实验四 植物组织中核酸的提取和测定
核酸的提取与鉴定实验报告
核酸的提取与鉴定实验报告一、实验目的1、掌握从生物样本中提取核酸（DNA 或 RNA）的基本原理和方法。
2、学习使用各种试剂和仪器进行核酸提取的操作步骤。
3、了解核酸鉴定的常用方法及其原理。
4、培养实验操作技能和科学研究的严谨态度。
二、实验原理核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），是生物体遗传信息的携带者。
核酸提取的基本原理是利用细胞裂解液将细胞破碎，使核酸释放出来，然后通过一系列的物理和化学方法将核酸与其他细胞成分分离，最后得到纯度较高的核酸样品。
DNA 提取常用的方法有酚氯仿抽提法、盐析法等。
酚氯仿抽提法是利用酚和氯仿的混合液去除蛋白质，然后通过乙醇沉淀得到 DNA。
盐析法是利用高浓度的盐使蛋白质变性沉淀，从而分离出 DNA。
RNA 提取常用的方法有异硫氰酸胍法、Trizol 法等。
Trizol 法是基于异硫氰酸胍和酚的作用，能够有效地裂解细胞并抑制 RNA 酶的活性，从而提取出完整的 RNA。
核酸鉴定的方法主要有紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法等。
紫外分光光度法通过测定核酸在 260nm 和 280nm 处的吸光度值（A260 和 A280）来评估核酸的纯度和浓度。
A260/A280 的比值在 18 20 之间表示 DNA 纯度较高，在 19 21 之间表示 RNA 纯度较高。
琼脂糖凝胶电泳法则是根据核酸分子在电场中的迁移率不同来分离和鉴定核酸，DNA 分子在琼脂糖凝胶中迁移距离与分子量大小成反比，RNA 通常会呈现出 28S、18S 和 5S 三条带。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜的动物组织（如肝脏、肌肉等）或培养的细胞。
大肠杆菌菌液。
2、实验试剂细胞裂解液（含蛋白酶 K）。
酚氯仿混合液（酚：氯仿＝ 1:1）。
无水乙醇、75%乙醇。
3M 醋酸钠（pH 52）。
Trizol 试剂。
异丙醇。
RNA 酶抑制剂。
琼脂糖。
50×TAE 电泳缓冲液。
核酸染料（如 EB 或 GelRed）。
核酸的提取与鉴定实验报告
核酸的提取与鉴定实验报告核酸的提取与鉴定实验报告引言：核酸是生命的基础，它存在于细胞的核内，承载着遗传信息的传递和表达。
在现代生物学研究中，核酸的提取与鉴定是非常重要的实验步骤。
本实验旨在探究核酸提取的方法以及鉴定核酸的质量和纯度。
一、核酸提取方法核酸的提取方法有多种，本实验采用了常用的酚-氯仿法。
首先，将待提取的细胞或组织样品加入细胞裂解液中，通过离心将细胞碎片沉淀下来。
然后，使用酚和氯仿进行提取，酚层中含有核酸和脂质，氯仿层中含有蛋白质。
通过离心将酚层和氯仿层分离，进一步提取纯净的核酸。
二、核酸的鉴定1. 纯度检测核酸的纯度是指核酸溶液中核酸与其他杂质的比例。
常用的纯度检测方法有比色法和光谱法。
本实验中使用了光谱法，即通过测量核酸溶液的吸光度来评估其纯度。
纯度越高，吸光度比值（A260/A280）越接近1.8。
实验结果显示，所提取的核酸样品的纯度在可接受范围内。
2. 浓度测定核酸的浓度是指单位体积核酸溶液中核酸的含量。
浓度测定常用的方法有比色法和荧光法。
本实验中采用了比色法，即通过比较核酸溶液的吸光度与标准曲线的关系来确定核酸的浓度。
实验结果显示，所提取的核酸样品的浓度为Xμg/μl。
3. 碱基组成分析核酸的碱基组成是指核酸中腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）的相对含量。
碱基组成分析可以通过核酸测序技术来完成。
本实验中使用了Sanger测序技术，通过测序结果可以确定所提取核酸的碱基组成。
4. 凝胶电泳分析凝胶电泳是一种常用的核酸分析方法，可以根据核酸的大小和电荷来分离核酸。
本实验中使用琼脂糖凝胶电泳，将提取的核酸样品与DNA分子量标准品一同加载到琼脂糖凝胶槽中，通电分离。
通过观察凝胶上的DNA条带，可以初步判断核酸的大小和纯度。
结论：通过本实验，我们成功提取了核酸样品，并进行了一系列的鉴定实验。
通过纯度检测、浓度测定、碱基组成分析和凝胶电泳分析，我们确定了所提取核酸的质量和纯度。
实验四植物DNA的提取[定稿]
![实验四植物DNA的提取[定稿]](https://img.taocdn.com/s3/m/5de4138468dc5022aaea998fcc22bcd126ff4203.png)
实验四植物DNA的提取[定稿]第一篇：实验四植物DNA的提取[定稿]实验四植物DNA的提取一、实验目的掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法。
采用CTAB法从植物叶片中提取基因组DNA，并进行纯度分析。
二、实验原理1、核酸提取的基本原理核酸是生物有机体中的重要成分，在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。
核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两大类，在真核细胞中，前者主要存在于细胞核中，后者主要存在于细胞质及核仁里。
在制备核酸时，通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，使核蛋白被释放出来。
在浓氯化钠溶液(1～2 mol／L)中，DNA核蛋白的溶解度很大，RNA核蛋白的溶解度很小；而在稀氯化钠溶液(0.14 mol／L)中，DNA核蛋白的溶解度很小，RNA核蛋白的溶解度很大。
因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液将DNA核蛋白和RNA核蛋白从样品中分别抽提出来。
分离得到核蛋白后，需进一步将蛋白等杂质除去，常采用的去除蛋白的方法有3种：①用含异戊醇的氯仿振荡核蛋白溶液，使其乳化，然后离心除去变性蛋白质，此时蛋白质凝胶停留在水相和氯仿相中间，而DNA溶于上层水相。
用两倍体积的无水乙醇溶液将DNA 钠盐沉淀出来。
如果用酸性乙醇或冰乙酸来沉淀，得到的是游离的DNA。
②用十二烷基硫酸钠(SDS)等去污剂使蛋白质变性，与核酸分离，从而从材料中直接提取出DNA。
③用苯酚处理，然后离心分层，DNA溶于上层水相，蛋白变性后则停留在酚层内。
吸出上面水层，加两倍体积的无水乙醇溶液，得到白色纤维状DNA沉淀。
反复使用上述方法多次处理DNA核蛋白溶液，就能将蛋白等杂质较彻底地除去，得到较纯的DNA制品。
为了彻底除去DNA制品中混杂的RNA，可用RNA酶处理。
生物材料中含有的脂肪物质和大部分的多糖，在用盐溶液分离核蛋白和用乙醇或异丙醇分级沉淀时即被除去。
在DNA提取、制备的过程中，核酸极不稳定，许多因素可破坏其完整结构：①化学因素，核酸的结构在pH值4.0～11.0间较稳定，pH值在此范围外就会使核酸变性降解，故制备过程应避免过酸过碱。
实验报告 植物基因组的提取和检测
四川大学实验报告题目：的提取与检测植物基因组DNA一、实验目的1.了解真核生物基因组DNA提取的一般原理；2.掌握基因组DNA提取的方法和步骤。
二、实验原理1.在液氮中对植物组织进行研磨，破碎细胞；2.SDS等离子型表面活性剂能溶解膜蛋白而破坏细胞膜，使核蛋白解聚，从而使DNA游离出来；3.苯酚和氯仿等有机溶剂能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质；4.上清液中加入异丙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE缓冲液中，即得植物基因组DNA溶；5.DNA的琼脂糖凝胶电泳鉴定：带电荷的物质，在电场中的趋向运动称为电泳。
DNA的琼脂糖凝胶电泳可以分离长度为200bp至近50kb的DNA分子。
DNA的迁移率（U）的对数与凝胶浓度（T）之间存在反平行线性关系。
因此，要有效地分离不同大小的DNA片段，选用适当的琼脂糖凝胶浓度是非常重要的。
三、实验材料1.设备移液器，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，1.5ml离心管2.材料植物幼嫩叶片3.试剂（1）细胞提取液：100mmol/L Tris-HCl, pH8.0, 5mmol/L EDTA, 500mmol/L NaCl, 1.25%SDS，1%β-巯基乙醇（去除酚类）（2）氯仿:异戊醇（24:1）（3）其它试剂：液氮、无水乙醇、 TE缓冲液、异丙醇、洗涤缓冲液四、方法和步骤0C水浴（金属浴）中加热备用；μ500L细胞提取液于651、取2、研钵用液氮预冷，新鲜植物叶片（自来水清洗，蒸馏水冲洗干），去除叶脉，剪成细条状，置于研钵中研磨成粉末状（越细越好）；0C预热的细胞提取液中，迅速摇匀，65500、取0.1g粉末（大约两勺半）转移至μL3水浴（金属浴）中保温30min，10min左右温和颠倒混匀一次；第 1 页四川大学实验报告题目：的提取与检测植物基因组DNA4、从水浴（金属浴）中取出离心管，加等体积(约500μL)氯仿/异戊醇（24:1），室温下10000rpm×10min；5.将上清液转移到另一1.5mL离心管中（使用的枪头用剪刀剪成大口），加等2/3体积的异丙醇，轻轻混匀，静置1min,使核酸沉淀下来，12000r/min× 5min，倒掉上清液；6、加入1ml洗涤缓冲液，轻轻转动离心管使核酸沉淀悬浮起来，静置5min,12000r/min× 2min,去除上清液，再加入1ml洗涤缓冲液，轻轻转动离心管使核酸沉淀悬浮起来，放置5min;7、12000r/min× 10min后，倒去上清液，用小滤纸条将管壁上多余的水分吸掉，室温静置干燥；8、干燥后，加入20μLTE缓冲液，溶解DNA，做好标记；9、取5μL溶液，0.7%琼脂糖凝胶电泳检测DNA大小和质量。
核酸的提取与鉴定实验报告
核酸的提取与鉴定实验报告
实验报告：核酸的提取与鉴定
I. 实验目的：
通过实验学习核酸提取和鉴定的步骤，掌握核酸提取实验技能，初步了解PCR技术及其在分子生物学中的应用。
II. 实验原理：
DNA分子在水性条件下具有极强的极性，由此，在化学性质上只要是极性且亲水性的溶剂都能迅速膨胀和破裂DNA分子的双链
结构，并溶解其中的碱基、核苷酸、脱氧糖等。
利用这一原理，
我们可以用溶液来提取含有核酸的样品，然后通过紫外吸光度计
检测该提取物中核酸的含量。
此外，PCR技术是一种被广泛运用
于DNA扩增的技术，其主要原理是通过DNA聚合酶扩增DNA
的特定片段。
III. 实验步骤及结果：
1. 核酸提取：将实验样品加入细胞破解液并混匀，离心后取上
清液，加入等体积的异丙醇，轻轻振荡混合并离心15分钟，然后
弃上清液，加入70%无水乙醇并离心，倒掉液体后用氧气吹干。
最终的核酸提取物的溶解液浑浊且无法肉眼辨认样品。
2. 核酸鉴定：将已经提取的样品分别用紫外吸光度计测量其光密度，结果表明与对照的D.W相比，样品中的核酸具有极高的光密度值，证明核酸提取步骤成功，核酸鉴定实验成功。
IV. 结论：
通过本次实验，我们成功地提取了样品中的核酸，并对提取后的核酸进行了鉴定，证明提取物中含有大量的核酸，表明核酸提取和鉴定实验成功，也为分子生物学的研究提供了基础。
核酸提取试剂实验报告
一、实验目的1. 熟悉核酸提取试剂的使用方法。
2. 掌握核酸提取的原理和操作步骤。
3. 了解不同核酸提取试剂的优缺点。
二、实验原理核酸是生物体内重要的生物大分子，包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA主要存在于细胞核中，负责储存遗传信息；RNA主要存在于细胞质中，参与蛋白质的合成。
核酸提取是将核酸从生物样本中分离出来的过程，常用的提取方法有酚-氯仿法、磁珠法等。
本实验采用酚-氯仿法提取DNA，该方法利用酚和氯仿的变性作用，将蛋白质与DNA 分离，然后通过离心、沉淀等步骤，获得纯化的DNA。
三、实验材料1. 样本：细菌、真菌、植物、动物组织等。
2. 试剂：酚-氯仿、氯仿、无水乙醇、NaCl溶液、TE缓冲液等。
3. 仪器：离心机、电子天平、移液器、离心管等。
四、实验步骤1. 样本处理：将样本剪碎，加入适量TE缓冲液，充分研磨，制成匀浆。
2. 混合：将匀浆液加入等体积的酚-氯仿，充分振荡，静置10分钟。
3. 离心：将混合液以12,000 rpm离心10分钟，取上清液。
4. 沉淀：在上清液中加入等体积的氯仿，充分振荡，静置10分钟。
5. 离心：将混合液以12,000 rpm离心10分钟，取上清液。
6. 沉淀：在上清液中加入1/10体积的3mol/L NaCl溶液和2.5倍体积的无水乙醇，充分混匀，静置2小时。
7. 离心：将混合液以12,000 rpm离心10分钟，弃上清液。
8. 洗涤：用75%乙醇洗涤沉淀，以12,000 rpm离心5分钟，弃上清液。
9. 洗涤：用无水乙醇洗涤沉淀，以12,000 rpm离心5分钟，弃上清液。
10. 溶解：将沉淀溶于适量TE缓冲液，混匀，即为提取的DNA。
五、实验结果与分析1. 实验结果：通过酚-氯仿法提取的DNA呈白色絮状沉淀，溶解于TE缓冲液后，在紫外分光光度计下，A260/A280比值在1.8-2.0之间，表明DNA纯度较高。
2. 结果分析：实验结果表明，酚-氯仿法能够有效提取DNA，且提取的DNA纯度较高。
实验四 肝组织中核酸的提取和鉴定
实验四肝组织中核酸的提取和鉴定一、实验目的：1.了解核酸提取的主要原理和方法。
2.掌握核酸提取实验操作技能。
3.掌握核酸鉴定实验操作技能。
二、实验原理：核酸提取是生物学中的常用操作，其中DNA 和 RNA 分别用于分子生物学和生物信息学研究中。
肝作为重要的代谢器官，其中含有大量的核酸。
肝组织中核酸的提取主要步骤包括细胞破碎、蛋白质去除、核酸溶解和纯化等。
随着生物技术的不断发展，目前常用的核酸提取方法主要包括酚-氯仿法、CTAB 法、盐法等。
本实验将采用CTAB 法提取肝组织中的总核酸。
酚-氯仿法：酚和氯仿在一般情况下是不混溶的，但当二者混合时，由于酚的分子大小和分子内极性变化，使酚分子具有两种不同的极性，可以在解理体系中表现出较强的亲和性，因此酚能沉淀核酸和蛋白质复合物，而使DNA、RNA清洗得更纯。
氯仿是羰基、亚胺、脂肪类等物质的溶剂，可以分解蛋白质，同时它又是疏水性溶剂，与酚结合在一起可以减少酚水相中环氧树脂的含量。
CTAB法：CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）是一种阳离子型的表面活性剂，由于其可与核酸形成稳定的复合物，在NaCl的介质中能选择性分离出核酸。
CTAB 的选择性可以用于除去单细胞内存在的大量DNA。
(1)样品制备将待测组织取一定的量(一般为1g)，切成小块，加入离心管中，加入等量体积的CTAB 提取缓冲液(2×CTABBuffer)，加入必要量的β- 巯基乙醇后混匀，用RNA酶水解剂处理，使核酸不经RNase酶处理即不能降解，然后将其混匀，放入水浴中温育30min。
温育完后，加入一定量的氯仿和异戊醇，混匀后离心。
在上层水相与下层有机相之间，出现一层白色的粘稠界面，界面中夹杂有蛋白质和DNA。
吸取上层水相，在里面加入等量异丙醇，轻轻地倾斜离心管，使异丙醇与水相分层，将上层异丙醇吸出后，加入90%的乙醇混匀，瞬间形成白色凝胶状物，成为所提取的DNA。
将其用75%酒精洗涤数次，直至酒精中没有崩解压缩改变形状的物质，使其干燥。
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告
植物组织遗传物质的提取与检测实验报告实验目的：了解植物组织遗传物质的提取方法和常用的检测方法。
实验原理：1. 植物组织遗传物质的提取方法：（1）CTAB法：该方法可用于提取植物组织中的DNA，具有简便快捷、价格低廉、纯度高、适用于大量样品等优点。
（2）酚/氯仿法：该方法主要用于提取植物种子和干燥植物材料中的DNA。
（3）柱层析法：该方法可用于DNA的纯化和寡核苷酸的制备。
2. 常用的植物组织遗传物质检测方法：（1）凝胶电泳法：该方法可用于检测DNA和RNA，是目前最常用的分离和检测遗传物质的方法之一。
（2）PCR法：该方法可用于扩增某一片段的DNA，具有灵敏度高、特异性强、适用于少量或低浓度的样品等优点。
（3）Southern blotting法：该方法可用于检测某一特定基因的存在与否，并可以估算基因的拷贝数和分析结构等。
实验材料：PCR仪、琼脂糖凝胶、DNA提取试剂盒、电泳仪、紫外线照相仪、PCR试剂盒等。
实验步骤：1. 提取DNA：（1）取一片新鲜的植物叶片放入研钵中，加入适量的CTAB提取液，进行研磨。
（2）将研磨好的样品转移到离心管中，进行蛋白质酶处理、乙醇沉淀等步骤。
（3）使用紫外线照相仪测定DNA浓度和质量。
2. 准备琼脂糖凝胶：（1）按照琼脂糖凝胶的要求调配好琼脂糖缓冲液。
（2）将琼脂糖缓冲液煮沸，将琼脂糖加入其中，搅拌至溶解。
（3）将混合物冷却至约60℃，倒入凝胶板中，在其表层形成凝胶。
3. 进行电泳分析：（1）将DNA样品通过电泳进行分离。
（2）将分离好的DNA样品转移到凝胶板电泳槽中，通电分离。
（3）运用特殊技术进行荧光探针和显色剂的染色，测定目标位点的大小和数量等信息。
实验结果：通过琼脂糖凝胶电泳分析，可以检测到植物叶片中的DNA条带（大小约为7kb），说明提取到了植物组织中的遗传物质。
实验结论：通过本实验可以了解植物组织遗传物质的提取方法和常用的检测方法，掌握凝胶电泳、PCR扩增等技术的操作流程，此外还应注意实验的安全和环保问题，避免对环境产生负面影响。
植物基因组的提取实验报告
植物基因组的提取实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握从植物组织中提取高质量基因组 DNA 的方法，为后续的分子生物学实验如 PCR 扩增、基因克隆和测序等提供纯净的DNA 模板。
二、实验原理植物细胞包含细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核等结构，基因组DNA 存在于细胞核中。
提取植物基因组 DNA 的基本原理是通过物理和化学方法破碎细胞，使 DNA 释放出来，然后去除蛋白质、多糖、多酚等杂质，最后通过沉淀和洗涤获得纯净的 DNA。
在实验中，通常使用液氮研磨植物组织来破碎细胞壁，然后使用裂解液（如 CTAB 或 SDS 等）使细胞膜破裂，释放出 DNA 和其他细胞成分。
接着，加入蛋白酶 K 消化蛋白质，用酚/氯仿抽提去除蛋白质，再用乙醇或异丙醇沉淀DNA，最后用70%乙醇洗涤去除盐离子等杂质。
三、实验材料与试剂（一）实验材料新鲜的植物叶片（如菠菜、豌豆等）（二）实验试剂1、 CTAB 提取缓冲液（2% CTAB，14 M NaCl，20 mM EDTA，100 mM TrisHCl pH 80，02% β巯基乙醇）2、氯仿/异戊醇（24:1）3、异丙醇4、 70%乙醇5、 TE 缓冲液（10 mM TrisHCl pH 80，1 mM EDTA）6、蛋白酶 K（20 mg/ml）（三）实验仪器1、研钵和研杵2、离心机3、移液器4、恒温水浴锅5、紫外分光光度计6、电泳仪和琼脂糖凝胶四、实验步骤（一）材料预处理选取新鲜、健康的植物叶片，用蒸馏水洗净，吸干表面水分，剪成小块备用。
（二）细胞破碎与 DNA 释放1、在研钵中加入适量液氮，将预处理好的植物叶片迅速放入研钵中，研磨成粉末状。
2、将研磨好的粉末迅速转移至预冷的离心管中，加入预热至 65℃的 CTAB 提取缓冲液，轻轻颠倒混匀，65℃水浴保温 30 60 分钟，期间每隔 10 15 分钟轻轻颠倒混匀一次。
（三）去除蛋白质和杂质1、加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），轻轻颠倒混匀 10 15 分钟，使其充分乳化。
生化 实验四 植物DNA的提取和鉴定
实验四 植物DNA的提取与鉴定
实验原理
真核生物的DNA与组蛋白结合，以 DNA核蛋白的形式存在于细胞核内。
在提取DNA时，通过研磨破坏细胞壁 和细胞膜，释放出DNA核蛋白。
实验原理
在1.4 mol/L NaCl中，DNA核蛋白 的溶解度大，RNA核蛋白的溶解度 小。
在0.14 mol/L NaCl中，DNA核蛋白 溶解度小，RNA核蛋白溶解度大。
液氮：研磨 氯仿-异戊醇：蛋白质变性 异丙醇：沉淀DNA 70%乙醇：脱盐
TE缓冲液
10 mmol/L Tris-HCl （pH7.4） 维持弱碱性
1.0 mmol/L EDTA 抑制DNA酶活性
思考题
本实验中CTAB、EDTA、巯基乙醇 各有什么作用？ 吸取样品、抽提时应注意什么？为 什么？ 在提取DNA时，有哪些方法可以除 去蛋白质？
试剂
CTAB提取液
2.0% CTAB （十六烷基三甲基溴化 铵） 1.4 mol/L NaCl 20 mmol/L EDTA 100 mmol/L Tris-HCL（pH8.0） 0.2% 巯基乙醇
CTAB
CTAB是阳离子去污剂,能使蛋白质变 性，还能与核酸形成特异的核酸CTAB复合物。
核酸-CTAB复合物可溶于≥0.7 mol/L NaCl的高盐缓冲液。
③酶的作用：DNA酶降解DNA分子。
紫外光吸收法鉴定DNA纯度和浓度
核酸的紫外吸收260 nm,蛋白质280 nm DNA的A260/A280约1.8，RNA的约2.0 50 ug/mL DNA溶液，A260 = 1.0 40 ug/mL RNA溶液，A260 = 1.0
实验步骤
10 mL CTAB提取缓冲液加入50 mL 离心管 中，65℃水浴中预热。 50-60 g植物叶片，置于预冷的研钵中，倒入 液氮，充分研磨10 分钟。（全班共用） 每组取约2 g叶片粉末，加入预热的CTAB提 取缓冲液中，轻轻混匀，65℃保温30分钟。 加10 mL氯仿-异戊醇，振荡2-3分钟。 5000 rpm离心5分钟。
植物dna提取实验报告
植物dna提取实验报告植物DNA提取实验报告引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体内的遗传物质，植物DNA提取实验是一种常见的实验方法，旨在从植物细胞中提取纯净的DNA样本。
本文将介绍植物DNA提取实验的步骤、原理和结果分析。
实验步骤1. 样本准备：选择一种植物作为实验对象，如洋葱。
将洋葱切成小块，放入离心管中备用。
2. 细胞破碎：将洋葱块加入研钵中，加入适量的提取缓冲液（含有盐和洗涤剂），用研钵和研杵将洋葱块研磨成细胞浆。
3. 过滤：将细胞浆倒入筛网中，用玻璃棒轻轻压榨，使细胞浆通过筛网，滤掉固体残渣。
4. 沉淀DNA：将过滤后的细胞浆转移到离心管中，加入冷乙醇，轻轻摇晃离心管，使DNA沉淀出来。
5. 分离DNA：使用微量移液器将DNA沉淀物转移到干燥的离心管中，加入去离子水溶解DNA。
6. 纯化DNA：使用DNA纯化试剂盒，按照说明书进行纯化步骤，去除杂质。
实验原理植物DNA提取实验的原理基于细胞破碎、DNA沉淀和纯化的过程。
首先，细胞破碎步骤使用提取缓冲液中的洗涤剂和盐的作用，破坏细胞膜和核膜，释放出细胞内的DNA。
接着，通过过滤和离心的方式，将细胞浆中的固体残渣和蛋白质去除，使DNA沉淀出来。
最后，通过纯化试剂盒中的化学试剂，去除杂质，得到纯净的DNA样本。
结果分析实验结束后，可以通过多种方式对提取的DNA进行分析。
常用的方法包括凝胶电泳、PCR扩增和测序等。
通过凝胶电泳，可以观察到DNA的带状图谱，判断DNA的大小和纯度。
PCR扩增可以使用特定引物对DNA进行扩增，进一步验证提取的DNA是否可用于后续实验。
测序则可以获得DNA的序列信息，对植物基因组进行研究。
实验注意事项1. 实验器材的消毒和无菌操作十分重要，以避免外源性DNA污染。
2. 实验过程中，尽量避免DNA的降解，注意保存条件和时间。
3. 实验中使用的试剂和溶液要严格按照说明书操作，避免误操作导致实验失败。
4. 实验室操作时要注意安全，佩戴实验手套和护目镜，避免实验物品对身体造成伤害。
棉花核酸提取实验报告
一、实验目的1. 掌握棉花组织中核酸的提取方法。
2. 鉴定提取的核酸成分，包括DNA和RNA。
二、实验原理核酸是生物细胞中携带遗传信息的物质，包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
DNA主要存在于细胞核中，RNA主要存在于细胞质中。
本实验通过提取棉花组织中的核酸，鉴定其成分，为后续的分子生物学研究提供基础。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：棉花叶片、无水乙醇、氯化钠、苯酚、氯仿、异丙醇、琼脂糖凝胶、DNA Marker、电泳仪、紫外可见分光光度计等。
2. 仪器：高速离心机、恒温水浴锅、电子天平、移液器、玻璃棒、离心管、微量移液器等。
四、实验步骤1. 棉花叶片处理取新鲜棉花叶片，剪成小块，称取0.5g，置于离心管中。
2. 液氮研磨加入液氮，将棉花叶片研磨成粉末。
3. 加入试剂向离心管中加入1ml的盐酸（1M），涡旋混匀，室温放置30分钟。
4. 高速离心将离心管置于高速离心机中，以12,000 rpm离心10分钟。
5. 移取上清液将上清液移至新的离心管中，加入等体积的苯酚/氯仿/异丙醇（25:24:1）混合液，涡旋混匀，室温放置10分钟。
6. 高速离心将离心管置于高速离心机中，以12,000 rpm离心10分钟。
7. 移取上清液将上清液移至新的离心管中，加入等体积的95%乙醇，混匀，室温放置2小时。
8. 高速离心将离心管置于高速离心机中，以12,000 rpm离心10分钟。
9. 洗涤沉淀弃去上清液，加入1ml的70%乙醇，涡旋混匀，室温放置5分钟。
10. 高速离心将离心管置于高速离心机中，以7,500 rpm离心5分钟。
11. 弃去上清液，将沉淀干燥。
12. 溶解沉淀将沉淀加入适量的TE缓冲液（10mM Tris-HCl，pH 8.0，1mM EDTA），涡旋混匀，室温放置30分钟。
13. 紫外可见分光光度计检测取适量的核酸溶液，在260nm和280nm波长下测定吸光度，计算DNA和RNA的浓度。
植物和动物的核酸dna和rna提取方法 -回复
植物和动物的核酸dna和rna提取方法-回复植物和动物的核酸DNA和RNA提取方法DNA和RNA是生物体内的重要遗传物质，它们的提取是许多生物学研究和实验的基础步骤。
本文将介绍植物和动物的核酸DNA和RNA提取方法，分别从样本选择、细胞破碎、核酸稳定性、纯化和质量控制等方面进行讲解。
第一部分：样本选择和预处理在进行核酸提取之前，选择适宜的样本对提取结果的质量至关重要。
在植物中，可以选取新鲜的叶子、茎或根部组织作为样品。
而在动物中，可以选择血液、肌肉、皮肤或体液样本。
确保样本新鲜，避免冷冻和解冻的过程。
样本收集后，需要进行预处理。
植物中的细胞壁和动物中的胞质膜都是阻碍核酸提取的障碍物。
因此，我们需要使用合适的破碎方法来破坏细胞壁或细胞膜，以释放核酸。
第二部分：细胞破碎与核酸稳定性细胞破碎是核酸提取的关键步骤。
对于植物样本，可以使用制冷液氮或制冷液氮研钵的方法将样本粉碎成粉末。
对于较硬的植物组织，可以使用研钵和研钉的方法进行研磨。
对于动物样本，可以使用刀片或搅拌刀等工具对样本进行破碎。
细胞破碎后，需要将核酸稳定在提取过程中。
核酸在体内容易受到核酸酶的降解。
为了避免核酸的降解，可以加入稳定剂如乙二醇或砷酸盐。
这些稳定剂可以离心沉淀，将核酸包裹在沉淀中，使其在提取过程中不受到酶的攻击。
第三部分：核酸纯化核酸稳定后，需要进行核酸纯化来去除其他杂质。
核酸纯化方法有多种，其中最常见的是酚-氯仿法和硅胶柱法。
酚-氯仿法通过去除脂质和蛋白质来纯化核酸。
首先，将核酸溶液加入酚-氯仿混合液中，使核酸、脂质和蛋白质分成两个相。
然后，将上层的核酸相取出，加入异丙醇沉淀。
最后，将沉淀洗涤并以适当的缓冲液使核酸溶解。
硅胶柱法是一种更精细的核酸纯化方法。
该方法使用硅胶柱或膜结合物来吸附核酸。
核酸样品通过柱子时，核酸被硅胶吸附，而不纯的杂质则被洗脱。
最后，核酸通过洗脱缓冲液离开柱子。
第四部分：核酸质量控制在核酸提取的最后阶段，需要对核酸的纯度和质量进行检查。
试验四肝组织中核酸的提取和鉴定
实验四 肝组织中核酸的提取和鉴定【目的】验证核酸的三大组成成分。
熟悉组织中核酸的提取与鉴定的基本操作方法。
【原理】动物组织细胞中的核糖核酸（RNA ）与脱氧核糖核酸（DNA ）大部分与蛋白质结合而形成核蛋白。
被三氯醋酸沉淀的核蛋白，先用95%的乙醇加热去除附着在沉淀上的脂类杂质，再用1.7mol/L NaCl 溶液提取出核酸的钠盐，然后加入乙醇即可使核酸钠盐沉淀析出。
RNA 与DNA 均可被硫酸水解产生磷酸、含氮碱基(嘌呤与嘧啶)及戊糖（RNA 为核糖，DNA 为脱氧核糖）。
此三类物质分别可按照下述原理鉴定。
1.磷酸 磷酸与钼酸铵试剂作用生成黄色磷钼酸，磷钼酸中的钼在有还原剂（硫酸亚铁）存在时可被还原成蓝色的钼蓝。
根据此呈色反应即可鉴定磷酸的存在。
2.嘌呤碱 根据嘌呤碱能与硝酸银产生灰褐色的絮状嘌呤银化合物而鉴定。
3.戊糖 根据核糖经浓盐酸或浓硫酸作用则生成糠醛，后者能与3，5二羟甲苯缩合而形成绿色化合物而鉴定。
CHOC H C H C H CH 2OHOH OH OH OCHOOH CH 3COCH 3OCH 3OH-H 2O核糖3，5-二羟甲苯糠醛绿色化合物脱氧核糖在浓酸中生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，它和二苯胺作用生成蓝色化合物。
CHO C H C H C CH 2OHH H O -H 2O脱氧核糖蓝色化合物CHO C H C H C H 2OHH OH OH ω-羟基-γ-酮基戊醛【器材】剪刀、镊子、玻棒、滤纸、试管、试管架、蒸发皿、匀浆器、离心机、沸水浴箱。
【试剂 1.生理盐水。
2. 0.12 mol/L三氯醋酸溶液。
3. 95% 乙醇。
4. 10% NaCl溶液NaCl 10g溶于蒸馏水中，加至100ml。
5. 0.92 mol/L H2SO4取浓H2SO4（比重1.84，含量98%）5ml加入蒸馏水中，加水至100ml 。
6. 钼酸铵试剂钼酸铵3g，溶于70ml蒸馏水中，逐渐加入浓 H2SO4 14ml ，冷却后再加至100ml，混匀备用。
核酸的提取实验报告
核酸的提取实验报告核酸的提取实验报告引言：核酸是生物体内的一类重要生物大分子，包括DNA和RNA。
通过提取核酸，可以进一步研究生物体的遗传信息、进化历程以及相关疾病的发生机制。
本实验旨在探究核酸的提取方法及其应用。
一、实验材料和方法1. 实验材料：- 植物样本（如草莓、洋葱等）- 细胞裂解液- 蛋白酶K- 乙酸酒精- 筛网- 乙醇- 无水乙醚2. 实验步骤：- 步骤一：将植物样本切碎并加入细胞裂解液中，用玻璃棒搅拌均匀。
- 步骤二：加入适量的蛋白酶K，使细胞膜和核膜溶解，释放核酸。
- 步骤三：将溶液倒入筛网中，用橡胶球挤压，使细胞碎片通过筛网，核酸留在筛网上。
- 步骤四：将筛网放入含有乙酸酒精的试管中，用乙酸酒精洗涤筛网，使核酸与乙酸酒精结合。
- 步骤五：将筛网取出，放入含有乙醇的试管中，用乙醇洗涤筛网，使核酸与乙醇结合形成沉淀。
- 步骤六：将筛网取出，用无水乙醚洗涤筛网，去除残留的乙醇。
- 步骤七：将筛网放入干燥器中，使核酸完全干燥。
- 步骤八：用无水乙醚溶解干燥的核酸，得到核酸提取物。
二、实验结果与讨论通过上述实验步骤，我们成功提取到了核酸。
核酸提取物的浓度和纯度可以通过比色法或荧光法进行测定。
此外，提取的核酸还可以通过电泳分析，观察其片段大小和纯度。
核酸提取实验的关键步骤是细胞裂解和核酸分离。
在细胞裂解液中加入蛋白酶K可以降解细胞膜和核膜，释放核酸。
筛网的使用可以分离细胞碎片和核酸，使核酸留在筛网上。
乙酸酒精和乙醇的洗涤则可以去除杂质，提高核酸的纯度。
在实验过程中，需要注意的是避免核酸受到外界污染。
实验器具和试剂应保持洁净，操作过程中要尽量避免接触皮肤和口腔，以防止外源性核酸的污染。
核酸的提取不仅在科研领域具有重要意义，还在医学诊断和法医学等领域有广泛应用。
通过提取人体样本中的核酸，可以进行基因检测、疾病诊断和遗传学研究等。
核酸提取技术的不断改进和创新，为生物医学领域的发展提供了重要支持。
核酸的提取技术实验报告
一、实验目的1. 熟悉核酸提取的基本原理和操作步骤。
2. 掌握使用酚/氯仿法提取动物组织中的DNA。
3. 了解DNA提取的纯度和质量检测方法。
二、实验原理核酸（DNA和RNA）是生物体内的重要遗传物质，广泛存在于各种生物细胞中。
核酸提取技术是分子生物学实验的基础，对于基因克隆、基因表达、基因突变等研究具有重要意义。
本实验采用酚/氯仿法提取动物组织中的DNA，通过一系列物理和化学方法使细胞裂解，释放DNA，并最终获得纯化DNA。
三、实验材料与试剂1. 动物组织（如鸡肝、鸡血等）2. 10×TE缓冲液（pH 8.0）3. 2M NaCl溶液4. 95%乙醇5. 70%乙醇6. 酚/氯仿混合液（酚：氯仿=1:1）7. 3M醋酸钠溶液（pH 5.2）8. Tris-HCl缓冲液（pH 8.0）9. 0.1M NaCl溶液10. 氯化钠11. 无水乙醇12. 3M醋酸钠溶液（pH 5.2）13. 1×TE缓冲液（pH 8.0）14. 硅胶柱15. 离心机16. 电子天平17. 移液器18. 烧杯19. 试管20. 玻璃棒21. 紫外分光光度计四、实验步骤1. 准备样品：称取约0.5g动物组织，置于1.5ml离心管中，加入1ml 10×TE缓冲液，使用玻璃棒充分研磨，使组织完全破碎。
2. 加入酚/氯仿混合液：向上述离心管中加入等体积的酚/氯仿混合液，充分混匀，静置5分钟。
3. 分离水相和有机相：将混合液转移至另一离心管中，加入等体积的3M醋酸钠溶液（pH 5.2），充分混匀，静置5分钟。
将离心管置于离心机中，以12,000r/min离心5分钟。
4. 提取DNA：将上层水相转移至另一离心管中，加入等体积的95%乙醇，混匀，静置5分钟。
将离心管置于离心机中，以12,000r/min离心5分钟。
5. 洗涤DNA：弃去上清液，加入1ml 70%乙醇，混匀，静置5分钟。
将离心管置于离心机中，以12,000r/min离心5分钟。
实验四植物组织中核酸的提取和测定
实验四植物组织中核酸的提取和测定一、实验目的1.掌握从植物组织中提取核酸的方法。
2.掌握RNA、DNA 的定性鉴定方法。
二、实验原理用冰冷的稀三氯乙酸或稀高氯乙酸溶液在低温下抽提植物组织匀浆，以除去酸溶性小分子物质，再用有机溶剂，如乙醇、乙醚等抽提，去掉脂溶性的磷脂等物质。
最后用浓盐溶液(10％氯化钠溶液)和／L 高氯酸(70℃)分别提取DNA 和RNA，再进行定性鉴定。
由于核糖和脱氧核糖有特殊的颜色反应，经显色后所呈现的颜色深浅在一定范围内和样品中所含的核糖和脱氧核糖的量成正比，因此可用此法来定性、定量测定核酸。
1.核糖的测定糠醛，后者再与3，5－二羟甲苯作用产生绿色物质。
测定核糖的常用方法是苔黑酚(即3，5－二羟甲苯法(Orcinol 反应))。
当含有核糖的RNA 与浓盐酸及3，5－二羟甲苯在沸水浴中加热10～20分钟后，有绿色物产生，这是因为RNA 脱嘌呤后的核糖与酸作用后生成2.氧核糖的测定物质。
测定脱氧核糖的常用方法是二苯胺法。
含有脱氧核糖的DNA 和二苯胺在沸水浴中共沸10分钟后，产生蓝色。
这是因为DNA 嘌呤核苷酸上的脱氧核糖与酸生成ω－羟基－6－酮基戊醛，它再和二苯胺作用产生蓝色此法易受多种糖类及其衍生物和蛋白质的干扰。
上述两种定糖的方法准确性较差，但快速、简便，能鉴别DNA 与RNA，是鉴定核酸、核苷酸的常用方法。
三、仪器、原料与试剂仪器：恒温水浴锅、离心机、吸管、量筒、电炉、布氏漏斗装置、烧杯、剪刀。
原料：新鲜菜花(花椰菜)试剂：1. 95％乙醇：600mL2. 丙酮：400mL3. 5％高氯酸溶液：200 mL4. L 高氯酸溶液：200mL5. 10％氯化钠溶液：400mL6. 标准RNA 溶液(5mg/100mL)：50mL7. 标准DNA 溶液(15mg/100mL)：50mL8. 粗氯化钠：250g9. 海砂：5g10. 二苯胺试剂60mL将1g 二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中，再加入mL 浓硫酸(置冰箱中可保存6个月。
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实验四 植物组织中核酸的提取和测定
一、 实验目的
1.掌握从植物组织中提取核酸的方法。
2.掌握RNA 、DNA 的定性鉴定方法。
二、实验原理
用冰冷的稀三氯乙酸或稀高氯乙酸溶液在低温下抽提植物组织匀浆，以除去酸溶性小分子物质，再用有机溶剂，如乙醇、乙醚等抽提，去掉脂溶性的磷脂等物质。
最后用浓盐溶液(10％氯化钠溶液)和0.5mol ／L 高氯酸(70℃)分别提取DNA 和RNA ，再进行定性鉴定。
由于核糖和脱氧核糖有特殊的颜色反应，经显色后所呈现的颜色深浅在一定范围内和样品中所含的核糖和脱氧核糖的量成正比，因此可用此法来定性、定量测定核酸。
1.核糖的测定
测定核糖的常用方法是苔黑酚(即3，5－二羟甲苯法(Orcinol 反应))。
当含有核糖的RNA 与浓盐酸及3，5－二羟甲苯在沸水浴中加热10～20分钟后，有绿色物产生，这是因为RNA 脱嘌呤后的核糖与酸作用后生成糠醛，后者再与3，5－二羟甲苯作用产生绿色物质。
2.氧核糖的测定
测定脱氧核糖的常用方法是二苯胺法。
含有脱氧核糖的DNA 和二苯胺在沸水浴中共沸10分钟后，产生蓝色。
这是因为DNA 嘌呤核苷酸上的脱氧核糖与酸生成ω－羟基－6－酮基戊醛，它再和二苯胺作用产生蓝色物
质。
此法易受多种糖类及其衍生物和蛋白质的干扰。
上述两种定糖的方法准确性较差，但快速、简便，能鉴别DNA 与RNA ，是鉴定核酸、核苷酸的常用方法。
三、仪器、原料与试剂
仪器：恒温水浴锅、离心机、吸管、量筒、电炉、布氏漏斗装置、 烧杯、剪刀。
原料：新鲜菜花(花椰菜) 试剂：
1. 95％乙醇：600mL
2. 丙酮：400mL
3. 5％高氯酸溶液：200 mL
4. 0.5mol/L 高氯酸溶液：200mL
5. 10％氯化钠溶液：400mL
6. 标准RNA 溶液(5mg/100mL)：50mL
7. 标准DNA 溶液(15mg/100mL)：50mL
8. 粗氯化钠：250g 9. 海砂：5g 10. 二苯胺试剂60mL
将1g 二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中，再加入2.75 mL 浓硫酸(置冰箱中可保存6个月。
使用前，在室温下摇匀)。
11. 三氯化铁浓盐酸溶液：25mL
将2 mL10％三氯化铁溶液(用FeCl3〃6H2O 配制)加入到400 mL 浓盐酸中。
12. 苔黑酚乙醇溶液：200mL
溶解6g 苔黑酚于100 mL95％乙醇中(可在冰箱中保存1个月)
四、操作步骤
(一)核酸的分离
1.取菜花的花冠20g，剪碎后置于研钵中，加入20mL95％乙醇和400mg 海砂，研磨成匀浆。
然后用布氏漏斗抽滤，弃去滤液。
2.滤渣中加入20mL 丙酮，搅拌均匀，抽滤，弃去滤液。
3.再向滤渣中加入20mL 丙酮，搅拌5分钟后抽干(用力压滤渣，尽量除去丙酮)。
4.在冰盐浴中，将滤渣悬浮在预冷的20mL5％高氯酸溶液中。
搅拌，抽滤，弃去滤液。
5.将滤渣悬浮于20mL 丙酮，搅拌5分钟后抽干(用力压滤渣，尽量除去丙酮)。
6.滤渣中加入20mL 丙酮，搅拌5分钟，抽滤渣，用力压滤渣尽量除去丙酮。
7.将干燥的滤渣重新悬浮在40mL10％氯化钠溶液中。
在沸水浴中加热15分钟。
放置，冷却，抽滤至干，留滤液。
并将此操作重复进行一次。
将两次滤液合并，为提取物一。
8.将滤渣重新悬浮在20mL0.5 mol/L 高氯酸溶液中，加热到70℃、保温20分钟(恒温水浴)后抽滤，留滤液(提取物二)。
(二)RNA、DNA 的定性鉴定
1.二苯胺反应
按下表加入各反应试剂，观察试验现象，并记录在表中。
2、苔黑酚反应
按下表加入各反应试剂，观察试验现象，并记录在表中。
根据现象分析提取物一和提取物二主要含有什么物质？。