大鼠血管内皮细胞培养

改良的大鼠心肌微血管内皮细胞培养方法

１．２动物和试剂选用６～８周龄Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠（约６０～１００ｇ）
（上海斯莱克实验动物中心）。ＤＭＥＭ高糖培养基
（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，美国）；鼠尾胶（自制）；胰蛋白酶（１：２５０，Ａｍｅｒｅｓｃｏ，美国）；胎牛血清（ＦＢＳ，Ｇｉｂｃｏ，美国）；兔抗鼠ＣＤ３４单克隆抗体、兔抗鼠ＣＤ３１单克隆抗体（ＡｎｔｉｂｏｄｙＤｉａｇｎｏｓｔｉｃａＩｎｃ，美国）；兔抗人
比例：ＣＤ３４、ＣＤ３１为１：５００，ＶＩＩＩ因子为１：２００。
本文２Ｏ１２ —１２一Ｏ８收到，２０１３－０１ —１６修回，２Ｏ１３一Ｏ１ —１８接受
矗曩厦学杂志
２０１３年第２３卷第１期
圜篓一
篓
ＶＩＩＩ因子相关抗原多克隆抗体（ＤＡＫＯ，丹麦）；抗
兔及抗鼠ＡＢＣ试剂盒、ＤＡＢ显色试剂盒、ＦＩＴＣ标记羊抗兔ＩｇＧ（Ｂｅｙｏｔｉｍｅ，中国）；其余化学试剂为国产分析纯商品。１．３实验用肝素的配制
ｍ饵讲学杂志，２０１３。２３（１）：３９－－－４０
⑥ ２０１３ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＩＣＲＯＣＩＲＣＵＬＡＴＩＯＮ

大鼠肺微血管内皮细胞使用说明

大鼠肺微血管内皮细胞编号名称规格北京派瑞金GK1001大鼠肺微血管内皮细胞5×105cells/瓶为能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。

派瑞金提供的大鼠肺微血管内皮细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。

研发的大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。

同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。

大鼠肺微血管内皮细胞简介：1、名称：大鼠肺微血管内皮细胞2、组织来源：大鼠肺血管组织3、规格：5×105cells/25cm2培养瓶4、细胞简介：大鼠肺微血管内皮细胞分离自正常大鼠肺血管组织，血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。

细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列。

肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障，该屏障对于肺气体交换，调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。

本公司生产的大鼠肺微血管内皮细胞总量约为5×105cells/瓶，细胞纯度75%~85%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5、培养基信息：1）培养基类型：1640培养基(GIBCO，添加NaHCO31.5g/L，Sodium Pyruvate0.11g/L) 2）添加因子：优质胎牛血清10%，细胞生长因子等大鼠肺微血管内皮细胞使用方法：收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1.取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

大鼠血管内皮祖细胞培养及鉴定

ｂｎｒｏｉａｓＭｅｈｄＥＰｒｓｌｔｄｆｏｍａｅＳｒｇｅ—ＤａｅａｙＦｉｏｌｄｎｉｒｄｅｔｃｎｒｕａｉｎＤｉｃｏｅｍａｒｗｎｒｔ．ｔｏｓＣｓｗｅｅｉｏａｅｒｍｌｐａｕｗｌｙｒｔｂｃｌｅｓｔｇａｉｎｅｔｉｇｔ．ｓｓｙｆｏ
中西医结合心脑血管病杂志２１００年５月第８第５期卷
・５３６・
大鼠血管内皮祖细胞培养及鉴定Ｄ
朱
摘要：的目
江，煜敏，朝红，文欣刘孔道
探索骨髓来源的血管内皮祖细胞的分离培养方法，缺血性疾病治疗找到新的移植细胞来源。方法采集Ｓ雄为Ｄ
组经过ＣＤ３４免疫荧光、ＣＤ１３、３ＦＬＫ一１免疫组化鉴定呈阳性，能特异性吸ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ附ＦＴＣ—ＵＥ一内吞ＤＩ并ＩＡ和Ｉ一Ａｃ —ＬＤＬ。结论自体
骨髓细胞通过贴壁换液后可以分离培养出内皮祖细胞，贴壁细胞经过体外诱导后大量扩增，通过表面标记物鉴定可以确认为内取并皮祖细胞，非贴壁细胞不能大量增殖，将贴壁分离方法来筛选内皮祖细胞，方法简易，能满足细胞移植的需要，而故此并因而，移植在治疗脑缺血引起的内皮损伤应该有较好的临床应用前景。

新生大鼠心脏微血管内皮细胞原代培养

＿ｌＪ］．Ｌａｎｃｅｔ，１９９５，３４６（８９６８）：１９３１９４．Ｅ５］ＢｒｉｌｉａＣＧ，ＭａｔｓｕｂａｒａＬＳ，ＷｅｂｅｒＫＴ，ｅｔ“ ｆ．Ａｎｔｉ —ａｌｄｏｓｔｅｒ０ｎｅ
５６３—５７５．
然发生，即使在使用最大剂量的ＡＣＥＩ和联合ＡＣＥＩ与
ＡＲＢＦቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 。。・
Ｌ６ＪｕｎＫ．ＴｏｍｏｍｉＭ，ＨｉｔｏｍｉＳ，ｅｔａ１．Ｃａｒｄｉａｃａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００５，１１１：２１５７ —２１６４．
Ｌ７ＪＳｔａｅｓｓｅｎＪ，ＩｉｊｎｅｎＰ，ＦａｇａｒｄＲ，ｅｔａ１．Ｒｉｓｅｉｎｐｌａｓｍａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｆａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅｄｕｒｉｎｇｌｏｎｇ—ｔｅｒｍａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ１１ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ
Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，１９８１，９１（３）：４５７—４６５．
ｉｎａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ１Ｉｔｙｐｅ１Ａｒｅｃｅｐｔｏｒ—ｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅａｆｔｅｒｍｙｏｃａｒｄｉ —

体外培养大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型的建立

ＴｈｅＣＭＥＣｓｗｅｒｅｃｕｌｔｕｒｅｄｂｙｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｐｌａｎｔｉｎｇｍｙｏｃａｒｄｉｕｍｔｉｓｓｕｅ．Ｉｔｓｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｇｅｎｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．
ｒａｔｉｏｎｏｆｌｏｗｏｘｙｇｅｎｄａｍａｇｅｍｏｄｅｌ（Ｉ），ｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｓｅｒｕｍｆｒｅｅｏｘｙｇｅｎｔｒａｉｎｉｎｇａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｎ）．Ｉｎｖｅｒｔｅｄｐｈａｓｅｃｏｎｔｒａｓｔｍｉ — ｃｒｏｓｃｏｐｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｈｙｐｏｘｉａ，ＭＴＴｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｃｅｌｌｖｉｔａｌｉｔｙ，ＡｎｎｅｘｉｎＶ —ＦＩＴＣａｎｄＰＩｄｏｕｂｌｅｍａｒｋｉｎｇｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅ．ＲｅｓｕｌｔｓＣｕｌｔｕｒｅｄｒａｔＣＭＥＣｓｈａｓｔｈｅｔｙｐｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ

大鼠胸主动脉内皮细胞培养方法的改进

维普资讯
・
１４・６
ＡｔｃｄＭｅｃａＡａｄＮｅｉＭｏｇｌＪｎ２０Ｖ１２Ｎｏ３ｎｏｕ．０７ｏ．９．

大鼠胸主动脉内皮细胞培养方法的改进
瞿海龙，陈晓春
（内蒙古医学院第三附属医院心内科，内蒙古包头０４１）１００
ｒａｈｄｍｏｏａｅｏｆｅｃ．ｅＣｆｐｓａｅ２ｗｅｅｉｅｔｅｙｆｃｏｅａｅｎｇｎｅｃｅｎｌｙｒｃｎｌｎｅＴＥｓｏａｓｇｒｄｎｉｄｂａｔｒＷｒｌｔｄａｔｅｕｈｉｆｉ
摘
要：目的：建立一种简单易行的ｓＤ大鼠胸主动脉的内皮细胞培养方法。方法：离大鼠胸主动脉，分清除
血管外结缔组织，将其剪成厚约１５ｍ的血管环，１２．ｒａ以５— ０个血管环密度接种于２ｃ５ｍ培养瓶中，以含２％胎０
牛血清的ＤＥ液培养，ｈＭＭ６后去掉血管环。待细胞生长达单层融合时，０消化传代。对Ｐ代细胞应用抗Ⅷ 因子２
抗体进行鉴定。结果：０后，６ｈ细胞呈集落样散在分布于瓶底；９７— ｄ细胞汇合成单层，呈销路石状。经Ⅷ 因子相
关抗原免疫组化鉴定，所培养细胞为内皮细胞。结论：管环贴壁法培养ｓ血Ｄ大鼠胸主动脉内皮细胞简易可行。
关键词：鼠；大内皮细胞
中图分类号：３９Ｒ２
ｈｏｇｍｍｕｏｙｏｈｍｉａｔｏｔｒｕｈｉｎｃｔｃｅｃｍｅｄ．ＲｅｕｔＡｆｅ０ｈｕｓｏｕｔｒｎｌｈｓｌｓ：ｔｒ６ｏｒｆｃｌｕｇ，ｔｅｃｌｉｔｉｕｅｎｉｈｅｓｄｓｒｂｔｄｉａｃｕｔｒｏｅｂａｅｎ．Ａｔｒｓｖｎ —ｎｉｅｄａｓｔｅｃｌｅｃｅｎｌｙｒｃｎｌｅｃｓ “ ａｉｇｌｓｅｎｔｓｍｅｔｆｅｅｅｈｎｙ，ｅｓｒａｈｄｍｏｏａｅｏｆｕｎｅａｈｐｖｎ

大鼠血管内皮细胞培养研究

大鼠血管内皮细胞培养研究血管内皮细胞是血管中重要的细胞类型，其在维护血管生理特性以及参与血管病理反应中都具有重要的作用。

大鼠作为实验动物，其血管内皮细胞的研究也是非常重要的。

在这篇文章中，我们将重点介绍大鼠血管内皮细胞的培养技术及其在血管生物学研究中的应用。

一、大鼠血管内皮细胞培养技术1.1 资源准备大鼠动脉、静脉组织、FBS、DMEM/F12、胰酶、胰酶抗性味粉、细胞凝集素、槲皮素、PBS、二氧化碳培养箱、显微镜、离心机、相位对比显微镜、细胞均质器等。

1.2 组织消化将新鲜的大鼠动脉或静脉取出，去除外膜及脂肪组织，用PBS缓冲液清洗数次。

接着，用胰酶液消化组织，割碎后转移到消化液中，37℃孵育1-2小时，直到组织消化完全。

1.3 筛选基质消化完全的组织过筛，筛子孔径为80目。

去掉筛子上的淋渣后，产出的细胞可以用显微镜观察并鉴定是否为血管内皮细胞。

1.4 细胞培养将产出细胞悬浮在完全培养基（DMEM/F12，10% FBS，100ug/mL嘌呤鸟嘌呤，100ug/mL青霉素和50ug/mL链霉素）中，在培养室内孵育。

按细胞密度不同，可选用不同的培养方法，比如单细胞悬浮培养、半贴壁培养和全贴壁培养等。

1.5 纯化细胞如果需要纯化大鼠血管内皮细胞，还需要使用血管壁内形成的凝集素贴壁分离技术，配合药物槲皮素进行消除非内皮细胞。

二、大鼠血管内皮细胞在血管生物学研究中的应用2.1 血管内皮损伤与修复在血管损伤修复研究中，常常会使用拉环法、加热法、切割法、放置血栓等手段产生不同程度的血管内皮损伤模型，进而观察、探究血管内皮细胞的响应和修复机制。

例如研究大鼠颈动脉内皮细胞在内膜损伤后的DNA修复机制是一个非常热门的研究课题。

2.2 血管疾病如高血压、动脉硬化、心血管疾病等，都与血管内皮细胞的损伤和功能异常有关。

通过培养大鼠血管内皮细胞，可以模拟这些血管疾病模型，如在培养基中将NO剂加入，从而模拟高血压或将脂质压入细胞内，模拟动脉硬化等，可以帮助我们更好的探究血管疾病的病理生理机制。

大鼠股动脉血管原代内皮细胞的分离与培养

-596•安徽医科大学学报Ada Unwersitatis Medicinalis Anhut2621Apr；56(4)网络出版时间：2621-3-116：50网络出版地址：https：//k/ki.3W/kcms/dwPH34.1025.R.26216317.1521.html大鼠股动脉血管原代内皮细胞的分离与培养刘倩，韩陈陈,罗婷婷，张雨，李浩，马场，魏伟摘要目的体外分离、培养并鉴定大鼠股动脉血管原代内皮细胞,为相对较小血管来源的原代内皮细胞功能研究提供细胞模型。

方法无菌取大鼠股动脉血管，胶原酶消化大鼠股动脉血管内皮细胞使其分离,流式细胞术检测内皮细胞纯度;流式分选出CD30阳性细胞，并用激光共聚焦鉴定内皮细胞;以CCK-C法、高内涵细胞成像法检测内皮细胞增殖能力，以法、Mv/gW胶法检测其迁移和成管功能。

结果胶原酶消化分离所得股动脉血管原代内皮细胞在2627-29-17接收基金项目：国家自然科学基金（编号：51562123、51330051、51273444）作者单位:安徽医科大学临床药理研究所，合肥230234作者简介:刘倩，女,硕士研究生；魏伟，男，博士，教授，博士生导师，责任作者,E-mVi：wwei@ahmu.efu.ch；马场，女，博士，副教授，责任作者，E-mail:mayane_ahmu@ 14~16d细胞覆盖培养瓶面积的2/3以上，细胞呈现典型铺路石状。

流式检测其纯度为3&34%,分选后利用CD30进行荧光染色鉴定，细胞均为CD30阳性；PGE3可显著上调CD30阳性内皮细胞增殖、迁移、成管功能。

结论该研究采用简便的方法成功分离得到股动脉血管原代内皮细胞,为研究相对较小血管来源的原代内皮细胞功能提供体外细胞模型。

关键词大鼠;股动脉;原代血管内皮细胞;分离培养;鉴定中图分类号R394.26；R322.120文献标志码A文章编号1000-1492（2620）04-0566-05 doi：r6.19465/p cnki.isspl000-0492.2621.04.hl7根据血管的结构、功能和运输方向差异,分为动脉、静脉和毛细血管。

大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养及鉴定

ｉｅｔｅｙｉｄｎｉｄｂｍｍｕｏｕｒｓｅｃ．Ｗｅａｓｅｅｍｉｅｈｒｗｔｕ＂ｆＢｉｆｎｆｏｅｃｎｅｌｌｏｄｔｒｎｄｔｅｇｏｈｃＩｅｏＭＥｙＭＴｓａ．Ｔｅｃｌｏｋｄ１ｅｓａｓｎ ” ｖＣｓｂｒａｓｙｈｅｌｌｏｅｉ ”ｌｂｔｅ．ｓｋｏ
（．ｏｅｅｏｎｍａＳｉｎｅａｄＶｔｉａｙＭｅｉｎ，ｉｎＵｉｅｓｙＣａｇｈｎ１０６，ｈｎ；．ｅａｍｅｔｏｎｍａＳｉｎｅａｄ１ＣｌｇｆＡｉｌｃｃｎｅｅｎｒｄｃｅＪｉｎｖｒｔ，ｈｎｃｕ３０２Ｃｉａ２ＤｐｒｎｆＡｉｌｃｅｃｎｌｅｒｉｌｉｔ
Ｔｃｎｌｇ，ｅｉｇＡｒｕｔｒｏｌｇ，ｅｉｇ１２０，Ｃｉａ．ＣｌｇｆＡｉｌＳｉｃｎｔｒａｙＭｅｉｉｅｈｎａｇｈ６ｕｔｒｅｈｏｙＢｉｎｇｉｌａＣｌｅＢｉｎ０２６ｈｎ；３ｏｌｅｏｎｍａｃｅｅａｄＶｅｉｒｄｃｎ，ＳｅｙｎｇｃｌａｏｊｃｕｌｅｊｅｎｅｎｕｌＵｉｅｉ，ｈｎａｇ１０６，Ｃｉａ４ＣｌｇｆＢｓｄｃｌＳｉｃｓＣｐｉｄｃｌＵｉｅｉ，ｅｉｇ１０６，ＣｉａｎｖｒｔＳｅｙｎ８６ｈｎ．ｏｌｅｏａｉＭｅｉａｃｅｅ，ａｔａＭｅｉａｎｖｒｔＢｉｎ００８ｈｎ）ｓｙ１；ｅｃｎｃｌｓｙｊＡｂｔａｔＴｅｍｅｈｄｆｃｌｒｎａｒｉｃｏａｃｌｒｅｄｔｅｉｌｃｉＢＭＥＣ）ｗｒｔｄｅｏｂｉｐｔｅｂｓｏｈｓｒｃ：ｈｔｏｓｏｕｔｉｇｒｔｂａｎｍｉｒｖｓｕａｎｏｈｌｅｌｆｕａｓｓｅｅｓｕｉｄｔｕｌｕｈａｉｆｒｔｅｄｓ

大鼠脑微血管内皮细胞的培养与鉴定

摘要：目的探讨大鼠脑微血管内皮细胞体外培养方法，血管内皮细胞的研究打下基础。为方法用胶原酶消化大鼠脑皮质制成细胞悬液再进行培养，用光镜及免疫组织化学检测进行鉴定。结果分离的大鼠脑微血管内皮细胞体外培养５～７ｄ左右可长成单层，光镜下为多角彤或扁平梭形，铺路石样” 呈“ 排列，第Ⅷ 因子相关抗原免疫组织化学测定阳性。结论该分离细胞培养法可培养出大鼠的脑微血管内皮细胞。关键词：脑微血管；内皮细胞；体外培养
ＴｂｅｈｄｆＣｕｌｉｇａｄＩｅｔｆｉｒｂａＬｍｉｒｖｓｕａｅＭｔｏｓｏｔｎｎｄｎｉｎｇＣｅｅｒｕｒｙｃｏａｃｌｒＥｎｄｔｌＣｅｌｉＩｏｈｅｌｎＲａｓＳＵＮ
［］中华医学会呼吸病学会．５慢性肺源性心脏病临床诊断与疗效判断标准［］中华结核和呼吸杂志，８，（）２－．Ｊ．１０３２：２９３５平芬实用呼吸病学［．Ｍ］石家庄：河北科学技术出版［］赵景春，．６
社，０４：１￣２．２０６９５
ｐｌｏａｙｅｔｓｎＪ．ｍＪｈｓｌｕｇＣｌＭｌｈｓｌｕｎｒｈｐｒｎｉ［］ＡＰｙｉｎｅｏＰｙｉ，ｍｙｅｏｏＬｌｏ
２０，８（）Ｌ３１１６．０１２１６：１６ —３８
顾顺华，秦建，慢性肺心病急性发作期患者红细胞膜等．［］张燕，８黏弹特性研究［］生物医学工程学杂志，０７２１Ｊ．２０，４（）：

人和大鼠血管内皮细胞的培养和鉴定

ｆａｃｔｏｒⅧ ａｎｔｉｇｅｎｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｌｆｕｏｅｓｒｃｅｎｃｅａｓｓａｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ｈｅＴｃｕｌｔｕｅｄｒｃｅｌｌｓｗｅｅｒｉｄｅｎｔｉｆｅｄｕｂｉｍｌｉｃｌａｖｅｉｎ
ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｅｄｉａｔｒｉｃｓ，ＴｉａｎｊｉｎＮａｎｋａｉＨｏ￣ｕｄ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００１００，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｏｄｅｌｏｆｈｕｍａｎａｎｄｒａｔｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ，ｎｄａｔｏ
ｍｅ￣ｏｄｓｏｆｐｅｒｆｕｓｉｏｎ／ｄｉｇｅｓｔｉｏｎａｎｄｈｉｓｔｉｏｃｙｔｉｃａｔａｃｔｈｍｅｎｔ．ｈｅＴｃｕｌｔｕｒｅｄｍｅｈｏｔｄｓｃａｎｐｒｏｖｉｄｅａｂｏｕｎｄｓｅｅｄｃｅｌｓｆｏｒｃｉｌｎｉｃｌａ
ａｐｐｉｌｃａｉｔｏｎｉｎｖｉｔｒｏ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ，ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｃｅｌｌｓ，ｃｕｌｔｕｒｅｄｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅｓｉｎｖｉｔｒｏｈｕｍａｎｓ

大鼠脑皮质微血管内皮细胞的培养

０ × １Ｏ１ａｄｏｓｒｅｒｈｌｇｃｌＲｅ１ｔ：ｈｕｔｒｄｍｉｒｖｓｕａｎｏｅｉｅｌｗｅｅｓｉｅｆ３／ｎｂｅｖｄｍｏｐｏｏｉａｌＣｍｙ．￥￣ｓＴｅｃｌｅｃｏａｃｌｒｅｄｔｌｌＩｕｈｌａｃｌｒｔｎｄｓａｐｓｔｅｙｆｒａｔｒⅧ ｒｌｔｅａｔｅ．ｅ７－ｔａｌｅｃｌｉｐａｅｎｌｙｒｒｗｔｎｏｋｄｌｅ” ｏｉｖｌｏｃｏｉｆｅａｉｎｉｎＯｎｔ－ｈｄｙ，ｈｅｌｄｓｌｙｍｏｏａｅｏｈａｄｌｏｅｋｖｇｈ９ｓｄｇｉ
．１１．５
文耄编号：０５－６６２０）２０５・２２３３２（０２０ — １１０
大鼠脑皮质微血管内皮细胞的培养
吴文斌。胡常林。，汤为学
，
（重庆医科大学第二Ｉ１临床学院神经内科
重庆４０１；２重庆医科大学基础医学院病理生理教研室０００．
ＵＷｅｂｎｅａｎｉ，ｔｔ
ｅａｔｎｏＮｕｏｏｙｔｅｅｏｄＣｌｇ ’ｌｉｌｄｃｎｈｎｑｎｐｒｍｅｔｆｅｒｌｇ，ｈＳｃｎｏｌｅｙＣｉｃＭｅｉｉｅＣｏｇｉｅｏｎａｇＭｅｉａＵｉｒｉｄｃｌｎｖｓｅ【Ａｓａ０６ｅｔｅ：ｏｃｌｒｃｏａｃｌｎｏｈｌｌｃｌｏＷｉａａｃｒｂａｃｒｘＭｅｈｄ＂ｂｔｅ１ｆｉＴｕｔｅｍｉｖｓｕａｅｄｔｅｉｅｌｆｍｓｒｒｔｅｅｒｌｏｔ．ｔｏｓｒｔｃｖｕｒｒａｓｒｔｅ

大鼠肺微血管内皮细胞的培养

ｃｌｒｆｕｎｒｍｅｏａｅａｅｄｔｅａｃｌ（ＭＶＣ）ｏｒｔｕｔｅｏｌａｙｉｖｕｒｎｏｌｌｅｓＰＥｓｆａ．ＭｅｏｓＴｅｔｓｅｂｏｋｐｓｄｕｐｍｏｒｓｌｈｉｌｓｔｄｈｉｕｌａｔｈｓｃｅ
ＣＥｕ－ｕ．ＺＡｉ８．ＮＵｈｎｙ．ＺＡｉｇＺＡＹ－ｉ．Ｄｐｒｅｔห้องสมุดไป่ตู้ｆＨＮＲｉａＨＯＺ— ｈｇＩＣｕ —ｕＨＮＪ．ＨＮＧｕｐｎｎｇｅａｔｎｍｏ
ＰｔｏｈｓｌｌｙＨｂｉｏｔ渤ｅａｈｐｙｉｏ。ｅｅＮｒｏｇｈ。ｈｎｊｋｕ７０９。ｈｎＺａｇｉｏ５２Ｃｉａａ０
ｃｔｒｔｏａｍｐｏｅｘｅｍｅｔａｉｌｃｔｒｌｕｕｅｍｅｈｗｓｉｒｖｄｉｅｐｒｎｎｍａ，ｕｕｅ—ｍｅｉ，ｔｓｅｂｏｋｍｅｈ，ｆｔｏｉｅｓｒｄｎｉｌｄｍｎｉｕｌｃｔｏｓｄｅａｂｖｎｅ－ｌ
陈瑞华，自牛春雨张静，赵刚，，张玉平
【摘要】目的建立简单有效地获取大鼠肺微血管内皮细胞（ＭＥ）ＰＶＣ的培养方法。方法从实
验动物、培养基、植块方法、牛血清浓度等方面对植块培养法进行改进，用Ｗｉａ雄性大鼠的肺组胎应ｓｒｔ织，进行ＰＥＭＶＣ的原代培养并传代培养；通过倒置显微镜、扫描、透射电镜观察其形态，进行免疫组并织化学鉴定。结果结论体外培养的大鼠ＰＥＭＶＣ呈梭形或多角形，形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列，获得的血管内皮细胞纯度较高， Ⅷ因子阳性反应，抗成功建立了ＰＥＭＶＣ的原代培养方法。改进的植块培养法简便、可靠，获得的ＰＥＭＶＣ纯度高，生长状态良好，保持了内皮细胞的结构和功能，可用于其功能特性的进一步研究。

大鼠心肌微血管内皮细胞的分离培养和鉴定

重庆医学２１００年２月第３卷第４期９
４３０
・
论
著・
大鼠心肌微血管内皮细胞的分离培养和鉴定
滕丽新刘胜学，庭菊。何作云，谢， △ （．１解放军第三二四医院干部病房，重庆４０２；０００第三军医大学：．２军事预防医学系分子
毒理学教研室，重庆４０３；．００８４新桥医院心内科，庆，００７３成都军区衣冠庙干休所，重４０３；．四川６０８）１０３
摘要：目的建立心肌微血管内皮细胞培养模型。方法以１～２鼠尾胶原对培养皿作预处理，用胶原酶和胰蛋白采
ｏａｓｔｉｓｔｅｒａｔｉｄｉｈ．ｒｔａｅｄｓｓｉｎ，ａｈｉｅｓａｉｄｆｌｒｔｏｎ，ｓａｅｎｄｃｔｅａｆｒｔａｌｏｐｒｔｅｔＰｅｒｓＢｙｐｏｅｓｉｇｅｔｏｍｃｎｈｅｒｎｇａｎｉａｉｔＩｏｌｔｄａｕｌｕｒｄｒｔＣＭＥＣ．ｓｌｓＲｅｕｔ
３ＯｆｃｒＳｎｔｒｕ，ｉｕｎａＣｅｇｕＭｉｉａｙＡｒａ，ｉｈａ１０３Ｃｈｎ．ｆｉｅａｉａｉｍＹｇａｍｉｏ，ｈｎｄｌｔｒｅＳｃｕｎ６０８，ｉａ；４ＤｅａｔｎｆＣｒｓ，ｎｉｏＨｏｐｉｌＴｉｄＭｉｉｒｅｉａｉｅｓｔＣｏｇｑｎ００７Ｃｈｎ）．ｐｒｍｅｔｏｄｉＸｉｑａｓｔ，ｈｒｌａｙＭｄｃｌＵｎｖｒｉｏａｔｙ，ｈｎｉｇ４０３，ｉａ

血管内皮细胞培养方法

血管内皮细胞培养方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：血管内皮细胞是一种位于血管内壁的重要细胞，它们在维持血管结构稳定、调控血管张力和血液循环等方面发挥着重要作用。

对血管内皮细胞进行培养研究具有重要的生物学意义和临床应用前景。

下文将介绍一种常见的血管内皮细胞培养方法，希望能为相关研究工作提供一些帮助。

一、血管内皮细胞的来源：血管内皮细胞主要来源于人体的血管组织，通过合适的方法可以从血管中分离和提取。

通常来说，可以选择人体动脉、静脉等血管组织作为细胞来源，从中分离得到血管内皮细胞进行培养。

在实验动物中，也可以选择小鼠、大鼠等动物的血管组织来获取血管内皮细胞。

1. 血管组织的分离和处理：需要将血管组织从人体或动物中取出，并去除周围的结缔组织和肌肉组织。

然后，将血管组织切成小段，并用适当的消化酶进行消化处理，使内皮细胞从血管组织中释放出来。

2. 血管内皮细胞的分离和纯化：经过消化处理后，将获得的细胞悬液进行离心分层，采集含有内皮细胞的上清液。

然后，可以通过负性筛选或CD31抗体磁珠等方法将内皮细胞进行进一步的分离和纯化。

3. 血管内皮细胞的培养和传代：将得到的血管内皮细胞接种到预先涂有明胶或基底膜的培养皿中，加入适当的培养基和生长因子，将细胞放入细胞培养箱中进行培养。

随着细胞的增殖和扩张，可以进行细胞的传代，维持内皮细胞培养的稳定性。

4. 血管内皮细胞的鉴定与应用：在进行内皮细胞培养的过程中，需要对细胞进行鉴定，确认其具有内皮细胞的特征和功能。

通过免疫组化染色、PCR检测等方法，可以检测内皮细胞表面标记物和相关基因的表达情况。

血管内皮细胞在动脉粥样硬化、血管疾病等方面的研究应用也具有广泛的前景。

1. 培养环境的控制：血管内皮细胞对培养环境的要求比较严格，需要在无菌条件下进行培养，并保持适当的温度、湿度和CO2浓度等参数。

2. 培养基的选择：选择适合血管内皮细胞生长和扩张的培养基是培养过程中的关键。

大鼠血管内皮细胞的分离、鉴定及传代培养

关键词血管内皮细胞
分离培养
大鼠主动脉
文献标识码：Ａ文章编号：１００７ — １７３３（２０１３）０４－０００８－０３
主动脉。取出胸主动脉，用ＰＢＳ冲洗３－４次后，放入另一‘
中图分类号：￥８５２．１６３
１．３．１细胞形态倒置显微镜下观察不同代次的细胞形态，是否呈现内皮细胞典型的折光性强、“ 铀路石” 样等特
点ｔ，。
和磷酸二氢钾，天津科密欧化学试剂有限公司：多聚甲醛、甲醇、硫酸铜、碳酸氢Ｃｔ￣ＪＳｎＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ，国药集
含２０％ＦＢＳ、４ｎｇ／ｍｌＶＥＧＦ１６５￣ｌｆｌＯ０￣ｇ／ｍｌ肝素的ＤＭＥＭ培养液培养［１，液体仅遮盖主动脉即可。培养４ｄ后，弃去主动脉植块，２～３ｄ换液１次。
细胞的体外培养方法对于研究内皮细胞特性、对作用于血管的药物及抗肿瘤药物的研究具有重要意义。本试验
采用植块法分离大鼠血管内皮细胞，通过条件培养以及
ＣＤ３ｌ免疫组化和管形成鉴定，建立了大鼠主动脉血管内
１．２．２传代培养原代细胞培养约１２－１４ｄ，迁出生长的
细胞覆盖培养瓶面积的２／３以上时即可传代【３】。弃去培养液，用ＰＢＳ冲洗培养瓶后，加０．２５％胰蛋白酶消化３￣５ｍｉｎ，见内皮细胞收缩变圆，立即加入等体积的含胎牛血清的ＤＭＥＭ培养液终止消化，吸管轻轻吹打并混匀，移入１０ｍｌ离心管中，１０００ｒ／ｍｉｎ离心ｌＯｍｉｎ，弃上清，

改良大鼠心脏微血管内皮细胞的培养方法及鉴定

本方ｄｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄｏｆｉｓｏｌａｔｉｎｇａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇｃａｒｄｉａｃｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｎｒａｔｓ
微血管内皮细胞中有特定Ⅷ因子及ＣＤ３１表达，体外小管形成实验证明大鼠心脏微血管内皮细胞具有小管形成的能力。原代周
期３～４ｄ，传代周期２～３ｄ，Ｐ２代细胞纯度达９５％以上。传至Ｐ４代仍未见细胞形态及分裂增殖活性下降。结论
大鼠心脏微血管内皮细胞简单有效，重复性好，且获得细胞数量多、纯度高，有利于实验人员掌握。关键词：大鼠；心脏微血管内皮细胞；原代培养；鉴定中图分类号：Ｒ一３３１文献标识码：Ａ文章编号：１００７— ０９３１（２０１４）Ｏ１ —００１９— ０５
ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｈｅａｔｒｓｗｅｒｅｒａｐｉｄｌｙｏｂｔａｉｎｅｄｕｎｄｅｒｓｔｅｉｒｌｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｒｏｍｔｗｏＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙｒａｔｓ（ｏｎｅｍｏｎｔｈ￣ｏｌｄ，ａｂｏｕｔ１００ｇｗｅｉｇｈｔ）ａｎｄｔｈｅｏｕｔｅｒｏｎｅ —ｆｏｕｒｔｈｏｆｔｈｅｌｅｔｆｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅｗａｓｒｅｍｏｖｅｄ．Ｔｈｅｒｅｍａｉｎｉｎｇｈｅａｒｔ

大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定

大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定侯伟;魏红玉;罗彦彦;许淑茹;陆俊佳;畅荣妮;舒伟【摘要】目的:研究大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定方法.方法:取出生5～7 d左右的大鼠乳鼠的腹主动脉血管,用组织块法在含20％胎牛血清及内皮细胞生长添加剂和肝素的DMEM培养基中培养,倒置相差显微镜观察内皮细胞形态和生长特征,免疫荧光方法进行血管内皮细胞Tie2相关抗原的鉴定.结果:来自于大鼠乳鼠腹主动脉的血管内皮细胞在改良的培养基中进行体外培养,能够保持增殖和传代的能力,且Tie2抗原鉴定呈阳性.结论:成功分离大鼠乳鼠腹主动脉组织并且获得体外原代培养大鼠乳鼠腹主动脉内皮细胞.用组织培养方法可以获得较满意的血管内皮细胞.【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2014(031)004【总页数】4页(P556-559)【关键词】大鼠乳鼠;血管内皮细胞;细胞培养;Tie2【作者】侯伟;魏红玉;罗彦彦;许淑茹;陆俊佳;畅荣妮;舒伟【作者单位】广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁 530021;广西医科大学药学院有机化学与药物化学教研室南宁 530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁 530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁 530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁 530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁530021;广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁 530021【正文语种】中文【中图分类】R-33血管内皮细胞(endothelial cell，EC)是覆盖于血管腔表面的单层细胞，是血管结构和功能的基础，具有多种重要的生理功能。

EC不仅调节血管生成，还调节血液和组织之间的物质交换以及分泌许多细胞因子。

血管生成与恶性肿瘤的增殖、转移与浸润的关系是当前研究的热点，血管EC在肿瘤血管形成中起重要作用[1,2]，可以为抗肿瘤血管形成及其他血管依赖性疾病的研究提供条件。