药物敏感试验
药物敏感试验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过药物敏感试验，了解病原菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供科学依据，以指导临床治疗，提高治疗效果。
二、实验原理药物敏感试验是微生物学实验中的一种重要方法，其原理是通过观察细菌在含有不同浓度抗生素的培养基上的生长情况，来判断细菌对该抗生素的敏感性。
当细菌对某种抗生素敏感时，其在含有该抗生素的培养基上生长受到抑制，形成抑菌圈；反之，当细菌对该抗生素不敏感时，其在含有该抗生素的培养基上仍能生长。
三、实验材料1. 样本：临床分离的细菌菌株2. 培养基：琼脂平板、肉汤培养基3. 抗生素：青霉素、链霉素、红霉素等4. 仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、镊子等5. 试剂：生理盐水、消毒液等四、实验方法1. 样本处理：将临床分离的细菌菌株接种于肉汤培养基中，37℃培养18-24小时，观察细菌生长情况。
2. 琼脂平板制备：将肉汤培养基加热融化，待冷却至50-55℃时，加入抗生素纸片，轻轻摇匀，倒入平板，待凝固。
3. 抑菌圈测定：将培养好的细菌菌株接种于琼脂平板上，37℃培养18-24小时，观察抑菌圈的形成情况。
4. 结果记录：记录不同抗生素对细菌的抑菌圈直径，并按抑菌圈直径大小进行敏感性分级。
五、实验结果1. 青霉素：抑菌圈直径为20mm，敏感；2. 链霉素：抑菌圈直径为15mm，中敏感；3. 红霉素：抑菌圈直径为10mm，低敏感。
六、实验讨论1. 通过本实验，我们了解到青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的抗生素选择。
2. 链霉素对所检测的细菌菌株具有中敏感，可以作为一种辅助治疗药物。
3. 红霉素对所检测的细菌菌株具有低敏感，不建议作为首选治疗药物。
4. 在临床治疗过程中，应根据药物敏感试验结果，合理选用抗生素，以减少耐药菌株的产生。
七、实验结论本实验通过药物敏感试验，成功检测了细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理选用抗生素提供了科学依据。
实验结果表明，青霉素对所检测的细菌菌株具有较好的敏感性，可以作为一种治疗该菌株感染的首选抗生素。
药物敏感试验实验报告
药物敏感试验实验报告药物敏感试验实验报告引言：药物敏感试验是一种常见的实验方法，用于评估药物对特定疾病的疗效。
本实验旨在通过对不同药物的敏感性测试，评估其对某一疾病的治疗效果，为临床医学研究和治疗提供参考依据。
实验设计：本次实验采用了体外细胞培养的方法，选取了一种常见的癌症细胞株作为实验对象。
首先，将细胞培养于含有不同浓度药物的培养基中，然后通过细胞存活率的测定，评估药物对细胞的杀伤效果。
实验组设有不同浓度的药物组和对照组，以比较药物对细胞生存的影响。
实验步骤：1. 细胞培养：选取适当的培养基和培养条件，将细胞株接种于培养皿中，并放置于恒温培养箱中，保持适宜的温度和湿度。
2. 药物制备：根据实验需要，将药物按照不同的浓度配制成培养基，以便后续的实验操作。
3. 药物处理：将培养基中的细胞分为实验组和对照组，实验组加入不同浓度的药物，对照组则不加入药物。
4. 细胞存活率测定：通过染色或其他方法，测定不同处理组中细胞的存活率，并进行统计分析。
实验结果：根据实验数据的统计结果，我们得出了以下结论：1. 药物A对细胞的杀伤效果最强，高浓度药物A可以显著降低细胞存活率。
2. 药物B对细胞的杀伤效果次之，中等浓度药物B可以适度降低细胞存活率。
3. 药物C对细胞的杀伤效果较弱，只有在高浓度下才能对细胞产生一定的抑制作用。
4. 对照组中的细胞存活率较高，说明细胞在无药物处理的情况下能够正常生长。
讨论与分析：根据实验结果，我们可以得出以下结论和讨论：1. 药物A具有明显的抗癌作用，可以作为治疗某种癌症的潜在药物候选。
2. 药物B的抗癌效果较弱，可以考虑与其他药物联合使用，以增强疗效。
3. 药物C的抗癌效果较为有限，可能需要进一步的研究和改进。
4. 实验结果表明，药物的浓度对细胞存活率具有显著影响，高浓度药物能够更有效地抑制细胞生长。
结论：通过药物敏感试验，我们评估了不同药物对癌症细胞的杀伤效果。
实验结果显示，药物A具有较强的抗癌作用，药物B具有适度的抑制作用，而药物C的抑制效果较弱。
药物敏感试验
药物敏感试验96孔板法1.适用范围本实验通过检测细菌对抗菌药物的敏感性，筛选最有疗效的药物。
2.仪器设备50ml容量瓶、10ml移液管、橡胶吸头、细菌瓶、96孔板、广口瓶、高速蜗旋仪、高速离心机、分析天枰、恒温振荡器（室温至60℃，30-50转/分钟）、恒温培养箱（室温到70℃）、培养皿、微量移液器（1000μl、100μl、10μl）、八排微量移液器（100μl）、及其配套枪头、OD值测量仪、微型振荡器。
3.试剂液体培养基（MH肉汤、LB培养基）、磷酸缓冲液、灭菌蒸馏水、灭菌去离子水、0.1mol/L HCL。
4.实验材料15%金霉素、10%抗敌素、相关各地区致病菌液。
5.试剂的配置(1)MH肉汤MH肉汤21.0g蒸馏水1000ml（2）LB培养基蛋白胨10g酵母浸粉5g氯化钠5g蒸馏水1000ml（3）磷酸缓冲液Nacl 80gKcl 2gNa2H PO4`12 29gK2HPO4 2g去离子水1000ml用磷酸缓冲液（磷酸缓冲液：水=9:1）调节PH至7.0。
（4）15%金霉素药样制备15%金霉素0.0512g0.1mol/L HCL 3000-5000μl加去离子水定容至50ml10%抗敌素药样制备10%抗敌素0.0512g加去离子水溶解，定容50ml离心，1000转5分钟，取上清液放至4℃冰箱保存。
6.实验操作步骤（1）菌种复苏各地相关菌种用平板划线（37℃恒温培养12~16小时）使其在平板培养基上生长。
（2）菌的扩增从平板上获取菌加入液体培养基，用恒温振荡器培养（37℃）12小时，备用。
（3）用八排微量移液器向96孔板中依次加入100μlMH肉汤。
（4）用100μl微量移液器向96孔板第一纵排分别加入药样上清液（每种药样加2孔）。
（5）倍比稀释用八排微量移液器从第一纵排吸取100μl混合液体，反复吸取8~10次，使吸入的混合液体液面相平后加入第二纵排反复吸取10次，依次法进行加至第十纵排。
细菌药物敏感试验执行标准和典型报告解读
细菌药物敏感试验执行标准和典型报告解读1. 引言细菌药物敏感试验，也称细菌药物敏感性试验或细菌敏感度试验，是临床微生物学中的一项重要内容。
它通过对细菌感染的病人样本进行试验，评估不同抗生素对细菌的敏感性，以确定最佳的抗生素治疗方案。
本文将全面评估细菌药物敏感试验的执行标准和典型报告解读，帮助大家更深入地了解这一重要的临床实验。
2. 细菌药物敏感试验执行标准在进行细菌药物敏感试验时，有一系列执行标准的要求需要满足。
必须采集来自病人临床样本的细菌，并在无菌条件下进行培养。
培养后，需要对细菌进行纯化和鉴定，以确保获得的细菌纯种。
接下来，根据临床样本中的细菌培养液，制备不同抗生素的浓度梯度，利用扩散法或微量培养法进行敏感性试验。
试验中必须包括阳性和阴性对照，确保实验结果的准确性。
3. 典型报告解读细菌药物敏感试验的典型报告通常包括细菌菌株的鉴定信息、不同抗生素的敏感性结果以及解释说明。
在报告中，每种抗生素都会根据细菌对其的敏感性被划分为敏感、中介和耐药三个等级。
解释说明部分将说明每种抗生素的敏感性结果，并结合临床数据，提供建议的治疗方案。
通过典型报告的解读，临床医生可以更好地选择最有效的抗生素治疗方案，提高治疗效果。
4. 个人观点和理解细菌药物敏感试验是临床微生物学中至关重要的一环，对于临床治疗具有重要的指导意义。
在执行标准要求和报告解读中，需要严格遵守规范，确保实验结果的准确性和可靠性。
在个人看来，细菌药物敏感试验不仅需要有严格的技术操作，还需要理解临床背景和病人情况，结合临床实际制定治疗方案，才能更好地发挥其作用。
5. 总结和回顾细菌药物敏感试验的执行标准和典型报告解读对于临床治疗非常重要。
在执行标准中，关键是保证细菌培养的纯化和鉴定准确无误，以及抗生素敏感性试验的准确进行。
而在典型报告解读中，医生需要结合临床情况，选择最佳的抗生素治疗方案。
细菌药物敏感试验是临床微生物学中的一项重要内容，其准确性和可靠性直接关系到病人的治疗效果，因此需要高度重视。
微生物实验七药物敏感试验
三、实验器材
1．菌种 大肠埃希菌。 2．培养基 牛肉膏蛋白胨培养基。 3．试剂 无菌生理盐水，抗菌药物纸片： 包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉 素等。 4．其他 无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接 种环。
四、实验方法和步骤 1．菌液制备 菌浓合适，一般为106 2．接种 细菌悬液制备后15min内接种至倒好的 牛肉膏蛋白胨培养基平板中，接种量0.10.2mL。涂布均匀。
抗生素 青霉素 链霉素 土霉素 氯霉素 红霉素 抑菌圈大小（单位，mm）
量取不同药物的各抑菌圈大小，记录
六、思考题
1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项？ 2. 试述药敏试验的意义
全部实验完毕
（一） 操 作 方 法
期末考试安排 革兰氏混合染色（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌）
二、实验原理
将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已 接种待检菌的琼脂平板表面特定部位。药物借其 分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着离 纸片距离加大，琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯 度浓度。其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度 高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细胞不 能生长，形成透明抑制圈。抑菌圈的大小可以反 映待检对测定药物的敏感程度，抑菌圈愈大，说 明该菌对此药物越敏感
四、实验方法和步骤
3．贴药敏纸片 涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片 分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面并轻压， 使纸片与琼脂表面完成接触。各纸片中心相距 应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。 4．培养 将平板倒置放入37℃培养箱培养，16~18h读取 结果。
五、实验结果
22了解药敏试验在实际生产中的重要意义了解药敏试验在实际生产中的重要意义将含有定量抗菌药物的纸片药敏纸片贴在已将含有定量抗菌药物的纸片药敏纸片贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部位
药敏试验及药敏试验结果介绍ppt课件
• 药物生理浓集部位有效 (尿－FQ) • 加大用药剂量可能有效
– 缓冲区：防止操作的系统误差造成重 大结果的判定错误
药敏试验的方法学
• 半定量…纸片扩散法 (抑菌圈直径) • MIC法：
– 稀释法(肉汤、琼脂) – 自动化仪法 – 抗生素连续梯度法 (Etest ) – 流式细胞仪
• 药敏可能无法检出新出现的耐药，VISA
药敏试验方法2－肉汤稀释法
4
8
混
16
32 64 128 256 ug/m
混清
抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml ， 孵育35℃， 16-20h，判读
药敏试验方法2－肉汤稀释法
• 调节离子浓度的MH肉汤 • 宏量肉汤法（2ml, 13x100mm ）
微量肉汤法 （ 0.1ml, 微量板） 自动化仪 • 优点：准确，可靠，可用于研究 • 缺点：
菌，
分枝杆菌
评价药物体外抗菌活性的指标
• MIC50, MIC90, MIC 均值， MIC 范围，R，I，S • MIC50/ MIC90：MIC从小到排列，位于第50 / 90百
分位菌株的MIC值 • 单纯比较MIC50，MIC90是片面的，还要同时看平
均MIC及MIC范围 • 同时结合R，I，S，（不同药物血浓度不同，安
8
Antibiotic concentration (ug/ml)
6
Drug A
4
Drug B
2
B
0
A
Time above MIC
Time
Drug A present at concentration of 2 ug/ml for 50% of dosing interval Drug B present at concentrationSloidef n2o ug/ml for 30% of dosing interval 40
中国药敏试验标准
中国药敏试验标准是指在医学领域中用于评估微生物（通常是细菌或真菌）对不同药物的敏感性的一组标准和方法。
这些标准和方法用于确定适当的抗生素或抗真菌药物来治疗感染性疾病。
中国药敏试验标准通常由中国药典委员会或中国国家药品监督管理局等机构制定和管理。
中国的药敏试验标准通常包括以下内容：
微生物培养：在药敏试验之前，需要培养出要测试的微生物，通常是从感染患者的样本（如血液、尿液、痰液等）中获得的。
药物敏感性测试：在培养好的微生物上进行药物敏感性测试，通常包括将不同浓度的抗生素或抗真菌药物暴露给微生物，并观察药物对微生物的杀菌或抑制作用。
结果解释：根据测试结果，确定微生物对不同药物的敏感性。
通常会使用标准的解释标志，如敏感（S）、中度敏
感（I）或耐药（R）来表示微生物对药物的反应。
报告：将测试结果记录在报告中，包括微生物的种类、药物敏感性信息以及任何特殊的注意事项。
需要注意的是，中国的药敏试验标准可能会根据不同的微生物和药物而有所不同，因此具体的标准可能会根据具体情况而有所变化。
此外，药敏试验通常需要在专业实验室中进行，由经过培训的专业人员执行，以确保结果的准确性和可靠性。
如果您需要了解特定微生物或药物的具体药敏试验标准，建议咨询当地的医学实验室或卫生部门，他们可以提供相关信息和指导。
病原药物敏感实验报告
一、实验目的本实验旨在通过病原药物敏感试验，了解病原微生物对不同抗生素的敏感性，为临床合理选择抗生素提供科学依据，指导临床治疗，提高治疗效果。
二、实验原理病原药物敏感试验是通过观察病原微生物在含有不同浓度抗生素的培养基上生长情况，来判断病原微生物对某种抗生素的敏感性。
根据抑菌圈的大小，可以判断病原微生物对药物的敏感程度。
三、实验材料1. 病原微生物样本：疑似感染部位的组织或分泌物。
2. 抗生素纸片：含有不同浓度抗生素的纸片。
3. 琼脂培养基：用于培养病原微生物。
4. 微量移液器：用于定量加样。
5. 镜头：用于观察病原微生物的生长情况。
6. 温箱：用于培养病原微生物。
四、实验方法1. 样本处理：将疑似感染部位的组织或分泌物进行稀释，取适量加入琼脂培养基中，混匀。
2. 制备菌悬液：将处理后的样本在显微镜下观察，选择生长良好的菌落进行稀释，制备成一定浓度的菌悬液。
3. 贴纸片：将制备好的菌悬液均匀涂布在琼脂培养基表面，然后将抗生素纸片贴在培养基表面，确保纸片与培养基充分接触。
4. 培养观察：将培养皿放入温箱中，在适宜温度下培养24-48小时。
5. 结果观察与记录：观察并记录抑菌圈的大小，根据抑菌圈的大小，判断病原微生物对各种抗生素的敏感性。
五、实验结果与分析1. 病原微生物对青霉素的敏感性：抑菌圈直径为15mm，表明病原微生物对青霉素表现为低敏感。
2. 病原微生物对头孢菌素的敏感性：抑菌圈直径为20mm，表明病原微生物对头孢菌素表现为中敏感。
3. 病原微生物对喹诺酮类的敏感性：抑菌圈直径为25mm，表明病原微生物对喹诺酮类表现为高敏感。
4. 病原微生物对氨基糖苷类的敏感性：抑菌圈直径为10mm，表明病原微生物对氨基糖苷类表现为不敏感。
六、实验结论根据病原药物敏感试验结果，病原微生物对青霉素表现为低敏感，对头孢菌素表现为中敏感，对喹诺酮类表现为高敏感，对氨基糖苷类表现为不敏感。
临床治疗时，应优先考虑使用喹诺酮类药物，同时可根据病情变化调整治疗方案。
药敏试验PPT资料PPT课件
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集，如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测，如不能及时送检，应妥善保存。
保证足够的样本量，以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理，如离 心、过滤等，以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况，判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生，为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度，帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗，提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性，了解耐药机制 和传播情况，为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌，然后滴 加抗生素溶液，观察抑菌圈的大 小，判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养，观察细菌的生长情况，确定药 物的最小抑菌浓度（MIC）。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上，观察纸片周围抑菌圈的 大小，判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法，通过在药敏试纸上施加连续变化的压力，使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系，从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便，结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型，选择合适的采集方法， 如咽拭子、痰液、尿液等。
药敏片药敏试验实验报告
一、实验目的1. 了解药敏片药敏试验的基本原理和操作步骤。
2. 掌握药敏试验在临床微生物学诊断中的重要性。
3. 学习如何通过药敏试验结果评估细菌对药物的敏感性，为临床用药提供依据。
二、实验原理药敏试验是一种体外实验，用于检测细菌对特定抗生素的敏感性。
实验原理基于细菌与抗生素之间的相互作用。
当抗生素浓度低于最小抑菌浓度（MIC）时，细菌能够生长；当抗生素浓度高于MIC时，细菌的生长受到抑制。
通过观察细菌在含有不同浓度抗生素的培养基上的生长情况，可以判断细菌对药物的敏感性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎链球菌；药敏片；M-H琼脂培养基；无菌生理盐水；无菌棉签；无菌剪刀；无菌镊子；无菌培养皿；酒精灯；恒温培养箱；显微镜。
2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器；电子天平；移液器；酒精灯；恒温培养箱。
四、实验方法1. 准备培养基：将M-H琼脂培养基融化，待冷却至50℃时，加入适量无菌生理盐水，混匀后倒入培养皿，待凝固。
2. 制备药敏片：将药敏片置于无菌纸上，用无菌剪刀剪成小块，放入无菌培养皿中。
3. 接种：用无菌棉签挑取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎链球菌，分别接种于M-H琼脂培养基上。
4. 展开药敏片：将药敏片贴于接种好的培养基上，确保药敏片与培养基紧密接触。
5. 孵育：将培养皿放入恒温培养箱中，37℃孵育24小时。
6. 观察结果：观察细菌在药敏片周围的生长情况，记录细菌生长情况，并与药敏片上的药物浓度进行比较。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌：对青霉素、头孢噻肟、红霉素、克林霉素敏感，对庆大霉素、链霉素耐药。
2. 大肠杆菌：对头孢噻肟、氨苄西林、诺氟沙星、链霉素敏感，对青霉素、红霉素、克林霉素耐药。
3. 肺炎链球菌：对青霉素、头孢噻肟、红霉素、阿奇霉素敏感，对庆大霉素、链霉素耐药。
根据实验结果，金黄色葡萄球菌对青霉素、头孢噻肟等抗生素敏感，而大肠杆菌对头孢噻肟、氨苄西林等抗生素敏感。
药物敏感试验实习报告
一、实习背景随着抗生素的广泛应用，细菌耐药性日益严重，给临床治疗带来了巨大挑战。
药物敏感试验是临床微生物学检验的重要项目之一，通过对细菌进行药物敏感试验，可以了解细菌对各种抗生素的敏感性，为临床合理使用抗生素提供依据。
本次实习旨在通过药物敏感试验的学习，掌握实验原理、操作步骤和结果判定，提高临床微生物学检验能力。
二、实习内容1. 实验原理药物敏感试验主要采用纸片扩散法，通过观察细菌在含有不同抗生素的琼脂平板上的生长情况，判断细菌对药物的敏感性。
根据抑菌圈的大小，可以判断细菌对药物的敏感程度。
2. 实验操作（1）制备琼脂平板：将熔化的琼脂平板冷却至50℃左右，倒入无菌平皿中，待凝固。
（2）接种细菌：用无菌接种环取适量细菌，均匀涂布在琼脂平板上。
（3）贴药片：将含有不同抗生素的纸片贴在琼脂平板上，确保纸片与平板紧密贴合。
（4）培养：将平板置于适宜的培养箱中，培养一定时间。
（5）观察结果：观察抑菌圈的大小，判断细菌对药物的敏感性。
3. 结果判定根据抑菌圈的大小，将细菌对药物的敏感性分为敏感、中度敏感和耐药三种情况。
（1）敏感：抑菌圈直径≥21mm。
（2）中度敏感：抑菌圈直径15-20mm。
（3）耐药：抑菌圈直径≤14mm。
三、实习体会通过本次药物敏感试验实习，我深刻认识到以下几点：1. 药物敏感试验是临床微生物学检验的重要项目，对于指导临床合理使用抗生素具有重要意义。
2. 实验操作要严格按照规程进行，确保实验结果的准确性。
3. 结果判定要客观、公正，避免人为因素的影响。
4. 在实际工作中，要关注细菌耐药性的变化，及时调整抗生素的使用策略。
四、实习总结本次药物敏感试验实习，使我掌握了药物敏感试验的实验原理、操作步骤和结果判定，提高了临床微生物学检验能力。
在今后的工作中，我将继续努力学习，为临床合理使用抗生素贡献自己的力量。
药物敏感试验
药物敏感试验1.药物敏感试验种类1.1纸片琼脂扩散法（disc agar diffusion test）常采用Bauer-Kirby）法。
1.2液体稀释法（dilution test）：肉汤稀释法（broth dilution）和琼脂稀释法（agar dilution test），肉汤稀释法又包括试管稀释法（tube dilution）和微量稀释法（microdilution）。
2.应用2.1纸片琼脂扩散法：2.1.1术语：敏感——表示被测菌株所引起的感染可以用常用剂量的该抗菌药物治愈，禁忌症除外。
耐药——被测菌株不能被常用剂量所达到的组织内或血液中的抗生素所抑制。
中度敏感——表示被测菌株可以通过提高剂量被抑制或在生理性浓集的部位被抑制，如β-内酰胺类药物。
中介度——这一范围只是抑菌圈直径介于敏感和耐药之间的缓冲域，以防止由微小的技术因素失控所导致的较大的结果解释错误，抑菌圈落入中介度范围，意义不明确，如果没有其他可以替代的药物，应重复或以稀释法测定MIC。
2.1.2应用：一般认为药敏结果与临床约有80~90%合格率，药敏实验是提供治疗感染性疾病最有力的依据，也可以进行流行病学调查，了解耐药菌株的耐药机制。
此外利用药敏谱可对被检菌株进行鉴定。
2.2液体稀释法（dilution test）2.2.1术语：MIC——最小抑菌浓度MBC——最小杀菌浓度MIC50——能抑制50%的试验菌的最低药物浓度即为该药物对被测菌的MIC。
MIC90——能抑制90%的试验菌的最低药物浓度即为该药物对被测菌的MIC。
2.2.2应用：液体稀释法比较繁琐，一般不作为常规试验。
仅在以下几个方面采用：调查罕见耐药，调查药敏定性试验是敏感但临床疗效不佳的原因，确定中介度的敏感性，有效的选择二线药，评价新药。
3.影响药敏性试验准确性的因素3.1细菌的分离培养综合动物的临床发病症状，剔除并避免选用少量杂菌。
选取5份以上菌落，平板划线于血平板上，或根据实验要求划线于不同的鉴别培养基，再培养。
药物敏感试验实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除药物敏感试验实验报告篇一：药敏试验报告药敏试验报告（琼脂稀释法）一、实验目的检测载铜离子土对沙门氏菌的最小抑菌浓度（mIc）二、实验原理三、实验材料与试剂材料：平板，锥形瓶，10mLep管等；试剂：载铜离子土，沙门氏菌，琼脂平板计数培养基，mh肉汤培养基，硫酸（1%），氯钡（0.25%）。
四、实验方法1配制琼脂平板计数培养基，按配方配制300mL，mh肉汤培养基100mL，待高压；2高压灭菌平板，锥形瓶，10mLep管等；3沙门氏菌扩大培养:10mlep管中加入4mlmh肉汤培养基，4ul 菌液，放置摇床37℃，220rpm过夜培养；4麦氏比浊管0.5的制备：0.25%氯化钡0.1ml，1%硫酸4.9ml。
8（即细菌的近似浓度为×10/ml）5将扩大培养的沙门氏菌调制0.5麦氏比浊度后，再稀释100倍备用；（每组做三个重复，16-24h后观察结果）五、实验结果实验组1、2以及对照组平板中，肉眼可见针尖状半透明菌落，革兰氏染色后，镜下形态为红色短杆状，初步断定为沙门氏菌；实验组3、4、5未见菌落，涂片染色后，镜下也未观察到细菌。
六、结论载铜离子土对沙门氏菌最小抑菌浓度（mIc）为3g/L。
篇二：001-药物敏感试验抗菌药物实验方法――药敏试验由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，细菌的耐药性问题正变得越来越突出，不少耐药菌株可耐受多种抗生素。
由此而造成的危害十分严重，它不仅使抗菌药的疗效降低，疗程延长，死亡率升高和治疗费用增加。
这不仅给养殖业带来巨大的经济损失，而且耐药菌株可能会将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康也造成潜在威胁。
专家强调指出，临床上应合理应用抗菌药，以避免或减少耐药性的产生，而合理应用抗菌药控制畜禽疾病的一项重要内容就是通过药敏试验指导临床用药，以充分发挥抗菌药疗效，并尽可能减少其不良影响。
目前由各种细菌所引起的疾病给畜禽养殖业带来严重经济损失，阻碍了养殖业的快速发展和经济效益，所以使用抗菌药预防和治疗细菌性疾病成了畜禽养殖过程中的一项重要工作。
药敏试验方法简介
室间质量控制
失控原因分析
一旦发现质量控制失控，应立即对失控原因进行分析，包括人员操作失误、试剂质量下降等。
质量控制失控应对措施
纠正与改进
根据失控原因采取相应的纠正措施，如重新培训人员、更换试剂等，并制定预防措施以避免类似问题再次发生。
记录与报告
详细记录质量控制失控事件及处理过程，并向上级主管部门报告，以便及时采取改进措施。
药敏试验板
将含有细菌的液体培养基按要求加到药敏试验板上。
加样
将药物按浓度梯度加到药敏试验板上。
药物添加
药敏试验板制备
观察结果
将药敏试验板置于适宜的温度和湿度下培养一定时间，观察细菌的生长情况。
结果判读
根据细菌生长情况，判断细菌对药物的敏感程度。
药敏试验结果判读
整理药敏试验数据，分析结果。
药敏试验报告整理与发布
05
药敏试验结果解读与临床应用
药敏试验结果解读
判断感染菌种与耐药性
药敏试验可以判断引起感染的菌种，并评估其对不同药物的耐药性。
指导抗生素选择
根据药敏试验结果，医生可以选择最合适的抗生素进行治疗。
检测多重耐药性
药敏试验可以检测出细菌的多重耐药性，预测其对多种药物的耐药性。
01
02
03
1
药敏试验结果临床应用建议
E-test法
操作简便、结果准确、适用于大多数药物。
成本较高。
定义
优点
缺点
03
药敏试验操作流程
采集感染部位样本，如痰液、尿液、血液等，进行细菌培养。
样本采集
细菌分离
细菌鉴定
通过培养基等手段将目标细菌分离出来。
采用生化反应、基因测序等手段对细菌进行鉴定，确定细菌种类。
药敏试验方法简介
在规定时间内观察细菌在药敏纸片周围的生长情 况。
结果记录
记录每个药敏纸片对应的抑菌圈直径或是否生长 。
结果解释
根据记录的结果，参照药敏试验标准解释敏感、 耐药等结果。
04
药敏试验结果解读
耐药性解读
耐药性
01
是指细菌、病毒等微生物对药物不敏感，即药物不能有效杀死
或抑制微生物的生长。
耐药性的分类
缺点
成本较高，需要使用特定的E型试纸和细胞培养液。
03
药敏试验操作流程
试验前的准备
确定试验菌种
根据感染类型、临床诊断等选 择合适的试验菌种。
准备培养基
选择适宜的培养基，以支持细 菌生长。
准备药敏纸片
根据需要选择适当的药敏纸片 。
菌液制备
收集菌株
从感染部位或血液等样本中收 集菌株。
纯化培养
将菌株在培养基上进行纯化培养 ，确保无杂菌污染。
01 02
定义
纸片扩散法是一种常用的药敏试验方法，通过在琼脂平板上放置含有 抗菌药物的纸片，让细菌与药物接触，观察细菌的生长情况来判断药 物的抗菌效果。
优点
操作简单、成本低、易于标准化。
03
缺点
由于不同菌种对药物的敏感性不同，可能需要调整纸片的放置位置和
时间。
稀释法
定义
稀释法是通过将细菌与不 同浓度的抗菌药物接触， 观察细菌的生长情况，以 判断药物的抗菌效果。
MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和达托霉素较为敏感，但对β-内酰胺类 抗生素、大环内酯类抗生素和磺胺类抗生素等不敏感。
案例三：万古霉素敏感性的药敏试验结果解读
万古霉素是一种糖肽类抗生素，常用 于治疗MRSA感染和耐甲氧西林凝固 酶阴性葡萄球菌感染等严重细菌感染
药敏试验操作方法
药敏试验操作方法药物敏感性试验是一种常见的实验方法，用于评估药物对细菌或其他微生物的敏感性。
下面我将详细介绍药敏试验的操作方法。
一、实验仪器和试剂准备1. 培养基：根据要测试的细菌种类选择相应的培养基，并按照说明书配制。
2. 抗生素：根据实验需求选择合适的抗生素。
可以是已知的抗生素，也可以是待测的新药物。
3. 细菌悬浮液：从培养物中挑取单一菌落，转接到培养基中培养一夜，然后取一定量的细菌悬浮液用生理盐水调制。
二、药敏试验步骤1. 稀释菌悬液：将细菌悬液稀释至适宜浓度，通常为0.5 McFarland 标准浓度，以确保实验准确性。
2. 制备琼脂平板：将培养基煎化至液态，待温度降至45-50时加入相应抗生素浓度，快速混合后倒入培养皿中。
3. 扩展细菌：将含有药物的琼脂平板倒扣在灭菌台上，用细菌悬液均匀涂抹在琼脂平板表面上。
4. 培养和观察：将培养皿放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一段时间，通常为18-24小时。
培养结束后，观察菌落生长情况，并记录结果。
5. 结果解读：根据菌落的生长情况和直径大小，判断细菌对药物的敏感性。
通常，抗生素有效抑制菌落生长的区域称为抑制圈，其直径大小与药物对细菌的抑菌效果相关。
- 抗生素敏感（S）：抑制圈直径大于抗生素的最低抑菌浓度（MIC）；- 中度敏感（I）：抑制圈直径仅略大于MIC；- 抗生素耐药（R）：抑制圈直径小于MIC。
6. 结果记录和分析：将对应的药敏结果记录下来，并进行案例分析和数据统计。
7. 实验验证：如果需要，可以对少数样本进行二次验证以确保结果的准确性。
三、注意事项和常见问题1. 实验操作要严格遵守无菌技术，以防止外界细菌的污染。
2. 实验室工作人员应佩戴适当的个人防护装备，如实验手套、口罩等。
3. 实验仪器和试剂要经过严格的消毒和无菌处理。
4. 抗生素的选择要与实验目的和细菌种类相匹配，避免选择不当的抗生素。
5. 实验结束后，应正确处置培养皿和含有抗生素的废弃物，以避免对环境造成污染。
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• 改善患者全身情况：器官功能支持，纠正酸碱平衡，
电解质紊乱，低蛋白血症，高血糖等
与临床沟通中常见问题
6、选择药敏报告敏感的药物，为 什么临床治疗无效？
体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不等同； 一般来说，耐药＝治疗无效； 敏感≠治疗有效。 • 可能不是真正的致病菌（污染或定植菌） • 细菌本身因素（如诱导耐药，生物被膜） • 感染部位与药代动力学因素 • 细菌的MIC，给药剂量和用药方式 • 药敏试验药物中有些药物单独使用无效，但可以与其
12.明显稀便，培养结果为何正常？
大便普通培养，通常只能鉴定志贺菌、沙 门菌感染，致病性大肠杆菌我们没有鉴定 血清。
怀疑霍乱时，需开霍乱弧菌培养。 可能病毒感染(轮状病毒)。 Nhomakorabea小结
耐药菌，尤其是多重耐药菌的出现， 使临床抗感染治疗面临着困难的用药 决策
细菌药敏试验在选择抗菌药物种类上 为临床提供参考（经验治疗）；可以 指导临床个体化治疗。
的鉴定 作为医院内感染流行病学调查的手段之一
如何进行药敏试验
方法学 1. 稀释法
--试管稀释法 --平板稀释法
2. 扩散法（纸片法） 3. E-TEST 4.自动化仪器
几个重要的指标
MIC（最低抑菌浓度） 在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度 MBC(最低杀菌浓度) 在体外能够使细菌的总数减少或杀灭99.9% 以上的最低药物浓度
他药物联合用药
• 药物剂型及生物利用度（纯品、商品）
与临床沟通中常见问题
7、涂片镜检结果与培养结果不吻合？
涂片镜检是报告所有检见的细菌，而培养 的目的是检出致病菌。
一些苛氧菌需在特殊的环境或培养基上才 能生长。
与临床沟通中常见问题
8、取的明显就是脓液标本，为何 鉴定报告为无菌生长？
我们做的是有氧培养，脓液可能为厌 氧菌感染。
• 可能是天然耐药 • 可能是药物的敏感性被其他药物所预
报
与临床沟通中常见问题
2.为什么有的菌报告很多种药物， 有 的仅报告几种药物？
• 报告的药物种类根据细菌种类的不同而
有所不同，如铜绿假单胞菌报告的药物 较多，而嗜麦芽窄食单胞菌报告的药敏 较少
CLSI药敏建议
与临床沟通中常见问题
3、是否能将所用的药都做药敏试验?
抗菌药物敏感试验
细菌室 李巍
抗菌药物敏感试验
定义、目的、方法 培养基、接种菌量、培养条件 结果阅读 判断标准
什么是抗菌药物的敏感性试验
测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生 长的效力，称为抗菌药物对细菌的抑制试 验，或称为细菌对药物的敏感性试验。
为什么要做药敏试验？
供医师选用抗菌药物时的参考 细菌耐药性检测和耐药性变迁 评价新抗菌药物的药效学特征 对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种
好
• 不同种抗菌药物之间MIC无可比性 • 目前很多仪器报告的是检测折点，而不
是真正的MIC
与临床沟通中常见问题
5、培养阳性的细菌都需要用抗菌药 物治疗吗？
• 不是的 • 培养阳性感染，可能为污染（血培养），可能为
定植（痰培养）
• 任何结果必须结合临床情况进行评价（很重要） • 感染部位的清创、引流、换药比使用抗菌药物更加
反射光 不反光的黑色背景 完全抑制的抑菌圈直径，包括纸片的直径 抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显
的可见细菌生长区域 在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜
下才能观察到的细小菌落应忽略
应注意葡萄球菌、肠球菌的阅读
苯唑西林、利奈唑胺和万古对葡萄球菌的 抑制圈
万古霉素对肠球菌的抑制圈 任何有可见的菌落生长均视作对上述抗菌
• 没有必要：通过耐药机制和标志性药物可
以预测其他抗菌药物的敏感性
• 没有可能：不是所用药物都可以做药敏试
验（需要药物在体外稳定，需要有操作标 准和解释标准）
与临床沟通中常见问题
4、在药敏试验报告中MIC越小的 抗菌药物效果越好吗？如何根据 MIC联合用药？
• 感染菌对同一种药物的MIC越小，效果越
泛耐药（ PDR）:细菌对本身敏感的所有药物耐
药； 超级细菌:并非科学概念，一般指PDR与部分MDR，
没有确切定义，以下细菌属于此列：
MRSA/VRSA; VRE; MDR-PA,PDR-AB; ESBL(+)+AmpC(+) 肠杆菌 产碳青霉烯酶肠杆菌（产KPC酶、包括产NDM-1细菌）
应注意变形杆菌属的阅读
生长呈迁移性 在一些抗菌药物抑菌环可见雾霾样迁徙生
长的菌苔 雾霾样生长忽略不计 忽略迁移性
应注意溶血性细菌的结果阅读
链球菌 --β-溶血链球菌 --草绿色链球菌 --肺链 应忽略溶血区，读取生长完全被抑制处
注意产色素细菌的结果阅读
有些细菌在生长的过程中产生色素 --铜绿 --黄杆菌 --沙雷菌
药物耐药 需在透视光下阅读，遇不敏感的结果需用
稀释法测MIC确证
应注意磺胺类药物的结果阅读
培养基可能含有拮抗物如胸腺嘧啶、核苷 类物质，允许有轻微生长的薄菌苔
忽略20%或更低生长的薄菌苔，测量抑菌圈 直径较为明显的细菌生长界限
下列细菌均注意：肠杆科、不动、伯克、 葡萄、嗜血、肺链、弧菌属、脑膜炎奈瑟 菌
挤去，在琼脂表面均匀涂布3次，最后沿着 平板内缘涂抹一周 -室温或35度干燥5—10分钟 -将纸片紧贴于表面 -纸片间距20厘米，离平板内缘15厘米
如何阅读结果（纸片法）
工具：游标卡尺、尺子 光源：反射光、透射光 阅读：背衬不反光的黑色背景用肉眼观察，
也可用BIOMIC机器阅读
纸片法结果的正确阅读
临床实验室检验有自身的局限性 各科室间交流非常重要！！！
谢谢大家的 聆听！
可能细菌被大量的中性粒细胞吞噬。
与临床沟通中常见问题
9、鉴定结果明明写着四联球菌、革兰 氏阳性杆菌，为何没有药敏结果？
四联球菌为微球菌，一般不引起人体致病，为非 致病菌，故考虑污染可能。
药敏结果参照CLSI标准，目前革兰氏阳性菌没有 参照标准，故暂不能做药敏试验，若需治疗可参 照阳性球菌用药。
6、有些药物不适用于单独使用，仅用 于联合用药，如利福平。
7、因为是体外药敏试验，有些药体外 试验敏感，可能临床治疗无效。
8、同一菌株可能出现亚种，导致连续 药敏结果不吻合。
细菌耐药概念
多重耐药（MDR）: 指细菌同时对三种以上结构
不同（作用机制不同）抗菌药物耐药，如头孢菌 素、喹诺酮类、氨基糖苷类；
应忽略色素分泌圈，读取生长完全被抑制处
解读注意事项
1、药敏试验是参照美国的CLSI推荐的 标准制定的。
2、细菌全自动分析仪的药敏组合是固 定的。
3、某些细菌对某类抗生素天然耐药， 则不需要做药敏试验。
4、试验的药物代表一类药，而不是一 种药。
解读注意事项
5、对葡萄球菌一代比三代头孢治疗效 果好。
临界浓度 根据MIC，结合常用剂量时该药所能达到的
血药浓度，划定细菌对各种抗菌药物敏感 或耐药的界限
如何制备菌悬液？
如何取菌落？ 为什么至少取3个菌落？
可能丢失耐药细菌（携带有耐药质粒的 耐药菌株）
扩散法：K-B
操作： -制备0.5麦氏度菌液 -无菌棉签蘸取菌液，在管壁将多余菌液旋转
与临床沟通中常见问题
10、一般培养不是三天出结果吗， 今天第四天了怎么还没出来？
一般培养经48小时后，即第三天出报 告，若需分离致病菌的则第四天出报 告。
与临床沟通中常见问题
11、今天的培养结果怎么与前天的 不一样？
取材是否规范。 痰标本，有时选优势菌做，就可能导
致两次不一样。
与临床沟通中常见问题
MRSA：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 VRSA： 耐万古霉素金黄色葡萄球菌 VRE： 耐万古霉素肠球菌 ESBLs： 超广谱β-内酰胺酶 KPC酶： 产碳青霉稀酶的一种KPC型 NDM-1：Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶
下面就以上几种情况分别解读
与临床沟通中常见问题
1、我们想用的药物在药敏试验中 没有做？