其它凝结测定的方法。
手工方法：A：在37℃预热CACL2(0.025M)；B：加0.1ml测定血浆到比色杯中，在37℃预热；C：加0.1ml预温过的APTT试剂入测定血浆中，混合；D：在37℃下孵育血浆试剂混合物3分钟。
(激活时间)，为了试验的一致性，用同样的激活时间，测定所有血浆；E：用力加0.1ml预热的CACL2，凝结形成，注意凝块形成时间。
用正常、异常质控血浆(如美创公司的质控三个水平1、2、3)与病人血浆结合起来测定。
建议至少用一个正常和一个不正常血浆，至少每测20份病人样本轮换一次。
VI. 结果用最近的0.1秒报告每个血浆的凝结时间，所得APTT时间结果与正常参考范围值一起列入报告。
(勿报告相对于商业质控血浆凝结时间的病人的值。
质控仅仅是为了保证试验系统的准确性。
)VII. 局限性血凝生物化学包含一系列受许多预试验条件影响的反应。
这些变异性必须被控制，以获得好的结果。
样本收集：勿延迟血液与抗凝剂的混合；避免样本产生泡沫；用塑料或硅硼酸盐玻璃容器；混浊的溶血、脂血或黄疸的样本，可能引起错误结果；反复冷冻和解冻血浆，会损伤细胞膜，会影响结果；血胞压积在22—25%范围之外，所加抗凝剂需调整比例；技术：如果血浆暴露到空气中pH值将升高；APTT工作要求37℃±0.5℃，经常检查所有加热部分的温度；所有的试验器皿必须被清洁，没有赃物痕迹；按照仪器供应商的要求，保养仪器。
影响物质：草酸钠，EDTA和肝素不适合作抗凝剂；口服避孕药物，雌激素，怀孕，氧杂萘邻酮类的药物，肝素，天门冬氨酰胺酶和naloxone已有报道报告会影响APTT结果。
VIII. 期望值APTT-LS正常人可获得下面结果：平均±2SD范围仪器28.6 24-38可见光度计26.0 23.4—28.6这些值仅作为一个指导，每个试验室应建立自己的正常参考范围。
试剂、仪器操作、血样收集技术或抗凝剂的改变，都应重新建立新的正常参考范围。
3 .纤维蛋白原采用clauss法，即在待检稀释血浆中加入高浓度的凝血酶，血浆凝固时间与血浆纤维蛋白原浓度成反比。
二、试剂及材料准备1. 冻干牛凝血酶(100NIH Unit/ml)干粉或液体2. 纤维蛋白原参比血浆1.0ml/瓶，3瓶/盒该制剂系人枸橼酸钠抗凝血浆，加入稳定剂和缓冲液后冻干而成。
使用前用蒸馏水溶解，轻轻摇动至完全溶解。
2—8℃存放可以稳定一周，也可-20℃冻存，避免反复冻溶。
3. 咪唑缓冲盐水(pH7.4±0.2)135ml/瓶，1瓶/盒该缓冲液以叠氮钠为防腐剂，叠氮钠如遇酸将产生有毒化合物，因此，含有该剂的容器、试管及丢弃的试剂均应用大量流水冲洗。
此外，亦应避免该试剂在金属管道内沉积。
4. 塑料试管(自备)5. 移液器100μl、200μl(自备)6. 正常及异常质控血浆(自备)7. 双对数坐标纸三、方法(一) 标准曲线的制备1. 稀释的纤维蛋白原参比血浆的制备将已知浓度的纤维蛋白原参比保存浆用咪唑缓冲盐水稀释成1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶40，5个浓度。
2. 每稀释度各取0.2ml、37℃预热5分钟，然后加入室温的凝血酶，记录各稀释度的血浆凝固时间。
每稀释度重复2—3次测定，取平均值。
3. 以各稀释度纤维蛋白原的浓度为纵坐标，对应的血浆凝固时间的平均值为横坐标，在双对数坐标纸上绘制标准曲线，每条标准曲线至少应包括所做的5个稀释度中的连续3个以上的点。
否则结果不予接受，应重新绘制。
(二) 标本的测定1. 标本采集：3.2%或3.8%的枸橼酸钠1∶9抗凝全血，以RCF3000×g离心10分钟，分离血浆待检。